尿蛋白电泳操作规程
尿微量白蛋白(U-ALB)免疫比浊定量QuikRead仪器法)作业指导书
尿微量白蛋白（U-ALB）免疫比浊定量QuikRead仪器法)作业指导书1.实验原理QuikRead U-ALB是一种以微粒子包被的抗人白蛋白血清为基础的免疫比浊试验。
存在于样本中的白蛋白和微粒子反应，溶液中浊度的最终变化通过QuikRead仪器被测定。
尿样本被加入缓冲液中在同一比浊杯中进行分析测定。
试剂被预先定标，特定批号的标准曲线被记录在试剂盒提供的磁卡当中。
QuikRead U-ALB和使用比浊法获得的结果相关性良好。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：无需特殊准备2.2 标本种类：夜尿或随机尿2.3 标本要求：QuikRead U-ALB试剂盒直接用尿样本（未稀释的样本）进行检测。
尿样本中不建议添加防腐剂。
夜尿样本的采集：采集的夜尿样本，要求至少采集6小时的夜尿。
记录采集尿样本的时间和尿量。
白蛋白的排泄率可根据以下公式计算：总尿量（ml）*QuikRead U-ALB浓度值（mg/l）/采集时间（min）=尿微量白蛋白的排泄率（ug/min）随机尿样本：在随机尿样本中，使用首次晨尿样本可获得十分可靠的结果。
贮存样本在测试以前要求尿样本达到室温。
3. 标本储存：尿样本2-8℃可贮存14天。
尿样本不应当被冰冻保存。
4. 标本运输：室温运输5. 标本拒收标准：细菌污染、乳糜尿6. 试剂6.1 试剂名称：QuikRead U-ALB 试剂6.2 试剂生产厂家：Orion coporation Orion Diagnostica6.3 包装规格：50Test/kit6.4 试剂盒组成：6.5试剂储存条件及有效期：试剂2-8℃贮存。
缓冲液可在室温下（2-25℃）贮存。
试剂的稳定性可达到试剂盒上印的有效期。
7. 仪器设备7.1仪器名称：QuikRead 分析仪7.2仪器厂家：基恩科技有限公司7.3仪器型号：QuikRead 型7.4仪器通道选择：采取两个发光二极管：654μm,950μm;吸收范围：0.0-2.57.5仪器校准程序：每个试剂盒有一个已知的校正数据，它记录在磁卡上，用以确定分析曲线，让磁卡通过仪器上读卡器，该数据信息就能送入QuikRead仪器之中，然后仪器就处于等待使用状态。
SDS-PAGE蛋白电泳检测标准操作规程(非还原&还原)
GOOD RESEARCH & DEVELOPMENT PRACTICESDS-PAGE蛋白电泳检测标准操作规程（还原&非还原）编号：SDS-PAGE蛋白电泳检测起草人：部门审核：QA审核：替代：□新订：□日期：日期：日期：修订号：0批准：年月日生效日期：年月日文件分发部门：GOOD RESEARCH & DEVELOPMENT PRACTICESDS-PAGE蛋白电泳检测编号：SDS-PAGE蛋白电泳检测一目的保证产品电泳电泳分子量和纯度检测按规范进行和检定结果的准确可靠。
二范围用于规范电泳电泳分子量和纯度的测定。
三责任质量控制部人员。
四内容1试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
2 溶液的配制2.1A液：1.5MTris·HCl pH8.8称取90.75gTris碱(分析纯)加适量的超纯水（约400ml）溶解,用6M盐酸调pH值至8.8,加超纯水定容至500 ml。
贴上标贴，室温储存。
此溶液有效使用期限为三个月。
6M盐酸（调pH用）：浓盐酸50ml，加50ml纯化水，混匀。
2.2、B液: 0.5MTris·HCl pH6.8称取60.5gTris碱(分析纯)加适量的超纯水（约400ml）溶解,用6M盐酸调pH值至6.8,加超纯水定容至1000 ml。
贴上标贴，室温储存。
2.3C液: 30%丙烯酰胺-0.8%N,N-亚甲基双丙烯酰胺溶液称取300g丙烯酰胺(分析纯),8gN,N’-甲叉双丙烯酰胺(分析纯), 加适量的超纯水溶解(一般500ml，因为丙烯酰胺具有溶胀性的特点),再定容至1000 ml,用滤纸过滤。
贴上标贴，避光4℃保存。
2.4D液:1%SDS称取2gSDS(分析纯),用超纯水溶解至200 ml.贴上标贴，4℃保存。
2.5E液:10%过硫酸铵GOOD RESEARCH & DEVELOPMENT PRACTICESDS-PAGE蛋白电泳检测编号：称取10g过硫酸铵(分析纯)，用超纯水溶解至100 ml，以1ml/支分装，贴上标贴，－20℃保存。
SDS-PAGE电泳标准操作流程
SDS-PAG电泳标准操作规程（网上）3. 程序:端平齐。
放于制胶架上夹紧，下端紧贴密封条。
3.1.2分离胶的配置3.122 灌胶混匀后用移液枪将凝胶溶液沿玻棒小心注入到长、短玻璃板间的狭缝内（胶高度距样品模板梳齿下缘约1cm）。
3.1 . 2.3液封在凝胶表面沿短玻板边缘轻轻加一层水以隔绝空气，使胶面平整。
静置约30min观察胶面变化，当看到水与凝固的胶面有折射率不同的界限时，表明胶已完全凝固，倒掉上层水，并用滤纸吸干残留的水液。
3.1.3浓缩胶的配置混匀后用移液枪将凝胶溶液注入到长、短玻璃板间的狭缝内（分离胶上方），轻轻加入样品模板梳，小心避免气泡的出现。
约30分钟，聚合完全。
3.2.1安装电泳槽将制备好的凝胶板取下，小心拔下梳子。
两块10%勺凝胶板分别插到U形橡胶框的两边凹形槽中，可往上提起使凝胶板紧贴橡胶。
将装好玻璃板的胶模框平放在仰放的贮槽框上，其下缘与贮槽框下缘对齐，放入电泳槽内。
倒入1X tris-gly 电泳缓冲液。
3.2.2 样品处理对于蛋白样品直接取80 pl的样品，依次加上20Q 5x buffer （加了B-巯基乙醇），混匀。
