园艺植物遗传学部分实验指导
植物遗传育种实验指导书
植物遗传育种实验指导书园林植物遗传育种学实验指导书实验一根尖细胞有丝分裂涂抹制片法一、实验目的与建议学习植物细胞涂抹制片技术；观察有丝分裂过程中染色体行为。
二、实验原理各种旺盛生长的植物组织，包括：茎尖、根尖、孢原组织等分生组织、愈伤组织及分化的小孢子、萌发的花粉管，经常进行着细胞分裂。
经过适当的取材处理，制片后可进行有丝分裂中染色体动态的观察，这是遗传学上通过细胞分裂观察染色体行为、形态结构、数目，从而进行组织分析，鉴别杂种等常用的制片方法。
三、实验材料与设备实验材料：中国水仙、风信子、柴万年青、郁金香(sx)。
用具和试剂：镊子、解剖学针、盖片、载片、滤纸、单刃刀片对氯苯饱和溶液、1nhcl、醋酸地衣红、中性树胶，卡诺紧固液。
四、实验步骤1.交予处置：实验前将鳞茎水培，等待根短出来长1～1.5cm时，穗序0.5cm短的食道，立即放进对二氯苯饱和状态水溶液中，在室温下处置2小时左右，予处置的促进作用主要就是铀色体，并使之集中，同时遏制纺纱缍丝构成。
在制片过程中，例如辨认出染色体后期的对立二者较多时，表明予处置时间比较。
2.固定：倒掉对氯二苯溶液，用水冲洗两遍，用新配的卡诺固定液固定24h后，可放入冰箱中备用。
如果要长期保存则要将根尖转入70%的酒精中。
3.离解：先将紧固后的食道用蒸馏水被褥3～4次，再用1nhcl在60℃(特别注意必须严格控制不少于±5℃)的恒温水浴锅中处置10～20min，然后用蒸馏水被褥3～4次。
此步主要就是并使细胞之间集中上开，并软化细胞壁，易于压片，同时也有利于染色。
4.染色制片(1)切片：剔除根冠，在生长锥处切下一小块组织。
(2)染色压片：在切开的非政府上几滴一滴醋酸地衣红，炖煮，除去大块的渣滓，砌上擦干净的盖玻片，覆以一层吸水纸，用食指在上面施予少量压力，勿并使砌片移动，用解剖学针柄颤动，可以并使细胞舒展，染色体变细。
不好的片子置放显微镜下检查，看见存有典型的对立图像时，可以把载玻片在酒精灯上往往抵蒸煮。
园林遗传育种学的实验教案
园林遗传育种学的实验教案实验一植物细胞的有丝分裂一、试验目的学习对植物组织，细胞的固定、离析和压片方法，借以观察有丝分裂过程和染色体动态变化。
二、实验原理各种生长旺盛的植物组织，包括饱原组织、根尖、茎尖等分生组织，愈伤组织及分化的小孢子。
萌发时的花粉粒常进行有丝分裂。
经过适当的取材处理，加以固定、离析、染色、涂抹、压片方法，可以迅速地将细胞分散附着在载片和盖片之间，进行有丝分裂和染色体动态的观察。
这是遗传学上通过细胞分裂，观察研究染色体形态，结构和计数，从而进行核型分析，鉴别杂种最常用的基本方法。
三、试验用具和试剂显微镜、解剖器、载片、盖片、培养皿、量筒、皮头吸管，小滴瓶，烧杯，吸水纸，固定液，水解分离液，改良品红染液四、实验方法和步骤1、材料准备挑选饱满的大蒜去掉外面老皮及老根，置于盛水的烧杯中使其底部接触水，待长根2cm备用。
2、固定借助物理方法或化学试剂的作用，迅速透入组织和细胞，将之杀死。
并将其结构和内含物如蛋白质，脂肪，糖类以及核物质与细胞器等，在形态结构上尽可能保持生活时的完整和真实状态。
同时更易于染色，可以较清楚地显现细胞在生活时不易看清的结构。
固定时，在指管内放入卡诺氏固定液5ml，用刀片或小剪刀切取长约0.5～1cm的根尖10～20条，直接放入指管，用塞塞紧，室温下固定2～24小时。
固定液应为材料体积的15倍以上。
经固定的材料若不及时使用，可经90％酒精～80％酒精中各半小时，再加入70％酒精中保存（0～4℃冰箱可存半年）。
经常时间保存的材料进行观察前，可用固定液再处理一次效果较好。
大蒜根尖的固定时间是上午11点。
洋葱根尖固定时间：中午12：00～13：00，晚上24：00～1：00，下午16：00～17：00洋葱根尖在固定前不要离开水，否则细胞失水。
3、水解分离水解的作用是去除未固定下来的蛋白质，同时使细胞间的果胶类物质解体，细胞壁软化，细胞分散，便于观察。
方法是取材料放入小烧杯中，用蒸馏水洗2～3次，加入水解分离液2～3ml，10～15分钟后用皮头吸管吸出，加蒸馏水冲洗2-3次，存放于蒸馏水中。
遗传学实验指导
遗传学实验指导实验1 细胞有丝分裂与减数分裂实验1.1 植物根尖细胞有丝分裂过程的制片与观察目的要求学习和掌握植物细胞有丝分裂制片技术；观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征及染色体的动态行为变化。
实验原理有丝分裂是植物体细胞进行的一种主要分裂方式。
有丝分裂的目的是增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。
在有丝分裂过程中，细胞核内的遗传物质能准确地进行复制，然后能有规律地均匀地分配到两个子细胞中去。
植物有丝分裂主要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其它分生组织里进行。
将生长旺盛的植物分生组织经取材、固定、解离、染色、压片等处理即可以观察到细胞内的有丝分裂图象。
如若需要进行染色体计数，则需进行前处理，即取材之后采用物理的或化学的方法，阻止细胞分裂过程中纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期。
这时，染色体不排到赤道板上，而是散在整个细胞质中。
这十分便于对染色体的形态、数目进行观察。
试剂和器材1材料均可以大蒜(Allium sativum 染色体数目2n=16)、玉米(Zea mays 染色体数目2n=20)、洋葱(Allium cepa染色体数目2n=16)或蚕豆(V icla faba染色体数目2n=12) 等根尖为实验材料。
