产脂肪酶真菌的筛选
产脂肪酶的菌株筛选方法的研究
产脂肪酶的菌株筛选方法的研究近年来，随着植物油和动物油在食品、医药、农药以及其他行业的广泛使用，脂肪酶的需求量逐渐增加。
脂肪酶是一种具有多种功能的酶，它可以分解脂肪和油脂，用来制造食品添加剂、医药中间体以及其他有用的产品。
发酵技术是获得脂肪酶的重要方法之一，而发酵菌株的筛选是发酵技术的基础和关键步骤，其目的是从微生物资源中筛选出对脂肪酶产生量有明显提高的菌株（颜永涛，2018）。
一般而言，菌株的筛选标准主要有两个，一是筛选的菌株能有效的产出脂肪酶，二是筛选的菌株能兼顾发酵条件的优化。
因此，要求筛选出高产脂肪酶的菌株，必须考虑到发酵条件与产物形成之间的关系。
筛选高产脂肪酶的菌株一般包括多种筛选方法，其中比较常见的是两种：一种是培养基筛选方法，另一种是固定化筛选方法。
培养基筛选方法是在最佳培养基中，根据育种材料的不同（如不同的液体培养基或固体培养基），采用基础发酵条件对菌株进行培养，以获得高产脂肪酶的菌株。
优势在于，培养基筛选方法易于操作，能够及时获得结果，且价格低廉，但这种方法受发酵条件的限制，在某些情况下，成果不太满意。
固定化筛选方法是在发酵过程中，将发酵菌株通过固定化技术（如表面层析法、膜层流法、筛选电泳法）进行筛选，然后再根据筛选出来的菌株的表现和性状，以及细胞高分子量蛋白或细胞酶活性，来识别和分离出高产脂肪酶的菌株。
相比培养基筛选方法，固定化筛选方法更加精确，能够准确识别出高产脂肪酶的菌株，但操作复杂，费时费力，存在技术操作的难度。
另外，结合培养基筛选方法和固定化筛选方法也可以进行脂肪酶菌株的筛选。
例如，采用柔性发酵条件，针对不同的育种材料经过培养基的筛选，从中获得脂肪酶合成量提高明显的发酵菌株，再利用固定化筛选方法进一步筛选出脂肪酶合成量更高的菌株（张静，2019）。
综上所述，要筛选高产脂肪酶的菌株，可以采用培养基筛选方法、固定化筛选方法，也可以结合培养基筛选方法和固定化筛选方法进行操作，以达到所需的目标。
产脂肪酶真菌的筛选
脂肪酶产生细菌的筛选巩素绢（河北农业大学生命科学学院微生物与生化药学，河北保定071001）摘要：从富含油脂的土壤中寻找高产脂肪酶的真菌，以期为扩大脂肪酶的菌源提供材料。
本试验从保定市炼油厂附近土样中，经富集培养、平板筛选得到22株脂肪酶产生菌株，通过复筛得到1株脂肪酶活力较高真菌。
为脂肪酶产生菌以及脂肪酶的工业化生产与应用奠定了基础。
关键词：脂肪酶；筛选；真菌Abstract：The study aimed to seek for the fungi with high yield of lipase from the greasy soil，so as to provide the material for expanding the fungi source of lipase.22strains of fungi producing lipase were isolated by enrichment culture and flat screening methods in soil samples collected from the refinery of Baoding．A stain with higher activity of producing lipase was isolated by re-screening methods.The study laid a foundation for lipase producing bacteria and industrial production and application of lipase to some extent．Key words:Lipase;Screening;fungi前言脂肪酶(Lipase，E.C.3.1.1.3，甘油三酯水解酶)，可在油水界面催化甘油三酯形成甘油二酯、甘油单酯或甘油及游离脂肪酸［1］。
产脂肪酶乳酸菌的筛选及其对奶酪风味的影响
产脂肪酶乳酸菌的筛选及其对奶酪风味的影响产脂肪酶乳酸菌的筛选及其对奶酪风味的影响引言：奶酪作为一种受人们喜爱的乳制品，其独特的风味是由其中的乳酸菌发酵产生的。
然而，乳酸菌中只有少数能产生脂肪酶。
脂肪酶可将乳中的脂肪水解为脂肪酸，这些脂肪酸为奶酪提供了特殊的风味。
本文将探讨产脂肪酶乳酸菌的筛选方法以及其对奶酪风味的影响。
第一部分：产脂肪酶乳酸菌的筛选方法脂肪酶乳酸菌的筛选是探索奶酪风味的关键。
以下是一些常见的筛选方法：1. 纸片法：在培养基上涂布脂肪酶底物，如乳脂肪酸甘油酯，然后在此基础上观察细菌的产酶能力。
产脂肪酶菌株会在纸片上出现透明圈，表示底物被水解。
2. 红雪藻酪蛋白平板法：添加红雪藻酪蛋白的平板培养基，利用产酶细菌使平板发生透明区带来判断。
3. 紫外线灭菌法：在试管中加入产酶菌株和乳脂肪酸甘油酯，利用UV-C紫外线灭菌使菌株破裂释放的酶作用对乳脂肪酸甘油酯进行水解，并观察产酶能力。
第二部分：产脂肪酶乳酸菌对奶酪风味的影响脂肪酶的存在对奶酪的风味影响巨大。
乳脂肪酸通过脂肪酶的作用被水解，产生了多种风味物质，如酸乳、酯类和醛类。
这些物质不仅为奶酪增添了复杂的香味，同时也能够增强奶酪的口感和风味。
此外，酯类化合物还能够产生脂肪感，使奶酪口感更为丰富。
因此，产脂肪酶的乳酸菌对奶酪的风味有着明显的影响。
此外，不同菌株产生的脂肪酶种类和酶活性也有所不同，这将进一步影响奶酪的风味。
因此，在奶酪生产中，选择合适的产脂肪酶乳酸菌菌株是非常重要的。
结论：产脂肪酶的乳酸菌在奶酪生产中起着重要的作用。
通过合理的筛选方法，我们可以获得高效产酶的菌株。
这些乳酸菌通过水解乳脂肪酸产生不同风味物质，丰富了奶酪的风味和口感。
因此，我们应该重视产脂肪酶乳酸菌的筛选与利用，以提高奶酪的质量和口感。
注意：本文为人工智能生成内容，仅供学术参考和个人用途，请勿直接传播和抄袭通过紫外线灭菌法观察产酶能力，可以判断乳酸菌是否具有产脂肪酶的能力。
产脂肪酶菌株的筛选及紫外-光复活诱变
产脂肪酶菌株的筛选及紫外-光复活诱变王金主1，袁建国2，杨丹2，徐军庆2，谭少君2，刘建民2，王元秀1，李峰2*（1.济南大学化学化工学院，山东济南250022；2.山东食品发酵工业研究设计院，山东济南250013）摘要：目的从土壤中分离选育出脂肪酶高产菌株。
方法通过罗丹明B 指示平板法分离出产脂肪酶量高的菌株，通过紫外-光复活诱变选育提高产量。
结果从土壤中筛得脂肪酶产量为6.75U/mL 的菌株白地霉L-8，通过紫外-光复活诱变提高产量到12.08U/mL 。
