实验五血清尿素氮的测定

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血清尿素的测定标准操作规程

血清尿素的测定标准操作规程【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法，了解其意义。

【原理】血清尿素（Urea）是蛋白质的正常代谢产物。

它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。

肾性血清尿素含量增加，提示肾小球损伤。

是研究药物肾毒性的重要指标之一。

【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水【动物】家兔2只【方法】取家兔2只，1只注射氯化高汞5ml/kg（0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg)，另1只注射等量的生理盐水。

48小时后，从家兔耳静脉取血1ml，制取血清，按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。

【结果】记录2只家兔血清尿素含量，比较并分析其差别。

附血清尿素(Urea)测定方法【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热，缩合生成色素原二嗪化合物。

因二乙酰不稳定，不宜直接加入，可由化学反应生成。

通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用，产生乙二酰。

二乙酰和尿素反应，缩合生成红色的二嗪。

根据颜色深浅确定尿素含量的多少。

【试剂】(1)酸性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。

冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。

溶解后用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中冰箱保存，可稳定6个月。

(2)二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，再用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中，贮放冰箱内可保存半年。

(3)尿素标准贮存液（100mmol/L）:称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g，溶解于蒸馏水中，并稀释至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内可稳定半年。

(4)尿素标准液应用液(5mmol/L)：取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.【操作】按表T4-1进行混匀后，置沸水中加热12分钟，置冷水中冷却5分钟后，用分光光度计在波长540nm，以空白管调至零点。

比色读取标准管及测定管的吸光度。

血、尿液尿素氮(BUN)测定作业指导书

血、尿液尿素氮（BUN）测定作业指导书1.实验原理Vitros BUN/UREA试剂是一种干燥，多涂层的，在透明的聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。

将一滴患者样品滴于干片上，分布层会使之均匀地分布。

水和非蛋白质成份进入下面的试剂层，与尿素酶反应生成氨。

半透膜只允许氨进入呈色反应层，与指示剂发生反应。

经过一段固定的孵育时间后，通过测定呈色剂的反射强度可间接求出尿素氮的含量。

测定方式：比色法波长：670nm测试时间和温度：37℃约５分钟反应过程：尿素酶非蛋白质成份＋水—————→氨+ 二氧化碳氨＋氨指示剂—————→呈色剂2. 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆。

定时收集的，稀释后的尿样。

2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品特别要注意的是：血清；肝素锂/钠和EDTA抗凝血浆；不要用氟化钠作防腐剂，因为氟会抑制尿素酶。

样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。

处理样品时要将其当成生物污染品。

2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：不能使用以下防腐剂：冰醋酸，浓盐酸，硼酸，硼粉或甲酸钠硼酸，样品在测试前要冷藏。

测试前将1份样品加20 份试剂级别的水进行稀释。

将测试结果乘以21，就得到原始样品中尿素氮的浓度。

冷藏的样品不能立即测试。

处理样品时要将其当成生物污染品。

3. 标本的存放：血清、血浆室温下最多1天；4～8℃冷藏最多5天；-18℃冷冻保存可长达6个月。

尿液样品在测试前要冷藏。

4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。

5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。

6. 试验材料：6.1测试BUN所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit1；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。

xx厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。

血清尿素氮的测定[方案]

血清尿素氮的测定【目的要求】1.了解血清尿素氮测定的方法及临床意义。

2.复习尿素的生成机理及其意义。

【实验原理】血清（或血浆）中的尿素，在尿素氮试剂的酸性环境中与二乙酰-肟（DAM）共沸后，可缩合成一红色化合物，称为fearon反应。

其颜色的深浅与血清（或血浆）中尿素的含量成正比，与同样处理的尿素氮标准液比色，即可测算出血清（或血浆）中尿素氮的含量。

【实验材料】1.器材刻度吸管（0.1ml、2ml、10ml）恒温水浴箱分光光度计2.试剂（1）待测血浆（2）尿素氮试剂（3）二乙酰-肟试剂（4）尿素氮标准液【操作步骤】取试管三支按下表操作1：4稀释血清（或0.1血浆）尿素氮标准液0.1（0.02mg/ml）蒸馏水0.1二乙酰-肟0.5 0.5 0.5尿素氮试剂 5.0 5.0 5.0 混匀，置沸水浴中加热15min，立即用自来水冷却5分钟。

