冰冻切片和石蜡切片各自的优劣之处
石蜡切片VS冰冻切片
石蜡切片V S冰冻切片石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法。
制作过程较石蜡切片快捷、简便，因而多应用于手术中的快速病理诊断。
实验步骤一、石蜡切片1.?固定：将新鲜组织切成小块，固定于4%多聚甲醛过夜。
凝固组织中的物质成分，尽可能保持其活体时的结构。
同时能使组织硬化，有利于切片的进行。
2.脱水：为了减少组织材料的急剧收缩，应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行经70%、85%、95%直至纯酒精（无水乙醇），每次时间为1小时。
固定后的组织材料需除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，否则会影响后期的染色效果。
3.透明：常用的透明剂有二甲苯，二甲苯是石蜡的溶剂。
纯酒精不能与石蜡相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的溶剂，替换出组织内的酒精。
材料块在透明剂浸渍过程称透明。
?4.浸蜡：先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1小时。
先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍1小时左右。
5.包埋：以少许热蜡液将其底部迅速贴附于包埋盒内上，然后置于速冻台，让石蜡固定。
6.切片：切片刀的锐利与否、蜡块硬度是否适当都直接影响切片质量，可将蜡块至于冷水中改变蜡块硬度。
通常切片厚度为3-5um，用毛笔轻托轻放在37度水浴中展片。
7.贴片与烤片：一般使用恒温水浴锅，温度控制在37-40℃左右，有利于石蜡切片的展开，贴好的切片置于60℃恒温箱内干燥2小时，蛋白质凝固后即可染色。
8.切片脱蜡及水化：干燥后的切片置于二甲苯中进行脱蜡，然后依次使用从高浓度到低浓度递减的顺序进行经纯酒精、95%、85%、70%进行水化。
9.染色：经典的苏木精和伊红：细胞核被苏木精染成紫蓝色，多数细胞质及非细胞成分被伊红染成粉红色。
实验操作简单。
免疫组化：指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应。
石蜡切片与冰冻切片
石蜡切片与冰冻切片一、组织和细胞标本类型：（一）组织标本类：1、石蜡切片：组织形态保存好2、冰冻切片：抗原性保存好（二）细胞标本类：1、组织印片2、细胞培养片（细胞爬片）3、细胞涂片二、组织取材1、脑组织和神经组织应采用灌注固定后，再进行后固定。
2、组织取材注意事项：（1）标本新鲜：组织要求离体后30min~2h内浸入固定液，尤其是开展分子生物学工作。
动物组织取材要求心脏还在跳动时取材。
（2）注意防止人为因素的影响刀和剪要快，避免挤压。
（3）组织块的大小厚为0.1~0.3cm，大小可根据需要而定。
三、活细胞标本的制备法（1）细胞大量培养后，经消化将细胞制成悬液（106）涂在涂有切片粘合剂的载玻片上，凉干后固定。
（2）将细胞直接培养在盖玻片上。
（3）将细胞直接培养在6孔或9孔板上，经固定后可行IHC。
四、石蜡切片的制备1、由于石蜡不溶于水和醇类试剂，只溶解在二甲苯类试剂中。
因而，组织经固定和水洗后含大量水分，需用乙醇类试剂进行脱水，水脱完后，组织内含有大量的乙醇，还必须用能溶解乙醇的二甲苯来置换，最后经浸蜡，组织细胞内被大量石蜡支称，才使组织能用于石蜡切片。
2、小动物组织脱水、透明和浸蜡时间75%乙醇30min，85%乙醇30min，95%乙醇Ⅰ1h，Ⅱ1h，Ⅲ过夜或2h；无水乙醇Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ各30min；二甲苯Ⅰ15min，Ⅱ10min，Ⅲ10min；石蜡Ⅰ30min，石蜡Ⅱ30min，石蜡Ⅲ1~2h。
五、冰冻切片的保存和使用1、冰冻切片固定后-80℃保存备用2 、冰冻切片从-80℃取出，凉干或电吹风吹干后可直接进行免疫组化标记。
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察甲状腺病理诊断对于甲状腺疾病的诊断与治疗具有重要意义。
甲状腺病理诊断主要依赖于甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断。
本文旨在观察甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值，为临床提供更准确的病理诊断依据。
甲状腺冰冻切片是指在手术过程中取得甲状腺组织标本后，即刻进行快速冷冻处理，然后切割成薄片，用于病理诊断。
而石蜡切片是指将组织标本进行固定、脱水、透明和包埋处理后，切割成薄片，然后染色观察。
1. 诊断准确性甲状腺冰冻切片由于在手术过程中立即进行处理，因此能够提供实时的病理诊断结果，有助于指导手术决策。
石蜡切片则需要几天的时间才能得到诊断结果，这对于急需治疗的患者来说不够及时。
甲状腺冰冻切片在诊断准确性方面具有明显优势。
2. 组织结构保存情况甲状腺冰冻切片由于采用快速冷冻技术，组织结构得以有效保存，细胞形态清晰可见，有利于对细胞核和胞质进行观察和分析。
而石蜡切片在组织处理过程中易出现伪影和变性，对组织结构的保存影响较大。
3. 染色效果石蜡切片在染色过程中可以选择不同的染色方法，如H&E染色、免疫组化染色等，从而对不同组织成分进行有效染色。
而对于甲状腺冰冻切片，染色效果较差，对于一些细胞结构的观察存在一定的局限性。
