如何发现过氧化氢

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双氧水中过氧化氢的测定-高锰酸钾法

双氧水中过氧化氢的测定-高锰酸钾法

实验十四过氧化氢含量的测定—高锰酸钾法【目的要求】1.掌握高锰酸钾标准溶液的配制和标定方法。

2.学习高锰酸钾法测定过氧化氢含量的方法。

【实验原理】H2O2是医药、卫生行业上广泛使用的消毒剂,它在酸性溶液中能被KMnO4定量氧化而生成氧气和水,其反应如下:5H2O2+2MnO4-+6H+=2Mn2++8H2O+5O2滴定在酸性溶液中进行,反应时锰的氧化数由+7变到+2。

开始时反应速度慢,滴入的KMnO4溶液褪色缓慢,待Mn2+生成后,由于Mn2+的催化作用加快了反应速度。

生物化学中,也常利用此法间接测定过氧化氢酶的活性。

在血液中加入一定量的H2O2,由于过氧化氢酶能使过氧化氢分解,作用完后,在酸性条件下用标准KMnO4溶液滴定剩余的H2O2,就可以了解酶的活性。

【仪器试剂】台秤(0.1g)、天平(0.1mg),试剂瓶(棕色),酸式滴定管(棕色,50cm3),锥形瓶(250cm3),移液管(10cm3、25cm3);H2SO4(3 mol·dm-3),KMnO4(s),Na2C2O4(s,AR.),双氧水样品(工业)。

【实验步骤】1. KMnO4溶液(0.02 mol·dm-3)的配制称取1.7g 左右的KMnO4放入烧杯中,加水500cm3,使其溶解后,转入棕色试剂瓶中。

放置7-10天后,用玻璃砂芯漏斗过滤。

残渣和沉淀则倒掉。

把试剂瓶洗净,将滤液倒回瓶内,待标定。

2. KMnO4溶液的标定精确称取0.15~0.20g预先干燥过的Na2C2O4三份,分别置于250cm3锥形瓶中,各加入40cm3蒸馏水和10cm33 mol·dm-3 H2SO4,水浴上加热直约75-85℃。

趁热用待标定的KMnO4溶液进行滴定,开始时,滴定速度宜慢,在第一滴KMnO4溶液滴入后,不断摇动溶液,当紫红色退去后再滴入第二滴。

溶液中有Mn2+产生后,滴定速度可适当加快,近终点时,紫红色褪去很慢,应减慢滴定速度,同时充分摇动溶液。

验证过氧化氢的存在及含量测定实验

验证过氧化氢的存在及含量测定实验

验证过氧化氢的存在及含量测定实验一.探究冲动2004年年底的巨能钙事件闹得沸沸扬扬,大家对食品,保健品质量格外的关注。

就其中涉及到的过氧化氢(俗称双氧水)对人体的危害也引起的大家的重视。

而过氧化氢是中学常见的物质。

现在我们来探讨如何测定过氧化氢的存在,将大家已学的知识同实际的生活联系在一起,在研究中学习知识,增长技能。

二.思维的火花过氧化氢对人体的危害主要在以下几方面:a、过氧化氢可致人体遗传物质DNA损伤及基因突变,与各种病变的发生关系密切,长期食用危险性巨大;b、过氧化氢可导致老鼠及家兔等动物致癌,从而可能对人类具有致癌的危险性。

c、过氧化氢可能加速人体的衰老进程。

过氧化氢与老年痴呆,尤其是早老性痴呆的发生或发展关系密切;d、过氧化氢与老年帕金森氏病、脑中风、动脉硬化及糖尿病性肾病和糖尿病性神经性病变的发展密切相关;e、作为强氧化剂通过耗损体内抗氧化物质,使机体抗氧化能力低下,抵抗力下降,进一步造成各种疾病;f、过氧化氢可能导致或加重白内障等眼部疾病;g、通过呼吸道进入可导致肺损伤;h、多次接触可致人体毛发,包括头发变白,皮肤变黄等;i、食入可刺激胃肠粘摸导致胃肠道损伤及胃肠道疾病;j、小分子过氧化氢经口摄入后很容易进入体内组织和细胞,可进入自由基反应链,造成与自由基相关的许多疾病。

