常用细胞培养基配方及缓冲液定稿版

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。

SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。

使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。

SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。

麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。

NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。

溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。

溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。

溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。

高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。

下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。

一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。

常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。

常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。

以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。

Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。

3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。

以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。

1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。

以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。

2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。

常用细胞培养基配方及缓冲液之欧阳音创编

1640细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

MEM细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

DMEM/F12细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

IMDM细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

BME 细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

199 细胞培养基
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

Hanks'平衡盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

Earle's平衡盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

Dulbecco's磷酸盐缓冲盐
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。

常用培养基配方范文

常用培养基配方范文培养基（Culture medium）是一种用于细菌、真菌、植物细胞、动物细胞和其他微生物的繁殖和生长的营养物质。

常用的培养基可分为发酵培养基、微生物培养基和细胞培养基。

下面列举了一些常用的培养基配方。

1. LB培养基（Luria-Bertani medium）成分：-牛肉提取物：10克-酵母提取物：5克-热可溶性淀粉：10克-氯化钠：10克-水：1升2. NB培养基（Nutrient broth）成分：-牛肉提取物或肉蔻精：8克-酵母提取物：4克-葡萄糖：4克-水：1升3. MacConkey培养基成分：-水解动物蛋白：17克-中和胆盐：1.5克-中性红：0.03克-水：1升4. TSB培养基（Tryptic soy broth）成分：-大豆胨：17克-酵母提取物：3克-水：1升5. BHIA培养基（Brain Heart Infusion Agar）成分：-脑心汤固体：37克-水：1升6.R2A培养基成分：-水解酵母提取物：0.5克-蛋白胨：0.5克-葡萄糖：0.5克-脱脂乳粉：0.5克-黄豆粉：0.5克-高氯酸钠：0.3克-多聚体1466：0.05克-水：1000毫升7.比尔斯氏培养基（BHI培养基）成分：-大豆胨：37克-脑心汤固体：2克-水：1升8. 培养基199（Medium 199）成分：-高锰酸钾：0.015克-硫酸：1.55克-磷酸一氢钠：0.184克-高氯酸钠：8.0克-溴酚蓝：0.4克-d-葡萄糖：5.55克-l-谷氨酸：40.525克-苏打粉：0.84克-水：1升9. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）成分：-苔藓胶原酸：1克-乳糖：1克- 谷氨酸：584mg- 水：1000ml这只是一小部分常见的培养基配方，实际上有很多种不同的培养基，它们根据不同的生物特性和培养需求来设计。

不同的培养基可以提供细菌、真菌、细胞等微生物生长需要的各种营养物质。

常用培养基配制word版

/升
终1 X浓度
Na2HPO4x7H2O
64 g
47.8 mM
KH2PO4
15 g
22 mM
NaCl
2.5 g
8.6 mM
NH4
5 g
18.7 mM
添加剂
/升
终1 X浓度
抗生素(如果需要)
氨苄青霉素
50 µg/ml
氯霉素
20 µg/ml
卡那霉素
30 µg/ml
四环素
12 µg/ml
半乳糖苷(如果需要)
充分混匀后4°C黑暗保存
警告:溴化乙锭是一种突变剂。使用溴化乙锭溶液时需带手套；称量其粉末时需带面具。
1 M KCl
KCl
74.6 g
H2O
至1升
1 M MgCl2
MgCl2x6H2O
20.3 g
H2O
至100 ml
1 M MgSO4
MgSO4x7H2O
24.6 g
H2O
至100 ml
5 M NaCl
H2O
至1升
5X Tris-甘氨酸, Native电泳缓冲液
/升
终1 X浓度
Tri 碱
15.1 g
25 mM
甘氨酸
72.0 g
192 mM
H2O
至1升
稀释溶液的pH至8.3
5X Tris-甘氨酸-SDS电泳缓冲液
H2O
至500 ml
过滤灭菌后分装(25 ml)，-20°C 保存
0.5 M EDTA (乙二胺四乙酸)(pH 8.0)
Na2EDTAx2H2O
186.1 g
H2O
至700 ml
10 M NaOH (~50 ml)调节pH值至8.0

