实验动物环境设施常用消毒灭菌方法
消毒和灭菌的区别以及常用的消毒、灭菌方法
消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用，其实它们的含义是有所不同的。
消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法，而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。
物理方法1温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1)干热灭菌法：a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2)湿热灭菌法：在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。
实验动物设施消毒与灭菌
01
020304 Nhomakorabea01考虑消毒剂的杀菌效果、安全性、环保性等因素
02
避免使用对实验动物和人体有害的消毒剂
03
定期更换消毒剂，防止产生耐药性
04
遵循操作规程
STEP4
STEP3
STEP2
STEP1
严格按照操作规程进行消毒与灭菌操作
确保操作人员具备相应的技能和知识
定期检查消毒与灭菌设备的性能和状态
记录消毒与灭菌操作过程，以便追踪和改进
演讲人
01.
02.
03.
04.
目录
消毒与灭菌的重要性
消毒与灭菌的方法
消毒与灭菌的注意事项
消毒与灭菌的实践案例
保障实验动物健康
2
1
消毒与灭菌是保障实验动物健康的关键环节
保护实验人员的健康和安全，防止实验过程中的交叉感染
防止实验动物感染疾病，确保实验结果的准确性
降低实验动物的死亡率，提高实验效率
4
01
消毒与灭菌可以避免实验人员受到微生物的感染，保障实验人员的健康和安全
03
消毒与灭菌可以防止实验动物之间的交叉感染，提高实验结果的可靠性
02
消毒与灭菌可以延长实验动物的寿命，提高实验结果的准确性和可重复性
04
物理消毒法
紫外线消毒：利用紫外线照射，破坏微生物的DNA和RNA，达到消毒目的。
热力消毒：通过加热，使微生物的蛋白质变性，达到消毒目的。
3
防止实验污染
消毒与灭菌是防止实验污染的关键步骤
01
实验污染可能对实验人员造成健康危害
03
消毒灭菌方法
食品包装消毒
食品包装材料需要经过严格的消毒程序，以杀灭 可能存在的细菌和病毒，保证食品安全。
食品储存环境消毒
食品储存环境需要定期进行消毒，以减少病菌的 滋生和传播，保证食品安全。
环境领域消毒灭菌应用
公共场所消毒
公共场所的地面、墙壁、天花板、空调系统等都需要定期进行消毒，以减少病菌 的传播，预防疾病感染。
超声波消毒灭菌法
超声波清洗机
利用超声波清洗机进行清洗和消毒，适用于医疗器械、手术器械等。
超声波雾化器
利用超声波雾化器将消毒液雾化后对空气进行消毒，具有高效、快速的特点 ，适用于手术室、ICU等。
02
化学消毒灭菌法
气体消毒灭菌法
环氧乙烷气体消毒法
使用环氧乙烷气体对物品进行消毒。
甲醛气体消毒法
使用甲醛气体对物品进行消毒。
过氧化氢气体消毒法
使用过氧化氢气体对物品进行消毒。
液体消毒灭菌法
含氯消毒剂
使用含氯消毒剂对物品进行消 毒。
过氧化物类消毒剂
使用过氧化物类消毒剂对物品进 行消毒。
酒精类消毒剂
使用酒精类消毒剂对物品进行消毒 。
固体消毒灭菌法
01
02
03
干热法
使用干热法对物品进行消 毒。
压力蒸汽灭菌法
使用压力蒸汽对物品进行 灭菌。
低温蒸汽甲醛熏蒸消毒法
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适用范围
优点
常用于医院内医疗器械、器具及物品 的消毒灭菌。
具有穿透性强、消毒灭菌时间短、效 率高、环保等优点。
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缺点
使用时需严格控制甲醛的用量和使用 时间，以免对人体造成伤害。同时， 该方法不适用于对甲醛过敏的人群。
实验室常用消毒灭菌方法
