五日生化需氧量(BOD5)测定中接种液的几种获取方法

样品名称 解氧 ; 67, 3 葡萄糖 4 谷氨酸 葡萄糖 4 谷氨酸 葡萄糖 4 谷氨酸 /, 0( 0, -/ 0, -’ 培养前溶
!" :$ 土壤浸出液
称 # * 土壤， 加 % +, 无菌水振荡 ! +89； 静置； 取浸出液即可"
#$ 接种液的预处理
#" !$ 充$ 氧
将混合均匀的接种液倒入相应容量的大烧杯中， 充入适量纯氧或空气， 使接种液中含有接近饱和的溶 解氧"
#" #$ 培$ 养
在盛接种液的烧杯口盖一块清洁、 湿润的纱布， 置于设定温度为 ’( / ’0- 的生化培养箱中" 接种液在 培养箱中放置 #% & 后即可用于稀释水的接种"
! ! 注： &’ 为接种稀释水在培养液中所占比例， &( 为标准样品在培养液中所占比例， 其中相对误差中的负号已省略,
2, "! 控制样品的分析
为检验这些方法配制的接种稀释水的质量， 用葡萄糖、 3 4 谷氨酸配制成的 )%$* 值为 ’0- 5 ("67・3 4 ’ 的控制样随成批样品一同分析, 分别称取在 ’-"8 干燥 ’ 9 的葡萄糖、 谷氨酸各 （ ’*- : ’ ） 67 溶于 水， 移入 ’ --- 63 容量瓶内并稀释至标线， 混合均匀, 分析样品的同时， 将 (- 63 葡萄糖 4 谷氨酸标准溶 液用同一种接种稀释水稀释至 ’ --- 63， 按测定 )%$* 的步骤操作, 部分控制样品的分析结果列于表 2, ! ! ! ! 表2
（ 玉溪师范学院 化学与环境科学系， 云南 玉溪 &$’()) ）
［ 关键词］ !"#$ 测定； 接种液；接种稀释水 在对抚仙湖入湖河流 !"#$ 进行分析的过程中，对几种接种液的来源、 配比、 预处理及 ［摘% 要］ 接种稀释水的配制方法进行了研究，并通过一系列的实验数据说明了这些配制方法的可行性* ［ 作者简介］ 周元清， 博士研究生， 讲师， 主要从事生物化学和环境生态的教学与研究工作* ［ 中图分类号］+,’&［ 文献标识码］-［ 文章编号］()), . ,$)& （ /))0 ） )’ . ))&( . )0 生化需氧量是指在规定条件下， 微生物分解存在于水中的某些可氧化物质， 特别是有机物所进行的生 物化学过程中消耗溶解氧的量* 此生物氧化全过程进行的时间很长， 如在 /)1 培养时， 完成此过程需 ()) 多天* 目前国内外普遍规定 /)1 2 (1 培养 $ 3， 分别测定样品培养前后的溶解氧， 二者之差即为 !"#$ 值， 以氧的 45・6 . ( 表示* 测定生化需氧量 （ !"#$ ） 的经验性常规方法是稀释接种法* 由于 !"#$ 是各级环境 监测站进行水质监测时经常需要测定的项目， 因此， 提高该方法测定的准确性和可靠性显得尤为重要* 对于不含或少含微生物的工业废水， 包括酸性废水、 碱性废水、 高温废水或经氯化处理的废水、 测定用 于分析质量控制的标准样品等， 在测定 !"#$ 时， 需进行接种， 以引入能分解水中有机物的微生物* !"#$ 的测定过程长达 $ 3， 当发现测定失败时， 由于样品的时效性问题， 很多测定难以重新进行， 以致很多分析 人员无法报出正确的分析数据* 获得含有足够微生物的接种稀释水， 是 !"#$ 分析能否顺利进行的关键问 题之一* 给稀释水接种的接种液的获得有很多种方法， 下面介绍的是笔者在 /))$ 年 ( 月至 (/ 月从事玉溪 抚仙湖入湖河流 !"#$ 分析工作过程中所总结出的几种简便、 易行的接种液的获取方法*
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" " " " 表$
水样号 $ % + ! ’ 2 5 4
空白实验 ()*’ 值
0$ 培养时间 1 天 培养前溶解氧 -.・/ 0 $ 培养后溶解氧 -.・/ 0 $ ()*’ 测定值 -.・/
’ ’ ’ ’Baidu Nhomakorabea’ ’ ’ ’
2# $3 2# $& 2# $& 2# $& 2# $& 2# !! 2# !! ’# %!
