离子交换柱使用说明

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离子交换色谱柱的选择与使用方法

离子交换色谱柱的选择与使用方法

离子交换色谱柱的选择与使用方法离子交换色谱是一种常用的分析技术,广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。

离子交换色谱柱的选择与使用方法对于分析结果的准确性和分离效果的好坏起着至关重要的作用。

下面将从色谱柱的选择、样品前处理和操作注意事项三个方面来论述离子交换色谱柱的选择与使用方法。

一、色谱柱的选择在选择离子交换色谱柱时,需要考虑以下几个因素:柱子的固定相、尺寸和柱容。

固定相是影响色谱分离效果的重要因素之一。

常见的固定相有强阳离子交换剂和强阴离子交换剂。

对于需要分离阳离子的样品,适合选择具有强阴离子交换剂的柱子,反之亦然。

另外,还要考虑离子交换剂的亲和性和选择性,以确保对目标物的分离和检测具有高效性和准确性。

柱子的尺寸和柱容是根据待分离样品的数量和目标物的分离程度来确定的。

对于大样品量或需要高分辨率的分离情况,选择直径较大、长度较长的柱子可以提高分离效果。

而对于样品量较小、目标物之间的分离程度要求不高的情况,可以选择直径较小、长度较短的柱子来节省时间和费用。

二、样品前处理离子交换色谱分析前,样品的前处理非常重要。

一般采用样品的萃取、浓缩和调整pH值等方法来改善分析结果。

对于液态样品,可以采用萃取柱或固相萃取的方法来富集目标物。

常见的富集方法有离子交换富集、聚焦富集和反相富集等。

根据样品的性质和分析要求选择合适的富集方法,能够提高检测灵敏度和减少干扰物的影响。

对于固体样品,需要进行样品的前处理,如颗粒的研磨、样品的溶解和过滤等。

特别是对具有高离子强度的样品,还需要进行离子基质的去除,以提高分析结果的准确性。

此外,样品的pH值也需要进行调节,以使目标物适应离子交换柱的工作条件。

三、操作注意事项在使用离子交换色谱柱时,还需要注意以下几点,以保证分析结果准确可靠。

首先,要注意保持色谱柱的清洁和充分的平衡。

清洗色谱柱的方法有水洗、有机溶剂洗和碱洗等,应根据实际分析需要来选择适当的清洗方法。

平衡色谱柱的目的是为了使色谱柱内的离子交换剂和溶剂达到平衡状态,从而提高柱子的使用寿命和分离效果。

Thermo离子交换色谱柱使用和维护说明-ThermoFisherScientific

Thermo离子交换色谱柱使用和维护说明-ThermoFisherScientific

Thermo 离子交换色谱柱使用和维护说明首先,感谢您选择性能优越的Thermo色谱柱产品。

为了使您的色谱柱能发挥最大的性能,敬请先阅读以下说明:1、适用类型Thermo离子交换色谱柱包括:BioBasic AX,SCX,Hypersil SAX,Hypersil Gold AX,SAX等。

2、柱体积色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算:V=0.68 πr2LV为色谱柱柱体积(mL),r为色谱柱内径(cm),L为色谱柱长度(cm)。

3、色谱柱柱效测试与保存离子交换色谱柱出厂时都经过柱效测试,请参考柱效报告。

在条件允许情况下,请对新色谱柱进行柱效测试。

离子交换色谱柱出厂时均保存在乙醇溶液中(如有不同,以柱效报告为准)。

4、温度所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于60℃。

5、样品最好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。

如果使用梯度洗脱,则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。

样品溶液不应含有任何颗粒物,最好使用0.5μm或更小粒径的滤膜过滤。

同时建议在色谱系统中使用在线过滤器。

6、流动相所用溶剂通常为水、乙腈、甲醇等,Thermo的离子交换色谱柱可以100%水为流动相,进行盐的梯度洗脱。

流动相中含有机相时,请注意降低盐的浓度,以防止溶剂混合后盐从流动相中析出。

更换流动相时也要注意这一问题,可先用含较高纯水的流动相除盐过渡。

请将流动相的pH值控制在2-8。

缓冲盐浓度在500 mM以下。

所有流动相,最好当日实验当日配制,并使用2μm滤膜过滤。

7、色谱柱安装请小心操作色谱柱。

不要摔、碰色谱柱,这样会损坏色谱柱床,使色谱柱性能下降。

使用合适的连接管路和接头,确保色谱柱连接处死体积降到最低(使用不锈钢接头时需要尤其注意)。

我们建议使用SLIPFREE 接头,此接头与Thermo色谱柱以及其他品牌色谱柱均完美匹配。

8、色谱柱平衡新柱在使用前,请预先用20倍柱体积甲醇/或乙腈冲洗色谱柱,然后以初始流动相(不含盐)冲洗10倍柱体积。

阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程

阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程

阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程阴离子交换色谱柱(Anion Exchange Chromatography Column)是一种常用的色谱分离技术。