2试剂95％乙醇、冰乙酸、石炭酸品红、l mol／L HCl。
3器材恒温培养箱、显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、单面刀片、镊子、培养皿、量筒、吸水纸。
操作方法1生根植物根尖是植物的分生组织，取材容易，操作方便。
植物根尖细胞分裂旺盛，因此，它是细胞有丝分裂相制备与观察的理想选取部位。
大蒜、洋葱易于在水培、沙培、土培条件下生根。
采用水培时要注意在暗处培养，以满足根生长条件，使根系生长旺盛。
玉米和蚕豆种子可先用温水浸泡1天之后，再转入铺有多层吸水纸或纱布的培养皿中，上面盖双层湿纱布置于24～26℃温箱中培养，每天换水二次。
2取材待根长至l.5~2.0 cm时，将根取下。
若实验只需观察细胞有丝分裂的过程和各时期的特征，可将根尖直接放入Carnoy固定液(95％乙醇：冰乙酸=3：1)中固定；如果要观察染色体形态和数目，则必须对根尖进行前处理后才能固定。
植物遗传育种学实验指导
园林植物遗传育种学实验指导实验一植物细胞的有丝分裂实验二植物细胞的减数分裂实验三染色体组型分析实验四基因分离实验一植物细胞的有丝分裂一、实验目的观察树木、花卉细胞有丝分裂各时期染色体的变化和特征，掌握根尖压片技术。
二、实验原理有丝分裂是植物细胞数目增加的主要方式，常见于根尖、茎尖分生区的细胞，细胞经有丝分裂正确地把染色体分配给子细胞，形成两个染色体数目、内容一致的子细胞。
有丝分裂是一个连续过程，根据染色体的形态特征可人为地将分裂期分为前期、中期、后期、末期等四个时期。
三、实验材料发芽的杉木种子根尖；洋葱的幼根。
四、实验用具及药品显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、刀片、镊子、吸水纸、小烧杯、大培养皿、冰箱、恒温水浴锅、量筒、天平。
醋酸、铁矾、苏木精、8－羟基喹啉、秋水仙素、二甲苯、盐酸、叔丁醇、无水乙醇、95%乙醇。
五、实验步骤1．取材⑴杉木种子根尖将杉木种子在自来水中浸泡24h，然后置培养皿中，在25℃下发芽，5～7天后胚根长达10～15㎜时将发芽种子取出。
⑵洋葱根尖培养将洋葱的鳞茎放在盛清水的培养皿内，在室温（20～25℃）下培养使其发根，待根长约10～15㎜时将根取出备用。
2．预处理为了阻止纺缍体的活动，获得更多的中期分裂相，同时使染色体相对缩短，便于染色体分散和计数，可对根尖进行预处理。
可用于预处理的化学药物有生物碱、苷类、酚类及其他物质，常用药物的浓度及处理时间如下:（1）秋水仙碱:浓度为0. 04%～0.2%，处理2～5 h;（2）a-溴代萘:饱和水溶液处理0.5～4 h;（3）对二氯苯:饱和水溶液处理2～4 h;（4）8-羟基喹啉:浓度为0. 002M，处理2～4 h;上述各处理在室温下进行，若低温处理则用蒸馏水在1～4℃下处理24 h。
3．固定经过预处理的材料冲洗干净后，用卡诺氏固定液固定12～24 h，目的是将细胞迅速杀死，使染色体保持固定的形态。
经固定的材料若不立即使用，可换到70%酒精中置于4℃下保存。
园林植物遗传实验指导
园林植物遗传实验指导东北农业大学园艺学院目录目录实验一观赏植物生物学性状调查 (1)实验三花粉贮藏及花粉生活力的测定 (5)实验五植物根尖细胞染色体制片技术与观察 (8)实验六花粉母细胞减数分裂制片法 (11)实验七花粉管生殖细胞的有丝分裂 (12)实验八园林植物多倍体的诱导与鉴定 (14)实验九植物总DNA 的提取 (17)实验十植物总RNA的提取 (20)实验十一PCR扩增技术 (22)实验十二植物RAPD分析技术 (24)实验13植物染色体标本制备及核型分析 (27)实验14植物染色体分带技术 (49)实验15植物诱导染色体结构变异 (54)实验16荧光原位杂交实验 (55)附录 (57)I实验一实验一观赏植物生物学性状调查一、目的要求掌握观赏植物生物学性状调查的目的、内容和方法，通过调查填写调查表，根据调查表比较同种观赏植物不同品种间观赏性状的差异，并学会利用花卉品种分类检索表为调查到的花卉进行品种鉴定。
二、材料用具1、材料各类观赏植物（草花、灌木、乔木、藤本）。
2、用具钢卷尺、游标卡尺、皮尺、标杆、记号笔、铅笔、小卡片、细线、统计表等。
三、实验内容观测不同植物品种的观赏与经济性状，包括株型、花、果实、抗性等特征，对其进行比较和评价。
数量性状一般按三级记载。
具体观测性状如下：1、株型：包括株高、枝下高、冠长、冠幅（株幅）、冠形、分枝角度、分枝数、枝叶的特征、植株生长情况等。
2、花的特征：包括花期、花型、花朵大小、花色、花香、开花数量等。
3、结实情况：包括果实的形状、大小、多少等。
4、抗性：包括抗寒性、抗热性、抗旱性、抗病性、抗虫性、耐阴性等。
5、特殊的经济价值或观赏价值。
（一）木本花卉生物学性状调查1、试验材料的选择根据实验的时间地点选择正值花期的木本花卉，春季可选木兰、樱花、榆叶梅、梅花、碧桃等，夏秋季可选紫薇、石榴、黄花槐、夹竹桃、桂花、洋紫荆、大叶醉鱼草、木芙蓉等，要求该木本花卉有2个以上品种的成年植株，通过品种性状调查，比较品种间观赏性状的差异。
园艺植物遗传育种 实验教案
园艺植物遗传育种实验教案一、教学目标1. 理解园艺植物遗传育种的基本概念和原理。
2. 掌握园艺植物遗传育种的基本方法和技术。
3. 能够进行园艺植物遗传育种的实验设计和实施。
二、教学内容1. 园艺植物遗传育种的基本概念和原理。
2. 园艺植物遗传育种的基本方法和技术。