实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:（1）流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
（2）间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
（3）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC～150ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
消毒灭菌方法
严格的消毒灭菌对细胞与胚胎工程研究与应用工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
(一)消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法（消毒剂、抗生素）两大类。
1．干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120 ºC～150 ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2．湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1 kg/cm2，维持20～30 min即可达到灭菌效果。
3．射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30 min。
用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4．过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前，常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌，或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
兽医生物安全二级实验室消毒灭菌方法
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细胞工程实验室常用的消毒灭菌方法
细胞工程实验室中，为了保证实验环境和实验材料的无菌状态，采用多种消毒灭菌方法。
以下是一些常用的消毒灭菌技术：
1. 干热灭菌法：
- 适用于玻璃器皿、金属器械等耐高温但不耐湿热的物品，通过烘箱在160-180℃下保持一定时间进行消毒。
2. 湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）：
- 这是实验室最常用且效果最为可靠的灭菌方式，通过高压蒸汽灭菌锅在121℃或134℃维持15-30分钟，可以杀死所有微生物及其孢子。
3. 射线灭菌法：
- 包括伽马射线、电子束或X射线照射，主要用于不能承受高温高压的生物制品、塑料制品等的灭菌。
4. 过滤除菌法：
- 对液体培养基、缓冲液等使用0.22微米孔径的滤膜进行除菌过滤，以去除溶液中的微生物。
5. 化学消毒剂消毒：
- 如70%乙醇用于表面擦拭消毒；新洁尔灭（苯扎氯铵）可对皮肤、操作台面以及非渗透性材料进行消毒。
6. 甲醛熏蒸：
- 用于空间及大型设备的消毒，如细胞培养室内部设施在闲置期间进行彻底的环境消毒。
7. 空气过滤：
- 使用高效过滤器（HEPA过滤器）净化空气，常用于超净工作台、生物安全柜和层流洁净室，以确保空气质量达到无菌要求。
8. 紫外线杀菌灯消毒：
- 紫外线对空气和物体表面具有一定的杀菌作用，通常用作实验室静态条件下的辅助消毒手段。
9. 过氧化氢银离子消毒灭菌：
- 利用过氧化氢与银离子复合消毒剂进行空间雾化或者浸泡，实现快速、广谱的消毒灭菌效果。
根据不同的实验需求和材料特性，选择适宜的消毒灭菌方式至关重要。
消毒、灭菌方法归纳