分光光度计选用540nm波长，以空白管调零点，读取各管吸光度。

计算及结果分析尿素（mg%）×尿素氮标准液浓度*5(mg/ml；mg/100ml)【注意事项】1. 此法灵敏度高，用量极微（一般只需0.02ml血清即可）。

本实验是先将血清用生理水以1：4加以稀释再取0.1ml，故最后计算时，应乘以稀释倍数“5”2. 试剂中加入硫胺脲和镉离子，可增进显色强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现象（小于5%/h）。

3. 此法操作简单，特异性强，不受其他非蛋白质含氮化合物如尿酸、肌酸等影响，但应控制好实验条件。

4. 吸管必须校正，使用时务必注意清洁干净，加量务必准确。

5.尿液中的尿素氮也可用此法进行测定。

由于尿液中尿素氮含量高，标本需用蒸馏水以1:50稀释。

如果呈色后吸光度仍超过本法的线性范围，还需将尿液再稀释，重新测定。

【思考题】。

测定血清尿素的实验报告

一、实验目的1. 掌握血清尿素测定的原理和方法。

2. 熟悉二乙酰-肟法测定血清尿素氮的实验操作。

3. 了解实验中可能出现的误差及其处理方法。

二、实验原理血清尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）是血液中尿素氮的浓度，是反映肾功能的重要指标。

尿素氮是蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏产生，通过肾脏排泄。

二乙酰-肟法是一种常用的测定血清尿素氮的方法，其原理如下：在酸性反应环境中加热，尿素与二乙酰缩合，生成色素原二嗪，称为Feorin反应。

因为二乙酰不稳定，所以通常由反应系统中二乙酰-肟与强酸作用，产生二乙酰，二乙酰与尿素反应，综合生成红色的二嗪。

其颜色的深浅与血清中尿素含量成正比。

三、实验材料1. 试剂：- 碱性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%H3PO466ml冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉2g溶解后加蒸馏水稀释至1升，置棕色瓶放冰箱保存，可稳定半年。

- 二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml溶解后，再用蒸馏水稀释至1升置棕色瓶中，贮存放于冰箱内可保存半年不变。

- 尿素标准贮存液（100mmol/L）：称取干燥纯尿素（MW60.06）0.6g，溶解于水中并稀释至100毫升，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内稳定六个月。

- 尿素标准应用液（5mmol/L）：取5.0ml贮存液用去氨蒸馏水稀释至100ml。

2. 仪器：- 分光光度计- 离心机- 实验室试管四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：- 取5支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。

- 向每支试管中加入2.0ml碱性试剂，混匀。

- 将试管置于沸水中加热5分钟，取出冷却至室温。

- 以540nm波长，1cm光程，测定各管吸光度。

- 以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定：- 取2支试管，分别加入0.5ml血清和0.5ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。