对于菌体或组织等固体样品，取少量样品加100ul 2x buffer （加了B-巯基乙醇）煮沸10分钟。
3.2.3 加样用移液枪取处理过的样品溶液10 p l，小心地依次加入到各凝胶凹形样品槽内，marker加入到其中一个槽内，为区别两块板，marker可加在不同的孔槽中。
3.2.4电泳将电泳槽放置电泳仪上，接通电源，正负极对好。
电压调至约150v保持恒压。
待溴酚蓝标记移动到凝胶底部时，关电源，把电泳缓冲液倒回瓶中。
3.2.5剥离胶把电泳槽取出，两块板拿下来，用刮片从长短玻片中间翘起，再把浓缩胶刮掉，取下。
3.3. 染色放于加有R250染色液的染色皿中，染液漫过胶即可，置于摇床上，转速约为45r/min，时间约1小时,完成后染液倒掉并用水洗掉染液。
3.4. 脱色取出染色过的胶放于加有脱色液的染缸里，脱色液漫过胶即可，置于摇床上，转速约为45r/min，时间约1小时，本底色脱净，条带清晰可见即可，完成后倒掉脱色液。
尿液蛋白质测定(手工法)操作规程sop
尿液蛋白质测定（手工法）操作规程sop
一、项目名称：尿液蛋白质定性检查
二、方法：磺基水杨酸法
三、原理：磺基水杨酸为生物碱试剂，在酸性环境下，其阴离子可
与带正电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀。
四、试剂：10%磺基水杨酸乙醇溶液。
五、仪器：手工法
六、操作步骤：
1、取试管加尿液3ml。
2、滴加10%磺基水杨酸溶液3－4滴，形成界面。
3、如尿呈浑浊，表示有蛋白质存在，混浊深浅表示含量的多
少。
七、结果判断：
●阴性：尿液外观仍清晰透明，不呈浑浊。
●微量（+/-）：轻微浑浊，隐约可见。
●阳性（+）：明显的白色混浊，但无颗粒出现。
（++）：稀薄乳样浑浊，出现颗粒。
（+++）：混浊，有絮片状沉淀。
（++++）：絮状混浊，有大凝块下沉。
八、参考范围：正常人为阴性。
九、标本要求：
1、标本应新鲜，并及时送检。
2、尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。
3、容器应清洁、干燥。
十、临床意义：分为功能性、体位性、病理性蛋白尿，后者见于肾
炎、肾病综合症等。
十一、注意事项：
1、此法比较敏感。
2、如尿液浑浊，应先离心或过滤。
3、强碱性尿可出现假阴性，应加5%醋酸溶液数滴酸化后再做试
验。
4、有机碘造影剂、超大剂量使用青霉素等均可致假阳性。
5、尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时，可呈假阳性。
十二、参考文献：
全国临床检验操作规程（第3版）
十三、
编写者：
制定日期：
修改日期：
科主任对规程认可：。
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作规程
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作----(纯度检测)一.目的：检测蛋白质的纯度是否达到生产抗体的要求。
二.依据：《分子克隆手册》，Ab-mart公司内部标准。
三. 职责：质量控制部。
四.试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
五. 器皿与耗品：所有玻璃器皿使用前用玻璃清洁剂清洗, 80℃烤干。
tube、tip一次性使用。
六. 仪器设备：电泳仪（电源1--300V）电泳槽灌胶模具染色具凝胶扫描仪七. 环境要求：相对洁净环境，室温。
八. 溶液的配置：1.A液：1.5MTris·HCl pH8.8称取18.15gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至8.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）2.B液: 1MTris·HCl pH6.8称取12.1gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至6.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）3.C液: 30%丙烯酰胺称取29.2g丙烯酰胺(分析纯),0.8gN,N’-甲叉双丙烯酰胺(分析纯), 加适量的超纯水溶解,再定容至100 ml,用滤纸过滤,。
贴上标贴，避光4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）4.D液:10%SDS称取10gSDS(分析纯),用超纯水溶解至100 ml.贴上标贴，室温储存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）5.E液:10%过硫酸胺称取10g过硫酸胺(分析纯), 用超纯水溶解至100 ml。
贴上标贴，-20℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）6.F液:TEMED(amersco)7.电泳缓冲液(10X)称取60.57g Tris碱(分析纯),288.268g甘氨酸(分析纯),20gSDS(分析纯),加超纯水定容至2000ml，临用前加超纯水稀释10倍，贴上标贴，室温储存。
24小时尿蛋白定量操作规程
24小时尿蛋白定量操作规程
以下是24小时尿蛋白定量操作规程的一般步骤：
准备：
1. 确保实验室和试剂处于清洁有序的状态，并根据需要准备所需的试剂和设备。
2. 需要24小时尿样。
操作步骤：
1. 在清晨起床时，用清洁的容器收集全部排尿，并记录开始时间。
