紫外-荧光检测器
荧光检测器原理
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荧光检测器原理
荧光检测器是指利用荧光原理来探测光信号的仪器。
它主要由一个发射器、一个检测器和一些相关的结构和电路组成,发射器用来发射光信号,检测器用于探测发射器发出的光信号。
发射器和检测器通常是互斥的,也就是说,当发射器发出的光信号被检测器检测到时,就会切断发射光信号的电源。
荧光原理是一种光探测技术,也被称为“荧光技术”。
这种技术采用一种可以监测特定频率的精密图像信号传递系统,以探测某一特定波长范围的紫外光。
当这种特定波长的紫外光照射在某种物体上时,它会被吸收,变成其他更长波长的光,被称为“发散光”或“发射光”。
这种发射光就是荧光,可以被检测器检测到,以此来确定它穿过物体的频率和功率。
荧光检测器也可以用在安全监控用途,这种设备可以用来监控某个特定频率的荧光信号的频率和功率,用来探测区域是否存在有人。
它也可以用来检测反射荧光,通过探测反射光来判断区域里的物体。
总的说来,荧光检测器的原理就是利用发射器发出特定波长的紫外信号,当物体穿过紫外信号时,就会发出发散光或发射光,而这些发射光又可以被检测器探测到,从而获得精确的信号传输系统和区域检测技术。
紫外荧光测硫仪操作规程
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2.3如测标样(0.5 ppm)时不在范围,待仪器稳定后重新做曲线,按“2.1.1”-“2.1.3”步骤重新操作;
2.4标样保证在一年之内出厂;
2.5仪器老是不稳定,停机检查,管路衬管;
2.6污染管路更换,衬管用重铬酸钾洗液,稳定在范围内,方可检测;
1.5结束测试
测试结束后,单击工作站控制面板“退出系统”按钮后选择“退出工作站”,即可关闭计算机。
2.0仪器操作注意事项
2.1做标准曲线:
2.1.1接“TS-3000测硫仪使用说明”(3)步骤,进入工作站控制面板,点击使用“低档”,开“紫外灯”,使用“标样”模式,取一支与待测样品硫含量接近的标样(目前取0.5 mg/L)用25 uL进样针抽取标样,点选“开始积分”,在“样品浓度”内输入样品实际含量,“进样体积”输入25.4uL,氧气含量300,氩气150。点击“进样”键,同时按自动进样器“前进开关”,待样品注射完取下进样针,如此反复5-6次;
1.3.2旋动主机右下端旋钮,调节载气流量至氧气300ml/min,氩气150ml/min。
1.3.3进入工作站控制面板,点击使用“低档”,开“紫外灯”,(需要预热15 min)使用“样品”模式。
1.3.4点击“打开校正曲线”按钮,点击左下角“打开”,选择以保存的标准曲线文件,点击求平均值,点击右下角“绘图”后,单击“确定”键退出。
1.3.5点击“基线”按钮,点击“自动清零”调校基线回到零点。
1.3.6单击“启动”,输入“样品名称”,“进样体积”与“载气流量”,先使用标样进行测试,若结果异常,则点击控制面板最下状态栏中部“高压(V)”进行调整,结果偏高则向下微调,偏低则向上微调(调节幅度1~2V)。
检测器的种类及选择方法
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荧光检测 fluorescence and (b) chemiluminescence profiles of HRP-immunolabeled GFP.
电化学检测器(ECD)
电化学检测器是测量物质的电信号变化,对具有氧化还原 性质的化合物,如含硝基、氨基等有机化合物及无机阴、阳 离子等物质可采用电化学检测器。包括极谱、库仑、安培和 电导检测器等。前三种统称为伏安检测器,用于具有氧化还 原性质的化合物的检测,电导检测器主要用于离子检测。其 中安培检测器(AD)应用较广泛,更以脉冲式安培检测器最为 常用。 原理:在两电极之间施加一恒定电位,当电活性组分经过 电极表面时发生氧化还原反应(电极反应),电量(Q)的大小符 合法拉第定律Q=nFN。因此,反应的电流(I)为:I=nFdN/ dt,式中n为每摩尔物质在氧化还原过程中转移的电子数,F 为法拉第常数,N为物质的摩尔数,t为时间。当流动相的流 速一定时,dN/dt与组分在流动相中的浓度有关。
紫外检测器(UV)
The data showed that glucuronidation of the 3- and 40-hydroxyls resulted in band I λmax hypsochromic shifts (or blue shift) of 13-30 and 5-10 nm, respectively. Glucuronidation of the 5-hydroxyl group caused a band II λmax hypsochromic shift of 5-10 nm. In contrast, glucuronidation of the 7-hydroxyl group did not cause any λmax change in band I or II λmax, whereas glucuronidation of the 6hydroxyl group did not cause predictable changes in λmax values. The paper demonstrated for the first time that a rapid and robust analysis method using λmax changes in online UV spectra can be used to pinpoint region-specific glucuronidation of flavones and flavonols with hydroxyl groups at the 40-, 3-, 5-, and/or 7-position(s).
