色谱填料的选择
分子排阻色谱 填料

分子排阻色谱(SEC)是一种常用的分离技术,用于根据分子大小对混合物进行分离。
在SEC中,填料是色谱柱的核心部分,其作用是决定色谱柱的分离性能。
SEC的填料种类繁多,主要包括以下几种:
1. 多孔硅胶:这是最常用的SEC填料之一,具有较高的分离效率。
多孔硅胶的孔径和粒径可以根据需要进行调整,以适应不同分子大小的分离需求。
2. 聚合物小球:聚合物小球是一种常用的SEC填料,具有较高的分离效率和稳定性。
聚合物小球的粒径和孔径可以根据需要进行调整,以适应不同分子大小的分离需求。
3. 高交联聚合物小球:高交联聚合物小球具有较高的稳定性和重现性,适用于对复杂样品的分析。
高交联聚合物小球的粒径和孔径可以根据需要进行调整,以适应不同分子大小的分离需求。
4. 凝胶过滤柱填料:凝胶过滤柱填料是一种具有高分辨率的SEC填料,适用于对低分子量化合物进行分离。
凝胶过滤柱填料的粒径和孔径可以根据需要进行调整,以适应不同分子大小的分离需求。
在选择SEC填料时,需要考虑样品的分子大小、性质和分
离需求等因素。
例如,对于较大分子量的样品,可以选择具有较大孔径和粒径的填料;对于较小分子量的样品,可以选择具有较小孔径和粒径的填料。
同时,还需要考虑填料的稳定性和重现性等因素。
USP关于色谱柱填料的规定
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USP关于色谱柱填料的规定我们在实验中常常用到USP作为检验依据,其中有一些关于色谱柱的要求现将其中个色谱柱要求罗列如有不恰当的请大家指正L1和L8是美国药典(USP)规定的色谱柱编号,其实就是C18柱和NH2柱。
下面是对应的色谱柱类型。
L1:十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相,简称C18或ODSL2:30~50um表面多孔薄壳型键合C18(ODS)固定相L3:多孔硅胶微粒即一般的硅胶柱L4:30~50um表面多孔薄壳型硅胶L5:30~50um表面多孔薄壳型氧化铝L6:30~50um实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物-强阳离子交换固定相L7:全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相简称C8柱L8:全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相简称NH2柱L9:强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相L10:多孔硅胶微球键合氰基固定相(CN)简称CN柱L11:键合苯基多孔硅胶微球固定相简称苯基柱L12:无孔微球键合季胺功能团的强阴离子填料L13:三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相(C1)简称C1柱L14:10um硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相简称SAX柱L15:已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相简称C6柱L16:二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相L17:氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换树脂L18: 3~10um全多孔硅胶化学键合胺基(NH2)和氰基(CN)L19:钙型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换树脂L20:二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相(Diol)简称二醇基柱L21:刚性苯乙烯-二乙烯基苯共聚物微球L22:带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换树脂L23:带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换树脂L24:表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶L25:聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚(表面含有残余羧基功能团)树脂。
能分离分子量100~5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物(用聚氧乙烯测定)的固定相L26:丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相L27:30~50um的全多孔硅胶微粒L28:多功能载体,100?的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29: 氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5um,孔径80?L30: 全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31: 季胺基改性孔径2000?的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33: 能够分离分子量4000~40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相,pH稳定性好L34:铅型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂,9um球形L35:锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相,孔径150?L36: 5um胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸-3,5二硝基苯甲酰L37:适合分离分子量2000~40,000Mw的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38:水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39:亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40:Tris 3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41:球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43: 硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44: 多功能固定相,60 ?