培养基促生长实验操作精编WORD版
培养基促生长实验操作
培养基促生长实验操作 Prepared on 22 November 20201目的制订培养基灵敏度实验操作,是为了规范、统一培养基灵敏度检测,确保微生物检测准确、安全进行。
2 范围适用于所有配制好并灭菌的培养基。
3 编写依据4 术语无5 职责QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
6 内容使用的设备、器具生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等使用的菌株EP检测用ATCC的菌株:金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633沙门氏菌Salmonella enterica subsp ATCC 14028白色念珠菌Candida albicans ATCC 10231黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代, 并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验用菌株的生物学特性。
检测频率每批配制、灭菌后的培养基均应做灵敏度测试。
操作方法6.4.1 对照标准培养基用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基.6.4.2 实验培养基将琼脂类的实验培养基加热融化后,冷却至45℃左右,以无菌的方式在无菌培养皿中注入15~20ml,备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备6.4.3.1 细菌菌悬液的制备方法一:取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30~35℃培养18~24h,取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释,分别制成10-7~10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备取白色念珠菌的斜面培养物1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于20~25℃培养24~48h,加入无菌水4ml制成原液,取上述原液按10倍系列稀释,分别制成10-6~10-7的菌悬液备用。
细胞生长曲线实验步骤
细胞生长曲线实验步骤一、准备细胞与培养基1.选择适宜于实验的细胞系,并确保细胞状态良好,无污染。
2.准备所需的培养基,按照说明书进行配制,并在使用前进行无菌过滤处理。
3.准备所需的无菌器械、吸管、离心管等。
二、接种细胞至培养板1.在无菌操作台上,用无菌吸管吸取适量的细胞悬液。
2.将细胞悬液均匀接种至培养板中,每个孔内的细胞数量应保持一致。
3.将接种好的培养板放入培养箱中,设置适宜的温度、湿度和二氧化碳浓度。
三、定时观察与计数1.在接种后的不同时间点(如每天或每24小时)观察细胞的生长情况。
2.使用倒置显微镜观察细胞的贴壁生长和形态变化,以及细胞数量的变化。
3.在特定时间点,使用血细胞计数板或自动细胞计数器对细胞进行计数。
四、记录数据1.将每次观察和计数的结果详细记录下来,包括细胞数量、形态变化等。
2.记录实验过程中的温度、湿度、二氧化碳浓度等环境参数。
五、绘制生长曲线1.根据记录的数据,以时间为横轴,细胞数量为纵轴,绘制细胞生长曲线图。
2.生长曲线应反映出细胞数量随时间的变化趋势。
六、数据分析1.分析生长曲线,计算细胞的倍增时间、生长速率等参数。
2.比较不同条件下的细胞生长情况,分析影响细胞生长的因素。
七、清洗与消毒1.实验结束后,将使用过的器械、培养板等进行清洗和消毒处理。
2.清洗可使用去离子水或清洗剂,消毒可使用75%酒精或紫外线照射等方法。
八、实验总结1.总结实验过程中的经验教训,分析可能存在的误差来源。
2.根据实验结果,提出改进实验方法的建议或对未来研究方向的展望。
请注意,以上步骤仅为一般性的细胞生长曲线实验步骤,具体实验过程可能因细胞类型、实验条件等因素而有所不同。
在实际操作中,请遵循实验室的安全规定和操作规程,确保实验结果的准确性和可靠性。
ms 培养基促进生根的方法
ms 培养基促进生根的方法
在植物组织培养中,生根是一个重要的步骤。
MS培养基是一种经典的组织培养基,也是促进生根的主要培养基之一。
以下是使用MS培养基促进生根的方法:
1. 准备MS培养基:将MS培养基粉末加入蒸馏水中,搅拌均匀,然后加热至溶解。
调整pH值至5.8,并加入植物生长素(如IBA或NAA)以促进生根。
2. 准备植物材料:收集植物茎段、叶片或愈伤组织,进行消毒处理。
3. 制备生长环境:将准备好的MS培养基倒入无菌培养瓶中,然后将植物材料插入培养基中。
4. 培养条件:将培养瓶置于适宜的光照条件下(如光照强度为50-100μmol/m2s),温度保持在适宜范围内(如20-25℃)。
5. 观察和处理:观察植物材料的生长情况,将生长健壮的组织转移到新的MS培养基中,继续培养。
以上是使用MS培养基促进生根的基本方法。
不同植物材料和生长条件可能需要调整培养基配方和培养条件。
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培养基实验实训报告模板
一、实验目的1. 了解培养基的配制原理和重要性。
2. 掌握培养基的配制方法和步骤。
3. 学习并实践高压蒸汽灭菌操作方法。
4. 熟悉培养基的接种技术和菌落观察。
二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。