2. 将收集到的尿样倒入带有标记线的24小时尿收集容器中。
3. 在24小时内，将生成的所有尿液都收集到同一个容器中，确保不漏尿。
4. 在收集期间，将尿液保存在冰箱中或进行适当的冷藏，以避免蛋白质降解。
5. 在24小时后的同一时间结束尿液收集，并记录结束时间。
6. 将尿液进行充分混合。
7. 紧接着，取1-2mL的混合好的尿液样本，转移到干净的离心管或容器中，并进行标签。
8. 将尿液样本离心10-15分钟，以去除任何固体颗粒。
9. 将离心管中的尿液转移到分析用的小试管中，准备进行尿蛋白定量检测。
10. 根据所使用的具体检测方法，按照该方法的操作规程进行测量，并记录结果。
注意事项：
1. 24小时尿蛋白定量需要收集所有尿液，包括清晨第一次排尿。
2. 在尿液收集期间要保持卫生，以避免尿液受到污染。
3. 尿液样本需要及时冷藏或保存在冰箱中，以避免蛋白质降解。
4. 操作过程中要注意使用一次性手套和其他个人防护用具，以避免污染尿样。
5. 操作要规范，确保准确性，避免任何可能影响尿蛋白定量结果的因素。
SDS-PAGE电泳SOP
SDS-PAGE电泳标准操作规程1.目的：制定本规程以规范还原性SDS-PAGE和非还原性SDS-PAGE电泳方法分离蛋白的操作过程。
2.范围：抗原或是抗体的定性鉴定、纯度鉴定和相对定量比较。
3.责任：质量分析人员熟悉并遵守该标准操作规程。
4.定义：N/A5.设备、材料和试剂：5.1设备、材料设备名生产商型号/货号设备编号备注电泳仪伯乐PowerpacHC TM HV JS026垂直电泳槽伯乐Miniprotean JS025干式恒温浴K30 JS045离心机eppendorf F-45-12-11 JS020单道移液器（10ul,100ul）Eppendorf Research plus JH07931,GH15898冰箱TCL BCD-211KD3 N/A摇床QILIM BEIER N/APH仪梅特勒5.2试剂试剂名称生产商货号批号APS国药集团化学试剂F20111213甲醇国药集团化学试剂20130407 冰醋酸国药集团化学试剂130420考马斯亮蓝R-250 国药集团化学试剂20130322 Tris-HCl 国药集团化学试剂201300422 甘油国药集团化学试剂F201000115 溴酚蓝国药集团化学试剂20120929 无水乙醇国药集团化学试剂甘氨酸国药集团化学试剂SDSDTTProtein Marker盐酸国药集团化学试剂2×PAGE 7.5%凝胶制备试剂盒Promoton PG111 分离胶缓分离胶溶液4%浓缩胶Promoton 浓缩胶预混液6.溶液配制6.1分离胶以1mm板，配两块为例：取7.5%的分离胶缓冲液和分离胶各5ml混匀，再向其加入10%的APS溶液100μl混匀。
6.2 浓缩胶以1mm板，配两块为例：取浓缩胶的预混液4ml，向其加入10%的APS溶液40μl混匀。
6.3 上样缓冲液（loading buffer）：6.4 10%过硫酸铵称取1g APS，加入10ml纯水搅拌溶解（现配现用）也可储存4~8℃冰箱中保存，保存期为1-2周。
尿蛋白 检测方法
尿蛋白检测方法
尿蛋白的检测主要有尿蛋白定性试验、尿蛋白定量测定、尿蛋白电泳分析和尿微量白蛋白检测。
1. 尿蛋白定性试验：通常指普通尿常规检查，一般留取一试管的晨尿，晨尿要保证空腹6-8个小时，晨起第一次排尿时取中段尿。
然后用加热醋酸法、磺柳酸法或试纸法检查，如果有尿蛋白即报告阳性，但不能测出尿蛋白的量。
2. 尿蛋白定量测定：需要将24小时的尿液完全留下后混合，记录尿量，选取部分标本通过化验检查尿蛋白的浓度，再计算出24小时尿蛋白的总量。
可以帮助诊断肾脏疾病的严重程度，如果尿蛋白量过大，可能需要做肾穿刺活检。
3. 尿蛋白电泳分析：也需要取晨尿，取样本尿液，使尿液中的蛋白做电泳，确定是大分子蛋白、中分子蛋白，还是小分子蛋白。
根据蛋白成分的不同，确定肾脏受累部位。
4. 尿微量白蛋白检测：比较建议在空腹6-8个小时以后，留取晨起第二次或第三次的尿液，可以早期发现是否存在尿蛋白的情况。
除上述检查外，还需要完善一些血液相关检查，确定有没有其他继发性因素参与，引起尿蛋白。
根据患者具体情况，有可能还需要做肾穿刺活检，加以明确诊断，给予相应的治疗。
蛋白转移电泳槽型号安全操作及保养规程
蛋白转移电泳槽型号安全操作及保养规程概述蛋白转移电泳（Protein transfer electrophoresis）是一种重要的蛋白质分离/移转技术。
在生命科学、制药、医疗等领域应用广泛。
蛋白转移电泳槽是进行蛋白质电泳转移的重要设备，不仅负责分离功能，同时还有其它安全和保护功能。
本文对蛋白转移电泳槽的使用规程、操作注意事项以及保养维护进行了详细说明。
操作规程1. 使用前检查每次使用蛋白转移电泳槽前，应检查设备的完好性、电极接触性、泄露情况、紫外线透过率等方面。
检查过程应注意遵循以下步骤：•检查蛋白转移电泳槽是否完好无损，底部的导电垫是否完整。
•检查电极接触情况，特别是触电的铜柱底座必须与电极垫紧密接触。
•检查设备泄露情况，每个阀门开启/关闭时都应确认没有泄漏。
•检查紫外线透过率，确认是否存在紫外线泄漏。
2. 样品处理将样品处理好后进行装载，移至电泳槽，并在指定电极下方的基底上放置泡沫垫。
每个电泳槽的装载量不应超过建议的最大容量。
3. 组装电泳槽在蛋白转移电泳槽两端的电极柱上分别放置电极垫，并安装上电极盖或电极底盖。
在电泳槽中间的位置透明膜下放置合适的吸水纸或发泡塞。
4. 开始电泳转移按照蛋白转移电泳槽设备的说明书上所描述的开始转移，必须注意在整个电泳过程中只有建议电流值下的电泳过程才是允许的。
5. 完成电泳转移转移完成后，用户应关闭电源并卸载所有样品。
