机能学实验——红细胞渗透脆性上课讲义
血液试验课件—红细胞渗透脆性试验
试验的原理、方法、注意事项及临 床意义。
• 实验报告:红细胞渗透脆性试
验的原理、注意事项及临床意义。
• 原理
红细胞在低渗盐溶液中发生膨 胀破裂的现象称红细胞渗透脆 性。但红细胞对低渗盐溶液具 有一定的抵抗力,这种抵抗力 的大小可作为衡量红细胞渗透 脆性的指标。对低渗盐溶液抵 抗力小,表示渗透脆性高;相 反,则表示渗透脆性低。
NaCl浓度(%) 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24
• 注意事项 . 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。
.所有玻璃器皿要求干燥清洁。
. 向试管内滴加血液时不可用力挤压,不可将 血泡沫注入试管。混匀含红细胞的液体时动 作应轻,以免造成溶血。
红细胞渗透脆性实验中不同浓度的NaCl溶液配制法
试管编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.9%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 蒸馏水(ml) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9
. 观察溶血情况时以白色为背景。
. 为使各管加血量相同,加血时持针角度应一 致。
. 各试管应准确编号。
. 玻璃器皿应小心轻放,以免损坏。
• 参考范围 开始溶血NACL浓度:0.46%~0.42% 完全溶血NACL浓度: 0.34%~0.32%
患者与正常对照,溶血管的NaCl浓度相差 0.4%具有诊断价值。
临床意义
红细胞渗透脆性增高 :见于遗传性球形红 细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血和遗传 性椭圆形细胞增多症。
红细胞渗透脆性实验报告
红细胞渗透脆性实验报告
实验目的,通过实验,观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,了解红细胞的渗透脆性特点。
实验原理,红细胞在不同渗透压下会发生渗透作用,当渗透压较高时,红细胞会失去水分而收缩,导致脆性增加;而渗透压较低时,红细胞会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验材料与方法:
1. 材料,新鲜血液、生理盐水、离心管、显微镜、玻璃片、封片、渗透压计。
2. 方法:
a. 取新鲜血液离心,得到红细胞悬液。
b. 分别用生理盐水制备不同浓度的溶液,得到不同渗透压的溶液。
c. 取一定量的红细胞悬液,分别加入不同渗透压的溶液中,放置一段时间后制作干片。
d. 在显微镜下观察红细胞的形态变化,并记录观察结果。
实验结果:经过观察,我们得出以下实验结果:
1. 在高渗透压溶液中,红细胞明显收缩,形态不规则,脆性增加。
2. 在低渗透压溶液中,红细胞膨胀,形态圆润,脆性减小。
实验分析:根据实验结果,我们可以得出以下结论:
1. 红细胞在高渗透压下会失去水分而收缩,导致脆性增加。
2. 红细胞在低渗透压下会吸收水分而膨胀,脆性减小。
实验结论,红细胞的渗透脆性与渗透压密切相关,渗透压较高时,红细胞的脆性增加,渗透压较低时,红细胞的脆性减小。
实验意义,通过本实验,我们深入了解了红细胞的渗透脆性特点,为进一步研究红细胞的生理功能提供了重要的实验数据和理论基础。
结语,本实验通过观察红细胞在不同渗透压下的脆性变化,深入探讨了红细胞的渗透脆性特点,对于加深我们对红细胞生理特性的理解具有重要的意义。
希望本实验能为相关领域的研究工作提供一定的参考价值。
有机磷酸酯类中毒及其红细胞渗透脆性ppt课件
骨骼骨肌骼收肌缩纤维震颤
先兴奋不安,继之惊厥、 中后枢而神转经为系抑统制的 ,出M、现N意受识体 模糊昏迷等
家兔称重,观察(正常活动、呼吸、瞳孔大 小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤) 并记录。
制备有机磷中毒模型并抢救
表1 有机磷酸酯类中毒及其解救实验方案
组别 模 型 制备
抢
中毒症状明显 后
有机磷酸酯类中毒 及其抢救
掌握敌百虫中毒原理和症, 掌握解救药物阿托品、碘解磷
定的解救效果和作用原理.