根据微生物的种类和实验目的不同,培养基也有不同的种类和配制方法。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例,学习培养基的配制原理和方法。
三、实验材料与仪器1. 材料:牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、蒸馏水、pH试纸、无菌水、微生物菌种等。
2. 仪器:高压蒸汽灭菌锅、电子天平、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、接种环、培养皿、显微镜等。
四、实验步骤1. 培养基的配制- 称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠,加入适量的蒸馏水。
- 将牛肉膏、蛋白胨溶解后,加入琼脂,继续加热至完全溶解。
- 调整pH值至7.2-7.4,可用pH试纸检测。
- 将培养基倒入培养皿中,待凝固后备用。
2. 高压蒸汽灭菌- 将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中。
- 加盖,设定灭菌温度和时间(一般121℃,15-20分钟)。
- 灭菌结束后,自然冷却至室温。
3. 接种与培养- 将灭菌后的培养基倒入培养皿中,待凝固后,用接种环取少量菌种,接种于培养基表面。
- 将培养皿放入培养箱中,设定合适的温度(一般为37℃)进行培养。
4. 菌落观察- 培养一定时间后,观察菌落生长情况,记录菌落特征。
五、实验结果与分析1. 培养基的配制- 观察培养基是否凝固,是否有气泡等异常现象。
- 检测培养基的pH值,是否符合要求。
2. 高压蒸汽灭菌- 观察灭菌后的培养基是否有微生物生长。
- 检测培养基的菌落计数,判断灭菌效果。
3. 接种与培养- 观察菌落生长情况,记录菌落特征。
- 比较不同菌种在相同培养基上的生长情况。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中,应注意哪些事项?2. 高压蒸汽灭菌的效果如何判断?3. 不同菌种在相同培养基上的生长情况有何差异?七、实验结论1. 成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
培养基的接种实验步骤
培养基的接种实验步骤培养基的接种实验步骤其实一点都不复杂,大家只要按照一定的流程来,基本上就能顺利完成。
要说这个培养基,简单来说,就是一个供微生物生长的“豪华套餐”,微生物通过它能得到生长所需的营养,就像我们吃饭一样,养分都能吸收得很棒。
不过,在实验中,这个“豪华套餐”可不是随便谁都能吃的。
它可得经过精心的准备,接种过程得小心谨慎,稍不注意,可能就会给微生物“添乱”了。
怎么做呢?你跟着我一起来看,保证你马上能搞懂。
咱们得准备好一切。
培养基得先做好,装进培养皿或者试管里。
如果是固体培养基,那就像是煮粥时加点“凝胶”让它定型;如果是液体培养基,那就像是给小家伙们准备了一碗“汤”。
这些培养基得一锅一锅地做,讲究卫生,啥细菌、杂质都得“打发”掉,不能有一点马虎。
培养基放进去后,记得得搞清楚,管子、皿子要消毒,毕竟你要是碰上不速之客,谁都不开心,不是?然后,咱们接种这步就开始了。
别以为随便一捻就行,这里面可有学问呢。
接种环就是关键中的关键!这环,就像是我们拿筷子夹菜一样,得稳准狠。
你得把接种环放到火焰上烧一下,烧到红红的,像个小火把一样的。
这样做是为了杀死接种环上可能有的细菌,确保万无一失。
接种环冷却了,就可以开始操作了。
切记,一定要让接种环待在空气中冷却,不然小心烧到自己,热乎乎的环可是有点危险的。
咱们把要接种的微生物弄好。
一般来说,你可能从琼脂平板上取,或者从液体培养基里取,甚至有时候可能从环境样本中取。
你把接种环轻轻地接触微生物,记得,不要太猛,慢慢地接触就行,别让细菌散落得四处乱跑。
拿好了微生物后,别着急,还是得保持冷静,先放在目标培养基上,稳稳当当地转动接种环,或者画个小圈圈,让微生物均匀分布在培养基表面。
别小看这个过程,控制力度、转动的角度,都是技术活儿。
然后,接下来的步骤也是至关重要的,咱们要给这些微生物提供一个“五星级的环境”,让它们在培养基里开心长大。
这个时候,最好是把接种好的培养基放进温箱里。
发现植物的生长和养分吸收实验
发现植物的生长和养分吸收实验植物的生长过程及其对养分的吸收是植物学研究的重要方向之一。
为了更好地了解植物的生长和养分吸收机制,科学家们进行了一系列的实验。
本文将介绍一种发现植物的生长和养分吸收的实验方法,并探究实验结果所带来的启示。
实验材料:1. 植物种子(选择常见的小麦、豌豆等作为研究对象)2. 培养基(包含适量的养分和水分)实验步骤:1. 在一组培养皿中均匀撒上一层培养基。
2. 将相同数量的植物种子分别放入每个培养皿中。
3. 使用适量的水对每个培养皿中的种子进行浇灌。
4. 选择适当的光照条件和温度,放置培养皿并标记好各组样本。
5. 每天观察并记录不同样本的植物生长情况,包括根系生长、茎干伸展和叶片展开等。
6. 在一定时间内结束实验,并对根系、茎干和叶片等部位进行定量分析,测量相应的长度、面积和质量等。
实验结果与讨论:通过对实验结果进行统计和比较,我们可以得出以下几点结论:1. 光照条件对植物的生长和养分吸收具有重要影响。
在充足的光照下,植物的生长速度明显加快,茎干的生长也更加健壮,叶片的展开更加广阔。
这是因为充足的光照能够提供光合作用所需的能量,促进植物的养分合成和转运。
2. 温度对植物的生长和养分吸收也具有一定的影响。
适宜的温度可以促进植物生长,而过高或过低的温度则会抑制植物的正常发育。
这是因为适宜的温度能够维持酶活性和代谢速率在较高水平,从而有利于植物对养分的吸收和利用。
3. 养分的供应对植物的生长和养分吸收至关重要。
例如,含有较高氮、磷和钾等关键养分的培养基可以明显促进植物的根系生长和叶片展开。
这是因为这些养分在植物的生理代谢中扮演着重要角色,是构建细胞和组织的基本元素。
