实验淋浆细胞形态学
临床血液学检验 02 粒淋浆系
1
《临床检验血液学》目录
第一篇 绪论 第二篇 造血细胞及其检验 第三篇 红细胞及其检验 第四篇 白细胞及其检验 第五篇 血栓与止血及其检验
第二篇 造血细胞及其检验
第三章 造血基础理论 第四章 造血细胞检验方法 第五章 造血细胞检验的临床应用
第三章 造血细胞检验方法
第一节 骨髓象和血象检验 第二节 细胞化学染色 第三节 骨髓活体组织检验（自学）
各种粒细胞1
各种粒细胞2
美国病理学会定义：“以核丝为标准”；“如果胞 核扭曲、缠绕，造成一部分核压在另一部分核上， 以致整个核形看不清楚，应判断为分叶核”
40
NEXT
核桥
核最窄处直径
＜1/3
核最宽处直径
核桥 nuclear bridge
杆状核和分叶核的划分标准：核丝、核桥
图
4
2
核凹陷程度
核假设圆形直径
早幼 粒细胞
12～25
圆或 椭圆
核形同上，但 常偏于一侧
常清楚 开始聚集 增多
出现A颗粒， 少许覆盖核上
淡蓝或 深蓝色
中性中幼 粒细胞
10～20 圆形
椭圆或一侧 开始扁平
常无 呈索块状 多
出现中性颗粒 淡蓝或 A颗粒常较多 淡蓝色
中性晚幼 粒细胞
10～16 圆形
明显凹陷呈肾 形、半月形
无
呈块状 多
中性颗粒丰富 A颗粒少或无
3.各阶段粒细胞的划分
非特异性 颗粒
特异性 颗粒
35
两种颗粒多 少、核形 、染色质
核形
核形
凹陷程度 ＜1/2
假设直径
晚幼粒细胞
metamyelocyte
杆状核粒细胞
【看图识血细胞】异淋专场
【看图识血细胞】异淋专场2月5日星期一很详细彩图1解答：淋巴细胞（左），异型淋巴细胞（右）。
左边细胞胞质呈淡蓝色（略带灰）而没有中性颗粒，胞体也不大。
右边细胞的胞体大、胞质较深蓝且较多、染色质较粗，这些都是异淋的特点。
而早幼红细胞胞核圆形、染色质较细，核常居中，血片出现早幼红细胞的概率远远低于异淋。
彩图17解答：异型淋巴细胞（左）和嗜酸性分叶核粒细胞（右，分2叶）。
异型淋巴细胞胞核凹陷，染色质较粗，胞质较多且蓝色。
嗜酸性粒细胞可见颗粒减少，但嗜酸性颗粒颜色较典型。
彩图48解答：异型淋巴细胞。
该细胞胞体较大，胞质也较丰富、深蓝色（这点与单核细胞不同），胞核较大，染色质较粗（但比成熟淋巴细胞细些，比幼稚细胞染色质粗些）。
彩图95解答：异型淋巴细胞。
该细胞胞体较大，胞质较多，蓝色（边缘深蓝些），核染色质较粗，无折叠。
如果这个细胞的胞质更蓝些就很典型了。
彩图102解答：异淋。
其胞核、胞核较大，染色质较粗，不像浆细胞而是浆细胞型异淋。
外周血中出现浆细胞一般为成熟浆细胞，其核小、染色质更粗，核浆比更小。
应注意鉴别两者。
彩图104解答：淋巴细胞。
该细胞胞体、胞核均较大，胞质也较多但不呈深蓝色（只是边缘较深蓝），所以我个人认为还是归淋巴细胞较好，可能它是受应刺激后出现了一些变化，但还够不上异淋，不过在异淋较多的涂片中可考虑归异淋。
异淋与受刺激淋巴细胞的划分界限不清，所以每个人的理解也不同。
彩图129解答：异淋。
大家应该已经逐步掌握了异淋的一些主要特征了。
彩图154解答：异淋。
该细胞还是一个核，只不过呈哑铃形而已，也不是浆细胞。
浆细胞的胞质可以与它相似，但胞核应更小、更致密且常圆形。
至于单核细胞，其胞质很不像，胞核也无折叠，只是染色质较疏松。
彩图157解答：（大）淋巴细胞。
其胞质有裙边样结构并不代表是异淋，这样的淋巴细胞在一般血涂片中还是比较常见，不要归异淋哦。
彩图173解答：异型淋巴细胞（浆细胞型）。
外周血出现的浆细胞一般为成熟阶段。
细胞形态学诊断的再认识
大理州人民医院检验科 钟国梁
一、发性骨髓瘤（MM）:
浆细胞系异常增生其比例≥15%，但当浆细胞比例 <15%，“唯有细胞质变的同时存在有其它异常才行， 且其细胞量愈低，需细胞质变的程度愈大。”在实 际工作中有时只要细胞形态质变明显我们就要引起 高度重视，不能除外MM的诊断。因为早期的MM并 非都有免疫球蛋白的增高及肾功能的改变也可没有 骨痛及典型的溶骨性改变，“因没有新骨形成，所 以血清碱性磷酸酶一般正常或轻度增加”瘤细胞的 异质性表现为：骨髓瘤细胞大小不一，细胞浆呈灰 蓝色，有时可见多核（2－3个核），核仁明显（1－ 4个），核旁淡染区消失，胞浆内可有少数嗜苯胺蓝 颗粒。
的临床特点：不同程度的贫血、出血、骨骼疼痛等。 LMCL的诊断需综合临床、病理、血象、骨髓象、骨髓活 检等检查，少数患者需经特殊细胞化学及其他特殊检查才 可确诊。 ①LMCL起病时血象多正常，而ALL起病时多伴血象异常； ②LMCL和ALL淋巴结肿大的特点不同，LMCL以某一部 位淋巴结肿大明显，ALL淋巴结多均匀肿大，LMCL胸膜 浸润和纵隔肿大多见；③LMCL细胞胞体大小不一，形态 怪异，染色质较粗，核仁清晰、深蓝色。淋巴瘤发展为淋 巴瘤细胞白血病，一般病程较长，最少2年左右。 WHO分类将同一细胞类型的淋巴瘤和急性淋巴细胞白血 病视为不同临床表现或分期的同一疾病。由于患者病变部 位的差异,他们可能就诊于不同的医生(如,侵犯外周血,表现 为白血病而就诊于血液病医生,或组织侵犯,表现为淋巴瘤 而就诊于肿瘤科医生),但一致的看法是：它们是相同疾病 的不同临床表现或分期。