消毒、灭菌方法归纳一、物理消毒灭菌法：热力、辐射、滤过、干燥和低温等㈠热力灭菌法：分为干热灭菌和湿热灭菌1、干热灭菌法：一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100℃经1小时可被杀死，芽胞则需要更高温度才能被杀死。
①焚烧：废弃物②灼烧：接种环、试管口（酒精灯火焰）③干烤：（160~170℃，2h）利用干烤箱灭菌，一般加热至171℃经1h或160℃2h或121℃16h。
适用于高温下不变质、不损害、不蒸发的器皿（如：玻璃器皿）。
④红外线（0.7~1000um波长的电磁波）：医疗器械2、湿热灭菌法：最常用，在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好，因为：ⅰ湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性；ⅱ湿热的穿透力比干热大；ⅲ湿热的蒸汽有潜热效应存在。
①巴氏消毒法：用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法（61.1-62.8 ℃30min 或71.7℃15-30s，主要用于牛乳消毒和酒类）。
②煮沸法（100 ℃，5min）食具、注射器等消毒③流动蒸汽消毒法（100 ℃15-30min）④间歇蒸汽灭菌法（100 ℃5-30min，37 ℃24h×3天）⑤高压蒸汽灭菌法：*压力—103.4KPa（1.05Kg/cm2）*温度—121.3 ℃*时间—15-20min*效果—杀灭包括芽孢在内所有微生物*应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品㈡辐射杀菌法：①紫外线：波长265—266nm效果最强。
紫外线杀菌机理是干扰细菌DNA合成，导致细菌变异和死亡。
手术室空气消毒常采用紫外线消毒②电离辐射：高速电子、X射线、γ射线③微波：不能穿透金属表面。
主要靠热效应发挥作用，必须在有一定含水量条件下才能显示出来。
二、化学消毒灭菌法原理：⑴破坏菌体蛋白；⑵干扰细菌的酶系统和代谢；⑶改变细胞膜的通透性。
三、影响消毒灭菌效果的因素1.微生物的种类：微生物对消毒灭菌的敏感性高低排序大致如下——真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。
实验动物管理制度与操作规程
实验动物(dòngwù)设施〔设备(shèbèi)〕运行(yùnxíng)管理制度一、设施(shèshī)平安(píng ān)运行管理管理制度1、认真贯彻“谁主管，谁负责〞的原那么，设施负责人对中心内的平安生产、劳动保护工作负全面领导责任。
2、设兼职平安员，对设施的平安工作负检查、监督责任。
3、各人对所在岗位的所有仪器设备及所使用的工具、器材负直接的平安管理责任。
4、动物饲养员必须对所饲养的动物负全部的平安管理责任。
5、所有工作人员均应严格遵守设施所规定的各项制度。
6、所有工作人员在工作过程中均应牢固树立“平安第一〞的思想，贯彻“预防为主〞的方针，认真作好个人防护，严防各类事故的发生。
7、各种电器、动力设备在移动、检修之前必须切断电源。
饲养室和实验室内电、煤气设备及线路设施必须严格按照平安用电规程和设备的要求实施，不许乱接、乱拉电线，墙上电源未经允许，不得拆装、改线。
8、各饲养室和实验室的钥匙应由专人管理，不得私自配备或转借他人。
9、发现平安隐患，均应及时处理，并记录、汇报。
10、发生火警等险情，在采取扑救措施的同时，应及时报警，并报告上级主管部门。
11、每日下班时，工作人员都必须查看水电、煤气和门窗等，切断电源，清扫易燃的纸屑等杂物，消灭隐患。
12、为保证人身平安，防止人畜共患传染病的发生，但凡常年从事实验动物工作的人员每年必须进行1次体检。
凡有人畜共患传染病者不得从事实验动物工作。
13、为了保证动物种群的健康和屏障设施平安，工作人员必须遵守实验动物管理制度和操作规程。
14、工作(gōngzuò)中使用的酸、碱要放在指定的位置，须有专人保管，操作时必须按规定着装。
15、高压灭菌工作(gōngzuò)必须按有关规定操作。
16、对违反规章制度(ɡuī zhānɡ zhì dù)造成损失的追究当事人的责任。