通过对实验结果的分析,我们可以得出以下启示:1. 提供适宜的光照和温度条件对植物的正常生长至关重要。
在种植植物时应尽量确保足够的光照和适宜的温度环境,从而为植物的生长提供有利条件。
2. 合理施用养分对植物的生长和发育至关重要。
培养基的常规配置程序实验报告[总结]
培养基的常规配置程序一、目的要求1.掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。
2.掌握培养基的配置原则和方法。
3.掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。
二、基本原理营养琼脂培养基:是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。
高压蒸汽灭菌:主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。
将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。
待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。
此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。
三、实验材料1.药品:营养琼脂、蒸馏水。
2.仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿等。
3.其他物品:药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花等。
四、操作步骤(一)玻璃器皿的洗涤和包装1.玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。
再置于烘箱中烘干后备用。
2.灭菌前玻璃器皿的包装(1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,用报纸按传统包月饼的方法,将几套培养皿包成一包,准备灭菌。
(2)移液管的包扎:先将报纸裁成宽约5cm的长纸条,然后将移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,右手将移液管压紧。
在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。
上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。
(3)无菌水的制备:往两支洁净的试管中分别加入10ml蒸馏水,用试管塞塞好,准备灭菌。
(二)固体培养基的配制过程1.培养基配制(1)称取4g营养琼脂,溶于125ml的蒸馏水中,加热使其完全溶解。
(2)培养基的分装分装时,将4支洗净的试管放置在试管架上,用5ml的移液管分别移取适量的上述溶液于试管中(装入量不宜超过试管高度的1/5);将剩余溶液倒入锥形瓶中(装入量以锥形瓶总体积的一半为限度),用橡皮塞塞好瓶口。
培养基促生长实验操作
培养基促生长实验操作实验目的:本实验旨在通过合适的培养基制备和培养条件,促进植物的生长与发育过程。
实验材料:1.植物种子(建议选择常见的植物种子,如油菜、小麦等);2.种子培养基(可购买或自制,如MS培养基);3.培养皿或培养瓶;4.移液器和移液枪;5.纯净水;6.实验室常用器材(试管、量筒、移液枪等);7.光照设备或恒温培养箱。
实验步骤:1.种子表面消毒:将收集到的植物种子放入消毒瓶中,添加适量的70%乙醇,摇动均匀,浸泡15-30秒,然后倒出乙醇,用纯净水冲洗种子表面,重复上述操作3次。
在无菌条件下,将种子转移到含0.1%次氯酸钠溶液中,浸泡10-15分钟,然后用纯净水冲洗3次,以去除表面的次氯酸盐。
最后,将种子浸泡在含0.1%地奥霉素(或其他抗生素)的纯净水中,边缘动摇,边充分混合,浸泡20-30分钟以杀灭或抑制种子表面的细菌和真菌。
最后,用纯净水冲洗3次,将种子转移到无菌条件下的培养皿或培养瓶中备用。
2.培养基制备:根据所选用的培养基配方(如MS培养基),准确称量培养基粉末,加入适量的纯净水中,搅拌至粉末完全溶解。
将培养基溶液倒入洁净的容器中(如试管、烧杯等),并使用自制培养基滤经0.22μm的滤器进行无菌过滤,以去除悬浮物和微生物。
倒出无菌培养基液体,避免把培养基接触到非无菌物品,如手指、桌面等,以免污染。
3.培养基接种:将处理后的种子分别均匀撒播在含有培养基的培养皿或瓶子上。
对于小种子,可以利用移液器或移液枪将种子移植到固体培养基或带有培养基的琼脂瓶中。
要避免种子之间的粘连和聚集,使得它们能够充分生长和发育。
4.培养条件:根据所培养的植物的要求,为其提供适宜的培养条件。
一般来说,光照条件下的培养需要提供适量的光照,可以采用日光灯或人工光源来模拟自然光照。
此外,温度和湿度也是生长过程中需关注的因素,可以使用恒温培养箱或温室条件来控制。
5.培养过程监测:在培养过程中,每隔一段时间检查培养皿中植物的生长情况,包括根的生长、叶片的形成、茎的延伸等。
培养基配制使用操作规程0
培养基配制使用操作规程0一、实验前准备1.确定所需的培养基种类和配制量。
2.准备所需的实验材料和设备,如试剂、培养基成分、量筒、称量器具等。
3.检查所使用的设备和容器,确保其干净无污染。
二、配制培养基1.根据培养基配方,按照比例准确称取所需的培养基成分。
不同的培养基成分可能有不同的配比,应根据具体要求进行配制。
2.准确称取培养基成分后,将其放入一个干净的容器中。
如果配制的培养基成分较多,可以选择使用一个混合容器,将不同的成分分批加入。
3.加入一定量的去离子水,使培养基成分溶解均匀。
注意搅拌培养基溶液,以确保成分充分溶解。
4.根据培养基配方需要,调整培养基的pH值。
