神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒说明书

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srgn elisa试剂盒使用说明书

srgn elisa试剂盒使用说明书SRGN Elisa试剂盒使用说明书一、引言SRGN Elisa试剂盒是一种用于检测人体内SRGN（serglycin）蛋白含量的工具。

SRGN是一种分布广泛的天然蛋白质，在多种细胞类型中表达，并参与多种生物学过程。

本文将介绍SRGN Elisa试剂盒的使用方法和注意事项。

二、试剂盒组成SRGN Elisa试剂盒包括以下组成部分：1. 微孔板：包含已涂层的SRGN抗体。

2. 标准品：一系列已知浓度的SRGN标准品。

3. 反应液：包括洗涤缓冲液、稀释液、显色液和停止液。

4. 底物：TMB底物。

三、试剂盒的使用步骤1. 取出所需微孔板的数量，将多余的微孔板密封保存。

2. 向每个孔中加入100μL稀释液，轻轻摇晃，将孔底液完全溶解。

3. 倒出孔内的液体，用洗涤缓冲液冲洗孔底3次，每次加入300μL，倒出液体。

4. 向每个孔中分别加入50μL标准品或待测样本，注意避免交叉污染。

5. 加入100μL SRGN抗体，轻轻摇晃，保证孔底液完全溶解。

6. 将微孔板密封，放置于37℃恒温箱中孵育1小时。

7. 倒出孔内的液体，用洗涤缓冲液冲洗孔底3次，每次加入300μL，倒出液体。

8. 向每个孔中加入100μL显色液，轻轻摇晃，保证显色液均匀分布。

9. 将微孔板密封，放置于室温下避光孵育15分钟。

10. 加入50μL停止液，轻轻摇晃。

11. 使用Elisa阅读器在450nm波长下测量各孔的吸光度值。

四、结果分析根据吸光度值绘制标准曲线，计算待测样本中SRGN的浓度。

根据吸光度值和标准曲线的关系，可以通过软件或手动计算得出结果。

五、注意事项1. 试剂盒的保存应在2-8℃下，避免阳光直射和冻结。

2. 打开试剂盒后，应尽快使用，避免试剂的长时间接触空气。

3. 使用试剂盒前，将所有试剂和标本恢复至室温。

4. 各步骤中的孔内液体倒出时，应使用吸头或洗涤器，避免污染。

5. 实验过程中，避免试剂的接触皮肤和眼睛。

NSE中文说明书

０．０５０─３７０ｎｇ／ｍｌ
先在－７０度以下速冻，然后转移至－２０度。
稀释：
含沉淀的标本使用前需离心。不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠
高于检测范围的标本可用ＮＳＥ稀释液稀释。建议１：５稀释。
防腐。
稀释后的标本ＮＳＥ含量必须高于５０ｎｇ／ｍｌ。
如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。
检测步骤：
· Ｅｌｅｃｓｙｓ系统缓冲液／测量池清洗液预热杯（ＰＣ／ＣＣ－Ｃｕｐ）货号０３０２３１４１
区别开来。α亚单位可出现在哺乳动物的多种类型组织中，而β亚单位主要存在于 · Ｅｌｅｃｓｙｓ反应杯／吸样头盒（ＡｓｓａｙＣｕｐｓ／ＡｓｓａｙＴｉｐｓＣｏｍｂｉｍａｇａｚｉｎｅＭ）
心肌和横纹肌组织中。二聚体烯醇化酶αγ和γγ称为ＮＳＥ或γ－烯醇化酶，主要存
货号１２１０２１３７
在于神经组织、神经内分泌细胞和这些组织来源的肿瘤组织中。
· Ｅｌｅｃｓｙｓ废物盒（ｗａｓｔｅｌｉｎｅｒ）货号０３０２３１５０
支气管癌：ＮＳＥ被认为是监测小细胞支气管癌的首选标志物。而ＣＹＦＲＡ２１－１则适合于 · Ｅｌｅｃｓｙｓ系统清洗液支架（ＳｙｓＣｌｅａｎＡｄａｐｔｅｒＭ））货号０３０２７６５１
如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。
提供的材料：
货号：１２１３３１１３，１００人份的ＥｌｅｃｓｙｓＮＳＥ试剂盒包含： · Ｍ链霉亲和素包被的微粒 · Ｒ１生物素化的抗ＮＳＥ抗体
正常参考值： ≤１５．２ｎｇ／ｍｌ。如有必要，各实验室应自联吡啶钌标记的抗ＮＳＥ抗体
一周或首轮治疗结束后，ＮＳＥ含量迅速降低。而治疗无反应者，血中ＮＳＥ持续升高或按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)酶联免疫分析(ELISA)