结论获得了一株高产脂肪酶的白地霉菌株，结果表明从土壤中分离出产脂肪酶的菌株，再通过紫外-光复活诱变提高其产量的高产菌株的筛选方法是可行的。
关键词：脂肪酶；罗丹明B ；白地霉；紫外-光复活诱变中图分类号：Q814.1文献标识码：A文章编号：1672-979X （2011）05-0192-04收稿日期：2011-1-11作者简介：王金主()，男，山东临沂人，硕士研究生，研究方向发酵工程：x @*通讯作者：李峰，男，高级工程师，研究方向发酵工程和酶工程：j @Screening of Lipase Producing Strains and Its Breeding by UV -photoreactivation MutagenesisWANG Jin-zhu 1,YUAN Jian-guo 2,Y ANG Dan 2,XU Jun-qing 2,TAN Shao-jun 2,LIU Jian-min 2,W ANG Y uan-xiu 1,LI Feng 2(1.School of Chemistryand Chemical Engineering,University of Jinan,Jinan 250022,China;2.Shandong F ood &Fermentation Industry Research and Design Institute,Jinan 250013,China)Abstr act:Object ive To isolate and select a high-yield lipase producing strain from soil.Methods A high-yield strain was isolated by flat separation using Rhodamine B as indicator.Its production was improved by ultraviolet photoreactivation mutagenesis.R esult s We obtained Geotrichum candidum L-8from soil.Its lipase yield was improved from 6.75U/mL to 12.08U/mL through ultraviolet photoreactivation mutagenesis.Conclusion A high-yield lipase producing strain was obtained.The methods to isolate it from soil and to improve its production of lipase were feasible.Key Words:lipase;Rhodamine B;Geotrichum candidum;ultraviolet photoreactivation mutagenesis脂肪酶是一种特殊的酯键水解酶[1]，它能水解甘油三酯产生脂肪酸、甘油二脂、甘油单脂和甘油[2]。
产脂肪酶菌株的筛选鉴定及响应面法
摘要本文开展了产脂肪酶菌株的筛选鉴定及响应面法优化发酵工艺试验,确定得到的高产脂肪酶菌株为Youzh-1,对其进行16S rRNA 测序分析,确定其为荧光假单胞菌,在单因素试验的基础上采用响应面法对Youzh-1的发酵工艺进行进一步优化设计,得到最佳发酵工艺为葡萄糖添加量18.825g/L 、牛肉膏添加量25.98g/L 、温度41℃、pH 值6。
在此条件下测得脂肪酶活力为79.87U/mL ,较理论值87.19U/mL 减少了8.39%,证明模型可靠。
关键词脂肪酶;菌株;筛选;鉴定;响应面法;发酵工艺;优化中图分类号TQ925.6文献标识码A 文章编号1007-5739(2022)12-0165-06DOI :10.3969/j.issn.1007-5739.2022.12.046开放科学(资源服务)标识码(OSID ):Screening and Identification of Lipase-producing Strain and Optimization of FermentationProcess by Response Surface MethodologyQIN Hao LIU Kai DENG Wenxi LI Shan YU Shuping WANG Mengyuan GUO Donghui *(College of Life Sciences,Shandong First Medical University,Tai ′an Shandong 271016)Abstract In this paper,the screening and identification of lipase -producing strain and the optimization of fermentation process by response surface methodology were researched.The obtained high lipase-producing strain was Youzh-1,which was determined to be Pseudomonas fluorescens by 16S rRNA sequencing analysis.On the basis of the single factor experiment,the response surface methodology was used to further optimize the fermentation process of Youzh-1.The optimum fermentation process was obtained as follows:the addition of glucose was 18.825g/L,the addition of beef extract was 25.98g/L,the temperature was 41℃,and the pH value was 6.Under these conditions,the lipase activity was measured to be 79.87U/mL,which was 8.39%lower than the theoretical value (87.19U/mL),which proved that the model was reliable.Keywords lipase;strain;screening;identification;response surface methodology;fermentation process;optimization产脂肪酶菌株的筛选鉴定及响应面法优化发酵工艺秦昊刘凯邓文玺李珊于淑萍王梦圆郭东会*(山东第一医科大学生命科学学院,山东泰安271016)脂肪酶在人们的生产生活中发挥着重要作用[1]。
