槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)剖析44页PPT
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71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)剖析
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6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
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7、心急吃不了热汤圆。
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8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
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9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚 的工人 总是说 工具不 好)。
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10、只要下定决心克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
槐米中芦丁的提取及分离工艺研究
槐米中芦丁的提取及分离工艺研究
槐米是一种常见的食品，其含有丰富的营养物质和活性成分。
其中，芦丁是一种具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物学活性的物质，具有重要的医药、保健和化妆品等应用前景。
本文针对槐米中芦丁的提取和分离工艺进行了研究，探讨最佳的工艺条件，为芦丁的应用提供基础研究。
一、实验材料和设备
实验材料：鲜槐米，浸提剂改性乙酸乙酯，乙醇，氯仿，芦丁标准品。
实验设备：电动磨、超声波清洗器、恒温水浴、滤纸、玻璃过滤器、烤箱、冷冻离心机。
二、实验步骤
（一）槐米粉的制备
取适量鲜槐米，洗净晾干，用电动磨将其磨成细粉，并通过40目筛后存放备用。
（二）芦丁的提取
将10g槐米粉加入100mL改性乙酸乙酯中，超声波清洗器中超声提取1小时，离心5000rpm，取上清液置于烤箱中，温度为60℃，使其蒸发干燥，得到槐米提取物。
将得到的槐米提取物溶于乙醇，放入分液漏斗中，用氯仿进行液液分离，收集上层乙醇相，用玻璃过滤器过滤，静置后收取沉淀，用乙醇重结晶，得到纯的芦丁。
三、结果与分析
本实验通过改性乙酸乙酯的超声波提取技术，能够快速高效地提取槐米中的芦丁，且分离出的芦丁为白色固体，与相应的标准物质具有相同的紫外光谱。
四、结论
本文所述提取芦丁的方法简便、快速，能够得到高纯度的芦丁，为槐米中芦丁的研究和应用提供了可靠的基础数据。
值得一提的是，提取工艺中的超声波清洗器和过滤器是较为常见的实验室设备，因此该方法具有较高的实际可操作性。
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定
槐米中芦丁及槲皮素的提取分离及鉴定槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L ．）的未开放花蕾。
味苦性凉、具清热凉血、止血之功。
常用于治疗多种出血症：肠风便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血、赤血下痢等。
槐米常炒炭应用。
槐米的主要化学成分为芦丁，其含量可达12～16％，其次含有槲皮素、三萜皂苷、槐花米甲素、槐花米乙素、槐花米丙素等。
芦丁具有Vitp 样作用，可降低毛细血管脆性和调节通透性。
临床上用作毛细血管脆性引起的出血症，常作为高血压症的辅助治疗药。
[目的要求]1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2．掌握槲皮素的制备原理及操作。
3．熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用4．通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
[实验原理]芦丁（rutin ）：C 27H 30O 16·3H 2O ，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。
难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin ）：C 15H 10O 7·2H 2O ，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。
能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。
利用芦丁易溶热水、热乙醇，较难溶于冷水、冷乙醇的性质选择重结晶方法进行精制。
芦丁可被稀酸水解生成槲皮素及葡萄糖、鼠李糖，依此进行制备槲皮素。
通过纸色谱及紫外光谱进行黄酮及糖的鉴定。
[实验内容]一、芦丁的提取分离及精制方法⑴槐米粗粉（50g）置1000ml烧杯中，加入500ml饱和石灰水，加热，并维持pH8～9煮沸20分钟，趁热用脱脂棉滤过滤液药渣用300ml饱和石灰水煮沸10分钟，维持pH8～9趁热滤过滤液药渣（×）合并70℃下用浓HCl调pH至4 ～5沉淀低温（80℃）干燥，称重。
槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清（⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006）1.摘要:本实验以槐⽶为原料，采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
该⽅法提取率⾼达26.3%，对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析，并与标准品做对⽐，结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。