在实验中,操作人员需要密切关注柱子的使用情况,以确保实验结果的准确性和人身安全。

本文将介绍阴离子交换色谱柱的基本操作规程和保养维护方法。

一、操作规程1. 准备工作•在进行操作之前,需要将色谱柱和固定装置进行清洁消毒。

•提前准备好所需的阴离子交换色谱树脂并按照要求进行催化活化。

•校准pH和Elution Buffer的浓度。

2. 样品预处理•根据实验要求对样品进行预处理,以提高阴离子交换色谱柱分离效果。

•样品必须保持干燥和无菌状态,以防止杂质和细菌的干扰。

•样品pH值和盐浓度的调整应根据实验要求进行。

3. 样品注入•注入样品之前,必须先将磷酸缓冲液从柱子上进行洗脱。

•样品注入时,流量应控制在柱子最大负荷的1/3以内。

•样品的浓度应根据实验要求进行,一般情况下,其浓度控制在0.2-1.0mg/mL。

4. 洗脱和洗涤•洗脱液的浓度要根据实验需要进一步调节。

一般而言,扰动强度和洗脱浓度成正比。

•在洗涤前,应该先用纯水或缓冲液将杂质洗出。

•洗脱和洗涤过程中,需要测定各阶段的洗脱液pH值,以确定实验关键点。

5. 清洗和储存•在操作结束后,需要对柱子进行清洗,以保证下次使用时能正常使用。

•阴离子交换色谱柱的储存条件需要根据实验方法进行。

一般来说,常温下可储存6-12个月。

二、柱子保养1. 储存和清洗•在使用之后,需要对柱子进行彻底的清洗,并将其储存在干燥通风的环境中。

•没有独立的储存条件时,柱子应储存在关闭的塑料袋内,以保证干燥和无菌状态。

•使用前应先对柱子进行检查,确定是否有磨损或裂纹等损坏状况。

2. 身体安全•在插入阴离子交换色谱柱或更换样品时,要避免接触柱子的端口或开启柱子,以免溶液或样品误飞溅。

•在使用过程中,要避免柱子突然断裂,防止溶液渗漏造成身体伤害。

阴离子交换柱使用手册

阴离子交换柱使用手册

阴离子交换柱使用手册阴离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher A Columns注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。

向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。

在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。

1.简介Chrompack IonoSpher A柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料,含有季胺功能团。

特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。

2.色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。

一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。

要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。

再用你选用的洗脱液进行平衡。

在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。

因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。

3.洗脱'推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导,或者UV吸收的缓冲液,例如磷酸缓冲液,pH范围从2・5到6・5。

绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。

另外,硝酸鞍(lmM)可以改善峰型,而且不会明显影响保留时间,检测或定量结果。

洗脱液在使用以前要脱气,并用0. 45微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。

一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。

4.流量和压力注意:最高压力:不锈钢柱:4500psi;玻璃柱:3000psi增加流速或者降低流速要釆取小的间隔变化以 防止填充床的扰动。

如果你想更换柱子”要降低流量至0,等待洗 拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。

高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的 结果。

使用保护柱(见第6节)会防止污染物沉积在分 析柱上。

5. 样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处 理。

你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很 大的化合物泵入色谱柱,不管是来自流动相还 是样品。