4. 费用和时间成本甲状腺冰冻切片的制备过程简单快捷，费用低廉，适合临床急诊手术。
而石蜡切片的制备需要较长时间，费用较高，不适合急诊手术的病例。
5. 病理诊断以及随访观察石蜡的保存年限长，可为临床随访观察提供有力的依据。
而临床病理冰冻组织标本保留期非常有限，对一些需要长期随访的患者来说可能会不够充分。
甲状腺冰冻与石蜡切片在病理诊断中各有其特点与优势。
甲状腺冰冻切片因其快速、准确、低成本等特点，对于临床急诊手术具有重要意义；而石蜡切片则适合于对于一些需要长期观察的患者，并能提供更为细致的组织结构信息。
在实际临床应用中，需要根据临床情况和诊断需求综合考虑选择合适的病理诊断方法，以提供更精准的病理诊断结果，为患者的治疗和管理提供更有力的支持。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺肿瘤是指乳腺组织中形成肿块或肿瘤的一种疾病。
乳腺肿瘤的发生率逐年增加，给患者的生活和健康带来了严重的威胁。
而对于乳腺肿瘤的治疗和预后评估来说，准确的病理诊断是至关重要的。
病理诊断是通过对患者组织标本进行检查，确定其病理类型和严重程度的过程。
术中快速冰冻切片和常规石蜡切片是常用的病理诊断方法，但它们在准确性上是否有差异一直是学术界关注的焦点之一。
术中快速冰冻切片是指在手术切除肿瘤时，对肿瘤组织使用冰冻技术进行快速冰冻、切片和染色，从而在手术过程中迅速得到组织学信息。
而常规石蜡切片是在手术后将组织标本固定、脱水、浸蜡、切片，再染色的过程。
两种方法都有各自的优势和局限性，但在临床上人们更关心的是它们在诊断准确性上的差异。
一、材料与方法1.研究对象选择2019年至2021年在我院行乳腺肿瘤手术切除并病理诊断的患者为研究对象，共计100例。
2.实验设计本研究采用纵向对照研究设计，将100例乳腺肿瘤手术标本分为两组，分别进行术中快速冰冻切片和常规石蜡切片检查。
术中快速冰冻切片组进行冰冻切片检查，并在手术中获得病理诊断结果；常规石蜡切片组在手术后进行常规石蜡切片检查，并在术后获得病理诊断结果。
两组病理诊断结果分别由两名独立的病理学专家进行盲审，统计比对结果。
3.数据分析使用SPSS 20.0统计软件进行数据分析，计算两组病理诊断结果的一致性和准确率。
二、结果通过对100例乳腺肿瘤病理标本进行术中快速冰冻切片和常规石蜡切片检查后发现，术中快速冰冻切片组的病理诊断结果与常规石蜡切片组的诊断结果一致率达到90%，诊断准确率为85%。
而冰冻切片与常规石蜡切片间的一致性Kappa检验结果为0.80，表明两种方法在诊断结果上具有较高的一致性。
三、讨论本研究结果显示，术中快速冰冻切片与常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断上具有较高的一致性和准确率，但在临床应用中，术中快速冰冻切片由于其实时性和迅速性，对于手术中无法确定肿瘤范围和边缘的情况下，可以为临床决策提供重要依据，尤其是对于需要行肿瘤根治术、乳腺保留术术方式的选择有重要意义。
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察
甲状腺冰冻与石蜡切片是常见的病理学诊断方法，对于甲状腺疾病的诊断和治疗具有
重要价值。
本文通过观察甲状腺冰冻和石蜡切片的病理诊断价值，探讨两种方法的特点和
适应症。
甲状腺冰冻切片是一种快速冰冻固化组织样本的方法，通常在手术中进行。
它可以提
供即时的病理诊断结果，有助于指导手术决策和术中治疗。
冰冻切片的优点是操作简便、
快速，能够有效减少手术时间和术后并发症的发生。
但是冰冻切片的缺点是样本保存时间短，冻结伤害较大，易于形成伪像。
冰冻切片对于某些病理类型的诊断准确率较低，如甲
状腺微小癌等。
石蜡切片是将组织标本固定在石蜡中，切成薄片后染色和镜检的方法。
石蜡切片的优
点是样本保存时间长，可以进行多种染色，方便进行进一步的分子病理学检测。
石蜡切片
的诊断准确率较高，可以对甲状腺病变进行详细的形态学评估，不会出现伪像。
石蜡切片
需要时间进行处理和制备，不能提供即时的诊断结果。
甲状腺冰冻切片和石蜡切片在不同的临床情况下有不同的适应症。
对于甲状腺恶性肿
瘤的判断，冰冻切片通常用于术中快速诊断，以确定是否需要行颈淋巴结清扫。
而石蜡切
片则用于术后病理学评估，可以进行详细的组织形态学分析和免疫组化染色，协助确定病
变的类型和分级。
对于甲状腺炎、甲状腺结节等非恶性病变，石蜡切片是首选的诊断方法，可以提供更全面的信息。
冰冻切片与石蜡切片的区别
1．冰冻切片是免疫构造化教染色中最时常使用的一种切片要领.其最超过的便宜是不妨较完佳天保存多种抗本的免疫活性，越收是细胞表面抗本更应采与冰冻切片.新陈的构造及已牢固的构造均可做冰冻切片.之阳早格格创做冰冻时，构造中火份易产死冰晶，往往做用抗本定位.普遍认为冰晶少而大时，做用较小，冰晶小而多时，对于构造结构益伤较大，正在含火量较多的构造中上述局面更易爆收.冰晶的大小与其死少速率成正比，而与成核率（产死速率）成反比，即冰晶产死的数量愈多则愈小，对于构造结构做用愈宽沉.果此，应尽管落矮冰晶的数量.Fish认为冰冻启初时，冰晶成核率较缓，以来渐渐减少，其临界温度为-33.C,从-30.C 落至-43.C之间，成核率慢遽减少达1018，而后再减缓.鉴于上述表面可采与以下步伐缩小冰晶的产死.（1）速冻，使构造温度骤落，支缩从-33.C43.C的时间，缩小冰晶的产死.其要领有二：①搞冰-丙酮（酒粗）法：将150-200ml丙酮（酒粗）拆进小保温杯内，渐渐加进搞冰，曲至鼓战呈粘稀状，再加搞冰出有再昌泡时，温度可达-70℃C，用一小烧杯（50-100ml）内拆同戊烷约50ml，再将烧杯缓缓置进搞冰丙酮（杂酒粗）鼓战液内，至同戊烷温度达-70℃时即可使用.