2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。
芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。
有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。
其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。
黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。
黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有：①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。
芦丁是其主要成分，含量为16%-25%。
芦丁属于黄酮类化合物，结构中含有多个酚羟基，呈酸性，苷元为槲⽪素，糖基为芸⾹糖。
芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶，95-97℃脱⽔，熔点314℃，可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮，不溶于⽯油醚和⽔。
芦丁可溶于碱液中，呈黄⾊酸化后⼜析出，故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。
然后利⽤在冷⽔中不溶，在热⽔中微溶的溶解度差精制，可获得纯度⾼的微细针状结晶，最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。
4.实验部分4.1实验药品槐⽶（市售），氧化钙AR（西陇化⼯股份有限公司），盐酸AR（西陇科学有限公司），四硼酸钠AR（⼴东省台⼭市化⼯⼚），甲醇AR（天津市⼤茂化学试剂⼚），三氯甲烷AR（成都市科隆化学品有限公司）,氯仿（分析纯，成都市科龙化⼯试剂⼚），⼄醇（分析纯）4.2实验仪器JJ200电⼦天平（常熟市双杰测试仪器⼚），SHZ-D（III）循环⽔式多⽤真空泵（河南爱博特科技发展有限公司），ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器（河南爱博特科技发展有限公司），薄层⾊谱展开缸，紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司）4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀：称取槐⽶10.0g，在研钵中稍加研碎后，置于500ml烧杯中，加⼊250ml⽔，加热搅拌下添加⽯灰乳，保持PH=8-8.5。
槐米中芦丁的提取分离与鉴定
2.实验方法
芦丁粗品
0.5g芦丁粗品
1g芦丁粗品
按1:200加水，煮沸溶 解，趁热抽滤 滤液
放置析晶
2%H2SO4 80ml，直火回 流，加热30min，抽滤
芦丁精品
沉淀
滤液（PC）
水洗至中性，95%EtOH重 结晶 滤液
槲皮素精品
芦丁的精制：取0.5g芦丁粗品，置500mL烧杯中，
按1:200加水，加热至沸，使之充分溶解。
趁热过滤，滤渣再加入300mL水，直火加热0.5h。
趁热过滤，合并两次滤液。
放置，析出沉淀，抽滤，干燥得淡黄色芦丁粗品。
二 芦丁的精制和水解
一 实验原理 1.芦丁的精制是根据芦丁在热水中溶解度大，冷水中溶解度小的性 质进行重结晶而获得芦丁粗品。
2.芦丁是黄酮苷类，可进行酸水解，苷键断裂生成苷元槲皮素，葡 萄糖和鼠李糖。
4.熔点测定：芦丁
熔点测定：槲皮素
THANKS
一，芦丁的提取
1.实验原理：芦丁在冷水中的溶解度为1:10000，在热水中的 溶解度为1：200，在冷乙醇中的溶解度为1:650.因此，采用 水煎法提取芦丁经济，效率高。
2.实验方法
槐米20g，研碎
药渣
滤液
300ml，煎煮0.5h，过滤 滤液
芦丁粗品
取20g槐米，研碎。
置于400mL沸水中，直火煎煮1h(需补充蒸发掉的水分)。
（2）因糖的极性差异造成Rf值，与对照品比较鉴定
（3）黄酮类的显色反应特异性较强，故可与聚酰胺产 生氢键缔合，常用于分离和鉴别。
1.糖的纸色谱（圆形滤纸）鉴定 取澄清的水解液20mL，加碳酸钡中和至中性，滤去生成的硫 酸钡沉淀，滤液浓缩至小体积1mL，供纸色谱点样用。
槐米中芦丁的提取分离与鉴定(1)
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
芦丁
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。 溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中 1:23。可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、 冰乙酸、吡啶，不溶于水、氯仿、乙 醚、苯和石油醚等。
注意观察现象：未加热时，瓶悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
中药化学 实验 槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
槲皮素的制备
精品芦丁(0.2g)
放入150ml圆底烧瓶中，加入2%稀硫酸50ml, 空气冷 凝直火加热（电炉上放石棉网）40分钟，放冷抽滤。
沉淀
滤液
水洗至中性抽滤、干燥。 取10ml，加氢氧化钡约1g,调PH7.5,过滤。
沉淀
滤液 水浴浓缩至1~2ml
浓缩液（备检查糖用）
4、芦丁、槲皮素的鉴定
（1）试管定性反应： ①HCI-Mg粉反应
行酸水解得到槲皮素
[实验流程]
1、提取
槐米（20g）
加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液
药渣
煎煮液
放置4~5h，抽滤
沉淀
自然干燥
粗品芦丁
2、精制
粗品芦丁
加甲醇15~20ml，水浴加热（空气冷凝） 溶解， 至无黄色物，趁热过滤。
沉淀
滤液
放置，待结晶析出，抽滤至干。
沉淀
干燥
精品芦丁
注意：
1、甲醇量可以适当增加。 2、注意控制回流温度。 3、回流时间以芦丁完全溶解为准。
取样品的乙醇溶液1ml加少许镁粉，再加浓 HCI 1~2滴，观察颜色。 ②FeCl3反应