3. 园艺植物遗传育种的实验设计和实施。
三、教学重点1. 园艺植物遗传育种的基本概念和原理。
2. 园艺植物遗传育种的实验设计和实施。
四、教学方法1. 讲授法：通过课堂讲解，介绍园艺植物遗传育种的基本概念、原理、方法和技术。
2. 实验指导法：指导学生进行园艺植物遗传育种实验的设计和实施。
五、教学过程1. 理论学习(1) 通过课堂讲解，介绍园艺植物遗传育种的基本概念、原理、方法和技术。
(2) 通过示意图、实例等方式，加深学生对园艺植物遗传育种的理解。
2. 实验设计(1) 分组讨论，学生根据已学知识和实验目的，设计园艺植物遗传育种实验的具体方案。
(2) 学生按照所设计的实验方案，进行实验准备和材料准备。
3. 实验实施(1) 指导学生按照实验方案，进行实验的操作和记录。
(2) 组织学生进行观察和数据统计，分析实验结果。
4. 实验总结(1) 学生进行实验结果的总结和讨论。
(2) 教师进行总结和点评，回答学生的问题。
六、实验设备和材料1. 实验设备：显微镜、移液枪等。
2. 实验材料：园艺植物种子或幼苗、培养基、营养液等。
七、教学评价1. 学生的实验设计和实施是否准确、规范。
2. 学生对园艺植物遗传育种的理解和运用能力。
遗传学实验指导书.docx
实验1植物染色体减数分裂观察1、实验目的通过对植物花粉的形成过程中减数分裂的观察，了解植物生殖细胞形成的-•般过程以及染色体在这一过程中的动态变化，从而深刻理解减数分裂的遗传学意义，为研究遗传学基木规律奠定细胞学基础。
2、实验原理减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程屮发卞。
这一过程的特点是：细胞连续两次进行核分裂，而染色体只复制一次，结果形成四个核，每个核只含单倍数的染色体。
即染色体数减少一半, 所以称为减数分裂。
另一个特点是前期特別长。
而11变化复杂，包括同源染色体的配对和非姊妹染色单体的交换与分离等。
3、实验材料高粱（2”20）、玉米（2n=20）或小麦（2n=42）等雄蕊幼穗及其永久制片和照片。
4、实验器具和药品（1）用具：显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、接种针、蹑子、酒精灯、吸水纸、擦镜纸、烧杯、量筒、带橡皮头的铅笔。
（2）药品：纯洒精、95%酒精、冰醋酸、7（）%酒精、卡诺固定液（Carnoy）液、醋酸洋红（醋酸地衣红）。
5、实验说明在被子植物中，由分牛细胞进行儿次有丝分裂，形成小胞子母细胞（花粉母细胞），简称PMC,每个PMC 进行两次连续的细胞分裂，即减数分裂，产生四个子细胞，每个子细胞就是一个小他子，每个小抱子内的染色体的数II是PMC的一半（n）o整个减数分裂过程可分为下列各个时期：第一次分裂：前期I：乂可分为以下五个时期：细线期：核内岀现染色体细长如线，数目成双，核仁明显，但一般看不到双线结构。
偶线期：同源染色体配对，即联会。
呈二价状态（此期很短暂，不易找到）。
粗线期：二价体变粗变短，由于各染色体由已复制成两条的染色单体组成。
故此时配对的染色体含冇四条染色单体，叫做四合体。
双线期：各同源染色体开始分开，由于在粗线期非姊妹染色体之间发牛局部的交换，因而同源染色体在一定区段出现交叉结。
终变期：染色体长度更为粗短，交叉结向端部移动，核仁的核膜开始消失，此吋观察染色体最清楚，故可计算数目。
园艺植物育种学实验指导
园艺植物育种学实验指导前言一、实验课的性质与任务本课程是高校园艺专业本科生的专业基础课。
本课程从加强基础、培养能力。
提高素质的教学目标出发，建立一个科学、合理的园艺植物遗传育种学实验教学课程体系。
使学生通过本课程实验教学，不只是加深理解和巩固所学理论知识。
而是更能切实掌握园艺植物遗传育种学基本实验技能，正确使用常规仪器，学会正确记录，分析讨论实验结果，初步综合运用已学实验技术方法设计简单实验。
在实验教学中，同时加强对学生进行科学素质和良好的实验室工作习惯的训练。
为继续培养具有创新精神和实践能力的高素质人才奠定良好的基础。
二、实验课程目的与要求1.实验目的（1）以园艺植物遗传育种学实验的基本操作、基本技能和基本理论为基础。
精选重组验证性实验，增加综合性实验及知识范围，操作难度适宜的自选实验的比例，引导、指导学生初步设计实验。
建立一个既与理论课有一定互补作用，又具有相对独立性的科学、合理、实用性强的实验教学课程体系。
综合分析、推理判断的能力，科学思维能力和创新意识，以及科学求实的态度。
相互协作的团队精神。
2.实验要求（1）实验内容的安排循序渐进，由简单到综合，由基本到提高到开放实验，激发学生的学习兴趣，调动学生的学习主动性。
（2）强调学生课前预习，教师课堂讲授简明扼要，重点讲授实验原理，操作要点和实验方法的应用及意义，演示关键操作方法。
（3）切实指导学生进行操作与观察，启发学生手脑并用，培养学生通过实验独立获取知识和技能的能力，严格要求和指导学生如实进行原始记录和分析实验结果，强调科学求实精神；重视随堂考查，讲评学生实验和实验报告，提高学生的实践能力。
三、考核方式、方法及实验成绩评定方法1.考核内容应包括两个主要方面：⑴实验记录、实验报告、实验课程总结记录书写情况；⑵平时作业（实验过程）的认真程度；仪器设备操作使用情况；遵守实验室工作规章制度情况等。
2.成绩考核采用百分制记分制。
实验一园艺植物开花习性调查一、实验目的通过各种园艺植物开花习性的调查，了解园艺植物开花习性的主要特点，熟悉园艺植物开花习性调查的主要观察项目和观察方法。
【课程大纲】《园林植物遗传育种学实验》