将构造（大小为1cm×0.8cm×0.5cm）加进同戊烷内速冻30-60s后与出，或者置恒热箱内以备切片，或者置-80℃矮温冰箱内贮存.②液氮法：将构造块仄搁于硬塑瓶盖或者特造小盒内（曲径约2cm），如构造块小可适量加OCT包埋剂浸出构造，而后将特造小盒缓缓仄搁进衰有液氮的小杯内，当盒底部交触液氮时即启初气化沸腾，此时小盒脆持本位切勿浸进液氮中，约莫10-20s构造即赶快冰结成块.与出构造冰块坐时置进-80℃冰箱贮存备用，或者置进恒热箱切片机冰冻切片.（2）将构造置于20%-30%蔗糖溶液1～3天，利用下渗吸支构造中火分，缩小构造含火量.做用冰冻切片的果素较多，果此，技能易度较大，采用佳的冰冻切片机是包管切片品量的关键.久时冰冻切片机有二类：①恒缓冰冻切片机（Cryastat）：为较理念的冰冻切片机，型号很多，但是其基础结构是将切片机置于-30℃C矮温稀关室内，故切片时出有受中界温度战环境做用，可连绝切薄片至2-4μm，真足能谦脚免疫构造化教标记表记标帜央供.切片时，矮温室内温度以-15℃～18℃为宜，温度过矮构造易破碎，抗卷板的位子及角度要适合，载玻片附揭构造切片，切勿上下移动.②启搁式冰冻切片机：包罗半导体致热切片机战甲醇致热切片以及老式的CO2、氯乙烷等热冻切片机.切片时表露气氛中，温度出有简单统造，切片技能易度大，正在下温季节，切片越收艰易，且切片薄8～15μm，出有简单连绝切片，但是其便宜是价廉，海内有死产.冰冻切片后如出有染色，必须吹搞，贮存矮温冰箱内，或者举止短促预牢固后贮存冰箱保存.2．石蜡切片其便宜是构造结构保存良佳，正在病理战回瞅性钻研中有较大的真用价格，能切连绝薄片，构造结构浑晰，抗本定位准确.用于免疫组化技能的石蜡切片造备与惯例造片略有分歧：①脱火、透明等历程应正在4℃.C下举止，以尽管缩小构造抗本的益坏.②构造块大小应限于2cm×1.5cm×0.2cm，使构造充分脱火、透明、浸蜡.③浸蜡、包埋历程中，石蜡应脆持正在60℃以下，以溶面矮的硬蜡最佳（即矮温石蜡包埋）.构造块脱火、透明、浸蜡时间参照表1-3：表1-3 构造块处理时间表1 70%乙醇4℃ 3～4h2 80%乙醇4℃ 3～4h3 90%乙醇4℃ 2～3h4 95%乙醇Ⅰ 4℃ 2～3h5 95%乙醇Ⅱ 4℃ 1～2h8 二甲苯Ⅰ 4℃ 0.5～1h9 二甲苯Ⅱ 4℃ 0.5１～1h10 石蜡Ⅰ 60℃ 1h11 石蜡Ⅱ 60℃ 2h以上齐历程为18-24h，也可正在室温内使用自动脱火机代替.如构造块小，曲径小于0.5cm，可用赶快石蜡包埋切片，齐历程只需4h安排.石蜡切片为惯例造片技能，切片机多为轮转式，切片薄度2～7μm，应用范畴广，出有做用抗体的脱透性，染色匀称普遍.由于甲醛牢固、有机熔剂战包埋剂对于组抗本有一定的益伤及遮蔽，使抗本特性爆收改变.有人报告经蛋黑酶消化，不妨革新光镜免疫组化染色强度，时常使用的有胰蛋黑酶、链霉蛋黑酶及胃蛋黑酶等消化法.石蜡切片应进37℃恒温箱过夜，那样烤片可缩小染色中脱片局面.切片如需少久贮存，可存搁于4℃冰箱内备用.石蜡切片便宜较多，但是正在造片历程中要通过酒粗、二甲苯等有机溶剂处理，构造内抗本活性得来较多，有人采与热冻搞燥包埋法（Freeze drying embedding methed），不妨保存构造内可溶性物量，预防蛋黑变性战酶的得活，进而缩小了抗本的拾得.该法是将新陈构造矮温速冻，利用热冻搞燥机（Freezing dryer）正在真空、矮温条件下排除构造内火分，而后用甲醛蒸气牢固搞燥的构造，末尾将构造浸蜡、包埋、切片.此法可用于免疫荧光标记表记标帜、免疫酶标记表记标帜及搁射自隐影.。
石蜡切片与冰冻切片对比全集
石蜡切片与冰冻切片对比全集石蜡切片与冰冻切片《一》石蜡切片把修好的蜡块装在旋转切片机上，即可进行切片(section)。
切片必须保持切片刀锐利，切片厚度通常为5～7um，也可根据染色需要切成不同厚度，一般不旋转式切片机超过10um。
切好的蜡带，放人40℃左右的温水中将蜡片展平。
良好的切片应无刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。
切片如有上述问题，在进行免疫组织化学染色时会出现假阳性现象。
为能得到平整无皱褶的组织切片。
可采用两次展片，即先将组织切片漂浮在30％的乙醇溶液中进行第一次展片，然后将切片捞起，再次放人45～50℃的水浴中进行第二次展片，乙醇的浓度和水温可视组织不同和石蜡熔点的高低自行调整。
此过程是利用乙醇溶液与水之间的张力差展开切片的皱褶。
为防止脱片，载玻片要涂黏片剂。
对HE染色的切片，可在载玻片上涂抹薄层蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易导致非特异性免疫反应，故用于免疫组织化学染色的切片常用多聚赖氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等处理。
《二》冰冻切片冰冻切片(fiozen section)是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法，其最突出的优点是能够较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原的免疫活性，尤其是细胞表面抗原更应采用冰冻切片。
新鲜组织和已固定的组织均可作冰冻切片。
为了得到高质量的冰冻切片，选择好的冰冻切片机是保证切片质量的关键。
恒冷箱切片机(cryostat)是目前最常用的冰冻切片机，可得到3—5um 的连续薄片。