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中神经特异性烯醇化酶(NSE)的含量。

试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：请来电咨询保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)水平。

用纯化的小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入神经特异性烯醇化酶(NSE)，再与HRP标记的神经特异性烯醇化酶(NSE)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的神经特异性烯醇化酶(NSE)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)浓度。

神经元特异性烯醇化酶(NSE)作业指导书

物的反应曲线。
5.2 样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择 Workplace- Testslection ，在 Sequence No 栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个
项目或组合项目，点 SAVE键，样本号自动累加。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择 Workplace- Testslection ，在 Sequence No 栏输入起始标本号，然后选择该标本所
4. 仪器和校准
使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产 Elecsys 2010/E 170/E 411 全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：每批 NSE试剂盒必须用新鲜试剂和 NSE Cal 1, Cal 2 定标一次。另外，以下情况需要再次定标： Elecsys E170 分析仪：
· 一个月（同一批号试剂）
Elecsys 添加剂液（ SysWash）货号 11930346
Elecsys
适配器（Adapter for SysClean ），货号 11933159,
Elecsys
反应杯（ CUP），货号 11706829
Elecsys
加样头（ TIP），货号 11706802
Elecsys E170 分析仪
成夹心复合物。
· 第 2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
· 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，
通过光电倍增管进行测定。仪器通过 2点定标曲线以及试剂条码提供的母定标曲线计算出结果。
标（ BLANK键）或两点定标（ TWO POINT键）、全点定标（ FULL 键），再选择其它项目进行相应选择，最后点 SAVE，将定标物放

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒使用说明书

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中 1，25-二羟基维生素 D3(1,25-(OH)2D3)的含量。

小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠1，25-二羟基维生素 D3(1,25-(OH)2D3)水平。

用纯化的大鼠 1,25-(OH)2D3 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 1,25-(OH)2D3，再与 HRP 标记的 1,25-(OH)2D3 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。

TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的 1,25-(OH)2D3 呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠1，25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片（48） 2 片（96）密封袋 1 个 1 个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：90ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

大鼠神经元特异性烯醇化酶酶联免疫分析(NSE-ELISA)试剂盒使用

大鼠神经元特异性烯醇化酶酶联免疫分析（NSE-ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：E0537r预期应用ELISA法定量测定大鼠血清中NSE含量，有助于诊断小细胞肺癌及相关性疾病。