H2O2具有杀菌、消毒、漂白等作用。

H2O2既可作为氧化剂,又可作为还原剂。

三.实验设计设计思路一一.动植物在代谢中产生的过氧化氢,对机体是有毒的。

机体通过过氧化氢酶,催化过氧化氢迅速分解成水和氧气而解毒。

MnO2也可催化这一反应。

下面分别用MnO2和猪肝中的过氧化氢酶催化这一反应。

实验步骤1将豌豆粒大小的新鲜猪肝脏研成肝糜备用。

2取三只试管,编号1,2,3。

分别加入10mL过氧化氢的体积分数为3%的溶液。

同时把肝糜投入1号试管,向2号试管内加入少量的MnO2,3号试管做空白实验,立即用橡胶塞封住试管。

3轻轻地振荡三只试管,将带火星的木条分别放在试管口,检验试管内的气体。

过氧化氢测试方法

过氧化氢测试方法

过氧化氢测试方法
过氧化氢测试方法通常有以下几种:
1. 试纸法:将试剂纸浸泡在过氧化氢溶液中,根据试纸上的颜色变化来判断过氧化氢的浓度。

通常,试纸会变色或出现斑点,颜色的深浅或斑点的大小与过氧化氢浓度成正比。

2. 化学滴定法:使用一种已知浓度的还原剂(如硫酸亚铁)滴定过氧化氢溶液,通过滴定剂的消耗量来确定过氧化氢的浓度。

3. 电化学法:使用电化学电极(如氧化还原电极)检测过氧化氢的浓度。

一种常用的电极是氧化还原电极(比如铂电极),它能测量过氧化氢的氧化还原电位,从而确定过氧化氢的浓度。

4. 光谱法:利用分光光度计、紫外-可见吸收光谱仪或荧光光谱仪等仪器,测量过氧化氢的吸光度或发射光强,通过与标准曲线或已知浓度的标准溶液对比,确定过氧化氢的浓度。

请注意,在进行过氧化氢测试时应注意安全,避免直接接触过氧化氢溶液或其蒸汽,并遵循相关的操作指南或安全操作程序。

过氧化氢的鉴定反应

过氧化氢的鉴定反应

过氧化氢的鉴定反应过氧化氢(H2O2)是一种常见的化学物质,也被称为双原子氧。

它是一种无色液体,常见于工业和实验室中,具有强氧化性。

过氧化氢可以通过多种方法鉴定,下面将详细介绍其中的一些。

1. 二氧化锰试纸法这是一种简单而常用的鉴定过氧化氢的方法。

该方法使用含有二氧化锰(MnO2)的试纸,过氧化氢与二氧化锰反应生成氧气和水。

当二氧化锰被还原时,从黑色变为棕色。

该方法的优点是操作简单,反应迅速,但存在一定的误差。

2. 硼酸-硫酰氯法该方法使用硼酸和硫酰氯反应生成硼酸酯,该酯可与大肠杆菌的硫酸还原酶发生酶促反应,产生可滴定的硫酰氯。

通过滴定该硫酰氯溶液,可以确定过氧化氢的浓度。

3. 高锘合物法这是一种使用相关过渡金属配合物检测过氧化氢的方法。

其中,高锘是一种由过渡金属锝(Tc)和配体制备的配合物。

过氧化氢可以氧化高锘配体为高级氧配体,进而改变高锘配合物的吸收光谱。

通过测量高锘配合物的光谱变化,可以确定过氧化氢的浓度。

4. 氧电极法该方法利用氧电极检测过氧化氢的氧化还原反应。

电极上涂覆有一层催化剂,催化剂可促进过氧化氢的反应。

电极的电流与溶液中过氧化氢的浓度成正比。

通过测量电极的电流变化,可以确定过氧化氢的浓度。

5. 分光光度法这是一种利用过氧化氢的颜色反应进行检测的方法。

过氧化氢与介质中的某些物质反应,产生吸收波长在240 nm至320 nm 之间的有色化合物。

测量这些化合物的吸光度,可以确定过氧化氢的浓度。

除了上述方法外,还有许多其他鉴定过氧化氢的方法,如荧光法、比色法等。

这些方法各有优劣,适用于不同的实际应用场景。

总之,通过以上的介绍,我们可以看到过氧化氢的鉴定可以使用多种方法,每种方法都有其特定的原理和适用范围。

在实际应用中,我们可以根据需求选择适合的方法,并结合其他技术手段进行分析确定过氧化氢的浓度或存在情况。

电还原鲁米诺电化学发光法测定过氧化氢

电还原鲁米诺电化学发光法测定过氧化氢
鲁 米 诺 电 化 学 发 光 体 系 除 具 有 电化 学 发 光 方 法 普 遍 所具 有 的 灵 敏 度 高 、 现 性 好 、 光 反 重 发 应 可 控 制 性 强 , 且 在 提 高 选 择 性 方 面也 有 有 利 的 因 素 等 优 点 外 , 具 有 发 光 量 子 产 率 高 、 而 还 氧 化 电位 低 、 剂 稳 定 、 溶 液 中 的氧 气 等 杂 质 的 “ 忍 ” 度 强 等 自身 特 有 的优 点 , 试 对 容 程 因而 受 到 人 们 的 广 泛 关 注 _ J 目前 , 米 诺 电 化 学 发 光 体 系 已 被 成 功 的 用 于 许 多 无 机 物 和 有 机 物 的 分 J . q 鲁 析 , 取 得 了 良好 的 分 析 特 性 并 . 是 , 内外 对 鲁 米 诺 电 化 学 发 光 体 系 的 研 究 和 应 用 大 多 但 国 都 集 中于 在 各 种 不 同 的 电极 材 料 上 电 氧 化 鲁 米 诺 进 行 发 光 分 析 的 研 究 , 基 于 电 还 原 鲁 米 诺 对 电化 学 发 光 分 析 法 , 有 S. l l 在 1 9 仅 Kuma a 9 6年 曾经 报 道 过 将 鲁 米 诺 作 为 发 光 标 记 物 , 氧 在 化 铝 电极 上 电还 原 鲁 米 诺 进 行 免 疫 分 析 测 定 鲁 米 诺 的 研 究 . 未 见 基 于 以 鲁 米 诺 作 为 发 光 物 还 在 各 种 材 料 的 电极 上 电还 原 鲁 米诺 进 行 电化 学 发 光 分 析 的研 究 . 们 发 现 , 传 统 的碳 糊 电极 我 当 中含 有 少 量 的 C TMA 时 , 米 诺 在 该 修 饰 电 极 上 的 弱 电 化 学 还 原 电 化 学 发 光 信 号 被 H2) B 鲁 ( 2 所 增 敏 . 此 建 立 了 一 种 新 的 测 定 过 氧 化 氢 的 电 化学 发 光 分 析 方 法 . 们 的 研 究 结 果 进 一 步 表 据 我