细胞培养试剂的配制

细胞培养试剂的配制一、Hank’s液配方：KH2PO4 0.06g，NaCl 8.0g，NaHCO3 0.35g，KCl 0.4g，葡萄糖1.0g，Na2HPO4·H2O 0.06g，加H2O至1000ml注：Hank’s液可以高压灭菌。

4℃下保存。

二、磷酸盐缓冲液(PBS)的配制母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。

然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。

0.01M PB（PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。

0.02M PB（PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。

若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。

三、胰蛋白酶溶液的配制配制胰蛋白酶时，要注意药品的牌号，活性及保存时间。

不同的牌号、质量会有差别，更重要的应注意酶的活性。

配制时，应按所标活性(一般活性为1：250)配制最适浓度的溶液。

配制方法下：0．25％胰蛋白酶(活性1：250)溶液的配制：1：250 胰蛋白酶0.25gHank 液100ml配制时，先用少量Hank 液溶解胰蛋白酶，然后再将余液加入。

置于370C 水浴中，溶解lh(时间长短取决于溶解程度，待溶液全部透彻清亮为止)。

溶解后，用除菌滤器过滤，无菌分装，密封，贴好标签，置于低温冰箱(-20℃)保存。

使用前，用7.4％NaHCO3调PH 至7.6-7.8。

细胞培养液配方

DMSO （2ml）
双抗(0.2ml)
RPMI-1640培养基 (180ml)
胎牛血清 (20ml)
双抗（2ml）
溶液各组分终浓度为90%RPMI-1640培养基 +10%胎牛血清+1%双抗（200mM L-谷氨酰胺、10mg/ml链霉素和10000U青霉素）
三细胞冻存液配方：(20ml)
RPMI-1640培养基 (14ml)
胎牛血清 (4ml)
细胞培养常用溶液配方
一PBS配方：
方法一 1×PBS(Phosphate-Buffered Sallines)
Na2HPO4、Na2HPO4•7H2O、Na2HPO4•12H2O中任选其一。
方法二母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水
0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。
0.02MPBS（PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。
细胞培养常用溶液配方
二细胞培养液配方：（200ml）
各种浓度PBS(pH=7.4)的配制：
先配0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：
0.1MPBS（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml即可。

常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基：加950ml蒸馏水溶解，用5N氢氧化钠调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

LB固体培养基：每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉，高压灭菌后保存。

SOB液体培养基Bacto-蛋白胨 20g酵母抽提物 5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解，加入250mmol/L KCl 溶液10ml，用5 N NaOH调pH至7.0，定容至1000 ml，高压灭菌后保存。

使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。

SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。

麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉，煮沸溶解后分装，高压灭菌。

NA固体培养基加950ml蒸馏水溶解，调pH至7.0，定容至1000ml，高压灭菌后保存。

TB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中：各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃，再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。

溶液Ⅰ葡萄糖 2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后，用水定容至250 ml，高压灭菌后保存。

溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml，现配现用。

溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾 60ml冰醋酸 11.5ml水 28.5ml高压灭菌后保存。

高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB抽提液2%（w/v）CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存（可在几年内保持稳定）CTAB/NaCl 溶液（10% CTAB/0.7mol/L NaCl）在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB（十六烷基三乙基溴化铵），同时加热并搅拌。

常用细胞培养基配方及缓冲液

—
—
—
—
L-精氨酸盐酸盐
126
126
126
126
126
126
126
126
126
L-天门冬酰胺
—
—
—
13.2
13.2
—
—
—
—
L-天门冬氨酸
—
—
—
13.2
13.2
—
—
—
—
L-胱氨酸盐酸盐
31.29
31.29
31.29
31.29
31.29
31
31
31.29
31.29
L-谷氨酸
—
—
—
14.7
14.7
—
—
—
—
7.35
渗透压（加碳酸氢钠）
299±5%
300±5%
L-脯氨酸
17.25
17.25
以上数据仅为参考，以产品说明书为准。
IMDM细胞培养基
成分（mg/L）
MD400
成分（mg/L）
MD400
氯化钙
165
L-苏氨酸