取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶 液2~3滴，观察颜色。 ③中性醋酸铅反应
取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸铅溶 液1~2滴，观察现象。
④α-萘酚、浓H2SO4反应 取样品的乙醇溶液1ml加α-萘酚试液1~ 2滴
实验
槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
[实验目的]
1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、 苷元的结构研究的一般方法；
2.熟悉根光谱的测定方法。
实验原理
➢提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异； ➢纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 ➢制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐米中芦丁的提取与分离摘要：利用芦丁在沸水中溶解度大的性质将其在沸水中进行提取，而芦丁与其他水溶性化合物可借助聚酰胺柱色谱予以分离。
关键词：槐花米；芦丁；槲皮素；提取；分离；鉴定1 引言芦丁（Rutin ）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高(含量可达12-16%)，可作为大量提取芦丁的原料。
芦丁是由槲皮素（Quercetin ）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose ）〔葡萄糖（Glucose ）与鼠李糖（Rhamnose ）组成的双糖〕脱水形成的苷。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子结晶水，熔点为174~178℃，不含水的芦丁熔点为188℃。
含2分子结晶，熔点为313~314℃。
水溶解度：冷水中为1:10000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
不含结晶水的槲皮素熔点为316℃，它们的结构式如下：OHOHO O OHO OOH OHOH OHOH CH 2CH 3OH O O OH芦丁（Rutin ）O OHO OH OHOH槲皮素（Quercetin ）芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。
2 实验内容与步骤2.1仪器与试剂仪器：紫外灯 蒸馏装置一套 250mL 烧杯（一只） 500mL 烧杯（两只） 100mL 三角瓶（两只） 纱布 色谱柱（Ф1.5×30cm ） 玻璃板 硅胶G 板试剂：甲醇 70%工业乙醇 槐米 层析用聚酰胺（60-100目） 芦丁标准样2.2 芦丁的提取将粉碎好的槐米10g 倒入500mL 烧杯中，加沸水150mL ，煮沸1h(在煮沸的过程中可补加水），趁热用纱布过滤，残渣加入100mL 水，再煮沸30分钟，共进行两次，将两次滤液混合，放置，冷却，即有大量黄色沉淀生成，抽滤。
实验 槐米中芦丁的提取、分离与鉴别
实验一槐米中芦丁的提取、分离与鉴别一、实验目的（1）掌握黄酮类化合物的提取原理和方法。
（2）掌握黄酮类成分的主要理化性质及鉴别方法。
二、实验原理芦丁(Rutin)亦称芸香苷(Rutisude)，广泛存在于植物界中。
现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。
尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达23.5%，槐花开放后降至13.0%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。
芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性，临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。
芦丁(Rutin)为淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。
溶解度情况如下：水：1:10000(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:300(冷)，1:30(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。
可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。
芦丁可溶于热水，难溶于冷水，其分子结构中具有较多的酚羟基，显弱酸性，在碱液中易溶解，而在酸性条件下，易析出沉淀，故本实验采用碱溶解酸沉淀的方法自槐米中提取芦丁。
再利用其在冷热水中溶解度的差别采用沸水为结晶溶剂进行精制。
利用芦丁可被稀酸水解，生成苷元和糖，通过颜色反应、薄层层析等方法进行检识和确认芦丁。
三、实验内容（一）芦丁(芸香苷)的提取1. 取1.5g石灰粉（CaO），置于干净的小研钵中，加入10mL水研成乳液备用。
称取槐米20g，于1000m1烧杯中，加0.4%硼砂水溶液200mL，在搅拌下小心加入石灰乳调至pH 8～9，加热至微沸，维持pH值20-30分钟，趁热抽滤，弃去滤渣，冷至60-70℃用浓盐酸调至pH4-5，放置过夜，减压过滤，得粗芦丁（滤饼用水洗3-4次），干燥后得粗品。
槐米中芦丁的提取分离与鉴定
的
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液
纸 色 谱
显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
鉴
定
新华一号滤纸
标本缸 倒入缸内CH约EN3LI 0毫升的展开剂
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芦丁的提取分离与鉴定
糖 的
标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分 液漏斗中，平衡后取上层备用。
CHENLI
7
芦丁的提取分离与鉴定
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OH