实验动物屏障环境卫生与消毒管理规范
实验动物屏障环境卫生与消毒管理规范
目的：保障屏障系统安全运行，维持系统洁净度，防止微生物污染范围：适用于动物实验屏障环境的卫生、消毒操作
责任人：饲养管理人员，实验人员
内容：
1.应保持屏障系统内地面、墙壁、顶棚、室内一切设施洁净无尘，无
饲料、垫料碎屑。
2.每天擦拭地面一次，每周擦拭墙壁两次，每两周擦拭顶棚一次。
3.空气消毒：每天工作结束，开启紫外线灯30min，换垫料后立即对
动物房的空气进行喷雾消毒。
4.换垫料后用灭菌消毒液擦拭饲养架、和动物房的各种器具、设施。
清洗水盆，所用清扫用具以消毒液清洗后放置指定位置。
5.饲育区内各类饲育用具、物品要摆放整齐，并保持清洁，与饲育动
物无关的物品不得带入或者存放在饲育区内。
6.每天工作结束，将动物房的垃圾袋扎好，经传递窗送出。
7.每日工作结束人员退出后,开启走廊、更衣室紫外线灯照射30分
钟；每次实验结束后，所用实验室须经紫外线照射30分钟；每次购入饲料、垫料及其他大批物品传递进入屏障系统后，清洁物品储藏室须经紫外线照射30分钟。
8.每日脱下的隔离衣均挂在指定位置，经紫外线照射30分钟重复使
用，每周全部更换洗消一次；使用后的手套放入指定容器，洗消
后备用。
9.专用消毒液:过氧乙酸(0.5％-1％喷雾)，百毒杀或消毒灵(0.2％—
05％空气喷雾，0.1％擦拭)，新洁尔灭(0.1％表面擦拭、浸泡)，次氯酸钠(1％空气喷雾、浸泡)，定期交叉使用。
常用物品消毒灭菌方法
常用物品消毒灭菌方法一、手术器械及其相关物品1、手术器械含口腔科压力蒸汽灭菌2%戊二醛溶液浸泡10小时无菌水冲洗干净后使用。
逐步取消在科室清洗由供应室集中清洗。
2、锐利器械含刀、刀片、穿刺针等压力蒸汽灭菌严禁戊二醛浸泡灭菌。
3、缝线压力蒸汽灭菌严禁戊二醛浸泡灭菌。
4、弯盘、换药碗压力蒸汽灭菌由供应室集中清洗。
二、器械类杯钳罐压力蒸汽灭菌有消毒液的每周更换2次干式保存每班更换、有污染时随时更换。
三、玻璃类1、体温表含氯消毒液500mg/L盖盒浸泡30分钟冷开水冲洗干净纱布擦干。
冷开水、消毒液每日更换。
2、盛消毒液的玻璃瓶压力蒸汽灭菌每周灭菌2次。
3、吸引瓶流动水冲洗晾干用含氯消毒液500mg/L浸泡30分钟清水冲洗晾干使用一次性引流袋。
四、塑料类及橡胶类1、超声雾化器、呼吸机、化瓶流动水清洗、干燥含氯消毒液500mg/L浸泡10-15分钟后流动水冲洗(一次性含嘴)。
2、橡皮气圈、橡皮中单流动水清洗、晾干用含氯消毒液250mg/L擦拭。
3、血压计、袖带、听诊器袖带清洗、晾干必要时用75%乙醇或含氯消毒液250mg/L擦拭。
五、环境与物表1、水龙头、水池保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L 擦拭有污染时随时消毒。
2、地面清扫必要时含氯消毒液250mg/L拖地有污染时随时消毒拖地。
3、物体表面床头柜、椅子等每床单元一条毛巾擦拭保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭毛巾用后含氯消毒液500mg/L泡30分钟有污染时随时消毒液擦拭病人出院应消毒。
4、门窗、墙壁、桌椅、楼梯扶手保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭有污染时随时消毒擦拭。
六、空气及空调1、空气开窗通风紫外线照射30分钟。
2、空调滤网定期清洗七、布类床单、被套及枕套定期更换清洗枕芯、棉絮及床垫必要时使用床单元消毒器消毒30分钟。
八、车辆各种推车保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭有污染时及时消毒清洁推车与污染推车分开或铺治疗巾后再放清洁物品。
3.实验动物环境与设施
第三章 实验动物环境与设 施
2015-6-5
1
着重掌握 1. 环境因素对实验动物和动物实验有怎样的 影响。 2. 为生产合格（标准化）的试验动物，进行 规范化的动物实验，最终得到准确、可靠的试验结 果，要求怎样的设施作为保障体系和支撑条件。