可以使用酸碱溶液进行调节,pH值应根据具体要求控制在适宜范围内。
5.根据培养基配方需求,加入一定量的琼脂或琼脂糖,使培养基凝胶化。
注意在加热溶化琼脂时要确保充分溶解,并避免过热。
6.将配制好的培养基溶液均匀地倒入培养皿或试管中,封装好,并在密封处涂抹石蜡或添加适量的抗生素用于防止污染。
三、消毒和灭菌处理1.培养基配制完成后,应进行标本消毒处理,以确保培养基无菌。
可以使用自主炉、高压灭菌器或紫外线灯进行消毒处理,处理时间和方法应根据具体要求进行。
2.检查消毒后的培养基容器,确保无菌。
如果发现有污染或者其他异常情况,需要重新消毒处理。
四、记录1.培养基配制完后,需要记录相关信息,如培养基种类、配制日期、配制人员等。
这些记录有助于追溯和分析培养基的质量问题,也方便后续使用和管理。
以上是培养基配制的操作规程,这些规程主要是为了确保培养基质量的可靠性和可重复性。
执行这些规程可以减少操作失误和污染的风险,保证实验结果的准确性和可靠性,同时也有助于规范实验室管理和操作流程。
制作培养基的实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的制作方法。
2. 熟悉培养基在微生物培养中的作用。
3. 了解培养基成分及其作用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质,其成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等。
通过配制合适的培养基,可以为微生物提供所需的营养物质,使其在实验室条件下进行纯培养。
三、实验材料1. 药品与试剂:葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨、牛肉膏、琼脂、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、氢氧化钠、盐酸、无菌水等。
2. 仪器与设备:高压蒸汽灭菌器、电热恒温水浴锅、天平、烧杯、量筒、玻璃棒、无菌试管、无菌棉塞、酒精灯、接种环等。
四、实验方法1. 配制培养基(1)称取葡萄糖20g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、牛肉膏5g、琼脂20g,加入1000ml无菌水。
(2)将上述药品与试剂溶解于烧杯中,用玻璃棒搅拌至完全溶解。
(3)将溶液转移至1000ml容量瓶中,用无菌水定容至刻度。
(4)将溶液煮沸5分钟,去除其中溶解的氧气。
(5)将溶液倒入无菌试管中,每管10ml,放入高压蒸汽灭菌器中,121℃灭菌15分钟。
2. 灭菌(1)将灭菌后的培养基取出,待冷却至50℃左右。
(2)用无菌棉塞封口,放入37℃恒温培养箱中培养24小时,观察培养基是否有污染。
3. 接种(1)将待培养的微生物用接种环取出,接种到灭菌后的培养基中。
(2)用无菌棉塞封口,放入37℃恒温培养箱中培养24小时,观察微生物的生长情况。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌后,无污染现象,符合实验要求。
2. 接种后,微生物在培养基上生长良好,说明培养基成分适宜,能够满足微生物的生长需求。
3. 通过观察实验结果,发现培养基在微生物培养中具有重要作用,为微生物提供了丰富的营养物质,使其在实验室条件下得以纯培养。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了培养基的制作方法,了解了培养基在微生物培养中的作用。
在实验过程中,我们严格按照操作规程进行,确保了实验结果的准确性。
在今后的实验中,我们将继续运用所学知识,为微生物培养提供更好的条件。
62-培养基配制标准操作规程文档范文
废弃处理等。
范围:本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基职责:QC检验员对本标准的实施负责。
内容:1.操作依据:《中国药典》2010年版二部2、培养基(Media)是指人工配制的生物营养物质,即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基(Dehydrated Medium)和配制好的琼脂(Agar)、肉汤(Broths)、稀释液(Diluents)等等。
3.程序3.1.购买3.1.1.质量控制部提出采购计划,并填写《采购计划》,注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等,由相关人员审核,交采购部采购。
3.1.2.培养基买回后,由使用部门填写领料单,由物流部发出。
3.1.3.领回后的干粉培养基,开瓶后应贴上《开启标签》,注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件,并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
3.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制,并填写《培养基配制使用记录》,配制记录上注明所用培养基的批号;盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》,标签应注明:名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为:同一批灭菌的培养基为一批,批号编号方式为年XX,月XX,日XX,流水号XX,例如:2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为:。
3.1.5.配制好的培养基应在一定时间内,按说明书规定时间进行灭菌,避免微生物滋生。