OH
HO
O
OH
OH
O
O
O C H 2O
O OH
用于治疗毛细管脆弱引 起的出血病，并用作高 血压的辅助治疗剂。
OH OH
OH OH
芦丁
CHENLI
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芦丁的提取分离与鉴定
OH
OH
3' 4'
HO
O
性状：黄色针状结晶（稀乙醇）。
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溶解度：冷乙醇中1:300，热乙醇中
天然产物提纯实训项目一槐米中芦丁的提取分离与鉴定项目一槐米中芦丁的提取分离与鉴定项目一芦丁的提取分离与鉴定?子项目一槐米中芦丁的提取?子项目二槐米中芦丁的精制?子项目三水解芦丁得到槲皮素?子项目四芦丁和槲皮素的鉴别实训目的?能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对槐米中的芦丁进行提取分离?能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进行水解能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进行水解薄?能够运用纸色谱薄层色谱法和化学法鉴别芦丁槲皮素和糖类化合物得到两个单体化合物ohoh实训结果ohohoohoohoh57334槲皮素ohoohooohch2oooh芦丁槲皮素oohohohoohohoh相关内容介绍芦丁的提取分离与鉴定槐花槐米槐花为豆科植物槐sophorajaponical
中药化学 实验 槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
取样品的乙醇溶液1ml加1%的FeCl3乙醇溶 液2~3滴，观察颜色。 ③中性醋酸铅反应
取样品的乙醇溶液1ml加5%的中性醋酸铅溶 液1~2滴，观察现象。
④α-萘酚、浓H2SO4反应 取样品的乙醇溶液1ml加α-萘酚试液1~ 2滴
后振摇，然后沿管壁加适量浓H2SO4，观察两界 面处的颜色。
（2）AlCl3纸斑反应 取样品的乙醇溶液，在滤纸上各滴一个点，
干燥后置紫外灯下观察荧光。然后在原斑点上 喷AlCl3，干燥后重新置紫外光灯下观察荧光。
5、糖的检识（径向纸层析） 展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5）上层 显色剂：邻苯二甲酸-苯胺试剂（95℃烘干） 样 品：水解浓缩液 对照品：葡萄糖、鼠李糖的水溶液 展开方式：径向 结 果：对照样品斑点及对照品斑点位置并计
实验
槐米中芦丁的提取、分离、鉴定及槲皮素的制备
[实验目的]
1.掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮苷、 苷元的结构研究的一般方法；
2.熟悉根据溶解性差异来提取分离芦丁的 方法；
3.了解芦丁紫外光谱的测定方法。
实验原理
➢提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异； ➢纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 ➢制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进
行酸水解得到槲皮素
[实验流程]
1、提取
槐米（20g）
加水煎煮两次，趁热过滤合并煎
沉淀
自然干燥
粗品芦丁
2、精制
粗品芦丁
加甲醇15~20ml，水浴加热（空气冷凝） 溶解， 至无黄色物，趁热过滤。
沉淀
滤液
放置，待结晶析出，抽滤至干。
沉淀
槐花米中芦丁的提取分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取分离与鉴定实验一预试；苷的碱提取，酸沉淀；薄层层析铺板。
实验二产品的精制:重结晶；苷的水解。
实验三苷、苷元的定性鉴定；甙、甙元的TLC鉴定；糖的纸层析鉴定。
槐花米中芦丁的提取分离与鉴定（一）预试；苷的碱提取，酸沉淀；薄层层析铺板。
（二）产品的精制:重结晶；苷的水解。
（三）苷、苷元的定性鉴定；甙、甙元的TLC鉴定；糖的纸层析鉴定。
教学目的：1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。
2．掌握化学鉴别试验、苷水解、薄层层检查等手段在苷类结构鉴定上的作用。
已知重要成分及其性质1．芦丁（芸香苷，rutin）淡黄色针晶，水中结晶者含3分结晶水，C27H30O16·3H2O 100mmHg和110℃加热12小时后，变为无水物，无水物于25℃变棕，115～7℃软化，214～5℃发泡分解，1g芦丁溶于约300ml冷水，200ml沸水，7ml沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。
2．槲皮素（Guereetin）为芦丁的苷元，C15H10O7，MW302.23；含二分子结晶水为黄色针晶，（稀乙醇），5～7℃失水，314℃解，1g溶于290ml无水乙醇、23ml沸乙醇，溶于冰醋一般在碱水中溶解显黄色，几不溶于水。
OHOOR OHOHR=glu rha芦丁R=OH槲皮素3．皂苷（Saponin）粗品为白色粉末，mp 210℃～20℃（dec）。
易溶于吡啶。
能溶于200倍的甲醇，酸水解得下列两种苷元及糖。
糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。
（1）白桦酯醇（Betulin）无色针晶，mp215～2℃，能溶于醋酸，丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。
HO OHHOCH2OH（2）槐花二醇（Sophoradiol）无色针晶，mp219~20℃或224℃，溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇、难溶于水。
整套实验的过程：预试——提取分离——鉴定实验一预试；甙的碱提取，酸沉淀实验目的通过系统预试，了解检品中含有哪些类型的成分，可能含有哪些化学类型的成分，为进一步提取分离有效成分提供线索。
实验二槐米中芦丁的提取分离及鉴定(一)
实验目的
1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取 黄酮类化合物的原理及操作。 2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过 程中防止甙水解的方法。