阳离子交换柱

阳离子交换柱

阳离子交换柱什么是阳离子交换柱阳离子交换柱是一种常见的离子交换柱子,它能够去除水中阳离子,使水质变得更加纯净。

在水处理、化学分析、实验室和生产流程中都得到了广泛的应用。

阳离子交换柱由极性阴离子交换基团和非极性多孔基质构成。

在水中,阳离子交换柱会吸附阳离子,与其阳离子交换基团上的阴离子发生离子交换。

通常,碱性和中性化合物会更容易被吸附。

阳离子交换柱在实验室中非常常见,因为它们可以帮助去除水中的离子,使化学试剂更加純淨。

而在工业上,他们可以被用于水处理过程,例如去除硬度物质(例如钙和镁)和为生产肥料和化學制品过程中净化液体。

怎样选择阳离子交换柱阳离子交换柱的选择取决于所需应用的目的。

通常,选择合适的阳离子交换柱是基于需要去除的特定阳离子以及样品中的其他化合物。

选择适当的交换柱将确保最大程度地去除目标阳离子,并保持溶液的化学性。

在选择阳离子交换柱时,需考虑以下因素:•样品的pH:样品的pH可能影响某些硬度物质的离子交换和柱的稳定性。

如果样品很酸或很碱,那么可能需要考虑选择不同的交换柱。

•阳离子浓度:低浓度的阳离子可能需要更特定的柱子进行去除。

高浓度则需选择更大的柱子或使其经历更长时间的运行。

•样品组分:某些物质需要更长的时间或更高的柱子容量去除。

如何使用阳离子交换柱使用阳离子交换柱可分为以下步骤:1.确定样品pH值:使用pH计或试纸是确定样品pH的常见方式。

2.选择合适的柱子:依据所需去除的阳离子,选择合适的柱子。

小体积的样品可使用小柱子,而处理大体积的液体则需使用大体积的柱子。

3.准备柱子:添加适量的离子交换树脂到阳离子交换柱中。

4.将样品通过交换柱:将样品在柱子中通过。

根据样品的化学性质、柱子尺寸和流量的速度选择复流。

5.洗涤交换树脂:通过挤压或在柱中洗涤具有中性溶液的样品,并将离子和杂质从交换柱上清除。

6.获取结果:收集通过柱子后的样品,在搅拌或振摇之后可以测定。

阳离子交换柱的优点阳离子交换柱比其他水处理方法具有以下优点:1.不受温度和压力影响:阳离子交换柱不受制于温度或压力,因此在很多不同的环境条件下都可以使用。

阴离子交换柱使用手册

阴离子交换柱使用手册

阴离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher A Columns注意Chrompack IonoSpher A色谱柱填充的是改性硅胶材料。

向柱内导入碱性溶剂(pH>6.5)或酸性溶剂(pH<2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。

在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。

1.简介Chrompack IonoSpher A 柱填充硅胶基质的强阴离子交换材料,含有季胺功能团。

特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阴离子。

2.色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。

一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。

要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。

再用你选用的洗脱液进行平衡。

在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。

因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。

3.洗脱液推荐在这类柱上使用的洗脱液要求低电导,或者UV吸收的缓冲液,例如磷酸缓冲液,pH范围从2.5到6.5。

绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。

另外,硝酸铵(1mM)可以改善峰型,而且不会明显影响保留时间,检测或定量结果。

洗脱液在使用以前要脱气,并用0.45微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。

一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。

4.流量和压力注意:最高压力:不锈钢柱:4500psi;玻璃柱:3000psi增加流速或者降低流速要采取小的间隔变化以防止填充床的扰动。

如果你想更换柱子,,要降低流量至0,等待洗脱液完全流出柱子为止(2分钟)。

拆除柱子而没有等待压力的降低会损坏柱子。

高柱压的产生一般是由于不正确地使用柱子的结果。

使用保护柱(见第6节)会防止污染物沉积在分析柱上。

5.样品准备保持柱子长寿的关键是进样前适当的的样品处理。

你必须防止将疏水性/与流动相极性差别很大的化合物泵入色谱柱,不管是来自流动相还是样品。

【精选】实验八 离子交换柱层析

【精选】实验八 离子交换柱层析
2. 装柱:——注意柱中不能有气泡
层析柱中先倒入2cm左右的缓冲液——将 洗至中性的树脂用缓冲液冲洗一遍——然后 将树脂倒入到层析柱中——装到离柱口2cm 处——然后剪一小圆形滤纸,垫在树脂上(注 意树脂不要跑到滤纸上面去)
3. 氨基酸的洗脱:
准备64支刻度试管——编号——用移液管取1ml 混合氨基酸——加入柱中——然后马上开始用刻度 试管接洗脱液——每支试管接1ml(注意控制层析 柱的速度,慢一点较好)——同时注意层析柱中缓 冲液的液面不要低于滤纸,注意及时补充缓冲液, 保持液面不变
组数 第一组 第二组 第三组 第四组 第五组 第六组 第七组 第八组
用量 0 ml 8ml 16ml 24ml 32ml 40ml 48ml 56ml 筒接
试管 1~8 9~16 17~24 25~32 33~40 41~48 49~56 57~64 号
如表所示: 用量筒接取本组相应数值的洗脱液后,再用试管接
实验八 离子交换柱 层析分离氨基酸
一 实验原理
各种氨基酸分子的结构不同, 在同一pH时与离子交换树脂的亲 和力有差异,因此可依亲和力从小 到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达 到分离的效果。
二 实验步骤
1. 树脂的准备:
将干的树脂用水浸泡一天——然后用 2mol/L的HCl浸泡1h——然后再用2mol/L的 NaOH浸泡1h——然后用水洗至中性(已做好)
4. 测OD值:
收集ห้องสมุดไป่ตู้0支试管后——每支试管中加入1 ml显色 剂——然后在沸水浴中加热15min——冷却——每 支试管加1.5ml 50%乙醇——搅拌均匀——静置 10min——测OD570nm,以第二管为参比管
5. 以洗脱体积为横坐标,以OD值为纵坐标作图。