过氧化氢测定方法

过氧化氢测定方法

过氧化氢测定方法过氧化氢(H2O2)是一种无色、无臭的氧化剂,常用于消毒和漂白等各种应用。

测定过氧化氢的方法有很多种,其中包括化学分析法、光谱法和电化学法等。

下面将重点介绍几种常用的过氧化氢测定方法。

一、重铬酸钾滴定法重铬酸钾滴定法是一种经典的测定过氧化氢的方法。

过氧化氢在酸性条件下与重铬酸钾反应生成Cr3+,其浓度可以通过滴定反应终点来测定。

该方法需要使用硫酸作为溶液的酸性介质,并加入过量的重铬酸钾作为滴定剂。

滴定时,重铬酸钾溶液的颜色从橙色变为绿色,终点可以通过光电比色法或视觉判断来确定。

通过计算反应物的化学计量关系,可以确定过氧化氢的浓度。

二、高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)也可以用于测定过氧化氢的浓度。

该方法常用于药物分析和生化实验中。

基本原理是通过柱效液相色谱仪将样品中的过氧化氢与酶反应生成产物,并通过紫外探测器检测产物的浓度。

该方法的优点是准确、快速、灵敏度高,并且可以同时测定多种物质。

三、连续荧光法连续荧光法也是一种常用的过氧化氢测定方法。

它基于过氧化氢与荧光染料发生反应产生荧光的原理。

荧光强度与过氧化氢的浓度成正比,可以通过荧光光谱仪或荧光显微镜观察并测定荧光信号的强度来确定过氧化氢的浓度。

该方法的特点是选择性好、敏感度高,可以在细胞和体内定量检测过氧化氢的产生和消除情况。

四、电化学法电化学法也是常用的测定过氧化氢的方法之一。

该方法是利用过氧化氢在电极表面的氧化或还原反应来测定其浓度。

常见的电极有导电玻璃碳电极、金电极和铂电极等。

通过测量电极上的电流或电势变化,可以推算出过氧化氢的浓度。

电化学法的优点是操作简便、灵敏度高,适用于实时、在线测定。

综上所述,过氧化氢的测定方法包括重铬酸钾滴定法、高效液相色谱法、连续荧光法和电化学法等。

选择合适的方法需要考虑样品的性质、浓度范围和分析要求等因素。

无论使用何种方法,都需要根据实际情况进行实验设计和数据分析,以确保测定结果的准确性和可靠性。

实验过氧化氢浓度

实验过氧化氢浓度

实验过氧化氢浓度小伙伴们,今天我想给你们讲讲我做的一个超有趣的实验,是关于过氧化氢浓度的哦。

过氧化氢这个东西啊,可能有些小伙伴在医院里见过,就是那种用来消毒伤口的药水。

它看起来就像普通的水一样,可是它可神奇啦。

我先拿了一片新鲜的猪肝。

猪肝红红的,摸起来软软的还有点滑溜溜的。

我把猪肝放到低浓度的过氧化氢溶液里。

你们猜怎么着?开始慢慢有小气泡冒出来了,就像小鱼在水底吐泡泡一样,一个接着一个,但是气泡不是特别多,而且冒得也不快。

这时候我就在想,这个低浓度的过氧化氢和猪肝发生反应了,但是反应好像有点“温柔”。

然后我又把猪肝放到高浓度的过氧化氢溶液里。

不得了啦,就像火山爆发一样,好多好多气泡一下子就涌了出来。

这些气泡“咕噜咕噜”地往上冒,整个溶液都变得像在沸腾一样。

猪肝周围全是密密麻麻的气泡,感觉都要把猪肝给“淹没”了。

这高浓度的过氧化氢反应起来可真“猛”啊。

从这个实验里,我就发现过氧化氢的浓度不同,和猪肝反应的剧烈程度就不一样。

就像我们跑步,有的小伙伴慢慢跑,就像低浓度过氧化氢反应那样温和,有的小伙伴跑得特别快,就像高浓度过氧化氢反应那样剧烈。

我还做了一个小测试呢。

我用一根小木条,带火星的那种哦。

我把带火星的小木条放到低浓度过氧化氢和猪肝反应后的溶液上方,小木条没有太大的变化。

可是当我把带火星的小木条放到高浓度过氧化氢和猪肝反应后的溶液上方时,小木条一下子就复燃了。

这说明高浓度过氧化氢反应产生了更多能让小木条复燃的东西,其实就是氧气啦。

