小鼠心脏超声实验方法研究
实验性自身免疫性心肌炎小鼠模型的建立与评价周钰瑞
实验性自身免疫性心肌炎小鼠模型的建立与评价周钰瑞发布时间：2021-08-12T08:23:18.055Z 来源：《中国科技人才》2021年第12期作者：周钰瑞[导读] 病毒性心肌炎（viral myocarditis, VMC)是最常见的心肌炎类型，临床表现为不同程度的组织损伤和心功能障碍，部分可转化为扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy, DCM），出现进行性心力衰竭。
周钰瑞苏州大学江苏省苏州市 215123摘要：病毒性心肌炎（viral myocarditis, VMC)是最常见的心肌炎类型，临床表现为不同程度的组织损伤和心功能障碍，部分可转化为扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy, DCM），出现进行性心力衰竭。
自身免疫反应在DCM的发生发展中发挥了重要作用，实验性自身免疫性心肌炎小鼠模型（experimental autoimmune myocarditis，EAM）可以作为研究自身免疫性心肌炎机制、诊断、药物治疗等实验研究的重要模型，本文将简单介绍EAM模型的建立和评价方法。
关键词：自身免疫；心肌炎；小鼠模型 Abstract: Viral myocarditis (VMC) is the most common type of myocarditis. Myocarditis is a disease with an extreme wide range of clinical presentations. Some of them can be converted to dilated cardiomyopathy (DCM) and develop progressive heart failure. Antoimmune responses play an important role in the development of DCM. Experimental autoimmune myocarditis mouse model (EAM) can be used as an important vehicle for experimental research on the mechanism, diagnosis and drug therapy of autoimmune myocarditis. In this review, we will describe the establishment and evaluation methods of the model. Key words: Autoimmunity; Myocarditis; Mouse model心肌炎是影响心脏肌肉组织的炎症过程，许多不同的感染因子可以引起心肌炎[1]，其中病毒性心肌炎(viral myocarditis， VMC)是最频发的类型。
cTnT_R141W_转基因小鼠扩张型心肌病模型的建立(已阅)
【 Key words】 Cardiac troponin T; Dilated cardiomyopathy ; Transgenic model , mouse ; Echocardiography
心肌肌钙蛋白 T(cardiac troponin T ,cTnT) 是构成 肌钙蛋白的 3 种组分之一 ,肌钙蛋白与原肌球蛋白 一起调节心肌的收缩功能[1 - 2 ] 。突变的 cTnTR141W与 家族性扩张型心肌病 ( dilated cardiomyopathy ,DCM) 有关[3] 。在一个 72 位成员组成的家族性扩张型心 肌病家系中 14 位典型的 DCM 患者 , 全部携带有 cTnTR141W突变 ,主要表现为中到重度的 DCM ,心衰发 生较 早 , 超 声 检 查 幼 年 即 有 异 常 表 现 。但 是 cTnTR141W引发的家族性扩张型心肌病的机理仍然不 清楚 ,本文通过转基因技术 ,将 cTnTR141W转入 C57BLΠ 6J 小鼠 ,建立了心肌组织特异表达 cTnTR141W 基因的 转基因小鼠 。
Trizol 法提取 cTnTR141W 转基因小鼠和同窝阴性 小鼠的心脏组织总 RNA ,在 112 %甲醛变性胶上分 离 RNA , 按 Gabi Engler2Blun 报 道 的 方 法 进 行 Northern blotting 分析[7] 。cTnT 探针 DIG 标记 ,化学 发光和 X 光胶片曝光按 Roche 公司产品说明书进 行。 115 病理检测 cTn TR141W转基因小鼠
小鼠超声心动图和超声成像
AbstractRodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1 Echocardiography provides a powerful, non-invasive tool to serially assess cardiac morphometry and function in a living animal.2 However, using this technique on mice poses unique challenges owing to the small size and rapid heart rate of these animals.3 Until recently, few ultrasound systems were capable of performing quality echocardiography on mice, and those generally lacked the image resolution and frame rate necessary to obtain truly quantitative measurements. Newly released systems such as the VisualSonics Vevo2100 provide new tools for researchers to carefully and non-invasively investigate cardiac function in mice. This system generates high resolution images and provides analysis capabilities similar to those used with human patients. Although color Doppler has been available for over 30 years in humans, this valuable technology has only recently been possible in rodent ultrasound.4,5 Color Doppler has broad applications for echocardiography, including the ability to quickly assess flow directionality in vessels and through valves, and to rapidly identify valve regurgitation. Strain analysis is a critical advance that is utilized to quantitatively measure regional myocardial function.6 This technique has the potential to detect changes in pathology, or resolution of pathology, earlier than conventional techniques. Coupled with the addition of three-dimensional image reconstruction, volumetric assessment of whole-organs is possible, including visualization and assessment of cardiac and vascular structures. Murine-compatible contrast imaging can also allow for volumetric measurements and tissue perfusion assessment.心脏的病理生理的啮齿类动物模型代表一个有价值的研究工具，调查机制，疾病以及测试新疗法1超声心动图提供了强大的，非侵入性工具，连续评估一个活生生的动物的心脏形态学和功能。
小鼠心梗模型的建立与无创评价