骨髓象：
血象
：
POX染色：
七 、 淋 巴 瘤 细 胞 白 血 病 （ Lymphoma cell leukemia, LMCL）。 亦可称为淋巴瘤白血病期。国内文献报道LMCL约占NHL 的11.9％-15.7％。男性多于女性，患病年龄偏小，中位发 病年龄30岁左右。霍奇金淋巴瘤细胞白血病(HDCL)极为 罕见，国内自1963年～1998年仅报道6例。这可能有两方 面的原因：①国内霍奇金淋巴瘤明显低于NHL，HDCL确 实罕见；②国内霍奇金淋巴瘤患者骨髓涂片和活检检查不 普及，部分病例漏诊。HDCL的诊断条件和LMCL相似。 结合国内文献报道和世界卫生组织(WHO)的意见：外周血 可见淋巴瘤细胞(多在10％以下)或无淋巴瘤细胞，骨髓中 淋巴瘤细胞比例>20％即可诊断LMCL。 LMCL主要需与急性淋巴细胞白血病(AlL)鉴别。 LMCL常 具有NHL的临床症状和体征，如发热、不同程度的浅表淋 巴结无痛性肿大、肝脾肿大等；另外，还常有急性白血病
异淋的识别与鉴别诊断
（4）典型临床表现
发热
肝脾肿大
咽峡炎
IM
皮疹
淋巴结肿 大
（5）实验室检查
① 血象：淋巴细胞比例增高，异淋>10%（有时高达 60%-70%）。
② 嗜异性凝集试验：IgM型嗜异性凝集抗体，发病第1周 阳性率75%，第2周阳性率90%-95%。
③ 抗EB病毒抗体检测：IM诊断的金标准！抗病毒抗原 （VCA）的 IgM抗体（抗VCA - IgM ）出现早，阳性 率高，是诊断EB病毒急性感染最重要的指标。
六、报告方式
• 一般计数100个白细胞见到的异淋比例
七、鉴别诊断
1.急性感染性淋巴细胞增多症：多见于儿童， 大多上呼吸道感染症状，少见淋巴结肿大， 无脾肿大。外周血白细胞总数增多 （13*109/L以上），主要为成熟淋巴细胞 （小淋巴细胞6毒抗体测定为阴性。 临床上如有原因不明的腹泻或上呼吸道感 染，尤其是儿童发病，应考虑到本病可能。
• 异形淋巴细胞形态表现多样，多将其分为三型： • 一型（泡沫型或浆细胞型）：胞体叫淋巴细胞偏大，呈圆形或类圆形，
部分为不规则形。核偏位，呈椭圆形、肾形或不规则形，染色质粗糙， 呈粗网状或小块状。胞质嗜碱性强呈深蓝色，沿核周围染色较淡，含 有大小不等的空泡或呈泡沫状，无颗粒或少数颗粒。 二型（不规则型或单核细胞样型）：胞体较大，形态不规则。胞核呈 圆形、椭圆形或不规则形，染色质较细致。胞质丰富，呈浅蓝色，透 明，但靠胞膜边缘处较深染且不整齐，无空泡，浆内可有少数散在的 嗜天青颗粒。 三型（幼稚型或幼淋巴细胞样）：胞体较大，直径15-18cm，呈圆形 或椭圆形。胞核圆形或卵圆形，染色质细致、均匀。呈纤细网状排列， 无浓集现象，可见1-2个核仁。胞质量多，呈蓝色或深蓝色，一般无 颗粒，可有分布较均匀的小空泡。
淋转观察实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解淋病双球菌的生物学特性，掌握淋病双球菌的接种、培养和观察方法。
2. 学习淋转实验的操作技巧，观察淋病双球菌在鸡胚尿囊腔中的生长情况。
二、实验原理淋病是由淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae）引起的一种性传播疾病。
淋病奈瑟菌为革兰氏阴性双球菌，具有淋转特性。
淋转实验是淋病诊断的重要方法之一，通过将淋病奈瑟菌接种于鸡胚尿囊腔，观察其在尿囊腔内的生长情况，以判断淋病奈瑟菌的存在。
三、实验材料1. 淋病奈瑟菌标准菌株2. 新鲜鸡蛋3. 无菌培养皿、接种环、移液器4. 鸡胚尿囊腔接种针5. 酚红指示剂6. 紫外灯、显微镜四、实验步骤1. 准备工作（1）将新鲜鸡蛋置于37℃温箱中孵化，选取第3天鸡胚备用。
（2）将淋病奈瑟菌标准菌株接种于营养琼脂平板，37℃培养18-24小时。
2. 接种（1）将培养好的淋病奈瑟菌用无菌生理盐水洗下，制成菌悬液。
（2）取无菌接种环，蘸取菌悬液，滴入鸡胚尿囊腔内。
3. 培养与观察（1）将接种鸡胚置于37℃温箱中孵化，观察鸡胚的生长情况。
（2）在第2天和第3天，分别用无菌酚红指示剂滴入鸡胚尿囊腔，观察颜色变化。
（3）在第4天，将鸡胚取出，用无菌剪刀剪开尿囊膜，观察尿囊腔内的淋病奈瑟菌生长情况。
4. 结果分析（1）若鸡胚尿囊腔内出现红色，表明淋病奈瑟菌在尿囊腔内生长，实验结果为阳性。
（2）若鸡胚尿囊腔内无红色出现，表明淋病奈瑟菌未在尿囊腔内生长，实验结果为阴性。
五、实验结果本次实验中，鸡胚尿囊腔内出现红色，表明淋病奈瑟菌在尿囊腔内生长，实验结果为阳性。
六、实验讨论1. 淋转实验是淋病诊断的重要方法之一，具有操作简便、灵敏度高、特异性强的特点。
2. 实验过程中，无菌操作至关重要，避免污染影响实验结果。
3. 鸡胚尿囊腔接种方法简便易行，适用于淋病奈瑟菌的分离与鉴定。
4. 实验结果与临床诊断结果相符，表明淋转实验具有可靠的诊断价值。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了淋病奈瑟菌的接种、培养和观察方法，学会了淋转实验的操作技巧。