《园林植物遗传育种学实验》课程大纲一、课程概述课程名称（中文）：园林植物遗传育种学（英文）：Genetic and Breeding of Ornamental Plant课程编号：14241048课程学分：0.5课程总学时：15课程性质：专业基础课前修课程：植物学二、课程内容简介园林植物遗传育种学实验主要包括园林树木染色体制片技术、染色体组型分析、几种主要园林树种花的生物学特性及花粉形态的观察、花粉的贮藏及生命力的测定、园林植物单株选择、园林植物组织和器官的培养等内容，通过实验教学提高学生对理论知识的理解及其动手能力。
三、实验目标与要求园林植物遗传育种实验教学是其理论教学的辅助手段，是对理论知识认识的深化。
随着该学科的发展，其实验课教学主要以基础实验技术的训练及介绍新技术为目标，着重于园林植物新品种的选育及良种繁育。
因此该实验课的教学愈显重要，要求既要注重基础又要力求创新。
四、学时分配园林植物遗传育种实验课学时分配实验项目名称学时实验类别备注园林树木染色体制片技术 3 验证性实验染色体组型分析 2 验证性实验几种主要园林树种花的生物学特性及2 验证性实验花粉形态的观察花粉的贮藏及生命力的测定 2 综合性实验园林植物单株选择 3 设计性实验园林植物组织和器官的培养 3 设计性实验合计15注：园林植物遗传育种实验课程总计0.5学分，安排6次实验，其中验证性实验占47%，综合性、设计性实验占53%。
五、教学内容与安排实验一：园林树木染色体制片技术（验证性实验 3学时）（一）实验目的（1）学习和掌握对树木组织、细胞的固定、离析和压片方法，包括临时片和永久片；（2）熟悉和巩固植物生长发育过程中有丝分裂全过程及其典型特征；（二）实验材料与用品实验材料：松科或杉木的种子；用具：染色板，载玻片，盖玻片，指管，温度计，试剂瓶，滴瓶，镊子，解剖针，毛边纸。
（三）实验内容与方法（1）取材预处理（2）固定（3）水解分离（4）染色、压片（5）镜检（四）实验结果综述根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。
(标准格式)遗传学实验指导
《遗传学》实验指导书适用专业(农学、园艺、中草药等)前言遗传学实验是为了配合遗传学的教学而开设的一门非独立性设课的实验课程。
要求学生根据所掌握的理论基础和实验技能，独立完成实验操作，并撰写实验报告。
本课程由验证性、操作性和综合性等多层次实验内容构成，主要从个体、细胞、分子三个水平揭示遗传学的基本现象与规律。
通过本课程的学习，使学生加深对遗传学基础理论和原理、遗传学试验技术和分析方法的理解和掌握、验证遗传学理论，并通过综合性、设计性实验研究，培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力和初步独立进行科学研究的能力。
本实验指导包括各类实验9个，共28学时，必做14学时，选做14学时，可以根据学时数和具体情况，酌情选择。
此外还有附录四个，供教师准备实验时参考。
至于一些分子水平上的实验技术，限于时间而未收集，有待以后补充。
实验要求一、实验前预习实验指导书并复习有关内容；准备好实验报告纸、铅笔、橡皮、尺子、钢笔(或圆珠笔)等；二、按实验指导及教师的要求进行观察、记载，写好实验报告。
字迹要整洁、清楚。
绘图一律用铅笔，解答用兰色或黑色圆珠笔书写。
三、爱护实验仪器、设备，注意节约药品和各种实验材料；按操作规程使用仪器，严禁私自拆卸仪器及调整仪器附件，如有损坏，照价赔偿。
四、注意安全，严格遵守操作规程，如遇特殊情况应及时报告指导教师。
五、保持实验室安静，不得在实验室内喧哗。
实验完毕后，将实验用品放回原来位置,打扫卫生。
目录实验一：植物细胞有丝分裂的制片与观察························································4 实验二：植物细胞减数分裂的制片及观察························································6 实验三：植物染色体组型分析··········································································8 实验四：一对相对性状的遗传分析·······················································11 实验五：两对相对性状的遗传分析··································································14 实验六：植物多倍体的诱发及细胞学鉴定·······················································15 实验七：数量性状的遗传分析·········································································17 实验八：蛋白质遗传标记分析·········································································21 实验九：人类性状的遗传分析·········································································2310、实验报告基本内容要求············································································ 2511、实验报告格式···························································································26实验一：植物细胞有丝分裂的制片与观察实验学时：3学时实验类型：综合实验要求：必做一、实验目的：掌握植物细胞有丝分裂的制片方法，并通过植物细胞有丝分裂制片的观察，熟悉有丝分裂的全过程，以及各个时期染色体的形态特征。