小鼠心梗模型的建立与无创评价刘建;范慧敏;汪进益;张治国;曹浩;兰琴;史乾;唐光亮;刘中民【摘要】目的建立小鼠的心肌梗死模型,提高动物存活率,并使用心脏超声进行无创心功能评价.方法昆明雄性小鼠20只,气管插管后由左侧第4肋间进胸,结扎冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,在模型建立的前1 d和术后1 d、1周分别使用心脏超声检测左室收缩末直径、舒张末直径、缩短分数和射血分数,并于术后第8天进行病理检查.结果小鼠心肌梗死模型建立过程中早期死亡率10%(2/20),术后1周内死亡率15%(3/20),经过超声评价,造模成功率为75%(15/20).小鼠心功能明显下降,射血分数由手术前的(92.1±3.45)%下降到术后1周的(49.8±14.20)%,缩短分数由手术前的(61.4±2.85)%下降到(26.1±9.01)%;心室明显扩大,左室收缩末直径由(13.9±1.98)μm扩大到(36.5±7.37)μm,舒张末直径由(35.9±3.12)μm扩大到(48.9±6.05)μm.病理学检查见明显瘢痕形成.结论通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立了小鼠心肌梗死模型并可以使用超声心动图评价这一模型.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2010(018)003【总页数】4页(P196-198, 后插3)【关键词】小鼠;模型;动物;心肌梗死;超声心动图【作者】刘建;范慧敏;汪进益;张治国;曹浩;兰琴;史乾;唐光亮;刘中民【作者单位】同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120;同济大学附属东方医院心胸外科,上海,200120【正文语种】中文【中图分类】R654.1急性心肌梗死是当代社会的多发病常见病，人们通过制作动物模型，为研究人心肌梗死的发病机制以及开展新疗法提供基础。
慢性心衰动物模型的制备及指标评定
慢性心衰动物模型的制备及指标评定慢性心衰是一种心血管疾病，其主要特征是心脏功能逐渐衰竭。
为了深入研究慢性心衰的发生机制及治疗方法，科学家们广泛应用动物模型进行实验研究。
下面将介绍慢性心衰动物模型的制备方法以及常用的指标评定方法。
一、慢性心衰动物模型的制备方法：1.高盐饮食法：将小鼠或大鼠的日常饮食中的盐分含量提高，例如增加食盐的含量。
高盐饮食会引起血压升高，从而导致心脏负荷增加，进而发生心衰。
2.高胆固醇饮食法：给小鼠或大鼠注射或灌胃高胆固醇的食物，例如高脂食品。
高胆固醇饮食会引起血液中胆固醇水平升高，导致动脉粥样硬化，心脏供血不足，最终发生心衰。
3.慢性心肌梗塞法：在小鼠或大鼠的冠状动脉中注射致命的微球或通过手术结扎冠状动脉，造成心肌梗塞，进而诱发心衰。
4.肾脏疾病法：通过手术切除小鼠或大鼠的一个或两个肾脏，或者给予肾脏毒素如丙酮酸来诱发肾脏疾病，进而导致心衰的发生。
二、慢性心衰动物模型的指标评定方法：1.心脏形态学指标：通过心脏组织切片染色法，观察心脏组织的肥大程度和纤维化情况。
常用的染色方法有hematoxylin-eosin (HE)染色和Masson's trichrome 染色，通过显微镜观察心脏细胞形态、胶原纤维沉积情况等。
2.心脏生理学指标：使用心电图（ECG）记录动物的心电活动，评估心脏的电生理状态。
常用的心电图参数包括心率、QRS波群、QT间期等。
超声心动图是另一种评估心脏功能的重要工具，可以测量心腔内径、心肌收缩力等参数，来评估心脏的收缩和舒张功能。
3.血液学指标：采集动物的血液样本，常见的指标包括血红蛋白浓度、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等。
这些指标可以反映动物的贫血情况、炎症反应以及凝血功能等情况。
4.生物化学指标：测定动物血液中的心肌损伤标志物，如肌钙蛋白、心钙蛋白等。
这些标志物在心肌损伤时释放到血液中，可以反映心肌细胞的损伤程度。
5.心脏基因表达：通过转录组学方法，分析心脏细胞内基因的表达变化。
正常小鼠冠状动脉的超声成像技术分析
结果
小鼠心脏超声检查结果
对20只C57BL/6小鼠进行超声检测，在胸骨旁左室长轴切位首先显示心脏四腔结构、主动脉，仔细探测主动脉根部前壁，小心旋转探头，使右冠状动脉与扫描平行，均可获得清晰的右侧冠状动脉主干和开口及其管壁周围组织图像。胸骨旁左室短轴切面探测显示主动脉根部紧靠左室上缘处后，小心调整旋转探头，并根据切面图像质量等具体调整，均可获得清晰的左冠状动脉主干和开口及其周围组织图像。20只小鼠冠状动脉各级分支如左前降支、左回旋支以及后降支显示欠佳。
4．
5．Coatney RW. Ultrasound imaging:principles and applications in rodent research[J]. ILAR J, 2001,42(3) : 233 - 247.
6．Байду номын сангаас
7．Lewis JS, Achilefu S, Garbow JR, et al. Small animal imaging. Current technology and perspectives for oncological imaging[J]. Eur J Cancer. 2002,38(16): 2173-2188.