这个实验让我学到了好多。

我知道了不同浓度的过氧化氢有不同的“本事”。

在生活里呀,过氧化氢浓度不同用处也不一样呢。

低浓度的能轻轻消毒我们的小伤口,高浓度的可能就用在一些特殊的工业或者科学研究上。

我感觉自己就像一个小小的科学家,发现了一个大大的秘密。

小伙伴们,你们要是也对这些有趣的实验感兴趣,也可以自己试试哦,不过一定要注意安全呀。

测定h2o2氧化应激指标试剂

测定h2o2氧化应激指标试剂

测定h2o2氧化应激指标试剂
过氧化氢(H2O2)是生物体内最常见的活性氧分子,不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。

生命体内积累的H2O2可能会导致细胞膜脂质过氧化损害,加速细胞的衰老和解体,同时也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。

因此,准确测定H2O2的含量对于了解细胞的氧化应激状态具有重要意义。

过氧化氢检测试剂盒是一种常用的测定H2O2氧化应激指标的试剂。

这种试剂盒的检测原理是H2O2与硫酸钛反应生成的过氧化物-钛复合物黄色沉淀,溶解于强酸中后,其黄色深浅与过氧化氢浓度在一定范围内呈线性关系,因此可以通过比色法检测412nm 处的吸光度来测定H2O2的含量。

此外,还有其他一些方法可以测定H2O2的含量,如荧光法、化学发光法等,这些方法也都有相应的试剂盒可供选择。

在选择具体的测定方法和试剂时,需要根据实验的具体需求和条件来进行选择。

过氧化氢含量的测定

过氧化氢含量的测定

过氧化氢含量的测定:双氧水,是一种重要的无机化工产品,也是工业领域重要的氧化剂、漂白剂、消毒剂和脱氯剂。

在纺织、造纸、化工、轻工、医药、电子、食品、环保等领域应用广泛。

目前我国双氧水产品分工业级、试剂级、医药级和电子级,浓度有27.5%,35%,50%,70%等多种规格。

过氧化氢含量的测定H2O2在化学工业、医药工业、印染工业和食品行业等领域有着广泛的应用,可作为氧化剂、消毒剂、漂白剂等使用。

但H2O2在使用的过程中会产生一些羟基自由基,具有很强的氧化性,对人体有一定危害。

近年来,H2O2在环境中也普遍存在,因此对H2O2的检测具有重要的意义。

荧光光度法测定过氧化氢(一)实验部分1、仪器和试剂Cary Eclipse型荧光分光光度计。

H2O2储备溶液:取2mL30%H2O2稀释至500mL,用KMnO4法标定得准确浓度为4.06×10-2mol/L;H2O2工作溶液:1.624×10-4mol/L(临用前用储备溶液稀释);NaOH溶液:1mol/L;邻苯二胺:2×10-3mol/L;四羧基铁酞菁(FeC4Pc)0.0186g用3.5mL 0.2mol/L NaOH溶液溶解,用水定容至250mL,得到浓度为1.0×10-4mol/L。

所用试剂均为分析纯,实验用水均为二次去离子水。

2、实验方法在2支5mL刻度试管中,分别加入0.2mL NaOH,0.1mL FeC4Pc,0.4mL OPDA,其中1支管中加入一定量的H2O2工作液,用水稀释至5mL,摇匀,静置80min。

然后在荧光光度计上用1cm 石英比色皿,设置电压为700V,狭缝宽度为10nm,激发波长为423nm,发射波长为577nm,分别测定加有H2O2的溶液的荧光值F和不加H2O2的试剂空白的荧光值F0,计算△F=F-F0。

(二)结果与讨论1、体系的激发光谱和发射光谱固定λem扫描体系的激发光谱,当发射波长为577nm时,体系在423nm处产生一个较强的激发峰;固定体系的激发波长λex时,体系在577nm处产生一个较强的荧光峰。