紫外、荧光分光光度计说明
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一、设备名称:RF-5301PC荧光分光光度计;二、使用原理1、荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。
荧光是光致发光,任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱,发射波长总是大于激发波长。
荧光激发光谱是通过测定荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱,反映不同波长激发光引起荧光的相对效率。
荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光,是荧光强度对发射波长的关系曲线,表示在所发射的荧光中各种波长相对强度。
由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长,可用它来鉴定荧光物质。
有些发荧光的物质其荧光强度与物质的浓度成正比,故可用荧光分光光度法测定其含量。
在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行。
利用某些物质受激发出的荧光,其光强度与该物质的含量成一定函数关系的性质而制成的。
三、组成结构光源、光件、样品池、检测器、数据处理器1、荧光分光光度计图RF5301PC荧光分光光度计主要是由激发光源、激发单色器、样品池、发射单色器、检测器以及数据处理系统几部分组成1. 光源:为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用。
2.激发单色器:置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,筛选出特定的激发光谱。
3.发射单色器:置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。
筛选出特定的发射光谱。
4.样品室:通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。
测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。
hplc检测器种类及特点
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hplc检测器种类及特点HPLC检测器种类及特点HPLC(高效液相色谱法)是一种常用的分离和分析技术,广泛应用于各个领域的实验室。
HPLC系统由多个部分组成,其中检测器是其中之一,用于监测样品在色谱柱中的分离和识别。
不同类型的HPLC检测器具有不同的特点和适用范围,本文将详细介绍一些主要的HPLC检测器种类及其特点。
紫外检测器(UV检测器):紫外检测器是使用紫外线(UV)光源照射样品,并测量样品吸收/透射的紫外光强度的一种检测器。
这种检测器适用于大多数化学物质,因为大多数有机化合物和某些无机化合物(如金属离子)对紫外线具有吸收能力。
紫外检测器的工作原理是通过比较进样溶液和参比溶液对紫外光的吸收量来确定样品的存在和浓度。
UV检测器具有极高的检测灵敏度和广泛的线性范围,且对各种溶剂和化合物的稳定性较好。
然而,该检测器不能提供化合物的结构信息,因为它只是根据吸收强度进行检测。
荧光检测器:荧光检测器是在分离柱后的样品流中使用荧光探针,通过测量样品产生的荧光强度来检测化合物。
这种检测器适用于大多数有荧光性质的化合物,包括天然化合物、药物、色素等。
荧光检测器的工作原理是在激发光源(通常是紫外线)的作用下,分子从低能级跃迁到高能级,然后放射出荧光光子。
荧光检测器具有较高的检测灵敏度和特异性,且具有多通道检测的能力,可以同时测定多个组分。
然而,荧光检测器对环境和溶剂的要求比较高,并且需要选择合适的激发波长和荧光波长。
电化学检测器:电化学检测器是使用电化学技术进行检测的一种检测器。
电化学检测器可以测量样品中的电子转移反应、电荷转移反应、离子传递等电化学过程。
常见的电化学检测器有电导检测器(CD)和安培检测器(AD)。
电导检测器是通过电荷传递反应量测样品离子浓度的一种方法,适用于带电离子和非离子。
安培检测器则是通过测量样品中电流强度来识别化合物的一种方法,适用于具有可测电流的化合物。
电化学检测器具有非常高的选择性和灵敏度,能够检测到微量的化合物,但它们对电极的选择和维护要求较高。
不同液相检测器的区别
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高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种,有什么区别?高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一,几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高,线性范围宽,噪声低,适用于梯度洗脱,对强吸收物质检测限可达1ng,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似,实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源,氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长,并安装一个光栅型单色器,其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池,一个作参比,一个作测量用,光源发出的紫外光照射到流通池上,若两流通池都通过纯的均匀溶剂,则它们在紫外波长下几乎无吸收,光电管上接受到的辐射强度相等,无信号输出。
当组分进入测量池时,吸收一定的紫外光,使两光电管接受到的辐射强度不等,这时有信号输出,输出信号大小与组分浓度有关。