6. 清洗设备电泳结束后，需要对设备进行清洗，既可避免污垢和其他杂质的蓄积，为下次使用调整设备状态。
清洗步骤如下：•首先关闭泄漏阀门并卸下电极，清除附着在阀门和变压器内的污物。
•接下来，使用洗涤剂溶液清洗电泳槽和电极，然后用纯水冲洗干净。
•最后，用纯化水重新填充电泳槽，以便为空气净化器的设置。
操作注意事项•用户必须仔细阅读操作手册，并按照手册说明正确操作设备。
•在电泳槽和电极上一些细小的损伤会对设备造成不可预料的损坏，应该谨慎处理。
•使用电泳槽应遵守安全操作规程。
SDS-PAGE电泳的标准操作规程
SDS-PAGE电泳的标准操作规程（编号：039）1、目的及适用范围SDS-PAGE电泳的分离原理，是根据大多数蛋白质都能与阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）按重量比结合成复合物，使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的净电荷，消除了蛋白分子的电荷效应，使蛋白按分子大小分离，主要用于蛋白质分子量的测定、蛋白质混合组分的分离和蛋白质亚基组分的分析等方面。
2、主要仪器恒压或恒流电源、垂直板、制胶模具3、试剂及配制方法试剂配制方法或要求H2O 电阻率不低于18.2 MΩ.cm1.5 M Tris-HCl 1.5 moL/L Tris-HCl缓冲液，pH 8.830% Acrylamide 30% 丙烯酰胺溶液（避光保存）10% SDS 10% SDS溶液10% APS 10% 过硫酸铵溶液（临用前配制）TEMED TEMED溶液1 M Tris-HCl 1 moL/L Tris-HCl缓冲液，pH 6.8g、甘氨酸94 g、SDS 5 g，水稀释至1 L，pH 8.315.15×电极缓冲液 Tris2×Loading buffer 100 mM Tris-HCl（pH6.8）、4% SDS、0.2% 溴酚蓝、20% 甘油，用于非还原SDS-PAGE电泳，如用于还原SDS-PAGE电泳，则再加2% β-巯基乙醇5×Loading buffer 250 mM Tris-HCl（pH6.8）、10% SDS、0.5% 溴酚蓝、50% 甘油，用于非还原SDS-PAGE电泳，如用于还原SDS-PAGE电泳，则再加5% β-巯基乙醇考马斯亮蓝染色液 0.1%考马斯亮蓝R250、25%异丙醇、10%冰醋酸，水稀释至1 L考马斯亮蓝脱色液醋酸100 mL、乙醇50 mL、水850 mL4、操作步骤4.1 制胶：取合适的密封垫片和两块已清洁的干燥的玻璃板，组装成灌胶的模具，按下表制成分离胶，灌入模具内一定高度（一般离玻璃板上端3.5 cm），小心加水或异丙醇封顶（约0.5 cm高），室温下聚合（温度不同，聚合时间不同，20℃大约需30 min）。
24小时尿蛋白定量测定(SOP)
【方法】邻苯三酚红比色测定法【原理】通过测定24小时尿液总蛋白的浓度和24小时尿量来计算24小时内从尿液排出的蛋白质的总量。
【标本收集】1.患者从8：00排空小便后开始计时，将24小时的所有小便全部收集在同一容器内。
2.准确收集24小时尿液（防腐剂为甲醛10ml，由血化中心提供），准确记录24小时尿量，从24小时尿液中留取约3ml尿液送检，用于测定尿总蛋白定量。
【标本接收】1.检验申请单上注明：测定项目为“24小时尿蛋白定量”，同时必须注明24小时尿量,单位为“L”。
2.所接收标本为用尿常规管装的尿标本。
3.24小时尿蛋白定量编码：250301010a，检验费用：10元。
【仪器与试剂】1.仪器为拜尔1650生化分析仪。
2.德赛诊断系统尿液/脑脊液总蛋白（U-TP/csf-TP）测定。
3.试剂为即用式。
4.试剂为单试剂，放于RTT1-36号位，定标位在CTT－18号位。
5.试剂稳定性与贮存：试剂和标准品避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期，试剂不可冰冻。
【操作步骤】1.上机操作：见《拜尔1650生化分析仪仪器操作SOP文件》。
2.在BAYER1650上编程时测定项目选择“CSF－TP”。
3.测定条件：见《尿液脑脊液总蛋白测定（SOP）》。
【计算与报告】1.测定出的结果为尿总蛋白定量，单位是g/l；2.将24小时尿量（由临床提供，单位L）、尿总蛋白定量（单位g/l）手工填入LIS3.保存后，24小时尿蛋白定量（g/24h）会自动计算出来；4.如果测定结果大于3000 mg/L，应用9 g/L NaCl溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2。
如果样品测定值低于20 mg/L，需加大样品用量（例如50μl样品+1000μl 试剂）。
【性能特性】1.病人结果可报告范围对总蛋白的检测范围为20～3000 mg/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L NaCl溶液作1+1稀释，重新测定，结果乘以2。
尿蛋白电泳报告单
尿蛋白电泳报告单介绍尿蛋白电泳是一种通过电泳技术分析尿液中蛋白质的方法。
它可以帮助医生了解尿液中蛋白质的类型和含量，从而对患者的健康状况进行评估。
本报告单将介绍尿蛋白电泳的过程和结果，并对一些常见的异常结果进行解释。
尿蛋白电泳的过程1.样本采集：尿液样本通常在早晨第一次排尿后采集，使用干净的容器收集足够的尿液。
2.样本准备：将尿液离心，使其变为无颗粒的透明液体。
3.准备电泳胶：将聚丙烯酰胺凝胶（一种透明的平板）放置在电泳槽中，倒入缓冲液，以保持胶体稳定。
4.加载样本：将准备好的尿液样本与电泳缓冲液混合，以合适的比例稀释，将稀释后的样本加载到准备好的凝胶孔中。
