小鼠胰岛素Insulin酶联免疫分析

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小鼠胰岛素(Insulin)说明书

小鼠胰岛素(Insulin)说明书

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)含量。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠骨骼肌胰岛素信号通路相关基因表达的变化

高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠骨骼肌胰岛素信号通路相关基因表达的变化

高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠骨骼肌胰岛素信号通路相关基因表达的变化袁海瑞;牛燕媚;刘效磊;刘素娟;傅力【期刊名称】《中国康复医学杂志》【年(卷),期】2011(026)004【摘要】目的:利用基因芯片技术研究高脂饮食诱导的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)小鼠骨骼肌细胞胰岛素信号通路相关基因的改变,分析其变化规律,为寻找治疗IR的潜在药物作用靶点提供理论依据.方法:选用雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为正常饮食组(NC组)和高脂饮食组(HC组).分别饲养16周后,采用口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)检测小鼠葡萄糖耐量;ELISA检测空腹血清胰岛素值(fasting insulin,FIN)以确定胰岛素抵抗模型成功;后分离小鼠股四头肌,提取总RNA,经过荧光标记后进行基因芯片杂交,利用芯片扫描仪记录荧光信号,并通过相关软件对所得数据进行统计学分析.结果:16周高脂饮食喂养结束后,HC组小鼠体重较NC组增加25.33%(P<0.05),FIN值较NC组增加77.19%(P <0.05).OGTT峰值出现的时间较NC组延迟,血糖值在30min后下降缓慢,且在180min血糖值仍高于基础水平.胰岛素信号通路的差异表达基因有11个.表达上调的基因有3个,表达下调的基因有8个,这些基因涉及糖代谢、脂代谢、信号转导及转录等生物学过程.结论:16周的高脂饮食可以诱发C57BL/6小鼠产生IR.HC组小鼠骨骼肌胰岛素信号相关基因发生差异表达,这些基因与IR密切相关.本研究为寻找治疗IR潜在的药物靶点提供理论依据.【总页数】6页(P357-362)【作者】袁海瑞;牛燕媚;刘效磊;刘素娟;傅力【作者单位】天津体育学院健康与运动科学系,天津,300381;天津体育学院健康与运动科学系,天津,300381;天津体育学院健康与运动科学系,天津,300381;天津体育学院健康与运动科学系,天津,300381;天津体育学院健康与运动科学系,天津,300381;天津医科大学康复与运动医学系【正文语种】中文【中图分类】R587.1【相关文献】1.mTOR/S6K1信号通路与有氧运动改善小鼠高脂饮食诱导胰岛素抵抗间的关系[J], 苑红;牛燕媚;刘彦辉;苏照鹏;李慧阁;姜宁;傅力2.津力达对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE-/-小鼠骨骼肌胆固醇相关基因的影响 [J], 金鑫;张彦芬;秘尧;何其龙;周升山;张会欣;崔雯雯3.津力达对高脂诱导的胰岛素抵抗ApoE-/-小鼠骨骼肌甘油三酯相关酶的影响 [J], 金鑫;张会欣;张彦芬;秘尧;何其龙;崔雯雯;周升山4.消脂方调控NF-κB炎症信号通路对高脂饮食诱导肥胖小鼠糖代谢及胰岛素抵抗的影响 [J], 孙怡婕;冯强;张栩;李红5.孕期高脂肪饮食通过胰腺Pax6信号通路诱导孕鼠胰岛素抵抗的相关研究 [J], 刘云云;徐先明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

小鼠胰高血糖素样肽1GLP-1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1GLP-1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。

试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:请来电咨询保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)水平。

用纯化的小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰高血糖素样肽1(GLP-1),再与HRP标记的胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰高血糖素样肽1(GLP-1)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)浓度。

小鼠胰高血糖素样肽1GLP-1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1GLP-1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。

试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:请来电咨询保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)水平。

用纯化的小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰高血糖素样肽1(GLP-1),再与HRP标记的胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰高血糖素样肽1(GLP-1)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)浓度。

小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素样生长因子2(IGF-2)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)水平。