概述烯醇化酶（Enolase）是参与糖酵解的酶，催化2-磷酸甘油酸向磷酸烯醇丙酮酸的转化，由三种亚基（α、β、γ）组成的二聚体同功酶。

其中αγ和γγ烯醇化酶同功酶存在于神经元及神经来源的细胞中，也称为神经元特异性烯醇化酶（Neurone specific enolase ，NSE）。

在正常大鼠群中NSE含量较低，但在某些神经内皮细胞增生的恶性疾病，如神经母细胞瘤（Neuroblastoma），其含量往往上升。

由于小细胞肺癌（Small cell lung carcinoma，SCLC）是最常表现有神经内分泌性质的肿瘤，目前NSE也是SCLC最敏感最特异的肿瘤标志物。

肺癌是近年来发病率日趋增高的癌种，在种种肺癌中小细胞肺癌占大约20%，因此正确诊断肺癌的类型，特别是确定小细胞肺癌的诊断很重要。

小细胞肺癌患者的αγ和γγ同功酶含量均有不同比例的增高，因些必须在同一敏感度下同时检测NSE的αγ和γγ同功酶含量。

本试剂盒所用单抗只针对NSE的γ亚基，而与α或β亚基无交差反应。

据文献报道，NSE含量测定可作为肺癌、成神经细胞瘤、黑素瘤、精原细胞瘤以及中枢精神系统损伤的诊断指标。

同时，也可用于SCLC治疗前后疗效的监测与预后，以及SCLC 与其它型肺癌的鉴别诊断。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定血清中NSE水平。

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入NSE抗原、生物素化的抗大鼠NSE抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的NSE呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

神经元特异性烯醇化酶测定试剂盒技术要求

神经元特异性烯醇化酶测定试剂盒技术要求神经元特异性烯醇化酶（Neuron Specific Enolase, NSE）是一种在神经元和神经内分泌细胞中表达的特异性酶，在临床上被广泛应用于神经系统疾病的诊断与监测。

为了满足临床需求，神经元特异性烯醇化酶测定试剂盒的技术要求应包括以下几个方面。

首先，测定试剂盒的灵敏度要求较高，能够在低水平下快速、准确地检测到神经元特异性烯醇化酶的存在。

灵敏度的提高可以帮助医生更早地诊断和监测神经系统疾病，从而采取更及时的治疗措施。

其次，测定试剂盒的准确性也是至关重要的。

准确度可以通过标准物质的选择和优化实验条件来保证。

标准物质应具有高纯度和稳定性，并能与患者样本中的神经元特异性烯醇化酶相准确地匹配。

实验条件的优化包括反应时间、温度、pH值等，以确保测定结果的准确性和可重复性。

另外，测定试剂盒的选择性也是需要考虑的因素。

由于神经元特异性烯醇化酶与其他相似酶存在交叉反应的可能性，因此试剂盒应具有高度的选择性，能够辨别并测定神经元特异性烯醇化酶的特异性。

此外，试剂盒的稳定性也是一个重要的技术要求。

试剂盒应具有较长的保质期，并能够在不同存储条件下保持稳定性，以确保在各种实验条件下的测定结果的一致性和可比性。

最后，测定试剂盒的操作简便性和快速性也是一个重要考量因素。

操作简便性可以帮助医生和实验室人员节省时间和精力，提高工作效率。

同时，快速性也非常重要，尤其是对于紧急情况下的临床诊断和监测。

综上所述，神经元特异性烯醇化酶测定试剂盒的技术要求应包括高灵敏度、准确性、选择性、稳定性、操作简便性和快速性。

这些要求的满足，可以提高临床应用中的诊断准确性和效率，为神经系统疾病的早期诊断和监测提供有力支持。

神经元特异性烯醇化酶(NSE)定量检测试剂盒风险分析实施报告

神经元特异性烯醇化酶（NSE）定量检测试剂盒(时间分辨免疫荧光法)风险分析报告苏州生物技术有限公司风险分析报告神经元特异性烯醇化酶定量检测试剂盒（NSE TRIFMA）用于定量检测人血清NSE的含量。

本试剂盒对样本的检测不在人体内或人体上直接进行，因此不会对受检者构成任何直接的风险。

本试剂使用的荧光检测仪、洗板机、振板器等仪器在使用和存放过程中不会产生对人体和环境有害的辐射或其它类型的能量危害。

但由于样本组成的复杂性、试剂本身的局限性（所有免疫诊断试剂盒都不具有100%的灵敏度和特异性）以及使用者对方法的理解和操作上可能的失误，在某些情况下，也可能出现错误的检测结果，导致错误的判断，因此构成间接风险；本风险分析报告主要列举了与试剂盒相关的生物学危害、环境危害、有关使用的危害和由功能失效、贮存及失效引起的危害及其伴生风险等几个方面，并提出了相应的防范措施。