磷酰化 AChE
碘解磷定
AChE
ACh
阿托品
M-R
N-R
CNS
心心脏率活减动慢的、抑血制 压下降 支气呼管平吸滑肌困收缩 难 腺体口分泌吐增加白 沫
大胃肠小道便、膀失胱禁肌收缩 皮汗腺肤分泌湿增加冷 针虹膜尖括样约肌瞳的孔收缩
救 10min后
甲兔 敌百虫 硫酸阿托品 碘解磷定
乙兔 敌百虫
碘解磷定 硫酸阿托品
红细胞渗透性和化学性 溶血实验
抵抗力:红细胞耐受一定浓度的低渗而不发生破裂、 解体的能力(最小、最大抵抗力)
渗透脆性:红细胞在低渗溶液中发生破裂解体的特 性(最小抵抗力就是渗透脆性)
滴加红细胞悬液方法
完全溶血
部分9%NaCl
氯仿
HCl
NaOH
3%红细胞悬液
注意事项
向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面, 轻轻滴入
滴加红细胞悬液后,轻轻摇匀溶液,切勿激烈 震荡
离心机的使用:对称配平
移液枪的使用
思考题
1.溶血判断标准是什么? 2.红细胞为什么会出现部分溶血现象? 3.测定红细胞脆性有何临床意义?
生理学实验红细胞渗透脆性的测定专家讲座
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
第1页
【试验目标】
❖ 1、本试验学习测定红细胞渗透脆性方法。 ❖ 2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正
常形态与功效主要性方面了解。
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
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【试验原理】
❖ 在临床或生理试验使用各种溶液中,与血浆渗透压 相等称为等渗溶液(如0.85%NaCI溶液),高于或 低于血浆渗透压则对应地称为高渗或低渗溶液。将 正常红细胞悬浮于不一样浓度NaCI溶液中即可看到: 在等渗溶液中红细胞保持正常大小和双凹圆碟形; 在渗透压递减一系列溶液中,红细胞逐步胀大并双 侧凸起,当体积增加30%时成为球形;体积增加 45%~60%则细胞膜损伤而发生溶血,这时血红蛋 白逸出细胞外,称为溶血。
❖ 另取3支小试管,在三支试管上分别编号11-13,分 别加入0.85%NaCl溶液、1.9%尿素和蒸溜水2.5ml 或4ml,与前面10支试管量一致。
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
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❖ 2.制备抗凝血:不一样动物采血方法各异, 但多采取末梢血。把血液放入含有肝素烧杯 内,混匀。1%肝素1ml可抗10ml血。
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
第5页
【试验材料】
❖ 试验动物: 动物种类不限 。
❖ 试验器材:试管架、小试管、滴管,移液管 。
❖ 药品与试剂:1%NaCl溶液、0.85%氯化钠溶 液、蒸馏水,1.9%尿素溶液,1%肝素。
生理学实验红细胞渗透脆性的测定
第6页
【试验方法】ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
❖ 1.配制不一样浓度低渗NaCl溶液:取口径相同干 燥洁净小试管10支,分别编号排列在试管架上,配 制出10种不一样浓度NaCl低渗溶液(0.25%, 0.3%,0.35%,0.4%,0.45%,0.5%,0.55%, 0.6%,0.65%,0.9%)。每个试管总量均为2.5ml 或4ml,视试管大小而定。
实验指导 实验一红细胞渗透脆性 生理学课件
• (一)实验目的 • 1.了解红细胞脆性实验的方法。 • 2.熟悉不同浓度的低渗溶液对红细胞形态和容积的影响。 • 3.掌握血浆晶体渗透压的功能。 • (二)实验材料 • 1.实验对象:家兔。 • 2.实验药品:1%氯化钠、蒸馏水等。 • 3.实验器材:小试管、2ml吸管、5ml注射器、试管架、棉签等。
• (四)实验结果与分析 • 按各试管液体颜色和透明度判断是否溶血、部分溶血或完全溶血。 • 1.未发生溶血:液体下层为混浊红色,上层为无色,表示红细胞未溶解而