产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化
2.3.3 不同起始 pH 对产酶的影响 结果显示，起始 pH 对产酶的影响很大，该菌株产
摘 要：从土壤样本中分离出一株具有较高活力的产脂肪酶菌株，初步确定为假单胞菌属。对该脂肪酶产酶条件进 行优化，最佳碳源为糊精、氮源为硫酸铵，最适发酵温度为 30 ℃，最适起始 pH 为 7.0。 关键词：脂肪酶；假单胞菌属；产酶条件
Screening of Lipase Producing Strains and Optimization of the Lipase Production LI Xin- ling1, SUN Xiao- fei1, MENG Nan1, BU Mei- ling1，LIU Jin2
Abstract: This thesis reports that a lipase- produing bacterial strain was isolated from the oilysoil samples and was identified as pseudomonas. The lipase fermentation condition for the strain was optimized by studying on effect of nitrogen sources, carbon sources and other influence factors. The optimum carbon and nitrogen source was dextrin and ammonium sulfate. The optimum pH was 7.0, and the optimum temperature for fermentation was 30 ℃. Key words: lipase; pseudomonas; optimal lipase- producing condition
产脂肪酶细菌的筛选及发酵培养条件的优化
[收稿日期] 2011-05-16;2011-08-12修回[基金项目] 贵州省科技攻关项目 生物酶法生产生物柴油 [黔科合NY(2006)3031];贵州省科技创新人才团队建设项目 贵州省特色动植物资源保护与可持续利用科技创新人才团队 [黔科合人才团队(2009)4007][作者简介] 洪 鲲(1973-),男,讲师,硕士,从事生物化学研究。
E -mail:ken _hong2004@yah *通讯作者:乙 引(1967-),男,教授,博士,硕士生导师,从事植物生理与生物化学研究。
E -mail:yiyin@gz [文章编号]1001-3601(2011)09-0561-0103-03产脂肪酶细菌的筛选及发酵培养条件的优化洪鲲,张豪,乙引*,张习敏(贵州师范大学生命科学学院,贵州贵阳550001)[摘 要]为给扩大脂肪酶的生产源提供基础资料,对富含油脂的67份土壤样品进行了产脂肪酶细菌的筛选及目标菌株发酵培养条件的优化试验。
结果表明:筛选分离出15株脂肪酶产生菌,经过对其发酵液脂肪酶活力的比较,菌株D9-1发酵液脂肪酶活力最高。
目标菌株D9-1产脂肪酶最佳培养条件:最适氮源为1%蛋白胨,最适碳源为1%橄榄油,表面活性剂为1%OP -10,最适发酵温度30 ,摇床转速为170r/m in,发酵培养时间为24h 。
[关键词]脂肪酶;细菌;筛选;发酵;培养条件[中图分类号]S182;S154[文献标识码]AScreening for Lipase -produ cin g Bacterial Strains andOptimization of the Fermentation Con ditionsH ONG Kun,ZH A NG H ao,YI Yin *,ZH ANG X-i min(School of Lif e Sciences ,Guizhou Normal U niversity ,Guiy ang,Guizhou 550001,China)Abstract:15lipase -pr oducing bacterial strains w ere isolated fr om 27soil samples rich in oil and D9-1w as selected as the mo st potential lipase -producing strain through comparing the lipase activity in fermentation broths o f these strains.T he results show ed that the o ptimum nitrog en source is peptone,optimum carbon source is 1%o liv e oil,optimum surfactant is 1%OP -10,optimum temperature is 30 ,and w hen the rotating speed w as 170r/min,the lipase activity in ferm entation broth r eached the highest after 24h.Key words:lipase;bacter ium;screening;ferm entation;fermentation conditio ns 脂肪酶广泛存在于动植物、细菌、真菌和霉菌体内[1-2],具有催化三脂酰甘油及其他一些水不溶性脂类的转酯、水解、酯化、醇解及酯类逆向合成的特性。
高产脂肪酶菌株的筛选及酶学性质的研究的开题报告
高产脂肪酶菌株的筛选及酶学性质的研究的开题报告
一、选题背景及意义
脂肪酶作为一种广泛存在于细菌、真菌和动植物中的酶类，在脂肪水解、饮食营养、生物转化等方面具有重要的作用。
因此，筛选高产脂肪酶的菌株具有重要的研究意义。
目前，虽然已有许多脂肪酶菌株被发现，但其产酶能力参差不齐，产酶量较少，对于一些实际应用仍然存在着不足。