3.1.6.必要时,灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
3.2.培养基质量控制3.2.1.为了保证微生物检验的质量,在使用前,每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
3.2.2.无菌检查用培养基的适用性检查,包括无菌性检查和灵敏度检查;微生物限度检查用培养基的适用性检查指计数培养基适用性检查;控制菌检查用培养基的适用性检查包括促生长能力检查、抑制能力检查和指示能力检查。
培养基的常规配置程序实验报告
培养基的常规配置程序实验报告实验报告:培养基的常规配置程序一、实验目的本实验旨在掌握培养基的常规配置程序,了解不同成分的作用及培养基的质量控制方法,为后续微生物培养和发酵实验提供必要的实验条件。
二、实验原理培养基是用于微生物培养和发酵的介质,其成分和配比直接影响实验结果。
根据实验需求,选择合适的成分和浓度配比,按照一定的程序进行配置,确保培养基的质量。
三、实验步骤1.准备实验器材和试剂:培养皿、玻璃棒、烧杯、量筒、电子天平、称量纸、药匙、试剂、水等。
2.确定培养基配方:根据所需培养的微生物种类和实验目的,选择合适的培养基配方。
例如,肉汤培养基、蛋白胨培养基、高氏一号培养基等。
3.称量试剂:根据配方比例,使用电子天平准确称量各种试剂。
4.配制溶液:将称量好的试剂放入烧杯中,加入适量水,搅拌均匀。
5.调节pH值:使用酸度计测量培养基的pH值,并用稀酸或稀碱调节至适宜的pH范围。
6.分装培养基:将配置好的培养基分装到培养皿中,每皿约20-30mL。
7.灭菌处理:将分装好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌处理,以杀死其中的杂菌。
8.摆设斜面:将灭菌后的培养基转移到试管中,制备成斜面培养基,以便接种和培养微生物。
9.储存培养基:将配置好的培养基存放在阴凉干燥处,并记录储存时间和条件。
四、实验结果与分析在实验过程中,需要记录每个步骤的操作细节和实验结果,并对数据进行分析。
例如,可以记录每种试剂的称量质量、配制过程中的操作难点、pH值调节时的变动情况等。
通过对这些数据的分析,可以找出实验中的问题与不足,为今后的实验提供改进方向。
五、结论通过本次实验,我们掌握了培养基的常规配置程序,了解了不同成分的作用及对微生物生长的影响。
同时,我们还学会了如何调节培养基的pH值、分装和灭菌处理等关键步骤。
这些知识对于后续的微生物培养和发酵实验具有重要的指导意义。
六、建议与展望在未来的实验中,我们可以进一步探讨不同培养基配方对微生物生长的影响,以及优化培养基的质量控制方法。
培养基促生长实验操作
制订培养基灵敏度实验操作,是为了规范、统一培养基灵敏度检测,确保微生物检测准确、安全进行。
2 范围适用于所有配制好并灭菌的培养基。
3 编写依据EP6.54 术语无5 职责QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
6 内容6.1 使用的设备、器具生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等6.2 使用的菌株EP检测用ATCC的菌株:金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633沙门氏菌Salmonella enterica subsp ATCC 14028白色念珠菌Candida albicans ATCC 10231黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代, 并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验用菌株的生物学特性。
6.3 检测频率每批配制、灭菌后的培养基均应做灵敏度测试。
6.4 操作方法6.4.1 对照标准培养基用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培6.4.2 实验培养基将琼脂类的实验培养基加热融化后,冷却至45℃左右,以无菌的方式在无菌培养皿中注入15~20ml,备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备6.4.3.1 细菌菌悬液的制备方法一:取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30~35℃培养18~24h,取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释,分别制成10-7~10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备取白色念珠菌的斜面培养物1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于20~25℃培养24~48h,加入无菌水4ml制成原液,取上述原液按10倍系列稀释,分别制成10-6~10-7的菌悬液备用。
制作培养基的实验报告
制作培养基的实验报告制作培养基的实验报告引言:培养基是微生物学研究中的重要工具,它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。
本实验旨在制作一种适用于细菌生长的通用培养基,并通过实验验证其有效性。
实验材料和方法:1. 实验材料:- 葡萄糖:提供碳源,促进细菌生长。
- 蛋白胨:提供氮源,支持细菌蛋白质合成。
- 酵母提取物:提供维生素和微量元素,满足细菌的生长需求。
- 磷酸二氢钾:提供磷源,参与细菌代谢过程。
- 氯化钠:提供适宜的渗透压,维持细菌细胞内外的平衡。
- 琼脂:用于固化培养基。
2. 实验方法:- 步骤一:将适量的蛋白胨、葡萄糖、酵母提取物、磷酸二氢钾和氯化钠加入适量的蒸馏水中,搅拌均匀。