血清尿素氮测定的原理方法及临床意义

血清尿素氮测定的原理方法及临床意义
血清尿素氮（BUN）是反映肾脏排泄功能的一个重要指标，也是评价肾脏疾病和代谢紊乱的标准检查之一。

BUN的原理方法：
BUN是指血液中尿素的浓度，它的检测是通过测定血液中尿素的含量来完成的。

尿素
是蛋白质代谢的末端产物，经由肝脏转化生成后再经过肾脏排泄。

正常情况下，尿素在肾
小球滤过后主要在肾小管内被再吸收，防止其大量丢失。

血中尿素的浓度，受到肝脏合成、尿素的经肾脏的再吸收、肾脏排泄和肾脏灌注量的影响。

BUN的测定方法包括酶法、光度法、电化学法、液体色谱法等，其中光度法是目前应用最广泛的方法之一。

临床意义：
BUN的高低可以反映肾脏功能是否受到影响。

一般来说，BUN增高是肾功能受损的重要指标，包括急性肾损伤、肾衰竭、肾小球肾炎、肾盂肾炎、泌尿系梗阻等病态情况。

此外，由于肝脏是尿素生成最重要的器官，肝脏疾病如肝炎、肝硬化等也会影响BUN的测定结果。

对于临床医生而言，BUN的测定结果可以作为诊断和治疗的重要线索，也可以用来监测肾
脏疾病和代谢紊乱的治疗效果。

需要注意的是，BUN的测定结果还应考虑个体差异、摄入蛋白质的数量和质量等因素
的影响。

在诊断或监测疾病的过程中，应结合临床病史、身体检查和其他相关检查结果，
综合分析判断。

血清尿素浓度实验报告

1. 熟悉血清尿素浓度测定的原理和方法。

2. 掌握生物化学实验的基本操作技能。

3. 了解血清尿素浓度与肾功能、蛋白质代谢的关系。

二、实验原理尿素是人体蛋白质代谢的终末产物，主要由肝脏合成，通过血液运输至肾脏排泄。

血清尿素浓度可以反映肾脏的滤过功能。

本实验采用二乙酰法测定血清尿素浓度，其原理是：在强酸条件下，二乙酰与尿素缩合成红色的二甲基氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。

三、实验材料1. 血清标本：收集患者空腹静脉血，分离血清。

2. 试剂：二乙酰试剂、硫酸、生理盐水、标准尿素溶液等。

3. 仪器：分光光度计、移液器、试管等。

四、实验步骤1. 准备工作：将试剂、仪器等实验用品准备齐全，并校准分光光度计。

2. 标准曲线制作：取一系列标准尿素溶液，分别加入二乙酰试剂，室温反应一定时间后，用分光光度计测定吸光度。

以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品测定：取血清标本，加入二乙酰试剂，室温反应一定时间后，用分光光度计测定吸光度。

4. 计算血清尿素浓度：根据标准曲线，查得样品的吸光度对应的尿素浓度，即为血清尿素浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线：制作的标准曲线线性良好，相关系数R²大于0.99。

2. 样品测定：按照实验步骤对血清标本进行测定，得到吸光度值。

3. 血清尿素浓度计算：根据标准曲线，查得样品的吸光度对应的尿素浓度。

1. 实验过程中，要注意避免试剂污染，保证实验结果的准确性。

2. 标准曲线的制作要保证足够的浓度梯度，以便在测定过程中有足够的准确度。

3. 血清尿素浓度受多种因素影响，如肾功能、蛋白质摄入量、代谢分解情况等。

本实验测定的血清尿素浓度仅供参考，具体病情需结合临床综合判断。

七、实验结论通过本次实验，我们成功掌握了血清尿素浓度测定的原理和方法，了解了血清尿素浓度与肾功能、蛋白质代谢的关系。

在实验过程中，我们要严格遵守实验操作规程，确保实验结果的准确性。

八、实验建议1. 在实验过程中，加强实验室安全管理，防止意外事故发生。

测血清尿素含量实验报告

一、实验目的1. 掌握血清尿素含量测定的原理和方法；2. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能；3. 了解血清尿素在临床医学中的意义。

二、实验原理血清尿素含量测定采用二乙酰-肟法，其原理如下：在强酸条件下，二乙酰与尿素发生缩合反应，生成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物。

该化合物的颜色深浅与尿素的含量成正比。

通过比色法，可以计算出血清中尿素的含量。

三、实验材料1. 试剂：二乙酰-肟试剂、血清、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等；2. 仪器：紫外可见分光光度计、移液器、试管、试管架等。

四、实验步骤1. 标准曲线绘制：（1）取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml的标准尿素溶液；（2）向各试管加入2ml的二乙酰-肟试剂，充分混匀；（3）将试管置于60℃水浴中反应30分钟；（4）取出试管，用蒸馏水定容至5ml；（5）以蒸馏水为空白，在波长540nm处测定各管的光密度（OD）；（6）以尿素浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 血清尿素含量测定：（1）取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml的血清样本；（2）按照标准曲线绘制步骤中的操作，进行反应和测定；（3）以蒸馏水为空白，在波长540nm处测定各管的光密度（OD）；（4）根据标准曲线，计算血清中尿素的含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：绘制标准曲线，结果显示尿素浓度与光密度呈线性关系，相关系数R²=0.998。