因此，筛选高产脂肪酶的菌株并进行酶学性质的研究，对于进一步了解脂肪酶的生产和应用具有重大意义。
二、研究内容
1.从自然界中筛选高产脂肪酶的菌株，利用液体发酵和固体发酵技术进行发酵，并对产酶量进行分析和比较；
2.对高产脂肪酶菌株的生长条件进行研究，包括温度、pH值、培养基成分等因素对其生长和产酶能力的影响；
3.从高产脂肪酶菌株的菌体中提取酶液，进行酶学性质的研究，包括酶的催化性质、热稳定性、抗离子等性质的分析和比较；
4.开展脂肪酶的应用研究，包括对脂肪水解和饮食营养的实际应用研究。
三、研究方法和步骤
1.从自然界中筛选高产脂肪酶的菌株，采用液体和固体发酵技术进行发酵，并对产酶量进行分析和比较；
2.对高产脂肪酶菌株的生长条件进行研究，包括温度、pH值、培养基成分等因素对其生长和产酶能力的影响；
3.从高产脂肪酶菌株的菌体中提取酶液，进行酶学性质的研究，包括酶的催化性质、热稳定性、抗离子等性质的分析和比较；
4.开展脂肪酶的应用研究，包括对脂肪水解和饮食营养的实际应用研究。
四、预期研究结果和意义
通过筛选高产脂肪酶的菌株，并研究其生长条件和酶学性质，有望发现一些具有高产酶量、高催化效率、热稳定性好等优良性状的脂肪酶菌株。
这些研究成果将有助于推进脂肪酶的生产和应用，为提高脂肪水解和饮食营养等方面做出贡献。
产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及发酵培养基优化
was selected and identified as
. The fermentation medium formula was optimized by single factor and response surface methodology as
follows: tributyrin 2.0% ( / ), glucose 9 g/L and urea 8 g/L. Under the condition, the lipase activity was 4.3 U/ml, which was 16.22% higher than that of
将采集的样品分别依次进行富集培养、初筛和初始发 酵复筛。样品经过3次富集培养后，分别取50 滋L菌液上清 涂布于罗丹明B培养基平板，罗丹明B能与脂肪酶降解油脂 产生的脂肪酸特异性结合，产酶菌落周围会生成玫红色， 在波长365 nm紫外灯下呈现橙黄色。将罗丹明B平板放在 波长365 nm紫外灯下进行观察，选取橙黄色圈较大的菌株 进行分离培养，镜检至无杂菌后作为出发菌种，接种于初 始发酵培养基中进行复筛，选出脂肪酶高产菌株[15-17]。 1.3.2 菌种鉴定
富集培养基：酵母膏0.2 g/L，氯化钠0.5 g/L，磷酸氢二 钠3.5 g/L，磷酸二氢钾1.5 g/L，七水硫酸镁0.5 g/L，橄榄油 10 mL，用蒸馏水定容至1 000 mL，121 益灭菌20 min。
初筛罗丹明B培养基[14]：硫酸铵0.5 g，氯化钠4 g，磷酸 氢二钾1 g，七水硫酸镁0.5 g，琼脂粉15 g，三丁酸甘油脂乳 化液100 mL（4% PVA颐三丁酸甘油脂=3颐1，超声乳化），用 蒸馏水定容至1 000 mL，121 益灭菌20 min后，待温度降至 60 益时加入1 mL罗丹明B 溶液（质量浓度＜10 mg/mL），混 匀后倒平板。
产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化
霞品研究与开发
Ｆｏ ｄＲｅｅ ｒ ｈ Ａｎ ｖ ｐ ｎｔ ｏ ｓａ ｃ ｄＤｅ ｄｏ ｍｅ
２１ ０ １年 ６月
第３ 卷 期 １ ２ 第６ １ ９
产脂肪酶菌株的筛选及产酶条件优化
李 鑫玲 ’孙晓菲 ’孟楠 ’ 卜 ， ， ， 美玲 ’刘进 。
（． １河南科 技大学 食 品与生物 工程学 院 ， 河南 洛阳 ４ １０ ； ． 岛啤酒 （ ７０３ ２青 太原 ） 有限公司 ， 山西 太原 ０ ０ ３ ） ３０ ２
４ 结 语
Ｃ ｏｅｅ ［ ． ｕｒｉｎＲ ｓａｃ ， ０ ，６ ５ ６ ５ ０ ｒ ａ ｔｎｓＪ Ｎ ｔ ｔ ｅｅｒｈ ０ ６２ ： ５ — ６ １ ｉｏ ２ 【】 Ｊｎ ａ Ｍ． ｏｄ ＇－ ｕｉ＇ ｅ ｎ ｒ ｏｏｅ ｕ ｕ ｅＣ ｓ ｏ ３ ａｎｔ Ｒ ｌａ Ｇ ｔ ｒ ｚａｄＭａ ａＤ ｌｒｓＬ ｑ ｅｄ ａｔ ． ｎ ｅｒ ｉ ｒ
摘 要 ： 土壤样本 中分 离出一株具有较 高活力 的产脂肪酶 菌株 ， 步确定为假 单胞菌属。对该 脂肪 酶产 酶条件进 从 初
行 优 化 ， 佳 碳 源为 糊精 、 最 氮源 为 硫 酸铵 ， 适发 酵 温度 为 ３ ， 最 ０℃ 最适 起 始 ｐ 为 ７ 。 Ｈ ． ０
关键词 ： 脂肪酶 ； 假单胞菌属 ； 产酶条件
６・ Ｏ
芎。 ０ 墓４ 。 ０
赡 ３０ ．
速搅 拌均匀 ， 高压灭菌倒板前再用磁力搅拌器混匀 ； 种
子培养 基 （ ： 萄糖 ２ ，Ｎ ２ ．， Ｐ ４ ．， ％）葡 ． （ Ｈ ） ０ ０ ＫＨ Ｏ ０１ ０ ｓ ５ 橄榄油 １ ， Ｓ ７ ． ， 白胨 ２５ ｐ ．； 酵 ． ＭｇＯ ・Ｈ ００ ５ 蛋 ０ ０ ．，Ｈ ７ 发 Ｏ 培养基（ ： 白胨 ２ ， ％）蛋 ． 蔗糖 ０ ， ０ ． 橄榄油 １ ，Ｎ ４￣ ４ ５ ． （ Ｈ ） Ｏ ０ Ｓ
产脂肪酶真菌的分离鉴定、产酶条件优化及酶学性质研究的开题报告
产脂肪酶真菌的分离鉴定、产酶条件优化及酶学性质研究的开题报告一、研究背景随着人们生活水平的不断提高，高脂肪食品的消费量逐渐增加。
而高脂肪食品的长期摄入容易导致人体各种代谢疾病的发生，如肥胖、高血脂、心脑血管疾病等。
因此，研究开发高效、环保的脂肪降解酶已经成为了当前生物技术领域的热点。
真菌是脂肪酶的主要产生菌种之一。
目前已经分离出多种产脂肪酶的真菌，并在饲料、乳制品、面包等食品工业中得到广泛应用。
然而，目前已知的产脂肪酶真菌种类还很有限，而且其酶学性质和产酶条件也需要进一步的研究和优化。
因此，本课题将通过对自然环境中的微生物进行筛选和鉴定，分离出一株高效产脂肪酶的真菌，并对其产酶条件和酶学性质进行研究和分析，以期为生产上的应用提供科学依据和技术支持。
二、研究内容和方法1. 真菌的分离鉴定本研究将从自然环境中采集样本，通过板培法、毛细管扩散法等方法筛选出能够产生脂肪酶的菌种，并通过形态学、生理生化、分子生物学等方法进行鉴定和分类。
2. 产酶条件的优化通过单因素试验和正交试验等方法，对影响真菌产酶的因素进行优化，如温度、pH值、培养基成分、培养时间等。