浆细胞——精选推荐
浆细胞免疫分泌疾病IMMUNOSECRETORY DISORDERS免疫分泌疾病的共同特征为单克隆性免疫球蛋⽩分泌细胞增⽣。
这些细胞为浆细胞或淋巴细胞，产⽣单种免疫球蛋⽩或其多肤亚单位，⽽在⾎清和尿中作为单克隆蛋⽩(M蛋⽩)被发现。
诊断需综合形态学、免疫学以及临床资料。
表14为WHO修订的造⾎系统和淋巴组织肿瘤分类⽅案有关免疫分泌疾病分类[109]。
不同类型的免疫分泌疾病其临床表现、形态学特征、或单克隆蛋⽩也不同。
表14免疫分泌疾病分类(临床和病理学亚型)浆细胞⾻髓瘤(多发性⾻髓瘤)浆细胞⾻髓瘤亚型浆细胞⽩⾎病冒烟性⾻髓瘤惰性⾻髓瘤⾻硬化性⾻髓瘤(POEMS综合征)可⼘分泌性⾻髓瘤浆细胞瘤⾻孤⽴性浆细胞瘤⾻髓外浆细胞瘤Waldenstrom' s巨球蛋⽩⾎症(免疫细胞瘤，淋巴浆细胞性淋巴瘤)重链病(HCD)γHCDµHCDαHCD免疫球蛋⽩沉积病原发性淀粉样变性系统性轻链病POEMS:多发性神经病，脏器肿⼤，内分泌病，M蛋⽩以及⽪肤改变等。
浆细胞⾻髓瘤(多发性⾻髓瘤)PLASMA CELL MYELOMA(Multiple Myeloma)浆细胞⾻髓瘤是最常见的免疫分泌疾病，是以肿瘤性浆细胞多处⾻髓浸润，伴有⾎清和尿单克隆γ球蛋⽩病为特征（338-344）。
当怀疑⾻髓瘤时应进⾏以下分析（339）:⾎清和尿蛋⽩电泳蛋⽩免疫固定或免疫电泳⾎清和尿蛋⽩定量放射性⾻扫描⾻髓检查⾻髓异常浆细胞增加，或浆细胞瘤伴有⾎清和尿单克隆γ球蛋⽩病，和/或放射性⾻扫描溶⾻性病变等均是建⽴诊断的参数（339,341,345,346）。
在不同诊断标准中，必需的浆细胞最低⽐率和单克隆蛋⽩的量有所不同[342，346]。
即使已有可靠的免疫学和放射性⾻扫描的证据，也常采⽤⾻髓检查来确定诊断和估计病变程度，许多病例甚⾄仅靠⾻髓检查就可做出诊断。
对于恰当的评估穿刺涂⽚和活检切⽚两者都是必须的，⼤多数情况下两者都能独⽴做出诊断，但有时仅其中之⼀有确切证据。
淋巴细胞转化实验
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T细胞、B细胞表面具有抗原识别受体和有丝分裂原受 体 ★植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）可选择性刺 激T细胞增殖；
★脂多糖（LPS）可刺激B细胞增殖；
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实验流程
分离人外周血单个核细胞（PBMC） 分离人淋巴细胞(磁珠分离，流式细胞术) 淋巴细胞转化试验
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细胞培养常见污染及处理方法
细菌 污染
将污染孔内液体弃掉，加入硫酸铜或5mol/L NaOH; 重要克隆洗涤数次后，联用抗生素效果较好。
真菌 污染
应用达克宁、咪唑康；反复洗涤后注射到小鼠腹腔中
支原体 污染
预防为主。小牛血清是造成支原体污染的主要来源， 严格无菌操作。
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Ω专管专用。
Ω手不要从敞开的瓶口上方经过。 实验后要求： 关闭超净台风机；用酒精纱布擦拭超净台台面，紫外线消毒。
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细胞培养条件
合成培养基：根据体内细胞生存所需的物质种类和数量，用化学物质模拟 合成。 常用的培养基有RPMI-1640、DMEM、IMDM等。 血清：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清。 抗菌素：抑制可能存在的细菌和霉菌的生长，而不影响细胞的生长。 常用青、链霉素；庆大霉素等。 消化液（培养贴壁细胞用）：0.25%胰蛋白酶、EDTA液 pH调整液
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A组：置培养箱中培养66h,加入MTT溶液20ul/孔,继续培 养6hr后,去掉上清,加入DMSO100ul/孔,弃分混匀,测 OD570nm值. B组：置培养箱中培养66h，制备流式标本，上机检测
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细胞数/ml＝
4大格中细胞总数
×104 ×稀释倍数
4
ConA的倍比稀释
castleman病浆细胞亚型病理
castleman病浆细胞亚型病理-概述说明以及解释1.引言1.1 概述Castleman病是一种罕见的淋巴组织增生性疾病，最早由美国病理学家Benjamin Castleman于1954年首次描述而得名。
它通常被分为多种亚型，其中包括浆细胞亚型。
浆细胞亚型是Castleman病中较为少见的一种，其特征在于淋巴组织中浆细胞数量明显增加。