讨论
利用C57BL/6小鼠制备的心脏疾病模型如川崎病、病毒性心肌炎、心肌病、高血压病及转基因动物等已经得到广泛应用，对小鼠模型冠状动脉结构及功能评价是研究的重要内容之一。既往研究单纯以病理观察小鼠冠状动脉损伤的变化作为评价方法，由于这种有创的评价方法难以进行重复性检查，且无法连续、动态的观察模型小鼠冠状动脉损伤的变化，因而对疾病模型的进一步深入研究存在一定制约。随着近年来超声探头高频技术和图像采集高帧频技术的发展，小鼠心脏超声的图像质量有了显著提高。高频小动物超声仪具有常规的二维、M型超声和脉冲多普勒和组织多普勒技术，其高能量信号具有较高的时间和空间分辨率，因而可较清晰观察动脉的生理和形态改变[4]，直观得到丰富的资料。Foster等[5]报道，高频超声可清楚地观察胎鼠、新生鼠和成年小鼠的心脏，甚至可以测出胎龄为85d胎鼠心脏的多普勒血流，出生3天的新生小鼠的三尖瓣已清晰可辨。因此，高分辨率超声成像技术被认为是无创式动态观察小动物心脏以及大血管结构及功能的理想工具[6-7]。
病理生理学实验设计报告
病理生理学实验设计报告一、实验题目探究某种药物对小鼠心肌梗死模型的治疗效果二、实验目的本实验旨在研究某种药物对心肌梗死小鼠模型的治疗作用，通过检测相关生理指标和病理变化，评估该药物在心肌梗死治疗中的潜在价值。
三、实验原理心肌梗死是由于冠状动脉供血急剧减少或中断，导致相应心肌持久而严重的缺血缺氧，引起心肌坏死。
在小鼠心肌梗死模型中，通过结扎冠状动脉左前降支可模拟心肌梗死的发生。
给予实验药物后，观察其对心肌梗死面积、心肌细胞凋亡、炎症反应、心功能等方面的影响，以探讨其治疗机制。
四、实验材料与方法（一）实验动物选用 6-8 周龄的雄性 C57BL/6 小鼠，体重约 20-25g，购自_____动物实验中心。
实验动物在标准环境中饲养，自由饮食和饮水，适应环境 1 周后进行实验。
（二）主要试剂与仪器1、实验药物：＿____（纯度>98%），用生理盐水配制。
2、戊巴比妥钠：用于麻醉小鼠。
3、心电图机：记录小鼠心电图。
4、超声心动图仪：检测小鼠心功能。
5、组织切片染色试剂：如苏木精伊红（HE）染色剂、TUNEL 凋亡检测试剂盒等。
（三）实验分组将小鼠随机分为 3 组，每组 10 只：1、假手术组（Sham 组）：只开胸但不结扎冠状动脉左前降支，给予等量生理盐水。
2、心肌梗死模型组（MI 组）：结扎冠状动脉左前降支，建立心肌梗死模型，给予等量生理盐水。
3、药物治疗组（Drug 组）：结扎冠状动脉左前降支后，给予实验药物治疗。
（四）实验步骤1、小鼠麻醉：腹腔注射戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉小鼠。
2、手术操作：在小鼠左侧胸部做切口，暴露心脏，用丝线结扎冠状动脉左前降支，造成心肌梗死。
假手术组只穿线不结扎。
3、术后处理：缝合切口，给予抗生素预防感染。
术后 24 小时开始，药物治疗组每天腹腔注射实验药物，假手术组和心肌梗死模型组给予等量生理盐水，连续给药 2 周。
4、指标检测心电图检测：在术前、术后 24 小时和 2 周分别记录小鼠心电图，观察 ST 段变化。
心肌肥厚小鼠心肌组织Beclin1的表达及其意义
心肌肥厚小鼠心肌组织Beclin1的表达及其意义张明娟;张超英;杨军;朱参战;段宗明;宋安齐【摘要】目的本研究拟采用心肌肥厚动物模型来探讨自噬相关蛋白Beclin1在心肌肥厚中的表达以及意义. 方法选用20只WT小鼠,完全随机化分为两组:一组为实验组(皮下置入微量泵,异丙肾上腺素ISO 30 μg/(g·d),n=10),一组为对照组(假手术组,微量泵,0.9％ NaCl,n=10).分别在实验开始时与4周时,对各组小鼠进行超声心动图学检测,包括:LVPWd、LVPWs、IVS、FS、LVEF、Vcfc.并且在第4周末处死小鼠,获得体重、组织质量,并取心脏组织进行HE和Masson染色,进行心脏间质纤维化的分析与评价.并取左室心肌组织进行自噬相关蛋白Beclin1的免疫组化检测,分析自噬在心肌重塑中的作用和意义. 结果①微量泵入去甲肾上腺素(ISO)4周后,小鼠的心脏组织代偿性增生,心脏体重指数实验组较对照组明显增加(P＜0.001),心脏彩超的结果显示LVPWd、LVPWs、FS、LVEF、Vcfc实验组较对照组明显增加(P均＜0.001),进一步提示其为心功能正常心肌肥厚模型.Masson染色结果显示心肌组织发生明显的纤维化.②自噬相关蛋白Beclin1在实验组小鼠心肌纤维化区的表达较对照组心脏组织中的表达明显降低. 结论通过置入微量泵体内缓慢输注异丙肾上腺素可以在较短时间内成功建立心肌肥厚模型,而自噬相关蛋白Beclin1表达下调可能是心肌细胞应对ISO输注引起的心肌肥厚的保护性反应,利于心肌细胞的存活.【期刊名称】《山西医科大学学报》【年(卷),期】2015(046)005【总页数】6页(P387-391,501)【关键词】异丙肾上腺素;心肌肥厚;心肌纤维化;自噬【作者】张明娟;张超英;杨军;朱参战;段宗明;宋安齐【作者单位】西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安710004;西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安710004;西安交通大学医学院第二附属医院病理科;西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安710004;西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安710004;西安交通大学医学院第二附属医院心内科,西安710004【正文语种】中文【中图分类】R542.2心脏是一个具有可塑性的器官，在高血压或心肌梗死、长时间段的心率加快、收缩期和舒张期缩短、心肌收缩力持续增强等病理生理状态下，心脏能通过心肌形态的重塑(cardiac remodeling)以适应环境的变化，保证强有力的心脏搏动，满足全身器官的血供和血压的维持。