局限:流动相的选择受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相,每种溶剂都有截止波长,当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时,溶剂的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector,PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器,是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件,构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号,然后对二极管阵列快速扫描采集数据,得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素
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液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素液相色谱紫外-荧光串联检测器法检测我国污水中常见11种抗生素引言近年来,随着抗生素的广泛使用和滥用,我国污水中抗生素的排放量逐渐增加,对环境和人类健康造成了潜在风险。
因此,开发一种高效可靠的检测方法来监测污水中抗生素的含量显得尤为重要。
液相色谱紫外-荧光串联检测器法结合了紫外吸收和荧光检测技术的优势,已成为一种常用的方法来检测污水中的抗生素。
方法1. 样品预处理污水样品在进行检测之前需要进行预处理。
首先,将收集的污水样品进行过滤,去除固体颗粒物。
然后,使用净化剂去除样品中的杂质和有机物。
最后,将样品进行固相萃取,以浓缩目标物质。
2. 色谱分离使用液相色谱分离目标化合物。
液相色谱具有高效隔离、良好的分离度和分离效果,并能够使检测物质在短时间内被完全分离。
3. 检测方法使用紫外-荧光串联检测器来检测分离的目标化合物。
紫外检测器通过测量样品吸收光的强度来确定化合物的浓度。
荧光检测器则通过测量目标化合物的荧光强度来评估其含量。
使用两者串联检测器的优势在于可以提高检测的特异性和准确性。
结果与讨论使用液相色谱紫外-荧光串联检测器法成功检测了我国污水中的11种常见抗生素。
结果显示,这些抗生素在污水样品中的含量普遍较高。
其中包括青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等不同种类的抗生素。
结论液相色谱紫外-荧光串联检测器法是一种可靠而有效的方法,可用于检测我国污水中的常见抗生素。
通过该方法,可以对抗生素在污水中的污染情况进行定量分析,及时了解污水处理厂的处理效果,并在必要时采取相应的控制措施。
此外,该方法还可用于监测抗生素的排放和迁移过程,为环境保护和人类健康提供科学依据。
展望尽管液相色谱紫外-荧光串联检测器法已经取得了较好的成果,但仍然存在一些挑战和改进的空间。
未来的研究可以进一步优化样品预处理方法,提高检测灵敏度和准确性,并加强对其他污染物的分析,以全面了解我国污水中的抗生素污染情况。
液相检测器原理
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液相检测器原理
液相检测器是一种用于分析化学样品中溶解物的工具,它利用液相色谱法(HPLC)或凝胶电泳法等方法进行分析。
液相检测器的工作原理是利用化学或物理性质来检测溶解物的存在和浓度。
以下是几种常见的液相检测器原理:
1. 紫外-可见光检测器(UV-Vis Detector):该检测器利用样品中溶解物对紫外-可见光的吸收特性进行检测。
当光线通过样品时,溶解物会吸收特定波长的光,产生吸收峰。
通过测量吸收光的强度,可以确定溶解物的存在和浓度。
2. 荧光检测器(Fluorescence Detector):该检测器利用溶解物的荧光性质进行检测。
在样品中加入荧光染料或特定的荧光标记物后,当激发光照射样品时,溶解物会发射荧光。
通过测量发射荧光的强度或波长,可以确定溶解物的存在和浓度。
3. 振动式试管检测器(Refractive Index Detector):该检测器利用溶解物对折射率的影响进行检测。
当溶解物与载体溶剂相互作用时,会使溶剂的折射率发生变化。
通过测量样品和纯溶剂间的折射率差异,可以确定溶解物的存在和浓度。
4. 电导检测器(Conductivity Detector):该检测器利用溶解物对电流的导电性进行检测。
溶解物的存在会改变电解液的电导率,从而产生电流信号。
通过测量电流信号的强度,可以确定溶解物的存在和浓度。
液相检测器根据不同的原理可以选择合适的检测器进行分析,以实现对溶解物的准确检测和分析。
HPLC中常用的检测器
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a: 雾化器与分析柱出口直接相连,柱洗脱液进入雾化器针管,在 针的末端,脱洗液和充入的气体(通常为氮气)混合形成均匀的微 小液滴,可通过调节气体和流动相的流速来调节雾化器产生的液滴 的大小。 b: 漂移管的作用在于使气溶胶中的易挥发组分挥发,流动相中的 不挥发成分经过漂移管进入光散射池。
c: 在光散射池中,样品颗粒散射光源发出的光经检测器检测产生 光电信号。 ELSD采用的光源 一般为卤素灯
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ELSD与UV-D比较:
a: UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。ELSD可以 检测任何挥发性低于流动相的样品。
b: ELSD的通用性响应值使得ELSD响应值比UV响应值更能代表样品的质 量