用纯化的小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素样生长因子2(IGF-2),再与HRP标记的胰岛素样生长因子2(IGF-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素样生长因子2(IGF-2)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)浓度。

试剂盒组成:注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

小鼠胰岛素说明书(1)

小鼠胰岛素说明书(1)

小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。

用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的胰岛素浓度。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与上海巧伊生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。

如您有其它需求,请登录上海巧伊生物科技有限公司网站或致电本公司。

胰岛素简介:胰岛素是糖代谢中最主要的激素之一。

胰腺的ß细胞岛细胞产生胰岛素前体蛋白,前体蛋白被加工成C肽和胰岛素。

它们以等摩尔浓度进入血循环中。

成熟的胰岛素由A、B两条链组成。

这两条链是通过两个二硫键桥接形成有功能的胰岛素分子。

血浆葡萄糖浓度的变化是胰岛素产生并分泌的最主要刺激因素,产生的胰岛素具有一些代谢调节作用。

其最主要的作用是,将外周血中糖转运到肝脏中贮存起来。

一些诸如肝糖生成障碍或在促进血糖升高的激素诸如胰高血糖素、肾上腺素、生长激素和皮质醇等作用下促进肝糖分解都可拮抗胰岛素的作用。

检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中胰岛素的浓度。

胰岛素捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的胰岛素会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

当加入与HRP耦连的抗胰岛素抗体后,抗小鼠胰岛素抗体与胰岛素接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。

最后加入显色剂,若样本中存在胰岛素将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,胰岛素浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中胰岛素浓度。

小鼠胰岛素定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分 规格(96T/48T)小鼠胰岛素预包被板 12条/6条标准品稀释液 10ml/5ml小鼠胰岛素标准品 2支/1支(冻干)小鼠胰岛素抗体HRP结合物 10ml/5ml浓缩洗涤液 20× 30ml/15mlTMB底物 10ml/5ml终止液 5ml/3ml封板胶纸 3/2张说明书 1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作;A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。

INS(胰岛素、Insulin、INS) Abbott AXSYM试剂标准操作规程SOP

INS(胰岛素、Insulin、INS) Abbott AXSYM试剂标准操作规程SOP

INS(胰岛素、Insulin、INS) Abbott AXSYM1.检验目的检测血清INS主要是用于给糖尿病人提供辅助的诊断信息以及对胰岛素瘤的鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估。

2.方法原理采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析(MEIA),即以anti-INS包被微粒子(○M-Ab)与标本中的BNP形成○M-Ab-Ag复合物,当复合物被转移到纤维杯上时,微粒子就不可逆地结合到纤维杯表面的玻璃纤维上,并与加入的碱性磷酸酶标记anti-INS结合,洗去未结合的游离物质,加入底物——四甲基伞形酮磷酸盐,碱性磷酸酶脱去底物的磷酸基而发出荧光,通过MEIA光路元件检测而得到定量结果。

3.性能指标MEIA定量检测INS不精密度CVs为4.0-5.3%,检出限>1.0μU/ml,灵敏度1.0μU/ml,白蛋白、a-1酸性糖蛋白、胆红素等于22种体内相关成份对INS测定无干扰,携带污染率0.001%。

4.标本收集4.1标本类型:静脉血或动脉血的血清或血浆标本均可作为检测标本(抗凝剂可用肝素钠、枸橼酸钠或EDTA,抗凝剂的质量应符合化试药品要求——化学纯或分析纯,使用的比例以厂家推荐为准);其他体液如羊水、胸水、腹水等体液可以作为检测标本,但加热灭活的血清和血库的库存血则不宜作为检测标本。

4.2标本留取:以空腹为宜,收到标本后最好立即离心留取血清或血浆(凝固血应待其充分凝固后收集血清),不能有残留的红细胞、纤维蛋白丝,明显溶血的标本不宜采纳,进行抗凝或血栓溶解治疗的病人采血后宜适当延长凝固时间再进行离心分离血清,羊水中如混有胎儿红细胞可能会导致较高的INS结果,因此抽取羊水应尽量不要混入胎儿红细胞。

