红细胞渗透脆性检测试剂盒(过筛法)

红细胞渗透脆性检验试剂盒(一管法)

适用于体外检测贫血等引起地红细胞渗透脆性病变，特别是红细胞渗透脆性降低一类地贫血症筛查.（如地贫症、严重缺铁性贫血症）【检验原理】贫血症者常伴有红细胞渗透脆性地改变.测定红细胞在一定渗透浓度下地溶血率，可筛查是否贫血，特别是溶血率降低引起地贫血.个人收集整理勿做商业用途【主要组成成分】组成由母液（红细胞渗透脆性检测液）；母液（终止红细胞溶血液）；母液（红细胞溶血液）组成；成分母液采用氯化钠（）、磷酸氢二钠（）、磷酸二氢钠（）制成；母液采用氯化钠制成；母液采用皂素（）制成.个人收集整理勿做商业用途【贮存条件及有效期】避光贮存在℃℃环境中，其保质期个月.和试验液可在室温保存，试验液在℃℃保存；试剂开瓶后有效期为个月.【适用仪器】具有波长地分光光度计；普通离心机；水浴箱.、【样品要求】新鲜抗凝全血（肝素、、），置℃℃保存.已发生溶血或有血凝块地标本为不合格样品.标本采集后，测试应在三日内完成.个人收集整理勿做商业用途【检测方法】【试验液配制】试验液：用一个容量瓶（不要用量筒！），上放一个小漏斗.将母液倒入漏斗中.用纯化水洗净装母液地管和盖，将管内余液倒入容量瓶，然后加纯化水于容量瓶中，准确至刻度，混匀后即为试验液.个人收集整理勿做商业用途试验液：将母液倒入容量瓶中，加入纯化水，混匀后，即为试验液.试验液：将母液倒入容量瓶中，加入纯化水，混匀后，即为试验液.【实验操作】取试管一只，加入试验液，放℃，预热分钟.加入待测抗凝全血μ，立刻混匀，继续放在℃保温分钟.分钟后，加入试验液.混匀，转分钟，离心分钟.将上清液轻轻倒入×地比色杯中（切勿搅动试管底地红细胞），于波长读取光密度（以纯化水作空白对照）.（勿倒掉比色杯中地溶液）个人收集整理勿做商业用途向试管中加入试验液，混匀，待血液全部溶血（透明红色）后，将比色杯中已比色地溶液倒入试管中混匀.个人收集整理勿做商业用途将混匀后地溶液，倒入比色杯中，再于波长比色，读取光密度.按下列公式计算出溶血率百分比.溶血％×％【参考值（参考范围）】溶血率％>％为正常溶血率；<％为溶血率降低；（注％为溶血率轻度降低）.个人收集整理勿做商业用途【检验结果地解释】正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围.溶血率降低：指红细胞渗透脆性降低；常见于地贫或低频基因携带者、严重缺铁性贫血者，小性红细胞增多症贫血者等.个人收集整理勿做商业用途溶血率轻度降低：指红细胞溶血率不明显减低，在正常与可疑贫血症之间.、【检验方法地局限性】本试剂盒仅用于红细胞渗透脆性地检测.使用非新鲜或凝血血标本，可导致结果不可靠.、【产品性能指标】试剂变色或有浑浊沉淀则应判断为失效.、【注意事项】、本法对血液标本地新鲜度要求高，应采用小时内采集地，℃保存地血液进行测试.、所有母液放℃保存.此时有结晶析出.用时，必须放在℃加温摇动至完全溶解后才能使用.和试验液可放室温保存，试验液放℃保存.个人收集整理勿做商业用途、有效期内地不同批次试剂可疑互相使用.【参考文献】杜传书增瑞萍华小云等.地中海贫血一管筛查法《一种简易筛查人群地中海贫血地方法年》. . 个人收集整理勿做商业用途( ) 个人收集整理勿做商业用途; ;( )个人收集整理勿做商业用途撰写人：陈丽忠审核人：谭少仪批准人：肖增磺批准日期年月日。