高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46: 季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球液相色谱柱USP column PackingL1 —— Octadecyl silane chemically bonded to porous silica or ceramic micro-particles,3 to 10um in diameterL2 —— Octadecyl silane chemically bonded to silica gel of a controlled surface porosity that has been bonded to a solid spherical core, 30 to 50um in diameter.L3 —— Porous silica particles, 5 to 10um in diameter.L4 —— Silica gel of controlled surface porosity bonded to a solid spherical core, 30 to 50um in diameter.L5 —— Alumina of controlled surface porosity bonded to a solid spherical core , 30 to 50um in diameter.L6 ——Strong cation –exchange packing-sulfonated fluorocarbon polymer coated on a solid spherical, 30 to 50um in diameter.L7 —— Octylsilane chemically bonded to totally porous silica particles , 3 to 10um in diameter.L8 ——An essentially monomolecular layer of aminopropylsilane chemically bonded to totally porous silica gel support, 10um in diameter.L9 ——10um irregular or spherical layer of aminopropylsilane chemically bonded, strongly acidic cation-exchange coating.L10- Nitrile groups chemically bonded to porous silicaparticles, 3 to 10um in diameter.L11- Phenyl group chemically bonded to porous silica particles, 5 to 10um in diameter.L12- A strong anion-exchange packing made by chemically bonding a quaternary ammonium anion-exchange coating.L13- Trimethylsilane chemically bonded to porous silica particles, 3 to 10um in diameter.L14 –Silica gel 10um in diameter having a chemically bonding a quaternary ammonium anion-exchange coating.L15 – Hexylsilane chemically bonded to totally porous silica particles, 3 to 10um in diameter.L16 –Dimethylsilane chemically bonded to porous silica particles, 5 to 10um in diameter.L17_ Strong cation-exchange resin consisting of sulfonated cross-linked styrene-divinylbenzene copolymer in the hydrogen from, 7 to 11um in diameter.L18 – Amion and cyano groups chemically bonded to porous silica particles, 3 to 10um in diameter.L19 – Strong cation-exchange resin consisting of sulfonated cross-linked styrene-divilbenzene copolymer in the calcaium from, about 10um in diameter.L20- Dihydroxypropane groups chemically bonded porous silica particles , 5 to 10um in diameter.L21 – A rigid, spherical styrene-divinylbenxene copolymer, 5 to10um in diameter.L22 – A cation-exchange resin made of porous polystyrene gel with sulfonic acid group, about 10um in diameter.L23 –An cation-exchange resin made of porous polymethacrylate or polyacrylate gel with quaternary ammoniumgroups, about 10um in size.L24 — A semi-right hydrophilic gel consisting of vinyl polymers with numerous hydroxyl groups on the matrix surface , 32 to 63um in diameter.5L25 _Packing having the capacity to separate compounds with a molecular weight range from 100-5000 (as determined by polyethylene oxide), applied to neutral, and cationic water-soluble polymers. A polymethacrylate resin base, cross-linked withpoly-hydroxylated ether (surface contained some residual carboxylfunctional groups) was fund suitable.L26- Butyl silica chemically bonded to totally porous silica particles, 5 to 10um in diameter.L27 _ Porous silica particles, 30 to 5um in diameter.L28 –A multifunctional support, which consists of a high purity, 100 ?, spherical silica substrate that has been bonded with anionic exchange, amine functionality in addition to a conventional reversed phase C8 functionality.。
