常见细菌鉴定
胡方芳-临床微生物标本常见细菌培养和鉴定
三 细菌鉴定的基本依据
• 基本结构：形态与染色 • 生长特性：培养特性 • 细菌代谢产物：生化反应： • 细菌免疫学特征：血清学试验： • 遗传特征：分子生物学实验 • 其他：质谱分析技术、色谱分析技术等
四 细菌鉴定基本步骤
• （一） 挑选可疑菌落 • （二） 涂片染色 • （三） 生化反应试验 • （四） 血清学试验 • （五） 其他相关试验
• 粪便：接种血平板、SS平板和麦康凯平板 置普通温箱 35℃孵育
• 脓液及创伤感染分泌物：血平板 置普通温箱 35℃孵育
• 生殖道：接种血平板和淋球菌平板 置CO2温箱 35℃孵 育
一 常见细菌培养
• 培养特性： 1 适宜生长温度：大多数病原菌35-37℃，某些在
低温（李斯特菌属 4 ℃ 缓慢生长）或高温下生 长 2 气体环境：需氧菌、兼性厌氧、微需氧（5%O2、 10%CO2 如肺炎链球菌、淋病奈瑟氏菌等）、厌 氧菌
菌）、辣味（金黄色葡萄球菌）等
（3）菌落溶血特征 α溶血/草绿色溶血： β溶血： γ溶血/不溶血：
链球菌的溶血现象
2 液体培养基 （1）均匀浑浊生长 （2）沉淀生长 （3）表面生长（菌膜）
（二） 涂片染色
• 染色：革兰染色：革兰阳性菌、革兰阴性菌 • 形态、大小和排列：球形、杆形、螺旋形，菌体
大小，单个、成双、葡萄状等
-
迁移生长 +
洋葱 类鼻疽 巴斯特 其他
铜绿
- 靛基质
其他
沙雷 枸橼 肠杆菌 嗜麦芽 不动 沙门 其他
+
变形杆菌
大肠
革兰阴性球菌
氧化酶（+） G- Co：
脑膜炎双Co 卡他布兰汉
淋球菌
血平板 + 巧克力 + 普通平板 （除卡他）
临床常见细菌手工鉴定和结果判断
临床常见细菌的手工鉴定和结果判断一．细菌的鉴定步骤1、鉴定的概念：将一个未知的菌株按其生物学特性，经过与所有已知菌种进行比较后划归到一个已知菌种的分析过程。
2、对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养或者该菌种在血平板上生长良好，有单个菌落可以进行生化试验。
（我们这里一般都是预先纯化培养）+––+b）G，G，c，对待鉴定的菌种进行革兰染色，3、观察形态（Gc，Gb做触酶，氧化酶实验，然后按科，属，种逐步鉴定。
要注意对待鉴定的菌种选择一个合适的鉴定系统，临床常见细菌的快速简单的鉴定系统我们都已经设计好，参考鉴定质控单。
4、按鉴定质控单的要求填写好病人姓名，年龄，性别；标本类型，标本编号，送检日期等。
另外最重要的是要填写好该菌种的菌落形态以及有无溶血。
5、复习革兰染色，触酶实验，氧化酶实验。
⑴．革兰染色：是细菌鉴定过程中最常用最基本最重要的染色方法。
首先要将待鉴定的细菌涂片，固定（目的：杀死细菌，改变细菌对染料的通透性）。
第一步：以结晶紫初染（染色液Ⅰ）第二步：以卢戈氏碘液媒染（染色液Ⅱ）乙醇脱色（染色液Ⅲ）95%第三步：用．第四步：最后用稀释复红复染（染色液Ⅳ）⑵．触酶实验(HO实验)：22a.原理：具有过氧化氢酶的细菌能催化双氧水生成水和初生态氧，继而形成氧分子出现气泡。
b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在洁净的玻片上涂开，滴加3%过氧化氢数滴，观察结果（立即有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性）。
要注意不能在血平板上进行实验，这样易出现假阳性；另外陈旧菌落要是进行实验可能会导致假阴性结果；还有不能在接种针或环上进行实验。
c.阳性对照用金黄色葡萄球菌，阴性对照用链球菌；试剂要避光置4℃冰箱保存。
d.应用：绝大多数含细胞色素的需氧和兼性厌氧细菌触酶实验阳性，链球菌属阴性。
临床常见细菌鉴定实验中我们一般用于区别葡萄球菌属（+），微球菌属（+），链球菌属（－）。
⑶．氧化酶实验（Kovac实验）：a. 原理：氧化酶又称细胞色素酶，是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
细菌的生化鉴定
综合的部分常见菌鉴别试验表1 常见产黄色素菌种的鉴别菌名氧化酶动力葡萄糖吲哚硝还ONPG麦芽糖木糖七叶苷Mac生长少动鞘氨醇单胞+ + + - - + + + + - 浅黄金色单胞菌- + + - + + + + + + 栖稻黄色单胞菌- + + - - - + + - + 嗜麦芽窄食单胞- + + + + + - + + 食醇鞘氨醇杆菌+ - + - - + + + + + 多食鞘氨醇杆菌+ - + - - + + + + + 脑膜炎败血黄杆+ - + + - + + - + V 有毒威克斯菌+ - - + - - - - （+）- 短稳杆菌+ - + + - - + - - + 洋葱伯克霍尔德+/- - + + + + + + + 产吲哚金黄杆菌+ - + + + - + - + + 食醇鞘氨醇杆菌阿拉伯阴性,甘露醇阳性,多食鞘氨醇杆菌相反。