c: 不同于紫外检测只能使用不吸收紫外的流动相,ELSD能与任何的挥发 性流动相相容,不论其光学特性。 用紫外检测器定量未知物是困难的,因为样品的紫外吸收值往往和代表样 品的质量的色谱峰的大小无关。ELSD对几乎所有的样品给出一致的响应 因子。因此可以通过和内标比较定量未知化合物,在因缺乏标准品而无法 校正曲线的情况下,利用ELSD可以近似的提供不纯物的定量测定。
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优点:
a:专用型检测器,具很强的专属性。 b:线性范围可达106,宽广 c:高灵敏度 10-12g/l,可与荧光相比,
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缺点:
a: 只能测定具有电解活性(电氧化一还原性)物质 b: 要求洗脱液具有导电性(可向洗脱液中加入少量电解质,或在 柱后补加适量电解质溶液,这并不影响分离效率)
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优点:
通用性强,操作简便
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缺点:
a: 灵敏度低 b:过于娇贵---室温的变化会影响基线的稳定性 ,大的溶剂前沿峰可 能会掩盖前期脱洗的色谱峰
检测器的种类及选择方法分析
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简介
检测器性能评价指标: 响应值(或灵敏度)S : 定义 S= R/ Q 在一定范围内,信号R与进入检测器的量Q呈线性 关系: R=SQ S= R/Q 单位: mV/(mg / cm3) ;(浓度型检测器) mV /(mg / s) ;(质量型检测器) S 表示单位量的物质通过检测器时,产生的响应 信号的大小。S值越大,检测器(也即色谱仪)的灵 敏度也就越高。
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进样后,载气携带试样组分流过测量臂而这时参考臂流过的仍 是纯载气,使测量臂的温度改变,引起电阻的变化,测量臂和 参考臂的电阻值不等,产生电阻差,R参≠R测
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则: R参· R2≠R测· R1,这时电桥失去平衡,a、b两端存在着电位 差,有电压信号输出。信号与组分浓度相关。记录仪记录下组 分浓度随时间变化的峰状图形。
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示差折光检测器(RID)
工作原理;利用组分与流动相的折光率的不同,其 响应信号(R)与组分的浓度(Ci 成正比:R=ZCi(ni-n0), 式中Z为仪器常数,ni为i组分的折光率,n0为流动相 的折光率。 优点:通用型检测器,只要组分的折光率与流动相 的折光率有足够的差别就能检测。 缺点:灵敏度低、受环境温度、流量及流动相组成 等波动的影响大,一般不能用于梯度洗脱。 适用范围:RID为通用型检测器,适用于无紫外吸 收化合物的分析,如糖类分析。
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紫外检测器(UV)
固定波长检测器:波长一般为254nm,以低压汞灯为光源, 光源单色性好、光强度大、灵敏度高。 可变波长检测器:目前配置最多的检测器。光路系统类似分 光光度计,一般采用氘灯或卤钨灯为光源,光束经单色器分光 后按需要选择组分的最大吸收波长为检测波长,从而提高灵敏 度。 二极管阵列检测器(DAD)是20世纪80年代出现的一种光学多 通道检测器。在晶体硅上紧密排列一系列光电二极管,每一个 二极管相当于一个单色器的出口狭缝,二极管越多分辨率越高, 一般是一个二极管对应接受光谱上一个纳米谱带宽的单色光。 原理:复色光通过样品池被组分选择性吸收后再进入单色器, 照射在二极管阵列装置上,使每个纳米波长的光强度转变为相 应的电信号强度,即获得组分的吸收光谱,从而获得特定组分 的结构信息,有助于未知组分或复杂组分的结构确定。
荧光检测器
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荧光检测器检测器故障和解决方法1.检测器性质概述检测器是液相色谱系统的“眼睛”,测量离开柱的样品的浓度或质量。
光电检测器测量柱流出物的光吸收、荧光和折光率的变化。
电化学和电导检测器溶液的变化。
特殊的样品用特殊的检测器。
不合适的检测器测得的结果也不可靠。
2.常出现的UV检测器故障故障类型故障率(%)噪音 26漂移 12灵敏度 9灯寿命 24气泡 7 在检测生物样品时可能为主要故障池污染 6其他 8无故障 113.具体故障与解决a.灯故障主要是灯失灵或能量衰减以及灯引起基线噪音。
除EC外,检测器中灯是重要部件。
灯失灵,明显地引起检测器信号总下降。
多数检测器有观察孔或指示器,由此可看见灯工作的情形。
但是不可以直接观察紫外灯,因为紫外线会损伤眼睛。
基线噪音这是灯失灵更普遍的故障。
氘灯打开后有30分钟的最大噪音,所以每次使用前至少预热30分钟。
换灯时要注意不能在灯上留下指痕。
因为未擦去的指痕在开灯后会引起灯表面永久性的损害。
请用软布或专用擦镜纸握住灯,在开灯之前用棉签蘸取甲醇擦去。
新装上后至少要点燃1小时以上,才能开始定量分析。
b.池故障与解决气泡是最常见故障。
瞬间而过的气泡会在色谱图上出现长噪音尖峰。
若感觉到有气泡,当将等调整670nm左右,戴上防护眼镜便可以看到池内有一个圆环,并不是清晰地绿色图像。
流动相脱气不足会产生气泡,池污染会使得故障加重。
用充分脱气的流动相可以带走气泡,或用强溶剂通过系统。
在正相和反向系统转换的时候一定要过渡。
检测器阻塞有下列现象:系统压力升高,松开检测器进口的接头压力降至正常水平。
检测器部分易发生的地方为进口管道或热交换器、池本身和出口管道。
用一般的净化的溶剂去掉阻塞可能不奏效但可以试试。
若是厂家标明耐高压,可用泵打溶剂反冲,常可以去掉堵塞。
压力不要超过6MPa.正常的池不可用此法,一般情况请咨询厂家的维护工程师较好。