柱色谱实验报告
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柱色谱实验报告柱色谱实验报告引言:柱色谱(Column Chromatography)是一种广泛应用于化学、生物化学、药学等领域的分离技术。
本次实验旨在通过柱色谱技术对混合物进行分离和纯化,以了解其原理和应用。
实验材料与方法:1. 实验材料:柱色谱柱、样品混合物、溶剂、色谱柱填料等。
2. 实验方法:a. 准备柱色谱柱:将填料均匀填充至柱内,注意保持填料层的均匀性。
b. 样品预处理:将待分离的混合物溶解于合适的溶剂中,并进行必要的前处理,如过滤、浓缩等。
c. 样品加载:将预处理好的样品溶液缓慢地加入柱中,避免产生气泡。
d. 溶剂选择:根据样品的特性选择合适的溶剂体系,以实现样品分离。
e. 溶剂梯度洗脱:通过改变溶剂体系中溶剂的组成,控制样品在柱内的停留时间,实现样品分离。
f. 分离效果评价:通过观察柱床上的色带,并进行必要的检测手段,如紫外可见光谱、质谱等,评价分离效果。
实验结果与讨论:柱色谱实验的结果主要通过观察柱床上的色带来进行评价。
色带的宽度和形状可以反映样品的分离程度,色带越窄越尖锐,说明分离效果越好。
在实验过程中,我们可以根据需要收集不同色带的组分,进一步进行纯化和分析。
柱色谱实验的成功与否受到多个因素的影响,其中包括填料的选择、溶剂体系的优化、样品的预处理等。
填料的选择应根据样品的性质和分离要求来确定,不同填料具有不同的亲疏水性和分离能力。
溶剂体系的优化是柱色谱实验中关键的一步,通过调整溶剂的极性和流动速度,可以实现对样品的有效分离。
样品的预处理也是确保柱色谱实验成功的重要环节,如样品的过滤、浓缩等,可以避免填料堵塞和背景噪音的干扰。
柱色谱实验不仅可以用于分离和纯化混合物,还可以用于定性和定量分析。
在实验中,我们可以通过收集不同色带的组分,进行进一步的检测和分析。
例如,通过紫外可见光谱检测,可以确定某个组分的最大吸收波长,从而进行定性和定量分析。
此外,柱色谱实验还可以与其他分析方法相结合,如质谱联用、核磁共振等,进一步提高分析的准确性和灵敏度。
色谱柱制备纯化工艺
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色谱柱制备纯化工艺
1. 选择合适的填料,色谱柱的填料通常是硅胶、聚合物或者其
他介孔材料。
选择合适的填料对于分离和纯化目标化合物非常重要,需要考虑填料的孔径大小、表面活性和化学稳定性等因素。
2. 色谱柱的装填,在制备色谱柱时,需要将填料均匀地装填到
柱内,以确保色谱分离的效果。
通常会使用适当的溶剂和压缩装填
的方法来实现均匀的填充。
3. 优化流动相条件,流动相的选择和优化对于色谱分离的效果
至关重要。
需要考虑流动相的极性、溶解度和流速等因素,以获得
最佳的分离效果。
4. 样品预处理,在进行色谱柱制备纯化工艺前,通常需要对样
品进行预处理,包括溶解、过滤和浓缩等步骤,以确保样品的纯度
和稳定性。
5. 分离条件的优化,在进行色谱柱制备纯化工艺时,需要对分
离条件进行优化,包括色谱柱的温度、压力和流速等参数的调节,
以获得最佳的分离效果。
总的来说,色谱柱制备纯化工艺涉及多个方面的操作和优化,需要综合考虑填料选择、装填技术、流动相条件、样品预处理和分离条件的优化等因素,以确保获得高纯度的目标化合物。
这些步骤的合理操作和优化将对实验结果产生重要影响。
色谱柱填料如何选择
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色谱柱填料如何选择色谱柱是一种用于分离混合物中不同成分的设备,选择合适的色谱柱填料非常重要,因为它直接影响到色谱分离的效果。
下面将从样品性质、目标分离、柱填料种类以及柱填料特性四个方面介绍如何选择色谱柱填料。
首先,需要考虑样品的性质。
样品的性质对柱填料的选择起到决定性的作用。
例如,如果样品是极性物质,则可以选择极性填料,如硅胶和亲水性柱填料;如果样品是非极性物质,则可以选择非极性填料,如疏水性柱填料。
此外,还需考虑样品的溶解度、毒性等特性,以避免填料与样品发生不兼容的情况。
其次,要考虑目标分离。
目标分离意味着需要根据需要选择柱填料的分离性能。
分离性能包括选择分离度、副反应、分析速度等。
例如,如果需要高分离度,则可以选择具有较高耐用性和高分离度的填料;如果需要高选择性,则可以选择对目标分析物具有选择性保留的填料。
需要注意的是,柱填料的分离性能与填料特性和操作条件有关,因此需要综合考虑。
第三,需要考虑柱填料的种类。
根据柱填料的基本材料可以将其划分为无机填料、有机填料和生物填料等类型。
无机填料通常具有高机械稳定性、高温稳定性和酸碱稳定性,适用于较为苛刻的条件。
有机填料适用于对极性分析物有较高吸附选择性要求的情况。
生物填料则适用于生物大分子分析,如蛋白质或核酸。
最后,需要考虑柱填料的特性。
柱填料的特性包括填料颗粒大小、孔隙结构和载流速度等。
颗粒大小直接影响到柱填料的分离性能,通常情况下,较小的颗粒大小可以提供更高的分辨率。
孔隙结构决定了填料的表面积和孔径分布,对于较大的分析物,需要选择较大的孔径填料。
载流速度取决于填料粒径和柱直径等因素,较快的载流速度通常可以提供较短的分析时间。
综上所述,色谱柱填料的选择需要综合考虑样品性质、目标分离、柱填料种类和柱填料特性等因素。
合理的选择可以提高色谱分离的效果,提高分离的准确性和重复性。
在实际操作中,还需要结合实验室的条件和经验进行选择,逐步优化分析方法。
色谱柱常用填料
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保护柱填料一般与分析柱填料相同。
Hypersil 填料Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。
大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。
Hypersil BDS填料尽管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命且对于简单的两元流动相如甲醇/水当样品为酸性中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时样品峰型就极差拖尾严重并导致定量分析精度下降时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应即所谓的封尾以减小残余硅羟基的作用但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响Hypersil公司开发的将残余的硅羟基降至极限的Hypersil BDS (Base Deactived Silica碱钝化硅胶)系列产品并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。
Hypersil BDS 填料的特征*对碱性化合物有更好的峰型*更长的柱寿命*更好的稳定性*同碱性化合物一样酸性和中性化合物也有非常优异的峰型真正的通用柱填料。
尽管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。
且对于简单的两元流动相(如甲醇/水),当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。