2. 血清尿素含量测定：根据标准曲线，计算各血清样本中尿素的含量，结果如下：样本1：尿素含量为5.2mmol/L；样本2：尿素含量为6.8mmol/L；样本3：尿素含量为7.4mmol/L；样本4：尿素含量为8.2mmol/L；样本5：尿素含量为9.0mmol/L；样本6：尿素含量为10.0mmol/L。

六、实验讨论1. 实验过程中，二乙酰-肟试剂的浓度、反应时间、温度等因素对实验结果有较大影响，应严格控制实验条件，以保证结果的准确性。

血清尿素尿素氮(UreaBUN)测定标准操作程序SOP文件

POINT(2) [ 25 ]
CALIBRATION METHOD [ LINEAR ]
POINT(3) [ 0 ]
CALIBRATION POINT [ 2 ]
POINT(4) [ 0 ]
SPAN POINT [ 2 ]
WAVELENGTH(PRIMARY) [ 340 ]
DUPLICATE LIMIT(%) [ 6 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ -22 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
SE(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 20000 ]
R.VOLUME(R3) [ 110 ]
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
9.2在测定过程中，各种器材和蒸馏水应无氨离子污染，否则结果偏高。GLDH的测定会在反应杯中残留氨，会干扰到UREA/BUN的检测。因此不能将此两个项目安装在一起。
9.3血氨升高可使尿素结果升高。尿液中，内生得氨也会干扰UREA/BUN的检测。在酸性条件下，检测结果也会偏高。
9.4仅应用于体外诊断。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定

