疑难血型鉴别总结

ABO疑难血型鉴定三步法

第一步:复查ABO血型，排除人为因素、操作失误。重新采集血样、核对试剂和器材。

第二步：将需定型病人归纳进五大类33种原因分类表，“对号入座”，逐一排除，剩下几条不能排除者——

第三步：针对剩下的几种不能排除的因素，设计针对性实验来验证。

ABO疑难血型鉴定

1 红细胞抗原↓7种

(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)

(2)白血病(临床提示)

(3)异型血输注(临床提示输血史)

(4)造血干细胞移植(病史)

(5)血型物质升高

(6)急性大失血(临床病史)

(7)ABO亚型

2 红细胞抗原额外反应7种

(1)自身凝集素(临床提示AIAH)

(2)红细胞粘附大量蛋白(红c未洗涤)

(3)红细胞未洗涤，与血清试剂反应

(4)造血干细胞移植(病史)

(5)获得性B抗原(类B)(临床提示感染)

(6)B(A)、A(B)表型

(7)异型血输注(输血史)

无临床提示者，仅三种

3 血清抗体↓6种

(1)年龄小于6个月或老年(临床提示)

(2) 双胞胎嵌合体(家族史)

(3)低丙种球蛋白血症(临床提示)

(4)造血干细胞移植(病史)

(5)先天性ABO抗体缺失

(6)大量输液(输液史)

4 血清抗体额外反应8种

(1)自身抗体(临床提示AIAH)

(2)同种抗体

(3)对试剂反应的物质

(4)血清蛋白异常(临床常为肝病)

(5)输异型血浆(输血史)

(6)造血干细胞移植(病史)

(7)输含血型抗体的免疫球蛋白(输血)

(8)ABO亚型

无临床提示者，仅四种

5 混合凝集5种

(1)近期怀孕或输血(病史、输血史)

(2)双胞胎嵌合体(家族史)

(3)骨髓移植受者(临床提示)

(4)造血干细胞移植(病史)

(5)白血病(病史)

常见几种疑难血型分析：

例1：实验中一例A2B亚型的鉴定：

临床标本，姓名：张××，标本离心分离血浆，常规操作，制备0.8%、4%红细胞悬液。对标本进行正反定型，博迅定型试剂卡批号：20081006，反定型试剂批号：20090602，结果如下：

正定型反定型

抗-A 抗-B 抗-D A1 Bc

3+ 3+ 4+ 4+W －

分析：

标本正定显示为AB型，反定显示为B型，反定该标本血清(血浆)与反定型A1细胞呈现4+W的反应格局(存在混合凝集)，正反定型不符。该结果反定用卡复试一次，结果一致，试管法复试4+W(未发现混合凝集)。采取措施如下：

(1)用自身血清、红细胞做反定型对照，检验自身完全抗体。(2)用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外完全抗体。

应用O1、O2两种细胞及自身红细胞做反定型对照，结果皆阴性。证实无自身完全抗体，无ABO系统外完全抗体。用博迅卡、试管法各复试一次，结果一致。

(3)对该标本进行直抗、抗筛实验，直抗用卡法、试管法两种方法，抗筛应用卡法、聚凝胺法、试管法三种方法。结果为：直抗两种方法皆阴性，抗筛三种方法皆阴性(筛检细胞批号:090601)。

(4)应用B型、AB型血辨分别与该标本进行交叉配血。B型与标本交叉配血分别应用卡法、聚凝胺法、试管法，三种方法主侧阴性，次侧皆阳性，B型供血者血清亦进行抗筛试验结果全阴性。

考虑到该标本正反定型不符，正定为AB型(与抗-A、抗-B反应强度为3+,可排除弱亚型) ，反定为B型(4+W,存在混合凝集)，反定自身对照、O细胞对照皆阴性；B型交叉配血次侧不符(4+W)，且直抗阴性；AB型交叉配血主侧有微弱凝集，且抗筛阴性。由于反定型与A1细胞反应阳性，初步判断该标本为AB型(出现了针对自身抗原缺失部分的意外抗体)，其中A 抗原为亚型，用抗-A1试剂验证：

将该标本红细胞悬液与抗-A1试剂在含中性胶的卡中反应，结果阴性，且标本与抗-A阳性，说明该红细胞上仅有A抗原，无A1抗原，判断该抗原为A2亚型，即标本为A2B。

例2被检者血清中存在ABO系统以外的特异性同种抗体，反定型时出现假阳性反应。

举例说明：临床标本，姓名：魏××，标本离心分离血浆，常规操作，制备0.8%、4%红细胞悬液。对标本进行正反定型，结果如下：

标本正定显示为B型，反定显示为O型，反定该标本血清(血浆)与反定型B细胞呈现1+P的反应格局，正反定型不符。该结果反定用卡、试管法各复试一次，结果一致。采取措施如下：

（1）用O型红细胞做反定型对照，确认是否存在ABO系统以外同种抗体。结果如下：2+，反定O细胞对照阳性说明有ABO系统外完全抗体。

（2）用试管法做反定型自身细胞对照，结果阴性，证实无自身完全抗体，排除冷凝集。

(3)对该标本进行直抗、抗筛实验。结果为：直抗阴性；抗筛阳性，结果如下：与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号筛检细胞反应分别为：1+、阴性、2+。

(4)应用B型血辨与该标本进行交叉配血。主次侧皆阴性，主侧阴性主要有两种情况：

①血辨红细胞上无该抗体相应抗原；②该抗体在37℃无反应活性。根据抗筛结果，应是无相应抗原。

反复输血等血清中可能含有ABO以外同种异型抗体，如完全抗体抗-M，使M阳性试剂红细胞发生凝集。从本例结果来看，该样本血清中含有抗-A以外的同种异型抗体，根据筛检细胞反应格局，可能是抗-M(谱细胞鉴定抗体特异性)。大多数抗-M在37℃不发生反应，但当抗-M在37℃有反应活性时(本例)，为避免可能引起的直接和延迟输血反应，应选择交叉配血相容的血液进行输血。

例3近期输过血案例

海某某，长春中医院患者，定型为AB型RH(D)为混合凝集，抗筛阴性(O型筛检细胞，RH阳性)，该患一周前在某区医院输入1800ccRH阳性血(经该医院证实)，其本人为阴性血。

自身冷凝集血样的ABO定型：

一旦血标本中出现红细胞自身凝现象或反定型自身对照阳性或微柱凝胶卡对照管阳性, 就应考虑有冷凝集素存在。

措施：正定型用红细胞的准备：血样采集后，立即离心获得压积红细胞，用37℃温盐水洗涤红细胞，45℃热放散3分钟；

反定型用血浆或血清的准备：血样采集后放置4℃冰箱静置24小时，用自身红细胞吸收去除自身冷抗体或巯基试剂处理破坏IgM抗体(额外不应出现的抗体)，用O型红细胞吸收去除ABO系统以外的非特异性及特异性抗体。

出现弱/缺失抗原的解决措施：

1.洗涤RBC且延长孵育时间进行试验，如果使用洗涤红细胞后反应加强，则考虑是型物质的抑制。

2. 酶处理红细胞再次试验。

3.增加正定型细胞浓度。

4.吸收放散确定是否是亚型。

5.了解输血史(尤其是O型红细胞输注)来分析混合视野。

6.了解病情诊断（尤其是白血病）。

7.了解是否是双胞胎。