（+），多数阳性；（-），多数阴性；V，不定；空缺的是暂时未查到确切结果。
表2葡萄球菌与其他革兰阳性球菌的鉴别菌属严格需氧四联排列紧粘琼脂动力触酶氧化酶厌氧葡萄糖产酸杆菌肽耐药呋喃唑酮耐药5.0％NaCl琼脂生长葡萄球菌属－ d －－+ － d + －+气球菌属－+ －－－－（+）－－+动性球菌属+ d －+ + －－+口腔球菌属－ d + －±－+ －－－微球菌属+ + －－+ + －－+ +注：杆菌肽0.04U/片，（+）为耐药，（-）为敏感，抑菌环10～25mm；呋喃唑酮100μg/片，抑菌环≤9mm为耐药（+），抑菌环15～35mm为敏感（-）。
葡萄球菌、动性球菌、口腔球菌和微球菌都属微球菌科。
表3常见凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定试验菌名新生霉素硝酸盐还原尿素酶甘露醇产酸*蔗糖产酸*麦芽糖产酸覃糖产酸表皮葡萄球菌S （＋）＋－＋＋－头状葡萄球菌S （＋）－＋＋－－孔氏葡萄球菌R （－）±（＋）（－）±＋溶血葡萄球菌S （＋）—V ＋＋＋腐生葡萄球菌R －＋＋＋＋＋模仿葡萄球菌S ＋＋＋＋（±）±人型葡萄球菌S ＋＋－＋＋±里昂葡萄球菌S ＋±＋＋＋＋施莱弗葡萄球菌S ＋－＋－－±华纳葡萄球菌S ±＋±＋（＋）＋注：产酸试验应加石蜡油。
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科生化鉴定实验
肠杆菌科是一类常见的革兰氏阴性细菌，可以通过一系列
生化鉴定实验来进行鉴定。
以下是一些常用的肠杆菌科生
化鉴定实验：
1. 硫代硫酸亚铁（TSI）琼脂糖培养基实验：在TSI琼脂
糖培养基上培养菌株，观察菌落的颜色和气体产生情况。
肠杆菌科细菌在该培养基上产生酸和气体，导致培养基中
的pH下降，产生黄色酸性反应。
2. 尿素水解试验：将菌株接种到尿素水解培养基上，观察
培养基的颜色变化。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生
尿素酶，将尿素水解为氨和二氧化碳，导致培养基变为粉
红色。
3. 大肠杆菌甲醛试验：将菌株接种到含有甲醛的培养基上，观察培养基的颜色变化。
肠杆菌科细菌中的大肠杆菌能够
利用甲醛作为唯一的碳源，产生酸和气体，导致培养基变
为黄色。
4. 气体产生试验：将菌株接种到气体产生管中，观察管内
气体的产生情况。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产生气体，如氢气和二氧化碳。
5. 青霉素酶试验：将菌株接种到含有青霉素的培养基上，
观察菌落的形成情况。
肠杆菌科细菌中的一些种类能够产
生青霉素酶，使得培养基中的青霉素失活，导致菌落形成。
需要注意的是，肠杆菌科细菌的鉴定通常需要结合多个实验结果进行综合判断，单一实验结果可能不足以确定菌株的分类。
此外，不同的肠杆菌科细菌种类可能在生化反应上有差异，因此具体的实验步骤和判断标准可能会有所不同。
一般细菌培养及鉴定结果-概述说明以及解释
一般细菌培养及鉴定结果-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分的内容可以包括以下内容：细菌是一类微小而重要的生物体，广泛存在于自然界的各个角落中，包括土壤、水体、空气以及生物体等。
它们对于生态系统的正常运行和人类的健康至关重要，具有重要的科学研究和应用价值。
在进行细菌的研究和应用之前，首先需要进行细菌的培养和鉴定。
细菌培养是指将采集到的细菌样本在合适的培养基中提供充足的营养和生长条件，使其繁殖扩增。
而细菌鉴定是指通过对细菌形态、生理生化特性以及基因组等方面进行分析和判断来确定细菌的种类和特性。
本文将重点讨论细菌的一般培养方法和鉴定方法。
在细菌培养方法方面，将介绍不同种类的培养基的配制和使用，以及培养条件的控制因素。
在细菌鉴定方法方面，将介绍常用的鉴定手段，如形态观察、生理生化实验和分子生物学技术等，以及它们的原理和应用范围。
通过对一般细菌培养和鉴定的研究，我们可以更好地认识细菌的生长规律和特性，进一步了解它们在自然界和人类生活中的作用。
同时，这些研究成果也为细菌的应用提供了技术支持，例如在医学、工业、农业等领域中的应用。
通过本文的探讨，希望能够使读者对细菌培养和鉴定有更清晰和全面的认识，为相关领域的研究和应用提供理论和实践的指导。
在继续研究细菌的过程中，我们也要注意遵守实验室的安全操作规范，确保实验的准确性和可重复性。
文章结构部分的内容可以写成如下形式：1.2 文章结构本文按照以下结构进行组织和展示：引言部分主要是对整篇文章进行一个概述和介绍，包括细菌培养和鉴定的基本概念以及研究目的。