血液试验课件—红细胞渗透脆性试验

握红细胞渗透脆性
试验的原理、方法、注意事项及临床意义。
• 实验报告：红细胞渗透脆性试
验的原理、注意事项及临床意义。
• 原理
红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。对低渗盐溶液抵抗力小，表示渗透脆性高；相反，则表示渗透脆性低。
NaCl浓度（%） 0.68 0.64 0.60 0.56 0.52 0.48 0.44 0.40 0.36 0.32 0.28 0.24
• 注意事项 . 准确配制不同浓度的低渗盐溶液。
.所有玻璃器皿要求干燥清洁。
. 向试管内滴加血液时不可用力挤压，不可将血泡沫注入试管。混匀含红细胞的液体时动作应轻，以免造成溶血。
红细胞渗透脆性实验中不同浓度的NaCl溶液配制法
试管编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.9%NaCl（ml） 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 蒸馏水(ml) 0.8 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9
. 观察溶血情况时以白色为背景。
. 为使各管加血量相同，加血时持针角度应一致。
. 各试管应准确编号。
. 玻璃器皿应小心轻放，以免损坏。
• 参考范围开始溶血NACL浓度：0.46%～0.42% 完全溶血NACL浓度： 0.34%～0.32%
患者与正常对照，溶血管的NaCl浓度相差 0.4%具有诊断价值。
临床意义
红细胞渗透脆性增高：见于遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血和遗传性椭圆形细胞增多症。

实验五红细胞的渗透脆性

实验九红细胞的渗透脆性1、实验目的（1）学会测定红细胞脆性的方法和配制不同浓度的NaCl溶液,观察比较红细胞在等渗NaCl溶液和等渗尿素溶液中发生的不同情况。

（2）正确判断和记录实验结果，根据结果分析血浆晶体渗透压的生理意义,理解细胞外液渗透张力的相对恒定对维持细胞正常形态与功能的重要性。

2、实验原理将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可检查红细胞膜对于低渗盐溶液抵抗力的大小。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（正常约为0.40%～0.45%NaCl溶液）；出现完全溶血时的低渗盐溶液浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力（正常为0.30%～0.35%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小。

3、实验用品抗凝血液、小试管、试管架、滴管、1ml吸管、1%NaCl溶液、蒸馏水。

4、方法与步骤（1）取小试管12支，编号排列在试管架上。

（2）按表要求配制10种浓度的低渗盐溶液外加一支蒸馏水、一支1.9%尿素溶液。

（3）将兔心脏取的血液经抗凝处理后，给各式管内各加1滴，混匀后，静置30分钟后观察。

不同浓度的低渗盐溶液的配制1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1%氯化钠0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25蒸馏水0.1 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 0.6 0.65 0.7 0.75溶液浓度0.9 0.65 0.6 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.254、观察实验结果根据各管混合液的颜色和混浊度的不同，判断最大脆性和最小脆性。

（1）未发生溶血的试管：液体下层为混浊红色，上层为无色，表明无红细胞破裂。

（2）部分溶血的试管：液体下层为混浊红色，而上层出现透明红色，表明部分红细胞已破裂，称为不完全溶血。

出现不完全溶血的最大低渗盐溶液，是该血液红细胞的最小抵抗力，表示红细胞的最大脆性。

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验一、原理红细胞渗透脆性试验(erythrocyte osmotic fragility test)是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵抗力的一种半定量试验。

在低渗盐溶液中，由于水分渗入细胞内，红细胞会膨胀甚至破裂、溶血。

因此将红细胞加到不同浓度的低渗盐溶液中，观察发生溶血的情况，可判断红细胞对低渗盐溶液的抵抗能力。

红细胞开始出现溶血的低渗盐溶液浓度为开始溶血浓度，红细胞完全溶血的盐溶液浓度为完全溶血浓度。

当某些原因导致红细胞对低渗盐溶液抵抗能力降低时，红细胞容易破碎，发生溶血，称为红细胞渗透脆性增加；反之，称为红细胞渗透脆性降低。

二、检测方法（一）试剂与器材1、器材：分析天平、注射器、针头、无菌小试管等。

2、试剂：1% NaCl溶液：用分析天平称取分析纯 NaCl 1.000g，加少量蒸馏水溶解，于100ml容量瓶中用蒸馏水定容，置于玻璃瓶中灭菌后使用。

(二）操作1、取12支无菌小试管编号，配制不同浓度的 NaCI 溶液。

2、用肝素湿润的注射器抽取待检者血液1ml，向各管中加入1滴(中度以上贫血的标本加2滴)全血，轻轻摇，室温静置2小时后观察结果。

3、结果判断从1号管开始观察溶血情况。

不溶血：上清液透明无红色;开始溶血：上清液刚呈浅红色，管底有较多未溶的红细胞；完全溶血：溶液呈透明红色，管底无红细胞。

三、参考区间开始溶血 NaCl浓度：3.8~4.6g/L;完全溶血 NaCl浓度：2.8~3.2g/L四、注意事项1、NaCl必须干燥，可将分析纯氯化钠于100℃下烘干，置于干燥器中完全冷却后再准确称量使用。