下沉管底。 • 2.部分溶血:液体下层为混浊红色,上层呈透明淡红色,表示部分红细胞
破裂。最先出现部分溶血的盐溶液为红细胞的最大脆性(即最小抵抗 力),正常人为0.45%~0.40%NaCl溶液。 • 3.完全溶血:液体完全呈透明红色,管底无红细胞,说明红细胞全部溶解。 最先出现完全溶血的盐溶液为红细胞的最小脆性(即最大抵抗力),正 常人为0.3%~0.35%NaCl溶液。
0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50
NaCl浓度
0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25
• ⑵采取血液:从兔颈总动脉取血2ml(若采人血,则用灭菌注射器从肘正 中静脉抽取血液1.5ml),立即向每个试管各加血液1滴,轻摇试管,使血液 与盐溶液充分混合。静置30min。
• (三)实验过程
• 1.实验原理
• 检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶 液中,当水渗透其内部达一定程度时,红细胞发生膨胀破裂。根 据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况,通过红细胞表面 积与容积的比值,反映其对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小,红 细胞抵抗力愈小,渗透脆性增加。反之,抵抗力增大。
生理解剖实验课件-红细胞渗透脆性
实验原理的详细解释
在不同渗透压的环境下,红细胞会经历 膨胀、收缩和破裂等形态变化。这些变 化与红细胞膜的结构和功能密切相关。
当渗透压升高时,水分通过红细胞膜进 入细胞内,使红细胞膨胀。如果渗透压 过高,红细胞可能会破裂。相反,当渗 透压降低时,水分从细胞内流出,红细
胞收缩。
通过观察红细胞在不同渗透压下的形态 变化,可以评估红细胞的渗透脆性。红 细胞渗透脆性增加表明红细胞膜的结构
红细胞的代谢过程
葡萄糖代谢
01
红细胞通过糖酵解途径将葡萄糖分解为丙酮酸,产生能量供细
胞代谢使用。
血红蛋白合成与分解02 Nhomakorabea红细胞内的血红蛋白在代谢过程中不断合成与分解,保持动态
平衡。
细胞内物质的合成与更新
03
红细胞通过一系列生化反应合成细胞内所需物质,同时不断更
新细胞膜和细胞器等结构,维持细胞的正常功能。
01
红细胞渗透脆性与渗透压的关系
根据数据分析结果,解读红细胞渗透脆性与渗透压之间的关系,以及这
种关系的生物学意义。
02
处理因素对红细胞渗透脆性的影响
分析实验组与对照组之间的差异,解读处理因素对红细胞渗透脆性的影
响及其机制。
03
实验结论
根据数据分析结果,得出实验结论,总结红细胞渗透脆性实验的主要发
现和意义。
数据分析方法
数据整理
对实验数据进行整理,包 括红细胞在不同渗透压下 的形态变化、数量变化等 。
统计分析
采用适当的统计分析方法 ,如独立样本t检验、配对 样本t检验等,对实验数据 进行处理和分析。
数据可视化
将实验数据以图表、图像 等形式进行可视化展示, 以便更直观地观察和分析 数据。
血沉和红细胞脆性实验讲稿
血沉和红细胞脆性实验讲稿一、相关理论知识渗透压1、渗透现象(1)概念:指被半透膜隔开的两种浓度不同的溶液,自行发生的水分子从低浓度溶液向高浓度溶液中扩散的现象。
(2)实验:将蔗糖水灌入一个下端有半透膜作底的玻管中,然后把它浸放在盛有纯水的玻璃杯中,过一会儿,我们便会看到玻璃管内的液面逐渐上升,这说明玻璃管中的水通过半透膜进入了玻璃管内,我们把这种水分子自动地透过半透膜从低浓度一侧向高浓度一侧扩散的现象就称为渗透现象。
这是因为玻璃管中盛的是纯水,而玻璃管内装的是蒸馏水,若从水分子的浓度上看,纯水要大于蔗糖水(因为蔗糖水中除水分子外,还有蔗糖分子),无论是水分子或蔗糖分子都不是静止的,而是不停地向各个方向运动着,由于纯水中水分子浓度大于蔗糖水的水分子的浓度,在起初一定的时间内,从纯水方面穿过半透膜进入蔗糖水的水分子个数比同时间内从蔗糖水通过半透膜穿出来的水要多。
因而,玻璃管中水蔗糖水液面逐渐上升。