《园艺植物遗传学》实验指导书
园艺植物遗传学实验指导书2008年5月《园艺植物遗传学》实验指导书目录实验室工作规程 (1)实验一植物细胞有丝分裂的制片和观察 (5)实验二植物细胞减数分裂的制片及观察 (9)实验三染色体核型分析 (13)实验四分离规律的验证 (15)实验五独立分配规律的验证以及基因的互作观察 (18)实验六连锁遗传现象的观察和交换值的测定 (20)实验七遗传力的估算 (22)实验八染色体结构变异以及多倍体的观察和鉴定 (24)实验室工作规程一、守则为了获得准确的实验结果，避免在工作中发生差错和意外事故，实验者必须遵守下列规则。
(1) 实验前必须制订周密的工作计划，预习实习内容。
进入实验室后要按照计划或指导教师的规定进行操作，并随时把实验中出现的情况和最后结果详细地记录下来。
(2) 遗传育种学实验中大多数是借助于光学显微镜，在细胞学水平上研究生物的遗传特性，所以实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃皿以及实验者的双手都必须保持洁净，做到无灰尘、无脏物，以免干扰镜下观察结果。
(3) 盛有化学药品、试剂、溶液的瓶上，必须贴有标签，注明名称、成分、配制日期，并分门别类，安放在一定位置上，排列整齐，便于取用。
(4) 挥发性药品、有毒药品、强酸、强碱等，使用时切勿靠近眼、鼻、口、衣服。
酸类稀释时，只能将酸徐徐倒入水中，绝对不可将水倒入酸中。
(5) 取用液体药品时，所用各类量具必须分开，不可混用，用后必须马上冲洗干净；称量固体药品时，先在称盘上放清洁蜡光纸或白纸，调试平衡后再称，保护称具不受腐蚀和防止药品相混。
(6) 进行显微镜检查时，切勿使染料或药剂沾污镜头和镜台，如有沾污必须随时擦干净；并注意各种试剂不要洒在工作台上，以免腐蚀。
(7) 一切药品和化学试剂都必须按最低使用量配用，切勿浪费。
用过的固体废物、酸类、碱类、染料等应倒入废缸内，不可直接倒入水槽中，废酒精、二甲苯、固定液等分别倒入一定的瓶中，以便回收再用。
(8) 实验中如有丢失、损失仪器设备及用具，应及时报告并填写报告单，凡不遵从教师指导违反操作规程以致造成不应有的损失者，按其情节轻重，态度好坏，给予处理，赔偿全部或一部分。
园艺植物育种学实验实习指导
园艺植物育种学实验实习指导目录实验一果树植物种质资源调查实验二园艺植物开花习性的观察实验三自花授粉植物有性杂交技术实验四异花授粉植物有性杂交技术实验五园艺植物花粉生活力测定实验六园艺植物基因组DNA及总RNA提取技术实验七化学诱变染色体加倍及其鉴定实验八果树杂交后代的鉴选实验九聚丙烯酰胺凝胶电泳分析园艺植物同功酶实验十植物抗寒性鉴定实验十一大白菜的产量构成性状的品种间和品种内变异实验十二无性繁殖园艺植物选择育种计划的制定实验十三无性繁殖园艺植物的有性杂交育种计划制定实验十四有性繁殖园艺植物的常规品种育种计划制定实验十五有性繁殖园艺植物的杂种一代育种计划制定实验一果树植物种质资源调查*一、**实验目的** *通过参观果树种质资源圃，学习园艺植物——果树种质资源调查的方法，从现有的资源中发掘优良的地方品种和类型，以及本地特色的野生果树资源，为生产提供有直接经济栽培价值的材料，或为育种及利用做砧木或商品提供有价值的原始材料。
加深认识种质资源调查对栽培、育种、和科学研究的重要意义。
*二、实验说明** *果树种质资源是果树品种选育工作中所采用的原始材料，包括野生类型、半野生类型、栽培类型以及人工创造的育种材料。
育种的成就取得很大程度上决定于所收集种质资源的丰富程度，研究是否深入，优良性状是否得到充分利用。
种质资源是育种工作的基础，不同的资源有不同的用途。
正确地选择和适当地利用当地种质资源对创造新品种具有决定性的意义。
因此，提高育种的水平和效能，必须首先进行种质资源的调查、收集、保存，这是育种工作的首要任务之一。
果树资源的调查，主要包括地方品种和野生果树。
地方品种是在一定地区的栽培品种，它们是在当地自然条件和栽培条件下形成的，没有经过现代育种技术的改进，但它们对当地条件有高度的适应性和抗逆性，适合当地的生产和消费习惯，同时它们有多样的变异类型，是果树选种的重要原始材料。
但是，随着品种生产规模化栽培，使得有些具有某些优良性状的果树资源濒临灭绝，因此通过资源调查，挽救保存地方品种是防止种质散失的重要任务。
园林植物遗传育种实验
染色体的组成
着丝粒
着丝点（着丝粒） 主缢痕
染色体臂
主缢痕
次缢痕（核仁组织区）
染色体臂
随体
端粒（封口，使DNA序列终止）
次级缢痕
随体
染色体的形态、结构与数目
染色体的形态结构 染色体的形态 根据着丝点位置划分: V形、L形、棒状、点状
细胞分裂后期染色体的形态
园林植物遗传育种实验课
实验一 植物细胞的有丝分裂
取材 --预处理 ---- 固定 --- 水解 ---染色 --- 制片 ---镜检
实验二 植物细胞的减数分裂
减Ⅰ前期
减Ⅰ中期 减Ⅰ后期 减Ⅰ末期减Ⅱ中期减Ⅱ后期减Ⅱ末期
实验二 植物细胞的减数分裂
实验三 染色体组型分析
染色体的形态、结构与数目
园林植物遗传育种学实验指导