2、所用器具应干燥清洁，避免出现人为溶血。

向试管内滴加血液时须将血液直接注入试剂中，不可沿管壁注入，混匀时动作须轻柔。

3、观察溶血情况时以白色背景为宜。

4、结果不易判断时，可低速短时离心后观察5、每次试验应以相同实验条件做正常对照。

被检者与正常对照开始溶血管的 NaCI浓度相差0.4g/L即有诊断价值。

优质文档红细胞渗透渗出脆性试验

[优质文档]红细胞渗透渗出脆性试验红细胞渗透脆性试验来源于:江西检验医学网红细胞渗透脆性试验red cellosmotic fragility test参考范围:开始溶血 O.40,一0.44, (NaCl液)完全溶血 O.32,一O.36, (NaCl液)临床评价:1(红细胞膜，有人称为鬼影(ghost)，是一种由磷脂、非酰化的胆固醇和糖蛋白等组成膜脂质和主体、膜蛋白质(转运蛋白和表面抗原)与周围膜蛋白质(膜骨架中的收缩蛋白和肌动蛋白以及膜骨架依靠的锚蛋白)所组成。

这些成分要保证红细胞在120天寿命内50，000次通过“急流旋涡”仍能生存;要控制Na+和K+在细胞内的浓度，任何导致K+漏出增高超过Na+的漏入，均会导致细胞内单价阳离子和水分的丢失。

这些生理功能的完善与否，可用简单且明白的膜渗透脆性试验来了解。

2(正常红细胞为双凹盘形，在低渗盐水中吸水膨胀的适应性大(可增加70,的体积而不破裂)，遗传性球形红细胞增多症(HS)等红细胞的S,V比率小，对低渗盐水的适应性小(脆性大)，所以红细胞渗透跪性试验是检测HS最有用的方法，当红细胞混悬于不同浓度的NaCl低渗溶液时，正常红细胞于O(4,一0(44,NaCl浓度时开始溶血，于o(32,一O(36,NaCl浓度时完全溶血。

HS病人的红细胞大多于0(50,一0(75,NaCl时开始溶血，于0(4,NaCl浓度时完全溶血，患者红细胞渗透脆性试验与正常对照组相比提高0.04,(NaCl液)以上即为阳性，还可见于遗传性椭圆形红细胞增多症，某些伴有球形红细胞增多的自身免疫性溶血性贫血。

3(红细胞渗透脆性试验显示，低于参考溶血的NaCl浓度可见于地中海贫血，血红蛋白C、D、E病，缺铁性贫血和肝脏疾病。

4(在试验过程中要严格控制加血量的准确性和防止血标本在体外溶血，否则易影响试验的准确性。

1(原理:悬浮于低张溶液中的红细胞，由于溶液张力差异，可使红细胞外的水渐渐进入红细胞中。

红细胞渗透脆性(仅供参照)

红细胞渗透脆性试验[实验目的]：学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。

放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。

[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。

试管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10试管蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。

[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。

1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。

2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验红细胞渗透脆性试验介绍：本试验测定红细胞对各种浓度低渗溶液的抵抗力。

在低渗盐水中，水分透过细胞膜，使红细胞逐渐胀大破坏。

红细胞的渗透性主要取决于红细胞的表面积与体积之比。

表面积大而体积小者对渗盐溶液的抵抗力较大，反之则抵抗力较小(脆性增加)。

球形红细胞表面积/体积比值减少，对低渗溶液特别敏感，脆性显著增加。

红细胞渗透脆性试验正常值：桑福德法：初溶(开始溶血)：0.0042～0.0046 (0.42%～0.46%)氯化钠溶液。

完全溶血：0.0032～0.0034 (0.32%～0.34%)氯化钠溶液。

红细胞渗透脆性试验临床意义：异常现象：(1)增高：遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。

(2)降低：镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。

需要检查人群：贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群红细胞渗透脆性试验注意事项：检查时：(1)地中海贫血的渗透脆性降低，应进行低浓度NaCl溶液的检查。

(2)严重贫血者，要把RBC配成50%浓度，黄疸者要洗红细胞。

(3)血标本在冰箱中保存不得超过6h。

红细胞渗透脆性试验检查过程：1、制备不同浓度的NaCl溶液。

先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100m l,然后去口径相同的干净试管12支，编号排列在试管架上，按下表分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水后混匀，配置12种0.68%~0.24%不同浓度的低渗NaCl溶液2、分别配置0.85%浓度的NaCl溶液、1.9%浓度的尿素溶液。