但随着液面的上升,逐渐对半透膜的压力加大,因此,蔗糖水中的吕分子穿出半透膜进入纯水的速度也就增大,当蔗糖水液面达到某一高度量,就不再上升了。
这是因为水分子进出纯水与蔗糖水的速度相等了。
此时,管内外液面高度差所产生的压力,即为蔗糖水的渗透压。
2、渗透压(1)概念:渗透压是指溶液所具有的吸引和保留水分子的能力。
或者说是指水分子通过半透膜产生的扩散力。
这是从不同的角度来表示的,前者是从高浓度一侧,后者是从低浓度一侧来阐述的。
(2)影响因素:其大小与溶液的浓度有关(特别是溶液中的颗粒数目),而与其种类和大小无关,颗粒数目越多,渗透压就越高。
(3)渗透压的表示法:目前血浆渗透压有两种表示方法:①压力表示法:以KPa或mmHg来表示。
②渗透摩尔表示法:通常以1个摩尔浓度的非电解质溶液所产生的渗透压就称为1个渗透摩尔(Osm),由于这个单位太大,故医学上常用此单位的千分之一即毫渗透摩尔(mOsm)来表示。
3、血浆渗透压的组成(1)晶体渗透压:指的是由血浆中的晶体物质(特别是电解质)及小分子的有机物质所形成的渗透压,这部分渗透压占了绝大部分。
红细胞渗透脆性实验
红细胞渗透脆性实验红细胞渗透脆性实验是一种常用的血液分析方法,用于评估红细胞膜的稳定性和弹性。
该实验利用了红细胞在不同渗透压下的脆性变化,可以对红细胞膜的功能、水平和吸收能力进行评估和分析,具有重要的临床意义。
实验原理:红细胞内部有一定的渗透压,当红细胞分离出体外时,如果外部环境的渗透压高于红细胞内的渗透压,则会通过半透膜透过膜进入红细胞内部,使红细胞体积膨胀,红细胞膜被撑开。
反之,当外部环境的渗透压低于红细胞内的渗透压时,水会从红细胞内部流出,红细胞体积缩小。
实验过程:1、准备标准盐水浓度,即0.9%的氯化钠溶液。
2、取一定量的患者血液样本,离心去上清液,弃去上清液后,将沉淀物用相同体积的0.9%氯化钠溶液洗涤3次。
3、取少量的红细胞沉淀,加入不同浓度的盐水,称出每种浓度的盐水加入相应的样本内。
4、使样本和盐水充分混合,放置不同的时间(一般为30分钟),孵育后进行离心处理。
5、标记沉淀物的红细胞体积,对分离出的上清液测定其吸光度(或乳胶凝集率)。
6、计算红细胞的溶血率,溶血率越高,表示红细胞的渗透脆性越高。
实验结果:在不同盐水浓度下孵育后,红细胞和盐水发生渗透压差异,导致红细胞脆性变化,失去完整性。
通过测定溶血率,可以得到红细胞的溶血程度,从而分析红细胞渗透脆性的高低,反映红细胞膜的稳定性和弹性。
一般来说,红细胞膜的完整性越强,渗透脆性越低,溶血程度越小;反之,红细胞膜的完整性越弱,渗透脆性越高,溶血程度越大。
实验注意事项:1、样本应在离心前密闭保存,避免污染。
2、孵育时间需控制在一定范围内,过长过短都会影响实验结果。
3、盐水和样本的比例应准确。
4、实验过程需严格按照操作流程,避免误差。
结论:红细胞渗透脆性实验可以反映红细胞膜的稳定性和弹性,对于临床疾病诊断、治疗和预后评估有着很高的应用价值。
在具体应用时,需结合其他临床检测项目综合分析,才能准确地诊断疾病并制定科学的治疗方案。
红细胞的渗透脆性实验报告
红细胞的渗透脆性实验报告红细胞的渗透脆性实验报告引言:红细胞是人体血液中的重要组成部分,具有运输氧气和二氧化碳的功能。
红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。
本实验旨在通过测量红细胞在不同渗透压下的溶血程度,来评估红细胞的渗透脆性。
实验材料与方法:1. 实验材料:- 新鲜采集的人体全血样本- 生理盐水- 不同渗透压的溶液(0.3%,0.6%,0.9%,1.2% NaCl溶液)2. 实验方法:1. 将采集的全血样本离心,分离出红细胞。
2. 用生理盐水洗涤红细胞,去除血浆和其他细胞成分。
3. 将红细胞悬液分成若干等份。
4. 在不同的试管中,分别加入不同浓度的NaCl溶液和红细胞悬液,形成不同渗透压的溶液。
5. 将试管放入恒温水浴中,保持温度恒定。
6. 按照设定的时间,取出试管,离心沉淀红细胞。
7. 通过测量上清液的吸光度,确定红细胞的溶血程度。
实验结果与讨论:在本实验中,我们选取了不同浓度的NaCl溶液,以模拟不同渗透压环境下红细胞的受损程度。
通过测量上清液的吸光度,我们可以得到红细胞的溶血程度。
实验结果显示,随着NaCl溶液浓度的增加,红细胞的溶血程度也逐渐增加。