2015-6-5
2
第一节 环境因素对实验动物的影响
注意:
新引进动物应在单独房间，单独笼架饲养一 段时间,待观察健康无病后再移入其它房间 不得向屏障动物房内传入不符合相应的实验 动物生产许可证的动物!
实验用品和器具进出清洁级屏 障动物房
用70%酒精或5 %碘伏仔细擦拭消毒物品 表面紫外灯照射15min 或直接喷雾消毒 手术器械可经高压消毒或经消毒液中浸泡 后在紫外灯下照射15min传入 小型仪器经灭菌通道喷雾消毒后传入
4、光照 工作照度150～300lx 动物照度15～20lx 明暗交替时间12/12或10/14h 照度对动物的生殖生理和行为活动有较大 影响 强光长时间照射引起角膜退行性变化
5、噪声 60dB以下音域，人1000~2000Hz,小鼠 1000~5000Hz。 引起小鼠听力性痉挛。 对生殖影响较大，如豚鼠流产。 引起动物呼吸、心跳、血压、肾上腺皮质激 素等生理指标变化。
表4-1
不同环境温度时戊巴比妥钠（95mg/kg） 腹腔注射导致大鼠死亡率比较
给药动物数(只) 死亡动物数(只) 死亡率(%)
环境温度(℃)
12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32
20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20
20 20 20 10 10 10 10 7 6 11 16
6、空气洁净状况 气体污染， 氨14mg/m3 有害气体，氨、甲基硫醇、硫化氢等 颗粒污染，100级，10000级，100000级 美国宇航局标准，每立方英尺空气中直径0.5微米 以上粒子的个数。 粉尘颗粒，是变应原，还是微生物的主要载体。
常用6种灭菌方法有哪些,附适用范围
常用6种灭菌方法有哪些，附适用范围常用6种灭菌方法有干热灭菌法、湿热灭菌法、间歇灭菌法、辐射灭菌法、过滤除菌法和化学试剂灭菌法。
干热灭菌法是指在干燥环境（比如火焰或者干热空气）进行灭菌的技术。
湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法。
间歇灭菌法是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物的方法。
一、常用6种灭菌方法有哪些1、干热灭菌法：是指在干燥环境（比如火焰或者干热空气）进行灭菌的技术。
一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法，适用于干燥粉末、凡士林、油脂等。
火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法；干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。
2、湿热灭菌法：是指用饱和水蒸气、沸水或者流通蒸汽进行灭菌的方法，湿热灭菌法是以高温高压水蒸气为介质，因为蒸汽的潜热大，而且穿透力强，容易使蛋白质变性或者凝固，从而导致微生物的死亡。
该方法的灭菌效率比干热灭菌法高，而且还是药物制剂生产过程中比较常用的灭菌方法。
3、间歇灭菌法：是指利用反复多次的流通蒸汽加热，从而杀灭所有微生物。
间歇灭菌一般在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。
这种方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100°C以上的温度下处理比较长时间会被破坏，用间歇灭菌法可以起到杀菌作用，又可以让被处理的物质免遭破坏。
4、辐射灭菌法：是利用电离辐射杀死大多数物质上的微生物的一种有效方法，它们都可以通过特定的方式控制微生物生长或者杀死微生物，比如微波可以通过热产生杀死微生物的作用，该方法可以在常温或者低温下进行，处理过程食品温升很小，这样有利于维持食品的质量；而且辐射过的食品不会留下任何残留物。
5、过滤除菌法：是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，从而达到无菌目的，过滤除菌的原理有惯性撞击截留作用、拦截截留作用、布朗扩散截留作用等。