但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时,样品峰型就极查,拖尾严重,并导致定量分析精度下降,时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中,造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基。
尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应,即所谓的“封尾”,以减小残余硅羟基的作用,但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。
c18柱色谱填料使用
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c18柱色谱填料使用
C18色谱柱是一种常用的色谱柱,其填料具有亲脂性,常用于反相色谱中。
以下是使用C18色谱柱的注意事项:
1. 流动相的选择:C18色谱柱通常使用正己烷和甲醇作为流动相。
正己烷可以增加分离物与固定相的相互作用力,甲醇则有助于溶解非极性溶剂。
根据分析需要,可以调整正己烷和甲醇的比例。
2. 预处理:在使用C18色谱柱之前,需要进行预处理以去除可能存在的杂质和保证柱子的稳定性。
常见的预处理方法包括使用高压液相系统进行洗脱、使用有机溶剂或酸碱溶液进行洗脱等。
应避免用过酸性或过碱性的洗脱剂,以免对C18柱填料造成损害。
3. 样品准备:样品的溶解度和纯度对分离效果有很大影响,因此在分析前需要充分溶解样品,并通过滤器除去杂质。
4. 色谱柱平衡:在使用C18色谱柱之前,需要将其平衡至最佳状态。
可以通过逐步增加流动相的流速并监测基线来找到最佳流速。
在达到最佳流速之前,应缓慢增加流速以避免对色谱柱造成过度压力。
5. 柱效测定:在使用C18色谱柱之前,需要测定其柱效。
可以通过使用标准品进行测定,并比较标准品和样品的保留时间和峰形来进行评估。
6. 清洗和维护:在使用C18色谱柱过程中,需要定期清洗和维护以保持其性能和寿命。
需要定期更换流动相、清洗柱子并检查其性能。
总之,使用C18色谱柱需要了解其特点和注意事项,并进行充分的预处理、样品准备、色谱柱平衡、柱效测定以及清洗和维护。
这些步骤对于获得准确、可靠的色谱结果非常重要。
多肽纯化反相色谱填料选择
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多肽纯化反相色谱填料选择
多肽纯化反相色谱填料的选择取决于多肽的性质和分离需求。
以下是一些常见的反相色谱填料类型和它们的特点:
C18反相硅胶:这是最常见的反相色谱填料类型,适用于大多数多肽的分离。
C18反相硅胶具有较好的疏水性和稳定性,能够有效地去除杂质和保留目标多肽。
C4反相硅胶:适用于分子量较大的多肽,其疏水性比C18略强,能够更好地保留目标多肽。
C8反相硅胶:介于C18和C4之间,其疏水性适中,适用于一些分子量适中的多肽。
在选择反相色谱填料时,需要考虑多肽的分子量、疏水性、电荷性质等因素。
对于分子量较小、亲水性较强的多肽,C18反相硅胶可能更适合;对于分子量较大、疏水性较强的多肽,可以选择C4或C8反相硅胶。
此外,还可以根据需要选择其他类型的填料,如苯基柱、聚合物柱等。
需要注意的是,不同的填料品牌和型号可能具有不同的性能和特点,因此在选择时需要仔细比较和评估。
同时,在纯化过程中还需要
注意流动相的选择、洗脱条件等参数的优化,以确保获得最佳的分离效果。
气相色谱柱填料与分类
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气相色谱柱填料与分类
气相色谱柱的填料可以根据其化学性质和结构特点进行分类。
常见的气相色谱柱填料包括以下几类:
1. 非极性填料:主要是疏水性的填料,如聚硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)、聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)等。
这类填料适用于分离非
极性或弱极性化合物。
2. 极性填料:主要是具有极性官能团的填料,如脂肪醇硅烷(polyethylene glycol,PEG)、化学键键合的固相微萃取填料等。
这类填料适用于分离极性或强极性的化合物。
3. 中极性填料:介于非极性和极性填料之间的一类填料,具有一定的极性。
常见的中极性填料有氨基化填料(如二氧化硅原位胺化填料,aminopropylsilane,APS),官能团化脂肪酸硅
烷(fatty acid silane)等。
4. 框架填料:这类填料由孔径规则、粒径均匀的硅胶、多孔硅胶或石墨化碳(graphitized carbon)等制成,可以提供更高的
分离效率和更好的形状选择性。
5. 手术填料:这类填料主要是手术水平或微粒形式的无孔填料,例如微球填料、膜填料等,具有快速传质和高效分离的特点。
综上所述,气相色谱柱填料的分类主要是根据其化学性质和结构特点来区分的,不同类型的填料适用于不同的分析需求。
色谱柱常用填料
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保护柱填料一般与分析柱填料相同。
Hypersil 填料Hypersil填料是基于粒度为3um、5um和10um,孔径为120A的硅胶为基质的HPLC 填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。
大量的试验测试已经证实Hypersil ODS2 填料是替代Waters Spherisorb ODS2的最佳填料无论是在酸性还是碱性样品的分析上选择性与峰型几乎与其保持一致。
|Hypersil BDS 填料尽管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命且对于简单的两元流动相如甲醇/水当样品为酸性中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时样品峰型就极差拖尾严重并导致定量分析精度下降时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应即所谓的封尾以减小残余硅羟基的作用但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响Hypersil公司开发的将残余的硅羟基降至极限的Hypersil BDS (Base Deactived Silica碱钝化硅胶)系列产品并用现代衍生反应技术生产出特别适用于碱性化合物的真正均一反相填料。
Hypersil BDS填料的特征*对碱性化合物有更好的峰型*更长的柱寿命*更好的稳定性*同碱性化合物一样酸性和中性化合物也有非常优异的峰型真正的通用柱填料。
尽管常规填料色谱柱具有优异的选择性和较长的色谱柱寿命。
且对于简单的两元流动相(如甲醇/水),当样品为酸性、中性和弱碱性化合物时均可获得较佳的峰不对称度。
但当分析药物等样品中的强极性含氮的化合物时,样品峰型就极查,拖尾严重,并导致定量分析精度下降,时常会出现一些小峰埋没于前一拖尾峰的尾巴中,造成该现象的原因是固定相上尚有残余的硅羟基。
尽管很多厂家对硅胶表面作了第二次反应,即所谓的“封尾”,以减小残余硅羟基的作用,但往往都不能完全消除残余的硅羟基的影响。
制备液相色谱的步骤你可知道?