c.池阻塞和污染,如确定是池堵塞,可用注射器回抽溶剂或用泵反冲(耐高压),一般能疏通。
紫外荧光硫检测仪安全操作及保养规程
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紫外荧光硫检测仪安全操作及保养规程一、前言紫外荧光硫检测仪是一种常用的实验室检测设备,可用于分析和检测不同类型的样品中含硫量。
为确保实验室人员的安全,保护设备的正常使用及延长设备寿命,有必要制定一份相应的安全操作及保养规程。
二、安全操作规程1. 设备操作前的准备工作在操作紫外荧光硫检测仪之前,应首先确保设备本身的工作环境和实验室的周围环境符合安全要求。
具体的操作前准备步骤如下:•检查设备本体有无破损或缺陷;•关闭设备电源;•确认实验室的工作环境符合要求,如无杂物、无可燃物;•检查工作台面是否稳定;•检查样品是否符合设备检测要求。
2. 设备的电源及设备的操作•操作一个紫外荧光硫检测仪时,应独立分配电源,不得与其他设备共用插座;•启动设备前,应先阅读设备说明书,熟悉设备操作流程,再进行启动;•启动时,应检查仪器仪表是否正常;•每次使用前,均应检查设备能否正常工作;•调整仪器时,应逐级调整,一步一步进行,务必按照设备使用说明进行操作,不得盲目调整;•长时间使用设备时,应注意设备的散热,确保设备不会因过热造成损坏。
3. 样品制备及样品装运•样品制备时,应严格按照设备要求进行操作;•在进行样品装运时,应注意不要破坏检测器的灵敏元件;•将样品装进管子时,应使用适当的实验室塞子,确保样品不会泄漏。
4. 操作结束,设备的关闭•操作结束后应先关闭设备的电源,取下检测器并清理;•清洗仪器时应使用专门的清洗剂,不要使用普通溶剂如丙酮,乙酸乙酯等;•关闭设备前,应将设备周围地面上的任何杂物清理干净,确保周围环境的卫生。
三、保养规程为了延长设备的使用寿命,有必要做好设备的保养工作,保养规程包括如下几点:1. 设备的清洁保养•设备的表面应及时清洁,不得在设备表面进行吸烟、饮食等活动;•清洗设备时应使用专用的清洗剂,不得使用普通溶剂如丙酮,乙酸乙酯等;•定期清理设备周围的杂物,保证室内卫生清洁。
2. 日常维护保养•在设备日常的使用过程中,应按照设备说明书进行操作;•每日安装并拆卸检测器时应注意不要给双面铜箔板的金手指接触其它金属物质,以免刮伤;•当发现设备故障时应立即停机,并请相关技术人员进行维修;•对设备的不使用时间,应进行相应封存保护。
高效液相色谱检测器的种类及特点
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一、概述高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析化学技术,广泛应用于化学、生物、医药和食品等领域。
在HPLC技术中,检测器是至关重要的一部分,它负责检测样品中化合物的浓度,并将其转化为可读的信号输出。
本文将对HPLC检测器的种类及特点进行详细介绍。
二、紫外-可见光(UV-Vis)检测器1. 原理:UV-Vis检测器利用化合物中的紫外或可见光吸收特性来检测化合物。
2. 特点:1)广泛适用:UV-Vis检测器适用于大多数有机化合物和许多无机化合物的分析。
2)灵敏度高:对于绝大多数有机化合物,UV-Vis检测器的灵敏度较高。
3)简单易用:UV-Vis检测器的操作相对简单,适合实验室常规分析。
三、荧光检测器1. 原理:荧光检测器利用化合物在受激光照射下产生荧光的特性来检测化合物。
2. 特点:1)高灵敏度:荧光检测器对于有荧光活性的化合物具有极高的灵敏度。
2)特异性强:由于荧光本身具有较高的特异性,荧光检测器可以用于分析中对混杂物的忽略。
3)应用广泛:在生物学、医学和环境领域,荧光检测器得到了广泛的应用。
四、蒸发光散射检测器1. 原理:蒸发光散射检测器通过样品与蒸发后的溶剂之间的差异来检测化合物。
2. 特点:1)通用性强:蒸发光散射检测器对于大多数非吸收性化合物都具有较好的检测能力。
2)无需色谱柱:相比于其他检测器,蒸发光散射检测器可以不需要色谱柱,适用于高分子化合物的检测。
3)灵敏度较低:蒸发光散射检测器的灵敏度通常较低,需要较高浓度的样品才能进行检测。
五、质谱检测器1. 原理:质谱检测器通过将化合物转化为离子,并对离子进行质量分析来检测化合物。
2. 特点:1)高分辨率:质谱检测器具有极高的分辨率,可以准确确定化合物的质荷比。
2)特异性强:质谱检测器对于复杂混合物的成分分析具有很强的特异性。
3)操作复杂:相比于其他检测器,质谱检测器的操作和维护较为复杂,需要专业的操作人员。
六、综述HPLC检测器种类繁多,每种检测器都有其特定的适用场景和优势。
色谱检测器的分类介绍
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色谱检测器的分类介绍色谱技术是一种常用于化学分析的手段,它主要基于样品分子不同的亲和性和不同的性质,通过分离来满足分析需求。
而色谱检测器的作用则是将色谱分离后的化学物质的特征信息转换为检测信号,在分析过程中起到至关重要的作用。
在实际应用中,不同种类的色谱检测器根据其原理、使用范围以及性能特点等方面进行了分类,本文就对其进行简单介绍。
1.气体色谱检测器气体色谱检测器是一种常用的检测单元,其适用于气相色谱仪中检测许多不同类型的化合物。
常见的气体色谱检测器包括热导检测器、电化学检测器、火焰离子化检测器、热解吸质谱检测器和金属离子检测器等。
①热导检测器:指使用导热率随化合物浓度变化而变化来检测气相色谱中的化合物。
这种检测器可以对大多数非极性有机物具有良好的灵敏度,非常适合于测定有机化合物的含量。
但是,它并不适用于所用化合物具有相似导热率的样品分析。
②电化学检测器:可以检测固体、液体和气体样品中各种有机和无机物质。
在检测器中,分子被氧化或还原成电子,实现了转化。
这样就产生了电流,说明化合物的浓度。
③火焰离子化检测器(FID):是一种常见的检测器,基于金属离子检测器,用于检测有机分子的氢、氧原子含量。
FID在检测硝基芳香化合物、有机酸、醇、酮、醛、烯酮、醚等方面均表现出色。