1、风险分析与对策1.1试剂盒本身引起的危害1.1.1测量的准确性、精密性方面的缺陷引起的危害分析：NSE TRIFMA测量的准确性主要由抗体的特异性、校准品（或标准品）的赋值正确与否、试剂盒工艺参数优化水平等因素有关；试剂盒测量值在准确性上的缺陷可能导致假阴和假阳，引起误判；试剂盒测量值在精密性上的缺陷会引起分析内和分析间测量值的不一致，导致矛盾的测量结果，也会引起误判。

风险控制措施：本试剂盒使用高度特异的高亲合性抗NSE单克隆抗体为原料，使用国内外广泛使用的Roche NSE ECLIA等试剂标准品校正本试剂盒校准品的浓度，对标记、反应时间、试剂使用浓度等多个方面优化实验参数，使检测达到临床检验所须的灵敏性和特异性，并确保分析内/分析间测定变异、批次内/批次间不一致性在企业标准的规定范围之内。

1.1.2 试剂在贮存稳定性方面可能引起的危害分析：试剂的贮存稳定性存在缺陷，在标明的贮存期限内可能出现样本测定值准确性、精密性变差等问题，造成诊断上的误判。

大鼠神经特异性烯醇化酶NSE

大鼠神经特异性烯醇化酶NSE ELISA本试剂盒用于定量检测大鼠血清和血浆中的NSE的浓度。

本试剂盒采用双抗夹心ELISA法。

抗大鼠NSE单抗包被于酶标板上，大鼠标本中的NSE会与单抗结合。

加入生物素化的抗大鼠NSE（二抗），它将与结合在单抗上的大鼠NSE结合而形成免疫复合物，未结合的将被洗去。

辣根过氧化物酶标记的Streptavidin 将与二抗的生物素结合，多余的物质会被洗掉。

加入TMB显色。

大鼠NSE的浓度与OD(450nm)成正比。

酶标板(Coated Wells) 48wells Anti-Rat NSE Biotin 1 vial浓缩洗涤液(40X)(Washing Concentrate)12.5ml 标准品(Standards) 1 vial显色液(TMB Substrate) 6ml 标准品稀释液(Standard Diluent) 7ml终止液(Stop Solution) 6ml 浓缩酶联物（HRP） 1 vial酶联物稀释液(HRP Diluent) 7ml 生物素稀释液(Biotin Diluent)7ml1.可在450nm处进行读数的酶标仪；2.能精确吸取10-200µL的移液器；3.可调多道（8）移液器（50－200µL）；4.供可调多道移液器使用的试剂存放槽；5.洗瓶或洗板机；6.蒸馏水或去离子水；7.1升的圆柱形量筒；8.移液器：1和（10或25 mL）；9.移液器枪头；10.纸巾；11.计时器，用以监控温育步骤；12.处理池和消毒剂（例如：0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水）；1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。

所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。

使用后立即冷藏保存试剂。

2.洗板不正确可以导致不准确的结果。

在加入HRP或底物前确保尽量吸干孔内液体。

温育过程中不要让微孔干燥掉。

3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。

神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求参考版

医疗器械产品技术要求编号：
神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 1.产品型号/规格及其划分说明
1.1型号规格
480测试/盒，96测试/盒。

1.2结构组成
校准品靶值批特异，详见定值单。

不同批号的组分不得混用。

1.3适用范围
用于体外定量测定人血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）的含量。

2.性能指标
2.1外观
组分齐全、完整；溶液无混浊，无沉淀或絮状物；微孔板包装袋无破损、漏气现象。

2.2准确度
回收率应在90%～110%范围内。

2.3线性
在[0.5，200]ng/mL范围内，r应不小于0.9900。

2.4空白限
应不大于0.50ng/mL。

2.5精密度
2.5.1批内精密度
手工操作应不大于10.0%，全自动操作应不大于8%。

2.5.2批间精密度
应不大于15.0%。

2.6特异性
根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定了校准品的来源、赋值以及不确定度等内容，溯源至企业工作校准品。