当NaCl溶液浓度为0.3%时,红细胞的溶血程度较低,吸光度较小。
随着溶液浓度的增加,红细胞的溶血程度逐渐增加,吸光度也随之增大。
当NaCl溶液浓度达到1.2%时,红细胞的溶血程度最高,吸光度最大。
这一结果表明,红细胞在高渗透压环境下容易发生溶血。
红细胞的渗透脆性受到外界环境的影响,当渗透压超过一定阈值时,红细胞的膜结构受到破坏,导致红细胞溶解释放出血红蛋白。
红细胞的渗透脆性与人体健康状况密切相关。
一些疾病,如贫血和遗传性溶血性贫血等,会导致红细胞的渗透脆性增加。
此外,一些药物和化学物质也可能对红细胞的渗透脆性产生影响。
因此,通过测量红细胞的渗透脆性,可以为临床诊断和治疗提供一定的参考。
结论:红细胞的渗透脆性是衡量其稳定性和健康状况的重要指标之一。
红细胞的渗透脆性的实验报告
红细胞的渗透脆性的实验报告一、实验目的1、理解红细胞渗透脆性的概念及其在生理学和病理学中的意义。
2、掌握测定红细胞渗透脆性的实验方法和操作技能。
3、观察不同浓度的低渗溶液对红细胞的影响,绘制红细胞渗透脆性曲线。
二、实验原理正常红细胞在等渗的血浆中能够保持其形态和功能的完整性。
但当红细胞处于低渗溶液中时,水分子会通过细胞膜进入细胞内,导致红细胞膨胀甚至破裂,这种现象称为红细胞的溶血。
红细胞对低渗溶液具有一定的抵抗力,其抵抗能力的大小可以用红细胞渗透脆性来表示。
红细胞渗透脆性越大,说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越小,越容易发生溶血;反之,红细胞渗透脆性越小,说明红细胞对低渗溶液的抵抗力越大,越不容易发生溶血。
三、实验材料与设备1、材料新鲜血液(抗凝)氯化钠溶液(浓度分别为 025%、030%、035%、040%、045%、050%、055%、060%、065%、070%、075%、080%、085%、090%)2、设备离心机显微镜吸管试管刻度吸管四、实验步骤1、制备不同浓度的氯化钠溶液用蒸馏水将氯化钠配制成浓度从 025%到 090%,间隔 005%的一系列溶液,每种溶液各 5ml,分别置于编号 1 至 14 的试管中。
2、采集血液用消毒过的注射器从健康人的静脉中抽取 2ml 新鲜血液,注入抗凝管中,轻轻摇匀。
3、稀释血液用吸管吸取 02ml 抗凝血液,加入到 2ml 生理盐水中,制成 1:10 的稀释血液。
4、加样用刻度吸管吸取 02ml 稀释血液,分别加入到上述 14 支装有不同浓度氯化钠溶液的试管中,轻轻摇匀。
5、静置将所有试管置于室温下静置 30 分钟。
6、离心选择适当的转速和时间对各试管进行离心。
7、观察结果取出离心后的试管,轻轻倾斜,观察上清液的颜色和透明度,判断是否有溶血现象发生。
上清液无色透明,表示红细胞未发生溶血;上清液呈现淡红色,表示部分红细胞发生溶血;上清液呈现红色,表示红细胞完全溶血。
生理学实验教案——红细胞的渗透脆性
红细胞的渗透脆性一、实验目的及原理目的:测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。
原理:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。
放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,至于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。
开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45% NaCl溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~0.35% NaCl溶液)。
对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
二、实验准备1.实验对象:家兔2.实验药品:1%氯化钠、蒸馏水3.实验器材:5ml试管10支、2ml滴管2支、5ml注射器、试管架、棉签4.环境:安静的实验室三、实验学时1学时四、实验方法1.低渗盐溶液的配制取试管10支,洗净烤干,编号后依次排列于试管架上,参照下图向各试管中加入1% NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2ml。