氯化钾
330
L-色氨酸
16
硝酸钾
0.076
L-酪氨酸
71.5
无水硫酸镁
97.67
L-缬氨酸
维生素B12
0.68
0.68
L-丙氨酸
4.45
4.45
L-天门冬酰胺
7.5
7.5
pH（无碳酸氢钠）
5.8±0.3
5.8±0.3
L-天门冬氨酸
6.65
6.65
pH（加碳酸氢钠）
6.8±0.3

常用细胞培养基配方及缓冲液

常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是为了在体外维持细胞生长和增殖所设计的一种营养液。

细胞培养基的配方要求提供细胞所需的基本营养物质，如氨基酸、糖类、维生素和激素，并提供适当的pH和离子平衡。

同时，缓冲液也是细胞培养过程中不可或缺的一部分，用于稳定细胞培养基的pH，维持细胞正常的生长环境。

下面列举几种常用的细胞培养基配方及缓冲液：1. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)-细胞培养基配方：-DMEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：无2. RPMI 1640 Medium (Roswell Park Memorial Institute Medium) -细胞培养基配方：-RPMI1640培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)溶液，浓度为25mM，用于稳定pH。

3. MEM (Minimum Essential Medium)-细胞培养基配方：-MEM培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)- 缓冲液：盐酸/NaOH缓冲体系，通常用NaHCO3/N-2-羟乙基piperazine-N'-2-乙磺酸(HEPES)缓冲。

4. Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)-细胞培养基配方：-HBSS培养基粉末-对应体积的无菌水-缓冲液：无5. L-15 Medium (Leibovitz's L-15 Medium)-细胞培养基配方：-L-15培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。

6. DMEM/F12 Medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's F-12 Medium)-细胞培养基配方：-DMEM/F12培养基粉末-对应体积的无菌水-10%火马骅胎血清(FBS)-1%青霉素/链霉素(P/S)-缓冲液：HEPES溶液，浓度为25mM。

各种培养基配方模板

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用）可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2～7.4配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL（rose bengal，玫瑰红水溶液）琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）马铃薯200g蔗糖（或葡萄糖）20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制：(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

常用细胞培养基配方及缓冲液

常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。

常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：一、常用的细胞培养基配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。

-基本配方：-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。

2.RPMI1640-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。

-基本配方：-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。

3. MEM（Minimum Essential Medium）-MEM是最早用于细胞培养的培养基。

-基本配方：-高糖MEM：添加25mM葡萄糖-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖4. Ham's F-10-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。

-基本配方：- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖5.L-15-适用于多种种类的细胞培养。

-基本配方：- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。

二、常用的缓冲液：1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）-0.1MPBS的配方：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-1L去离子水-调pH至7.42.HEPES缓冲液-基本配方：-119mMNaCl-5mMKCl-0.8mMMgSO4-0.4mMKH2PO4-2.4mMNaHCO3-20mMHEPES（pH7.4）-0.6mMCaCl23. Tris缓冲液-基本配方：- 25mM Tris- 192mM glycine-10%甘油-0.1%SDS-pH8.34. Hanks平衡盐液 (HBSS)-基本配方：-8gNaCl-0.4gKCl-0.146gKH2PO4-0.2gMgSO4-0.06gMgCl2-0.35gNaHCO3-0.06gNa2HPO4-pH7.45. Tris-EDTA-基本配方：- 1M Tris-HCl，pH 8.0-0.5MEDTA，pH8.0以上是常用的细胞培养基配方和缓冲液的一些例子，不同细胞类型和实验要求可能需要不同的培养基和缓冲液。