VEGFR-3+单核细胞对高血压小鼠左心室重
实验研究VEGFR-3+单核细胞对高血压小鼠左心室重塑的影响杨国红1，余芳芳1，蔡伟1，牛秀珑1，张芯1，赵季红1，李玉明2，陈少伯1△摘要：目的探讨高血压小鼠外周血血管内皮生长因子受体（VEGFR）-3+单核细胞对高盐诱导的高血压性左心室重塑的影响。
方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常盐饮食组（0.5%NaCl，NS组）、高盐饮食组（8% NaCl，HS组）、HS+N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）组（HS+L组）以及HS+L-NAME+外周血VEGFR-3+单核细胞（PBMV）干预组（HS+L+PBMV组），在饮食干预第9~12周对高血压小鼠进行PBMV干预。
所有小鼠以标准的尾压法测定无创尾压；利用Vevo2100超声影像系统测定心脏结构和功能；荧光定量PCR检测小鼠心肌组织张力应答增强子结合蛋白（TonEBP）及淋巴管内皮细胞标志物mRNA表达水平；以Masson染色观察心肌组织纤维化程度；以麦芽胚凝集素（WGA）荧光染色计算心肌细胞横截面积（CSA）。
结果干预结束时，HS+L组收缩压显著高于其他3组（P＜0.05）；HS+L+PBMV组TonEBP的mRNA水平低于HS+L组，与淋巴内皮细胞相关的标志物VEGF-C、Prox-1、Podoplanin、LYVE-1的mRNA表达水平显著高于HS+L组（P＜0.05）；心脏超声结果显示，HS+L+PBMV组左心室舒张末期内径（LVEDD）及左心室后壁厚度（LVPWT）显著低于HS+L组，左心室射血分数（LVEF）及左心室缩短分数（LVFS）显著高于HS+L组（P＜0.05）；病理学结果显示，HS+L+PBMV组CVF及CSA明显低于HS+L组（均P＜0.05）。
结论PBMV能在降低高血压小鼠收缩压水平的同时，减轻左心室重塑，其机制可能与PBMV促进淋巴管增生有关。
关键词：高血压；心室重构；血管内皮生长因子受体3；单核细胞；淋巴管生成；流式细胞术；高盐中图分类号：R544.11文献标志码：A DOI：10.11958/20221051Effects of peripheral blood VEGFR-3+monocytes on left ventricular remodeling inmice with hypertensionYANG Guohong1,YU Fangfang1,CAI Wei1,NIU Xiulong1,ZHANG Xin1,ZHAO Jihong1,LI Yuming2,CHEN Shaobo1△1Institute of Prevention and Treatment of Cardiovascular Diseases in Alpine Environment of Plateau,Tianjin KeyLaboratory of Cardiovascular Remodeling and Target Organ Injury,Characteristic Medical Center of the Chinese People's Armed Police Forces,Tianjin300162,China;2TEDA International Cardiovascular Hospital△Corresponding Author E-mail:Abstract:Objective To explore the effects of peripheral blood VEGFR-3+monocytes(PBMV)on left ventricular(LV) remodeling induced by high salt intake.Methods Six-week-old male C57BL/6mice were randomly divided into the0.5% NaCl concentration diet(W/W,normal salt,NS)group,the8%NaCl concentration diet(W/W,high salt,HS)group,the HS+ N-nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME,HS+L)group and the HS+L+PBMV treatment group.PBMV intervention was performed in hypertensive mice from9-12weeks after high salt diet intervention.Noninvasive tail pressure was measured by standard tail pressure method in all mice.Cardiac structure and function were determined using a Vevo2100ultrasound imaging system.The mRNA levels of tonicity responsive enhancer binding protein(TonEBP)and lymphatic endothelial cell markers in mouse myocardial tissue were detected by fluorescence quantitative PCR.Masson staining was used to observe the degree of myocardial fibrosis.Calculation of cardiomyocyte cross-sectional area(CSA)was analyzed by