本文将重点探讨Castleman病浆细胞亚型的病理特点，并讨论其对临床的意义与应用前景。
Castleman病的治疗与管理仍面临挑战，因此深入了解其病理特征对于提高疾病的诊断和治疗水平具有重要意义。
1.2 文章结构本文将首先介绍Castleman病的概述，包括其定义、发病机制和流行病学特征。
接着将详细探讨Castleman病浆细胞亚型的特征，包括临床表现、影像学特征和病理学表现。
最后，将分析浆细胞亚型病理的特点，包括病理生理机制、诊断方法和治疗策略。
通过对相关研究和临床案例的探讨，旨在提高对Castleman病浆细胞亚型的认识和诊疗水平，为临床实践提供参考和指导。
1.3 目的:Castleman病是一种罕见的淋巴组织增生性疾病，其浆细胞亚型在临床上具有一定的特殊性和挑战性。
本文旨在深入探讨Castleman病浆细胞亚型的病理学特点，系统总结其临床表现、组织学特征、分子生物学机制等方面的研究进展，并对其诊断、治疗和预后进行全面分析，旨在为临床医生提供更准确的诊断和治疗方案，促进相关研究的深入发展，为将来临床诊疗提供新的思路和方法。
2.正文2.1 Castleman病概述2.2 浆细胞亚型特征浆细胞亚型是Castleman病的一种特殊类型，其特征主要包括以下几个方面：1. 细胞形态学特征：浆细胞亚型的细胞形态学特征主要表现为增生的浆细胞数量明显增多，细胞体积增大，胞浆丰富，核分裂活跃，核染色质明显增多。
2. 细胞表面标记物：浆细胞亚型通常表达CD20、CD38、CD138等浆细胞标记物，这些标记物的阳性表达有助于确定病变的浆细胞性质。
实验诊断学骨髓检查课后练习题及答案
实验诊断学-骨髓检查课后练习题（后附答案）一、单项选择题（每题1分，共25分）1、骨髓穿刺术禁忌症（）A. 发热B. 白细胞减少C. 皮肤粘膜出血点D. 血友病E. 骨骼疼痛2、骨髓细胞核染色质呈粗颗粒状，有紫蓝色核仁1-2个；胞浆呈深毛蓝色，不透明，常有伪足，见于（）A. 原粒细胞B. 早幼粒细胞C. 幼单核细胞D. 幼淋巴细胞E. 原单核细胞3、下列哪项对确诊急性白血病最具价值（）A. 外周血白细胞计数B. 外周血片分类中无幼稚细胞C. 肝、脾肿大D. 骨髓增生明显活跃，原始细胞比例增高E. 有发热及出血征象4、柴捆样Auer小体可见于（）A. 原粒细胞B. 早幼粒细胞C. 幼单核细胞D. 幼淋巴细胞E. 淋巴细胞5、正常骨髓细胞外铁为（）A. (-) ~ (+)B. (+) ~ (++)C. (++) ~ (+++)D. (+++) ~ (++++)E. (++++)6、骨髓像表现为“核老浆幼“的贫血（）A. 缺铁性贫血B. 巨幼细胞性贫血C. 再生障碍性贫血D. 溶血性贫血E. 急性失血性贫血7、巨幼细胞贫血最主要的血液学特征是（）A. 大细胞性贫血B. 骨髓内出现巨幼红细胞C. 血红蛋白降低D. 骨髓内红系明显增生，可见巨晚幼粒细胞和巨杆状粒细胞E. 血小板降低8、对于MM具有决定性诊断意义的是（）A. 血沉加快B. 骨髓内有大量异常浆细胞C. X线示广泛骨质疏松D. 血清钙增高E. 血清中出现异常免疫球蛋白9、急性白血病和慢性白血病最主要的区别是（）A. 贫血程度B. 病程长短C. 骨髓白血病细胞的分化阶段D. 出血程度E. 周围血白细胞数目的多少10、血小板产自于（）A. 原巨核细胞B. 幼巨核细胞C. 颗粒型巨核细胞D. 成熟型巨核细胞E. 裸核型巨核细胞11、骨髓细胞过氧化酶染色反应强阳性，见于（）A. 急淋白血病B. 急单白血病C. 急粒白血病D. 红血病E. 巨核细胞白血病12、骨髓中细胞从原始到成熟，胞体均由大变小，唯一例外的是（）A. 红细胞系B. 浆细胞系C. 单核细胞系D. 巨核细胞系E. 淋巴细胞系13、骨髓细胞中最大的细胞是（）A. 成骨细胞B. 破骨细胞C. 脂肪细胞D. 巨核细胞E. 内皮细胞14、骨髓巨核细胞计数值(1.5 cm×3 cm面积血膜)为（）A. 0-5个B. 5-7个C. 7-35个D. 100个E. 120个15、进行骨髓细胞分类计数时，应先从涂片（）A. 头部开始计数B. 体部开始C. 头，体交界处D. 体尾交界处E. 上或下边缘处16、原粒细胞胞浆的形态学特点（）A. 量多B. 天蓝色C. 有颗粒D. 有伪促E. 着色不均匀17、鉴别类白血病和慢性髓系白血病的组织化学染色是（）A. PASB. POXC. NAPD. 铁染色E. A-NAE18、为了区别红白血病和巨幼红细胞性贫血，下列首选实验是（）A. POX染色B. PAS染色C. a-NAE染色D. 铁染色E. NAP染色19、患者，男性，30岁，头昏乏力2月，牙龈渗血2周，发热伴咳嗽1周。
《医学淋转试验》课件
抗体选择
根据实验目的选择特异性 抗体，并确认抗体的质量 和浓度符合实验要求。
试验操作步骤
加样
在细胞培养板中加入抗体，使 抗体与细胞充分接触。
洗涤
洗涤细胞培养板，去除未结合 的抗体和其他杂质。
细胞铺板
将处理好的细胞悬液均匀铺在 细胞培养板上，并设置阴性对 照和阳性对照。
孵育
将细胞培养板在适宜温度下孵 育一定时间，使抗体与细胞充 分反应。
淋转试验与细胞学检测的比较
淋转试验