2.8稳定性
2.8.1效期末稳定性
NSE试剂盒在2～8℃保存，有效期12个月。

在NSE试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1～2.4，2.5.1项，结果应符合各项要求。

2.8.2校准品复溶后稳定性
复溶后的校准品在2～8℃条件下保存7天后检测2.2～2.4，2.5.1项，结果应符合各项要求。

神经元特异性烯醇化酶抗体-说明书

Similarity: Belongs to the enolase family.
Gene ID: 2026
Database links: Entrez Gene: 2026 Human
Entrez Gene: 13807 Mouse Entrez Gene: 24334 Rat Omim: 131360 Human SwissProt: P09104 Human SwissProt: P17183 Mouse SwissProt: P07323 Rat Unigene: 511915 Human
Tissue/cell: Neuroblastoma cells; Block endogenous peroxidase by 3% Hydrogen peroxide for 30min; Blocking buffer (normal goat serum,C-0005) at 37℃ for 20 min; Incubation: Anti-NSE/ENO2/γ Enolase Polyclonal Antibody, Unconjugated(bs-1027R) 1:200, overnight at 4°C, followed by conjugation to the secondary antibody(SP-0023) and DAB(C-0010) staining
Tissue Specificity: The alpha/alpha homodimer is expressed in embryo and in most adult tissues. The alpha/beta heterodimer and the beta/beta homodimer are found in striated muscle, and the alpha/gamma heterodimer and the gamma/gamma homodimer in neurons.

神经元特异性烯醇化酶NSE时间分辨荧光免疫分析试剂盒的临床性能评价

【关键词神经元特异性烯醇化酶】 (NSE);时间分辨荧光免疫分析(TRFIA);体外诊断 (IVD)
The Clinic Study of the Neuron Specific Enolase (NSE) Diagnost c Kit by Time-Resolved Fluoroimi munoassay 仃RFIA) CUI Xiaobing', WANG Biao', ZHANG Guolanz DONG ZhiningZ XU Weiwen'* , , (I. Souther M n edical Universit , GuangDong, GuangZhou 510515, China; 2. GuangZhou Darui Antibody COI TD; y GuangDong, GuangZhou 510663, China; 3. School of Biotechnology, Souther M n edical Universit , GuangDong, y GuangZhou 510515, China) [ABSTRAC刀 Objective To investigate the value of the newkit (NSE-TRFIA) for detection of NSE by the time- resolved f uoroimm l unoassay 口 RFIA M ). ethods Compared with the techniques of ECLIA, m easuring the level' of NSE from the 1008 blood samples with the NSE -TRFIA. Verified 师 W ALLC ` NSE-TRFIA. Results The positive accordant ratio was 98.04%, the negative accordant ratio was 98.39%. The