血清尿素氮测定的原理

血清尿素氮测定的原理嘿，朋友们！今天咱们来聊一聊血清尿素氮测定这个事儿。

你可能会想，这血清尿素氮测定是啥玩意儿啊？为啥要测定它呢？先别急，听我慢慢给你说。

你看啊，咱们人体就像一个超级复杂又神奇的小宇宙。

身体里的各种物质就像小宇宙里的各个星球，都有着自己独特的作用和运行轨迹。

血清尿素氮呢，它就是这个小宇宙里比较重要的一个“小星球”。

那血清尿素氮是怎么来的呢？这就和咱们吃的东西有关啦。

咱们吃进去蛋白质，就像给身体这个大工厂送进去了原材料。

这些蛋白质经过身体里各种“小工人”（酶啊之类的物质）的加工，在肝脏这个大车间里就会产生尿素。

这尿素啊，就像是加工后的产品，会随着血液循环这个“运输大道”跑到肾脏那里去。

肾脏呢，就像一个超级精密的过滤器，它会把尿素过滤出来，然后排出体外。

这血清尿素氮其实就是血液里尿素所含的氮元素的量。

现在咱们就来说说这血清尿素氮测定的原理。

这就好比你要数清楚一个仓库里某种货物的数量一样。

不过，这个仓库就是咱们的血液，货物就是尿素氮。

目前啊，测定血清尿素氮有好几种方法呢。

有一种方法叫二乙酰一肟法。

这个方法可有趣了。

你可以把它想象成一场化学反应的小聚会。

在这个聚会里，二乙酰一肟就像一个超级活跃的小嘉宾，它会和尿素氮来一场特殊的“互动”。

在酸性的环境下，就像给这个聚会提供了一个特定的氛围一样，二乙酰一肟和尿素氮会发生反应，生成一种红色的化合物。

这红色的化合物就像聚会后出现的一个新标志一样。

然后呢，我们就可以通过比色的方法，就像比较颜色的深浅来判断这个红色化合物的多少，从而得出血清尿素氮的含量。

我给你打个比方啊，就像你看颜料混合后的颜色深浅来判断颜料量的多少一样。

这时候你可能会问，那这个方法准不准呢？其实啊，只要按照正确的操作流程来，这个方法还是挺靠谱的呢。

还有一种方法叫脲酶法。

这个脲酶啊，它可是尿素的“克星”。

脲酶就像一把专门开尿素这个锁的钥匙。

当脲酶遇到尿素的时候，就会把尿素分解掉。

这个过程就像拆积木一样，脲酶把尿素这个“大积木”拆成了氨和二氧化碳。

05血清尿素测定

【注意事项】

1 . 测定标本要求空腹抽血。 2. 试剂测定主波长可在500nm～600nm之间任意选择，如以550nm为主波长可获得最高灵敏度，如以600nm为测定主波长可有降低标本中浓度。 3．试剂与样品的用量可按其比例放大缩小，计算公式不变。
【实验用品】
【器材】试管、微量加样器、恒温水浴箱、离心机、 721E型分光光度计等
（试剂）
试剂 1：脲酶试剂 :6000u/L,稳定剂适量试剂 2：磷酸盐溶液：PH8.0，0.1mol/L磷酸盐. 试剂 3：显色剂|：亚硝基铁氰化钠、苯酚10ml/L 试剂 4：显色剂‖：次氯酸钠40ml/L
脲酶-波氏比色法测定血液尿素氮操作步骤
加入物
血清标本
尿素标准液
测定管（U）标准管（S）
空白管（B）－－
10 (ul)
－
－
10 (ul)
－
蒸馏水
酶测定液
－
10 (ul)
1000 (ul)ຫໍສະໝຸດ 1000 (ul) 1000 (ul)
1000 (ul) 1000 (ul) 1000 (ul)
临床意义：
病理因素：肾前性、肾性及肾后性3方面

①肾前性：主是严重失水引起血液浓缩，肾血流量减少及肾小球滤过率降低，从而使尿素氮潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻。 ②肾性：为最常见因素，可见于急性肾小球肾炎、肾衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全代偿期可见尿素氮轻度升高(>8.0mmol/L)，肾衰竭失代偿期，尿素氮可中度升高(17.9~21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.00μmol/L)；尿毒症时尿素氮 >21.4mmol/L，肌酐也可达1800μmol/L，为尿毒症诊断标准之一。 ③肾后性：如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素氮升高。血尿素氮减少较为少见，除了妊娠、蛋白质缺乏等营养不良情况外，常表示有严重肝病、肝坏死。

血清(血浆)尿素氮测定

以空白管调零比色，读取各管吸光度。
【计算】
尿素氮mg% = 测定管/标准管×0.002×100/0.1×5 = 测定管/标准管×10
【参考范围】
5-20 mg/dl
【临床意义】 1．血液尿素浓度增高，可分生理性与病理性因素二个方面。 (1) 生理性因素：高蛋白的饮食可引起血清尿素浓度和尿液排出量显著增高。血
【注意事项】 1．试剂中加入硫氨脲和镉离子可增加显色强度和色泽的稳
定性，还可消除羟胺的干扰，但仍有轻度退色现象，故应及时比色。
2．尿液中尿素亦可用此法测定，但因尿液中尿素浓度较高，需将尿液作50倍以上稀释后再行测定。
3．尿素浓度以前习惯用尿素氮表示，尿素分子中含有二个氮原子，因此1mmol/L尿素等于2 mmol/L尿素氮。世界卫生组织推荐使用尿素，并以mmol/L表示浓度单位，我国卫生部也已规定一律使用尿素，不再使用尿素氮一词。
取4只试管，具体操作按下表进行。
加入物(ml)
空白管（B）标准管（S）测定管（人）测定管（牛）
血清
——0.1Fra bibliotek0.1
尿素标准应用液
—
0.1
—
—
蒸馏水
0.1
—
—
—
二乙酰一肟溶液
0.5
0.5
0.5
0.5
尿素氮试剂
5.0
5.0
5.0
5.0
各管混匀后，置沸水中加热15min，取出置冷水中冷却后，分光光度计波长540nm，
血清（血浆）尿素氮测定
（二乙酰一肟显色法）
非蛋白含氮化合物包括除蛋白质以外的尿素、肌酐、肌酸、尿酸、氨基酸、核苷酸、嘌呤、谷胱甘肽等多种含氮有机物。体内氨基酸代谢产生的氨，主要经肝脏生成尿素，而后又主要经肾脏排出体外。因此，血清尿素浓度的测定是临床上应用较多的反映肾小球滤过功能的常用指标。