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制备液相色谱的步骤你可知道?液相色谱(Liquid chromatography,LC)是一种常见的分析化学技术,广泛应用于化学、药物、环境和食品等领域。
液相色谱的原理是通过溶液或悬浮液在固定填料(固定相)上流动,样品中不同成分在填料上的相互作用力不同,从而分离出目标化合物。
制备液相色谱的步骤如下:1.选择填料:选择合适的填料对分离目标化合物至关重要。
填料可以是具有特定的化学性质和物理性质的固体材料,如硅胶、膜结构材料或涂膜材料。
2.准备流动相:流动相是指通过填料的溶液或悬浮液。
流动相的种类和组成根据目标化合物的性质和分离要求来确定。
常见的流动相包括水、有机溶剂和缓冲液等。
3.建立色谱条件:根据目标化合物的性质,确定色谱的参数,如流速、温度、pH值和检测波长等。
这些参数将直接影响到分离和检测的结果。
4.填充填料:将选定的填料装入色谱柱中。
填充填料时,需要保持填料的均匀和紧密,以确保样品能够均匀地通过填料。
5.样品处理:样品处理是为了使样品能够适应液相色谱分离的要求。
这可能包括样品溶解、稀释、过滤和预处理等步骤。
6.开始分离:将处理好的样品注入色谱柱中,并以设定的条件进行分离。
在分离过程中,样品中的不同成分将根据其与填料的相互作用力不同而被分离出来。
7.结果分析:通过检测器检测分离的样品成分,并将信号传输到数据处理系统进行数据分析和解释。
需要注意的是,制备液相色谱需要严格控制各个步骤的操作条件和实验参数。
同时,也需要根据实际实验室的设备和需求来选择合适的液相色谱系统和柱子。
总结起来,制备液相色谱的过程包括选择合适的填料、准备流动相、建立色谱条件、填充填料、样品处理、开始分离和结果分析等步骤。
这些步骤的合理操作能够确保准确而有效地分离和分析目标化合物。
气相色谱柱的填料极性及适用范围

气相色谱柱的填料极性及适用范围一、非极性1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷,商品名:AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1二、弱极性2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC5,SE-52,3、5%Phenyl1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基(94%)二甲基聚硅氧烷,商品名:OV-5,DB-5,SE-54,HP-5,RTX-5,BP-5注:2、3常无严格区分,通常混称。
三、中等极性4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane,50%二苯基(50%)二甲基聚硅氧烷,商品名:OV-17,HP-50,RTX-505、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane,14%氰丙基苯基(其中7%氰丙基7%苯基)(86%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC10,OV-1701,DB-1701,RTX-17016、50%Cyanopropyl phenyl polysiloxane,50%氰丙基苯基(其中25%氰丙基25%苯基)(50%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC225,OV-225,BP-225,DB-225,HP-225,RTX-225四、强极性7、polyethylene glycol,聚乙二醇,商品名:AC20,PEG20M,HP-INNOWAX(FFAP是其与2-硝基对苯二甲酸的反应产物)常用毛细管色谱柱对应表SE-30、OV-1,化学组成:100%甲基聚硅氧烷(胶体),所属极性:非极性,适用范围:碳氢化合物、农药、酚、胺,对照牌号:DB-1、BP-1、007-1、SPB-1、RSL-150、CPSRL-5、HP-1.OV-101,化学组成:100%甲基聚硅氧烷(流体),所属极性:非极性,适用范围:氨基酸、碳氢化合物、药物胺,对照牌号:HP-100、SP-2100SE-52、SE-54,化学组成:5%苯基聚硅氧烷、1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷,所属极性:弱极性,适用范围:多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物胺,对照牌号:DB-5、BP-5、SPB-5、007-2、OV-73、CPSIL-8、RSL-120、HP-5.OV-1701,化学组成:7%氰丙基、7%苯基甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:药物、醇、酯、硝基苯类、除莠剂,对照牌号:BP-10、RSL-1701、DB-1701、HP-1701、CPISL-19.OV-17,化学组成:50%苯基50%甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:药物、农药,对照牌号:DB-17、HP-17、007-17、SP-2250、RSL-300.OV35,化学组成:35%苯基65%二甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性.OV-225,化学组成:25%氰丙基、25%苯基、甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:脂肪酸甲脂、碳水化合物、中行固醇,对照牌号:DB-225、HP-225、BP-225、CPSIL-43、RSL-500.OV-275,化学组成:100%氰丙基聚硅氧烷,所属极性:强极性.XE-60,化学组成:25%氰乙基、75%二甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