实验原理
本实验主要是利用芦丁中含有较多的酚羟基， 可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芦丁结晶 的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对 冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
实验报告
按照实验报告要求认真填写，并认真完成下 次实验的预习《实验二 槐米中芦丁的提取、 分离与鉴定（二）》——芦丁的水解及槲皮 素精制，同时了解槲皮素乙酰化物的制备方 法。
课外作业
1．本实验提取过程中应注意哪些问题？ 2．根据芦丁的性质还可采用何种方法进行提 取？简要说明理由。
仪器、材料与试剂
槐米、活性炭、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、 2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、冰醋酸、 蒸馏水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化 铝乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、 广泛pH试纸、中速层析滤纸等。
实验步骤
（一）提取： 称取槐米30g，在乳钵中研碎后，投入300ml0.4％硼砂溶液 的沸水溶液中煮沸2-3分钟，在搅拌下加入石灰乳调pH9，煮 沸40分钟（注意添加水，保持原有体积，保持pH8~9），趁 热倾出上清液，用棉花过滤（或用四层纱布过滤）。残渣加 100ml水，加石灰乳调pH9，煮沸30分钟，趁热用棉花过滤 （或用四层纱布过滤），二次滤液合并。滤液保持在60℃， 加浓HCl，调pH2-3，放置过夜，待析出结晶，过滤，滤饼 用蒸馏水洗至pH5-6，抽干，置空气中晾干，得粗制芦丁， 称重，计算得率。 （二）精制： 将芦丁粗品悬浮于蒸馏水中，煮沸至芦丁全部溶解，加少量 活性炭，煮沸5-10分钟，趁热抽滤，冷却后即可析出结晶， 抽滤至干，置空气中晾干，或60~70℃干燥，得精制芦丁， 称重，计算得率。
槐米中芦丁的提取分离和检识及槲皮素的制备
槐米中芦丁的提取分离和检识及槲皮素的制备杨翊涵（2013级中药学一班）【摘要】本文整理总结了两次实验的操作过程与实验结果。
包括从槐米中提取芦丁、芦丁的分离和检识，以及槲皮素的制备和检识。
通过碱溶酸沉的方法提取芦丁，再利用稀酸水解生成槲皮素。
通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物的提取分离的原理和操作。
熟悉紫外光谱在黄酮结构鉴定中的应用。
通过芦丁的结构检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法熟悉重结晶技巧。
了解和掌握黄酮类化合物的一些主要性质和鉴定方法。
【关键词】芦丁、槲皮素、提取分离、检识鉴定、结构、性质。
1. 1 芦丁的提取原理利用芦丁结构中含有多个酚羟基，呈酚酸性，能在碱水中溶解的性质，可用碱性溶剂进行提取，提取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法）。
也可利用芦丁在冷水中溶解度小，在热水中溶解度大的性质进行提取。
1.2. 芦丁的分离原理利用芦丁结构在冷乙醇中溶解度小，在热乙醇中溶解度大，以及在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质分离。
芦丁用溶剂加热溶解后，趁热抽滤，滤液放冷后能析出而达到分离的目的（如不纯可再重复操作进行分离）。
也可采用醇溶水沉法进行精制。
1.3. 芦丁的鉴定原理（1）利用吸附薄层色谱的分离原理，芦丁与芦丁对照品在同一条件下进行展开，显色，以达到鉴定芦丁的目的。
（2）通过专属的化学显色反应（如三氯化铝显色反应），确定芦丁的成分类型（黄酮类）。
1.4 实验原理芦丁浅黄色针状结晶，难溶于冷水，可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素黄色结晶，能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
芦丁为黄酮苷，分子中具有酚羟基，显酸性，可溶于稀碱液中，在酸液中沉淀析出，可利用此性质进行提取分离。
槐米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐米中芦丁的提取、分离与鉴定（一）一、实验目的1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
二、实验原理芦丁：浅黄色针状结晶，mp174℃-178℃。
溶解度：1：8000；热水1:200；冷乙醇1:300；热乙醇1:30；冷甲醇1:100；热甲醇1:10.槲皮素：黄色结晶，mp313℃-314℃（2分子结晶水），能溶解于冷乙醇（1:650），易溶于沸乙醇（1:60），可溶于甲醇、乙酸乙酯等；难溶于水，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。
本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基，显弱酸性，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
三、药品材料槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸四、实验操作芦丁的的提取和精制芦丁的提取：取槐米20g置500ml烧杯中，加入沸水400ml及1g硼砂，搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟（注意保持PH8-9），并随时补充蒸发掉的水分，趁热用双层纱布滤过，收集滤液，药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟，合并两次滤液。
浓缩至1/2体积，滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5，静置一周，析出芦丁。