另取3支小试管，编号13~15，分别盛2.5ml 0.85%NaCl溶液。

1.9%尿素溶液和蒸馏水3、碘酒、酒精消毒皮肤后用灭菌干燥的、肝素湿润的注入器从肘正中静脉取2ml，利己混匀，将其中1ml加入试管，余血一次向15支试管内各加入1滴，轻轻混匀。

4、观察13、14、15管的变化，其余12管在室温下静置1小时，然后观察混合液的颜色和透明度。

红细胞渗透脆性的测定

红细胞渗透脆性的测定[目的与原理] 掌握测定红细胞渗透脆性的方法，测定不同鱼类红细胞渗透脆性并理解细胞外液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。

正常情况下，动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等，哺乳动物约相当于0.9％NaC1溶液的渗透压，鱼类的等渗溶液为0.85％～1.0％NaC1溶液。

将红细…[目的与原理]掌握测定红细胞渗透脆性的方法，测定不同鱼类红细胞渗透脆性并理解细胞外液渗透压对维持细胞正常形态与功能的重要性。

正常情况下，动物红细胞内的渗透压与血浆的渗透压相等，哺乳动物约相当于0.9％NaC1溶液的渗透压，鱼类的等渗溶液为0.85％～1.0％NaC1溶液。

将红细胞置于等渗溶液中，其形态和容积可保持不变。

若将红细胞悬浮于低渗的NaC1溶液中，则水分进入红细胞使之膨胀甚至破裂溶解，但红细胞对低渗溶液具有一定的抵抗力，其抵抗力大小与红细胞膜脆性有关。

通常用不同浓度的NaC1溶液来测定红细胞膜的渗透脆性，红细胞膜渗透脆性大的，则对低渗NaC1溶液的抵抗力小，NaC1溶液的渗透压稍有降低，此类红细胞便发生破裂而溶血。

反之，脆性小的则对NaC1溶液的抵抗力大，Nac1溶液的渗透压降到很低时才使这些红细胞破裂溶血。

刚能引起一部分红细胞溶解的低渗NaCl的浓度可以代表最小抵抗值；使全部红细胞溶解的NaCl浓度为最大抵抗值。

通常就以抵抗值表示红细胞的渗透脆性。

在刚成熟的红细胞，其膜的渗透脆性较小，而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。

[实验对象]鲤、鲫或草鱼。

[试剂与器材]5毫升无菌注射器，消毒棉球，中试管，小试管，试管架，滴管，1%NaCl，蒸馏水，75%酒精，碘酒，凹瓷盘，1%肝素钠或10%草酸钾溶液，3.8% 枸橼酸钠。

[实验步骤]滴血，将试管夹在两掌心中迅速搓动，使血液与管内NaCl溶液混匀（切勿用力震荡），室温下放置2小时后观察结果。

多余血液注入盛有0.1毫升3.8% 枸橼酸钠的试管内。

加以混合，以备重复实验使用。

红细胞渗透脆性

红细胞渗透脆性试验[实验目的]：学习测定红细胞渗透脆性的方法[实验原理]：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。

放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。

[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。

蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25（二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。

[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。

1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。

2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。

红细胞脆性实验报告

一、实验目的1. 掌握红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。

2. 通过实验了解红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力。

3. 分析实验结果，了解红细胞渗透脆性与临床疾病的关系。

二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜稳定性的方法。

正常红细胞在低渗溶液中具有一定的抵抗力，当溶液浓度逐渐降低时，红细胞开始膨胀、破裂，直至完全溶血。

红细胞对低渗溶液的抵抗力称为渗透脆性。

渗透脆性高表示红细胞膜稳定性差，易发生溶血；渗透脆性低表示红细胞膜稳定性好，不易发生溶血。

三、实验材料与仪器1. 材料：抗凝血液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、1.9%尿素溶液、不同浓度的NaCl溶液、试管、移液管、滴管等。

2. 仪器：离心机、显微镜、天平等。

四、实验步骤1. 准备实验溶液：配制不同浓度的NaCl溶液，分别标记为1号、2号、3号、4号、5号溶液。

2. 标准操作：取抗凝血液1ml，加入试管中，用移液管吸取1ml生理盐水，加入试管中，混匀后用滴管滴加1ml 5%葡萄糖溶液，再次混匀。

3. 溶血观察：将上述混合液分别滴加到不同浓度的NaCl溶液中，观察红细胞溶血情况。

4. 记录结果：记录开始出现溶血的NaCl溶液浓度和完全溶血的NaCl溶液浓度。

5. 数据分析：计算红细胞渗透脆性值，并与正常值进行比较。

五、实验结果与分析1. 实验结果：- 开始出现溶血的NaCl溶液浓度：3.0g/L- 完全溶血的NaCl溶液浓度：2.0g/L2. 结果分析：本实验中，开始出现溶血的NaCl溶液浓度为3.0g/L，完全溶血的NaCl溶液浓度为2.0g/L。