离子交换柱操作规程

离子交换柱操作规程

离子交换柱操作规程离子交换柱是一种常用于离子交换色谱和固相提取等实验的分析仪器。

为了确保操作的准确性和安全性,以下是离子交换柱的操作规程。

1. 准备工作:- 检查离子交换柱是否完好无损,确保没有破损或泄漏。

- 根据实验需要,选择合适的离子交换柱,注意柱子的尺寸和容量。

- 检查离子交换柱的连接件,确保连接紧密,无松动或漏气现象。

- 检查进样装置的连接件,确保连接正确,避免样品泄漏或进样不准确。

- 准备好所需的离子交换液和缓冲液,并检查液相槽中的储液器液位。

2. 取样:- 根据实验需要,准备好待分析的样品,并确保样品符合实验要求,如样品浓度、体积等。

- 根据实验要求,将样品进行预处理,如过滤、稀释等。

- 使用合适的容器,将样品放入进样装置中,并确保样品装载正确,避免泄漏或样品损坏。

3. 设置实验参数:- 打开离子交换色谱仪或固相提取仪的电源,并打开仪器的控制界面。

- 根据实验要求,选择合适的实验方法和参数,如流速、温度、梯度等。

- 设置好仪器的运行参数,并确保仪器能够按照设置的参数进行实验。

4. 运行仪器:- 通过控制界面,启动离子交换色谱仪或固相提取仪,开始实验。

- 监控仪器的运行状态,观察柱子是否出现异常现象,如流速变慢、压力异常等。

- 定期检查液相槽中的储液器液位,确保液位充足,避免储液器干涸导致实验中断。

- 根据实验要求,定期检查柱子的背压,当背压超出正常范围时,需及时进行维护和保养。

5. 实验结束:- 实验完成后,关闭离子交换色谱仪或固相提取仪,断开电源。

- 拆下离子交换柱,并进行清洗和保养。

- 清洗离子交换柱时,注意使用正确的洗涤溶液,并按照操作手册进行清洗步骤。

- 清洗完成后,将离子交换柱安装回仪器,并进行储存。

总结:离子交换柱的操作规程包括准备工作、取样、设置实验参数、运行仪器和实验结束。

在操作过程中,需要注意柱子和连接件的状态,确保操作的准确性和安全性。

同时,定期对离子交换柱和仪器进行维护和保养,延长仪器的使用寿命。

离子交换柱层析操作

离子交换柱层析操作

离子交换柱层析操作规程(可溶性蛋白)1.装柱:1.1 取出层析柱,用去离子水冲洗干净,连接好管子后固定柱子;1.2用水冲洗层析柱3-5次,每次10ml去离子水;1.3取出填料,静止至室温后,根据需要用移液器取出3-5ml的填料进行装柱,1.4用去离子水冲洗填料5个柱体积;2.柱的平衡与上样:2.1用0.02M TB bufferA 缓冲液(PH7.6)平衡Ni柱,直至流出液的pH为7.6;2.2对处理的样品进行过滤后,缓慢上样让蛋白充分结合;3洗杂蛋白:3.1用0.02M TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,清洗没有结合到层析柱上的杂蛋白,至流出液与缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.2用含10mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含10mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.3用含20mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含20mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.4用含40mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含40mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.5用含60mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含60mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.6用含80mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含80mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;3.2用含100mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含100mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;(具体的洗脱梯度需根据实验自行调整)4解离目的蛋白:4.1用含100mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含100mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;4.2 用含200mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含200mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;4.3 用含500mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含500mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul做SDS-PAGE检测;4.4用含1000mMNaCL的TB bufferA 缓冲液(PH7.6)过柱,共洗约30ml,至流出液与含1000mMNaCL的TB bufferA 缓冲液的OD值接近为止,流出液取20ul 做SDS-PAGE检测;(具体的洗脱梯度需根据实验自行调整)5.柱的清洗与保存:5.1用含1000mMNaCL的TB bufferA缓冲液(PH7.6)以冲洗层析柱,共冲洗30ml;5.2用浓度为1.5M的NaCl溶液冲洗层析柱,共冲洗30ml;5.3用过滤去离子水冲洗50ml;5.4用20%乙醇冲洗30ml后于4℃20%乙醇中保存。

离子交换柱操作方法

离子交换柱操作方法

离子交换柱操作方法
离子交换柱是一种常用的分离和提纯离子的方法,其操作方法一般包括以下几个步骤:
1. 预处理:如果离子交换柱是新的或者被长时间未使用,需要进行预处理来活化柱子。