2.采血从家兔颈总动脉取血2ml,立即向每个试管各加血液1滴,轻摇试管,使血液与盐溶液充分混合。
静置30分钟。
3.实验观察按各试管液体颜色和透明度判断是否溶血、部分溶血或完全溶血。
①未发生溶血试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
②部分溶血试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,表示红细胞部分溶解,最先出现部分溶血的盐溶液为红细胞的最大脆性(即最小抵抗力)。
③完全溶血试管内溶液呈透明红色,管底无红细胞,说明红细胞全部破裂。
最先出现完全溶血的盐溶液为红细胞的最小脆性(即最大抵抗力)。
五、实验结果认真完成实验,将实验结果记录于下表。
红细胞的渗透脆性观察项目试管编号未发生溶血部分溶血完全溶血六、思考1.什么是红细胞的渗透脆性?红细胞的渗透脆性一般是指红细胞,在低渗溶液中发生溶血的性能,称为渗透脆性。
生理学试验讲义
生理学实验讲义实验三影响红细胞渗透脆性及血液凝固的因素一、影响红细胞渗透脆性的因素【实验目的】1、本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。
2、加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。
3、观察不同因素对红细胞渗透脆性的影响。
【实验原理】将红细胞悬浮于等渗NaCI 液中,其形态不变。
若置于低渗NaCI 溶液中则发生膨胀破裂,此现象称为红细胞渗透脆性。
但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力,其大小可用NaCI 溶液浓度的高低来表示。
将血液滴入不同浓度的低渗NaCI 溶液中,开始出现溶血现象的NaCI 溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力(正常为0.42-0.46%NaCI 溶液)。
出现完全溶血现象时的NaCI 溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力(正常为0.28-0.32%NaCI 溶液)。
前者代表红细胞的最大脆性(最小抵抗力),后者代表红细胞最小脆性(最大抵抗力)。
生理学上将能使悬浮于其中的药细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液,不能跨过细胞膜的微粒所形成的力,但等渗溶液并不一定是等张溶液(如1.9% 的尿素溶液)。
【材料与方法】一、实验对象家兔二、器械药品:试管架、小试管45 支、载玻片、盖玻片、注射器、8 号注射针头、棉签,1%NaCI 溶液、0.85% 氯化钠溶液、蒸馏水,1.9% 尿素溶液、地塞米松、皂甙。
三、方法与步骤(一)配制不同浓度的低渗NaCI 溶液取口径相同的干洁小试管36 支,分别编号排列在三个试管架上,按下表分别向各试管内加入1%NaCI 溶液和蒸馏水混匀,配制从0.68-0.24%12 种不同浓度的NaCI 低渗溶液,每管总量均为2.5ml 。
表7-1 不同浓度低渗氯化钠溶液的配制试剂试管编号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 121%NaCl(ml) 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 蒸溜水(ml )0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9 NaCl 浓度% 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24 实验结果皂甙(ml )另取9 支小试管,在三个试管架中分别编号13-15 ,分别加入0.85%NaCI 溶液、1.9% 尿素和蒸溜水2.5ml 。
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二、影响红细胞渗透脆性的因素有哪些?