4.3标本保存:留取的标本最好在3小时内检测,不能立即检测的应放置于2-8℃最长达24小时(可以含有凝块但要密闭以防蒸发),或者-20℃最长达12个月(不能反复冻融也不能含有凝块和红细胞)。

小鼠胰岛素INS酶联免疫分析ELISA

小鼠胰岛素INS酶联免疫分析ELISA

小鼠胰岛素(INS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(INS)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(INS)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(INS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(INS),再与HRP标记的胰岛素(INS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(INS)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(INS)浓度。

试剂盒组成:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

操作步骤1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

(完整)胰岛素(Insulin)作业指导书

(完整)胰岛素(Insulin)作业指导书

(完整)胰岛素(Insulin)作业指导书胰岛素(Insulin)1.分析原理采用双抗体夹心法原理,整个过程18分钟完成。

·第1步:20µl标本、生物素化的抗胰岛素单克隆抗体和钌(Ru)标记的抗胰岛素单克隆抗体混匀,形成夹心复合物。

·第2步:加入链霉亲和素包被的微粒,让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

·第3步:反应混和液吸到测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质被清洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。

检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过2点定标校正,由从试剂条形码扫入仪器的原版标准曲线而得。

2.标本要求血清:按标准常规方法采集。

血浆:肝素锂、EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝.溶血有干扰,因为红细胞释放可降解胰岛素的肽酶。

标本在15-25度可稳定4小时,2-8度可稳定24小时,-20℃可稳定6个月。

只可冻融1次.含沉淀的标本使用前需离心.不要使用加热灭活的标本。

标本和质控品禁用叠氮钠防腐.标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温;放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。

3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。

试剂:M:链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖),1瓶,6。

5ml。

粒子浓度0。

72mg/ml,生物素结合能力: 470ng生物素/mg粒子。

含防腐剂。

R1:生物素化的抗胰岛素单克隆抗体(灰盖),1瓶,10ml,浓度高于1。

0mg/l,MES缓冲液0。

05mol/l,pH6。

0,含防腐剂。

R2:Ru(bpy)32+标记的抗胰岛素单克隆抗体(黑盖),1瓶,10ml。

浓度1。

75mg/l,MES缓冲液0.05mol/l,pH 6.0含防腐剂.校准品(货号12017504):Cal 1 低值定标液(白盖),2瓶,1.0ml/瓶,胰岛素浓度约为5μU/ml,人血清,含防腐剂Cal 2 高值定标液(黑盖),2瓶,1.0ml/瓶,胰岛素浓度约为300μU/ml,人血清,含防腐剂质控品:Elecsys 通用质控品(PreciContorl Universal)1和2 ,货号11731416其他所需材料:Elecsys 2010、E170、E601或 E411分析仪Elecsys 2010和 E411分析仪需要:Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号11662988Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号11662970Elecsys 添加剂液(SysWash)货号11930346Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号11298500Elecsys E170和 E601分析仪需要:Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号12135019Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号12135027Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号112985004.仪器和校准使用仪器:瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 601/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准:每批Insulin试剂盒必须用新鲜试剂和Insulin Cal 1,Cal 2定标一次.另外,以下情况需要再次定标:Elecsys2010/E 170/E601/E 411:·一个月(同一批号试剂)· 7天(放置仪器上的同一试剂盒)各种分析仪均适用的情况:根据要求进行定标;如质控结果超出范围时;根据规定进行定标.5.操作步骤(以E 170为例)5。

小鼠胰高血糖素样肽1GLP1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1GLP1酶联免疫分析ELISA

小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)水平。

用纯化的小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰高血糖素样肽1(GLP-1),再与HRP标记的胰高血糖素样肽1(GLP-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰高血糖素样肽1(GLP-1)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成说明书48孔配置1份96孔配置1份保存封板膜2片(48)1个2片(96)1个密封袋酶标包被板标准品:4.5pmol/L 标准品稀释液酶标试剂1×48 1×96 2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存2-8℃保存0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶3 ml×1瓶3 ml×1瓶3 ml×1瓶3 ml×1瓶3ml×1瓶(20ml×20倍)×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶6 ml×1瓶6 ml×1瓶6 ml×1瓶6 ml×1瓶6ml×1瓶(20ml×30倍)×1瓶样品稀释液显色剂A液显色剂B液终止液浓缩洗涤液样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