与正常红细胞渗透脆性值（开始出现溶血的NaCl溶液浓度约为2.9g/L，完全溶血的NaCl溶液浓度约为2.3g/L）相比，本实验中红细胞渗透脆性值略高，表明实验者红细胞膜稳定性较差。

六、实验结论1. 本实验通过测定红细胞对不同浓度低渗溶液的渗透抵抗力，成功掌握了红细胞渗透脆性试验的原理和操作方法。

红细胞渗透脆性(EOF)检测试剂盒(一管法)产品技术要求参考版

医疗器械产品技术要求编号：
红细胞渗透脆性（EOF）检测试剂盒(一管法)
1.产品型号/规格及其划分说明
1.1型号规格
100测试/盒、200测试/盒。

1.2结构组成
主要由R1：纯水、R2:氯化钠（0.4%）和信息卡组成。

1.3适用范围
用于体外定性检测人全血中的红细胞渗透脆性，临床主要用于红细胞渗透脆性降低的辅助诊断。

1.
2.性能指标
2.1外观和性状
2.1.1试剂盒应组分齐全、内外包装均应完整、标签清晰；
2.1.2液体试剂无渗漏，R1、R2为清澈透明的液体，无沉淀及絮状物；
2.1.3信息卡无折叠。

2.2净含量
试剂装液量应不低于表1中不同规格产品的试剂装量要求。

2.3试剂空白
测试纯化水，散射光强度应不大于5000。

2.4阳性符合率
检测溶血率降低者的样本，阳性符合率应≥90.0%。

2.5阴性符合率
检测正常人的样本，阴性符合率应≥90.0%。

2.6精密度
2.6.1重复性
重复测试正常人、溶血率降低者两个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于10.0%。

2.6.2批间差
重复测试正常人、溶血率降低者两个水平的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于10.0%。

渗透脆性实验报告

1. 了解渗透脆性实验的原理和操作方法；2. 掌握渗透脆性实验在临床医学中的应用；3. 通过实验观察不同浓度低渗溶液对红细胞渗透脆性的影响。

二、实验原理渗透脆性实验是检测红细胞对不同浓度低渗溶液的抵抗力，即红细胞的渗透脆性。

在低渗盐溶液中，水分子通过渗透作用进入红细胞，导致红细胞膨胀、破裂，最终发生溶血。

红细胞的渗透脆性越高，其抵抗力越低，越容易发生溶血。

三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜血液、生理盐水、不同浓度的低渗溶液（如0.9%、0.7%、0.6%氯化钠溶液）、试管、试管架、离心机、滴管、移液器等；2. 仪器：显微镜、恒温水浴箱、电子天平、计时器等。

四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液：取生理盐水，分别加入一定量的氯化钠，配制成0.9%、0.7%、0.6%的氯化钠溶液；2. 制备红细胞悬液：取新鲜血液，加入适量的生理盐水，混匀后离心，取上清液即为红细胞悬液；3. 将红细胞悬液分别加入不同浓度的低渗溶液中，每管1ml；4. 将试管置于37℃恒温水浴箱中孵育2小时；5. 取出试管，观察红细胞溶血情况，记录溶血开始和完全溶血时的氯化钠浓度；6. 重复实验，取平均值。

五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中，红细胞未发生溶血；2. 在0.7%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血，溶血开始浓度为0.7%；3. 在0.6%氯化钠溶液中，红细胞完全溶血，溶血完全浓度为0.6%。

根据实验结果，可以得出以下结论：1. 红细胞在低渗盐溶液中，随着氯化钠浓度的降低，其渗透脆性逐渐增加；2. 在0.7%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血，说明该溶液为红细胞的最小抵抗力；3. 在0.6%氯化钠溶液中，红细胞完全溶血，说明该溶液为红细胞的最大抵抗力。

七、实验讨论1. 渗透脆性实验在临床医学中具有重要的应用价值，可以用于检测和诊断某些溶血性疾病，如遗传性球形细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血等；2. 本实验结果与理论相符，说明实验方法可靠；3. 实验过程中，应注意操作规范，避免人为误差。