fluorescence staining of malt germ lectin(WGA).Results At the end of the intervention,the systolic pressure(SBP)was significantly increased in the HS+L group compared with the other groups(P＜0.05).The mRNA levels of TonEBP was significantly lower while the lymphatic endothelial cell markers of VEGF-C,Prox-1,Podoplanin and LYVE-1were significanly higher in the HS+L+PBMV group than those of the HS+L group(P＜0.05).Echocardiography measurement demonstrated that the LV end-diastolic dimension(LVEDD)and LV posterior wall thickness(LVPWT)were significantly decreased in the HS+L+PBMV group than those of the HS+L group.The LV ejection fraction(LVEF)and LV fractional shortening(LVFS)were significantly increased in the HS+L+PBMV group compared with those of the HS+L group(P＜0.05).The pathological results showed that基金项目：国家自然科学金资助项目（81600328）；天津市自然科学基金资助项目（16JCQNJC11800）；天津市科技重大专项资助项目（15ZXJZSY00010）作者单位：1中国人民武装警察部队特色医学中心，高原高寒环境及心血管病防治研究所，天津市心血管重塑与靶器官损伤重点实验室（邮编300162）；2泰达国际心血管病医院作者简介：杨国红（1981），男，副主任医师，主要从事高血压及冠心病的基础与临床方面研究。
酒精性心肌病小鼠心电图校正QT间期延长的电生理机制探讨
酒精性心肌病小鼠心电图校正QT间期延长的电生理机制探讨江宇;韩钟霖;曹克将;汪道武【摘要】Objective: To investigate the electrophysiological mechanism of QT prolongation in experimental mice with alcoholic cardiomyopathy (ACM). n<br> Methods: A total of 40 C57BL/6 mice were randomly divided into 2 groups:Alcoholic group, n=25, the ACM model was established by long term alcohol drinking and intragastric alcohol administration, 12 mice died during modeling and anesthesia and 13 mice were enrolled for study. Control group, n=15, the mice were fed by normal diet, 3 died during anesthesia and 12 were enrolled for study. All animals were treated for 5 months. The pathological changes of ACM were examined by electric microscope, QT interval was measured by ECG, the electrophysiology of cell action potential duration and ion channels were detected by whole cell patch-clamp techniques. n<br> Results: Alcohol group showed decreased left ventricle ejection fraction (LVEF) than Control group (39.06 ±1.511)%vs (61.18 ±2.56)%, prolonged QT interval (106.43 ± 5.91) ms vs (85.64 ± 6.35) ms, P<0.05, and extended action potential duration APD90 (37.62 ±3.53) ms vs (25.77 ± 3.41) ms. Alcohol group also presented delayed voltage-dependent inactivation of L-type Ca2+channel and increased window current area. n<br> Conclusion: Long term alcohol drinking may cause extended inactivation of myocardium Ca2+channel, prolong the action potential duration, which is one of the mechanisms for prolonged QT interval of ACM in experimental mice.%目的：通过建立酒精性心肌病小鼠动物模型，研究酒精性心肌病小鼠校正QT间期（QTc）延长的电生理机制。