5.进行电泳：将准备好的电泳槽连接到电源，设置合适的电流和电压，开启电源，让电泳进行一段时间。
6.结果分析：通过观察凝胶上的带状图案，可以分析尿液中蛋白质的类型和相对含量。
报告单解释下面是一些常见的尿蛋白电泳结果和其可能的解释：1.无异常结果：–结果解释：所有的蛋白带都在预期的位置上，没有异常带出现。
–健康状况评估：尿液中没有异常的蛋白质，患者的肾功能正常。
2.单一异常蛋白带：–结果解释：在电泳图上只有一种异常蛋白带出现。
–健康状况评估：可能存在特定的蛋白异常，可能是炎症、感染或其他疾病的迹象。
建议进一步检查。
3.多个异常蛋白带：–结果解释：电泳图上出现多个异常蛋白带。
–健康状况评估：可能存在多种蛋白异常，这可能与多种疾病有关，如多发性骨髓瘤、肾脏疾病等。
建议进一步检查以确定具体疾病。
4.异常电泳图：–结果解释：整个电泳图的带状图案异常。
–健康状况评估：可能存在严重的肾脏疾病或其他系统性疾病。
建议立即进行进一步检查和治疗。
结论尿蛋白电泳是一种有效的方法，通过分析尿液中的蛋白质类型和含量，可以评估患者的健康状况。
正常的电泳图案表明肾功能正常，而异常的电泳图案可能与炎症、感染、肾脏疾病等疾病有关。
准确解读尿蛋白电泳结果对于医生判断疾病并采取适当的治疗措施至关重要。
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作规程
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作----(纯度检测)一.目的：检测蛋白质的纯度是否达到生产抗体的要求。
二.依据：《分子克隆手册》，Ab-mart公司内部标准。
三. 职责：质量控制部。
四.试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
五. 器皿与耗品：所有玻璃器皿使用前用玻璃清洁剂清洗, 80℃烤干。
tube、tip一次性使用。
六. 仪器设备：电泳仪（电源1--300V）电泳槽灌胶模具染色具凝胶扫描仪七. 环境要求：相对洁净环境，室温。
八. 溶液的配置：1.A液：1.5MTris·HCl pH8.8称取18.15gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至8.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）2.B液: 1MTris·HCl pH6.8称取12.1gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至6.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）3.C液: 30%丙烯酰胺称取29.2g丙烯酰胺(分析纯),0.8gN,N’-甲叉双丙烯酰胺(分析纯), 加适量的超纯水溶解,再定容至100 ml,用滤纸过滤,。
贴上标贴，避光4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）4.D液:10%SDS称取10gSDS(分析纯),用超纯水溶解至100 ml.贴上标贴，室温储存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）5.E液:10%过硫酸胺称取10g过硫酸胺(分析纯), 用超纯水溶解至100 ml。
贴上标贴，-20℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）6.F液:TEMED(amersco)7.电泳缓冲液(10X)称取60.57g Tris碱(分析纯),288.268g甘氨酸(分析纯),20gSDS(分析纯),加超纯水定容至2000ml，临用前加超纯水稀释10倍，贴上标贴，室温储存。
蛋白电泳检测操作规程
1. 目的：规范蛋白电泳检测操作2. 范围：适用于蛋白电泳检测3. 职责：实验室人员对本操作规程的实施负责。
4. 内容：4.1 稀释取900ul超纯水放入离心管中，再加入100ul样品混合均匀制成稀释液。
另取呈梯度的BSA10ul加入到90ul超纯水中稀释十倍。
4.2 酶解取稀释液20ul置于另外一组离心管中,加入5ul Loading Buffer混合均匀，盖紧离心管盖，沸水浴10min。
4.3 离心完成沸水浴后，置于离心机中13000rpm离心3-5min，离心待用。
4.4 准备电泳取出预制凝胶，撕去底部封条，黑色条朝外放入电泳槽中，加入缓冲液检测是否渗漏，如渗漏则重新安装凝胶。
4.5 加样电泳按照顺序，使用移液枪以及加样枪头将待用样品和BSA依次加10ul到凝胶点样孔中，盖上电泳槽，开启电泳仪，调节电压至80V，开始电泳；半小时后调节电压至120V，继续电泳过程直至电泳条带至凝胶底部。
4.6 后处理取出凝胶，清水冲洗后置于容器中加入染色液，在摇床中50rpm染色1.5h。
染色完成后，倒出染色液，清水冲洗干净后，加入脱色液，在摇床中50rpm脱色30min，然后倾去脱色液，换用新的脱色液重复脱色30min，脱色过程重复三次。
置于观察灯上拍照，利用image处理图片（具体操作见image使用流程）5. 注意事项5.1 预制凝胶底部封条一定要撕去。
5.2 BSA的配制必须精确，必须使用中性缓冲液配制。
5.3 凝胶加样过程必须使用配套加样枪头，使样品下沉。
5.4 电泳缓冲液可重复利用，但建议重复次数不超过三次；染色液也可重复使用，建议重复次数不超过三次。
6．附录6.1 染色液（1L）配制方法考马斯亮蓝R250 2.5g、乙醇400ml、乙酸100ml、水500ml。