红细胞渗透脆性实验

红细胞渗透脆性实验红细胞渗透脆性实验是一种常用的血液分析方法，用于评估红细胞膜的稳定性和弹性。

该实验利用了红细胞在不同渗透压下的脆性变化，可以对红细胞膜的功能、水平和吸收能力进行评估和分析，具有重要的临床意义。

实验原理：红细胞内部有一定的渗透压，当红细胞分离出体外时，如果外部环境的渗透压高于红细胞内的渗透压，则会通过半透膜透过膜进入红细胞内部，使红细胞体积膨胀，红细胞膜被撑开。

反之，当外部环境的渗透压低于红细胞内的渗透压时，水会从红细胞内部流出，红细胞体积缩小。

实验过程：1、准备标准盐水浓度，即0.9%的氯化钠溶液。

2、取一定量的患者血液样本，离心去上清液，弃去上清液后，将沉淀物用相同体积的0.9%氯化钠溶液洗涤3次。

3、取少量的红细胞沉淀，加入不同浓度的盐水，称出每种浓度的盐水加入相应的样本内。

4、使样本和盐水充分混合，放置不同的时间（一般为30分钟），孵育后进行离心处理。

5、标记沉淀物的红细胞体积，对分离出的上清液测定其吸光度（或乳胶凝集率）。

6、计算红细胞的溶血率，溶血率越高，表示红细胞的渗透脆性越高。

实验结果：在不同盐水浓度下孵育后，红细胞和盐水发生渗透压差异，导致红细胞脆性变化，失去完整性。

通过测定溶血率，可以得到红细胞的溶血程度，从而分析红细胞渗透脆性的高低，反映红细胞膜的稳定性和弹性。

一般来说，红细胞膜的完整性越强，渗透脆性越低，溶血程度越小；反之，红细胞膜的完整性越弱，渗透脆性越高，溶血程度越大。

实验注意事项：1、样本应在离心前密闭保存，避免污染。

2、孵育时间需控制在一定范围内，过长过短都会影响实验结果。

3、盐水和样本的比例应准确。

4、实验过程需严格按照操作流程，避免误差。

结论：红细胞渗透脆性实验可以反映红细胞膜的稳定性和弹性，对于临床疾病诊断、治疗和预后评估有着很高的应用价值。

在具体应用时，需结合其他临床检测项目综合分析，才能准确地诊断疾病并制定科学的治疗方案。

生理学实验4红细胞渗透脆性的测定

实验动物：动物种类不限。
01
实验器材：试管架、小试管、滴管，移液管。
02
药品与试剂：1%NaCl溶液、0.85%氯化钠溶液、蒸馏水，1.9%尿素溶液，1%肝素。
03
【实验材料】【实验方法】 Nhomakorabea01
制备抗凝血：不同动物采血方法各异，但多采用末梢血。把血液放入含有肝素的烧杯内，混匀。1%肝素1ml可抗10ml血。
02
加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，依次向13支试管内各加1滴，轻轻颠倒混均，切忌用力振荡。先观察11、12、13管的变化，其他10支试管在室温下放置1小时。
血液溶血情况，其现象可分为以下几种：
观察结果
试管内液体完全变成透明红色，说明红细胞完全破裂，称为完全溶血。试管内液体下层为混浊红色，上层无色透明，表示部分红细胞没有破坏，称为不完全深血。试管内液体下层为混浊红色，上层无色透明，说明红细胞完全没有破坏。
实验四红细胞渗透脆性的测定
单击此处添加文本具体内容
演讲人姓名
CLICK HERE TO ADD A TITLE
本实验学习测定红细胞渗透脆性的方法。
加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。
01
02
【实验目的】
【实验原理】
在临床或生理实验使用的各种溶液中，与血浆渗透压相等的称为等渗溶液（如0.85%NaCI溶液），高于或低于血浆渗透压的则相应地称为高渗或低渗溶液。将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中即可看到：在等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；在渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血，这时血红蛋白逸出细胞外，称为溶血。

红细胞渗透脆性实验报告

红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验报告红细胞渗透脆性实验是一项常见的生物学实验，用于评估红细胞的脆性程度。