过氧化氢的鉴定方法

过氧化氢的鉴定方法

过氧化氢的鉴定方法
过氧化氢是一种常见的化学物质,也被称为双氧水。

它具有强氧化性和杀菌性,因此被广泛应用于医疗、卫生、化工等领域。

在实验室中,准确鉴定过氧化氢的存在非常重要,下面将介绍几种常用的过氧化氢鉴定方法。

一、观察气泡产生
过氧化氢分解时会产生气体,因此可以通过观察气泡产生来鉴定其存在。

将待测液体滴加到酸性溶液中,如加入硫酸或盐酸,如果出现大量气泡,则可以判断为过氧化氢。

二、观察颜色变化
过氧化氢在催化剂的作用下能够发生氧化反应,产生颜色变化。

常用的催化剂包括过氧化钠、过氧化铁等。

将待测液体与催化剂混合后,观察是否出现颜色变化。

过氧化氢的存在会导致溶液颜色变深。

三、使用过氧化钠试纸
过氧化钠试纸是一种常见的过氧化氢鉴定试纸。

将试纸浸湿后放入待测液体中,如果试纸变蓝,则可以判断为过氧化氢的存在。

四、漂白现象
过氧化氢是一种强氧化剂,具有漂白作用。

将待测物质与含有色素的物质混合后,观察是否发生漂白现象。

如果颜色明显变浅或消失,则可以判断为过氧化氢。

五、化学反应
过氧化氢可以与某些物质发生特定的化学反应,从而鉴定其存在。

例如,过氧化氢能够与硫化钠反应生成硫,反应过程伴有明显的气体产生。

通过观察气体产生和颜色变化来判断是否存在过氧化氢。

总结起来,过氧化氢的鉴定方法包括观察气泡产生、观察颜色变化、使用过氧化钠试纸、观察漂白现象以及特定化学反应等。

在实验中,可以根据需要选择合适的鉴定方法来确认过氧化氢的存在。

这些方法简单易行,能够准确鉴定过氧化氢,为实验和应用提供了重要的参考依据。

过氧化氢的检测方法

过氧化氢的检测方法

过氧化氢的检测方法嘿,你问过氧化氢的检测方法啊?这可挺有意思呢。

有一种比较简单的方法是用二氧化锰。

把二氧化锰加到可能含有过氧化氢的溶液里。

如果有过氧化氢,就会看到有气泡冒出来,就像汽水被摇晃后的那种感觉。

这是因为过氧化氢遇到二氧化锰会分解,产生氧气,那些气泡就是氧气啦。

不过要注意哦,这个方法只能大概检测有没有过氧化氢,很难精确知道含量是多少。

还有一种方法是用化学试剂来检测。

比如说用碘化钾和淀粉溶液。

过氧化氢会和碘化钾发生反应,生成碘单质。

而碘单质遇到淀粉会变蓝,就像变魔术一样,溶液一下子就变色啦。

这就能很清楚地知道有过氧化氢存在啦。

而且呢,通过观察颜色变化的程度,还能大概推测过氧化氢的含量。

如果颜色变得很深,那可能过氧化氢的量就比较多;要是颜色只是浅浅地变蓝,那含量可能就少一些。

另外,也可以用一些仪器来检测。

像分光光度计这种高级玩意儿,它可以检测过氧化氢在特定波长下的吸光度。

这就像是给过氧化氢做个体检,通过检测吸光度来确定它的浓度。

不过这种方法需要有专业的仪器,还得会操作,一般是在实验室里用的比较多。

比如说有个学生,在做化学实验的时候,怀疑自己配的溶液里可能混进了过氧化氢。

他就想到了用碘化钾和淀粉溶液来检测。

他把碘化钾和淀粉溶液加进去,紧张地看着,结果溶液真的变蓝啦。

他就知道里面有过氧化氢。

然后他又想办法把过氧化氢除掉,这样他的实验才能继续正常进行呢。

所以说,过氧化氢的检测方法有不少呢。

不管是简单的化学试剂反应,还是用高级仪器,都能帮我们找到过氧化氢的踪迹。

现在你对过氧化氢的检测方法有点了解了吧?。

关于过氧化氢分子结构的历史

关于过氧化氢分子结构的历史

关于过氧化氢分子结构的历史
过氧化氢是一种常用的消毒剂和氧化剂,它的分子结构最初是由法国化学家Jacques-Louis Dulong在1818年进行研究。

经过多年的研究和实验,科学家们更加深入地了解了过氧化氢的分子结构。

下面我们将从历史的角度,分析过氧化氢分子结构的演变过程。

1. 初步研究
早在18世纪,人们已经开始研究过氧化氢。

当时的人们并不知道过氧化氢的分子结构,只是通过试验发现它具有氧化性和漂白性。

1818年,Dulong首先研究了过氧化氢的分子结构,得出了它由氧气和水分子组成的结论。

2. 进一步研究
随着科学技术的发展,越来越多的科学家开始致力于研究过氧化氢。

在19世纪中叶,人们发现过氧化氢分子中有两个氧原子,分别用原子式H2O2表示,将此称为“过氧”结构。

3. 现代研究
随着20世纪的到来,科学家们进行了更加深入的研究,发现
H2O2分子的O-O键是个氧气分子中仅有的极弱(单向)配对键,化学键的键长和键角与O-O键属于双键的相似。

1950年代,X射线晶体学的方法被应用于研究过氧化氢晶体结构,得出了过氧化氢分子的三维结构。

总之,随着科学技术的发展,人们对过氧化氢分子结构的认识也在不断深入。

从最初的简单结构研究到现代的三维结构分析,这一过程也展示了人类科学研究的发展历程,为物理化学基础理论的发展做出了巨大的贡献。

植物细胞过氧化氢的测定方法_张小莉

植物细胞过氧化氢的测定方法_张小莉

植物学报Chinese Bulletin of Botany 2009, 44 (1): 103−106, www.chinbullbotany.com收稿日期: 2007-12-11; 接受日期: 2008-02-19基金项目: 国家自然科学基金(No.30530430)* 通讯作者。