血清尿素测定方法

血清尿素测定方法
血清尿素测定是一种常用的临床实验室检测方法，用于评估肾功能和测定血氨水平。

以下是一种常用的血清尿素测定方法：
1. 准备样本：从患者的静脉或指尖采集血液样本，并将其放入干燥的试管或离心管中。

2. 离心：将采集到的血液样本离心，以分离血浆或血清。

3. 取样：使用移液器或微量吸管，将所需量的血浆或血清转移到清洁的试管中。

4. 加试剂：添加尿素试剂到试管中。

尿素试剂通常是一种含有酶的溶液，可以将尿素转化为氨气。

5. 反应：将试管放入恒温水浴或试剂盒中，进行反应。

在此过程中，尿素与试剂中的酶发生反应，产生氨气。

6. 检测：使用光度计或其他光学方法，测量反应后产生的氨气的吸光度。

吸光度的程度与血清中尿素的浓度成正比。

7. 计算：通过比较待测样本的吸光度与标准曲线上的吸光度，确定样本中尿素的浓度。

需要注意的是，每个实验室可能有自己的具体操作步骤和试剂，因此在进行血清尿素测定时，还应该参考相应的实验室方法手册。

医学机能实验技术实验知识：尿素氮的测定

尿素氮的测定肾脏通过泌尿作用来排泄代谢终末产物、调节内环境稳定，通过内分泌功能调节血压、电解质平衡、红细胞的生成等，这些功能是通过肾小球的滤过、肾小管和集合管重吸收以及肾小管和集合管的排泄三个环节实现，影响上述三个环节的因素都能影响尿的生成，引起尿的变化。

急性肾功能衰竭的影响因素包括肾前性因素（急性肾脏缺血等）、肾性因素（肾中毒等）和肾后性因素（急性的尿路梗阻等）。

当肾功能损害达到一定程度时，则出现肾功能障碍，产生相应的肾功能衰竭表现。

少尿型急性肾功能衰竭的发展过程可分为少尿期、多尿期和恢复期三个阶段。

少尿期是病情最危重的阶段，内环境紊乱严重。

急性肾功能衰竭的典型临床表现为少尿或无尿、水中毒、高钾血症、代谢性酸中毒及氮质血症，治疗以抢救急性肾脏缺血为主要原则，纠正水、电解质及酸碱平衡紊乱，尽早恢复内环境稳定。

【附】一、尿素氮的测定（1）原理：血液和尿中的尿素氮在强酸条件下与二乙酰-肟-氨硫脲煮沸，可生成红色复合物，红色的深浅和尿素氮的含量成正比。

（2）血清尿素氮的测定，操作方法见表3-13-1。

混匀后，置水浴锅内煮沸15分钟，再冷却3分钟，将分光光度计波长调到540nm，以空白管调零点，进行比色，记录测定管光密度和标准管光密度，按以下公式计算每100ml血清中尿素氮的含量（mg）。

血清尿素氮=测定管光密度标准管光密度×10表3-10-1血清尿素氮的测定方法试剂（ml）测定管（缺血前）测定管（缺血后）标准管空白管1：5稀释的血清0.1 0.1 - -尿素氮标准液- - 0.1 -蒸馏水- - - 0.1 二乙酰单肟试剂0.5 0.5 0.5 0.5尿素氮试剂 5.0 5.0 5.0 5.0二、酚红排泄实验（1）原理：注入机体的酚红主要从肾排出，其中94%经肾近曲小管排泄，当肾小管功能受损时，酚红的排出则发生障碍。

将注入酚红1小时内收集的尿液加碱显色后，与酚红标准液对比，可测定酚红自肾的排出率。

尿素氮(BUN)检测

迪信泰检测平台
尿素氮（BUN）检测
尿素氮（Blood urea nitrogen, BUN）是人体蛋白质代谢的主要终末产物，尿素氮构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮，血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

采用靛酚蓝比色法进行检测，脲酶水解尿素产生的NH3-N，与次氯酸盐和苯酚反应生成蓝色靛酚，产物在630nm处有特征吸收峰，尿素氮的含量在一定范围内与吸光值呈正比，通过吸光值变化即可定量检测尿素氮的含量。

迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测尿素氮含量变化。

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生化法测定尿素氮样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

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血清尿素的实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 熟悉生物化学实验的基本操作步骤。

2. 掌握血清尿素测定的原理和方法。

3. 了解血清尿素在临床诊断中的意义。

二、实验原理尿素是哺乳动物体内蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏合成，通过肾脏排泄。

血清尿素氮（BUN）是血液中尿素的浓度，是反映肾功能和体内氮代谢状况的重要指标。

本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法基于二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。

三、实验材料1. 血清样本：采集受试者空腹静脉血，分离血清。

2. 试剂：二乙酰试剂、强酸试剂、显色剂、空白试剂等。

3. 仪器：分光光度计、移液器、试管等。

四、实验方法1. 样本处理：取血清样本100μl，加入1ml强酸试剂，充分混匀后室温放置10分钟。

2. 显色：加入2ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。

3. 测定：以空白试剂为参比，于540nm波长下测定吸光度。

4. 结果计算：根据标准曲线计算血清尿素含量。

五、实验结果1. 标准曲线绘制：将不同浓度的尿素标准品按照实验方法进行测定，绘制标准曲线。

2. 血清尿素含量测定：将受试者血清样本按照实验方法进行测定，得到吸光度值，根据标准曲线计算血清尿素含量。

六、结果分析1. 血清尿素正常范围为3.2～7.1mmol/L。

本实验受试者血清尿素含量在正常范围内，说明受试者肾功能正常。

2. 血清尿素升高可能见于以下情况：- 肾脏功能受损：如急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭、肾小球肾炎等。

- 蛋白质摄入过多或分解代谢增强：如发热、创伤、肿瘤等。

- 肾前性少尿：如严重脱水、充血性心力衰竭、肝肾综合征等。

3. 血清尿素降低可能见于以下情况：- 蛋白质摄入减少：如营养不良、消化系统疾病等。

- 肝脏功能异常：如肝功能衰竭、肝脏病变等。

- 肾小球滤过功能下降：如肾小球肾炎、肾病综合征等。

七、实验讨论1. 本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法操作简便、准确度高，是临床常用的测定方法。

实验五血清尿素氮的测定

血清尿素氮的测定一.实验原理血清中尿素在氨基硫脲存在下，与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时，可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物)，其颜色深浅与尿素含量成正比，与同样处理的尿素标准液比色。

即可求得血清中尿素的含量。

由于反应在强酸中进行，所产生的羟胺是干挠物质，所以必须用氧化剂将其氧化除去。

在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定．加入氨基硫脲可增加其稳定性，还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。

二.实验操作取试管3支，注明空白管、标准管、测定管，按下表操作540nm比色，以空白管调零，测定各管吸光度值。

三.计算血清尿素氮（mmol / L ）=——————— X 17.85 测定管吸光度标准管吸光度正常值参考范围3．57～14．28mmol ／L四.临床意义血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、胆红素及氨等。

其中尿素含量约占l ／3～1／2。

尿素是蛋白质代谢的产物．通过肾脏排出，故测血清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验，并且其增高程度与病变的严重程度呈平行关系。

五.试剂1.尿素氮试剂：蒸馏水lOOml ，浓硫酸44ml ，85％磷酸66ml ，冷却至室温后，加氨基硫脲50mg ，硫酸镉(3CdSO ４·8H 2O)2g ，溶解后稀释至1000ml 。

2.20g ／L 二乙酰一肟试剂：称取二乙酰一肟20g ，加入蒸馏水约900ml ，溶解后稀释至1000ml.３.尿素氮标准贮存液(357mmol ／L)：称取尿素1.072g 溶解于蒸馏水中定容至1000ml 。

４.尿素氮标准应用液(17.85mmol ／L)；取贮存液5ml ，加蒸馏水至100ml 。

血清尿素测定

血清尿素测定1.实验原理：尿素在尿素酶催化下，水解生成氨和二氧化碳。

氨在α-酮戊二酸和还原型辅酶I存在下，经谷氨酸脱氢酶（GLDH）催化，生成谷氨酸。

同时，NADH被氧化成NAD，可在340nm波长处监测吸光度下降的速率，计算样品中尿素的含量。

反应式如下：尿素＋H2O —尿素酶→2NH4+ + CO32-NH4+α-酮戊二酸＋NADH H+—GLDH→谷氨酸＋NAD＋＋H2O2 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。

