实验三 红细胞脆性试验

实验三红细胞脆性试验

[实验目的]

测定红细胞细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力。亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。

[实验原理]

正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞因失去内部液体而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水分进入红细胞，使红细胞两面凹陷的圆盘形变为球形，如继续膨大，即发生破裂溶解，形成溶血。红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于0.9％NaCl 溶液的耐受能力。耐受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低。反之，耐受力低者，红细胞易于破裂，即脆性高。

凡上层液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小抗力（红细胞的最小抵抗力）。

凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或最大抗力（红细胞的最大抵抗力）。

正常红细胞的最小渗透抵抗力为0.4~0.5NaCl%溶液，最大渗透抵抗力为0.3~0.35%NaCl 溶液。一般说，刚成熟的红细胞膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。

生理学上将与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液；而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。等渗溶液不一定是等张溶液（如1.99%的尿素溶液），但等张溶液一定是等渗溶。

[实验动物]

鸡

[器材及药品]

试管，试管架，吸管，新鲜血（或去纤维蛋白血），1％NaCl，蒸馏水。

[方法与步骤]

1．先将试管分别排列在试管架上，按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶液均为2毫升。

2．采取血液，并在上列各管中各加入大小相等的血液l滴，然后用拇指堵住试管口，将试管慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。

3．在室温下静置~21小时，观察结果。

4．依下列标准判定出有无溶血、不完全溶血或完全溶血的氯化钠百分比浓度。

（1）试管内液体下层为浑浊红色，上层为无色或极淡色的液体，说明红细胞没有溶解。

（2）小试管内液体下层为浑浊红色，说明有未溶解的红细胞，而上层出现透明红色，说明有部分红细胞破坏和溶解，称为不完全溶血。开始出现部分溶血的盐溶液浓度，既为红细胞的最小抵抗力（表示红细胞的最大脆性）。

（3）小试管内液体完全变成透明红色，管底无红细胞沉积，说明红细胞完全溶解，称为完全溶血。引起红细胞最先全部溶解的盐溶液的浓度，既为红细胞的最大抵抗力（表示红细胞的最小脆性）。

（4）记录被检红细胞脆性范围，既开始溶解时的盐溶液浓度与全部溶解时的盐溶液浓度。

[注意事项]

1．配制的各种NaCl溶液必须准确。

2．各管中加入的血滴大小应尽量相等。

3．混匀时轻轻倾倒1～2次，减少机械震动，避免人为溶血。

4．应在光线明亮处判定结果。