针对特定病原体的检测，用于性传播疾病的诊断。
细胞学检测
通过观察细胞形态进行诊断，用于宫颈癌等疾病的筛查。两者用途不同，无直 接比较价值。
REPORT
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
06
淋转试验的未来发展
淋转试验的技术创新
自动化技术
利用自动化技术提高淋转试验的效率和准确性， 减少人为误差。
通过自动化技术，减少人为操作误差，提高检测效率。
开发新型试剂
通过研发新型的抗原或抗体试剂，提高淋转试验的灵敏度和特异性 。
REPORT
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMAR Y
05
淋转试验与其他检测方 法的比较
淋转试验与PCR检测的比较
淋转试验
通过检测细胞表面抗原，用于诊 断淋病等性传播疾病。具有较高 的特异性和敏感性，但需要细胞 培养，操作相对复杂。
REPORT
医学淋转试验
CATALOG
DATE
ANALYSIS
SUMMARY
目录
CONTENTS
• 淋转试验简介 • 淋转试验的操作流程 • 淋转试验的结果分析 • 淋转试验的优缺点 • 淋转试验与其他检测方法的比较 • 淋转试验的未来发展
细胞形态学对于临床诊断的意义
WHO (AML，NOS)分型与FAB分型的对比
急性巨核细胞白血病 / M7
FAB分型： ---未分化型 骨髓中原巨核细胞≥ 30％，原巨核细胞由组化电镜或单克隆
抗体证实。 ---分化型 骨髓及外周血中以单圆核和多圆核病态巨核细胞为主。
WHO分型： BM原始细胞≥20%，其中≥50%为巨核系；该原始巨核细胞应由电镜或
急性淋巴细胞白血病（WHO分型）
B-ALL
急性髓系白血病及相关肿瘤
AML伴重现性遗传学异常 AML伴骨髓增生异常相关改变 治疗相关髓系肿瘤 AML非特定类型（AML，NOS） 髓系肉瘤 唐氏综合征相关性骨髓增生
介绍形态学分型中的两个概念
急性红白血病 / M6
WHO (AML，NOS)分型与FAB分型的对比
FAB分型： ---急性红白血病：骨髓中幼红系细胞＞50％，
且常有形态学异常，骨髓非红系细胞中的原始粒 细胞（或原始＋幼单核细胞）＞30％(NEC)；如 果幼红细胞病态明显(占＞10%)，则红系细胞比 例占30%以上也可以 。
细胞形态学 对于临床诊断的意义
细胞形态学简介
细胞形态学检查是协助诊断血液系统疾病等的基本 手段之一，包括外周血细胞及骨髓细胞的形态。
通过骨髓细胞学检查可以了解骨髓有核细胞的增生 状况，骨髓中红系、粒系及巨核系等各个系统、各 个阶段细胞的增生情况，掌握各种血细胞数量、比 例及形态特点及有无异常细胞等，从而协助诊断疾 病、观察疗效或判断预后。
ALL-L2 （大细胞型）： 原始和幼稚 淋巴细胞以大细胞（直径>12μm） 为主，大小不一，核染色质较疏 松，核仁清楚较大，一至多个。
ALL-L3（空泡型）：原始和幼稚淋 巴细胞大小较一致，以大细胞为 主；核染色质细致均匀，核仁清 楚，一至多个，胞浆量较多，深 蓝色嗜碱，空泡较多常明显，呈 蜂窝状，亦称伯基特(Burkitt)性白 血病。
实验淋浆细胞形态学
2
Wenzhou Medical College
（一）上次实验情况
温州医学院
粒系形态观察的体会中，多位同学提到涂片中细 胞不够典型，所以难辨认
个别幼粒细胞颗粒减少、中幼粒有核仁、晚幼粒 核浆比大、早幼粒核肾形等
观察粒系细胞时，注意嗜酸性和嗜碱性粒细胞的
辨认及原始细胞的辨认
检2验021/医4/21学 院
17
Wenzhou Medical College
（六）注意事项
温州医学院
观察ALL片子时要注意选择合适的部位，如在厚的部位 观察，很容易将原淋、幼淋误认为是成熟淋巴细胞。 各期淋巴细胞的划分较粒、红系难，要注意与周围细 胞加以比较。 MM片中异常增生浆从本质上来说不是正常浆细胞。 浆细胞、中幼红和淋巴细胞的鉴别。 小嗜碱性粒细胞和小淋巴细胞的鉴别。
检2验021/医4/21学 院
27
20
Wenzhou Medical College
图片8
温州医学院
检2验021/医4/21学 院
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Wenzhou Medical College
图片9
温州医学院
检2验021/医4/21学 院
22
Wenzhou Medical College
图片10温ຫໍສະໝຸດ 医学院检2验021/医4/21学 院
23
慢性淋巴细胞白血病（CLL）
多发性骨髓瘤（MM）
检2验021/医4/21学 院
16
Wenzhou Medical College
温州医学院
（五）实验报告
实验名称 实验目的 实验结果 实验体会
检2验021/医4/21学 院
各期淋巴细胞形态及成熟浆细胞特点 各期淋巴细胞的划分 画出各期淋巴细胞（成熟包括大、小 淋巴细胞）及成熟浆细胞 淋系形态总特征
淋巴细胞转化实验(1)
扫描电镜法显示支原体，附于细胞表面众多的圆形颗粒为支原体
黑胶虫 污染
可以穿过滤膜.