- 步骤二:将混合液加热至沸腾,持续搅拌,直至所有成分完全溶解。
- 步骤三:将溶液倒入培养瓶中,待其冷却至室温。
- 步骤四:在培养基中加入适量的琼脂,搅拌均匀。
- 步骤五:将培养基倒入培养皿中,待其凝固。
实验结果:经过制作和固化,我们成功制备了一种适用于细菌生长的通用培养基。
在实验中,我们使用了该培养基分别培养了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
1. 大肠杆菌培养结果:- 观察到在培养基上形成了一片均匀的、乳白色的菌落。
- 菌落大小均匀,直径约为2-3毫米。
- 菌落边缘光滑,无明显凹陷或突起。
2. 金黄色葡萄球菌培养结果:- 观察到在培养基上形成了一片黄色的、凸起的菌落。
- 菌落大小不均,直径约为1-2毫米。
- 菌落边缘不规则,有时呈波浪状。
讨论与分析:通过本实验,我们成功制备了一种适用于细菌生长的通用培养基,并验证了其有效性。
大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是两种常见的细菌,它们在该培养基上都能够良好地生长。
在培养基制备过程中,我们选择了葡萄糖、蛋白胨、酵母提取物、磷酸二氢钾和氯化钠作为主要成分。
葡萄糖提供了碳源,促进细菌生长和代谢活动。
蛋白胨提供了氮源,支持细菌蛋白质合成。
酵母提取物提供了维生素和微量元素,满足细菌的生长需求。
细菌生长现象实验报告
一、实验目的1. 观察细菌在不同培养基上的生长现象。
2. 掌握培养基的配置原则和方法。
3. 熟悉细菌在液体培养基中的生长特点。
二、实验材料1. 实验器材:无菌培养皿、无菌棉签、无菌镊子、酒精灯、显微镜、恒温培养箱、液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
2. 实验试剂:蛋白胨、牛肉膏、琼脂、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等。
三、实验步骤1. 配制培养基:(1)液体培养基:称取蛋白胨10g、牛肉膏5g、葡萄糖5g、氯化钠5g,加入1000ml蒸馏水,加热溶解,调整pH值至7.2-7.6,分装于无菌试管中,高压灭菌。
(2)固体培养基:在液体培养基中加入2%琼脂,分装于无菌培养皿中,待凝固后备用。
(3)半固体培养基:在液体培养基中加入0.5%琼脂,分装于无菌试管中,待凝固后备用。
2. 接种:(1)取适量细菌样品,用无菌棉签涂布于固体培养基表面。
(2)取适量细菌样品,用无菌棉签涂布于液体培养基中。
3. 观察与记录:(1)将接种好的培养基放入恒温培养箱中,分别于24小时、48小时、72小时观察细菌的生长现象。
(2)观察液体培养基中的细菌生长现象,记录混浊度、沉淀、菌膜等。
(3)观察固体培养基上的菌落特征,记录菌落形态、大小、颜色等。
四、实验结果与分析1. 液体培养基中的细菌生长现象:(1)混浊生长:大多数细菌在液体培养基中生长繁殖后均匀浑浊,如大肠埃希菌、志贺菌等。
(2)沉淀生长:少数链状排列的细菌如链球菌、炭疽芽孢杆菌等则呈沉淀生长。
(3)菌膜生长(表面生长):专性需氧菌如枯草芽孢杆菌、结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌等一般呈表面生长,常形成菌膜。
2. 固体培养基上的细菌生长现象:(1)菌落形态:细菌在固体培养基上形成菌落,菌落大小、形状、颜色等特征有助于细菌的鉴定。
(2)菌落大小:细菌在固体培养基上的菌落大小与其生长速度有关,生长速度快的菌落较大。
(3)菌落颜色:某些细菌在固体培养基上产生色素,有助于细菌的鉴定。
培养基的制作实验报告
一、实验目的1. 掌握培养基的配制原理和方法。
2. 了解培养基在微生物培养中的应用。
3. 熟悉灭菌和消毒的方法及注意事项。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖所必需的营养物质混合物。
根据微生物种类和实验目的,培养基的配方和种类有所不同。
本实验以牛肉膏蛋白胨培养基为例,介绍培养基的配制、灭菌和消毒方法。
三、实验材料与试剂1. 材料:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、pH试纸等。
2. 试剂:1M HCl、1M NaOH、无菌水等。
四、实验步骤1. 培养基配制(1)称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g,加入1000ml蒸馏水;(2)加入琼脂15g,搅拌均匀;(3)将混合液煮沸,溶解琼脂;(4)用pH试纸检测培养基pH值,调节至7.0-7.2;(5)将培养基冷却至50-60℃,过滤去除杂质;(6)分装至灭菌试管中,每管10ml。
2. 灭菌(1)将装有培养基的试管放入高压蒸汽灭菌锅中;(2)关闭锅盖,加热至压力达到0.1MPa,维持15-20分钟;(3)待压力降至0时,打开锅盖,取出灭菌试管。
3. 消毒(1)将灭菌后的试管置于超净工作台;(2)用无菌镊子取出试管,放入无菌培养皿中;(3)用酒精灯对试管进行消毒;(4)将培养皿放入培养箱中,待培养基凝固。
五、实验结果与分析1. 培养基配制:按照实验步骤,成功配制了牛肉膏蛋白胨培养基。
2. 灭菌:高压蒸汽灭菌法能够有效杀死培养基中的微生物,保证培养基的无菌状态。
3. 消毒:酒精灯消毒可以进一步降低培养基的污染风险。
六、实验讨论1. 在培养基配制过程中,应注意控制pH值,以保证微生物的正常生长。
2. 灭菌和消毒是保证培养基无菌的关键环节,应严格按照操作规程进行。
3. 实验过程中,应注重无菌操作,避免外界微生物的污染。
七、实验结论通过本次实验,掌握了培养基的配制、灭菌和消毒方法,为微生物培养提供了基础条件。