6、化学试剂灭菌法：是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法，该方法可以分为气体灭菌法和液体灭菌法，气体灭菌法是指采用气态杀菌剂进行灭菌的方法，比如臭氧、甲醛等；液体灭菌法是指采用杀菌剂容易如进行消毒的方法。
常用物品消毒灭菌方法
常用物品消毒灭菌方法一、手术器械及其相关物品1、手术器械含口腔科压力蒸汽灭菌2%戊二醛溶液浸泡10小时无菌水冲洗干净后使用。
逐步取消在科室清洗由供应室集中清洗。
2、锐利器械含刀、刀片、穿刺针等压力蒸汽灭菌严禁戊二醛浸泡灭菌。
3、缝线压力蒸汽灭菌严禁戊二醛浸泡灭菌。
4、弯盘、换药碗压力蒸汽灭菌由供应室集中清洗。
二、器械类杯钳罐压力蒸汽灭菌有消毒液的每周更换2次干式保存每班更换、有污染时随时更换。
三、玻璃类1、体温表含氯消毒液500mg/L盖盒浸泡30分钟冷开水冲洗干净纱布擦干。
冷开水、消毒液每日更换。
2、盛消毒液的玻璃瓶压力蒸汽灭菌每周灭菌2次。
3、吸引瓶流动水冲洗晾干用含氯消毒液500mg/L浸泡30分钟清水冲洗晾干使用一次性引流袋。
四、塑料类及橡胶类1、超声雾化器、呼吸机、化瓶流动水清洗、枯燥含氯消毒液500mg/L浸泡10-15分钟后流动水冲洗(一次性含嘴)。
2、橡皮气圈、橡皮中单流动水清洗、晾干用含氯消毒液250mg/L擦拭。
3、血压计、袖带、听诊器袖带清洗、晾干必要时用75%乙醇或含氯消毒液250mg/L擦拭。
五、环境与物表1、水龙头、水池保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L 擦拭有污染时随时消毒。
2、地面清扫必要时含氯消毒液250mg/L拖地有污染时随时消毒拖地。
3、物体外表床头柜、椅子等每床单元一条毛巾擦拭保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭毛巾用后含氯消毒液500mg/L泡30分钟有污染时随时消毒液擦拭病人出院应消毒。
4、门窗、墙壁、桌椅、楼梯扶手保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭有污染时随时消毒擦拭。
六、空气及空调1、空气开窗通风紫外线照射30分钟。
2、空调滤网定期清洗七、布类床单、被套及枕套定期更换清洗枕芯、棉絮及床垫必要时使用床单元消毒器消毒30分钟。
八、车辆各种推车保持清洁必要时含氯消毒液250mg/L擦拭有污染时及时消毒清洁推车与污染推车分开或铺治疗巾后再放清洁物品。
实验动物屏障设施常用的6种消毒剂
Dec.2019,39⑹实验动物与比较医学Laboratory Animal and Comparative Medicine489 doi:10.3969/j.issn.1674-5817.2019.06.012•经验交流实验动物屏障设施常用的6种消毒剂潘明明，陈枉枉，王艳，王媾，周正宇(苏州大学实验动物中心，苏州215123)［摘要］控制实验动物屏障设施病原微生物不仅关乎实验动物质量和实验结果的可信度，更关系到人员健康和环境安全。
在实验动物屏障设施的运行过程中，人员和物品的进出等可能带入病原微生物，因此屏障设施的日常卫生消毒至关重要。
本文选取实验动物屏障设施中常用的6种消毒剂，对其性质、作用机理、奉性、职业健康安全和应用效果等方面进行综述，为实验 动物屏障设施选取合理有效的消毒剂提供参考。
［关键词］实验动物；屏障设施；病原微生物；消毒剂［中图分类号］Q95-33［文献标志码］A［文章编号］1674-5817(2019)06-0489-06实验动物屏障设施対病原微生物都有严格的控制要求，屏障环境中一口侵入致病性微生物，在适宜条件下病原微生物的快速增殖可能造成实验动物的感染、发病英至死亡。
病原微生物还会对动物实验结果产生干扰，戻至导致实验失败。
实验动物感染人兽共患病还会威胁到人员的健康，因此屏障设施的日常卫生消毒显得尤为重要。
消毒剂按其杀菌效果及杀菌范围可分为低效、中效和高效消毒剂。