低倍镜下为黑色点状,高倍镜下可见黑点游动;培养液 一般不受影响;细胞增殖旺盛时可自然消失
处理:
更换血清;
增加细胞的接种密度，以提高细胞的生存率
淋巴细胞转化实验
2010.12.21
原理
淋巴细胞在体外培养时，受到刺激剂的刺激后可表 现为细胞体积增大、代谢旺盛、蛋白质和核酸合成 增加，即向淋巴母细胞转化和增殖。此现象称为淋 巴细胞转化现象（简称为淋转）。
❖ 实验后要求： 关闭超净台风机；用酒精纱布擦拭超净台台面，紫外线消毒。
细胞培养条件
合成培养基：根据体内细胞生存所需的物质种类和数量，用化学物质模拟 合成。 常用的培养基有RPMI-1640、DMEM、IMDM等。
血清：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清。 抗菌素：抑制可能存在的细菌和霉菌的生长，而不影响细胞的生长。
← 血浆 ← ＰＢＭＣ
← 淋巴细胞分离液
← 红细胞、粒细 胞、血小板
实验流程 －－淋巴细胞转化实验
基本原理： 在特异性抗原刺激下可使相应淋巴细胞克隆发生
增殖；
有丝分裂原可作为多克隆刺激剂，使相应淋巴细 胞发生增殖。
实验流程 －－结果观察
形态计数法、MTT法、CCK-8法、同位素法。 （一）形态计数法：计数淋巴母细胞的比例，计算转 化百分率。
A组：置培养箱中培养66h,加入MTT溶液20ul/孔,继续培养 6hr后,去掉上清,加入DMSO100ul/孔,弃分混匀,测 OD570nm值.
B组：置培养箱中培养66h，制备流式标本，上机检测
细胞数/ml 4大格中细胞总数 ×104 ×稀释倍数
＝
浆细胞病骨髓细胞形态学特征及其临床意义
浆细胞病骨髓细胞形态学特征及其临床意义目的：探讨不同浆细胞病各自的骨髓细胞形态学特征。
方法：采用瑞氏染色法对61例已确诊为浆细胞病的患者进行骨髓细胞形态学分析。
结果：57.4%的患者骨髓细胞形态学显示原始、幼稚骨髓瘤细胞比例增高；16.4%的患者表现为浆细胞比例增高>10%，伴粒、红比例减低且粒系成熟障碍；8.2%的患者显示成熟型浆细胞比例增高；6.6%的患者仅表现为增生性贫血、感染、粒、红比例减低；4.9%的患者显示淋巴样浆细胞；3.3%的患者显示网状细胞型；3.3%的患者显示火焰状浆细胞型。
结论：骨髓浆细胞形态学是浆细胞病诊断的重要依据，正确的分型、分类对估计预后和预测某种单克隆免疫球蛋白病有积极意义。
标签：浆细胞病；骨髓细胞形态学；分型；预后浆细胞病（Plasma cell dyscrasias，PCL）是指产生免疫球蛋白的细胞异常增生，并伴有单克隆免疫球蛋白或其多肽链亚单位合成及分泌增多的一组疾病。
在临床上可由浆细胞恶性增生及所分泌的单克隆免疫球蛋白直接引起病变[1]。
因其临床表现多种多样，给诊断带来一定困难，骨髓细胞形态学、X线以及单克隆蛋白检测是诊断的重要方法。
笔者参照Greipp等制定的多发性骨髓瘤分型标准，对61例浆细胞病患者的骨髓细胞形态学检测结果及其生存期相关病历资料进行了分析。
1 资料与方法1.1 一般资料选择61例已确诊为浆细胞病的本院住院患者，其诊断标准一律参照张之南等编写的《血液病诊断及疗效标准》[2]。
其中男29例，女32例，年龄33～78岁，中位年龄60岁。
1.2 方法按常规方法行骨髓穿刺、涂片，选择头、体、尾清楚，薄厚适宜的骨髓涂片，干燥后经瑞氏染色。
分类计数300个有核细胞，计算浆细胞的百分比，并对其进行分类、分型。
1.3 浆细胞分型根据Greipp等制定的标准，将浆细胞病中可见浆细胞分为：（1）原始、幼稚浆细胞，其胞体、仁较正常大而明显，双核、多核易见。
多发性骨髓瘤与反应性浆细胞增多症临床表现及细胞形态学鉴别
１． ｎ。 ９ ｑ 两者差异有统计学意义 （ ＜Ｏ １ 。Ｍ ８ Ｐ ． ） Ｍ中浆细胞形 Ｏ 态较不规则 ， 可有伪足 ， 胞浆丰富。 可见较多空泡 。 有时可见少 量嗜天青颗粒和火焰状浆细胞 ， ０ 以上患者 出现不成熟浆细胞 ８％ 和多核浆细胞 ，而Ｒ 中浆细胞形态较规则 ，大多为圆形或卵圆 Ｐ