:酯、硝基化合物,对照牌号:DB-225、HP-225、CPSIL-43、RSL-500.FFAP,化学组成:聚乙二醇硝基苯改性,所属极性:极性,适用范围:酸、醇、醛、酯、酮、腈,对照牌号:SP-1000、OV-351、BP-21、HP-FFAP.PEG-20M,化学组成:聚乙二醇-20M,所属极性:极性,适用范围:酸、醇、醛、酯、甘醇,对照牌号:HP-20M、DB-WAX、007-20M、BP-20.LZP-930,化学组成:LZP,所属极性:极性,适用范围:白酒.AL2O3,化学组成:r-AL2O3,所属极性:极性,适用范围:C1-C6低适用范围:碳烃,对照牌号:Alumina5A,化学组成:5A分子筛,所属极性:极性,适用范围:惰性气体及同位素.C-2000,化学组成:碳分子筛,所属极性:极性,适用范围:He,H2,O2,CO,CO2,C1-C2,对照牌号:CarbPLOT P7.13X,化学组成:13X分子筛,所属极性:极性,适用范围:石脑油C3-C12环烷烃、链烷烃.。
液相色谱的常见类型及其常用填料的特点与用途
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液相色谱的常见类型及其常用填料的特点与用途
液相色谱(Liquid Chromatography)的常见类型包括:
1. 通用液相色谱(Normal Phase Liquid Chromatography,NPLC):使用极性填料,非极性流动相,适用于分离极性化
合物。
2. 反相液相色谱(Reversed Phase Liquid Chromatography,RPLC):使用非极性填料,极性流动相,适用于分离非极性
或弱极性化合物。
3. 离子交换色谱(Ion Exchange Chromatography,IEC):使
用带有离子交换官能团的填料,适用于分离带电离子或分离具有不同离子状态的化合物。
4. 碳氢化合物色谱(Hydrocarbon Chromatography):使用低
极性填料,适用于分离石油产品、燃料、有机溶剂等样品中的碳氢化合物。
在液相色谱中,常用的填料包括以下几种:
1. 硅胶填料(Silica Gel):具有良好的化学稳定性和热稳定性,适用于大多数样品的分离。
2. C18填料:具有疏水性,适用于分离非极性化合物。
3. C8填料:相对于C18填料来说,更疏水,适用于分离更疏
水的化合物。
4. CN填料:具有较强的极性,适用于分离极性化合物。
5. NH2填料:具有亲水性,适用于分离极性化合物。
6. 离子交换填料:根据需要可以选择阴离子交换填料或阳离子交换填料,适用于分离带电化合物。
不同类型的填料具有不同的特点和用途。
根据需要选择合适的填料可以实现对不同类型化合物的有效分离和检测。
液相氨基柱填料-概述说明以及解释

液相氨基柱填料-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述:液相氨基柱填料是一种常用的色谱填料,广泛应用于分离和纯化化合物的过程中。
液相色谱技术是一种重要的分析方法,广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
填料作为液相色谱的核心部分,对分离效果和分析速度有着至关重要的影响。
本文将从理论基础、填料的物理性质、填料的制备方法以及填料的应用领域等方面,对液相氨基柱填料进行探讨与分析。
通过对液相氨基柱填料的研究,我们可以更好地理解填料的性质和特点,进一步优化液相色谱的分离条件,提高分离效果和分析速度。
在理论基础方面,我们将介绍液相色谱的原理和分离机制,深入了解液相色谱分析中填料的作用和重要性。
在填料的物理性质方面,我们将重点讨论液相氨基柱填料的化学组成、表面特性以及吸附和分离机理等方面的内容。
此外,文章还将详细介绍液相氨基柱填料的制备方法、性能测试以及性能优化的技术。
液相氨基柱填料在不同领域有着广泛的应用。
我们将重点介绍其在生物医药、环境监测和食品安全等领域的应用案例。
通过这些实际应用案例,我们可以了解到液相氨基柱填料在解决实际问题中的价值和作用,以及其在不同领域中的应用前景。
通过本文的研究,我们对液相氨基柱填料有了更深入的了解,对填料的制备方法和应用领域也有了更全面的认识。
希望本文能够为液相色谱研究提供一定的参考和指导,进一步推动和促进该领域的发展。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将围绕液相氨基柱填料展开深入的研究和探讨。
下面将对文章的各个部分进行简要介绍:引言部分将首先对液相氨基柱填料的概念和背景进行概述,引出液相氨基柱填料的重要性和应用前景。
正文部分将详细介绍液相氨基柱填料相关的理论基础,包括填料的结构、化学性质以及其在液相色谱等领域中的应用原理。
同时,将探讨液相氨基柱填料的物理性质,如比表面积、孔隙度等指标的测定方法和对填料性能的影响。
此外,还将介绍液相氨基柱填料的制备方法,包括传统的合成方法和新兴的改性方法。
层析填料的选择及其装柱技术介绍幻灯片
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理想的基质应符合下面的要求: 1.极低的非特异性吸附。 2.高度的亲水性。 3.较好的理化稳定性。 4.大量的化学基团能被有效地活化,而且容易和配体结合。 5.适当的多孔性。
一般亲和吸附剂采用的基质有纤维素、聚丙烯酰胺凝胶、交联 葡聚糖、琼脂糖、交联琼脂糖、多孔玻璃珠等。
常用亲和吸附剂采用的基质
反相层析填料的选择原则
考虑样品组分的种类和性质、分离的规模及对分辨率 的要求、流动相条件:
待分离物分子量,对介质孔径的选择提供指导; 样品组分的疏水性质决定采用何种配基; 分离的规模及对分辨率的要求也是须考虑的因素,通
常分离规模和分辨率的关系是负相关的 ; 反相层析时的流动相条件很大程度上影响反相介质基
层析填料的选择 及装柱技术介绍
佳辰公司生物中心 陈阶
2012-04-18
如何选择填料?