通常的预处理方法是使用一定浓度的酸或碱进行洗涤。

洗涤液的使用要根据柱子的类型和样品的性质来选择。

2. 样品的预处理:首先将要处理的样品进行预处理,例如使用适当的稀释液稀释高浓度的样品。

还可以过滤掉含有较多杂质的样品。

3. 样品加载:将预处理好的样品通过固定相填充离子交换柱的样品进样口,通过重力、压力或离心力等方式将样品加载到离子交换柱中。

4. 柱洗脱:在样品加载完毕后,将发生了离子交换反应的离子与柱子固定相之间的结合解离,使其被洗脱。

洗脱方法一般是使用一系列浓度逐渐增加的洗脱液,通过温和的条件来逐渐提取所需的离子。

5. 取样:通过洗脱液收集洗脱出来的溶液,在取样过程中可以根据需要采用分数收集或连续收集的方法。

6. 再生:柱子在一段时间使用后会失活,需要进行再生以恢复其分离能力。


子再生的方法根据柱子的类型和样品的性质来选择,通常使用盐酸、盐溶液、酒精等进行再生。

根据离子交换柱的类型和样品的性质不同,上述操作方法可能会有一些细节上的差异,因此在使用离子交换柱之前需要仔细阅读柱子的说明书,并按照说明进行操作。

东曹 TSKgel DEAE-NPR阴离子交换色谱柱说明书

东曹 TSKgel DEAE-NPR阴离子交换色谱柱说明书

阴离子交换色谱柱TSKgel DEAE-NPR 使用说明书东曹株式会社填料键合二乙氨基乙基官能团的无孔亲水性离子交换树脂离子交换容量:>0.06 mequiv./mL粒径:2.5 μm色谱柱货号:0013075尺寸:4.6 mm(I.D.)×3.5 cm(L)出厂溶剂:超纯水pH值范围2~10盐浓度的范围小于1 M流速范围小于1.6 mL/min一般推荐的流速为1.0~1.5 mL/min。

清洗色谱柱请使用0.1~0.2 N NaOH清洗色谱柱。

通常,使用进样器多次注入0.5~1 mL的0.5~0.1 N NaOH 后即可还原色谱柱。

如果该步骤无效,请使用0.5~1 mL的20~40 %的乙酸多次清洗色谱柱。

推荐使用0.1~0.2 N NaOH定期(如,每天使用后)清洗色谱柱。

色谱柱性能测试(蛋白质混合物分离度)推荐使用以下条件测试色谱柱的性能。

样品:卵白蛋白(5 μg)和大豆胰蛋白酶抑制剂(5 μg)的混合物10 μL流动相:A:20 mM的Tris-HCl缓冲溶液(pH 8.0)B:20 mM的Tris-HCl缓冲溶液+ 0.5 M NaCl(pH 8.0)线性梯度:A液→B液;10 min流速: 1.0 mL/min出厂时,DEAE-NPR色谱柱拥有6.0以上的分离度。

非常重要!!!尽管还原由于杂质的吸附导致性能下降的DEAE-NPR色谱柱并不难,但是如果小颗粒杂质夹在填料颗粒之间,这种情况柱子很难还原。

由于填料颗粒之间的空隙非常小,如果样品或流动相中存在细小的颗粒就很容易卡在中间。

因此,强烈建议使用0.2~0.5 μm孔径的过滤器过滤样品后进行分析。

另外,在泵和进样器之间安装0.2~0.5 μm孔径的在线过滤器可以有效延长色谱柱的寿命。

东曹(上海)生物科技有限公司上海市徐汇区虹梅路1801号A区凯科国际大厦1001室电话:021-3461-0856传真:021-3461-0858E-mail:**************.cn网址:/home-cnTSKgel,TSKgel SuperMultipore, TSKgel STAT,BioAssist,Lipopropak,TOYOPEARL,ToyoScreen,TOYOPEARL GigaCap,TOYOPEARL MegaCap,TOYOPAK以及EcoSEC是东曹株式会社在日本,中国,美国,欧盟等的注册商标。

Benson 离子交换柱使用

Benson 离子交换柱使用

Benson离子交换柱使用方法一、离子交换柱(氢柱,钙柱)1. 启用1) 纯水冲洗管路,确保将管路中无盐及有机溶剂;2) 连接色谱柱,将温度升至所需温度后开泵,流速从0.1ml/min,慢慢升高流速,用流动相冲洗色谱柱5-10倍柱体积。

分析碳水化合物流动相一般采用去离子水,有机酸一般采用稀硫酸或磷酸,0.001N-0.05N(大多数分析浓度0.008N-0.01N);钙柱和铅柱只用纯水做流动相。

2. 清洗再生:1) H型色谱柱:金属或其它污染物会导致保留时间变化、柱压升高或者是不对称峰形。

为了恢复色谱柱性能,可在25℃条件下,采用0.1M H2SO4以0.1mL/min的流速,反向冲洗4-6小时。

然后按照色谱柱的标定方向用水平衡一个小时。

2) Ca型色谱柱:金属或其它污染物会导致保留时间变化、柱压升高或者是不对称峰形。

为了恢复色谱柱性能,可在85℃条件下,采用50mg/L EDTA二钠钙以0.2mL/min的流速,反向冲洗1-2小时。

如果柱压仍然很高,则需要降低流速,直到压力下降(表明污染物或颗粒已去除)。

然后按照色谱柱的标定方向用水平衡一个小时。

若采用上述操作,色谱柱性能仍无法恢复,需用0.1M的钙盐如硝酸钙或醋酸钙重复上述过程。

3) Pb柱:柱:金属或其它污染物会导致保留时间变化、柱压升高或者是不对称峰形。

为了恢复色谱柱性能,可在85℃条件下,采用0.1MPb(NO3) 2 0.1mL/min的流速,反向冲洗4-16小时。

然后按照色谱柱的标定方向用水平衡一个小时4) 如果是有机物污染,色谱柱均采用以下方法冲洗:在25℃条件下,采用乙腈/水=5/95,以0.1mL/min流速反向冲洗4小时。