3. 酶学性质的研究将分离出的真菌进行大量培养，提取纯化脂肪酶，并进行酶学性质的分析和研究，如酶的催化效率、热稳定性、pH稳定性、底物特异性等。
三、预期结果本研究预计可以成功分离出一株高效产脂肪酶的真菌，并通过优化培养条件、提高酶的活性和稳定性等手段，进一步提高其产酶能力和应用价值。
同时，对其酶学性质和催化机理的深入研究也将为其在工业生产中的应用提供科学依据和技术支持。
四、研究意义本研究将为开发高效、环保的脂肪降解酶提供新的思路和方法，并为其在食品、医药、生物燃料等领域的应用提供技术支持和料源基础。
同时，通过研究其催化机理和特异性等酶学性质，也将为更深入地理解生物催化反应的本质提供新的思路和方向。
产脂肪酶微生物的筛选及脂肪酶基因的克隆表达
产脂肪酶微生物的筛选及脂肪酶基因的克隆表达摘要：脂肪酶是一类催化脂肪水解的酶，广泛应用于食品、制药和生物工程等领域。
本文旨在概述产脂肪酶微生物的筛选方法以及如何克隆和表达脂肪酶基因。
通过筛选出高产脂肪酶的微生物，并利用基因克隆技术将其基因表达，可以为大规模生产纯脂肪酶提供基础。
1. 引言脂肪酶是一种催化脂质的水解反应酶，广泛存在于微生物中。
它们通过将脂肪酯水解为脂肪酸和甘油，起到重要的催化作用。
因此，寻找高产脂肪酶的微生物，并将其脂肪酶基因克隆和表达，具有重要的应用价值。
2. 产脂肪酶微生物的筛选产脂肪酶的微生物广泛存在于土壤、水体和动物消化系统等环境中。
筛选产脂肪酶微生物的方法主要有：直接筛选法、改进筛选法和基因工程筛选法。
2.1 直接筛选法直接筛选法是最常见也是最简易直接的方法之一。
通过将微生物菌株进行培育，然后检测菌液中产酶能力。
其中，利用酶抑止剂和显色剂的方法可以进行定性和定量的检测。
该方法的优点是操作简便，易于操作。
2.2 改进筛选法改进筛选法通过加入酶诱导剂、化合物诱导剂和高浓度含油样品等方式，提高产脂肪酶的微生物菌株筛选效果。
例如，可使用大豆油、浓缩桔子油等作为诱导剂，增强菌株胞外酶的产酶能力。
2.3 基因工程筛选法基因工程筛选法是利用基因工程技术构建含有脂肪酶基因的表达载体，转化到宿主菌株中，使其表达目标基因并产生脂肪酶。
这种方式可通过对基因进行改造和优化，提高脂肪酶活性和稳定性。
同时，基因工程筛选法还可以利用高通量筛选技术，如流式细胞术和高通量测序技术，提高筛选效率。
3. 脂肪酶基因的克隆和表达脂肪酶基因的克隆和表达是关键步骤，它们可以为脂肪酶的高效生产提供基础。
3.1 脂肪酶基因的克隆脂肪酶基因的克隆可以通过PCR扩增、限制性内切酶切割和毗连等方法实现。
起首，从目标微生物的基因组DNA或环境DNA中提取目标基因的DNA序列。
然后，使用特异性引物进行PCR扩增，得到目标基因的DNA片段。
产脂肪酶乳酸菌的筛选及其对奶酪风味的影响
产脂肪酶乳酸菌的筛选及其对奶酪风味的影响产脂肪酶的乳酸菌在奶酪工业中具有重要的应用价值，可以改变奶酪的风味和质感。
本文将探讨产脂肪酶乳酸菌的筛选方法以及其对奶酪风味的影响。
首先，产脂肪酶的乳酸菌的筛选方法可以通过两种途径进行：传统筛选方法和分子生物学筛选方法。
传统筛选方法主要通过分离和纯化的方法来筛选产脂肪酶的乳酸菌。
首先，可以从天然的发酵食品中提取乳酸菌，并通过稀释涂布的方法在含有脂肪酸的琼脂平板上进行筛选。
随后，根据形成透明圈的菌落要素，筛选出产脂肪酶的乳酸菌菌株。
此外，也可以通过变种筛选的方法来获得产脂肪酶的乳酸菌。
分子生物学筛选方法主要通过PCR扩增或基因组测序来筛选。
首先，可以通过寻找与脂肪酶基因相关的引物并进行PCR扩增，然后通过凝胶电泳等方法进行鉴定。
此外，也可以利用基因组测序技术筛选潜在的产脂肪酶乳酸菌。
了解了产脂肪酶乳酸菌的筛选方法后，我们来看一下它对奶酪风味的影响。
产脂肪酶乳酸菌可以通过水解乳脂肪酸产生游离脂肪酸，从而改变奶酪的风味和质感。
首先，产脂肪酶乳酸菌的活性可以提高奶酪的风味。
由于脂肪酶可以水解脂肪酸，产生多种味道特异性的脂肪酸，这些脂肪酸可以增强奶酪的口感和风味。
例如，产脂肪酶的乳酸菌可以产生乙酸、丙酸和丁酸等短链脂肪酸，这些脂肪酸具有酸味和奶酪风味，可以增加奶酪的香气。
其次，产脂肪酶乳酸菌还可以改变奶酪的质感。
通过水解脂肪酸，产脂肪酶可以改变奶酪的质地和口感，使其更加柔软和酥脆。
脂肪酶还可以在奶酪中产生游离脂肪酸，从而减少脂肪的颗粒状结构，增加奶酪的均匀性和光滑度。
此外，产脂肪酶乳酸菌还可以改善奶酪的保存性。
脂肪酶可以通过水解脂肪酸降低酸酐含量，从而减缓奶酪的酸化速度，延长其保存期限。
总之，产脂肪酶的乳酸菌通过水解脂肪酸改变奶酪的风味和质感，并且还可以改善奶酪的保存性。
产脂肪酶乳酸菌的筛选方法可以通过传统筛选和分子生物学筛选两种途径进行，为奶酪工业提供了有力支持。
产脂肪酶菌株的筛选
试验计划
极端环境检验降解效果
富集培养
稀释涂布
分离纯化
The Presentation
极端环境检测降解效果
起始状态 The Presentation
摇床培养
静置培养
结果分析
加菌剂
空白对照
摇床培养的摇瓶油层下部出现乳化现象，菌 体生长良好，因无法定量检测剩余油量，所 以只能观察到在只有油的存在条件下菌剂依 然可T以he生P长re。sentation
加菌剂
空白对照
静置培养的摇瓶发现也可以生长良好，加菌剂 的药品出现絮状物，油层下面出现乳化现象， 推测是菌体将油包裹为极小的油滴故出现乳化 现象
显微镜观察
The Presentation
极端环境下摇床摇瓶培养的菌体40倍观察图
The Presentation
极端环境下静置摇瓶培养的菌体40倍观察图
富集培养
富集培养基配方：酵母膏0.2 g/L, NaCI 0.5 g/L, Na2HP04 3.5 g/L,KH2POQ 1.5 g/L, MgS04.7H20 0.5 g/L. 实验组编号1、2、3、4、5分别加入豆油2ml、4ml、6ml、8ml、10ml和0.5%菌剂。 空白对照编号6、7、8、9、10加入豆油2ml、4ml、6ml、8ml、10ml和不添加菌剂。
The Presentation
பைடு நூலகம் 富集培养基镜检照片
The Presentation
分离纯化
1、稀释：用无菌水对富集培养基进行稀释。稀释到10-1到10-5倍。 2、初筛：将菌液分别取200微升涂布到营养培养基平板上和维多利亚蓝B平板上。 28℃培养 3到5天，观察菌落生长情况及水解圈情况。 3、复筛：对初筛培养基上生长的菌落挑取单菌落划线，接到平板上培养。对平 板上的菌落进一步纯化。鉴定菌株。然后将菌株接种与发酵培养基上。28℃， 150r/min培养3到5天。取发酵液，4℃，8000r/min离心5min，取上清液测脂肪酶 酶活