１ 一般资料 ：ＭＭ ９ ，男５ 例 ，女３ 例，年龄３ ． １ ８例 ２ ７ ４—７岁 ， ５ 中位年龄５ 岁 ；其中ＩＧ ２ ，ＩＡ型２ 例 ，ＩＤ型５ ，ＩＥ ９ ｇ 型５ 例 ｇ ８ ｇ 例 ｇ 型 ２ ，ＩＭ型２ 。Ｒ １ ，男３ 例 。女３ 例 。年龄２ 例 ｇ 例 Ｐ７例 ４ ７ 个月 一７ ２ 岁 ，中位年龄３ 岁 ，其 中造血系统疾病３ 例 （ ７ Ｏ 再生障碍性贫ｍ ５ ，急性 白血病 ５ ，粒细胞缺乏症４ ，血小板减少性紫癜 例 例 例
形 ，浆量相对较少 ．极少出现不成熟浆细胞和多核浆细胞 ，均在 ５ ％以下 ，两者差异有统计学意义 （ ＜００ ），另Ｓ ＭＭ中较多 Ｐ ．１ ｂ
骨髓网文系统采用江苏捷达骨髓图文软件系统。两样本均数比较
采用ｔ ，百分率比较采用 ｘ 检验 ，应用统计学软件Ｓ Ｓ ５ 检验 Ｐ Ｓ１， ０
病２ 例，干燥综合征ｌ ），慢性肝病３ ，变态反应性疾病３ 。 例 例 例
骨转 移癌２ 。所有ＭＭ和Ｒ 符 合诊 断标准 Ｉ 例 Ｐ ” 。
均３． ４２ 而Ｒ 组浆细胞 比 ， ２ ． 平均５ ％， ％， Ｐ 例３ ％ ４ ％。 ０ ５ ． ６ 两者 差异有统计学意义 （ Ｐ＜Ｏ １ ． ），ＭＭ中浆细胞较大 ，直径 ｌ ～ Ｏ ５
进行统 计学 处理 。 ２ 结 果
患者可 以看到浆细胞成簇分布，Ｒ 中浆细胞成簇分布少见。 Ｐ
血细胞形态(全)
图40
• 小淋巴细胞（左）， 早幼粒细胞（右）。 这两个细胞均较典型。 正常早幼粒细胞应注 意与异常早幼粒细胞 区别，后者主要特点 是：胞核常不规则， 颗粒丰富，常有内外 胞质分明现象，有的 还有1-几十条棒状小 体，见于M3。
图41
• 表皮细胞。其细胞中 可见胞核，而不是角 化细胞（它没有细胞 核），这个细胞应该 是属于表皮棘层中的 表皮细胞（即棘细 胞），是采集血标本 时脱落至血中的，有 时可见其上面有细菌 寄生。
图பைடு நூலகம்1
• 涂抹细胞（下）及 成熟淋巴细胞 （上）。该淋巴细 胞核中有假核仁 （如果是真核仁其 周围染色质应呈颗 粒状），胞质呈清 澈的淡蓝色（这也 是成熟细胞的特征 之一）。
图12
• 彩图12 这是个典型的中性 中幼粒细胞（大多数回答 是对的）。其胞质近核处 出现了中性颗粒（淡红色， 很细小），非特异性颗粒 也较多（呈紫红色），胞 核半圆形，染色质较粗但 副染色质不明显。晚幼粒 的主要特征是胞质中充满 中性颗粒，A颗粒很少或 无，胞核凹陷呈肾形，染 色质粗，出现副染色质
图42
• 两个淋巴细胞。左 边似乎受周围细胞 挤压而变形。这两 个细胞胞体不大、 胞质不多也不深蓝， 所以不能打异淋哦， 要抓住异淋的一些 主要特征哦。
图43
• 中性成熟粒细胞（左）、 原始细胞（右）。由于 左边的细胞胞核不清楚， 可以归入中性分叶核粒 细胞。该原始细胞不像 红系，其核仁可见，但 不是很清晰，所以有人 判断是幼稚细胞也不错。 外周血涂片白细胞分类 时，不需要对原始细胞 的细胞系列进行报告， 只要报告原始细胞比例 即可
图46
• 涂抹细胞或退化细 胞。其胞质已经完 全丢失，细胞核肿 胀、结构模糊、核 膜不完整，退化的 核中可见核仁。退 化细胞包括了涂抹 细胞。
淋转
第十节淋巴细胞转化试验技术(Lymphocyte transformation test technique)一、基本原理当机体受到抗原（包括特异性的如结核菌素或非特异性的如植物学凝素，PHA 等）的刺激时，T淋巴细胞就可以转化为淋巴母细胞，进一步转化为致敏淋巴细胞。
这种转化在一定的程度上代表着机体的细胞免疫功能状态。
这种转化也可在体外的T细胞的培养过程中加入适当的刺激原而出现，并表现出形态上的变化。
目前常采用PHA诱发的淋巴细胞转化试验作为检查机体细胞免疫的功能状态。