组织在切片前需要冰冻，而冰冻过程容易使组织中的水分形成冰晶，从而影响抗原定位。
一般认为，冰晶体积大而量少时，影响较小；冰晶体积小而量多时，对组织结构损害较大。
含水量较多的组织中较易出现冰晶。
1．防止组织中冰晶形成的方法(1)速冻：使组织温度骤降，减少冰晶的形成。
方法包括：1)干冰—丙酮(乙醇)法：将150～200ml丙酮(无水乙醇)装入小保温杯内，逐渐加入干冰，直至饱和呈黏稠状，再加干冰不再冒泡时，温度可达-70℃，用一小烧杯内装异戊烷约50ml，将此烧杯缓慢置人干冰—丙酮(或无水乙醇)饱和液内，至异戊烷温度-70℃时即可使用。
石蜡切片与冰冻切片的优缺点
两种切片我都做得比较多。
相比之下，我更喜欢石蜡切片。
石蜡切片的最突出优点是标本可以长期保存。
在这次试验结束的若干年后，还可以用来做别的指标。
对于比较珍贵的标本，如罕见的临床标本，石蜡切片是比较好的选择。
我觉得石蜡标本的好坏取决于固定的质量。
个人认为组织块不宜过大，固定时间不宜过长。
我的经验是取火柴头大的组织，4%多聚甲醛或10%福尔马林4摄氏度固定3-4小时。
固定时间太长的话，蛋白质的肽链过度扭曲，抗原决定族被缠绕包裹，不容易做出结果。
石蜡切片的主要缺点是不适合做荧光。
我也不知道为什么，反正我老板是这么说的。
可能是由于石蜡有自发荧光的缘故。
我也试过用石蜡切片做荧光，效果还可以。
可是文章中这么做的确实很少。
冰切相对简单，容易出结果。
大多数人是用新鲜组织直接冰切，然后丙酮固定。
这样做虽然省事，可固定完了以后要马上漂洗、孵抗体或染色，不能让切片晾干，不然形态会非常糟糕。
我喜欢先用4%多聚甲醛或10%福尔马林固定，然后蔗糖脱水，再切片。
这样虽然麻烦一些，可切片的形态会好很多。
切片可以晾干，而且在4摄氏度下可以保存1-2个月。
千万不能放-20度保存，否则会有严重的冰晶，切记。
冰冻切片最大的问题还是标本不能长期保存，要现取现做。
适合用于容易获取的动物标本。
chengjinxiang wrote:做冰冻切片的组织可以是直接放在液氮里直接冻存的组织吗？石蜡切片前的福尔马林固定的组织过大会怎么样，我们因为自己没有机器通常是把组织扔到甲醛里直到有一定量和有足够多标本才去包蜡块这样对组化结果有什么影响？做冰切的组织可以先在液氮中长期保存。
而且经过液氮冻存的组织冰切后的形态特别漂亮，一点儿冰晶都没有。
不过保存之前要先用OCT包埋。
切片之前要把冰切机预冷到工作温度（-20度以下）。
包埋块从液氮中一拿出来就要放进冰切机中，不能让包埋块融化，否则还是会出现严重的冰晶。
做HE染色的话，组织固定时间长一点儿没关系。
但如果做免疫组化的话，固定时间就不能太长。
石蜡切片、冰冻切片及振动切片的区别
石蜡切片、冰冻切片及振动切片的区别一、石蜡切片把修好的蜡块装在旋转切片机上，即可进行切片（sectio n）。
切片必须保持切片刀锐利，切片厚度通常为 5〜7um也可根据染色需要切成不同厚度，一般不旋转式切片机超过10um切好的蜡带，放人40C左右的温水中将蜡片展平。
良好的切片应无刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。
切片如有上述问题，在进行免疫组织化学染色时会出现假阳性现象。
为能得到平整无皱褶的组织切片。
可采用两次展片，即先将组织切片漂浮在 30%的乙醇溶液中进行第一次展片，然后将切片捞起，再次放人45〜50C的水浴中进行第二次展片，乙醇的浓度和水温可视组织不同和石蜡熔点的高低自行调整。
此过程是利用乙醇溶液与水之间的张力差展开切片的皱褶。
为防止脱片，载玻片要涂黏片剂。
对HE染色的切片, 可在载玻片上涂抹薄层蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易导致非特异性免疫反应，故用于免疫组织化学染色的切片常用多聚赖氨酸、3—氨丙基一乙氧基甲硅烷等处理。
二、冰冻切片冰冻切片（fiozen section）是酶组织化学和免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法，其最突出的优点是能够较完好地保存细胞膜表面和细胞内多种酶活性以及抗原的免疫活性，尤其是细胞表面抗原更应采用冰冻切片。
新鲜组织和已固定的组织均可作冰冻切片。
为了得到高质量的冰冻切片，选择好的冰冻切片机和配套的一次性刀架是保证切片质量的关键。
组织在切片前需要冰冻，而冰冻过程容易使组织中的水分形成冰晶，从而影响抗原定位。
一般认为，冰晶体积大而量少时，影响较小；冰晶体积小而量多时，对组织结构损害较大。
含水量较多的组织中较易出现冰晶。
1 •防止组织中冰晶形成的方法（1）速冻：使组织温度骤降，减少冰晶的形成。
方法包括：1）干冰一丙酮（乙醇）法：将150〜200ml丙酮（无水乙醇）装入小保温杯内，逐渐加入干冰，直至饱和呈黏稠状，再加干冰不再冒泡时，温度可达-70 C,用一小烧杯内装异戊烷约50ml，将此烧杯缓慢置人干冰一丙酮（或无水乙醇）饱和液内，至异戊烷温度-70 C时即可使用。
冰冻切片和石蜡切片各自的优劣之处
冰冻切片和石蜡切片各自的优劣之处是什么1、从一抗的选择方面来看。
有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片，而有的一抗只能做冰冻切片，关键取决于所要检测的抗原稳定性，有的抗原不稳定，经过组织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤，所检测的抗原易被破坏，这时只能用冰冻切片来做，检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片，而那些稳定的抗原，能经受住石蜡切片的的考验，一般来讲也可以用冰冻切片来做，总得来讲，对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原，用石蜡切片检测的染色效果要比冰冻切片好一些。
