溶血检验

– [临床意义]常用于轻型遗传性球形细胞增多症、遗传性非
球形细胞溶血性贫血的诊断和鉴别诊断。
• 脆性增高：见于遗传性球形细胞增多症、遗传性椭圆形 细胞增多症、遗传性非球形细胞溶性贫血、缺铁性贫血、
廉状细胞贫血、脾切除术后。
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二、红细胞膜缺陷的检测
（三）自身溶血试验及其纠正试验
节溶血性贫血的实验室检测
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溶血性贫血（hemolytic anemia）是由 于各种原因导致红细胞生存时间缩短、 破坏增多或加速，而骨髓造血功能不能 相应代偿而发生的一类贫血。
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溶血性贫血的分类：
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1.按先天性、获得性和发病机理分类：
先天性 获得性
膜缺陷 酶缺乏
珠蛋白合成障 碍
免疫因素 膜的因素 物理因素 化学因素 其它
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一、溶血性贫血的筛查试验：
（二）血浆结合珠蛋白：（Hp）
– [参考值]0.7-1.5g/L(70-150mg/dL) – [临床意义]
• 减低：见于各种溶血时，以血管内溶血减低为显著。肝 脏疾病、传单、先天性无结合珠蛋白血症。
• 增高：见于感染、创伤、恶性肿瘤、SLE、糖皮质激素、 口服避孕药、肝外阻塞性黄疸。
而发生溶血的一组疾病。
（一）高铁血红蛋白还原试验
– [原理]有足量的NADPH存在下，反应液中高铁血红蛋白能被高铁
血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白。当G6PD含量正常时，由磷酸 戊糖代谢途径生成的NADPH的数量足以完成上述还原反应。反之， 则还原反应速度减慢，甚至不能还原。 – [参考值]
• 高铁血红蛋白还原率>75%; 高铁血红蛋白 0.3-1.3g/L
– [原理]先天性非球形细胞溶血性贫血患者，由于红细胞内酶缺陷，葡萄糖
酵解障碍，不能提供足量ATP,以维持红细胞内的钠泵作用。患者红细胞无菌 条件下在自身血浆中温育48小时，使ATP储备减少，钠泵作用减弱，导致溶 血增强。在孵育过程中，分别加入葡萄糖及加入ATP作为纠正物，并以氯化 钠溶液为对照，观察溶血是否能被纠正。
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一、溶血性贫血的筛查试验
（三）血浆高铁血红素清蛋白测定
– [正常值] 阴性 – [临床意义] 阳性表示为严重血管内溶血
（四）红细胞寿命测定
– 用51Cr标记红细胞检测红细胞半衰期。正常红细 胞半衰期为25-32天。溶血性贫血时常小于15天。 这是确定溶血性贫血的可靠方法。
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一、溶血性贫血的筛查试验
– 血管外溶血：为红细胞在血管外，即脾脏等单核 -吞噬细胞系统被吞噬破坏，之后血红蛋白就地 分解代谢。多为先天性，呈慢性发作。患者常有 脾大。
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3.按溶血发生的急慢分类
– 急性溶血：起病急，有发热及全身症状。重者 可发生休克、急性肾功能衰竭。红细胞及血红 蛋白急剧下降，出现血红蛋白血症和血红蛋白 尿症。发作12小时后可发生黄疸。
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二、红细胞膜缺陷的检测
（二）红细胞孵育渗透脆性试验
– [原理] 红细胞孵育过程中，葡萄糖的消耗增加，储备的ATP 减少，导致红细胞膜对阳离子的主动传递受阻，钠离子在红 细胞内集聚，细胞膨胀，渗透脆性增加。
– [参考值]
– 未孵育：50%溶血为4.00-4.45g/LNaCl – 37℃孵育24小时：50%溶血为4.65-5.9g/LNaCl
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二、红细胞膜缺陷的检测
（一）红细胞渗透脆性试验
– [原理] 红细胞在低渗氯化钠溶液中细胞逐渐膨胀甚至破裂而溶血。该试验是测定 红细胞对不同浓度低渗氯化钠溶血的抵抗力，即红细胞渗透脆性。将患者的红细 胞加至按比例配置的不同浓度低渗氯化钠溶液中观察其溶血的情况，结果以被检 红细胞最小抵抗力（开始溶血时氯化钠溶液的浓度）和最大抵抗力（完全溶血时 氯化钠溶液的浓度）来表示。
– [临床意义]
• 减低：蚕豆病和伯氨喹型药物溶血性贫血患者由于G6PD缺陷，高铁血红蛋白还原 率明显下降。
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三、红细胞酶缺陷的检测
（二）氰化物-抗坏血酸试验
– [原理]抗坏血酸与HbO2反应，氰化钠能抑制过氧化氢酶以使H2O2不
受影响，从而使H2O2与还原型谷胱甘肽（GSH)发生反应，产生氧化 型谷胱甘肽（GSSG)，后者需要NADPH使其再还原为GSH。如红细 胞中催化NADPH形成的酶（如G6PD)缺乏，则GSH产生减少，使 H2O2蓄积， HbO2 被氧化成为棕色的高铁血红蛋白。如红细胞不缺乏 G6PD则GSH活性正常， HbO2即被还原失效， HbO2仍呈鲜红色。
– [参考值]正常人红细胞经孵育48h后，仅轻微溶血、溶血度<3.5%;
加入葡萄糖及ATP孵育，溶血明显纠正，溶血度均<1%.
– [临床意义]
• 可用作遗传性球形细胞增多症和先天性非球形细胞溶血 性贫血的鉴别诊断。
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三、红细胞酶缺陷的检测
• 红细胞酶缺陷所致溶血性贫血又称红细胞酶病，指参与红细
胞代谢（主要是糖代谢）的酶由于基因缺乏，导致活性改变
– 慢性溶血：起病缓慢。除可代偿者无明显表现 外，常出现贫血、黄疸和脾肿大。
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一、溶血性贫血的筛查试验：
（一）血浆游离血红蛋白测定
– [参考值]<50mg/L(1-5mg/dL) – [临床意义] – 血管内溶血时血浆游离血红蛋白明显升高。血管外
溶血时正常。自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成 障碍性贫血可轻度升高。
遗传性球形红细胞增多症
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症， 丙酮酸激酶缺乏症
异常血红蛋白病
自身免疫性溶血性贫血
PNH
微血管病性溶血性贫血
铅中毒
脾功能亢进
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2.按溶血发生的部位分类：
– 血管内溶血：为红细胞在血管内（血液循环）中 直接破坏，释放出血红蛋白到血浆中形成血红蛋 白血症。多为获得性，常急性发作。
– [参考值] 开始溶血：0.42-0.46%（4.2-4.6g/L）NaCl溶液
完全溶血： 0.28-0.34%（2.8-3.4g/L）NaCl溶液
– [临床意义]
• 脆性增高：见于遗传性球形细胞增多症，温抗体型自身免疫溶血性贫 血、遗传性椭圆型细胞增多症
• 脆性减低：见于海洋性贫血、缺铁性贫血、某些肝硬化和阻塞性黄疸 等。
（五）尿含铁血黄素试验（Rous试验）
– [原理]铁离子在酸化的低铁氰化钾溶液中生成蓝色 的铁氰化钾，即普鲁士兰反应。如尿液中脱落的 肾小管上皮细胞有含铁血黄素，显微镜下观察可 有深蓝色物质出现，即为阳性。
– [正常值] 阴性 – [临床意义] 慢性血管内溶血可呈阳性，并持续数
周。常见于PNH。在溶血初期可呈阴性。