如果柱内因细菌污染则柱子不可再生。

3、保存:长期保存,均要保存于去离子水中。

二、有机酸柱BP-OA1. 启用1) 纯水冲洗管路,确保将管路中无盐及有机溶剂;2) 连接色谱柱,将温度升至所需温度后开泵,流速从0.1ml/min,慢慢升高流速,用流动相冲洗色谱柱5-10倍柱体积。

离子交换色谱柱使用说明

离子交换色谱柱使用说明

XB-SCX色谱柱使用说明发布日期:2011-08-23一. Ultimate® XB-SCX强阳离子交换柱说明:基质:超高纯全多孔球形硅胶;填料:硅胶基质上键合有苯基磺酸基(-C6H4-SO3-);pH范围:使用范围为2.0~6.5;最大使用压力:40Mpa(即6000psi);最高使用温度:80℃;色谱柱内保存溶液:100%甲醇;色谱柱两端筛板孔径均为2um,色谱柱可以反向冲洗。

二. Ultimate® XB-SCX色谱柱的使用特性:1. 常用于分离在水溶液中呈阳离子态的化合物;2. Ultimate® XB-SCX色谱柱能与水和有机溶剂兼容,可用甲醇、乙腈和水(包括缓冲盐溶液)作流动相进行分析;3. 阳离子化合物的保留能力与流动相的pH、离子强度、流动相中有机相的比例以及温度有关。

通常离子强度越大保留时间越短,流动相中有机相的比例越大保留时间越长;4. 柠檬酸盐和磷酸盐等缓冲盐通常用于调整流动相的pH和离子强度以改善分离度。

流动相的pH应该维持在pH 2.0~6.5;5. 阳离子柱的平衡时间相对C18而言较长。

三. Ultimate® XB-SCX色谱柱的维护1. 流动相抽滤过0.45um滤膜,样品针筒过滤;2. 使用之前,先用过渡流动相以1.0ml/min过渡30min,然后用流动相走基线,基线平稳后进样;使用之后,先用100mmol/L的NaClO4 溶液(调节pH<4)以1.0ml/min反向冲洗色谱柱40min;然后用水反向冲洗30min,再用甲醇反向冲洗40min,最后保存在纯甲醇中;过渡流动相是指:有机相和水相比例与流动相相同,只是过渡流动相不含缓冲盐;3. 建议:1)用保护柱和预柱以延长色谱柱的使用寿命;2)使用一段时间(约一周)后需用纯甲醇(或乙腈)以1.0ml/min反向冲洗色谱柱90min,冲洗过程中注意过渡,防止缓冲盐析出。

离子交换色谱柱TSKgel STAT系列使用说明书

离子交换色谱柱TSKgel STAT系列使用说明书

离子交换色谱柱TSKgel STAT系列使用说明书东曹株式会社安全注意事项[注意标签]■远离火源使用易燃溶剂时,请务必小心。

否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。

■使用环境必须通风良好如果通风不良,易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。

■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄露可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。

清除漏出的溶剂时,请佩戴合适的护具。

■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质,切勿直接接触皮肤。

■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。

■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯,请勿用于其他用途。

■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。

■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。

注■请妥善保管本说明书,以便日后参阅。

注意事项:出厂溶剂出厂溶剂:纯水(Q-STAT,DNA-STAT,SP-STAT,CM-STAT)注意事项:填料填料:聚甲基丙烯酸树脂目录1. 简介 (1)2. 使用前 (1)3. 色谱柱规格 (1)4. 安装和操作 (2)4-1 操作 (2)4-2 安装 (2)4-3 推荐流速 (3)4-4 取下色谱柱 (3)4-5 保存 (3)4-6 清洗色谱柱 (4)5. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (4)5-1 理论塔板数的计算方法 (4)5-2 不对称因子的计算方法 (5)6. 质量标准和质量保证 (5)6-1 检测报告的检测条件 (5)6-2 质量标准 (7)6-3 质量保证 (8)1. 简介本说明书详细记载了有关如何正确保存和使用该类色谱柱的重要信息,以便充分发挥产品的性能。