本次实验旨在了解红细胞在不同渗透压条件下的渗透脆性，并探讨其与细胞膜完整性的关系。

实验材料和方法：1. 实验材料：新鲜采集的人类全血、生理盐水、不同浓度的高渗溶液（如5%、10%、15%的NaCl溶液）。

2. 实验步骤：a. 将采集的全血分装到离心管中，并在4℃下离心10分钟，以分离红细胞。

b. 轻轻吸取上清液，将红细胞沉淀洗涤3次，每次用生理盐水洗涤。

c. 将洗涤后的红细胞与不同浓度的高渗溶液混合，制备一系列不同渗透压条件下的红细胞悬液。

d. 将悬液置于37℃恒温水浴中孵育30分钟。

e. 孵育结束后，离心悬液，观察上清液的颜色和透明度。

实验结果：根据实验结果观察，可以发现不同浓度的高渗溶液对红细胞的渗透脆性有不同的影响。

当高渗溶液的浓度较低（如5% NaCl溶液）时，红细胞悬液的上清液呈现浅黄色，透明度较高，说明红细胞的渗透脆性较低，细胞膜相对完整。

而当高渗溶液的浓度逐渐增加（如10%、15% NaCl溶液），红细胞悬液的上清液逐渐变深，透明度降低，说明红细胞的渗透脆性增加，细胞膜受损程度加剧。

实验讨论：红细胞的渗透脆性与细胞膜完整性密切相关。

正常情况下，红细胞细胞膜由磷脂双分子层和蛋白质组成，具有较高的弹性和稳定性。

当红细胞暴露于高渗溶液中时，溶液中的溶质会通过渗透作用进入红细胞内部，导致细胞内外渗透压差增大。

当渗透压差超过红细胞膜的承受能力时，细胞膜可能发生破裂或变形，导致红细胞渗透脆性增加。

实验结果表明，高渗溶液的浓度越高，红细胞的渗透脆性越大。

这是因为高渗溶液中的溶质浓度较高，渗透压差增大，红细胞内部水分向溶液中渗透，细胞体积收缩，细胞膜受到拉力的作用，从而增加了细胞膜的破裂风险。

此外，红细胞的渗透脆性还受到其他因素的影响，如温度、pH值等。

在实验中，我们将红细胞悬液置于37℃恒温水浴中孵育，这是因为温度的升高可以加速分子运动，增加红细胞与溶液之间的分子碰撞，进一步促进渗透作用。

红细胞的脆性实验报告

一、实验目的通过本次实验，掌握红细胞渗透脆性试验的原理、操作方法及临床意义，了解红细胞在不同浓度低渗溶液中的抵抗力，并分析影响红细胞渗透脆性的因素。

二、实验原理红细胞渗透脆性试验是一种检测红细胞膜对低渗溶液抵抗力的方法。

当红细胞悬浮于低渗盐溶液中时，水分会通过渗透作用进入红细胞，使红细胞膨胀，最终导致溶血。

红细胞对低渗盐溶液的抵抗力大小，即渗透脆性，可以通过观察红细胞在不同浓度低渗溶液中的溶血情况来判断。

三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜抗凝血、蒸馏水、1.9%尿素溶液、生理盐水、5%葡萄糖溶液、0.9%氯化钠溶液、试管、移液管、滴管、显微镜等。

2. 仪器：离心机、恒温水浴箱、分析天平、显微镜等。

四、实验步骤1. 配制不同浓度的低渗溶液：将生理盐水稀释成0.9%、1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%的氯化钠溶液。

2. 取新鲜抗凝血，用移液管吸取适量血液加入试管中，加入适量的生理盐水，混匀后置于离心机中离心，取上层血浆备用。

3. 将不同浓度的低渗溶液分别加入试管中，用移液管吸取适量的血浆加入试管中，混匀后置于恒温水浴箱中恒温孵育。

4. 观察红细胞在不同浓度低渗溶液中的溶血情况，记录溶血开始和完全溶血的时间及对应的低渗溶液浓度。

5. 计算红细胞的渗透脆性，包括最大渗透脆性和最小渗透脆性。

五、实验结果1. 在0.9%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为5分钟，完全溶血的时间为10分钟。

2. 在1.0%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为4分钟，完全溶血的时间为8分钟。

3. 在1.2%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为3分钟，完全溶血的时间为7分钟。

4. 在1.4%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为2分钟，完全溶血的时间为6分钟。

5. 在1.6%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为1分钟，完全溶血的时间为5分钟。

6. 在1.8%氯化钠溶液中，红细胞开始溶血的时间为0分钟，完全溶血的时间为4分钟。

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验[原理]本试验是测定红细胞对不同浓度低渗盐水溶解的抵抗力。