脂肪酶高产菌株筛选材料方法
2 脂肪酶高产菌株筛选2.1 前言常见的筛选脂肪酶高产菌的方法是含甘油三酯琼脂平板法，我们以橄榄油为底物，溴甲酚紫为指示剂，通过平板法筛选脂肪酶高产菌株。
2.2 材料和方法2.2.1 土样从襄樊、武汉、十堰等地的油脂厂、油坊、奶牛场、食堂采集土样208份。
2.2.2 设备与试剂本试验所用到的药品试剂除橄榄油外均为分析纯；橄榄油为国药集团化学试剂有限公司生产，化学纯。
试验仪器和设备如下：OHAUS分析天平AR1530 奥豪斯国际贸易有限公司乳化机CZD3 上海氟鲁克流体机械制造有限公司磁力搅拌器79-2 金坛市新航仪器厂灭菌锅YX-400B 上海三申医疗器械有限公司超净工作台SW-CT-2FD 苏州净化设备有限公司生化培养箱SPX-150B-Z上海博迅实业有限公司医疗设备厂2.2.3 溶液配制2％（w/v）的聚乙烯醇水溶液：称取聚乙烯醇固体20g，倾入1000mL蒸馏水中，然后边加热边搅拌直到聚乙烯醇全部溶解。
静置冷却至室温备用。
若有少量杂质不溶解，可通过滤纸过滤去除杂质。
橄榄油乳化液：分别量取橄榄油25mL和2％聚乙烯醇水溶液75mL，混合，置4℃平衡1h，然后10000r/min乳化三次，每次一分钟。
4℃保存备用。
若高温灭菌后产生分层，可充分振荡至分层现象消失，而无需重新乳化。
2.2.4 筛选培养基平板粗筛培养基（％）：酵母膏0.1，蛋白胨0.2，硫酸铵0.2，橄榄油乳化液1.2，磷酸氢二钾0.1，氯化钾0.05，硫酸镁0.05，硫酸亚铁0.001，琼脂1.5。
平板复筛培养基组成（％）：蛋白胨1.0，蔗糖0.5，橄榄油乳化液1.2，硫酸铵0.1, 磷酸氢二钾0.1,氯化钾0.1,硫酸亚铁0.001，琼脂1.5。
摇瓶复筛液体培养基（％）:蛋白胨2.0，蔗糖1.0，橄榄油乳化液1.0，硫酸铵0.5，硫酸镁0.05，磷酸氢二钾0.2。
筛选培养基于121℃灭菌20min，平板粗筛培养基和平板复筛培养基从灭菌锅取出后，每升培养基冷却到60℃加入无菌的10mg/mL溴钾酚紫10mL，混匀，趁热倒平板。
产脂肪酶菌株的筛选及酶学特性研究
PH 酶活 L ipase activ ity / U ·mL - 1
4. 0 不生长
5. 0 10. 03
6. 0 11. 10
7. 0 9. 06
8. 0 7. 08
( Co lleg e of L ife Science and T echnolog y , G uangx i U niv ersity, N anning 530005, China)
Abstract: 58 strains producing lipase w er e isolat ed f rom rich o il soil . T he lipase fro m GXL 02 has t he highest aro lysis of oil. St rain GXL 02 w as ident if ied as A cinetobacter sp. according t o it s character and 16S rDN A sequence. L ipase pr oduct ion condit ions o f A cinet obact er sp. GXL 02 w ere studied in detail. T he result s show ed that lipase pr oduct ion of GXL 02 depended on fat and M g2+ . Glucose and so me ot her saccharide car bon sour ces rest rained lipase productio n. T he o pt imal pH and t em perat ure of t he lipase for hy drol ysis of o live were pH 9. 0 and 50°C respect iv ely . Act ivit y of lipase w as no much chang e in 60°C fo r 90 m in, and st able f rom pH 3. 0 t o pH 10. 0.
产脂肪酶菌株的筛选
产脂肪酶菌株的筛选实验目的:以橄榄油作为唯一碳源筛选出能产生出脂肪酶的菌株。
橄榄油乳化法是测定脂肪酶活性的常用方法，其测定的原理是天然油脂被水解产生的游离脂肪酸可以被氢氧化钠中和。
橄榄油乳化：聚丙烯醇3:1橄榄油乳化，水包油型，然后装在合适的瓶子里。
实验原理：脂肪酶是一类特殊酯键水解酶，产脂肪酶的微生物广泛的分布，主要以各类真菌为主；在富含油脂的地方进行采样，利用稀释平板分离法筛选产脂肪酶菌株，再以乳化橄榄油为底物。
脂肪酶作用于橄榄油乳化液，催化酯键水解，生成脂肪酸，用标准氢氧化钠滴定脂肪酸，利用酚酞滴定终点，记录消耗的氢氧化钠体积，根据氢氧化钠的用量来计算脂肪酶的活力。
材料：烧杯、玻璃棒、锥形瓶、试管、平板、接种环、制备乳化状态的针筒等。
土壤采集：在土门菜市场油污重地进行土壤采样。
富集培养基配置：硫酸铵0.1% 磷酸氢二钾0.1% 七水硫酸镁 0.05% 七水硫酸亚铁0.001% 酵母膏0.5% 橄榄油乳化液12% 氯化钠l% PH自然，115℃灭菌30min选择培养基平板：乳化橄榄油 12% 蛋白胨 1% 硫酸铵0.2% 磷酸氢二钾0.1% 磷酸二氢钾0.3% 七水硫酸亚铁0.1% 维多利亚蓝0.004% 琼脂1.5% PH=8.0灭菌115℃30min 复筛培养基平板：乳化橄榄油12% 蛋白胨1% 硫酸铵0.2% 磷酸氢二钾0.1% 磷酸二氢钾0.3% 七水硫酸亚铁0.1% 琼脂1.5% PH=8 115℃灭菌30min实验方法：1、取土样2g悬于20ml无菌水中，震荡，在100ml培养基中加入5ml的悬液，30℃ 180r/m 培养3d。
2、取富集液稀释分别涂布于选择培养基平板上，经培养观察菌落周围的蓝色圈，然后挑取该菌落于富集培养基斜面上。
30℃培养箱3d。
3、将初筛得到的菌株在复筛培养基平板划线，然后放于30℃培养箱中3d。
4、挑取单菌落，镜检并纯化，得到纯菌株保存。
5、活力测定：U=(V-V.)/t×50×n。
制革污泥中产脂肪酶真菌的筛选及产酶条件优化