2.液相色谱检测器液相色谱检测器主要用于测定水相中的有机化学物质,包括药物、农药、天然产物和生物大分子等。
常见的液相色谱检测器包括光学检测器、荧光检测器和电化学检测器等。
①光学检测器:常用的有紫外-可见光谱(UV-Vis)检测器。
光学检测器基于化合物的吸收光谱进行检测。
化合物与特定范围内的光波长吸收。
光学检测器适用于可溶于水或有机溶液的化合物。
②荧光检测器:适用于样品中存在紫外线吸收的化合物,如花生四烯酸(PGA)、苯氧基酸(BOA)、半胱氨酸等,亦适用于对多种细胞色素中荧光团进行判定。
荧光检测器基于一种电离激发分子从基态到激发态上移动,激发态分子有自旋和次态之分,分子在自旋和次态间的跃迁导致荧光发射。
荧光检测器原理
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荧光检测器原理荧光检测器是一种广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域的分析仪器,其原理是利用样品中的荧光物质在受激发后发出特定波长的荧光信号,通过检测和分析荧光信号来实现对样品的定量或定性分析。
荧光检测器的工作原理主要包括激发光源、激发光路径、荧光检测路径和信号处理系统等几个关键部分。
首先,激发光源是荧光检测器的核心部件之一,它通常采用紫外光或蓝光等波长的光源,用于激发样品中的荧光物质。
当样品受到激发光照射后,其中的荧光物质会吸收光子的能量,电子跃迁至激发态,然后在短暂的时间内返回基态并释放出荧光光子。
这些荧光光子的波长和强度与荧光物质的种类和浓度有关,因此可以通过检测荧光光子来实现对样品的分析。
其次,激发光路径和荧光检测路径是实现荧光检测的关键部分。
激发光路径将激发光源发出的光引导至样品表面,使样品中的荧光物质受到光的激发;而荧光检测路径则将样品发出的荧光光子引导至光电探测器进行检测。
在这两个路径中,光学元件的选择和排列对荧光检测器的灵敏度和分辨率有着重要影响,合理设计光路可以提高荧光检测器的性能。
最后,荧光信号的处理和分析是荧光检测器工作原理的最后一步。
荧光光子被光电探测器检测后,会转换成电信号并送至信号处理系统进行放大、滤波、数字化等处理,最终得到与样品荧光强度相关的电信号。
通过比对标准曲线或参照物质,可以将荧光信号转换成样品中荧光物质的浓度或其他相关参数,实现对样品的定量或定性分析。
总之,荧光检测器通过激发样品中的荧光物质并检测其荧光信号来实现对样品的分析,其原理涉及激发光源、激发光路径、荧光检测路径和信号处理系统等关键部分。
合理设计和优化这些部分可以提高荧光检测器的性能,使其在生物医学、环境监测、食品安全等领域发挥更大的作用。
紫外荧光光谱仪,技术要求
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紫外荧光光谱仪,技术要求全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:紫外荧光光谱仪是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的一种光谱仪器。
它能够通过样品吸收紫外光激发后再发射出荧光光进行分析,因此在检测和分析具有荧光特性的化合物和材料时具有很高的灵敏度和准确性。
紫外荧光光谱仪的技术要求主要体现在以下几个方面:1. 光源系统:紫外荧光光谱仪的光源系统需要具有较高的稳定性和光强度,以保证样品能够受到足够的激发光。
常见的光源包括氙灯、汞灯等,其波长范围需要覆盖紫外至可见光区域。
2. 光谱分辨率:光谱仪的分辨率决定了样品吸收和发射峰的清晰度和分离程度。
较高的分辨率可以提高检测的准确性和灵敏度,因此紫外荧光光谱仪的分辨率应该尽可能高。
3. 探测器:在紫外荧光光谱仪中,常用的探测器包括光电倍增管(PMT)、光电二极管(PDA)等。
探测器的选择应该考虑到其响应速度、线性范围、灵敏度等指标,以确保准确测量样品的荧光强度。
4. 数据处理系统:紫外荧光光谱仪的数据处理系统应该具有良好的数据采集、处理和分析功能,能够实时显示样品的光谱图像、峰值分析、数据拟合等功能。
5. 校准和质控:为了保证仪器的测量结果准确可靠,紫外荧光光谱仪需要进行定期的校准和质控。
校准仪器应该包括波长校准、信号校准等,可以通过标准品或标准光源进行。
6. 软件系统:紫外荧光光谱仪的软件系统应该具有友好的用户界面和操作步骤,能够快速、方便地进行光谱测量、数据处理和结果分析。
紫外荧光光谱仪在检测和分析具有荧光特性的化合物和材料时具有很高的灵敏度和准确性。
其技术要求主要包括光源系统、光谱分辨率、探测器、数据处理系统、校准和质控、软件系统等方面。
只有能够满足这些技术要求的紫外荧光光谱仪才能达到准确、可靠的光谱分析目的。
第二篇示例:紫外荧光光谱仪是一种可以测量样品的荧光发射光谱的仪器,它广泛应用于化学、生物、环境等领域。
紫外荧光光谱仪具有高灵敏度、高分辨率、高检测速度和宽测量范围等特点,因此在科学研究和工业生产中扮演着重要的角色。
HPLC中常用的检测器分有如下几种
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HPLC中常用的检测器分有如下几种液相检验HPLC中常用的检测器分有如下几种,紫外吸收检测器(UVD)、二极管阵列检测器(PDAD)、荧光检测器(FLD)、示差折光检测器(RID)、蒸发光散射检测器(ELSD)、质谱检测器(MSD)等。
下面就分别介绍简单介绍一下。
光学类检测器1、紫外吸收检测器(UVD)是目前HPLC中应用最广泛的检测器。
它的主要特点是灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱。
它要求被检测样品组分有紫外吸收,属于选择性检测器。
2、二极管阵列检测器(PDAD)是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器,它可以看作是UVD的一个分支。