园林植物遗传育种学实验指导书（园林专业用）张菊平编河南科技大学林学院二○○七年六月河南科技大学学生实验守则1．实验前要认真预习实验指导书和有关基础理论，并接受实验指导人员的检查。
否则，不得参加实验。
2．学生必须按时到实验室上实验课。
进入实验室后应保持室内安静整洁，不准吸烟、随地吐痰和将赃物带入室内。
3．做实验时必须严格遵守实验室的规章制度和仪器设备的操作规程，服从教师和实验技术人员的指导。
4．爱护仪器设备、节约使用材料，未经许可不得动用与本次实验无关的仪器和其它设施，不准将室内物品带出室外。
5．实验中要细心观察，认真记录各种数据，不得马虎从事，不得抄袭他人数据，不得擅自离开操作岗位。
6．实验时必须注意安全，防止人身和设备事故的发生，若发生事故迅速采取有效措施，包括切断电源等，并注意保护现场，及时向指导人员报告。
7．实验完毕后，要将使用的仪器设备、工具等整理整齐，清扫实验场地，交检实验记录，经实验指导人员同意后方可离开。
8．凡损坏仪器设备和工具者应主动说明原因，并接受检查，填写报废单或损坏情况报告，根据具体情况进行处理。
凡不遵守操作规程或擅自动用其它仪器设备造成损坏者按有关规定进行处理。
摘自：河科大教〔２００７〕１９号河南科技大学实验设备借用与赔偿制度一、借用制度1．常规仪器设备校内互借，经所属实验室主任同意，借用方填写借用登记薄，双方严格交接手续。
校外原则上不借，特殊情况经院（系）、实验室及实验室与设备管理处三方同意并填写借用登记薄，担保人签字担保，并收押金方可借出。
2．大精设备不外借。
校内借用时，设备技术人员应随机操作或指导。
3．计量仪器不准借用。
4．私人不准借用校内各类实验仪器设备和工具。
二、赔偿制度人为造成实验设备丢失、损坏者，除追究当事人责任外，另按下列规定进行经济赔偿。
1．教职工损坏、丢失实验仪器设备，修复后不影响使用者，赔偿全部修理费。
如影响使用精度者，最低可按原价的5%赔偿。
2．外借仪器设备损坏或丢失，除按原价赔偿外，再增加20%的管理费。
园艺植物生物技术实验指导
园艺植物生物技术实验指导单位河南科技学院教研室园艺植物遗传育种教研室时间2 0 0 8 年1 月编写说明课程编码：0 6 0 0 0 1 7课程教学总学时：3 6课程实验总学时：1 0总学分：2适用专业：园艺先修课程：植物学；植物生理学；园艺植物遗传学一、目的与任务实践课堂主要内容，了解生物技术相关实验设施，掌握生物技术基本实验操作，培养学生的动手操作能力、分析和解决问题的能力。
二、实验教学的基本要求通过本课程的学习了解生物技术实验室的设计、常用仪器设备的基本操作；掌握园艺植物组织培养基本流程及技术，初步掌握以基因工程为核心的相关技术操作。
三、实验教学的时数安排总学时1 0 学时，各实验学时数分配见下表：序号实验内容学时实验一培养基母液的配制2实验二培养基的配制与灭菌2实验三无菌操作技术及植物组织培养2实验四园艺植物脱毒技术2实验五园艺植物D N A 提取技术2实验一实验一实验一实验一培养基母液的配制一、实验目的通过配制M S 培养基母液，掌握贮备液的配制和保存方法。
二、实验原理配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存。
使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。
以M S 培养基为例，所需配制的母液为：大量元素母液（母液Ⅰ，浓缩2 0倍）、微量元素母液（母液Ⅱ，浓缩2 0 0 倍）、铁盐母液（母液Ⅲ，浓缩2 0 0倍）和有机化合物母液（母液Ⅳ，浓缩2 0 0 倍）等。
三、主要仪器设备和试剂1 . 仪器设备：冰箱，天平，酸度计，烧杯（5 0 m l ，1 0 0 m l ，5 0 0 m l ，1 0 0 0 m l ），量筒( 1 0 0 0 m l ，1 0 0 m l ，2 5 m l ) ，容量瓶( 1 0 0 0 m l ，5 0 0 m l ，1 0 0 m l ) ，磨口试剂瓶( 1 0 0 m l ，5 0 0 m l ，1 0 0 0 m l ) ，药勺、称量纸、滴管、玻璃棒，电炉，微波炉2 . 试剂：N H 4 N O3 , M n S O4 . 4 H 2 O , K N O 3 , Z n S O 4 . 7 H 2 O , C a C l 2 . 2 H 2 O ,N a 2 M o O 4 . 2 H 2 O , M g S O 4 . 7 H 2 O , C u S O 4 . 5 H 2 O , K H 2 P O 4 , C o C l 2 . 6 H 2 O ,H 2 B O 3 ，N a 2 ? E D T A ? 2 H 2 O ，K I , F e S O 4 . 7 H 2 O ，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇, 蒸馏水四、实验方法1 . M S 大量元素母液的配制配制时先用量筒量取蒸馏水大约3 5 0 m l ，放入5 0 0 m l 的烧杯中，按照配方表中用量依次分别称取：N H 4 N O 3 , K N O 3 , K H 2 P O 4 , M g S O 4 .7 H 2 O , C a C l 2 . 2 H 2 O ，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入5 0 0 m l 的容量瓶中，用蒸馏水定容至5 0 0 m l ，然后，倒入细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4 ℃冰箱中保存备用。
园林植物遗传育种学实验指导书.