通过引言，读者可以对文章的内容和目的有一个初步的了解。
正文部分是本文的核心内容，主要介绍了细菌培养方法和细菌鉴定方法。
在细菌培养方法部分，将会详细介绍细菌培养所需的培养基成分、培养条件和培养技术等方面的内容，帮助读者了解细菌在实验室中的培养过程。
在细菌鉴定方法部分，将会介绍细菌鉴定所需的常用技术和方法，包括形态学观察、生理生化试验、分子生物学方法等，帮助读者了解如何对分离到的细菌进行鉴定。
细菌生理生化鉴定
细菌生理生化鉴定
细菌生理生化鉴定是通过对细菌在特定生理和生化条件下的反应进行观察和分析，以确定其种类和特性的过程。
这通常包括一系列实验，涉及对细菌代谢途径、酶活性、生长条件等方面的研究。
以下是细菌生理生化鉴定的一些常见方法和实验：
1.形态学观察：
形状：观察细菌的形状，可以是球形（球菌）、杆状（杆菌）、螺旋形等。
结构：使用显微镜检查是否有胞壁、胞膜、纤毛、鞭毛等结构。
2.生理特性：
生长条件：观察细菌在不同温度、pH值和氧气条件下的生长情况。
营养需求：测试细菌对不同营养物质（碳源、氮源、矿物质等）的利用能力。
3.生化反应：
大肠杆菌的IMViC测试：Indole（吲哚）测试、Methyl Red（甲基红）测试、V oges-Proskauer（V-P）测试、Citrate（柠檬酸）测试、
4．氧化还原反应：观察细菌对不同氧化还原指示剂（如甲基红、溴亚甲蓝）的反应，推断其对氧化还原条件的适应性。
5.酶活性测试：
氧化酶：使用氧敏感指示剂观察酶的活性。
淀粉酶：利用淀粉琼脂板，观察菌落周围是否发生淀粉分解带。
蛋白酶：使用明胶板检测细菌对蛋白质的分解能力。
6.抗生素敏感性测试：确定细菌对不同抗生素的敏感性，通过纸片扩散法或肉汤稀释法进行。
7.分子生物学方法：16S rRNA测序：通过测序菌株的16S rRNA基因，进行分子水平的种类鉴定。
8.培养基选择：利用特定培养基，如MacConkey琼脂培养大肠杆菌等，根据细菌在培养基上的生长情况进行初步鉴定。
菌种鉴定方法及手段真菌细菌检测
菌种鉴定方法及手段真菌细菌检测菌种鉴定是指通过特定的方法和手段，对样品中存在的真菌和细菌进行鉴定和分类的过程。
下面将介绍几种常见的菌种鉴定方法及手段。
1.形态学鉴定：形态学鉴定是根据菌落形态、菌丝形态和孢子形态等特征来鉴定菌种的一种方法。
常见的形态学鉴定方法包括裸眼观察、显微镜观察、染色观察等。
裸眼观察主要通过观察菌落的颜色、形状、质地等特征，结合菌丝形态进行初步判断。
显微镜观察可以观察到菌丝的形态、孢子的形状、颜色等细节特征，通过比对菌种鉴定手册等资料进行鉴定。
2.生理代谢鉴定：生理代谢鉴定是通过菌株在不同培养基上的生理代谢特点来鉴定菌种的方法。
常见的生理代谢鉴定方法包括生理生化鉴定、生长温度范围鉴定、碳源利用鉴定、氮源利用鉴定等。
通过测定菌株在不同培养基上的生长速率、产酶能力、酸碱度变化、利用不同碳源和氮源等特征，判断菌株所属的种属。
3.分子生物学鉴定：分子生物学鉴定是通过检测菌株的DNA序列来鉴定菌种的一种方法。
常见的分子生物学鉴定方法包括PCR技术、基因测序、DNA指纹图谱鉴定等。
通过提取菌株的DNA，选择合适的引物进行PCR扩增，再通过基因测序获得菌株的DNA序列，通过比对菌株的DNA序列与数据库中已知的菌种进行比对，确定菌株所属的种属。
4.免疫学鉴定：免疫学鉴定是通过检测菌株与特定抗原的反应关系来鉴定菌种的方法。
常见的免疫鉴定方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹等。
通过与特定抗原结合，通过特异性抗体的反应来进行菌种的鉴定。
5.生化鉴定：生化鉴定是通过检测菌株的生化活性来鉴定菌种的方法。
常见的生化鉴定方法包括生化试剂盒、色谱分析、质谱分析等。
通过检测菌株在不同生化试剂上的产物或反应物的变化，进行菌种的鉴定。
综上所述，菌种鉴定方法及手段包括形态学鉴定、生理代谢鉴定、分子生物学鉴定、免疫学鉴定和生化鉴定等多种方法和手段。
不同的鉴定方法可以互相补充，提高鉴定的准确性和可靠性。
常见细菌系统鉴定手册(完整版)
常见细菌系统鉴定手册（完整版）引言细菌是一类微生物，其广泛存在于自然界中的各种环境中，包括土壤、水体、空气和生物体内等。
它们的存在对于生态系统的平衡和人类的健康具有重要影响。
准确鉴定细菌的种类和特性对于科学研究、临床诊断和环境保护具有重要意义。
本文档为常见细菌系统鉴定手册，旨在帮助用户了解并进行常见细菌的鉴定工作。
目录1.细菌的形态特征2.细菌的生理特性3.细菌的遗传特性4.常见细菌的鉴定方法–接种和培养方法–生物化学试验–分子生物学方法–其他鉴定方法5.常见细菌的鉴定实例6.细菌鉴定的注意事项7.总结细菌的形态特征在鉴定细菌时，首先需要观察和描述细菌的形态特征。
细菌的形态特征包括形状、大小、颜色、表面特征等。