在实验过程中,应严格遵守无菌操作规程,确保实验结果的准确性。
植物组织培养技术实验指导
T植物细胞组织培养技术实验指导书中国计量学院生命科学学院二零零六年七月《植物细胞组织培养》实验指导目录实验一、植物组织培养培养基母液的配制实验二、植物组织培养的培养基配制实验三、康乃馨的离体快繁实验四、胡萝卜愈伤组织的建立实验五、组织培养物的继代培养实验一组织培养基母液的配制一、仪器及药品冰箱、天平(0.0001g)容量瓶: 1000 ml, 500 ml、250 ml、100 ml、25 ml广口储液瓶:500 ml、250 ml、50 ml、25 ml烧杯:1000 ml 、500 ml 、250 ml、100 ml 、50 ml数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺或挖耳勺标签纸、胶水、50%酒精、95%酒精、1 mol/L盐酸、1 mol/L NaOH几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品蒸馏水二、方法和步骤:按照培养基配方,把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类,每一类中各种药品分别称量,如N6培养基各种母液的配制步骤如下:大量元素母液:包括用量较大的几种化合物〈见N6培养基配方〉,按表中排列顺序,将每种药品的用量扩大10倍,分别称取,分别溶解,然后按照顺序混合在一起。
如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合,应单位定容,最后加上蒸馏水,定容至1升或500毫升。
在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃搅棒以减少误差。
定容后的溶液为大量元素母液,配制培养基时,每配1 L培养基需吸取该母液l00 ml或50 ml。
微量元素母液:因用量少,为了称量精确和方便,常配成100倍或1000倍的母液,即每种药品扩大l00倍或者l000倍。
逐个溶解,混合在一起成为微量元素母液,每配1 L N6培养基需吸取该母液10 ml或者1 ml。
铁盐:在N6培养基中需要单独配制,它是由硫酸亚铁(FeSO4•7H2O)2.78 g 和乙二氨四乙酸二钠(Na2-EDTA)3.73 g,分别溶解,混合后,用酒精灯加热半小时以上,冷却后定容至1 L。
培养基制作实训报告模板
一、实验目的1. 熟悉培养基的基本成分和制备方法。
2. 掌握培养基制备过程中的操作技能,包括称量、溶解、调整pH值、加指示剂、熔化琼脂等。
3. 了解培养基的灭菌方法和注意事项。
4. 学会使用实验室常用玻璃器皿和仪器。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的基础,其制备质量直接影响实验结果的准确性。
本实验通过制备不同类型的培养基,使学生掌握培养基制备的基本技能。
三、实验材料1. 原料:蛋白胨、牛肉膏、琼脂、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B1等。
2. 仪器:天平、电炉、烧杯、玻璃棒、pH计、pH试纸、漏斗、滤纸、试管、培养皿、高压灭菌锅等。
3. 药品:NaOH、HCl、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 原料的选择、计算与称量根据培养基的配方,计算所需原料的准确数量,选择合适的称量工具(如电子天平)进行称量。
2. 混合溶解将称量好的原料依次放入烧杯或其他容器中,加入少于总量的水,在电炉上加热溶解,并不断搅拌。
固体培养基需要最后加入琼脂,边加边搅拌,待完全溶解后,补足所失水分。
3. 调整pH值用pH试纸或pH计测定培养基的pH值,用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCl溶液调节pH值到所需范围。
注意在培养基温度稍降低后进行调节,并逐滴加入酸碱调节剂,以免调过再回调。
4. 加指示剂对某些培养基,按要求加入一定量的指示剂。
注意不要在过高温度下加入指示剂。
5. 熔化琼脂固体或半固体培养基需加入一定量的琼脂。
将琼脂加入后,置电炉上一面搅拌一面加热,直至琼脂完全熔化后停止搅拌,并补足水分(水需预热)。
6. 分装与灭菌将制备好的培养基分装于中试管或三角瓶内,塞好棉塞,用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
采用高压蒸汽灭菌法,一般压力为0.1MPa,时间为30分钟。
7. 冷却与倒平板待培养基冷却至50℃左右,倾注平板,待凝固后备用。
五、实验结果与分析1. 培养基制备结果按照实验步骤制备了不同类型的培养基,如营养琼脂、葡萄糖琼脂、PDA培养基等。
培养基的制作实验报告
培养基的制作实验报告注:本实验报告旨在总结培养基制作实验的过程和结果,并分析所得到的数据。
通过本实验,我们可以更好地了解培养基的制作原理和应用。
一、引言培养基是一种为微生物的生长与繁殖提供所需的营养物质的载体。
它在微生物学研究、医学诊断、工业生产等领域扮演着重要角色。
然而,优质的培养基并不仅仅需要提供足够的营养物质,还需要控制其他因素,如pH值、溶解氧含量等,以确保微生物的生长环境适宜。
本实验旨在探究培养基的制作原理,并通过实际操作验证培养基对微生物生长的影响。
二、材料与方法实验所需材料包括蔗糖、肉汤粉、琼脂、含有微生物的试管等。
首先,我们需要准备好培养基的成分,将蔗糖和肉汤粉溶解在适量的蒸馏水中,然后加热至沸腾,直至完全溶解。
接着,将琼脂加入溶解后的液体中,轻轻搅拌,使其均匀分布。
将制作好的混合溶液热的状态下进行灭菌处理。
最后,将制备好的培养基倒入含有微生物的试管中,并进行培养与观察。
三、结果与数据分析在本实验中,我们制备了两种不同的培养基A和培养基B,并分别培养了两种不同的菌株。