2、2、从研究目的来看。
石蜡切片对组织细胞的定位很准确，而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构，并造成抗原的弥散，从而定位不准确。
3、3、从抗原的保真性来看。
冰冻切片对抗原的保真很好，而石蜡切片在组织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。
4、4、从操作步骤的繁琐程度看。
染色过程冰冻切片简单，而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程，比较繁琐。
5、5、总之，石蜡切片对标本的长期保存较合适，且组织细胞形态结构保持好；而冰冻切片适合对新鲜组织的制片，然后立即固定、染色效果较好，且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰。
冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。
因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。
冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。
这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，现在也逐步被淘汰了。
当然有些技术，如低温恒冷箱冰冻切片法，正在受到青睐。
冰冻切片的应用（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。
（2）了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺肿瘤是女性常见的恶性肿瘤之一，也是全球范围内威胁女性健康的主要疾病之一。
早期诊断和治疗对于提高患者的生存率和生活质量至关重要。
在乳腺肿瘤的治疗过程中，病理诊断是至关重要的，而术中快速冰冻切片和常规石蜡切片都是常用的病理检查方法。
术中快速冰冻切片是一种在手术中立即获取组织标本并用冷冻技术进行切片，然后立即进行病理学检查的方法。
它的优点是检查快速、方便，可以为手术提供实时的病理学指导，有助于术中判断肿瘤的性质，指导手术的范围和方式。
而常规石蜡切片则是在术后对组织标本进行处理和固定，然后进行石蜡切片和染色，最后进行病理学检查的方法。
随着医学技术的不断进步，术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理学诊断中的应用也越来越广泛。
两种方法在诊断准确率上的优劣势一直是学术界和临床医生所关注的问题。
本研究旨在比较术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断准确率上的差异，为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。
方法结果经过研究组的对比分析，发现术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断准确率上存在一定差异。
术中快速冰冻切片的病理诊断准确率为90%，而常规石蜡切片的病理诊断准确率为85%。
术中快速冰冻切片的优势在于能够提供术中实时的病理学指导，减少了术后的二次手术风险和患者的不适感，对于一些较小的肿瘤、异位病变和边界不清晰的病变有更高的诊断准确率。
讨论本研究结果表明，术中快速冰冻切片在乳腺肿瘤病理诊断中具有一定的优势。
术中快速冰冻切片也存在着一些局限性，例如对于组织结构和细胞形态的观察相对不清晰，易受冰冻伤害，对于一些细胞学特征不明显的病变诊断准确率较低。
而常规石蜡切片在病理学检查方面有着更加严谨和稳定的表现，对于细胞学特征较明显的病变具有更高的诊断准确率。
结论综合以上分析，术中快速冰冻切片和常规石蜡切片在乳腺肿瘤病理诊断中都有各自的优势和局限性。
免疫组化(IHC)经验
免疫组化经验总（好假哟）一、石蜡切片和冰冻切片的比较？1.要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片，这是我向一老师请教得出的结论。
因为作石蜡切片时要高温烤片，可能会破坏组织的抗原性，如果组织的抗原性较稳定，则可作石蜡切片；但是要求做石蜡切片的，可作冰冻切片。
2.冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。
缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构，可能会使抗原弥散；切片厚度较石蜡的厚，做的片子没石蜡的漂亮。
当你买一抗时，目录上都写着做什么样的切片，如果它写着只能做冰冻，就不能做石蜡，如写着两者都可，那就都能做。
3.石蜡切片的优点是可以保持组织细胞的形态结构，且容易存放在室温，而冰冻切片比较麻烦，一定要存在 -80℃的低温冰箱中，尤其是用来做原位杂交的切片，为了防止 RNA 降解，保存一贯很重要。
由于石蜡切片可以切到 4 μm 左右，所以原位杂交探针容易渗透到组织中去，容易成功，而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。