在对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后,得到光谱和色谱结合的三维图谱。
其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质),色谱用于定量,常用于复杂样品(如生物样品、中草药)的定性定量分析。
3、荧光检测器(FLD)同样属于选择性检测器,其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中是最高的,应用也较多,仅次于UVD。
它适用于能激发荧光的化合物。
很多与生命科学有关的物质,如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。
荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用,尤其在用荧光衍生后,可以检测很微量的氨基酸和肽。
通用型检测器1、示差折光检测器(RID)是一种通用型检测器,只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。
生命科学中常遇到各类糖类化合物,没有紫外吸收,一般常用示差折光检测器。
它的通用性比UVD广,但灵敏度要低,对温度变化敏感,并与梯度洗脱不相容,因而限制了它的使用。
2、蒸发光散射检测器(ELSD)也是一种通用型的检测器,可检测挥发性低于流动相的任何样品,而不需要样品含有发色基团。
ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。
ELSD灵敏度比RID高,对温度变化不敏感,基线稳定,可用于梯度洗脱。
现在ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。
荧光检测器原理
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荧光检测器原理
荧光检测器是一种广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域的分析仪器。
它通过检测样品中的荧光发射信号来获取样品的信息,具有灵敏度高、选择性好、快速准确等优点。
荧光检测器的原理是基于样品中的荧光物质受到激发后发出荧光信号的特性进行分析的。
首先,荧光检测器需要一个激发光源。
这个光源通常是紫外光或蓝光,能够激发样品中的荧光物质产生荧光发射。
当激发光照射到样品上时,样品中的荧光物质会吸收光子的能量,电子跃迁至激发态,随后在短时间内退回到基态,释放出荧光光子,即荧光发射。
荧光发射的波长和强度与荧光物质的种类、浓度、环境等因素有关。
其次,荧光检测器需要一个光学系统来收集样品发出的荧光信号。
这个光学系统通常包括透镜、滤光片、光电倍增管等组件,能够将样品发出的荧光信号聚焦并转换成电信号。
透镜用于聚焦荧光信号,滤光片用于选择出感兴趣的荧光波长,光电倍增管用于将荧光信号转换成电信号。
最后,荧光检测器需要一个数据处理系统来处理和分析采集到的荧光信号。
这个数据处理系统通常包括模拟-数字转换器、微处理器、计算机等组件,能够将光电信号转换成数字信号,并进行数据处理和分析。
通过对荧光信号的波长、强度等参数进行分析,可以获得样品的信息,比如荧光物质的浓度、活性、纯度等。
总的来说,荧光检测器的原理是基于样品中的荧光物质受到激发后发出荧光信号的特性进行分析的。
它通过激发光源、光学系统和数据处理系统的配合,能够实现对样品荧光信号的高灵敏度、高选择性的检测和分析,广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。
荧光检测器的原理及应用前景,将在未来得到更广泛的发展和应用。
荧光检测器原理
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荧光检测器的工作原理荧光检测器是高压液相色谱仪常用的一种检测器。
灵敏度在目前常用的HPLC检测器中最高,在HPLC中应用较多。
它用于能激发荧光的化合物,极高灵敏度和良好选择性是它最大的优点,因而在某些领域如药物和生化分析中起着不可替代的作用。
荧光检测器的工作原理:荧光检测器的工作原理是用紫外光照射某些化合物时它们可受激发而发出荧光,测定发出的荧光能量即可定量。
很多与生命科学有关的物质,如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。
荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用,尤其在用荧光衍生剂后,可以检测很微量的氨基酸和肽。
荧光检测器优缺点:优点:①灵敏度极高。
荧光检测器的灵敏度比紫外-可见光检测器的灵敏度约高两个数量级,最小检测量可达10^(-13g)。
这是因为在紫外吸收检测法中,被检测的信号A=lg(Io/I),即当样品浓度很低时,检测器所检测的是两个较大信号Io及I的微小差别;而在荧光检测法中,被检测的是叠加在很小背景上的荧光强度。
荧光检测器是最灵敏的液相色谱检测器,特别适合于痕量分析。
愈是常用的衡量检测器灵敏度的基准物质。
另外,荧光检测器的灵敏度还可以用水的拉曼谱带的信噪比来衡量。
②良好的选择性。
产生荧光的一个必要条件是该物质的分子具有能吸收激发光能量的吸收带,即物质分子具有一定的吸收结构;另外的条件是吸收了激发光能量之后的分子具有高的荧光效率。
相对较少的分子具有大的足够检测的量子效率是荧光检测器高选择性的主要原因。
在很多情况下,荧光检测器的高选择性能够避免不发荧光的成分的干扰,成为荧光检测的独特优点。
③线性范围较宽。
虽然比紫外吸收检测器窄,但对大多数痕量分析,该线性范围已足够宽。
在分析物质浓度较大时,发射强度由于内滤效应可能随浓度增加而降低。
④受外界条件的影响较小。
⑤只要选作流动相的溶剂不会发射荧光,荧光检测器就能适用于梯度洗脱。
缺点:①荧光检测器的高选择性优点在一些情况下,也是该检测器的缺点。
荧光检测器的优缺点
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荧光检测器的优缺点