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。

ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。

本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。

1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。

-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。

确保样本的质量和浓度满足实验要求。

-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。

-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。

2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。

-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。

-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。

-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。

洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。

-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。

-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。

-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。

-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。

-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。

终止剂的选择需符合试剂盒的要求。

-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。

3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。

神经元特异性烯醇化酶NSE标准操作程序SOP文件

2）SCLC与NSCLC（非小细胞肺癌）的鉴别诊断。
据报道，如果以20ug/L为诊断界限，90%以上的SCLC呈阳性，而NSCLC阳性率仅为12%左右；
3）SCLC与良性肺部疾病的鉴别诊断
据报道，良性肺病的NSE>20ug/L阳性率仅为3%左右。
神经母细胞瘤
神经母细胞瘤是常见的儿童肿瘤，占1-14岁儿童肿瘤的8％-10％。NSE作为神经母细胞瘤的标志物，对该病的早期诊断具有较高的临床应用价值。神经母细胞瘤患者的尿中NSE水平也有一定升高，治疗后血清NSE水平降至正常。血清NSF水平的测定对于监测疗效和预报复发均具有重要参考价值，比测定尿液中儿茶酚胺的代谢物更有意义。
其他肿瘤
甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、转移性精原细胞癌、黑色素瘤、胰内分泌瘤等也能导致NSE增高。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-33
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
原理：
采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。
·第1步：标本、生物素化的抗NSE单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗NSE单抗混匀，形成夹心复合物。
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-02-33
版序：ABCD
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概述：
神经元特异性烯醇化酶(neurone specific enolase,NSE)，是烯醇酶的异构体。又称2磷酸-D-甘油酸水解酶同工酶，是参与甘油分解的最后一个酶，使2-磷酸甘油酸向烯醇化丙酮酸转化。仅存在于神经元和神经内分泌细胞内及APUD组织。由3个独立的基因片段编码3种免疫学性质不同的亚基α、β、γ，组成5种形式的同工酶αα、ββ、γγ、αγ、βγ。二聚体是该酶分子的活性形式，γ亚基同工酶存在于神经原和神经内分泌组织，称为NSE。α亚基同工酶定位于胶质细胞，称为非神经原特异性烯醇化酶（NNE）。NSE和NNE的分子量分别为78ku和87ku。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备：根据实验要求，准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。

例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。

3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。

神经元特异性烯醇化酶

神经元特异性烯醇化酶神经元特异性烯醇化酶（Neuron-specific enolase）神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）是一种在神经系统中高度表达的酶，属于烯醇化酶家族。

它是一种非常重要的标记物，用于检测神经元的功能状态、损伤程度以及各种神经系统疾病的诊断和监测。

一、NSE的基本特性NSE是在神经元中高度表达的一个酶，也称为γγ-烯醇化酶，它主要参与糖酵解途径中的催化作用。

在人体中，NSE主要存在于大脑、脊髓和外周神经系统中的神经细胞体和轴突。

由于NSE仅在神经系统中表达，并且与其他组织中的烯醇化酶有明显区别，因此被广泛应用于神经系统疾病的诊断和监测。

二、NSE的生理功能1. 参与糖酵解途径NSE作为一种催化酶，在神经元中参与糖酵解途径，将葡萄糖分解为丙酮酸和乳酸，提供能量给神经细胞。

2. 维持神经元的正常功能NSE在神经元的能量代谢中发挥着重要作用，它能够调节神经元的能量供应，维持神经元的正常功能。

3. 参与神经元的发育和成熟研究表明，NSE在神经系统的发育和成熟过程中起着重要作用。

它参与了大脑皮层神经元的生成和迁移，对神经元的形成和连接具有调控作用。

三、NSE与神经系统疾病的关系由于NSE在神经系统中高度表达，在神经系统疾病中有一些特殊的表现，因此NSE被广泛用于神经系统疾病的诊断和监测。

1. 脑损伤脑损伤是指各种原因引起的大脑功能受损。

在脑损伤过程中，由于神经元受到损伤，会释放出大量的NSE。

因此，NSE的检测可以用作脑损伤的指标，在临床上被广泛应用于脑损伤的诊断和评估。

2. 脑肿瘤脑肿瘤是指发生在大脑、脑膜和脑室内的肿瘤。

研究表明，NSE在脑肿瘤的发生和发展过程中发挥着重要作用。

脑肿瘤细胞中的NSE 水平显著升高，因此可以用作脑肿瘤的标记物，帮助医生进行诊断和治疗监测。

3. 神经退行性疾病神经退行性疾病是一类以神经元损伤和退行性变为特征的疾病，如阿尔茨海默病、帕金森病等。