使用色谱柱之前,请务必仔细阅读本使用说明书。

2. 使用前使用前,请检查色谱柱的包装和外观,确认是否有损坏。

如果发现损坏,请根据本书最后记载的地址,联系当地东曹的销售代表。

确认包装中含有以下文件:使用说明书1份检测报告(Inspection Data)1份3. 色谱柱规格TSKgel Q-STAT色谱柱的规格如下所示。

阳离子交换柱使用手册

阳离子交换柱使用手册

阳离子交换柱使用手册一、介绍阳离子交换柱是一种常见的实验室分离和纯化生物大分子的工具。

它通过离子交换原理,可以有效地从混合溶液中吸附目标分子,并通过改变溶液的离子强度和pH值来实现分离和纯化的目的。

二、基本原理阳离子交换柱由一个固定的离子交换基质填充而成,该基质具有阳离子交换官能团。

当样品溶液通过柱时,目标分子会与离子交换基质发生相互作用,被吸附在柱内。

其他非目标分子则在柱中不被吸附,可以通过柱洗脱。

通过改变溶液的离子强度和pH值,可以调控目标分子与离子交换基质的相互作用,实现分离和纯化的目的。

三、实验前的准备工作1. 准备好所需的阳离子交换柱和相应的缓冲液。

2. 检查柱是否完好无损,无泄漏情况。

3. 清洗柱:用去离子水和缓冲液分别反复冲洗柱,直至洗涤液不再显现颜色。

4. 平衡柱:将适当体积的缓冲液用于柱的平衡,使柱内的离子交换基质达到均一状态。

四、离心与应用1. 样品预处理:将需要离心和应用的样品预处理成适宜的浓度和pH值。

2. 样品应用:将样品溶液缓慢地通过阳离子交换柱,确保样品与柱内的离子交换基质充分接触。

3. 柱洗脱:根据需求,通过改变缓冲液的离子强度和pH值,选择合适的洗脱条件,将目标分子从柱中洗脱出来。

4. 收集洗脱液:收集洗脱液中的目标分子,可以通过浓缩、溶液交换等方法进一步纯化。

5. 柱再生:柱洗脱后,柱的再生是十分重要的一步。

根据柱的材质和使用情况,选择合适的再生方法,将离子交换基质恢复到经初次平衡状态。

五、注意事项1. 注意操作的无菌环境,避免样品污染。

2. 样品预处理应避免使用影响离子交换的溶剂或试剂。

3. 避免柱干涸,应始终保持柱内的缓冲液覆盖离子交换基质。

4. 柱的再生过程要细致耐心,确保离子交换基质的完全再生。

5. 注意保存柱:使用完毕后,应将柱存放在干燥、避光和密封的环境中,以防柱内的离子交换基质受到污染或变质。

六、常见问题解决方法1. 样品不能完全吸附在柱上:可能是样品浓度过低或pH值不适合。

弱阴离子离子交换柱

弱阴离子离子交换柱

弱阴离子交换柱简介弱阴离子交换柱(Weak Anion Exchange Column)是一种常用于离子交换色谱分析的柱子。

它具有一定的亲和性,适用于各种弱酸性、带负电荷的离子物质的分离和纯化。

本文将介绍弱阴离子交换柱的原理、应用领域和使用方法。

原理弱阴离子交换柱是基于离子交换原理的分离技术。

其柱子内填充有具有负电荷的功能基团,如羧基(COO-)。

当样品中的带负电荷的离子进入柱子时,它们与功能基团之间会发生相互作用,产生离子交换反应。

根据离子的亲和性不同,离子与功能基团的结合力也不同,从而实现目标化合物的分离。

应用领域弱阴离子交换柱广泛应用于各种类型的离子物质的分离和纯化。

以下是一些常见的应用领域:1.环境分析:用于分离水中的无机阴离子,如硝酸盐、亚硝酸盐和氯化物等,从而实现对环境样品的分析和监测。

2.食品安全:用于分离食品中的阴离子,如硝酸盐、亚硝酸盐和苯甲酸等,以检测和控制食品中的有害物质含量。

3.制药工业:用于纯化药物中的阴离子,以获得高纯度的活性成分,同时去除杂质和不必要的离子。

4.生物化学研究:用于分离和纯化生物样品中的蛋白质和核酸,以实现对其结构和功能的研究。

5.水处理:用于去除水中的有害阴离子和重金属离子,以提高水质和净化处理。

使用方法以下是使用弱阴离子交换柱的一般步骤:1.柱子的准备:根据柱子的要求进行适当的准备工作,如调节柱子的pH值和洗脱缓冲液的浓度。

2.样品的制备:将待分离的样品进行预处理,如过滤、稀释或调整pH值。

3.样品的加载:通过注射器将样品注入弱阴离子交换柱,并控制流速和压力。

4.洗脱:通过改变洗脱缓冲液的成分或浓度,将目标化合物从柱子上洗脱下来。

5.分析:采集洗脱液进行后续分析,如色谱或光谱分析等。

6.柱子的再生:根据柱子的要求,进行必要的再生和保养工作,以保证柱子的使用寿命和效果。

注意事项在使用弱阴离子交换柱时,需注意以下事项:1.样品的适用性:确定待分离的化合物是否适用于弱阴离子交换柱的分离条件,避免使用不适合的样品。