无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。

用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。

3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。

尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

6. 实验材料6.1 试剂：欧泰克尿素测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液PH8.0 150 mmol/L谷氨酸脱氢酶（GLDH）≥0.72U/mlADP 1.5 mmol/LNADH 0.23 mmol/Lα-酮戊二酸13.8 mmol/L脲酶≥35.0 U/ml6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。

不要入口，吞下有害。

保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

实验五尿素中含氮量的测定

实验一尿素中含氮量的测定一、实验目的1.学会用甲醛法测定氮含量，掌握间接滴定的原理。

2.学会NH 4+的强化，掌握试样消化操作。

3.掌握容量瓶、移液管的正确操作。

4.进一步熟悉分析天平的使用。

二、实验原理常用的含氮化肥有NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4、NH 4NO 3、NH 4HCO 3和尿素等，其中NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4和NH 4NO 3是强酸弱碱盐。

由于NH 4+的酸性太弱(Ka=5.6×10-10)，因此不能直接用NaOH 标准溶液滴定，但用甲醛法可以间接测定其含量。

尿素通过处理也可以用甲醛法测定其含氮量。

甲醛与NH 4+作用，生成质子化的六次甲基四胺(Ka=7.1×10-6)和H +，其反应如下：4NH 4+ + 6HCHO = (CH 2)6N 4H + + 3H + + 6H2 所生成的H +和(CH 2)6N 4H +可用NaOH 标准溶液滴定，采用酚酞作指示剂。

标定NaOH 标准溶液的基准物质为邻苯二甲酸氢钾，其反应为：化学计量点时，溶液呈弱碱性(pH=9.20)，可选用酚酞作指示剂。

三、仪器与试剂容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管(50mL)、洗耳球、分析天平氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾、硫酸铵、甲基红指示剂(0.2%水溶液)、酚酞(0.2%乙醇溶液)、甲醛溶液(1:1)四、实验步骤1．0.1mol·L -1NaOH 标准溶液的配制及标定COOH COOK +NaOH COOK COONa+H 2O用台秤迅速称取1g NaOH固体于100mL小烧杯中，加约30mL无CO2的去离子水溶解，然后转移至容量瓶中，用去离子水稀释至250mL，摇匀后，用橡皮塞塞紧。

洗净碱式滴定管，检查不漏水后，用所配制的NaOH溶液润洗2～3次，每次用量5～10mL，然后将碱液装入滴定管中至“0”刻度线上，排除管尖的气泡，调整液面至0.00刻度或零点稍下处，静置1min后，精确读取滴定管内液面位置，并记录在报告本上。

尿素氮测定的标准操作规程

尿素氮测定(速率法）1:概述尿素是人体内蛋白氮代谢的终产物，它构成了血液中绝大部分的非蛋白氮。

尿素产生于肝脏，经过肾脏排泄至尿中，因此尿素的含量取决于蛋白质的摄入量，蛋白质分解代谢和肾功能. 2:标本的手收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。

血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。

样本在4摄氏度可稳定7天。

采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30—60分钟凝血析出血清。

3000r/min 离心5—10分钟，分离出血清备用。

不建议采用血浆标本。

3方法原理样品中的尿素在试剂中脲酶的催化下与水反应生成氨和二氧化碳，生成的氨与试剂中的酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下产生谷氨酸,同时NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降。

通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可计算出样品中尿素的浓度。

4剂来源，配置及储存试剂来源：试剂配置:试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。

启用后在2-8度可稳定30天。

若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A，应予丢弃.试剂储存:试剂避光储存2—8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪6计算方法ALT（U/L）=( A/min＊Tv＊1000）（6。

3＊Sv＊P)式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径（cm）7 线性范围：本实验的线性范围：0—-—-35mmol/L8 参考范围：2。

82--—8.2 mmol/L9 失控控理1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品,重测失控项目，如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。

检查仪器状态，查明光源是否更换,比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。