常见的细菌形状有球菌、杆菌、弧菌、螺旋菌等。
细菌的大小通常以直径或长度来描述，颜色可以是透明、白色、黄色、红色等。
表面特征是指细菌菌落的形状、质地和触感等。
细菌的生理特性细菌的生理特性是指其在生长和代谢方面的特点。
需要关注的生理特性有气体需求、温度和pH值的适宜范围、营养要求等。
例如，一些细菌需要氧气进行呼吸，被称为好氧菌；一些细菌则无需氧气，甚至不能在氧气存在下生长，被称为厌氧菌。
细菌的遗传特性细菌的遗传特性对鉴定和分类细菌起着重要作用。
细菌的遗传物质主要是DNA，其通过突变和基因重组等方式进行遗传。
常见的细菌分类方法包括16S rRNA基因序列比对、DNA 指纹图谱分析等。
常见细菌的鉴定方法接种和培养方法接种和培养是最常用的细菌鉴定方法之一。
主要步骤包括样品的采集、接种培养基、温度和时间的控制等。
常用的培养基有肉汤、琼脂和MacConkey琼脂等。
接种后，细菌会在培养基上生长形成菌落，通过观察菌落形态和特性可以初步判断细菌的类型。
生物化学试验生物化学试验是通过检测细菌在特定条件下的代谢产物来鉴定细菌。
常见的生物化学试验包括氧化-发酵试验、酸碱反应试验和酶活性检测等。
通过观察试验结果，可以确定细菌的代谢方式和特性。
实验二常见细菌种属的鉴定
16S rRNA基因测序
对细菌16S rRNA基因进行测序，通过比对数据库中的序列信息确 定细菌种属。
其他分子生物学实验
根据不同细菌种属的基因特征，进行其他分子生物学实验，如PCR 扩增、基因芯片检测等。
04 结果分析
形态学结果分析
总结词
通过观察细菌的形态、染色特性等，初步判断细菌种属。
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02
大肠杆菌在部分样本中检出，其数量 相对较少，表明该菌在实验样本中的 存在具有一定的偶然性。金黄色葡萄 球菌、沙门氏菌、绿脓杆菌和志贺氏 菌则在部分样本中呈现出较高的检出 率，表明这些细菌种属在实验样本中 具有一定的普遍性和稳定性。
03
在鉴定的细菌种属中，金黄色葡萄球 菌、沙门氏菌和志贺氏菌属于人类致 病菌，其中金黄色葡萄球菌和志贺氏 菌可引起严重的食物中毒和腹泻等临 床症状，沙门氏菌可导致伤寒和副伤 寒等严重疾病。绿脓杆菌则是一种条 件致病菌，常引起伤口感染和败血症 等症状。
血杆菌等。
了解常见化脓性细菌种属的生物 学特性，如金黄色葡萄球菌、表
皮葡萄球菌等。
02 实验原理
形态学鉴定法
总结词
基于细菌的形态、大小、染色反 应等表型特征进行鉴定。
详细描述
通过显微镜观察细菌的形态、大 小、排列方式、染色反应等表型 特征，与已知的标准菌株进行比 较，从而确定细菌的种属。
生理生化鉴定法
对实验结果的分析与讨论
实验结果表明，部分样本中存在较高检出率的致病菌，如金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺 氏菌等，这可能会对实验参与者和环境造成潜在的健康风险。因此，在实验过程中应采取有 效的防护措施，避免交叉感染和环境污染。
细菌鉴定方法范文
细菌鉴定方法范文细菌鉴定是确诊细菌种类的过程，通常用于医学诊断、食品卫生检测、环境监测等领域。
细菌鉴定的主要目标是确定细菌属、种，并了解它们的特性和致病性。
下面将介绍几种常见的细菌鉴定方法。
1.形态学鉴定法形态学鉴定法是通过观察细菌的形态特征，比如形状、大小、旋转、着色、胞壁、胞内结构等来进行鉴定。
实验室通常使用显微镜观察细菌镜检表型，然后使用染色和培养等技术对其进行进一步确认。
例如，革兰氏染色方法可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，细菌的颜色和形态可以提供一些信息。
2.生理生化鉴定法生理生化鉴定法通过检测细菌在特定环境条件下的生理和代谢特性，来鉴定细菌。
常见的方法包括营养需求、产酶反应、氧气需求、乳酸发酵、蛋白质降解以及酵素浓度等的检测。
这种方法可以在短时间内进行，并提供一些初步的信息，例如细菌的营养类型和代谢能力。
3.免疫学鉴定法免疫学鉴定法主要是利用细菌抗原和抗体之间的特异性反应来进行鉴定。
常用的方法包括免疫沉淀试验、酶联免疫吸附试验、血凝试验和凝胶免疫扩散试验等。
这些方法可以检测其中一种细菌是否具有特定的抗原，从而确定其种属和亚型。
4.分子生物学鉴定法分子生物学鉴定法是通过检测细菌的核酸序列来进行鉴定。
这些方法包括聚合酶链反应（PCR）、核酸杂交、DNA测序等。
通过扩增和测序研究细菌的特定基因或基因区域，可以得到更精确的细菌鉴定结果，并可以用于分子进化分析和种间关系研究。
5.质谱鉴定法质谱鉴定法是使用质谱仪来检测细菌样品中的分子和离子，并通过比较其质谱图与数据库中已知细菌的质谱图来进行鉴定。
这种方法可以快速鉴定大量样品，并且对细菌种类有更高的分辨率和灵敏度。