《园林植物遗传育种学》课程实验指导书园林专业杨泉女邓日烈刘晓辉编佛山科学技术学院生命科学学院园艺系2008年5月目录实验一、园林植物品种性状的描述 (2)实验二、园林植物种质资源调查 (3)实验三、花粉生活力的鉴定 (5)实验四、园林植物开花习性的观察与授粉技术 (7)实验五、人工诱发植物多倍体 (9)实验六、植物培养基的配制与灭菌 (11)实验七、园林植物的组织培养 (13)实验一、园林植物品种性状的描述植物表型变异类型的观察植物表型变异的研究是进行表型选择的工作基础，经过表型选择出来的类型r一般就直接称为优良类型，这些优良类型一方面可直接供生产之需，另一方面可作为该植物种进一步改良的原始材料。
一、实验目的通过实验初步掌握植物表型变异类型划分的原理和方法。
二、实验用具手持放大镜、铅笔、绘图纸、枝剪、小刀、米尺。
三、实验材料各种树木和花卉品种。
四、实验内容(一)树木形态特征变异的观察(1)叶子形态特征的变化。
许多乔灌木树种叶子的结构和色泽存在一定的变化，并在绿化事业上广泛应用着，如园柏的针叶有刺叶和鳞叶之分；槭树和黄卢的红叶中，存在深红、淡红和黄色三种类型；李子树中还发生了保持全年树叶紫红的变异，这就是红叶李；各种杨树、柳树的叶形和叶片大小也存在着一定的差异。
(2)果实(球果)形态特征的变异。
果实(球果)是树木重要的繁殖器官，也是划分种、品种和类型的重要的性状特征。
核桃果实按形状可划分为：尖顶、卵果、长果、圆果、方果等五种类型：按种壳光滑程度可分为光、中等光滑和有皱沟三种类型：接种壳厚度及其内壁构造(内壁褶、内壁膜、种壳)可划分为露仁、薄壳、锦仁、夹绵、夹仁、节子等六大类型。
(3)树皮形态特征的变化。
许多树种树皮的色泽、光滑度、裂缝的状况(形状、深裂度、裂缝的色泽)和裂片的形状均存在一定的差别，如杨树、柳树、榆树飞泡桐和松树等树种均可见到。
(4)树木冠形和分枝习性的变化。
树木的冠形和分枝习性是重要的经济指标之一。
园艺植物遗传实验技能训练教程是园艺技术专业的主要专
前言园艺植物遗传实验技能训练教程是园艺技术专业的主要专业基础课。
为使学生将课堂所学理论知识应用于实践，加深对理论知识的理解，增强学生解决实际问题的能力，根据专业要求安排不同的实训内容。
通过各种专业技能训练使学生能熟练掌握制片、压片、染色、固定技术，熟练使用电泳仪、显微镜、离心机等的使用方法，掌握常用的植物遗传分析技术，如：数理统计法、有机溶剂提取法、组织培养法、带型分析法等，明确染料的种类和正确使用，了解并掌握园艺植物遗传基本理化性质的分析方法与原理，学会实验数据的处理与分析，并根据实验结果得出结论。
通过综合实训使学生了解园艺植物的基础理论知识，掌握细胞分裂与染色体行为、遗传物质的分子基础、植物细胞的组织分化、经典的遗传规律、染色体数目的变异等。
掌握显微镜的使用与维护方法、细胞固定与细胞染色方法、孚尔根染色法、植物染色体分带技术、遗传物质的鉴定及提取方法。
通过具体单项的训练，提高学生实践技能，具有指导农业生产的实际能力，同时培养学生良好的职业素质和科学发展观。
为体现高职教育特色，增强学生的动手能力，使学生对所学知识融会贯通，培养他们独自解决生产问题的能力，洋葱根尖中DNA的鉴定、植物细胞减数分裂的观察、大麦中期染色体的组型分析、植物多倍体的诱发、植物材料中DNA的分离提取、实训十植物细胞的脱分化和分化培养等12个实训技能训练，增强了指导生产的能力。
目录第一部分植物遗传的基本理论 (2)1-1细胞分裂与染色体行为 (2)1-2 遗传物质的分子基础 (6)1-3 植物细胞组织分化 (7)1-4孟德尔遗传规律 (9)1-5染色体数目的改变 (13)第二部分园艺植物遗传实验基本知识 (19)2-1 实验室安全管理制度 (19)2-2显微操作技术 (20)2-3显微鉴定的方法 (21)2-4生物显微镜常见故障的修理 (23)第三部分植物遗传实验基本操作 (25)3-1显微镜的使用与维护 (25)3-2细胞固定 (25)3-3细胞染色 (27)3-4常用染料 (28)3-5孚尔根染色法 (29)3-6植物染色体分带 (31)3-7 DNA的提取方法简介 (32)第四部分园艺植物遗传实验技能训练 (35)实训一植物根尖石蜡切片的制作——石蜡制片法 (35)实训二花粉管生殖细胞有丝分裂的观察——固定染色法 (36)实训三洋葱根尖中DNA鉴定——孚尔根核染色法 (37)实训四植物细胞减数分裂的观察——染色体玻片法 (38)实训五孟德尔遗传规律的验证——数理统计法 (38)实训六大麦中期染色体的组型分析——染色体分析法 (40)实训七植物多倍体的诱发——秋水仙素法 (42)实训八植物材料中DNA的分离提取——有机溶剂提取法 (43)实训九植物中过氧化物酶的提取——电泳染色法 (45)实训十植物细胞的脱分化和分化培养——组织培养法 (47)实训十一植物单倍体的诱发——花药培养法 (49)实训十二植物染色体的分带——C带分析法 (50)第一部分植物遗传的基本理论1-1细胞分裂与染色体行为1-1-1简介一个细胞分裂为两个细胞的过程。
遗传学实验指导
遗传学实验指导张霞孔庆军徐海霞二00五年十二月实验一植物有丝分裂制片及多倍体诱发和鉴定一、实验目的1. 学习植物根尖有丝分裂制片技术；2．辨别有丝分裂各时期的染色体变化和特征；3．掌握染色体的观察和计数方法；4．初步掌握秋水仙素诱发多倍体的方法；5．学习植物多倍体的细胞学鉴定。
二、实验原理有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式。
在有丝分裂过程中，细胞核内染色体准确复制、均等分裂，使母、子细胞在遗传物质组成上达到等质同量。
既维持个体正常生长发育，又保证物种的连续性和稳定性。
高等植物的有丝分裂主要发生在根尖、茎尖及幼叶等部位的分生组织，将这些分生组织固定、水解、染色和压片，再置于显微镜下即可观察到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