6.2 脱色液（500ml）配制方法乙醇50ml、乙酸100ml、水350ml。
6.3 缓冲液配制方法缓冲液制剂一袋溶入1L水中混合均匀。
血清蛋白电泳检查作业指导书
血清蛋白电泳检查作业指导书（电泳法）1. 实验原理血清电泳检查是临床实验室中一种常用的蛋白质分析技术。
它可以对血清或其他体液中的异常蛋白质进行筛选。
它是以区带电泳为基础在一种合适的支持介质—琼脂糖上进行的电泳。
血清蛋白质在给定的PH条件下主要根据其所在带电荷数将其分离成各种片段，根据其支持介质不同，电泳技术已有很大发展。
选用琼脂糖作介质，其使用十分方便。
血清蛋白质由五个不同迁移区带组成：ALB,α1，α2，β和γ球蛋白。
每一区带含有一种或多种血清蛋白质。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：静脉血3. 标本储存：静脉血分离出血清，储存于2-8℃冰箱中，5天。
4. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
6. 试剂6.1试剂名称：血清蛋白电泳检查试剂6.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司6.3 包装规格：150tests6.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶10块缓冲液条带10包×2条氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒6.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
有效期两年。
7. 仪器设备7.1 仪器名称：SEBIA电泳仪7.2 仪器厂家：法国Sebia公司7.3 仪器型号：HYDRASYS8. 操作步骤8.1 启动电泳仪8.2 将加样器放在一平板上，有数字的一端向上。
各加样孔加入10ul溶血的样品，2分钟内加样完毕。
将加样器放入保湿盒内，齿端向上（转运时用塑料齿保护架）。
等待5分钟，使样品扩散至齿端。
打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。
8.3 使用HYDRAGEL 15 HEMOGLOBINCE时选择仪器的“PROTEIN”程序（位于链盘左侧）。
8.4 从包装袋内取出缓冲条，拿出末端的塑料片，将缓冲条两端塑料片固定在电极支架背侧的钉上，塑料片应紧贴支架。
尿蛋白电泳操作规程
尿蛋白电泳操作规程一．项目名称尿蛋白电泳（HYＤRAＧEL PROTEINURIＥ)二．检验方法名称SDS-琼脂糖凝胶区带电泳三．方法学原理在含有多量的阴离子去垢剂十二烷基磺酸钠（SＤS）液体中,蛋白质可与其连接，形成ＳＤS—蛋白质复合物。
这种复合物蛋白本身的构造已经破坏，他们都表现出相同的构造和相同的负电荷。
当这种SDS—蛋白质复合物在具有适当筛选功能的介质中电泳时，如在含高浓度琼脂糖的HYDＲＡGEL 5 PROTEＩNURIE凝胶上电泳时,蛋白质按它们的分子量大小进行分离。
在HYＤRAＧEL 5 PRＯTEＩＮＵRIＥ凝胶上能清楚分离来源于肾小管(分子量＜65-7０Kｄa)还是来源于肾小球(分子量>65-70ＫDａ)的蛋白质，因此尿蛋白不仅能被检测到,而且能对蛋白来源进行分类(肾小球,肾小管性和混合性)。
四．方法学溯源自１９3０年由Tiselius发现了移界电泳（moｖinｇ bouｎdarｙeectroｐｈoresiｓ),而后,这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zoｎｅeｌｅｃrrｏpｈoresｉs)所克服,区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五．仪器（一）型号:SＥＢIＡ HＹDRASＹS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量:约1４个样本／小时2．所需样本量：5uｌ3．检验时间:约5０分钟4．重复性:有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压０-300Ｖ(可选至3００0V)电流0－５０0mＡ功率0-100Ｗ六．试剂及配套品（一）试剂1．ＨＹDRAGEL ５ PＲOTEＩNURIE试剂盒（1）商标:SEBIＡ（2）包装规格:50测试（3）货号:PN４1152．脱色液（1) 商标：SEBIA(２) 包装规格:Ｐａck foｒ 1０×１０0ｍl（3) 货号：PＮ4５40（４) 成分:柠檬酸３．洗涤液（1）商标：ＳEＢＩＡ（2）包装规格：Ｐａｃk foｒ 1０×8０ml（3）货号：PN4５41（4）成分：叠氮钠（二）配套品尿蛋白质控(1）商标：ＳＥBIA(2）包装规格:Pａck foｒ 5×1ml（３）货号:PＮ4７81七．操作步骤㈠开机,启动电泳仪。
尿白蛋白检测操作规程
尿白蛋白检测操作规程尿白蛋白（urine albumin）是临床上常用的尿液指标之一，用于评估肾脏功能和筛查肾脏疾病。
以下是尿白蛋白检测的操作规程，具体步骤如下：一、实验前准备1. 准备所需试剂和设备：包括尿白蛋白检测试剂盒、比色皿、移液器、离心机等。
2. 根据试剂盒说明书，将试剂和标准品置于恒温环境中。
3. 检查设备和试剂的有效期和保存条件，确保其处于良好状态。
二、样本采集1. 指导被检测者正确收集尿液样本。
2. 要求被检测者首次排尿后的中间尿作为样本，避免早晨起床后和长时间憋尿的尿液。
3. 避免尿液污染，确保样本的纯净性。
4. 需采集足够的尿液量，一般要求不少于15ml。