!" %$ 金鱼水加淘米水
进行废水分析前 #% &， 取家养金鱼鱼缸内的养金鱼水 ( 份， 第二道淘米水 ! 份， 两者混合均匀， 带回实 验室进行预处理"
!" ($ 肉汤接种液
在城市管道污水中， 加入少量肉汤培养基， 于 ’0- 培养箱中培养 !7 / #% & 便可" 其制备过程是， 称取 加入蒸馏水 !)) +,， 轻轻摇匀， 隔石棉网微火煮沸至完全溶解， 置压力锅 肉汤培养基 #!0 * 于三角烧瓶中， 中灭菌 #) +89， 于冰箱中保存， 如出现浑浊或絮状物不可再用" 于试管中加入上述肉汤培养液 !) +,， 再加 入城市管道污水 ! +,， 塞上棉塞， 置 ’0- 培养箱中培养 !7 / #% &， 取出后充分振摇， 用少许脱脂棉过滤， 滤 液用蒸馏水稀释 !) 倍即可"
万方数据
"!
周元清" 申时座" 史云东" 张晔伟： 五日生化需氧量 （ ()*’ ） 测定中接种液的几种获取方法
!" 分析的实例说明
用这此方法配制的接种稀释水进行标准样品的考核、 空白实验值的测定和控制样品及工业和生活废 水的分析，均获得了满意的分析结果#
!# $" 空白实验值的测定
笔者在 %&&’ 年 $ 月至 $% 月从事玉溪抚仙湖入湖河流 ()*’ 分析的工作中， 用花园土浸出液和城市生 活污水为接种液做空白实验 ()*’ 值， 分别选列于表 $ 和表 % 中# 从表中可见，所有空白实验 ()*’ 值也均 在方法规定的 &# + , $# & -.・/ 0 $ 的范围内#
(% 接种液的来源、 配比和制备
(* (% 花园土浸出液
取 ()) 5 左右的花园等处植物生长土壤， 加入 ( 6 水， 混合并静置 () 478 后取上层清液供用* 采集花 园土时要考虑季节和温度* 春秋季阳光充足温和， 适合细菌及微生物繁殖， 可从浅层 / 9 ’ :4 处采集； 夏季 则因温度过高、 太阳光直射的缘故而要在离地表 $ 9 & :4 处采集， 否则细菌及微生物太少； 冬季温度又太 低， 采集的土样要经增菌方能使用*
’# 4$ ’# +& ’# +& ’# +& ’# +& 2# &% 2# &% !# 2&
&# +4 &# 4& &# 4& &# 4& &# 4& &# !% &# !% &# 2!