E-mail: songcp@henu.edu.cn.技术方法.植物细胞过氧化氢的测定方法张小莉1,2, 王鹏程1, 宋纯鹏1*1河南大学生命科学学院, 河南省植物逆境生物学重点实验室, 开封 475001; 2河南省中医学院, 郑州 450008摘要 过氧化氢是重要的活性氧之一, 激素等发育信号和胁迫刺激可以诱导细胞内H2O2的产生和积累, 继而调控植物的气孔运动、生长发育、衰老和逆境应答等诸多生理过程。

准确测定植物细胞内H2O2的含量及变化模式是系统研究H2O2信号转导及其生物学功能的一个关键技术。

该文以拟南芥为实验材料, 介绍了目前植物细胞H2O2的主要测定方法, 包括激光共聚焦显微检测、紫外分光光度计检测和DAB组织染色, 在此基础上比较分析了上述方法在灵敏度、检测范围、定量、成本以及耗时等方面的差异, 为相关研究选择合适的H2O2检测技术提供参考。

关键词 激光共聚焦显微成像, DAB染色, 过氧化氢, 分光光度法张小莉, 王鹏程, 宋纯鹏 (2009). 植物细胞过氧化氢的测定方法. 植物学报 44, 103-106.过氧化氢是活性氧(active oxygen species, AOS)的一种, 多种外界刺激或细胞内信号分子都可以导致细胞内H2O2的积累。

H2O2不仅具有损伤生物大分子、产生细胞毒害的能力, 而且还被证明可以作为信号分子, 在气孔运动、生物和非生物胁迫应答、细胞程序性死亡、激素应答以及生长发育调控过程中起重要作用(Neill et al., 2002; Laloi et al., 2004; Cheng and Song,2006)。

过氧化氢测定方法

过氧化氢测定方法

过氧化氢测定方法A1 原理酒中过氧化物在稀硫酸中能使碘化钾氧化,产生定量的碘,此碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定,以淀粉作指示剂。

同时用过氧化氢酶分析过氧化氢后,用硫代硫酸钠标准溶液滴定除过氧化氢外的过氧化物,从未加过氧化氢酶样品所消耗的硫代硫酸钠标准溶液的毫升数,计算过氧化氢的含量,其反应式为:2KI+H2SO4+H2O2──→ K2SO4+2H2O+I2 ..........(A1)I2+2Na2S2O3───→ Na2S4O6+2NaI ...........(A2)2H2O2──→ 2H2O+O2 ........................(A3)A2 试剂A2.1 0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液(用前标定);临用时稀释成0.0025mol/L。

A2.2 1%淀粉指示剂。

A2.3 10%碘化钾水溶液。

A2.4 10%硫酸。

A2.5 3%钼酸铵水溶液。

A2.6 0.1%过氧化氢酶溶液:称0.10g过氧化氢酶,用100mL蒸馏水分多次将其溶解,置冰箱保存。

A3 测定方法用欧氏吸管或容量瓶取25.0mL辐照薯干酒于250mL的碘量瓶中,取A、B二份;B 瓶中加入0.1%过氧化氢酶0.5mL,混匀,放置10min(放置过程中摇动数次)。

在A、B两瓶中各加入10%硫酸溶液5.0mL及10%碘化钾溶液5.0mL,并各加3%钼酸铵3滴,混匀,置暗处放置10min,各加水75mL,分别用0.0025mol/L硫代硫酸钠滴定,待滴至微黄色时,加淀粉指示剂0.5mL,继续滴至蓝色消失,分别记录A、B二份消耗硫代硫酸钠的毫升数。

A4 计算(V A-V B)×c×34.02过氧化氢(mg/L) = ───────────────×1000 .................(A4)V式中:V A──A瓶中消耗硫代硫酸钠的毫升数;V B──B瓶中消耗硫代硫酸钠的毫升数;c──硫代硫酸钠的摩尔浓度;34.02──与 1.00mL 硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3)=1.000mol/L]相当的以毫克表示的过氧化氢的质量;V──取薯干酒样的毫升数。

如何发现过氧化氢

如何发现过氧化氢

如何发现过氧化氢酶的存在:1.试纸法:(定性判断)将适量待测溶液放到烧杯中,滴入适量的EDTA溶液,搅拌均匀,然后剪一片50mm*50mm滤纸,用30%或50%浓度的过氧化氢将滤纸片浸湿,然后放到盛溶液的烧杯中,观察滤纸是否上浮,如果上浮,可定性判断该溶液中有过氧化氢酶。

2.加热法:(定性判断)将适量待测溶液放到2个烧杯中,1个在高于700C条件下加热1小时,然后冷却至常温下,将螯合剂(EDTA或DTPA)按700PPM用量分别加入2个烧杯中,搅拌均匀;然后按以下方法对其中残余过氧化氢量进行检测,如果加热前的残余过氧化氢量明显低于加热后的值,而且气泡较多,则表明溶液中存在过氧化氢酶;A、所用药品:20%的硫酸5%的钼酸铵溶液0.1N的硫代硫酸钠标准溶液10%碘化钾指示剂5%淀粉溶液指示剂双氧水标准溶液样品:来自脱墨系统工艺水,经滤纸过滤后取10ml。