经过一段时间的培养,我们发现,培养基A在菌落形成和增长速度方面表现出较好的效果,而培养基B则相对较差。
这说明培养基的配方对微生物的生长有着重要的影响。
为了更进一步分析培养基制作的原理,在实验过程中,我们进行了一系列的对照实验。
首先,我们使用了不同浓度的蔗糖来制作培养基,并培养同一菌株。
结果发现,低浓度的蔗糖制成的培养基中菌落生长较慢,而高浓度的蔗糖则有助于菌落的形成和生长。
此外,我们还进行了pH值和溶解氧含量的调节实验。
通过改变培养基的pH值,我们发现,在一定范围内,微生物的生长受到pH值的影响,与培养基的配方相互作用。
而溶解氧含量的调节则对大部分菌株的生长产生了显著影响。
这些实验结果表明,培养基的制作不仅仅是简单地提供营养物质,还需要注意其他因素的调节,以适应不同的微生物群体。
四、讨论与展望通过本实验,我们深入了解了培养基制作和微生物生长之间的关系。
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培养基促生长实验操作精编W O R D版
IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】
1目的
制订培养基灵敏度实验操作,是为了规范、统一培养基灵敏度检测,确保微生物检测准确、安全进行。
2 范围
适用于所有配制好并灭菌的培养基。
3 编写依据
EP6.5
4 术语
无
5 职责
QC卫检组人员负责培养基的配制、灭菌、灵敏度实验。
6 内容
6.1 使用的设备、器具
生物安全柜、无菌培养皿、无菌刻度吸管或无菌注射器、无菌玻璃涂布器、酒精灯等6.2 使用的菌株
EP检测用ATCC的菌株:
金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538
大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739
铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
枯草芽孢杆菌 Bacilllus subtilis ATCC 6633
沙门氏菌Salmonella enterica subsp ATCC 14028
白色念珠菌Candida albicans ATCC 10231
黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404
培养基灵敏度检测所用的菌株传代次数不得超过5代, 并采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验用菌株的生物学特性。
6.3 检测频率
每批配制、灭菌后的培养基均应做灵敏度测试。
6.4 操作方法
6.4.1 对照标准培养基
用已经过实验证明合格的培养基或购买的有质量证书的成品平皿培养基作为对照标准培养基.
6.4.2 实验培养基
将琼脂类的实验培养基加热融化后,冷却至45℃左右,以无菌的方式在无菌培养皿中注入15~20ml,备用。
液体类的培养基直接使用。
6.4.3 菌悬液的制备
6.4.3.1 细菌菌悬液的制备
方法一:取细菌的斜面培养物1耳匙接种在酪蛋白大豆消化肉汤培养基中30~35℃培养18~24h,取上述培养物用无菌水按10倍系列稀释,分别制成10-7~10-8的菌悬液备用。
6.4.3.2 霉菌菌悬液的制备
取白色念珠菌的斜面培养物1耳匙接种在沙氏琼脂斜面上于20~25℃培养24~48h,加入无菌水4ml制成原液,取上述原液按10倍系列稀释,分别制成10-6~10-7的菌悬液备用。
取黑曲霉的斜面培养物加入无菌水4ml制成孢子悬液,取上述孢子悬液按10倍系列稀释,分别制成10-6~10-7的菌悬液备用。
方法二:直接用杭州微球生物技术有限公司的产品-培养基灵敏度指示剂,该产品已经帮我们精确控制了细菌数量,只要直接拿稀释液稀释下就可以直接取到10~100CFU试验菌。
使用方便,数量精确。
推荐用此方法操作。
6.4.4培养基的生长促进实验
6.4.4.1 琼脂类培养基的生长促进实验
每株菌用2个实验培养基平皿,用表面涂布法在每个平皿表面接种0.1~0.5ml的菌悬液(约10~100CFU试验菌),同时用2个对照标准的培养基平皿做对照,接种相同量的菌悬液试验,在规定温度下培养,取出平皿点计菌落数。
实验培养基上的微生物数量应为对照培养基上微生物生长数量的70%-150%范围内。
(注:每种培养基生长促进实验的具体菌株见附录1)
6.4.4.2液体类培养基的生长促进实验
每株菌用2管(或瓶)实验培养基,接种0.1~0.5ml的菌悬液(约10~100CFU试验菌),同时用2个对照标准的培养基或用已知合格的酪蛋白大豆消化琼脂平皿做对照,接种相同量的菌悬液试验,在规定温度下培养,对比或计数,在规定时间内能生长菌落为合格。
6.4.5 培养基的生长促进和抑制特性试验
6.4.5.1 液体培养基的生长促进特性试验
接种0.1~0.5ml的菌悬液(约10~100CFU试验菌)于一定量适合的培养基。
在特定温度下培养,培养时间不超过试验中规定的最短期限。
与对照标准的培养基获得的微生物生长相比,接种微生物的生长应明显。
6.4.5.2固体培养基的生长促进特性试验
采用表面涂布法,在每一块平皿上接种0.1~0.5ml的菌悬液(约10~100CFU试验菌)适宜微生物。
在特定温度下培养,培养时间不长于试验中规定的最短期限。
接种微生物的生长与对照标准的培养基获得的微生物生长相当。
6.4.5.3液体或固体培养基的抑制特性试验
用适当培养基接种至少100 CFU适宜微生物。
在特定温度下培养,培养时间至少为试验中规定的最长期限。
无受试微生物生长。
(注:每种培养基生长促进和抑制特性试验的具体菌株见附录1)
7 附录
附录1 培养基生长促进和抑制特性表
附录1:
培养基的生长促进、抑制特性表。