" " " " 表%
水样号 $ % + ! ’ 2 5 4
空白实验 ()*’ 值
0$ 培养时间 1 天 培养前溶解氧 -.・/ 0 $ 培养后溶解氧 -.・/ 0 $ ()*’ 测定值 -.・/
!# %" 标准样品的分析
笔者曾参加过玉溪 “ 十五规划” 抚仙湖入湖河流 ()*’ 实际样品考核， 在考核过程中， 笔者分别采用上 述几种方法对接种稀释水进行了配制， 并用其对样品进行了接种稀释， 现将结果选列于表 + 中# 从表中可 见， 所有考核样品的分析结果均在样品保证值的范围内， 相对误差均较小#
用花园土浸出液和城市生活污水为接种液考核样品分析结果 # 空白液 培养前 $% +, ’. +, -+, -+, -+, -+, -+, -+, (+, (+, *( +, *( +, *( +, 2( +, 2( +, 2( +, ’+, ’+, *( 水样稀释 培养后 $% ", +(/ -, /+/ (, /*. (, .00 ", 2+’ -, ./+ ", *.’ (, ’+2 ", -". ", /(( 2, (.", .+-, ---, ---, --", .+’ 2, *+*, (( # 空白液培 养后 $% *, 0’ ", 2", 2", 2", 2", 22, .. ", 0", 02, /0 2, /0 2, /0 -, --, --, -*, "*, "+, "+ &’ -, .0* -, ./( -, .-0 -, ."+ -, .’-, ./" -, .*/ -, .2. -, .’0 -, .". -, ."2 -, .22 -, .’0 -, .’0 -, .’0 -, .’+ -, .-* -, .-’ &( -, -’* -, -(0 -, -.( -, -+2 -, -.-, -(/ -, -2" -, -*’ -, -0( -, -+’ -, -++ -, -*+ -, -0( -, -0( -, -0( -, -02 -, -.* -, -.. 稀释水 样 )%$* ’-’, (++*, 0-’ ’, .(( ’-, 2"" ’, *(/ *2, 0-+ ’", "’+ (’, 22/ +, -’" ., 2"2 2, *0/ +, 0./ ", -0( ’, *02 (, ’2" /, */* *, -./ /, (* 绝对 偏差 -, +/" -, ---, ---, 0-2 -, ---, "0+ -, 2+* -, ’.0 -, **0 -, ---, ---, ---, ---, ’"-, ---, ’’0 -, ---, ’’ 相对 偏差 -, +’1 -, --1 -, --1 2, (*1 -, --1 -, +01 ", -21 -, +21 *, ..1 -, --1 -, --1 -, --1 -, --1 0, //1 -, --1 ’, -(1 -, --1 ’, -1
万方数据
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玉溪师范学院学报
! ! 表"
水样号 ’ ( " 2 * + / 0 . ’’’ ’( ’" ’2 ’* ’+ ’/ ’0 # 水样稀释培 养前滴定 $% +, +**, 2+" *, -". 0, --*, 02" *, /2’ *, *’0 +, ’’. *, /.+ +, ’+0 +, 2"2 +, ((+ +, "20 +, ’(* +, ’.( *, *(+ *, .’+, 2-
玉溪师范学院学报 （ 第 /’ 卷） /))0 年第 ’ 期% ;<=>8?@ <A B=C7 DE?:FE>G H<@@E5E I<@* /’ J<* ’ K?>* /))0
! 化学研究 !
五日生化需氧量 （ !"#$ ） 测定中 接种液的几种获取方法
周 元 清% 申 时 座% 史 云 东% 张 晔 伟
’$ 接种稀释水的配制
加入接种液的稀释水叫接种稀释水， 其作用是在水样中引入可以氧化分解有机物的生物种群， 以便降 解水中的有机物质" 接种稀释水的配制过程是： 将培养好的接种液从培养箱中取出， 量取上清液作为接种 液， !, 稀释水中接种液的加入量为 #) / #( +," 按照 ;10%77 —70 中的水质 五日生化需氧量 （ 123( ） 的测 定稀释与接种法规定： 接种稀释水在 #)- 下的 123( 值应控制在!’ / !!) +* 4 , 之间或溶解氧瓶中的菌群 数在 ! ))) / !) ))) 个 4 +, 之间" 一般接种稀释水的配制是在 ! , 稀释水中加入： （ <） 生活污水 ! / !) +, 或受生活用水污染的河水 （ 湖水） !) / !)) +,； （ =） 表层土壤浸出液!) / ’) +,； （ >） 淘米水 ! / # +,"
万方数据
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玉溪师范学院学报
!" #$ 城市生活污水或含生活污水的河水或湖水
生活污水不宜用刚排出的生活污水， 最好采用污水井盖下靠井壁位置的水" 因为此处污水停留时间 取上清液供用" 长， 有利于微生物繁殖生长" 采集后在室温下放置 #% &，
!" ’$ 淘米水
取 () * 大米， 加入水 !)) +, 左右， 振荡混匀后， 在 #)- 下放置培养 ! .， 取其上清液" 用淘米水在室温 下好氧发酵， 大约放置 ( / 0 . 闻到臭味即可使用， 倒出上清液作为接种液， 123( 大约为 %)) +* 4 ,， 使用时 当淘米水 56 为 ( 时停止使用" 稀释至 !)) +* 4 , 左右较好" 用淘米水作接种液一般可使用 ’ 周，