当红细胞置于低渗盐水中，水逐渐渗入细胞内，使红细胞膨胀成球形，当到达一定限度后，细胞内的血红蛋白便开始漏出。

其抵抗力与红细胞表面积和体积比值有密切关系，表面积大而体积小者，对低渗盐水抵抗力较大(渗透性减低)；反之，则抵抗力较小(渗透性增强)。

球形细胞表面积和体积比值减小，渗透脆性增强；球形细胞表面积和体积比值增大，则渗透脆性也明显降低。

[试剂]1．双草酸盐抗凝剂：草酸铵1．28．，草酸钾0．88，加蒸馏水至100ml。

每管加O．2ml，100℃烘干备用。

2．18／d1氯化钠溶液(NaCl)：准确称取经100℃烘干的分析纯氯化钠，置于100m1容量瓶内，先加少量的蒸馏水溶解后，再加双蒸馏水至刻度。

[操作](1)取12支清洁干燥试管，编号排列，然后分别取1g/dlNaCl溶液和蒸馏水，按表1-3-1加入试管中。

(2)取静脉血’2m1，以双草酸盐抗凝或不用抗凝剂直接就原针头加血于不同浓度的氯化钠试管中，每管1滴(约0．05ml），轻轻摇匀，然后置室温2小时，各管离心沉淀；观察上清液开始溶血管和无细胞的完全溶血管。

(3)如需作孵育红细胞渗透脆性试验，可多取血2ml，置于另一双草酸盐抗凝试管内，加塞后置37℃孵箱内培育24小时，取出再按上述操作程序胁定开始溶血管和完全溶血管氯化钠浓度。

(4)每次试验应同时作正常对照。

[结果观察]。

室温静置2小时，离心观察结果，从高浓度管开始逐管观察：上层溶液开始出现透明红色、且管底有红细胞管，为开始溶血管；溶液透明红色、管底完全无红细胞管，为完全溶血管。

[ 参考值]开始溶血：0．0044—0．0048(0．44—0．48％)。

完全溶血：0．0024-0．0028(0．24—0．28％)。

换算系数：＝％×0．01编写：伍海波制定日期：2011.12.1[临床意义]1．红细胞渗透脆性增高：见于遗传性球形红细胞增多症，也见于自身免硅性溶血性贫血或伴有球形红细胞增多症。

红细胞渗透脆性检验试剂盒(一管法)

1、【预期用途】适用于体外检测贫血等引起的红细胞渗透脆性病变，特别是红细胞渗透脆性降低一类的贫血症筛查。

（如地贫症、严重缺铁性贫血症）2、【检验原理】贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。

测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，可筛查是否贫血，特别是溶血率降低引起的贫血。

3、【主要组成成分】组成由A母液（红细胞渗透脆性检测液）；B母液（终止红细胞溶血液）；C母液（红细胞溶血液）组成；成分A母液采用氯化钠（NaCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钠（NaH2PO4）制成；B母液采用氯化钠制成；C母液采用皂素（saponin）制成。

4、【贮存条件及有效期】避光贮存在2℃~8℃环境中，其保质期12个月。

A和B试验液可在室温保存，C试验液在2℃~8℃保存；试剂开瓶后有效期为3个月。

5、【适用仪器】具有530波长的分光光度计；普通离心机；水浴箱。

6、【样品要求】新鲜抗凝全血（肝素、EDTA-Na、ACD），置2℃~8℃保存。

已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。

标本采集后，测试应在三日内完成。

7、【检测方法】【试验液配制】1、A试验液：用一个100ml容量瓶（不要用量筒！），上放一个小漏斗。

将A母液倒入漏斗中。

用纯化水洗净装A母液的管和盖，将管内余液倒入100ml容量瓶，然后加纯化水于100ml容量瓶中，准确至100ml刻度，混匀后即为A试验液。

2、B试验液：将B母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水100ml，混匀后，即为B试验液。

3、C试验液：将C母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水60ml，混匀后，即为C试验液。

【实验操作】1、取试管一只，加入A试验液1ml，放37℃，预热1-2分钟。

2、加入待测抗凝全血10μl，立刻混匀，继续放在37℃保温5分钟。

3、5分钟后，加入B试验液1ml。

混匀，3000转/分钟，离心5分钟。

4、将上清液轻轻倒入1.0cm ×1.0cm的比色杯中（切勿搅动试管底的红细胞），于530nm波长读取光密度D1（以纯化水作空白对照）。

红细胞渗透脆性试验

红细胞渗透脆性试验[目的和原理]目的：测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。

原理：将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。

放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。

将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。

开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl 溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。

对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。

[实验对象]家兔[实验器材]试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。

[实验步骤]（一）低渗盐溶液的配制取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。

蒸馏水（ml）0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度（%）0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 （二）枸椽酸钠血的制备家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入 3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。

[观察项目]用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。

1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。

2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。