红细胞自身因素;凡能影响红细胞表面积/体积的因素均可影响红细胞渗透脆性,如珠蛋白数量不足或完全缺乏、遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血伴继发球形细胞增多、缺铁性贫血、红细胞寿命、等
实验因素:血液放置时间较长(一般不能超过6小时)、低渗盐溶液的浓度不准确、实验器具未清洁干燥、试管编号错误、向试管内滴加血液或混匀含红细胞的液体时动作用力过大、有凝血、抗凝剂用量过多、等
【课前讲解】
一、实验设计的原理
将红细胞悬浮于低渗盐溶液中,水将在渗透压差的作用下渗入细胞,于是红细胞发生膨胀,由正常的双凹圆碟形变成球形,并开始破裂而发生溶血。
红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。
但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力,这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性高低的指标。
对低渗盐溶液抵抗力小,表示渗透脆性高;相反,则表示渗透脆性低。
同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。
将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中可检测其抵抗力的大小,刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力;出现完全溶血溶液浓度,为该血液中红细胞的最大抵抗力。
前者代表红细胞的最大渗透脆性,后者代表红细胞的最小渗透脆性。
生理学上将渗透压与血浆的渗透压相等的溶液称为等渗溶液;能使悬浮于其中的红细胞保持正常体积和形态的溶液称为等张溶液。
等渗溶液不一定是等张溶液,如1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液,但不是等张溶液;而等张溶液溶液一定是等渗溶液,如浓度为0.85%的NaCl 溶液既是等渗溶液又是等张溶液。
成败关键(注意事项)
1. 血液最好新鲜制备。
2. 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。
3. 所有玻璃器皿要求干燥清洁。
4. 向试管内滴加血液时不可用力挤压,不可将血泡沫注入试管。
混匀含红细胞的液体时动作应轻,以免造成溶血。
5. 观察溶血情况时以白色为背景。
6. 为使各管加血量相同,加血时持针角度应一致。
一、结果分析
将红细胞悬浮于低渗盐溶液中,水将在渗透压的作用下渗入细胞,于是红细胞发生膨胀,由正常的双凹圆碟形变成球形,并开始破裂而发生溶血。
红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。
但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力,这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。
同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。
生理情况下,衰老的红细胞可变形性减小,变成球形,因而对低渗盐溶液抵抗力低,会先发生破裂,正常人刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为0.46%~0.42%NaCl溶液;而较幼稚
的红细胞的抵抗力高,较后发生破裂,正常人出现完全溶血的NaCl溶液浓度为0..34%~0.32% NaCl溶液。
红细胞膜对水分子可自由通透,水分子依渗透压梯度进入红细胞,红细胞膨胀破裂而溶血,因此,红细胞在蒸馏水中立即发生溶血。
红细胞膜对尿素分子可自由通透,尿素分子依浓度梯度进入红细胞,而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜,导致红细胞内渗透压增高,水进入细胞,红细胞膨胀破裂而溶血,因此,1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液,但不是等张溶液。
NaCl分子和红细胞内的物质都不易透过红细胞膜,故红细胞在等渗的0.85%的NaCl溶液中不会发生溶血,因此,0.85%的NaCl溶液既是等渗溶液又是等张溶液。
二、非预期结果及可能原因分析
血液放置过久;混匀血液或向试管内滴加血液时用力过大;肝素抗凝时用量过多;玻璃器皿未干燥。
2. 溶血程度不随NaCl溶液浓度改变而有规律地变化,原因主要有:
各试管加血量不准确;试管编号不准;溶液浓度配制不准。
【参考结论】
1. 红细胞在小于或等于0.46%浓度的低渗盐溶液中会发生溶血。
2. 正常人红细胞渗透脆性最高值为0.46%~0.42% 的NaCl溶液,最低值为0.34%~0.32% 的NaCl溶液。
3. 红细胞在等渗盐溶液中为双凹圆碟形,在低渗盐溶液中为球形。
4. 红细胞在等渗的尿素溶液或蒸馏水中会立即发生溶血。
【实验报告要点】
一、为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值?
同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。
生理情况下,衰老的红细胞可变形性减小,变成球形,因而对低渗盐溶液抵抗力低,会先发生破裂;而较幼稚的红细胞的抵抗力高,较后发生破裂。
将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中,刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最大渗透脆性,出现完全溶血的溶液浓度,为该血液中红细胞的最小渗透脆性。
二、红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会发生什么现象?为何出现这种现象?
红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会立即溶血。
因红细胞膜对尿素分子可自由通透,尿素分子依浓度梯度进入红细胞,而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜,导致红细胞内渗透压增高,水进入细胞,红细胞膨胀破裂而溶血,因此,1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液,但不是等张溶液。
【参考内容】
一、红细胞渗透脆性实验的临床意义
【临床意义】
红细胞在低渗盐水中,水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。
本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。
红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度有关,厚度越大,膜面
积与体积比值越小,则渗透脆性越大。
1.红细胞脆性增加遗传性球形红细胞增多症,自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。
2.红细胞脆性减低见于各型海洋性贫血,包括轻型,重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。
缺铁性贫血,镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况,如肝病等。