五、实验说明及注意事项1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁，收率稳定，且操作简便。
在提取前应注意将槐米捣碎，使芦丁易于被热水溶出。
槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。
PH应严格控制8-9，不得超过10,。
因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芦丁水解破坏，使提取率明显下降。
酸沉淀时PH4-5，不宜过低，否则会使芸香苷成烊盐溶于水，降低了收率。
2、提取过程中加入硼砂作用：保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芦丁不受损失。
槐米中芦丁的提取、分离与鉴定（二）一、实验目的1、掌握芦丁水解生成苷元的方法及二者之间的分离。
综合实验_槐花米中芦丁的提取与鉴定(给学生)
综合实验槐花米中芦丁的提取与鉴定（一）实验目的(1)通过芦丁的提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。
(2)掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷的检识方法。
(3)掌握薄层层析法的操作。
(4)掌握由芦丁水解制取槲皮素的方法。
（二）实验原理芦丁((rutin)亦称芸香苷（rutinoside），为黄酮苷，广泛存在于植物中，其中以槐花米(为槐树Sophora japnica，的花蕾)和乔麦叶中含量较高。
芦丁的主要药理作用有抗炎作用、维P样作用及抗病毒作用，具有维持血管抵抗力，释低其通透性，减少脆性的作用；对脂肪肝有去脂的作用，与谷胱甘肽合去脂作用更明显；对于放射性伤害所引起的出血症也有一定治疗作用；临床上只要作防治高血压的辅助药物，毛细血管性止血药。
芦丁水解后可生成槲皮素，槲皮素有一定的平喘作用；此外还有降低血压，增强毛细血管抵抗力，减少毛细血管脆性，降血脂，扩张冠动脉，增加冠状动脉血流量的作用。
槐花米中含芦丁8%~28%，槐花米甲素sophorin A 14% ，槐花米乙素sophorin B 1. 25%，槐花米丙素sophorin C 0. 35%，也含槲皮素quercetin、白桦脂醇betulin，槐二醇sophoradiol等。
本实验以常用中药槐花米为原料，对其主要成分芦丁进行提取分离及鉴定。
根据芦丁分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提液加酸后加酸酸化则芦丁游离析出(碱溶酸沉法)，然后也可通过快速柱层析法对粗品进行纯化。
(三)实验步骤1.芦丁的提取（1）于250mL烧杯中加入120 mL石灰水溶液，0. 5 g硼砂，置于石棉网上加热至微沸后，加入10g槐花米粗粉，保持微沸60 min(不断搅拌)后，趁热用纱布包裹挤压过滤。
滤渣再用100mL石灰水溶液同法操作一次。
合并滤液，然后在60∽70℃保温情况下，以15%盐酸液调节pH为3∽4。
槐米中芦丁的提取和精制()实验报告
试验【2 】一.槐米中芦丁的提取.精制和判定（一）试验目标请求1.制备芦丁,供药用.2.经由过程芦丁的制备,控制黄酮类化合物的提取分别的道理和操作.3.熟习重结晶技能.4.懂得和控制黄酮类化合物的一些重要性质和判定办法.（二）试验的根本道理1.芦丁的提取道理应用芦丁构造中含有多个酚羟基,呈酚酸性,能在碱水中消融的性质,可用碱性溶剂进行提取,提取液加酸后可沉淀析出（碱溶酸沉法）.也可应用芦丁在冷水中消融度小,在热水中消融度大的性质进行提取.2.芦丁的分别道理应用芦丁构造在冷乙醇中消融度小,在热乙醇中消融度大,以及在热水中消融度大,在冷水中消融度小的性质分别.芦丁用溶剂加热消融后,趁热抽滤,滤液放冷后能析出而达到分别的目标（如不纯可再反复操作进行分别）.也可采用醇溶水沉法进行精制.3.芦丁的判定道理（1）应用吸附薄层色谱的分别道理,芦丁与芦丁对比品在统一前提下进行睁开,显色,以达到判定芦丁的目标.（2）经由过程专属的化学显色反响（如三氯化铝显色反响）,肯定芦丁的成分类型（黄酮类）.(三)试验内容1.用碱提法.水提法.醇提法提取槐米中芦丁.2.用酸沉法和冷却过饱和法分别芦丁.3.溶剂重结晶精制芦丁.4.薄层色谱法和显色反响判定芦丁(四) 试验药材仪器与试剂1. 试验药材槐米20g.2. 仪器：磁力加热搅拌器.扭转蒸发仪.破碎摧毁机.500ml烧杯,1000ml烧杯,50ml烧杯,250ml园底烧瓶.500ml园底烧瓶.100ml量筒.50ml量筒.100ml锥形瓶.50ml锥形瓶.研钵.移液管.减压过滤装配,布氏漏斗,抽滤瓶.层析缸等.3.试剂：硼砂.氧化钙. HCI.三氯化铝.甲醇.乙醇.乙醚.丙酮.甲酸.滤纸.PH试纸等.（五）试验步骤1.提取（水提取法）称取槐米粗粉20g,在研钵中研碎后放入500ml烧瓶中,加水200ml,用磁力加热搅拌器加热煮沸30min,趁热过滤.残渣同法操作一次,归并两次滤液,放置冰箱中析晶,待全体析出后,减压抽滤,用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,抽干,得粗制芦丁,湿润,称重,盘算得率.2.精制（醇-水重结晶法）取粗制芦丁1g,置于250ml园底烧瓶中,加80%乙醇30ml加热回流15分钟,趁热抽滤.滤液置250ml 烧杯中,向滤液中加蒸馏水（约3~4倍量）至溶液呈显著混浊,室温放置,抽滤得精细芦丁.用少量蒸馏水洗涤芦丁结晶,晾干,称重.(六) 进程与现象记载Day 1 （2011-05-07）1.提取①称取研碎的粗槐米20.02g,组装仪器.②原料放入500mL烧瓶中加水200mL（1-2）,磁力搅拌加热.烧瓶中为咖啡色悬浮液,有甘苦气息,沸腾前不断产生吝啬泡上,液体中有显著漩涡（1-3）.102℃沸腾,产生大量气泡,药渣翻腾,漩涡被气泡隐瞒（1-4）.加热进程中时常停滞沸腾,续略升温2~3℃.跟着时光的延伸,液体色彩加深.煮沸规程中应控制液量,过少难以提出药品,过多轻易喷出瓶口.③最初用抽滤法分别残渣（1-5）,但是溶液很稠且含糖分较多,难以流下（1-6）,并且易壅塞和冲破滤纸,还逐渐冷却.后改用离心法,5000r,15min(1-7),后果略好,但是溶液照样冷却,消融的提取物较少.滤液为深黄色色,粘稠,气息浓重甘甜.④再次将滤渣至于放入500mL烧瓶中加水200mL磁力搅拌加热30min,液体色彩略比第一次深.