常见细菌鉴定
血液中分离出山羊布鲁菌
布鲁菌（Brucella spp)可引起布鲁菌 病 (Brucellosis)，又称波浪热，它是人蓄共患 性全身传染病。 患者，男，35岁，因不明原因发热4个多月 后入我院。患者有进食生羊肉串史。布鲁 杆菌凝集试验阳性（1:8），血培养第10天 阳性。经培养鉴定为山羊布鲁菌。临床用 利福平0.3g，强力霉素0.1g每天两次联合使 用，6周为1个疗程，体温逐渐下降，1个月 后痊愈出院。
* *
BBA LKV BBE
BBA LKV BBE
尿 伤口或脓 百／副日咳 布鲁菌 白喉棒杆菌 serum 难辨梭菌 大肠0157 Ｂ链 杜克嗜血 军团菌 弧菌
标本和菌株 染色 需氧培基 厌氧培基
* B Mac B C Mac BBA LKV BBE CNA Regan lowe BC Cystine-tellurite ，Loeffler’s CCFA 山梨糖-Mac LIM肉汤 C+万古霉素 BCYE TCBS
一。触酶试验阳性 1。大菌落，菌体规则，大至中等，或成链状有时β溶血-考虑芽孢杆菌属。 2。菌落中等大小， β溶血，菌体中至小---考虑产单核李 斯特菌，痤疮杆菌，放线杆菌。 3。不规则革兰阳性杆菌 （1）菌落颜色：黄色--短杆菌属某些菌，粉色--马红球菌 橘红色至红色--努卡菌，红球菌属，短杆菌属某些菌。 （2）较宽分枝：努卡菌，痤疮杆菌属，红球菌属，罗菌 属，放线菌，快速生长分枝杆菌。 （3）Y型分枝杆菌：放线菌，苏黎士菌属，厄菌属，痤 疮杆菌属，马棒状杆菌，罗菌属。
可接受的临床厌氧标本
1 抽出物（用注射器） 2 前庭大腺 3 胆汁 4血 5 骨髓 6 支气管镜检查保护性毛刷 7 后穹隆穿刺术 8 输卵管 9 子宫内避孕器检查放线菌 10卵巢
常见细菌的鉴定
A，B，D，G群链球菌的鉴别试验A群B群D群G群杆菌肽+ ———CAMP —+ ——七叶苷——+ + 胆汁七叶苷——+ —黄色素—+ ——SXT ———/+ +几种草绿色链球菌的鉴定菌名溶血性αγ七叶苷胆汁七叶苷蔗糖乳糖甘露醇菊糖棉子糖精氨酸乳房链球菌血链球菌唾液链球菌缓症链球菌少酸链球菌++－+++－+－－－－－－－+++－－+++++++++－+－－－－+++－－+－+－－－+－－－D群链球菌的生物特性试验肠球菌非肠球菌粪链屎链坚忍链牛链马链6.5％NaCl ＋＋＋－－阿拉伯糖－＋－－－甘露醇＋＋－＋－山梨醇＋－－－－乳糖＋＋＋＋－葡萄球菌三个种的鉴别试验金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌血浆凝固酶＋－－甘露醇发酵＋－－新生霉素敏感性S S RA蛋白＋－－奈瑟氏菌与形态类似菌属的区别特性奈瑟氏菌布兰汉氏菌摩拉氏菌不动杆菌形态球球球杆球杆氧化酶＋＋＋－DNA －＋葡萄糖产酸＋/－－－＋/－肠杆菌科及其他科属细菌鉴定菌名O/F 氧化E 触E 硝酸盐鞭毛肠杆菌科 F －＋＋周毛/无弧菌科 F ＋＋＋单毛不动杆菌属O/－－＋－无黄杆菌属F/O/－＋＋－/＋无/周毛假单胞菌属O/－＋/－＋＋丛毛产碱杆菌属－＋＋＋周毛苯丙氨酸、葡萄糖酸阴性各属的鉴别试验埃希氏菌属志贺氏菌属沙门氏菌属枸橼酸杆菌属爱德华氏菌属结肠炎耶尔森氏菌H2S －－＋/－＋/－＋－动力＋－＋＋＋－（30以下＋）枸橼酸盐－－＋/－＋－－靛基质＋－/＋－－/＋＋－/＋赖氨酸＋/－－＋－－＋/－尿素－－－＋/－－＋/－葡萄糖酸盐阳性的各属的鉴别试验克雷伯代菌属肠杆菌属沙雷氏菌属哈夫尼亚菌属动力－＋＋＋山梨醇＋＋/－＋－DNase －－＋－棉子糖＋＋＋/－－肠杆菌属种的鉴别试验阴沟肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌产气肠杆菌格高菲肠杆菌赖氨酸－－－＋＋鸟氨酸＋＋－＋＋精氨酸＋＋－－－山梨醇＋－－/＋＋－尿素醇＋/－－－/＋－＋黄色素－＋＋－－克雷伯氏菌属种的鉴定菌种靛基质甲基红枸橼酸盐赖氨酸丙二酸盐肺炎克雷伯氏菌－－＋＋＋产酸克雷伯氏菌＋－＋＋＋臭氧克雷伯氏菌－＋－/＋－/＋－鼻硬结克雷伯氏菌－＋－－＋枸橼酸杆菌属种的鉴别试验弗劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌H2S ＋/－－－靛基质－＋＋侧金盏花醇－＋－丙二酸盐－/＋＋－平板接种法：用无菌吸管取尿液0.05ml，滴注在平板培养基上，用接种环涂抹，待表面干燥后，35℃培养过夜，计数生长的菌落数，乘以20，求出每ml的菌数。
细菌的鉴定方法
细菌的鉴定方法细菌是一类微小的单细胞生物，它们在自然界中广泛存在，并且在生物学研究和医学诊断中具有重要的意义。
为了准确鉴定细菌的种类，科学家们发展了多种方法。
本文将介绍几种常见的细菌鉴定方法。
一、形态学观察法形态学观察法是最早也是最基础的细菌鉴定方法之一。