三、样本处理1. 将采集的尿液样本进行混合，以确保样本的均匀性。
2. 取适量的尿液样本，约10ml，在离心管中进行离心，离心3000r/min，离心10分钟。
3. 将离心后得到的上清液取出，转移到干净的试管中，避免悬浮物污染。
四、试剂准备1. 打开尿白蛋白检测试剂盒，取出所需试剂，并按照说明书上的要求配置试剂。
2. 按照比例将稀释液与检测试剂混合，轻轻摇匀。
五、操作步骤1. 在比色皿中依次加入10μl的标准品、10μl的稀释液、10μl的尿液样本和180μl的检测试剂。
2. 轻轻摇晃比色皿，均匀混合样本和试剂，确保其充分反应。
3. 在恒温环境下，将比色皿放入检测设备，开始反应。
4. 等待一定的反应时间后，根据检测试剂盒的说明书选择合适的读取波长，在特定波长下进行光密度（OD）的测定。
5. 根据测定结果，通过比较样本的OD值与标准品的OD值来计算尿白蛋白的浓度。
六、结果判读与分析1. 根据比色皿中样本的OD值，参考标准曲线，计算尿白蛋白的浓度。
2. 结果应该与正常值进行比较，评估尿白蛋白的水平。
3. 根据结果判断是否存在异常，根据临床需要参考其他检查指标进行综合分析。
七、结果记录与分析1. 将检测结果记录在检测表格或数据库中，包括样本编号、检测日期、浓度数值等。
医院检验中心血清蛋白电泳操作规程
医院检验中心血清蛋白电泳操作规程（1）试剂:1． PH 8.6 M=0.06 巴比妥缓冲液：巴比妥2．21g巴比妥钠12．36g 加热溶解后加蒸水至lL冷却．2．丽春红S染色液：称丽春红S0.4g,三氯醋酸6g，用蒸馏水溶解并稀释到100m1．3.漂洗液：3%(v／v)醋酸溶液：适用丽春红染色的漂洗4．透明液：液体石蜡+氢萘5．洗脱液：0.4M NAOH（2）操作:a)取醋纤膜，粗面编号后，浸入巴比妥缓冲液，浸透后取出，用吸水纸吸去缓冲液．b)加样：用加样器取血清约3ul加到薄膜上(粗面)，垂直点样于粗面上，距端是2.5cm.c)电源：将已加样的薄膜附贴在电泳糟支架上(粗面朝下)，要求中部悬空平直，平衡6—10分钟，将电泳仪的正负极与电泳糟的正负极连接，点样端为负极端，通电源，调电压为80-120V，电流强度为0.4-0.6mA／cm，通电40—50分钟.d)染色与漂洗：通电毕，立即将薄膜取出，浸于染液中5—10分钟，取出，用漂洗数次到背景完全漂净呈白色为止，最后于蒸馏水中漂洗半分钟，如不立即定量，可保存于漂洗液中。
（3）定量：1）光密度计扫描法：吸去薄膜上液体，待干燥后，将薄膜浸入十氢萘中，待完全透明后，放入光密度计内，扫描求得各组百分含量。
2）洗脱法：将漂洗的薄膜用吸水纸吸干后，将各色带剪下，白蛋白强入加有0.4M NaOH6ml管中，其它各部份分别浸入有0．4 M NaOH3ml管中，振摇数次，待色泽完全浸出后，即可在600—620nm比色，空白管用0.4MNa0H（4）计算：白蛋白％=白蛋白管吸光度×2/ T× l00α1球蛋白％= Αα1×100/ Tα2球蛋白％= Aα2/ T×100β球蛋白％=β/T×lO0γ球蛋白％=γ/ T×100(T＝ Aa1b 十 Aα1 十 Aα2 十 Aβ十 Aγ)（5）参考值：ALB: 55—74％α1：0.8—3.2％α2： 4.5—9％β： 5.8—12％γ：10-19%。
尿蛋白免疫电泳
尿蛋白电泳1、所有病人均留取新鲜晨尿送检。
2、检测方法：尿蛋白电泳方法均同于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法，尿蛋白定性采用磺基水杨酸法。
3、根据正常人血清醋纤膜电泳分离出来的区带来对照分析尿蛋白电泳区带。
血清蛋白电泳可分为A（白蛋白）、α1（球蛋白）、α2（球蛋白）、β（球蛋白）、γ（球蛋白）5条区带，根据尿蛋白电泳所出现的蛋白区带的位置，也可分别给定为以上5条区带，电泳薄膜上仅出现A、α1、β带称选择性蛋白尿，电泳薄膜上除有A、α1、β带外，还出现α2带者或A、α1、α2、β、γ等5条带均显示的为非选择性蛋白尿，尿蛋白定性根据形成的浑浊度以“＋”表示蛋白含量的多少。
结果：肾炎组以中量蛋白尿为主，呈选择性。
定性多为“+~++”.肾综组以大量蛋白尿为主，呈高选择性。
定性多为“＋＋~＋＋＋”肾衰组：初期以中~大量蛋白尿主国，呈非选择性。
终末期肾衰因肾小球大部分已毁坏，尿蛋白反而减少，甚至为阴性。
为选择性蛋白尿，定性为“－~＋”讨论：正常健康人，每24h尿中只有80－150mg蛋白排除体外，用磺基水杨酸尿蛋白定性检查法不可检出，尿蛋白电泳无区带显示，30例健康人尿蛋白定性均为阴性，尿蛋白电泳无区带显示，由结果出可以看出，随着肾小球基底膜损害不断加重，尿中排汇的蛋白量不断增加。
然而终末期肾衰患者肾小球绝大部分已毁坏，尿蛋白反而减少，说明尿蛋白含量的多少不一定能完全反映肾脏损害程度。
在这三组病例中显示尿蛋白电泳的选择性，肾综组高于肾炎组高于肾衰组，尿蛋白由选择性变为非选择性，终末期肾衰尿蛋白减少或无尿蛋白，当肾小球受到免疫反应损害后，肾小球基底膜滤孔变大，使肾小球对血浆蛋白的通透性增加，在疾病早期只有20万以下的小分子蛋白透过而排泄于尿中，这种蛋白尿称为“选择性蛋白尿”，病变进一步加重时，基底膜滤孔进一步增大，致使大、中分子的蛋白质也能滤出，即血浆中的所有蛋白质均无选择性的滤到尿中，称“非选择性蛋白尿”。
此尿蛋白的选择性变化可以反映病情的变化，我们认为利用尿蛋白电泳确定是否选择性蛋白尿有助于临床了解肾脏的损害程度，有助于对肾脏疾患的分类、治疗及判断预后。
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尿蛋白电泳操作规程
一．项目名称
尿蛋白电泳（HYDRAGEL PROTEINURIE）