⑤将两次得到的浸液（约300mL）收集放入冰箱备用.Day 2 （2011-05-08）2．精制1.将粗提物抽滤（1-7）（1-8）（1-9）,湿润得粗制芦丁（1-10）.2.取粗制芦丁1.008g,置于250ml园底烧瓶中,加80%乙醇30ml,加热回流15分钟（1-11）,加热前没有充分疏散固体粗提物,趁热抽滤（1-12）,得到黄色油状液体（1-13）.2.另扭转蒸发粗提物的滤液（1-14）,没有产物.Day 3（2011-05-14）3.判定（1）点滴显色反响从放置一周的粗提物中取芦丁的甲醇溶液（供试液）分别点在滤纸上,挥去溶剂,紫外照耀,光接收显著（1-15）,然后分别添加供试液芦丁的甲醇溶液和显色剂2%三氯化铝乙醇溶液,显黄色（1-16）,在紫外灯下λ365nm不雅察有显著亮斑（1-17）.（2）薄层色谱判定吸附剂：硅胶GF254薄层板（5.0cm X 10.0cm）.样品：克己芦丁（用甲醇消融,浓度约1mg/ml）对比品：芦丁对比品的甲醇溶液.睁开剂：三氯甲烷-甲醇-甲酸（7∶3∶0.5）显色：a.先在可见光下不雅察,然后在紫外光下不雅察,有显著紫外接收.（365nm紫外灯下不雅察）b.遮挡硅胶板左侧喷三氯化铝试剂（1-18）,365nm紫外灯下不雅察,右侧有显色剂呈黄色,左侧有显著紫外接收（1-19）.4 .留意事项(1) 硼砂因能与芦丁中的邻二酚羟基联合,起破坏邻二酚羟基,不被氧化损坏的感化.试验证实,提取时参加硼砂,产品的质量会好些.(2) 石灰乳既能达到碱消融提取芦丁的目标,还可以除去槐米中大量的粘液质和酸性树脂（形成钙盐沉淀）,但PH不能过高和长时光煮沸,因为会导致芦丁的水解而开环和形成钙鳌合物,影响产品的质量和产率.(3) PH过低（酸性太强）会使芦丁形成洋盐而收率下降.(4) 称量芦丁时,先将带滤纸的漏斗称重,再将盛样品的带滤纸的漏斗称重,差重即为样品的重量. （七）成果盘算及剖析产率小漏斗+滤纸重29.69g抽滤后小漏斗+滤纸+样品重30.20g样品净重0.51g产率=（0.51/1.008）×100%=50.60%比移值Rf=3/5.75=0.522剖析：1.水提法不能充分消融芦丁;2.精制时粗提物集合成固体颗粒,没有充分消融;3.抽滤.转移等进程的损掉.（八）心得领会第一次做如许长时光的试验,逐渐爱好上了试验室如许安静的氛围,在这里做试验,只须要存眷操作和试验进程,思虑.剖析反响机理和得到某个成果的原因,不须要斟酌试验之外的那些世俗和喧哗.1-1 1-2 1-31-5 1-61-8 1-91-11 1-141-12 1-151-17 1-181-192-1 2-2 2-32-43-1 3-2 3-3 3-4 3-5 3-63-7 3-8 3-9 3-10 3-11 3-12 3-13。
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需要的仪器设备
每组需要抽滤设备（需要1000ml的抽滤瓶）、 滤纸、 玻璃棒、1000ml烧杯、加热回流设 备（电热套、冷凝管、烧瓶）、小烧杯、浓 硫酸、浓盐酸
芦丁的提取分离与鉴定
提 取 与 精 制
第一次实验所得滤液 抽滤，少量水洗涤沉淀至中性 滤液 沉淀（粗品芦丁）
重结晶 取粗制芦丁3g,加蒸馏水 400ml,煮沸10分钟后，趁 热抽滤 滤液
天然药物化学实训
项目一 槐米中芦丁的提取分离 与鉴定
实训目的
能够运用碱溶酸沉法和结晶法的操作技术对 槐米中的芦丁进行提取分离 能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进 行水解 能够运用纸色谱、薄层色谱法和化学法鉴别 芦丁、槲皮素和糖类化合物
实训结果
得到两个单体化合物
OH OH
OH OH 3' HO 7 5 3 OH OH O O 4'
新华一号滤纸 标本缸
倒入缸内约30毫升的展开剂
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 色 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点) 谱 鉴 定 试验记录： 粘附纸色谱，并计
算斑点的Ｒf值 当溶剂走到溶剂前沿6－ 8cm即可，约需40分钟
１ ２ ３
标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用。
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
思考问题
1、芦丁是？苷（ N- 苷 、O-苷、S-苷or C苷? 2、苷键的裂解可以用什么方法 ？最常用的方 法是？ 影响酸水解速度的因素有哪些？ 2、芦丁水解后的产物是什么？ 3、如何进行苷类酸水解操作，如何分离得到 苷元成分？
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三
水解芦丁得到槲皮素
实验记录
颜色 样品 芦丁 槲皮素
直接观察 日光 UV
AlCl3 喷雾 日光 UV
R f值
注意：硅胶预制板，用之前105度烘半个小 时。
实验规则
1、预习实验内容：要明确实验目的与要求。对处方 中药物性质、配制原理、操作步骤、操作关键等， 做到“心中有数”，并合理安排实验时间。 2、遵守实验纪律：应保持实验室内肃静，不得无故 迟到或早退，不得擅离实验操作岗位，甚至高声 谈笑。如发生差错事故或异常现象，应随时报告 指导教师，查明原因，及时解释。注意安全，严 防火灾、烧伤或中毒事故发生。
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
性能：苦，性微寒。 功效：凉血止血、清肝泻火 应用：用于便血、痔血、血痢、崩漏、吐血、 衄血、肝热目赤、头痛眩晕等。 主要含有芦丁、槲皮素，还含少量皂苷类及多 糖、粘液质等。近代研究表明槐米含芦丁可高 达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁的提取分离与鉴定
需要配制的试剂: 1 苯胺—邻苯二甲酸试剂配法：苯胺0.93g和邻苯二甲酸 1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中。 （我们实验需要配 100ml）(用分液漏斗中加入50ml水和 100ml正丁醇震摇后 静置取上层即为水饱和的正丁醇） 2 10%α-萘酚乙醇溶液 25ml 3 2%三氯化铁乙醇溶液 20ml 4、展开剂：醋酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）（我们实验需要 配300ml 5、5组配一瓶配200ml正丁醇-乙酸-水（4：1：5）放到分液 漏斗中，平衡后取上层备用 配两瓶 6、 2%AlCl3乙醇溶液 100ml 7、硅胶预制板，用之前105度烘半个小时。