Ｄ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｔ ３ ５℃ ，ｉ ｎ ｏ ｃ ｕ ｌ ｕ ｍ ａ ｇ ｅ ｏ ｆ １ ８ ｈ，ｉ ｎ ｏ ｃ ｕ ｌ ｕ ｍ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ２ ． ５ ％ （ Ｖ／ Ｖ）， ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ａ — ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｉ ｍｅ ｏ ｆ ７ ２ ｈ，ａ ｎ ｄ ｒ ｏ ｔ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｓ ｐ ｅ ｅ ｄ ａ ｔ １ ５ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ．Ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ，ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｐ ａ ｓ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ
ｎ ｔ ０ ｓ ｐ ｈ ａ ｅ ｒ ｉ ａ ｃ ｅ ｎ ｇ Ｃ ｒ １ ２ ． 同时对该 菌株 的 摇床 培 养产 酶 条 件 进行 了初 步优 化 ， 得 到 最佳 发 酵条 件 为初 始 ｐ Ｈ值为 ５ ． ５ ， 培养 温度 为 ３ ５℃ ， 种龄 １ ８ ｈ， 接种量为 ２ ． ５ （ Ｖ／ Ｖ） ， 发 酵周 期 为 ７ ２
Ｍ Ａ Ｈｏｎ ｇ — ｒ ｕｉ ，ＬＵ Ｏ Ｘｉ ，ＺＨＵ Ｃｈａ ｏ
（ Ｃ ｏ Ｉ ｔ ｅ ｇ ｅ ０ ｆ Ｒｅ ｓ ０ ｕ ｒ ｃ ｅ ａ ｎ ｄ Ｅｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ，Ｓ ｈ ａ ａ ｎ ｘ ｉ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ＆ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｘｉ ａ ｎ ７ １ ０ ０ ２ １，Ｃｈ ｉ ｎ ａ ）
ｈ ， 转速 为 １ ５ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ， 酶 活力最 高达 到 ８ ． ５ Ｕ／ ｍ Ｌ ．
关键 词 ： 制 革 污泥 ；脂肪 酶 ； 真 菌 ；筛选 ； 发 酵； 优 化
中图法分 类 号 ： Ｘ１ ７ ２ 文 献 标 识 码 ：Ａ
产脂肪酶菌株的筛选及其固定化的研究
产脂肪酶菌株的筛选及其固定化的研究随着人们生活方式的改变和食物极限的提高，肥胖和心脑血管疾病等疾病也日益增多。
白领和学生等群体中，人们的饮食习惯和健康状况引起了更多的关注。
研究表明，脂肪酶能够降低脂肪的含量，对于健康人群以及需要减肥的人来说，这种酶被应用广泛。
因此，本文主要讨论如何通过菌株的筛选和固定化研究，实现产脂肪酶的目标。
1.产脂肪酶菌株的筛选(1)菌株分类首先我们需要得到具有脂肪酶产生能力的微生物株。
目前，研究人员从不同来源的环境中筛选得到脂肪酶分解菌株。
一般来说，脂肪酶菌株按照细菌、真菌、酵母菌的类型划分。
以细菌领域为例，产脂肪酶的细菌具有广泛的分布。
研究表明，主要包括属于芽孢杆菌属（Bacillus）、乳酸菌属（Lactobacillus）、放线菌属（Streptomyces）、泥炭菌属（Pseudomonas）等。
其中，芽孢杆菌属的应用比较广泛。
其次，酵母菌的产酶能力比较强，因此也是研究的热点对象。
真菌也是研究的对象之一。
上述微生物大多数有代表性的株系都已经分离鉴定过程中分离纯化和筛选中，通过选择合适的产酶基质，调节适宜的菌株培养环境，确定了不同的产酶体系。
基于活性、脂肪酶酶特异性和影响、菌株生产含量等方面着手，最终确定了适宜的菌株，如Bacillus subtilis CICC 40224，Bacillus pumilus CICC 1316。
(2)筛选菌株的影响因素1.酸碱度：脂肪酶的酸碱度是影响酶活性的一种因素，特别是在温度较高的条件下，酸碱度会对酶的活性和稳定性产生较大的影响。
2.温度：温度也是影响脂肪酶活性的因素之一。
根据研究，脂肪酶在40-50℃时的活性最为理想。
3.基质：脂肪酶对基质的种类和特性有一定的要求。
研究表明，基质的溶解度、分子大小、分子构型等因素会影响脂肪酶的分解能力。
4.浓度：产酶菌株的营养状态也会影响到它的产酶性能。
不同浓度的培养基对产酶菌株的贡献不同，太浓或太稀的培养基均会对脂肪酶的产生产生不利影响。
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脂肪酶产生细菌的筛选
巩素绢
（河北农业大学生命科学学院微生物与生化药学，河北保定071001）
摘要：从富含油脂的土壤中寻找高产脂肪酶的真菌，以期为扩大脂肪酶的菌源提供材料。
本试验从保定市炼油厂附近土样中，经富集培养、平板筛选得到22株脂肪酶产生菌株，通过复筛得到1株脂肪酶活力较高真菌。
为脂肪酶产生菌以及脂肪酶的工业化生产与应用奠定了基础。
关键词：脂肪酶；筛选；真菌
Abstract：The study aimed to seek for the fungi with high yield of lipase from the greasy soil，so as to provide the material for expanding the fungi source of lipase.22strains of fungi producing lipase were isolated by enrichment culture and flat screening methods in soil samples collected from the refinery of Baoding．A stain with higher activity of producing lipase was isolated by re-screening methods.The study laid a foundation for lipase producing bacteria and industrial production and application of lipase to some extent．