其中低效消毒剂对多数细菌的繁殖体、部分病毒、以及部分真菌等有消毒效果；中效消毒剂可以杀灭更多种类的病原微生物，但对细菌芽抱作用较羞；高效消毒剂除中效消毒剂的杀菌范围外，対细菌的芽抱、亲水类病毒等也具有较好的杀灭效果⑴。
本文选取了屏障设施常用的6种消毒剂：过氧乙酸、过氧化氢、百毒杀、新洁尔灭、微酸性电解水、过硫酸氢钾复合盐，对其性质、作用机理、毒性、职业健康安全、应用效果等方面进行综述。
［收稿日期］2019-07-01［作者简介］潘明明(1989-),男，硕上，助理实验师，主要从事实验动物兽医基础研究。
消毒灭菌技术,动物细胞试验
消毒与灭菌技术基本概念灭菌：指用某种方法杀死一切微生物的营养体，芽胞及孢子的措施。
灭菌后的物体内不再有可存活的微生物。
消毒：指用某种方法杀死所有病原微生物的措施，具有消毒作用的化学物质称为消毒剂，一般消毒剂在常用浓度下只能杀死微生物的营养体，对芽胞无杀灭作用。
所以说消毒实际上是部分灭菌。
二，物理方法1.干热灭菌法它包括灼烧法和烘箱热空气法。
灼烧法：微生物接种工具如接种环，接种针或其它金属用具等，可直接在酒精灯火焰上烧至红热灭菌，接种过程中试管或三角瓶口等，也可通过火焰灭菌及污染物品，实验动物尸体等废弃物的处理。
烘箱热空气法：不仅可以用于灭菌，也可用于器皿等材料的烘干。
由于热空气穿透力差，加之微生物蛋白质在干燥条件下，不易凝固变性，故热空气灭菌时温度一般要求掌握在160`C，维持2h，（注意不要塞的太满，温度不可超过170`C）可用于玻璃器皿（吸管，平板等），金属用具的灭菌。
液体培养基，橡胶制品，塑料制品等不能用此灭菌。
2.湿热灭菌法在同样温度下，湿热灭菌效果比干热好。
其主要原因是细胞原生质在含水量高的情况下更易变性凝固，而且蒸汽的穿透力强。
煮沸消毒法：物品在水中煮沸15min以上，可杀灭细菌的所有营养细胞和一部分芽胞。
如煮沸时间延长，并在水中加1%碳酸钠或2%~5%石碳酸，则效果更好。
这种方法用于注射器，解剖用具等的消毒，器具要用纱布包着。
高压蒸汽灭菌法：是湿热灭菌方法中效果最好的。
高压蒸汽灭菌不是由于压力的作用而是由于蒸汽的高温致死微生物。
一般在121`C下处理15~30min，可达灭菌的目的。
此法适用于各种耐热物品的灭菌，如一般培养基，生理盐水等各种溶液，玻璃器皿，工作服等。
对体积大，热传导性较差的物品，加热时间需延长。
含糖培养基在高压灭菌时，因糖分易遭到破坏，通常在112.6`C，维持15~30 min用来灭菌。
高压蒸汽灭菌锅排冷气法：<1>缓慢排气法：即开始加热灭菌时便打开排气阀门，随灭菌锅内温度逐渐上升，锅内的冷空气便逐渐排出。
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（5）漂白粉类：84消毒类是一种广谱、高效、去污力强的新型消毒剂，能快速杀灭甲、乙型肝炎病毒、细菌芽孢等各类致病菌。1：200用于动物饲养室的空气消毒，用量为10ml/m3喷雾；笼具、门窗等物体表面的擦拭消毒；抹布、拖把浸泡15min。1：500可用于饲具、青饲料的浸泡消毒，时间为5min。
（6）二氧化氯：稳定性二氧化氯是在二氧化氯水溶液中添加碳酸钠、硼酸钠等予以稳定。通常用柠檬酸活化，在酸性条件下使用。稳定性二氧化氯能广谱且快速地杀灭微生物，无毒无害，无残留，不污染环境，是一种性能优良的安全高效消毒剂。原液用水稀释20倍可用于笼具、地面消毒。
（11）新洁尔灭：化学名为十二烷基苯甲基溴化铵，又名溴苄烷铵。剂型为胶体和溶液含1%、5%、10%。0.1%用于皮肤消毒和器械消毒；0.02%消毒伤口和粘膜；对污染物品表面的消毒，可用0.1%~0.5%浓度的溶液喷洒、浸泡、擦抹处理，作用10~60min；还可用于饲具等的消毒。
注意事项：不能与肥皂、洗涤剂和盐类接触；使用1~2周后应重新配制。
② 常压蒸汽消毒：又称为流通蒸汽消毒，是指在1atm（1.013×105Pa）下，用100℃的水蒸汽进行消毒。适用于笼具、食物等不耐高热的物品的消毒。
③ 高压蒸汽灭菌：适用于大多数耐热物品，包括：金属器械、笼具、饲具、垫料、饮水瓶、饮水、饲料等物品的消毒。