荧光检测器的定义
荧光检测器是一种精密化学分析仪器,在分析和测量样品的过程中利用荧光分
光学原理,将样品中的小分子物质用紫外线激发到高能态后发射出荧光,再利用荧光信号进行测量的仪器。
荧光检测器的优点
灵敏度高
荧光检测器可以通过极其灵敏的荧光测量方法来检测分析物的存在,其灵敏度
远高于其他光学测量方法,如吸收光谱测量。
特异性好
荧光检测器可以对荧光化学深度的改变高度敏感性,所以对于荧光标记的分子
和样品中非荧光物的干扰具有很强的选择性。
适应性好
荧光检测器由于其特异性好、灵敏度高,且其使用方法简单,可以适应于多种
环境和样品,如生物领域、材料分析等。
可定量测量
荧光检测器能够提供少量成分的可靠和准确的检测结果,可以应用于定量分析,同时对信噪比、线性度、检测极限等有一定的要求。
荧光检测器的缺点
过于敏感
荧光检测器对样品的灵敏性过高,对干扰或者杂质的反应也非常灵敏,因此可
能会导致误差或者数据混乱。
易受到光、温、电等环境干扰
荧光检测器的精确性受到周围环境、光源和温度的影响,需要在实验室中创造
特殊的环境和条件来避免这些干扰。
荧光化学衰减
荧光检测器会受到荧光化学衰减的影响,在一些长时间的分析过程中,可能需要进行定期的标准样品检测来保证数据的准确性。
结论
综合以上分析可以得出荧光检测器虽然有一些缺点,但其优点也非常出色,特殊是在定量和高度特异性的分析领域中具有独特的应用价值。
进一步的科学研究和技术改良,将会使荧光检测器在分析化学领域中的应用更加广泛。
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紫外检测器 荧光检测器来自1、光-波长白炽透明的太阳是由波长小于10nm到1011nm的一组电磁波组成。
太阳
电磁波
2、什么样的物质有紫外、可见吸收
分子的电子结构和分子吸收光后电子状态的变化等可用
分子轨道在任何情况下都是
成键轨道比反键轨道稳定。电子跃迁发生在基态分子轨道(成键)和反键轨道之间,处于基态的电子吸收一
苯丙氨酸(Phe,F) λmax = 257nm
酪氨酸(Tyr,Y) λmax = 275nm
色氨酸(Trp,W) λmax = 280nm
3、紫外检测器
选 择 波 长
发射紫外光的灯 (汞、氘、氙灯)
原理:光源发出的光通过棱镜分解折射出不同波长的光,经过 狭缝调节后,只能让对某组分有最大吸收波长的光通过狭缝照 射到样品上,样品池中的组分吸收了该波长的光,使其通过样 品池后强度下降,使得检测器中的光电敏感元件输出电流发生 变化,这种改变就是测定的结果,这种改变符合比尔定律。
优点:有了参比池可以减小紫外检测器的噪声, 抵抗外来干扰,提高检测器的灵敏度
3、紫外检测器
棱镜发在样品池后,不需 要在棱镜后加狭缝
检测器是排成 一组阵列 的二极管,如256个二组 管,每个可看成一个单 元。
被测定组分通过样品池后照射到多色器上被分解折射成不同波长 单色光。每个二极管都接收到波长不同,强度不等的光,被测组 分通过样品池后的吸收紫外光的情况能够由多色器全波长分解扫 描表现出来,不需要设定特定的波长。
二极管阵列检测器可显示三维色谱图,能够检查 色谱峰的纯度。可同时进行多波长测定。重现性 好。但是灵敏度一般你于普通的紫外检测器。
4、荧光检测器
如果电子吸收了多余的能量,冲出了紫外吸收的范围到达更高的 能阶,在回到低能阶的路途中因与其它分子的碰撞或其它原因, 这些高能电子不会很快消失,当它们到达一个特定的次高能阶时, 一下子降到一个特定的次低能阶,这个过程发出的光就是荧光, 吸收能量的分子中的电子被激发从低能阶到高能阶,在跃迁的过程中电 亦称发射荧光。 子吸收了能量使紫外光的强度降低。这是紫外吸收的原理。
优点
10~1000倍。
需要的样品最少
一定是这类化合物的分子中的电子被激发后能吸收多 余能量达到更高能阶,所以才能用荧光检测器检测。
λ发射荧光<λ激发荧光(电子撞击失去一部分能量)
激发荧光能阶≈紫外吸收的能阶 举例:糖基化:激发波长260nm,发射波长420nm
4、荧光检测器
荧光检测器多采用90°角的光路,这样避开了激发光和发射光之间的
干扰。所用灯与紫外检测器一样,一般用氙灯,也是光电倍增管作为
敏感器。
有极高的灵敏度和良好的选择性,灵敏度约为紫外的
3、紫外检测器
原理:双光路一路是样品池,一路是参比池, 两路对等,光源以完全相等的两束光投射到测 量池和参比池上,若两池中都是纯流动相(有 的参比池中充满空气作为参比物),它们的吸 收值是相等或几乎没有吸收,则两光照射到光 电敏感器上的强度相等,无信号输出。即使有 噪音也相互抵消,基线平稳。当有组分进入样 品池,吸收紫外光使两边的光电敏感接受到的 照射强度不等,像天平失衡,电路上着重电泳 补偿,于是有信号。
定能量的光子后,可发生 σ- σ*、 σ-π*、π-σ*、π-π*、n-σ*、n-π*、各跃迁所需能量不同。
2、什么样的物质有紫外、可见吸收
41、、πσ--πσ*跃*所迁需是能双量键最中大π,电不子易由激π发成,键如轨饱道和向烃反,键只轨含道有的σ跃键迁,,其能跃量迁比出n→现π在*远跃紫迁外大区,,比波n-长σ* 小小,于因20此0n这m,种例跃如迁A也ma大xC部H4分=1出25现nm在等在。近紫外区,其εmax较大,大多数是强吸收峰。根据π-π*产 生2、的n体-σ系*跃不迁同,,杂吸原收子带O可、表N、示S以、下X都几含种有:n非键轨道,如C-Cl,C-OH等都发生n-σ*跃迁,其跃 (迁1所)需、能共量轭比非σ封-闭σ体*小系中但的是π主-要π还*(是K在带)20如0n丁m以二下烯。CH2=CH-CH=CH2,λmax=217nm。 (3、2)n→、πB带*跃(迁苯,吸只收有)分芳子香中族同和时杂存环在芳杂香原族子化(合有物n光非谱键的轨特道征)吸和收双。键芳π环电的子B时带才吸有收可在能发生 2n3-0π~2*7跃0n迁m,,如如苯C=乙O,烯N,=Nλ,mNa=xO=等24,4n其m、吸λ收m能ax量=2小82,nm大。部分在200~700nm之间,但是εmax较小, (是3弱)吸、收封。闭共轭体系(如芳香族和杂环芳香族化合物)