用秋水仙碱浸渍、涂抹或点滴植物的分生组织，能抑制细胞分裂时纺锤丝的形成，使染色体不走向两极而被阻止在分裂中期，这样细胞不能继续分裂，从而产生染色体数目加倍的核。
若染色体加倍的细胞继续分裂，就形成多倍性的组织和器官。
从多倍体组织分化产生的性母细胞，经减数分裂产生的雌雄配子受精后仍形成多倍体植株。
植物多倍体在探讨物种的演化，克服远缘杂交不育和育成作物新类型方面具有重要意义。
三、实验材料二倍体洋葱根尖（2n=2x=16）四倍体洋葱根尖（2n=4x=32）四、仪器、药品、用具显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、冰箱、恒温箱或水浴锅、天平、量筒、培养皿、青霉素小瓶、盖玻片、载玻片、镊子、刀片、吸管、洗瓶、吸水纸等改良苯酚品红染色液、1N盐酸、秋水仙碱、8-OH喹啉、无水酒精、冰醋酸、KCl等五、实验内容和方法1．解离取出供试材料二倍体洋葱根尖（2n=2x=16）和四倍体洋葱根尖（2n=4x=32）,分别放入不同的青霉素小瓶中水洗3遍，弃去水。
再加入1N盐酸，放入60℃恒温箱解离4—10min后，弃去盐酸，水洗根尖3遍。
2．染色取一根尖于载玻片上，仅切取生长点部位，弃去其余部分。
加一滴改良苯酚品红染液，边用镊子夹碎边染色5min，或整染30min，再加上盖玻片。
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植物基因组DNA的提取（CTAB法）
一、原理
植物组织中绝大部分是核DNA，它和组蛋白、非组蛋白结合在一起，以核蛋白（即染色质或染色体）的形式存在于细胞核内。
CTAB是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度（0.3mol/L NaCl）时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。
二、实验材料、仪器及试剂
1、仪器
水浴锅；混匀器；高速冷冻离心机；移液器；754紫外分光光度计；液氮罐；水平电泳槽；电泳仪；一次性手套；吸头；1.5 mL离心管。
2、材料与药品
植物材料，以幼苗、嫩叶含DNA高。
液氮；氢氧化钠；CTAB；Tris；氯仿；乙醇；RNA酶；硼酸；溴酚蓝；异戊醇；β-巯基乙醇；盐酸；异丙醇；EDTA；GoldView核酸染料；琼脂糖；甘油；DNA分子量标记（DNA marker）。
三、操作方法
（1）按1 g样品3 ml DNA提取液的比例，取相应的园艺植物叶片，加入DNA提取液后，在研钵中充分磨碎；取3ml左右研磨后的液样于5 mL离心管中，65℃水浴35分钟以上，其间颠倒混匀一次。
（2）加等体积的氯仿：异戊醇（24：1）溶液，上下颠倒摇匀后，10000 rpm下离心10分钟，取吸上清液于一新的离心管中。
（3）再加两倍体积的预冷异丙醇，上下颠倒混匀后，10000 rpm下离心10分钟，弃上清。
（4）用3 mL 70%乙醇洗涤沉淀，重复一次，在室温下倒置晾干。
（5）沉淀用100 uL TE溶液溶解，用TE（pH8.0）作空白对照，于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值，计算A260/A230和A260/A280的比值，并换算出核酸的含量。
（6）琼脂糖凝胶板的制备
（7）加样：将样品与溴酚蓝按4：1的比例混合，用移液器缓慢加入凝胶样品孔中，点样量为每孔5 μgDNA。
（8）电泳：点样端接负极，电泳开始时，可用较高的电压，如100伏特，这样可使样品很快进入胶内，而减少样品扩散，待样品进入胶内即可保持每厘米5伏特左右的电压，DNA 在电泳中向正极移动。
当溴酚蓝的区带移至距凝胶底部1-2cm，停止电泳，当胶板为10-15cm的长度时，电泳时间一般为2小时左右。
（9）观察与鉴定
电泳结束后，取出凝胶板，在波长为254nm的凝胶成像系统下，观察电泳图谱，如果电泳条带清晰（如果EB染色看到桔黄色荧光条带，GV染色则看到绿色荧光条带），将凝胶照相。
根据标准DNA的电泳图谱，可以得知样品DNA的分子大小。
园艺植物转座元件的分子标记分析
一、原理
IRAP 标记技术是根据大麦反转录转座子BARE-1 的LTR 外侧保守序列设计引物，从而可以扩增出相邻两个同一家族的反转录转座子成员间的片段，这两个相邻的反转录转座子可以是同向排列，也可以是反向排列。
其扩增谱带在琼脂糖凝胶上能有效分离。
REMAP 标记技术是用以检测反转录转座子与相邻微卫星之间DNA 多态性。
进行REMAP 分析需要两个引物，一个是与反转录转座子外侧保守序列互补的引物，另一个是与微卫星重复序列互补的引物（SSR引物）。
其扩增谱带在琼脂糖凝胶上能有效分离。
二、设备和试剂
1、设备
PCR仪，电泳仪、电泳槽，一次性手套，吸头，PCR管等。
2、试剂
需要合成引物；dNTPs，Taq DNA聚合酶。
三、操作步骤
1、引物来源：菠萝、菠萝蜜
2、PCR反应体系
反应体系为20μL。
其中包括，1×PCR缓冲液；2.5 mmol/L MgCl2，0.2 mmol/L dNTPs，6 pmol引物，1 U Taq DNA聚合酶，模板DNA 30 ng。
PCR扩增反应程序设定为，94 ℃预变性4 min；94 ℃变性30 s，退火温度根据不同引物设定，时间为30 s，72 ℃延伸2 min，40个循环；循环结束后72 ℃延伸10 min，4 ℃终止反应。
3、PCR产物检测
1.5% 琼脂糖凝胶电泳，上样量10μL (1μL负载缓冲液和9μL PCR产物)。
6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，上样量3μL (2μL PCR产物和1μL负载缓冲液) ，银染检测。
Bio2Rad GelDocTM XR凝胶成像系统采集图像。