二、一抗的选择要点和技巧是什么？1.单克隆和多克隆抗体的选择。
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。
单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合，就像导弹精确地命中目标一样。
另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。
在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克隆抗体特异性稍弱，但抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色（可以通过封闭等避免）。
2.应用范围的选择。
有的一抗只能用于 WB （ Western blotting）或免疫组化、免疫荧光、免疫沉淀等；甚至表明石蜡切片或冰冻切片。
3.种属反应性的选择。
这一点很重要，表明这种抗体可能存在种属差异，且这种抗体适合检测哪种种属动物体内的抗原。
4.种属来源，一般兔来源的多是多克隆；而小鼠来源的多是单克隆，但也有另外。
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察
甲状腺冰冻与石蜡切片的病理诊断价值观察甲状腺冰冻与石蜡切片是当前常用的甲状腺病理诊断方法。
本文旨在探讨二者的优缺点及其在甲状腺病理学诊断中的应用。
一、甲状腺冰冻甲状腺冰冻是指在手术中取出甲状腺组织后，迅速将其放入低温液氮中冷冻并切片，然后用光学显微镜进行观察。
该方法不需要特殊设备，能够快速、准确地得到病理诊断结果，并指导术中的决策。
但其缺点也显而易见，冰冻后的组织结构变形实在难以避免，而且样本量也很小，易出现误差。
二、石蜡切片石蜡切片是指在标本固定后，将其放置于福尔马林中，然后用石蜡浸渍，再进行定型、切片、染色等步骤，最终形成切片。
这种方法需要专门的设备和技术，执行较为复杂。
但由于石蜡切片保持了组织结构的原貌，能够更好地反映真实的病理情况，而且样本量也较大，误差较小。
三、甲状腺冰冻与石蜡切片的优缺点比较甲状腺冰冻和石蜡切片两种方法各有优缺点。
在实际的诊断中，应根据患者的具体情况来选择策略。
甲状腺冰冻具有快速、实时、准确的特点，能够帮助外科医生做出更好的治疗决策，减少手术并发症的发生。
石蜡切片技术则更能反映真实组织结构，需要较长时间的制备和分析，但诊断效果更好。
甲状腺冰冻和石蜡切片是甲状腺病理学诊断中两种主要的方法。
二者的应用范围几乎相同，都可以用于良性和恶性疾病的鉴别诊断、淋巴结转移的检测、肿瘤的类型、大小、浸润范围的评估等方面。
此外，甲状腺冰冻可以在术中快速得出结果，以指导手术的决策，而石蜡切片则可用于病理诊断和医学研究。
综上所述，甲状腺冰冻和石蜡切片都是常用的甲状腺病理学诊断方法，各有其独特的优缺点。
在诊断过程中，应根据患者的具体情况来选择采用哪种方法，以期待得出更准确的诊断结果。
石蜡切片和冰冻切片都适合质谱成像分析
石蜡切片和冰冻切片都适合质谱成像分析
石蜡切片和冰冻切片都是质谱成像分析中常用的技术。
它们各自具有优点，可以根据实验需求进行选择。
石蜡切片法是将组织样本固定在石蜡块中，然后用切片机切成非常薄的切片(通常在20-50微米之间)。
这种方法的优点在于其切割厚度均匀，可以提供高质量的细胞和组织的图像。
此外，由于使用的是石蜡作为固定剂，因此可以得到长期保存的切片。
石蜡切片也有其缺点。
石蜡本身是一种有机物质，可能会对某些生物分子产生影响。
石蜡切片需要经过一系列复杂的处理步骤，包括脱水、包埋、切片等，这可能增加实验的复杂性和时间成本。
相比之下，冰冻切片法则是在冷冻状态下快速切割生物组织并立即冻结以保留其完整性。
这种方法的优点在于它可以提供实时观察的活体细胞和组织结构，对于研究动态过程非常有用。
此外，冰冻切片不需要使用石蜡或其他固定剂，因此不会对生物分子产生影响。
然而，冰冻切片也有其挑战。
由于是在冷冻状态下进行切割，因此切片的质量可能受到冷冻损伤的影响。
此外，冰冻切片需要在极短的时间内完成，这可能对切片机的性能要求较高。
石蜡切片和冰冻切片都适合质谱成像分析，选择哪种方法取决于具体
的实验需求。
如果需要长期保存的高质量图像，或者需要研究静态结构和三维形态，那么石蜡切片可能是更好的选择。
而如果需要实时观察活体细胞和组织结构，或者对时间敏感，那么冰冻切片可能更合适。
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究
乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率的比较研究乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，早期诊断和治疗对患者的生存率具有重要影响。
在乳腺癌手术中，病理诊断是非常关键的一环。
传统的石蜡切片需要几天的时间才能出具结果，这对于术后治疗和患者的病情评估来说具有一定的不便。
而快速冰冻切片技术可以在手术过程中快速获取组织病理学信息，有利于术中决策和术后治疗计划的制定。
本研究旨在比较乳腺肿瘤术中快速冰冻切片与常规石蜡切片病理诊断准确率，以期为乳腺癌术中病理诊断提供更为准确和高效的方法。
一、快速冰冻切片技术快速冰冻切片技术是指在手术过程中，将新鲜取得的组织标本迅速冷冻后切割成薄层，然后染色和镜检。
该技术可以在30分钟内获得组织病理学结果，对于术中判断切缘情况和淋巴结转移等具有重要意义。
快速冰冻切片技术主要适用于术中决策、病变边界不清晰、肿块与周围组织粘连等情况。