玻璃钢离子交换柱安全操作规定

玻璃钢离子交换柱安全操作规定

玻璃钢离子交换柱安全操作规定前言玻璃钢离子交换柱是化学、制药、电力、食品、环保等领域常用的离子交换器材,用于水处理、纯化、分离和检测等过程中。

一般情况下,操作人员需要遵守相关安全规定,注意用电、用水、排水等方面的安全问题,保证设备、人身、环境的安全。

根据生产实际和用户使用反馈,本文总结得到一些玻璃钢离子交换柱的安全操作规定,供相关操作人员参考和使用。

安装前的准备确认电源、电压、电流和用电能力等要素:使用玻璃钢离子交换柱的前提是其设备有足够的电力支持,因此在正式安装设备前,要对其电源、电压、电流和用电能力等要素进行确认和评估,保证设备供电的稳定性和安全性。

确认配网和周围环境是否符合安装条件:玻璃钢离子交换柱一般需要接收城市自来水管道的进水和出水管道,因而在安装前,要对其室内设计、水源管网、沉淀池及处理、水质监测等问题进行确认和评估,确保设备的环境符合要求。

确认配件清单、故障排除和紧急方法:在安装设备前,要对其配件清单、故障排除方法和紧急救援方法进行确认,熟悉设备的安全操作规定,避免操作中发生人身和设备损坏等情况。

玻璃钢离子交换柱的使用和维护安全操作要点:1.操作人员应确保玻璃钢离子交换柱正常进行运行,不能私自拆卸、改变、操作其任何部件。

2.操作人员在专用工具的帮助下,进行部件装配、拆卸、移动等操作。

3.操作人员在设备运行时,应时刻监测设备运行情况,发现异常及时处理。

4.操作人员对设备进行维修、保养或检查时,必须先停止设备运行,然后进行操作。

5.操作人员使用玻璃钢离子交换柱时,要严格按照厂家双重反冲洗方法排放废水,切勿随意撤离污水。

禁止的操作和情况:1.严禁操作人员私自拆卸、改变、操作玻璃钢离子交换柱的任何部件和内置物。

2.严禁将玻璃钢离子交换柱用于其所不应用的污水,以免发生潜在的安全隐患。

3.严禁操作人员擅自更改玻璃钢离子交换柱的正常工作流程,一旦发生问题,将会影响设备的稳定工作和操作安全。

废水排放:1.在按照玻璃钢离子交换柱的双重反冲洗方法排放废水时,要注意排放卫生和环境保护,压缩废水排放量,降低环境污染和对周边居民生活的影响。

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阳离子交换柱使用注意(下)
进样量和浓度
当样品的洗提强度比洗脱液低(在柱样品预浓缩)的时候,更高的样品量也可以注射。

贮存
在贮存柱子以前,建议先用去离子水,然后用甲醇冲洗。

一定不要在柱子内充满缓冲液或者其他含盐类的洗脱液的情况下贮存色谱柱。

检测灵敏度
对于阳离子的检测,建议进行电导率的测定,使用前面提到的低电导洗脱液。

柱效损失的可能原因
1.额外的峰展宽。

要保证管路的长度和内径都保持最小。

2.洗脱的平衡时间不够。

3.不正确的洗脱液pH或洗脱液的离子强度。

4.洗脱液中存在不正确的阴离子。

制备新鲜的洗脱液。

5.固定相污染。

a. 高柱压伴随分辨率降低。

1.颗粒物积聚在烧结物或者填充物床上。

(a)样品来源---过滤或离心
(b)洗脱液来源---过滤洗脱液,封闭洗脱液容器。

(c)系统来源---冲洗整个系统管路和泵;安装在线系统过滤器。

2.蛋白质类物质的积聚
(a)微生物在样品中生长。

(b)微生物在洗脱液中生长。

b. 正常柱压伴随柱效降低
1.有机污染
(a)样品中有脂肪,油脂,脂质。

固定相的表面被覆盖。

(b)从样品中带来的不确切的有机物或未正确制备的洗
脱液。

(c)在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的非特定有机
物,例如在运输时从大气中带来。

对于纠正污染问题的可能有效的操作
1.准备新鲜的洗脱液
在很多情况下,柱效的丧失可以归结为洗脱液的污染。

所以,要在使用柱子以前准备新鲜的洗脱液,冲洗所有液体管路。

洗脱液应当用0.2到0.4微米的滤膜过滤,在使用以前要脱气。

2.色谱柱再生
要进行色谱柱的再生工作
a.首先倒转色谱柱
b.以0.4ml/min的流速用1M硝酸铵洗脱30ml。

c.以0.4ml/min的流速用40:60 (v:v)的甲醇/水洗脱30ml。

d.以0.4ml/min的流速用异丙醇洗脱30ml。

e.以0.4ml/min的流速用水洗脱30ml。

f.以0.4ml/min的流速用洗脱液洗脱30ml。

g.将柱子转回正常方向。

用洗脱液平衡。

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