小鼠胰岛素Insulin酶联免疫分析

小鼠胰岛素Insulin酶联免疫分析

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析检测范围:30pg/ml-800pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),与HRP 标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(1600pg/ml)0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

800pg/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液400pg/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液200pg/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液100pg/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液50pg/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

大鼠胰岛素Insulin酶联免疫分析

大鼠胰岛素Insulin酶联免疫分析

大鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T0 mU/L -20 mU/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的大鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

小鼠胰岛素(Insulin)说明书(1)

小鼠胰岛素(Insulin)说明书(1)

小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)含量。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:18mIU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒检测原理

小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒检测原理

小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA 试剂盒检测原理2021年是胰岛素发现100周年,胰岛素彻底改变了1型糖尿病患者的管理。

百年来,我们对不同类型糖尿病的发病机制理解也发生了翻天覆地的变化,推动了糖尿病患者的诊疗进展。

目前发现,胰岛素抗体产生的原因有以下两种情况:1、在从未用过胰岛素的受试者体内出现的,对自身分泌的胰岛素产生的抗体,即胰岛素自身抗体(insulin autoantibody,IAA)。

这种抗体被认为是在胰岛β细胞损伤、胰岛素分泌异常时产生的自身免疫性抗体。

虽然在正常人体内这种抗体也可能有少量存在,但一般情况下测不到或浓度较低,定性结果为阴性。

高浓度的IAA常出现在1型糖尿病患者或潜在患者身上。

1型糖尿病是一种自身免疫性疾病,其特征是免疫介导的胰腺β细胞破坏。

胰岛素自身抗体(IAA)在许多患有1型糖尿病高风险的受试者在临床疾病发作和暴露于外源性胰岛素之前会产生。

2、应用外源胰岛素后患者体内出现的抗胰岛素的抗体。

这是一种针对外源性胰岛素的抗体,为非自身免疫性抗体,习惯上常称之为胰岛素抗体(insulin antibody,IA)。

实际上这个习惯称谓不贴切,也不准确。

外源性胰岛素抗体是在使用外源性胰岛素时,由于外源性胰岛素具有抗原性,刺激机体免疫系统产生的能与胰岛素结合的抗体,常导致患者胰岛素治疗剂量逐步增大才能达到理想的治疗效果。

这种抗体一般在应用外源性胰岛素后1~2个月左右出现。

外源性胰岛素纯度越低,产生抗体的滴度就越高。

所以,应用动物源胰岛素的患者体内出现胰岛素抗体比较普遍,患者耐药情况也比较普遍和严重。

胰岛素抗体中包括了胰岛素自身抗体和外源性胰岛素抗体(非自身抗体)。

胰岛素自身抗体与外源性胰岛素抗体都是胰岛素抗体的一种类型,他们都属同一种抗体——胰岛素抗体。

因为,他们有同一个抗原——胰岛素。

但是,胰岛素自身抗体与外源性胰岛素抗体产生的机制不同,临床意义也不一样。

艾美捷不同种属的胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒提供了一系列独特而可靠的产品来支持研究中的胰岛素自身抗体(IAA)的分析。

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

仅供科研使用,不得用于临床检验。

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称:小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)英文名称:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1(IGFBP1 )ELISA KIT【包装规格】48人份/盒,96人份/盒【预期用途】仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )的浓度。

【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。

在预包被抗小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。

加底物A和B,底物在HRP 催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )的浓度正相关。

拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1 )的浓度。

【主要组成成分】主要成分校准品检测范围:31.2-2000pg/ml。

校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。

需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。

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小鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:96T
30pg/ml-800pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)含量。

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(Insulin)水平。

用纯化的小鼠胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素(Insulin),再与HRP标记的胰岛素(Insulin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胰岛素(Insulin)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(Insulin)浓度。

试剂盒组成
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止
液后15分钟以内进行。

操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。

注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月。

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