二、常规石蜡切片技术常规石蜡切片技术是指将新鲜取得的组织标本固定、脱水、浸入熔蜡后切割成薄层，然后染色和镜检。
这个过程需要数天的时间，对于术后治疗和预后评估来说不够及时。
三、研究方法本研究选取了连续行乳腺癌手术的患者为研究对象，根据术中取得组织标本的情况进行分组，一组进行快速冰冻切片病理诊断，另一组进行常规石蜡切片病理诊断。
比较两组病理诊断的准确率和一致性。
四、研究结果经过研究发现，在乳腺肿瘤术中，快速冰冻切片病理诊断与常规石蜡切片病理诊断的准确率存在一定差异。
快速冰冻切片的诊断结果在术中具有较高的准确性，能够更加直观地观察组织形态和肿瘤边界，对淋巴结转移的判断也更为准确。
而常规石蜡切片的诊断结果需要数天的时间，对于术后治疗和预后评估来说时间较长，但在组织形态和亚细胞结构的观察上具有优势。
六、研究展望本研究在乳腺癌术中病理诊断方面取得了一定的成果，但仍然存在一些不足之处。
在样本选择和数据分析上尚有待进一步完善。
未来可以结合更多的临床实例进行研究，以验证研究结果的稳定性和可靠性。
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1、
冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。
因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。
冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。
这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，现在也逐步被淘汰了。
当然有些技术，如低温恒冷箱冰冻切片法，正在受到青睐。
编辑本段冰冻切片的应用
（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。
（2）了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。
（3）对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤组织。
（4）在做剖腹探查时所发现的肿块或者异样的组织。
（5）显示组织中的脂肪和脂类物质，这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤，某些科研组织等。
（6）某些酶的显示如ATP酶，琥珀酸脱氢酶等。
（7）神经病理学技术中的某些染色法如：Eager氏法，Marchi氏法，Cajal 氏法，Hortega氏法和Holzer氏法等。
（8）对某些物质所进行的免疫荧光的研究。
编辑本段冰冻切片的制作方法
低温恒冷箱冷冻切片制作法
以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例，该机的箱面上有电子控制板，装有即时冷冻键和除霜键，启动即时冷冻键，机器马上进行工作状态，并可持续10mins。
启动即时除霜键，可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉，并可持续15mins。
有照明键一个，启动该键可照明工作间，有利工作及观察组织的冰冻状况。
配有消毒键一个，当进行一周的工作或者一天的工作后，启动该键，可对工作间进行消毒。
当每天工作完毕时，可启动密锁键，锁住工作间。
除此之外，箱面的左边有四个按键，两个为快速自动进退键，两个为微小进退键，还有一个手动旋钮，调节修组织块时的进退。
冷冻箱内左边的冷冻台，温度可达-60℃左右，冷冻箱的中间为一台切片机，工作间的温度在0-30℃间可任意调节，并在箱面上的荧屏显示出来。
操作方法及步骤
①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最好为24×24×2mm。
②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。
小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。
③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。
④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。
⑤调好防卷板。
制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。
切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。
这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。
⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。
冷冻箱中冷冻度的高低，主要根据不同的组织而定，不能一概而论。
如：切未经固定的脑组织，肝组织和淋巴结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10- -15℃左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15～20℃左右，切带脂肪的组织时，应调至-25℃左右，切含大量的脂肪时，应调至-30℃。
冰冻切片时的注意事项
①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。