一、依据所纯化的对象的各物理和化学特性。
(一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、 核酸等)
二、纯化所要达到的目的(粗提?中度纯化? 精细纯化?)。
三、所要选择的层析方法
1. 凝胶过滤 ( Gf)
易脱落。 4) 配体自身应具有较好的稳定性。
根据配体对待分离物质的亲和性的不同,可以将其分为 两类:特异性配体(specific ligand)和通用性配体 (general ligand)
亲和吸附介质的配基
(1)酶的抑制剂 (2)抗体 (3)A蛋白 A蛋白(protein A)为分子量约42KD的蛋白质,
Sephadex LH-20 同时具备亲水和亲脂双重性质, 且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作 用。
Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非常相似 的物质的分离和工业规模的制备,既可用于初 步纯化步骤,也可用于最终精制步骤,如非对 映同分异构体的分离。
气相色谱柱的填料极性及适用范围
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气相色谱柱的填料极性及适用范围一、非极性1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷,商品名:AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1二、弱极性2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC5,SE-52,3、5%Phenyl1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基(94%)二甲基聚硅氧烷,商品名:OV-5,DB-5,SE-54,HP-5,RTX-5,BP-5注:2、3常无严格区分,通常混称。
三、中等极性4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane,50%二苯基(50%)二甲基聚硅氧烷,商品名:OV-17,HP-50,RTX-505、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane,14%氰丙基苯基(其中7%氰丙基7%苯基)(86%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC10,OV-1701,DB-1701,RTX-17016、50%Cyanopropyl phenyl polysiloxane,50%氰丙基苯基(其中25%氰丙基25%苯基)(50%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC225,OV-225,BP-225,DB-225,HP-225,RTX-225四、强极性7、polyethylene glycol,聚乙二醇,商品名:AC20,PEG20M,HP-INNOWAX(FFAP是其与2-硝基对苯二甲酸的反应产物)常用毛细管色谱柱对应表SE-30、OV-1,化学组成:100%甲基聚硅氧烷(胶体),所属极性:非极性,适用范围:碳氢化合物、农药、酚、胺,对照牌号:DB-1、BP-1、007-1、SPB-1、RSL-150、CPSRL-5、HP-1.OV-101,化学组成:100%甲基聚硅氧烷(流体),所属极性:非极性,适用范围:氨基酸、碳氢化合物、药物胺,对照牌号:HP-100、SP-2100SE-52、SE-54,化学组成:5%苯基聚硅氧烷、1%乙烯基5%苯基甲基聚硅氧烷,所属极性:弱极性,适用范围:多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物胺,对照牌号:DB-5、BP-5、SPB-5、007-2、OV-73、CPSIL-8、RSL-120、HP-5.OV-1701,化学组成:7%氰丙基、7%苯基甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:药物、醇、酯、硝基苯类、除莠剂,对照牌号:BP-10、RSL-1701、DB-1701、HP-1701、CPISL-19.OV-17,化学组成:50%苯基50%甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:药物、农药,对照牌号:DB-17、HP-17、007-17、SP-2250、RSL-300.OV35,化学组成:35%苯基65%二甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性.OV-225,化学组成:25%氰丙基、25%苯基、甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:脂肪酸甲脂、碳水化合物、中行固醇,对照牌号:DB-225、HP-225、BP-225、CPSIL-43、RSL-500.OV-275,化学组成:100%氰丙基聚硅氧烷,所属极性:强极性.XE-60,化学组成:25%氰乙基、75%二甲基聚硅氧烷,所属极性:中极性,适用范围:酯、硝基化合物,对照牌号:DB-225、HP-225、CPSIL-43、RSL-500.FFAP,化学组成:聚乙二醇硝基苯改性,所属极性:极性,适用范围:酸、醇、醛、酯、酮、腈,对照牌号:SP-1000、OV-351、BP-21、HP-FFAP.PEG-20M,化学组成:聚乙二醇-20M,所属极性:极性,适用范围:酸、醇、醛、酯、甘醇,对照牌号:HP-20M、DB-WAX、007-20M、BP-20.LZP-930,化学组成:LZP,所属极性:极性,适用范围:白酒.AL2O3,化学组成:r-AL2O3,所属极性:极性,适用范围:C1-C6低适用范围:碳烃,对照牌号:Alumina5A,化学组成:5A分子筛,所属极性:极性,适用范围:惰性气体及同位素.C-2000,化学组成:碳分子筛,所属极性:极性,适用范围:He,H2,O2,CO,CO2,C1-C2,对照牌号:CarbPLOT P7.13X,化学组成:13X分子筛,所属极性:极性,适用范围:石脑油C3-C12环烷烃、链烷烃.。
液相色谱色谱填料选择性的研究方法
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Z h a o B o , We i Xi a o - d o n g , Na K e , Z h a o We n - j i e a n d Z h u B a o — q u a n
( S t a t e Ke y L a b . o f Ne w D r u g a n d P h a r ma c e u t i c a l P r o c e s s , S h a n g h a i I n s t i t u t e o f P h a r ma c e u t i c a l I n d u s t r y ,
属 的活 性 、键合 相 的表面 活性 、硅醇基 失活 过程等 因 素 ,都 可 以影 响分析 物 的保 留选 择性和 峰形 。所有 这 些变 量将 导致在 一个 给定 的填料 中 ,随批R PL C; C1 8 c o l u n ; m Hy p e r c r o s s l i n k e d p o l y s yr t e n e ; S e l e c t i v i t y
反相 液 相色 谱( R P L C ) 是药 物 分 析 和分 离 纯 化 过 程 检 测 的首 选 方 法 , 该 方法 适 用 性 广 ,各 国药 典 也 将 其 作 为 常 规 的 方 法 检测 药物 原 料 及 其 制 剂 的 含 量 和 杂 质 。反 相 高 效 液 相 色 谱 分析 必须 使 用 能 得 到 对
色谱柱填料如何选择?