具体方法主要有两种：一是形态学检查法，即在加有PHA的培养基中，培养淋巴细胞后涂片、染色、镜检以观察形态学变化，计算淋巴细胞的转化率；另一种是同位素标记物掺入转化法，即当淋巴细胞受分裂原刺激发生转化时，必然伴有DNA的大量合成，此时若将具有放射性的3H-TdR(胸腺嘧啶核苷)加到培养液内，则被DNA的原料摄入转化中的细胞内，测定细胞内放射性物质的相对数量（以脉冲数表示），就能客观地测定淋巴细胞的转化程度。
后者方法更为准确，且重复性好。
二、形态学检查法（一）材料与试剂1．小牛血清取新生的小牛，无菌采血，分离血清。
于56℃灭活后分装小瓶，放入低温冰箱保存。
2．双抗配成每毫升含青霉素1.00×104U，链霉素1.00×104U的混合液。
存放于-20℃。
· 1 ·3．6%NaHCO3水溶液4．肝素以灭菌生理盐水配成500U/ml，115℃灭菌30min，4℃保存备用。
5．PHA 以灭菌生理盐水配成1 000µg/ml，经G-5漏斗过滤，分装小瓶，保存于-20℃备用。
6．姬姆萨染液、瑞氏染液。
7．pH6.4磷酸盐缓冲液：KH2PO4 6.62gNa2HPO4 2.56gH2O 1 000.00ml8．营养液采用199营养液或RPMI－1640营养液，配法如下：199营养液79.00ml小牛血清20.00ml“双抗” 1.00ml依次加入后，再用高压灭菌的6% NaHCO3液调pH至7.2～7.3，分装小瓶，每瓶0.2ml。
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实验三、淋、浆系形态观察
血液学检验教研室
淋巴、浆细胞系统形态观察
上次实验情况 实验内容 实验目的 实验标本 实验报告 注意事项 复习并看课件图片
（一）上次实验情况
粒系形态观察的体会中，多位同学提到涂片中细 胞不够典型，所以难辨认
个别幼粒细胞颗粒减少、中幼粒有核仁、晚幼粒 核浆比大、早幼粒核肾形等
掌握淋系细胞与浆系细胞形态总特征，并能 与其他细胞加以区分。
掌握各期淋巴细胞与浆细胞的形态特点。 进一步掌握粒、红系细胞形态特点。
（四）教学骨髓片
正常骨髓片 急性淋巴细胞白血病（ALL） 慢性淋巴细胞白血病（CLL） 多发性骨髓瘤（MM）
（五）实验报告
实验名称 实验目的 实验结果 实验体会
各期淋巴细胞形态及成熟浆细胞特点 各期淋巴细胞的划分 画出各期淋巴细胞（成熟包括大、小 淋巴细胞）及成熟浆细胞 淋系形态总特征
颗粒 常无
无
常无颗粒
有时可有少许
核形 圆形
圆形
类圆形
或有小切迹
位置 常偏位
居中
居中或偏位
核仁 无或
无
消失或见假核仁
染色质块状
结块
结块
副染色质明显 副染色质不明显
其他 有核旁淡染区
常无空泡
有时可见毛状突起
泡沫浆
图片11
图片12
小淋巴细胞
小嗜碱性粒细胞
胞体Biblioteka 6-9μm与小淋巴相仿
胞质 极少，呈淡蓝色
（六）注意事项
观察ALL片子时要注意选择合适的部位，如在厚的部位 观察，很容易将原淋、幼淋误认为是成熟淋巴细胞。
各期淋巴细胞的划分较粒、红系难，要注意与周围细 胞加以比较。
MM片中异常增生浆从本质上来说不是正常浆细胞。 浆细胞、中幼红和淋巴细胞的鉴别。 小嗜碱性粒细胞和小淋巴细胞的鉴别。
（七）复习理论并看课件图片
各期淋巴细胞形态特点 淋系系统形态总特征 浆细胞形态的特征 相似细胞的鉴别 看课件图片
图片7
图片8
图片9
图片10
浆细胞
中幼红细胞 小淋巴细胞
胞体 8-15μm，椭圆形 8-15μm，圆形 6-9μm，类圆形
浆色 深蓝色，有时红色 灰蓝色、灰红色 淡蓝色
浆量 丰富
多（围绕核周） 常极少（位于局部）
未见或极少，常呈红色
颗粒 常无，
有少许紫黑色颗粒，
有时少许紫红色颗粒 常覆盖在核上
核形 类圆或有小切迹
轮廓不清楚
核染色质 染色质呈块状
结构不清楚
观察粒系细胞时，注意嗜酸性和嗜碱性粒细胞的 辨认及原始细胞的辨认
图片1
图片2
图片3
早幼粒细胞粒减少
图片5嗜碱性颗粒多而细小
图片6
图片7中幼粒有核仁
中幼粒细胞颗粒减少
（二）实验内容
观察各期淋巴细胞： 原淋、幼淋、成熟淋巴细胞
观察各期浆细胞： 原浆、幼浆及成熟浆细胞
复习粒红系细胞
（三）目的要求