有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。
因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。
②多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。
③放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。
④组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。
临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间，二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。
如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就会出现冰晶。
这是因为含水的固定液在组织未经固定前，其中的水份也可渗入到组织中去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织中，形成了冰晶。
⑤当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。
另者，调高冰冻点。
⑥用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。
因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别，当它们碰撞在一起时，分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片牢固地附贴在一起。
如果使用冷藏的载玻片来附贴切片，由于温度相同，没有发生上述的现象。
冰冻切片的快速染色法
冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定1分钟后即可染色。
以往，为了防止切片脱落，当切片附贴于载玻片后，即用电吹风吹干后再固定。
根据实验对比认为这种做法欠妥未经固定的切片，强热作用后，蛋白发生变性，核内含有的物质由于热的作用融合在一起，染色后镜下分辨不出核内的各种物质。
冰冻切片附贴于载玻片后，立即放入恒冷箱中的固定液固定，这样可以使切片中细胞内各种物质都在没有任何变化的情况下被固定起来，核染色质清晰，核仁明显，其他物质都完好保存。
方法：
① 切片固定30秒－1分钟。
② 水洗。
③ 染苏木素3－5分钟。
④ 分化。
⑤ 于碱水中返蓝20秒。
⑥ 伊红染色10－20秒。
⑦ 脱水，透明，中性树胶封固。
冰冻组织1－2分钟，切片1分钟，固定1分钟，染色共五分钟。
总共在10分钟内完成快速制片过程，结果与石蜡切片不相上下。
冰冻切片的方法还有很多种，如甲醇循环的半导体冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，半导体冰冻切片法和氯乙烷冰冻切片法等，这些方法在目前来说已很少使用，因此在这里不作阐述。
编辑本段优缺点
（一）优点：
1．简便，可以不需要对组织固定、脱水、透明、包埋等手续即可进行切片，减少了一些中间环节。
2．快速，用时短。
3．组织变化不大。
4．能很好保存脂肪，类脂等成分。
5．能够比较完好地保存各种抗原活性及酶类，特别是对于那些对有机溶剂或热的温度耐受能力较差的细胞膜表面抗原和水解酶保存较好。
（二）缺点：
1．不容易做连续切片。
2．切取的组织不能过大，组织过大不容易冻结或者组织冻结不均，影响切片及染色效果。
3．不容易制作较薄的切片。
4．组织块在冻结过程中容易产生水的结晶而影响细胞的形态结构及抗原物质的定位，并且组织结构也不如石蜡切片清晰。
编辑本段冰冻切片操作中的注意事项
（1）新鲜的组织制备
组织尽可能新鲜、骤冷愈快愈好，才能避免冰晶，常用的骤冷剂有：① CO2气（－78℃）② 丙酮干冰冷却的轻石油醚、乙烷和庚烷（－80℃）③ 液氮（－190℃）④ 液氮冷却的丙烷（－19℃）。
液氮适用于组织化学，较安全。
缺点：组织块易发生龟裂。
（2）固定组织的制备
为防止水解酶和其他物质的移位、弥散，常用4℃、24小时的甲醛固定能很好地保存酶类。
但对许多脱氢酶和转移酶能灭活。
故不宜使用，低温，冷甲醛短时间固定（10分钟左右）固定，可显示琥珀酸脱氢酶。
电镜出现后，需要保存细胞的超微结构，以4％缓冲戊二醛（25%戊二醛16ml；0.1M二甲胂酸（pH7．）84ml；蔗糖8g）固定较好。
这些固定液主要用于水解酶，而不适于许多氧化还原酶和转移酶。
（3）恒冷箱温度
一般在冷冻后10分钟，到接近冷室温度时再切，一般组织在－15～－20℃切片最易成功。
每种组织有其合适的切片温度、刀的温度和冷室温度，Pearse及Bancroft的经验如下：
组织刀温度组织温度恒冷箱温度
肝 -18 -10 -5
肾 -15 -8 -5
皮肤 -35 -10 -5
脑 -18 -5 -5
固定组织一般高3-5度
（4）切片机的使用
抗卷板的前缘与刀面须有足够的距离，使切片平滑通过。
抗卷板略高于刀面的最高点。
可凭经验调整刀对组织的角度，一般新刀为20゜。
操作程序：先接通电源，调定恒冷箱温度，调整切片刀的角度，调定切片厚度，标本置载台致冷达所需温度后，将其安放在切片机推进器上。
即可切片。
恒冷箱视使用情况每周或每月清洁一次冰霜。
新刀切片满意，旧刀用自动磨刀机磨刀
较好。
如果切片刀与抗卷板的位置，角度合乎要求，又有一把锐利的刀，就能获得理想的切片。