实验规则
5、保持室内整洁：学生进入实验室必须穿戴工作衣 帽。实验完毕应将本组实验台、实验架等整理洁净方 可离开。实验小组轮流值日，主要负责实验室内、走 廊地面、门窗的卫生整洁，以及废物缸的清倒工作， 将水、电门窗关好，经指导教师验收后再离开实验室。 6、写好实验报告：实验报告是考查学生分析总结实 验资料能力和写作能力的重要方面，亦是评定实验成 绩的主要依据
试验记录
试剂
盐酸-镁粉反 应 Molish反应 FeCl3反应 试验现象 芦丁 槲皮素
结论及解释
芦丁的提取分离与鉴定
定 性 反 应
黄酮母核 盐酸-镁粉反应 将样品溶液1ml，先滴加1－2滴浓盐酸再加入少许 镁粉振摇，1-2min内，观察颜色变化。（注意顺序）
Molish反应
苷类
将样品溶液1ml，加入与样品等体积10%α萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加适量浓 硫酸（约2ml），至分层注意观察两界面产生的 变化。（不要摇动）
实验规则
3、杜绝差错事故：称取药品时，要在拿取、称量 和放回时进行核对。称量完毕应盖好瓶塞，放回原 处。实验成品应写明名称、规格、配制者、配制时 间及班组号，交实验指导教师验收。
实验规则
4、爱护仪器药品：实验仪器、药品应妥善保管、存 放和使用。如有破损缺少，必须立即报告实验指导 教师，并填写仪器药品报损表，然后到准备室补领。 实验小组合用的仪器药品，每次实验前应检查核对 后再取用。实验指导教师对破损缺少的仪器药品应 查明原因，按本院校对仪器药品破损处理办法提出 处理意见。 打破玻璃器皿和试 备要赔偿！
精制芦丁1.5g 加入2%硫酸或者 (1mol/lHCL)100ml，加热回 流30min(从有液滴滴下开始 计时），放冷静置，抽滤
沉淀 粗品槲皮素
注意观察整个过程的现 象！( 溶液澄明度和颜色 的变化)为什么出现这种 情况？
滤液
作糖的检识用
水解
抽滤
洗涤沉淀
干燥
称重
具体做法：芦丁水解方法： 取精制芦丁1.5g，研细后 置于250ml圆底烧瓶中，加入2％硫酸或 （1mol/lHCL)100m1，加热回流 30min，瓶中浑浊 液逐渐变为澄清的棕黄色液体，最后生成鲜黄色沉淀。 放冷沉淀，抽滤，保存滤液（应为澄清无色液体）， 作为糖的检查，沉淀物为芸香苷苷元（槲皮素），用 蒸馏水洗至中性，抽干水分，晾干，称量。得粗制槲 皮素，再用乙醇重结晶得精制槲皮素。 1mol/lHCL配法:取约90毫升浓盐酸定容至1000毫升
注意观察现象：未加热时，瓶内为混悬
液（芦丁不溶于冷水），加热后，混悬 液逐渐变为澄清液（芦丁易溶于热水）， 继续加热，有鲜黄色沉淀析出（槲皮素不 溶于水）
滤液处理： 取芦丁水解后的滤液15m1，加 氢氧化钡粉 中和至中性（搅拌下进行）滤去白色的硫酸 钡沉淀(漏斗滤纸），滤液在沸水浴上蒸干后， 加1－2 ml乙醇溶解，作为糖的供试液。 （如果加 氢氧化钡加过量后可以加少量的硫 酸回调pH)
所需的试剂和设备
1、样品：槐花米 试剂：硼砂、CaO、浓盐酸 仪器：每一组需要： 电炉、1000ml烧杯、 小烧杯、 500ml烧杯、玻璃棒、pH试纸、玻 璃漏斗、滴管 公共需要：棉花、天平
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
提 取
槐花米 （25g） 加0.4%硼砂沸 水200ml
槲皮素
子项目一 槐米中芦丁的提取
思考问题
1、加入硼砂目的是什么？ 2、为什么要加入石灰水，在芦丁的提取中能 起到什么作用？ 3、酸沉pH值为什么不宜过低？
那个天然产物的实验，要算下得率,粗芦丁重 量/槐米的重量； 精制芦丁的重量/粗芦丁的 重量；并且计算下，每克芦丁分子中槲皮素 和糖所占的百分比。
芦丁的提取分离与鉴定
定 芦丁供试品溶液：取精制芦丁约5mg，用5ml甲 性 醇（无水乙醇）使溶液，备用。 反 应 槲皮素供试品溶液：取粗槲皮素约5mg，用5ml
甲醇（无水乙醇）使溶液，备用。
其余试剂：镁粉、浓盐酸、10%α -萘酚溶液、浓硫酸、2% 三氯化铁乙醇溶液 准备3支试管（一个空白管， 样品用蒸馏水代替，一个是芦丁、一个是槲皮素）
芦丁的提取分离与鉴定
子项目三 芦丁 和槲皮素的鉴别
糖 的 鉴 定
残渣
水解所得滤液20ml
用饱和Ba(OH)2调PH值至中 性，折叠滤纸过滤
滤液 蒸干，放冷 加2-3ml乙醇溶解 供试品溶液 纸色谱
芦丁的提取分离与鉴定
糖 的 纸 色 谱 鉴 定
标准品：葡萄糖、鼠李糖
展开剂：正丁醇-乙酸-水（4：1：5）上层液 显色剂：苯胺—邻苯二甲酸试剂。 105℃烘10min显色(显棕色或棕红色斑点)
所需要的药品和设备：氢氧化钡、葡萄糖、鼠李糖、 正丁醇、乙酸、苯胺、邻苯二甲酸盐、无水乙醇、甲 醇、乙酸乙酯、甲酸、AlCl3、镁粉、浓盐酸、 α-萘酚溶液、浓硫酸、三氯化铁、紫外灯、新 华1号滤纸、点样毛细管、水浴锅、硅胶G预制板
11块、分液漏斗 喷雾器几个
每组需要：1个蒸发皿、玻璃漏斗、玻璃棒、10ml试 管8支、2个小烧杯、胶头滴管
HO
O
O OH OH O OH OH OH OH OH O CH2O O
槲皮素
芦丁
项目一
芦丁的提取分离与鉴定
子项目一 槐米中芦丁的提取
子项目二 槐米中芦丁的精制
子项目三 水解芦丁得到槲皮素
子项目四 芦丁和槲皮素的鉴别
芦丁的提取分离与鉴定
相关内容介绍
槐花 槐米
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L．的干燥 花及花蕾
残渣
冷却（可以用流动水快速冷却）静置 精制芦丁（备用） 抽滤， 干燥、称重
食品091班得到的精制芦丁大约（粗芦丁4克 精制后大约？）
减压抽滤装置
减压过滤操作 减压过滤也就是抽滤,利用抽气泵使抽滤瓶中的 压强降低,达到固液分离的目的. 装置:布式漏斗,抽滤瓶,胶管,抽气泵,滤纸 过程: 1、安装仪器,检查布式漏斗与抽滤瓶之间连接是否 紧密，抽气泵连接口是否漏气； 2、修剪滤纸，使其略小于布式漏斗，但要把所有 的孔都覆盖住，并滴加蒸馏水使滤纸与漏斗连接紧密； 3、将固液混合物转移到滤纸上； 4、打开抽气泵开关，开始抽滤。 5、过滤完之后，先抽掉抽滤瓶接管，后关抽气泵。 （防止倒吸）