检测方法:a、过滤:用玻璃漏斗及定性滤纸过滤出样品中滤液。

b、量取10 ml滤液倒入250ml锥形瓶中,加入10毫升20%硫酸,,再加2 ml 10%碘化钾,再滴2-3滴5%钼酸铵溶液。

c、用0.1N的硫代硫酸钠溶液进行滴定,直到溶液变为浅黄色。

此时,加入5ml5%淀粉溶液,溶液变为兰色,继续滴定直到溶液恰变至无色为止。

记录所耗用的硫代硫酸钠的毫升数。

d、残余双氧水量(mg/l)=硫代硫酸钠的毫升数*173.用HMB-IV型测定仪测定:(定量判断)双氧水浓度:27.5%(用蒸留水稀释)EDTA 20mmol/L(0.02%mol/L)用蒸留水稀释标准溶液至要求浓度。

实验步骤:1、在试管中加入EDTA (20mmol/L)10滴。

2、加入10ML待测液。

3、加双氧水(27.5%)10滴。

4、排气3秒钟。

5、上下倒置10次。

6、放置计时(用HMB-IV)15分钟。

7、再上下倒置10次。

8、用手指掸一下让管壁上的液体流下。

9、用HMB-IV 测酶含量,单位为HMB。

光镜下过氧化氢的显示及观察

光镜下过氧化氢的显示及观察

光镜下过氧化氢的显示及观察过氧化氢(H2O2)是一种无色液体,它在自然界中广泛存在。

过氧化氢具有很强的氧化性,可以用作消毒、漂白和医疗等方面。

在实验室中,我们可以通过一种称为光镜的装置观察和显示过氧化氢的特性和反应。

光镜是一种能够放大光线的光学仪器,它由凸透镜、凹透镜和反射镜等光学元件构成。

通过调整这些元件的位置和角度,我们可以使光线经过反射和折射后聚焦在一个点上,从而放大被观察物体的图像。

当我们将过氧化氢溶液放在光镜下观察时,可以发现以下现象:1. 透明液体变为淡蓝色:过氧化氢溶液在光镜下呈现出淡蓝色的颜色。

这是由于过氧化氢分解产生的氧气气泡反射和折射光线的缘故。

2. 气泡的形成:当过氧化氢分解时,会产生氧气气泡。

这些气泡在溶液中不断上升,形成了许多小气泡和大气泡。

这种现象在光镜下观察时非常明显。

3. 气泡的移动和消失:在观察过程中,我们可以观察到气泡在溶液中的移动和消失。

较小的气泡会随着液体的流动而移动,最终消失在溶液中;而较大的气泡则会上升到溶液表面,破裂释放氧气。

通过对过氧化氢溶液在光镜下的观察,我们可以了解到过氧化氢的分解反应以及气泡的形成、移动和消失等特性。

这对于研究过氧化氢的性质和应用具有重要意义。

需要注意的是,过氧化氢是一种具有较强氧化性的物质,在使用和储存过程中需要谨慎。

避免过氧化氢接触火源和易燃物质,同时注意避免其与其他化学物质发生反应。

通过光镜下观察过氧化氢的显示,我们可以观察到溶液的颜色变化、气泡的形成、移动和消失等现象。

这为我们了解过氧化氢的特性和反应机制提供了直观的观察和实验依据,对于进一步研究和应用过氧化氢具有重要意义。

双氧水检验方法

双氧水检验方法

双氧水(过氧化氢)检验方法工业过氧化氢中过氧化氢含量的测定工作原理:在酸性介质中,过氧化氢与高锰酸钾发生氧化还原反应,根据高锰酸钾标准滴定溶液的消耗量,计算过氧化氢的含量。

反应是如下:KMnO4+3H2SO4+5H2O2==K2SO4+2MnO4+5O +8H2O2仪器与试剂:棕色滴定管滴瓶硫酸溶液(1+15):量取25mLH2SO4,,375mL蒸馏水高锰酸钾标准滴定溶液(L):准确量取0.79015g高锰酸钾试样,溶解并移入250mL容量瓶中,进行标定。

步骤:1)用10mL~25mL的滴瓶以减量法对三种规格的产品称量如下:质量分数为%~30%规格的产品,称量约~0.20g试样;35%规格产品,称取约~0.16g试样,精确至0.0002g;置于一以加有100mL硫酸溶液(1+15)的250mL锥形瓶中,摇匀。

50%规格的产品,称取约0.8g~1.0g,精确至0.0002g,置于250mL容量瓶中西式至刻线,用移液管移取25mL稀释后的溶液与以加有100mL硫酸溶液(1+15)的250mL 锥形瓶中,摇匀。

2)用约\L的高锰酸钾标准滴定溶液至溶液呈粉红色,并在30s内不消失即为终点。

数据记录与处理:%~30%的过氧化氢的质量分数w1,数值以%表示,按下式计算:VC·M/2000W1= ·100=mm35%的过氧化氢的质量分数w2,数值以%表示,按下式计算:VC·M/2000W2= ·100=mm50%的过氧化氢的质量分数w3,数值以%表示,按下式计算:VC·M/2000W3= ·100=m·25/250 m式中:V表示滴定中消耗的高锰酸钾标准滴定溶液体积,单位为毫升(mL)C表示高锰酸钾标准滴定溶液浓度的准确数值,单位为摩尔每升(mol/L)M为过氧化氢的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol)(M=m试料的质量的数值,单位为克(g)。