Key words:Lipase;Screening;fungi
前言
脂肪酶(Lipase，E.C.3.1.1.3，甘油三酯水解酶)，可在油水界面催化甘油三酯形成甘油二酯、甘油单酯或甘油及游离脂肪酸［1］。
微生物脂肪酶比动物脂肪酶酶解作用的pH和温度范围更宽，便于工业化生产获得高纯度酶制剂［2］。
脂肪酶在微生物界分布很广，据不完全统计，目前已有65个属的微生物能够产生脂肪酶［3］。
随着对微生物脂肪酶研究的深入，已发现多种具有不同的酶学性质和底物特异性的微生物脂肪酶，其在水解、酯化、转酯及酯类手性合成等反应中都表现出较好的应用前景［4］。
就微生物脂肪酶而言，虽然在产酶菌株选育、培养条件、酶的性质及工业应用上已进行了多年研究，但由于脂肪酶的结构及性质的多样性、酶的不稳定性、底物的水不溶性、酶的来源不足、提纯困难和应用范围不广泛等问题，脂肪酶的研究进展及工业应用与蛋白酶、淀粉酶相比要慢得多，窄得多［5］。
国内，脂肪酶的研究与开发曾被连续列为3个“五年”攻关项目，但目前对脂肪酶制剂的需求仍主要依赖进口［6］。
因此，该研究拟通过初筛和复筛从富含油脂的土壤中寻找高产脂肪酶的真菌，以期为扩大脂肪酶的菌源提供材料。
1材料与方法
1.1样品
1.1.1供试土样
8个土样分别采自保定市周边植物油厂、餐厅、菜市场、屠宰场等周围富含油脂的土壤。
1.1.2试剂
聚乙烯醇（PV A，聚合度1750±50）购自天津市化学试剂三厂；橄榄油购自上海医药（集团）上海化学试剂公司；其他生化试剂或化学试剂均为进口或国产分析纯。
1.1.3培养基
富集培养基：每升含0.5g(NH4)2SO4，0.1g NH4NO3，0.1g NaCl，0.1g MgSO4·7H2O，0.5g K2HPO4，0.1g FeSO4·7H2O，10mL橄榄油，用0.1mol/L NaOH 调pH8.0。
初筛培养基：每升含0.5g(NH4)2SO4，0.1gNH4NO3，0.1gNaCl，0.1g MgSO4·7H2O，0.5gK2HPO4，0.1g FeSO4·7H2O，20g琼脂，121℃灭菌20min后，于60℃左右加含0.2%溴甲酚紫的聚乙烯醇橄榄油乳化液12mL。
用0.1mol/LNaOH调pH8.0。
PDA培养基：马铃薯200.0g/L，蔗糖20.0g/L，琼脂20.0g/L。
PDB培养基不添加琼脂。
发酵培养基：每升含1.0g(NH4)2SO4，1.0gMgSO4·7H2O，1.0g NaH2PO4，2.0g K2HPO4，10mL橄榄油，20g黄豆粉，10g蔗糖。
用0.1mol/LNaOH调pH8.0。
种子培养基：每升含5.0g(NH4)2SO4，1.0g K2HPO4，0.5g MgSO4·7H2O，20g 葡萄糖，25g蛋白胨，10mL橄榄油。
用0.1mol/L NaOH调pH8.0。
1.2试验方法
1.2.1产脂肪酶菌株的筛选
1.2.1.1富集培养
将采集的土样10g溶于90mL蒸馏水中，充分摇匀，取上清液2mL加入到含20mL富集培养基的l00mL三角瓶中，30℃、200r/min振荡培养2 d。
再次取1mL富集培养液转接到新的20mL富集培养基中，进行第2次富
集。
共富集3次。
1.2.1.2平板分离
将第3次富集培养液采用梯度稀释法稀释后涂布于筛选培养基上，30℃恒温培养72h，紫外灯下观察所长菌落周围有无荧光圈及荧光圈大小，荧光圈直径/菌落直径(HC值)愈大，表示该菌株产脂肪酶能力愈强。
每个梯度作3个平行。
将HC值较大的菌株用划线分离纯化，纯化后接种于PDA斜面4℃保藏。
1.2.1.3菌株复筛
无菌条件下将筛选菌株接种于发酵培养基上，30℃振荡培养48h。
发酵液6 000r/min离心，上清液即为粗酶液。
利用平板扩散法测定粗酶液酶活，比较酶活力的大小，最终获得产酶能力较高的菌株，并斜面保存。
1.2.1.4平板扩散法测定脂肪酶酶活
配制溴甲酚紫显色培养基并倒平板。
冷却凝固后，利用无菌打孔器在平板上打孔，孔径0．8cm。
取粗酶液0．1mL注入孔中。
每个显色平板作2个平行。
将平板置于30℃条件下反应12h后观察变色圈大小，判断粗酶液的酶活大小。
2结果与分析
2．1脂肪酶产生菌株的筛选
2．1．1选择平板初筛
用溴甲酚紫平板对土样进行初筛，获得22株产脂肪酶菌株(表1)，发现5、7、16和18号菌株HC值≥1．5，产酶能力较高，因此对这4株菌株进行复筛。
表1菌株初筛、复筛结果
Table1Screening and rescreening results of strains
序号No．
HC值HC value
初筛
Screening
复筛
Rescreening
1 1.2
2 1.3
3 1.3
4 1.2
5 1.7 1.6
6 1.4
7 1.6 1.5
8 1.3
9 1.2
10 1.3
11 1.4
12 1.3
13 1.1
14 1.4
15 1.4
16 1.5 1.4
17 1.3
18 1.5 1.2
19 1.4
20 1.3
21 1.2
22 1.4
2．1．2平板扩散法复筛
挑取初筛的4株菌株，接种于发酵培养基中，30℃振荡培养48h后，离心得粗酶液，利用平板扩散法测定酶活大小，结果见表1。
可以看出，初筛的4株菌株产脂肪酶能力依次为5号＞7号＞16号＞18号，因此确定5号菌株为目的菌株。
3结论
从富含油脂土壤中分离得到1株产脂肪酶能力较高的菌株，根据菌落及个体形态，查阅相关鉴定手册，初步确定该菌株为黑曲霉。
参考文献
［1］胡长浩,施文芳,沈麟,等.脂肪酶菌种的筛选,鉴定及酶学性质研究［J］.生物技术,2009,19(2):53-57.［2］董明奇,史岩,姜春雷,等.脂肪酶高产菌株的筛选及酶学特性研究［J］.四川大学学报,2008,45(4):985-990.［3］JAEGER K,EGGERT T.Lipases for Biotechnology［J］.Current Opinion in Biotechnology,2002,13(4): 390-397.
［4］周海霞,袁丽红,欧阳平凯.脂肪酶假单胞菌的分离培养及最佳产酶条件研究［J］.现代生物医学进展,2008,8(2):259-262.
［5］孙宏丹,孟秀香,贾莉,等.微生物脂肪酶及其相关研究进展［J］.大连医科大学学报,2001,23(4):292-295.［6］张巧艳,钱俊青.响应面法优化黄杆菌突变株产脂肪酶摇瓶发酵条件［J］.浙江工业大学学报,2009,37(2):156-160.。