通过使用显微镜观察细菌的形态特征，如形状、大小、颜色等，可以初步判断细菌的类别。
常见的形态学观察方法包括染色技术，如革兰氏染色和抗酸染色，以及电子显微镜观察技术。
这些方法可以帮助鉴定出细菌的基本形态特征，但并不能确定其种类。
二、生理生化试验法生理生化试验法是通过研究细菌在特定环境条件下的生理和生化特性来鉴定细菌。
这种方法通常包括对细菌的代谢能力、酶活性、氧气需求和产物等进行测试。
常用的生理生化试验包括碳源利用试验、氧气需求试验、酶活性试验等。
通过对细菌在这些试验中的反应结果进行分析，可以初步确定细菌的种类。
三、分子生物学方法分子生物学方法是近年来发展起来的一种高效、准确的细菌鉴定方法。
这种方法是通过分析细菌的基因组DNA序列和RNA序列来确定其种类。
常用的分子生物学方法包括PCR扩增技术、核酸杂交技术和基因测序技术等。
利用这些技术，科学家们可以比较细菌的基因序列与已知的细菌数据库中的序列进行比对，从而确定细菌的种类。
四、质谱法质谱法是一种基于质量-电荷比的分析技术，可以用于鉴定细菌。
这种方法通过将细菌样品离子化，然后将离子通过质谱仪进行分析，得到细菌样品的质谱图谱。
通过比对质谱图谱与数据库中已知细菌的质谱图谱，可以确定细菌的种类。
质谱法具有灵敏度高、分析速度快的优点，因此在微生物学研究和临床实验室中得到了广泛应用。
五、免疫学方法免疫学方法是利用细菌与免疫系统之间的相互作用来鉴定细菌。
常用的免疫学方法包括血清学试验和免疫染色技术。
在血清学试验中，科学家们通过观察细菌与特定抗体之间的反应来确定细菌的种类。
而免疫染色技术则是通过使用特定抗体标记细菌，然后观察染色结果来鉴定细菌。
常见病原性细菌的分离鉴定方法1
在载玻片两端滴加生理盐水一滴，用 接种环挑取待检菌(金葡菌、白葡菌)， 分别与它们研磨、混匀，滴加兔血浆1滴， 立即观察有无凝固颗粒，若有即为阳性。 此法用于测定结合型凝固酶。
二、链球菌属
葡萄球菌菌落观察（教师示教）
分别取金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球 菌培养物，用分离划线方法接种血平板， 置37℃培养，18h～24h以后观察结果。
血琼脂平板中18h-24h后形成圆形隆 起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明 的菌落，不同菌种可产生金黄色、白色或 柠檬色色素。某些菌种（株）有溶血现象。
血浆凝固酶试验（教师示教）
（学生操作 ）
小结
1.一般细菌的鉴定流程 2.化脓性球菌的鉴定方法
一般细菌的鉴定流程 细菌学检验Biblioteka 采集标本和注意事项的一般程序
分离与培养 1.培养基的选用
2.培养方法
3.无菌操作
细菌的鉴定 1.涂片，革兰染色，镜检
2.生化反应
3.血清学鉴定
化脓性球菌的生物学性状
葡萄球菌 链球菌（肺炎球菌） 奈瑟菌属
麦芽糖发酵试验：分别取脑膜炎球菌、 淋球菌接种于麦芽糖发酵管中，置 37℃24h～48h观察结果。
细菌学检验的一般程序
涂片染色
初步诊 断报告
增菌
快速诊 断试验
接种平板培养基，分离单个菌落
挑取可疑菌落
涂片染色
各种鉴定试验
生化试验 血清学实验 动物试验 药敏试验
明确诊断报告
血液标本
革兰染色 染色性 形状排列
血平板分离培养 溶血现象、革兰染色
初步诊断
临床常见细菌、真菌鉴定手册
临床常见细菌、真菌鉴定手册
以下是临床常见的细菌和真菌的鉴定手册。
1. 革兰氏阳性菌
1.1 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）
形态：球形、革兰氏阳性、非芽胞杆菌。
生长特点：菌落呈金黄色，优陀罗斯表型检测阳性。
常见感染部位：皮肤软组织感染、呼吸道感染、泌尿生殖道感染等。
1.2 肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）
形态：球形、革兰氏阳性、无产气能力。
生长特点：菌落呈透明或灰色。
常见感染部位：肺炎、中耳炎、鼻窦炎等。
2. 革兰氏阴性菌
2.1 大肠杆菌（Escherichia coli）
形态：杆状、革兰氏阴性、发酵多糖。
生长特点：菌落呈粉红色，青霉素酶试验阳性。
常见感染部位：尿路感染、胆系感染、腹部感染等。
2.2 肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）
形态：杆状、革兰氏阴性、产气能力。
生长特点：菌落呈粘稠黏液状。
常见感染部位：肺炎、泌尿生殖道感染、脑膜炎等。
3. 真菌
3.1 白色念珠菌（Candida albicans）
形态：球形、真菌。
生长特点：菌落呈白色。
常见感染部位：口腔黏膜感染、外阴温暖湿润处发病等。
3.2 马来酵母菌（Malassezia furfur）
形态：卵圆形、真菌。