高锰酸钾法测定双氧水

高锰酸钾法测定双氧水

双氧水中H 2O 2含量的测定——高锰酸钾法一、实验目的:1.掌握KMnO 4溶液配制和标定的原理、方法。

2.了解自身指示剂和自动催化的原理。

3.掌握KMnO 4法测定H 2O 2的原理、方法。

二、实验原理:1.KMnO 4溶液配制与标定:⑴ 配制:KMnO 4是强氧化剂,常含有杂质,不能直接配制标准溶液。

蒸馏水中常含有少量的还原性物质,使KMnO 4还原为MnO 2·nH 2O ,它能加速KMnO 4的分解,故要将KMnO 4溶液煮沸一段时间,放置几天,使之充分反应过滤后,才能标定。

⑵ 标定:标定KMnO 4溶液常用分析纯Na 2C 2O 4,在酸性溶液中反应如下式: 2 MnO 4- + 5C 2O 42- + 16 H + == 2 Mn 2++ 8 H 2O + 10CO 2↑ (紫色) (肉色)此标定反应要在H 2SO 4酸性、溶液预热至75?~85℃和有Mn 2+催化的条件下进行。

滴定开始时,反应很慢,KMnO 4溶液必须先加入1滴,待退色后再逐滴加入,如果滴加过快,KMnO 4在热、酸溶液中能部分分解而造成误差。

4 KMnO 4 + 6 H 2SO 4= 2K2SO4 + 4MnSO 4 + 6H 2O + 5O 2↑在滴定过程中(保持溶液温度:温低反应慢,温高H 2C 2O 4分解),溶液中生成了Mn 2+,使反应速度加快(自动催化),所以滴定速度可稍加快些,以每秒2~3滴为宜。

由于KMnO 4溶液本身具有颜色,滴定时溶液中有稍微过量的MnO 4- 即显粉红色,故不需另加指示剂(自身指示剂)。

2、双氧水中H 2O 2含量的测定H 2O 2 在酸性溶液中是强氧化剂,但遇KMnO 4时表现为还原剂。

在酸性溶液中H 2O 2很容易被KMnO 4氧化,反应式如下:2MnO 4- + 5H 2O 2 + 6H + = 2Mn 2+ + 8H 2O + 5O 2↑ (紫红) (肉色)开始时,反应很慢,待溶液中生成了Mn 2+,反应速度加快(自动催化反应),故能顺利地、定量地完成反应。

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如何发现过氧化氢酶的存在:
1.试纸法:(定性判断)
将适量待测溶液放到烧杯中,滴入适量的EDTA溶液,搅拌均匀,然后剪一片50mm*50mm滤纸,用30%或50%浓度的过氧化氢将滤纸片浸湿,然后放到盛溶液的烧杯中,观察滤纸是否上浮,如果上浮,可定性判断该溶液中有过氧化氢酶。

2.加热法:(定性判断)
将适量待测溶液放到2个烧杯中,1个在高于700C条件下加热1小时,然后冷却至常温下,将螯合剂(EDTA或DTPA)按700PPM用量分别加入2个烧杯中,搅拌均匀;
然后按以下方法对其中残余过氧化氢量进行检测,如果加热前的残余过氧化氢量明显低于加热后的值,而且气泡较多,则表明溶液中存在过氧化氢酶;
A、所用药品:
20%的硫酸
5%的钼酸铵溶液
0.1N的硫代硫酸钠标准溶液
10%碘化钾指示剂
5%淀粉溶液指示剂
双氧水标准溶液
样品:
来自脱墨系统工艺水,经滤纸过滤后取10ml。

检测方法:
a、过滤:用玻璃漏斗及定性滤纸过滤出样品中滤液。

b、量取10 ml滤液倒入250ml锥形瓶中,加入10毫升20%硫酸,,再加2 ml 10%碘化
钾,再滴2-3滴5%钼酸铵溶液。

c、用0.1N的硫代硫酸钠溶液进行滴定,直到溶液变为浅黄色。

此时,加入5ml5%淀
粉溶液,溶液变为兰色,继续滴定直到溶液恰变至无色为止。

记录所耗用的硫代硫
酸钠的毫升数。

d、残余双氧水量(mg/l)=硫代硫酸钠的毫升数*17
3.用HMB-IV型测定仪测定:(定量判断)
双氧水浓度:27.5%(用蒸留水稀释)EDTA 20mmol/L(0.02%mol/L)用蒸留水稀释标准
溶液至要求浓度。

实验步骤:
1、在试管中加入EDTA (20mmol/L)10滴。

2、加入10ML待测液。

3、加双氧水(27.5%)10滴。

4、排气3秒钟。

5、上下倒置10次。

6、放置计时(用HMB-IV)15分钟。

7、再上下倒置10次。

8、用手指掸一下让管壁上的液体流下。

9、用HMB-IV 测酶含量,单位为HMB。

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