二．检验方法名称
SDS－琼脂糖凝胶区带电泳
三．方法学原理
在含有多量的阴离子去垢剂十二烷基磺酸钠（SDS）液体中，蛋白质可与其连接，形成SDS —蛋白质复合物。
这种复合物蛋白本身的构造已经破坏，他们都表现出相同的构造和相同的负电荷。
当这种SDS—蛋白质复合物在具有适当筛选功能的介质中电泳时，如在含高浓度琼脂糖的HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上电泳时，蛋白质按它们的分子量大小进行分离。
在HYDRAGEL 5 PROTEINURIE凝胶上能清楚分离来源于肾小管（分子量＜65-70Kda)还是来源于肾小球（分子量＞65-70KDa）的蛋白质，因此尿蛋白不仅能被检测到，而且能对蛋白来源进行分类（肾小球，肾小管性和混合性）。
四．方法学溯源
自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
五．仪器
（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)
（二）分析和计算参数：
1．处理量：约14个样本/小时
2．所需样本量：5ul
3．检验时间：约50分钟
4．重复性：有良好的批内和批间重复性
5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）
电流0－500mA
功率0－100W
六．试剂及配套品
（一）试剂
1．HYDRAGEL 5 PROTEINURIE试剂盒
（1）商标：SEBIA
（2）包装规格：50测试
（3）货号：PN4115
2．脱色液
（1）商标：SEBIA
（2）包装规格：Pack for 10×100ml
（3）货号：PN4540
（4）成分：柠檬酸
3．洗涤液
（1）商标：SEBIA
（2）包装规格：Pack for 10×80ml
（3）货号：PN4541
（4）成分：叠氮钠
（二）配套品
尿蛋白质控
（1）商标：SEBIA
（2）包装规格：Pack for 5×1ml
（3）货号：PN4781
七．操作步骤
㈠开机，启动电泳仪。
㈡打开密闭的凝胶片盒，取出凝胶片并放在关闭的凝胶片盒上，用滤纸条轻柔、迅速地吸去凝胶片槽孔中的多余水分，在每一槽孔内加入5ul已处理的尿样本，注意不能有气泡，在每次加样前应擦拭移液器尖端，在整个加样过程千万不可触及槽孔的底部。
㈢选择« PROTEINURIA 1*5 »程序进行一个凝胶片的电泳，或者« PROTEINURIA 2*5 »程序进行两个凝胶片的电泳。
㈣取出缓冲条固定在电极架上，当放一个凝胶片时将120ul蒸馏水或去离子水加在电泳舱的温控板上偏下中间处，或者在放两个凝胶片时，在偏下的左半侧和右半侧各加100ul的蒸馏水或去离子水；将凝胶片底边紧靠框架底边，边缘对齐边线，略弯曲凝胶片慢慢放平，注意凝胶片下面勿出现气泡。
㈤自然放下支架，关上电泳舱盖，按下键盘左侧的绿色箭头“START”键，电泳开始，确保仪器右侧的空气通道不被堵塞。
㈥电泳仪自动发出蜂鸣声,提示电泳结束，打开电泳盖，将加样梳和缓冲条丢弃，取出已烘干的胶片，用湿纸巾擦拭电极和温控板，将胶片固定于凝胶支架上放入染色空间中，在检查染色液瓶内是否有300ml染色液，脱色液瓶内是否有1000ml脱色液，保存液容器内是否有300ml保存液以及是否排空了废液瓶后，选择«Proteinuria»染色程序并按“start”键开始染色。
㈦在染色、脱色以及干燥步骤完成后，电泳仪自动发出蜂鸣声，取出凝胶支架并取下已干燥的凝胶片，可用湿软的纸擦干凝胶片背面的塑料支持膜。
㈧关机。
八．参考范围
本试验是定性结果。
九．临床意义
㈠生理性蛋白尿：尿蛋白含量是很低的，通常低于120mg/24h，男女之间无明显差异。
主要是白蛋白，有时可有极微量的转铁蛋白或免疫球蛋白，当尿蛋白＞120mg/24h时，应考虑为病理性蛋白。
对阳性的尿蛋白（＞120mg/24h）应注意随访。
㈡肾小球型蛋白尿：尿蛋白其特征为：分子量＞65-70KDa（如白蛋白、转铁蛋白和IgG），电泳条带显示位置在样本加样点与白蛋白部分之间，白蛋白是其主要组分。
㈢肾小管型蛋白尿：其蛋白特征为：分子量＜65-70KDa，电泳条带位于白蛋白和凝胶片阳极端之间。
如α1－微球蛋白，游离轻链单体，β2－微球蛋白，视黄醇结合蛋白(RBP)，溶菌酶，单纯性肾小管型蛋白尿中白蛋白只占少部分。
㈣混合型蛋白尿：其蛋白特征为肾小管及肾小球的蛋白同时并存。
通过此方法我们可以很容易地对肾脏疾病作早期诊断/鉴别诊断及分型、治疗效果的观察、肾活检（属创伤性诊断）前的筛查、甚至代替肾活检。
十．标本要求
㈠取24小时的新鲜尿液，必要时样品在2℃～8℃可保存一周。
冷冻的样本可保存一个月。
冷冻样品中加入HEPES 0.1 M (pH 6.75)和叠氮钠0.02g/dl，则可提高保存的稳定性。
勿用硼酸做为防腐剂。
解冻后样本可产生蛋白变性导致的细小点样痕迹。
㈡取20ul稀释液（这种液体很粘稠，吸管取时要保持垂直，慢慢吸，保证无气泡），放入小试管底部，保证粘稠液体不粘在管壁上，加80ul纯尿液，旋涡混匀5秒钟。
如果尿蛋白＞0.2g/dl，则尿液先用盐水稀释至0.2g/dl左右，然后再按下列标准程序操作。
注意：混浊的尿样本（未稀释的或浓缩的）点样后很难渗透到点样器的末端，建议使用离心法（例如：3000转数/分，10分钟）或者过滤法（例如：0.45um孔径滤过器）来除去杂质微粒。
十一. 操作注意事项
㈠为达到最佳检测效果，同一试剂盒内的所有组分必须一并使用。
㈡用滤纸吸去凝胶表面多余液体时，接触时间不能太长，应快速移去，以免凝胶脱水。
㈢注意先挂缓冲条再放凝胶片，缓冲条取出时应均匀挤捏使缓冲液能分布均匀。