化学检验工(高级).

B. 32%
C. 80%
D. 16%
维生素B12的水溶液在361nm处的E1%1cm值是207， 盛于1cm吸收池中，测得溶液的吸光度为0.456，计 算溶液浓度。
1.6 引起偏离朗伯比耳定律的因素

1. 吸收定律本身的局限性
朗伯比耳定律只有在稀溶液中才能成立。(为什么)
由于在高浓度时 (c>0.01mol/L) ，吸收质点之间的
化学检验工（高级）
第一章 分光光度法
源自文库
分 光 光 度 法

分光光度法是根据物质对不同波长 的单色光的吸收程度不同而对物质
进行定性和定量的分析方法。
1.1 光的性质

光是一种电磁波： 1）波动性 波长λ、频率v、光速c、波数(cm-1)等参数。
c v
2)粒子性(光量子)
E = hv
1.2 物质对光的选择性吸收
1.5 吸 光 系 数


（D）1. 某有色溶液，当用1cm吸收池时，其透光率 为T，若改用2cm吸收池，则透光率应为 A. 2T B. 2lgT C. T D. T2 （D）2. 一遵守朗伯－比耳定律的溶液，吸收池厚度 不变，测得透光度为40%，如果该溶液浓度增加1倍， 则该溶液的透光度为
A. 20%

高吸光度差示法
低吸光度差示法 极限精密差示法
1.8 定性及定量分析方法



( ×)1. 在多组分的体系中，在某一波长下，如果各种 对光有吸收的物质之间没有相互作用，则体系在该 波长的总吸光度等于单个组分吸光度的和。 ( C )2. 用普通分光光度法测得标液c1的透光度为20%， 试液的透光度为 12% ；若以示差分光光度法测定以 c1 为参比，则试液的透光度为 A. 40% B. 50% C. 60% D. 70% ( D )3. 按一般光度法用纯溶剂做参比溶液时，测得某试 液的透光度为 10% 。若参比溶液换为透光度为 20% 的 标准溶液，其他条件不变，则试液的透光度将变为 A. 5% B. 8% C. 40% D. 50%


1.5 吸 光 系 数

吸光系数K物理意义：吸光物质在单位浓度、 单位厚度时的吸光度。
1. 质量吸光系数 c单位g/L，b单位cm，K单位L ·g-1 ·cm-1 A = Kbc 2. 摩尔吸光系数 c单位mol/L，b单位cm，ε单位L ·mol-1 ·cm-1 A = εbc
1.5 吸 光 系 数
2. 分光光度计的类型

1)单光束分光光度计 2)双光束分光光度计 3)双波长分光光度计
1.8 定性及定量分析方法
1. 定性分析
光谱比较法 2. 定量分析

1)标准曲线法 2)直接比较法 A标 = Kbc标 A样 = Kbc样
A样 c样 c标 A标
1.8 定性及定量分析方法
3)差示分光光度法 采用已知浓度的成分与待测溶液相同的溶 液作参比溶液。
1.4 光吸收基本定律—朗伯比尔定律
b I0
c
It
透光率(T%) = It /I0 吸光度(A) =
－lgT = Kbc
1.4 光吸收基本定律—朗伯比尔定律

( )1. 朗伯－比耳定律的应用条件：一是必须使 用单色光；二是吸收发生在均匀的介质；三是吸 收过程中，吸收物质相互不发生作用。
(× ) 2. 有色物质的吸光度A是透光度的倒数。 (× ) 3. 在分光光度分析中，入射光强度与透射光 强度之比称为吸光度，吸光度的倒数的对数为透 光率。 (× ) 4. 有色溶液的吸光度为0，其透光率也为0。
1.3 紫外-可见吸收光谱


1. 吸收峰的长移和短移 长移：吸收峰向长波移动的现象，红移。 短移：吸收峰向短波移动的现象，紫移。 增强效应：吸收强度增强的现象。 减弱效应：吸收强度减弱的现象。 2. 发色团和助色团 发色团：具有π轨道的不饱和官能团。 －C=O、－N=N－、－C≡C－ 助色团：本身不“生色”，但能使生色团生色效 应增强的官能团。 －OH、－NH2、－SH、－ Cl

1. 物质的颜色
远紫外 近紫外 可见
10~200nm
200~400nm
400~760nm
互补色：蓝－黄、绿－紫红、红－青 物质呈现的颜色是其反射光的颜色，也是其 吸收光的互补色。
1.2 物质对光的选择性吸收

（ ）1. 如果把适当颜色的两种光按一定强度比例混 合，也可成为白光，这两种颜色的光称为互补色光， 如绿色光与紫红色光互补。 （ ）2. 当一束白光通过KMnO4溶液时，该溶液选择 性地吸收了绿色光，所以KMnO4溶液呈现紫红色。 （ ）3. 透光物质不吸收任何光，黑色物质吸收所有 光。 C （ ）4. 某溶液本身的颜色是红色，它吸收的颜色是 A. 黄色 B. 绿色 C. 青色 D. 紫色


1.7 分光光度计
光源 单色器 吸收池 检测器 信号指示
1. 紫外-可见分光光度计主要部件
钨灯或碘钨灯 340 - 2500nm

1)光源
氢灯或氘灯
160 - 375nm
1.7 分光光度计

2)单色器
色散元件：棱镜、光栅。

3)吸收池 4)检测器
光电管、光电倍增管

5)信号检测系统
1.7 分光光度计

摩尔吸光系数ε意义：
1）吸光物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数。
2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。
3）可作为定性鉴定的参数。 4）同一物质在不同波长下的ε值不同。

思考： 符合朗伯比耳定律的某有色溶液，当溶液浓度增 加时， λmax、A和ε各有什么变化？改变吸收池厚度， 上述各物理量数值将有何变化？
平均距离缩小到一定程度，邻近质点彼此的电荷 分布都会相互受到影响，此影响能改变它们对特 定辐射的吸收能力，相互影响程度取决于 c，因此， 此现象可导致A与c线性关系发生偏差。
1.6 引起偏离朗伯比耳定律的因素



2. 化学因素 3. 仪器因素(非单色光的影响) 4. 其他光学因素 简答题： 1. 朗伯比耳定律为什么只有在稀溶液中才 能成立？ 2. 引起朗伯比耳定律偏离的原因是什么？



1.2 物质对光的选择性吸收

2. 吸收曲线
λmax= 525nm 1.0 0.5 3 2 1 460 500 540 580
1. 同一物质对不同波长 的光吸光度不同。 2. 不同浓度同一物质， 吸收曲线相似。
3. 不同物质，吸收曲线 不同。
波长/nm KMnO4溶液(不同浓度)的吸收曲线
吸光度 A