生长特点：菌落呈棕黑色。
常见感染部位：头皮屑、皮脂溢出性皮炎等。
以上是常见的临床细菌和真菌的鉴定手册，希望对您有所帮助。
细菌常见的生化鉴定
细菌鉴定中常见的生理生化反应一、实验目的。
1)了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常见的生理生化反应方法。
2)了解不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况。
3)了解细菌在不同培养基的不同生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义。
二、实验原理。
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。
以此用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。
1.糖（醇）类发酵试验原理：不同的细菌含有发酵不同的糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同，产生的代谢产物也不同：有的产酸产气，有的产酸不产气。
指示剂溴甲酚紫，pH5.2黄色—pH6.8紫色，当发酵产酸时，培养基将由紫变黄。
产气可由杜氏小管中有无气泡来证明。
培养基的制备：操作：编号：在各试管上分别标明发酵培养基名称，所接种的菌名和组号，下同。
接种：取葡萄糖发酵培养基3支，按编号1支接种大肠杆菌，另1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。
同样取3支乳糖发酵培养基，1支接种大肠杆菌，1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。
将已接种好的培养基置32℃温箱中培养24h。
2.甲基红试验（M.R试验）原理：甲基红试验，pH4.4红色～pH6.2黄色，是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。
有些细菌分解糖类产生丙酮酸，丙酮酸进一步反应形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH降低到4.2以下。
有些细菌在培养的早期产生有机酸，但在后期将有有机酸转化为非酸性末端产物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大约6。
甲基红（MR）试剂：甲基红：0.04g 95%的乙醇：60ml 蒸馏水：40ml，先将甲基红溶于95%的乙醇中再加入蒸馏水即可。
试剂的制备：葡萄糖蛋白胨水培养基：在100ml邓亨氏蛋白胨水中加入1g葡萄糖即可。
步骤：将大肠杆菌和产气杆菌分别接种到葡萄糖蛋白胨水培养基中，32℃培养24h，加甲基红指示剂数滴，观察结果，呈现红色者为阳性，呈现黄色者为阴性。
常见细菌鉴定流程
葡萄糖— 麦芽糖—
硝酸盐+
葡萄糖+ 麦芽糖—
硝酸盐—
流感嗜血 杆菌
副流感嗜 血杆菌
金黄色葡 萄球菌
其他葡萄 球菌
葡萄球菌 生化
GPI 卡 或 API Strep 条
胆汁+ Optochin
敏感
脑膜炎 奈瑟菌卡他布 兰汉菌源自淋病 奈瑟菌七叶苷
+
—
菊糖+
肉汤浑浊生长
肉汤
肺炎链球菌
6.5%NaCL 肉汤
常见细菌鉴定流程
细菌生长物
革兰氏染色 油镜下观察
革兰氏阴性杆菌
巧克力平板上的阴性 小杆菌
革兰阳性球菌
革兰阴性双球菌
触酶
氧化酶
血平板及 MH 平板卫星试
+
—
验
氧化酶 +
+
—
手工非发 手工肠杆 血 平 板 血 平 板
酵菌生化 菌生化 +
+
MH — MH +
葡萄球菌形态
凝固酶
+
—
链球菌形态
葡萄糖+ 麦芽糖+
+
—
浑浊 cAMP+
沉淀 β溶血 α溶血
肠球菌
D 群链球 B 群链球 杆 菌 肽 草绿色链球菌
菌
菌
S
化脓性链球菌
常见细菌理化性质鉴定试验
常见细菌理化性质鉴定试验淀粉水解：淀粉在酸的催化作用下，能发生水解；淀粉的水解过程：先生成分子量较小的糊精(淀粉不完全水解的产物)，糊精继续水解生成麦芽糖，最终水解产物是葡萄糖。
培养基：将细菌接种在平板上，置37度温箱中培养24h，加革兰氏碘液于菌落上，观察颜色变化，呈蓝色者为阴性，无蓝色为阳性。
甲基红试验：是根据肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红这个原理进行的测验。
产氨实验（乙酰胺肉汤）原理：铜绿假单胞菌产生一种脱酰胺酶，可使乙酰胺经脱酰胺作用释放氨，滴加纳氏试剂（碘化汞钾），氨在碱性条件下与碘化汞钾作用，生成红色络合物。
操作：将纯培养物接种到装有乙酰胺肉汤的试管中，在36℃±1℃下培养20h～24h。