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色谱柱填料如何选择?色谱柱的关键内容是制备出高效的填料,这些填料制成的色谱柱既要有好的选择性,又要有高的柱效,要提高柱效是现代高效液相色谱的又一关键问题,所以填料和装柱技术是关键问题。
高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法,其分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。
但是色谱填料的选择范围很宽,分别为聚合物填料、硅胶基质填料和其它无机填料。
要选择合适的色谱填料,必须对此有一定的认识和了解。
一、硅胶基质填料硅胶是HPLC填料最普遍的基质。
除了具有无机物基质共有的高强度,还提供了一个表面,可以通过成熟的硅烷化技术键合范围很广的配基,制成反相、离子交换、疏水作用、亲水作用或分子排阻色谱。
硅胶基质填料适用广泛的溶剂,从极性到非极性。
其缺点是在水溶性碱性流动相中不稳定。
通常,硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2~8。
(一)正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其它具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其它极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组份的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正己烷(Hexane)、氯仿(Chloroform)、二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
(二)反相色谱反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被冲洗出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料聚合物填料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等,其优点是在PH 值为1~14均可使用。
相对于硅胶基质的C18填料,这类填料具有较强的疏水性,而且大孔的聚合物对蛋白质等样品的分离非常有效。
填料名词解释

填料名词解释
填料是用于填充物质之间的空隙,以增加分离效率或反应速率的材料。
在化学工业中,填料通常用于分离某些物质,例如在蒸馏、萃取和气相色谱中使用。
填料的选择取决于应用的具体要求,例如需要高分离效率、高化学稳定性或高机械强度等。
常用的填料包括球形填料、环形填料和网状填料等。
球形填料是最常见的填料形式之一,具有优良的物理性能和化学稳定性,广泛应用于各种工业领域。
环形填料通常用于气相色谱中,具有高分离效率和灵敏度。
网状填料是较新的填料形式,具有高表面积和优良的传质性能,适用于一些高效反应过程。
除了以上形式的填料外,还有许多其他类型的填料,例如泡沫填料、膨胀填料和多孔陶瓷填料等。
随着科技的不断进步,填料的种类和性能也在不断更新和改进,为各个领域的应用提供更加优质的解决方案。
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HPLC填料的选择
HPLC填料的选择
基质
HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。
陶瓷性质的无机物基质主要是硅胶和氧化铝。
陶瓷性质的无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。
HPLC级的有机聚合物是基于交联的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯。
有机聚合物基质刚性小,更易压缩。
溶剂或溶质容易渗入有机质基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少传质,最终是的柱效低。
硅胶
硅胶是HPLC填料最普遍的基质。
除了具有无机物基质共有的高强度,还提供了一个表面,可以通过成熟的硅烷化技术键合范围很广的配基,制成反相、离子交换、疏水作用、亲水作用或分子排阻色谱。
硅胶基质填料适用广泛的溶剂,从极性到非极性。
它的弱点是在水溶性碱性流动相中不稳定。
通常,硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2-8。
聚合物填料
高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯基质的填料是用于普通压力下的HPLC。
当然,它们的压力限度比大
多数的无机填料的压力限度低。
苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性强。
使用任何流动相,在整个pH范围内稳定。
因为能承受强酸强碱性的洗脱液,所以可以用NaOH或强碱来清洗色谱柱。
甲基丙烯酸酯基质本质上比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强,但它可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。
这种基质不如苯乙烯-二乙烯苯那样耐酸碱,但也可以承受在pH13下反复冲洗。
所有的聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。
用于HPLC的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有限制。
因为溶剂或小分子渗入聚合物基质中,小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。
对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,聚合物基质的效能比得上陶瓷性质的基质。
因此,聚合物基质广泛用于分离自然的或合成的高聚物。
氧化铝
氧化铝由于硅胶相同的良好物理性质,而且也能耐较大的pH范围。
它也是刚性的,不会在溶剂中收缩或膨胀。
但与硅胶不同的是,氧化铝的键合相在水相的流动相中不稳定。
不过,已经出现了在水相中稳定的氧化铝键合相,并显示出优秀的pH稳定性。
选择正确的基质
硅胶氧化铝苯乙烯-二乙烯苯甲基丙烯酸酯
有机溶剂 +++ +++ ++ ++
pH范围 + ++ +++ ++
膨胀/收缩 +++ +++ + +
耐压 +++ +++ ++ +
表面化学性质 +++ + ++ +++
效能 +++ ++ + +
+++好 ++一般 +差
硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物质,主要用来制成分子排阻和离子交换柱。