通用细胞培养基配方及其缓冲液

36
36
36
36
36
L-缬氨酸
46
46
46
46
46
46
46
46
46
D-葡萄糖
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
酚红
10
10
10
10
10
6
6
10
10
丁二酸钠
—
—
—
—
—
100
100
—
—
丁二酸
—
—
—
—
—
75
75
—
—
D-泛酸钙
1
1
1
1
1
1
1
1
1
重酒石酸胆碱
—
—
—
—
—
1.8
—
72.5
L-蛋氨酸
15
15
15
15
15
15
15
—
15
L-苯丙氨酸
32
32
32
32
32
32
32
32
32
L-脯氨酸
—
—
—
11.5
11.5
—
—
—
—
L-丝氨酸
—
—
—
10.5
10.5
—
—
—
—
L-苏氨酸
48
48
48
48
48
48
48
48
48
L-色氨酸
10
10
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细胞培养常用试剂的配制

细胞培养常用试剂的配制日期：2012-04-13来源：未知作者：网友点击：239次相关专题∙细胞培养基的配制∙细胞培养专题∙万能缓冲液PBS器材与试剂干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器等具体步骤1、水：细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。

需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.2、PBS (也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗溶解定容：将药品(NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4%26middot;H2O 1.56g，KH2PO40. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。

用HCl或NaOH调PH到7.4。

移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。

注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。

3、胰蛋白酶溶液：胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。

不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。

胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。

使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。

因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。

终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。

称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25%，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。

搅拌混匀，置于4℃内过夜。

用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。

生命科学细胞培养缓冲液配制

生命科学细胞培养缓冲液配制北京华越洋生物磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁) 1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco's磷酸缓冲盐溶液、D-PBSB、D-PBS溶液,含钙镁,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。

"主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4, 1.47mM KH2PO4,1.8mMCaCl2,3.98mM镁离子组成,该粉剂溶于水后pH值为7.2～7.4。

使用时，取粉末充分溶解于水即可使用，如要求无菌，应高压灭菌或过滤除菌。

磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,含钙镁) 10×1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco's磷酸缓冲盐溶液、D-PBSB、D-PBS溶液,含钙镁,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。

"主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4, 1.47mM KH2PO4,1.8mMCaCl2,3.98mM镁离子组成,该粉剂溶于水后pH值为7.2～7.4。

使用时，取粉末充分溶解于水即可使用，如要求无菌，应高压灭菌或过滤除菌。

磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁) 1L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco磷酸缓冲盐溶液、D-PBSA、CMF-DPBS溶液或DPBS溶液,不含钙离子和镁离子,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4,1.47mM KH2PO4组成,该粉剂溶于水后pH值为7.4。

现货磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁) 2L 细胞培养45% 室温,24个月最常用的磷酸盐缓冲溶液,又称Dulbecco磷酸缓冲盐溶液、D-PBSA、CMF-DPBS溶液或DPBS溶液,不含钙离子和镁离子,常用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4,1.47mM KH2PO4组成,该粉剂溶于水后pH值为7.4。

缓冲液培养基配制

电泳缓冲液、培养基的配制一、电泳缓冲液、染料和凝胶加样液的配制 1、50×Tris-乙酸（TAE ）缓冲液2、5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液3、1％溴酚蓝（bromophenol blue ）加1g 水溶性钠型溴酚蓝于100ml 水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

1％二甲苯青FF （xylene cyanole FF ）溶解1g 二甲苯青FF 于足量水中，定容到100ml 。

4、10mg/ml 的溴化乙锭（ethidium bromide ）小心称取1g 溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml 水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。

用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。

凝胶上样液（gel loadingsolutions ） 5、6×碱性凝胶上样液（室温贮存）6、6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）、6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）74℃贮存）9、6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存）10、10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）二、无机溶液配制1、1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

2、1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

3、10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

4、10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

5、1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。

实验常用试剂、缓冲液,培养基的配制方法-孤岛颠人收藏

生物实验常用试剂、缓冲液，培养基的配制方法孤岛颠人收藏1、1M Tris-HCl★组份浓度 1 M Tris-HCl （pH 7.4，7.6，8.0）★配制量1L★配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH 值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl★组份浓度 1.5 M Tris-HCl （pH8.8）★配制量 1L★配置方法称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

★注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer★组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）★配制量 1L★配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL500 mM EDTA（pH8.0） 20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠★组份浓度 3 M 醋酸钠（pH5.2）★配制量 100mL★配置方法称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

加入冰乙酸调节pH值至5.2。