然后向每支试管培养物加入1～2滴钠氏试剂，检查各试管的产氨情况，如表现出从深黄色到砖红色的颜色变化，则为阳性结果，否则为阴性。
吲哚试验：是指有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚(靛基质)，经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，则为吲哚试验阳性。
过氧化氢酶试验（又名：接触酶试验）一、原理：具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和新生态氧，继而形成分子氧出现气泡。
二、试剂3%过氧化氢溶液：临用时配制。
三、试验方法挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加3%过氧化氢溶液2mL，观察结果。
四、结果于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性。
革兰氏阳性球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。
脲酶试验原理：存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。
它是一种酰胺酶、能酶促有机物质分子中酶键的水解。
脲酶的作用是极为专性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和碳酸。
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常见细菌鉴定
平装: 331页
正文语种: 简体中文
开本: 16
ISBN: 9787117119610
条形码: 9787117119610
尺寸: x x cm
重量: 540 g
百分网内容简介
《临床常见细菌、真菌鉴定手册》着重对院内感染的常见细菌、真菌及其耐药性检测和研究进行了细致阐述。
细菌耐药也是当前临床面临的重大难题之一，抗生素滥用是造成耐药性不断增长的主要原因。
微生物是进化史上最成功的例子，存在几十亿年了，新兴的微生态学理论认为，人类和微生物之间是适应而不是对抗。
院内感染菌株绝大部分是条件致病菌，当机体免疫力低下、抗生素使用不合理破坏了正常菌群，导致微生态失衡情况下，引起感染的发生、发展。
我从事微生态研究多年，深刻认识到只有从生态平衡角度，将传统的单纯“杀菌”理论转变为“杀菌”加“促菌”理论，保护人体的正常菌群，维护人体微生态平衡，提高机体免疫能力，才是控制感染的根本办法。
百分网目录
上篇临床细菌学
第一章需氧及兼性厌氧，革兰染色阴性杆菌、球杆菌、球菌及弯曲菌和螺旋菌
第一节心杆菌属
第二节放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属和色杆菌属
第三节弗朗西丝菌属
第四节布鲁菌属
第五节军团菌属
第六节假单胞菌属
第七节伯克霍尔德菌属、窄食单胞菌属、丛毛菌属和食酸菌属
第八节不动杆菌属
第九节莫拉菌属
第十节金黄杆菌属和威克斯菌属
第十一节奈瑟菌属
第十二节鲍特菌属
第十三节产碱杆菌属、无色杆菌属、苍白杆菌属和根瘤菌属
第十四节弧菌属
第十五节气单胞菌属
第十六节肠杆菌科
第十七节巴斯德菌属
第十八节弯曲杆菌属和弓形菌属
第十九节螺杆菌属
第二十节巴尔通体属
第二十一节钩端螺旋体属
第二十二节疏螺旋体属
第二十三节密螺旋体属
第二章需氧革兰染色阳性球菌及杆菌
第一节葡萄球菌属
第二节链球菌属
第三节肠球菌属
第四节气球菌属及其相关菌属
第五节李斯特菌属和丹毒丝菌属
第六节棒状杆菌属及相关菌属
第七节芽胞杆菌属和其他需氧芽胞杆菌
第八节分枝杆菌属
第九节奴卡菌属、红球菌属
第三章专性厌氧菌
第一节消化球菌属、消化链球菌属、嗜胨菌属、微金菌属和厌氧球菌属
第二节韦荣菌属、氨基酸球菌属和巨形菌属
第三节丙酸杆菌属、放线菌属、双歧杆菌属、真杆菌
属、乳杆菌属、蛛网菌属、
放线棒杆菌属和动弯杆菌属
第四节拟杆菌属、普雷沃菌属、卟啉单胞菌属、梭杆菌属、二氧化碳嗜纤维菌
属及其他革兰阴性无芽胞厌氧杆菌属
第五节梭状芽胞杆菌属
第四章支原体属、脲原体属、衣原体属、立克次体属和东方体属
第一节支原体属和脲原体属
第二节衣原体属
第三节立克次体属和东方体属
第五章埃立克体属、无形体属和相关细胞内寄生体属第一节埃立克体属与无形体属
第二节考克斯体属
第三节养障体属
下篇临床深部真菌
第六章酵母菌及酵母样真菌
第一节念珠菌属
第二节隐球菌属
第三节毛孢子菌属
第四节地丝菌属
第五节芽生裂殖菌属
第六节其他酵母及酵母样真菌第七章双相性真菌
第一节球孢子菌属
第二节芽生菌属
第三节组织胞浆菌属
第四节孢子丝菌属
第八章丝状真菌
第一节曲霉菌属
第二节青霉菌属
第三节毛霉菌属、根霉菌属主要参考文献。