（3）紫外线辐射消毒：适用于空气、饮水及污染物体表面的消毒。
（7）乙醇：又称酒精。75%乙醇用于皮肤消毒；70~75%乙醇常用于物体表面的消毒，如工作台面、推车表面等，时间应在3min以上。
（8）苯酚：即碳酸。3%~5%的苯酚水溶液浸泡、喷洒或擦拭污染物品表面，作用时间30~60min。若皮肤不慎接触到浓苯酚，可用乙醇擦拭去除。
（9）煤酚皂溶液：又称来苏尔。1%~5%煤酚皂水溶液浸泡、喷洒或擦抹污染物表面，作用时间30~60min；1%~2%水溶液用于皮肤消毒，浸泡3~5min；对排泄物消毒用5%~10%的溶液搅拌均匀浸泡。
（4）电离辐射灭菌：是指用γ射线、X射线和离子辐射照射物品，杀死其中的微生物的冷灭菌方法。常用于对手术器械、仪器以及食物的消毒灭菌。
（5）过滤除菌：一般用于液体和气体的消毒，而不用于对物品的灭菌处理。
① 液体过滤除菌：用于不耐热或不能用化学方法消毒的液体制剂、血清制品等。
② 空气过滤除菌：屏障系统（屏障系统的空气经粗、中、高效过滤）、动物运输盒等。
（12）高锰酸钾：0.1%水溶液用于皮肤消毒；0.01%~0.02水溶液用于粘膜消毒；0.1%浓度可用于青草饲料的消毒，作用时间10~60min；对污染物体表面的消毒浓度为0.1%~2%，作用时间为10~60min；还可加入福尔马林中产生甲醛气体进行熏蒸消毒。
注意事项：储存于密闭容器中，阴凉干燥处保存，不能与有机物、还原剂、易燃物、硫酸、硝酸、有机酸等接触；具有强腐蚀性，不可直接接触皮肤粘膜。
2. 化学消毒法
常用化学消毒方法包括：药物液体浸泡、喷洒消毒，蒸汽或气体熏蒸消毒。常用的消毒药品及方法介绍如下：
（1）甲醛：常用于液体浸泡消毒和甲醛气体熏蒸消毒。
① 杀菌作用：8%甲醛水溶液作用6~24h可杀灭芽孢；5%甲醛水溶液作用30min可破坏肉毒杆菌毒素和葡萄球菌肠毒素。
② 杀真菌作用：5%甲醛水溶液作用10min，可以杀灭球孢子菌、组织胞浆菌和芽生菌。
实验动物环境设施常用消毒灭菌方法
1. 物理消毒法
（1）干热消毒：包括焚烧、烧灼、干烤等几种方法。焚烧适用于动物尸体的处理，尤其是带毒的动物尸体，污染的垃圾、垫料等。烧灼常用于耐热器材，如金属器械、不锈钢笼具、笼架等。干烤用于玻璃制品、金属材料、陶瓷等消毒。
（2）湿热消毒：主要有以下几种：
① 煮沸消毒：这种方法简单易行、经济实用且效果可靠。适用于金属器械、玻璃制品、棉织品、饮水瓶、饮水及笼具的消毒。
（3）环氧乙烷：又称氧化乙烯。其气体和液体均有杀菌作用，但多用于气体消毒。常用于外科手术器械等的消毒灭菌；还可用于棉制品、电子仪器、塑料制品、橡胶制品等的消毒灭菌；也可用于日常的卫生防疫消毒。环氧乙烷液体溅在皮肤或眼内应立即用清水或3%硼酸溶液反复冲洗，并给予局部用药。
（4）过氧乙酸：是一种广谱、高效、速效、廉价的消毒剂。稀释至0.2%时才能用于皮肤粘膜消毒；0.5%溶液浸泡笼具、鼠盒、饮水瓶、工作衣、帽鞋等10~30分钟；密闭房屋空间用浓度为15%溶液（7ml/m3空间）熏蒸消毒120min，或用2%溶液（8ml/m3空间）喷雾消毒，保持时间为30~60min，然后打开门窗通风；0.2%~0.5%溶液浸泡消毒青饲料，再用流动的清水冲洗；用0.2~0.5%溶液喷雾或擦洗消毒笼架、恒温恒湿机、进风粗效滤材、通风管道外壁、门窗、墙壁、地面。
③ 灭活病毒：甲醛溶液广泛用于病毒疫苗的制备，应用浓度一般为0.23~0.4%。甲醛对绿脓杆菌噬菌体、脊髓灰质炎病毒、鹦鹉热衣原体、天花及甲型流感病毒等都有较好的杀灭作用。
④ 注意事项：刺激性大，使用时注意防护；在9℃以下保存。
（2）戊二醛：常用浓度为2%，用0.3%碳酸氢钠或碳酸钠调节其pH值为7.5~8.5时，可达最强杀菌效果。常用于医疗器械的冷灭菌，内窥镜、生物制品的消毒灭菌，环境消毒以及水处理的杀菌灭藻。
（10）洗必泰：又名氯己定，化学名为双氯苯双胍己烷。是一种常用的皮肤粘膜消毒剂。0.5%洗必泰乙醇溶液用于外科手术前擦手及手术前皮肤消物体表面的喷洒、浸泡、擦拭消毒；0.5%的水溶液可用于伤口创面的冲洗消毒及各种外科创面的消毒处理。
注意事项：不能与肥皂及其他拮抗物质同用。