红外分光光度法鉴别

演示性试验

实验二十六 红外分光光度法鉴别

氢化可的松与醋酸氢化可的松

一、实验目的

1.了解红外分光光度计的基本原理及操作方法。

2.熟悉利用红外光谱鉴别药物的方法。

二、仪器与试药

1.仪器 FI 型光栅红外分光光度计 玛瑙乳钵

2.试药 溴化钾

三、实验原理

1.氢化可的松：

分子中三个羟基的存在，形成分子内及分子间的氢键缔合，使羟基的谱带变宽向低波数移动，V OH 约为3400cm ﹣1，C 20酮的Vc=o 为1715cm ﹣1，△4-3-酮的Vc=o 为1645cm –1，原因是与羟基形成氢

键、与双键共轭，故向低波数移动；Vc=o 为1620cm –1，由于C 3酮基形成氢键向低波数移动时，1620cm –1峰表现为肩峰：Vc=o1140～1000cm –1。

2.醋酸氢化可的松：

酯链羟基，因诱导效应，降低了羟基的极性，增强了双键成分因而增强了键力，使Vc=o 为1750cm –1;C 20酮基的位置在1710cm –1,△4-3-酮的Vc=o 为1635cm ﹣1;Vc-o-c1240cm ﹣1和1060cm ﹣1

是酯类的红外光谱特征。

四、实验内容：

取干燥供试品 1～2mg 与200mg 溴化钾（干燥并过 200目筛）粉末，在玛瑙乳钵中研磨均匀，将样粉适量置压片模具中，均匀覆盖模底，装置模具，联接真空系统，抽气5分钟（除去混于粉末中的湿气及空气，）然后，边抽气边加压至8吨维持5分钟，去除真空，取下模具，去除透明的供试品溴化钾片，置于样品框中，将样品框置于红外分光光度仪的光路中，空白置于参比光路，选择适当的增益、狭缝、程序及扫描时间，扫描区间为4000cm ﹣1～400cm ﹣1,得红外光谱曲线。

五、注意事项

1.供试品的纯度必须符合要求。

2.研磨样品时，应在红外灯下小心操作。

3.实验用溴化钾必须干燥、纯度符合要求并且颗粒均匀。

4.某些供试品在固体状态测定时，可能因为同质多晶型，测得图谱与标准图谱不符，此时应

CH 3O

另取少量供试品，置蒸发皿中，加入少量该药品项规定（《中国药典》）的溶剂，使供试品溶解，水浴蒸干，然后测绘。

六、实验思考

1.样品与底物为什么需要进行混合并研磨？

2.压片式红外分光光度计的保管应注意什么?

附：FI型光栅红外分光光度计（上海分析仪器厂）操作规程：

1.接通220伏电源（电源插头带地线）。

2.接通仪器电源，指示灯亮，停止扫描指示灯灭，硅碳棒预热，扇形镜开始转动，仪器预热开始，约20分钟后，接通仪器后的笔楔开关（使记录笔得到能量）。

3.检查各旋钮的位置：狭缝程度置3#，扫描速度置2#，调节增益旋钮至适当位置。

4.调节电平衡：用纸片档着两面三刀光束，调节电平衡，使笔达到静止并略向100%方向偏转。

5.提起笔架，打开记录器盖板，放置记录纸，对准起始点（使记录纸4000cm-1和波数指示刻度盘4000cm-1相对应）。

6.关闭样品光束，调节好0%T，即让笔停在0%。

7.打开双光束，调节100%T，用100%T旋钮细调。

8.插上聚苯乙烯标准品、供试品。

9.接通扫描开关，仪器开始扫描。