心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠的心脏功能分析
心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠的心脏功能分析王书美;吕丹;陈炜;张晓娟;曹兴水;张连峰【摘要】Objective To establish the heart-specific expression Calponin 1 transgenic mice and investigate its effects on the development of heart and cardiomyopathy. Method The transgenic vector was constructed by inserting the human Calponin 1 gene into the down-stream of α-MHC promoter. The transgenic mice were generated by the method of microinjection. The genotype of transgenic lines was identified by PCR, and the expression levels of the Calponin 1 gene were detected by Western Blot. The pathologic changes of the heart structure and function were analyzed by echocardiography, hematoxylin and eosin(HE) stain and Masson stain. Result The expression of Calponin 1 was detected in the heart of different age wide-type mice by Western Blot, but was down-regulated in the mice with DCM. Compared with the wild type mice, transgenic mice showed significant heart remodeling, left ventricular systolic diameter increased by 28％ (P ＜ 0. 01, n = 12), left ventricular diastolic diameter elevated by 16. 2％ (P ＜ 0. 01, n = 12) , left ventricular posterior wall during systolic decreased by 15.7％ (P ＜ 0. 01, n = 12) , and left ventricular posterior wall during diastole reduced by 21％ (P ＜ 0. 01, n = 12). Transgenic mice, versed wild type, showed weakened heart function, ejection fraction diminished by 11.5％ (P ＜ 0.01, n = 12) and fraction shortening reduced by 14.6％ (P ＜ 0.05, n = 12).The heart of the transgenic mice exhibited an enlarged ventricular chamber whencompared with that of the wild type with HE stain and Masson stain. Conclusion Over-expression of Calponin 1 in the heart of the transgenic mice caused a phenotype similar with dilated cardiomyopathy. It suggested that Calponin 1 might be one of the modifier genes which involved in the pathogenesis of cardiomyopathy.%目的建立心脏特异表达Calponin 1转基因小鼠,研究Calponin 1对心脏发育及心肌病的调节作用.方法利用心脏特异启动子α-MHC构建转基因表达载体,显微注射法建立Calponin 1转基因小鼠,PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western Blot检测Calponin 1在心脏组织中的表达,心脏超声检测转基因小鼠的心脏结构和功能,HE染色和Masson染色检测转基因小鼠心脏的病理改变.结果 Calponin 1在野生型小鼠心脏中有表达,在扩张型心肌病小鼠的心脏组织表达降低.通过显微注射法,建立了2个心脏组织Calponin 1基因高表达的转基因小鼠系.与野生型小鼠相比,Calponin 1转基因小鼠收缩期左室内径(LVID,systolic)增加28%(P＜0.01,n=12),舒张期左室内径(LVID,diastolic)增加16.2%(P＜0.01,n=12),收缩期左室后壁厚度(LVPW,systolic)减小15.7%(P＜0.01,n=12),舒张期左室后壁厚度(LVPW,diastolic)减小21%(P＜0.01,n=12),射血分数(ejection fraction,EF)降低11.5%(P＜0.01,n=12),短轴内径缩短率(fraction shortening,FS)降低14.6%(P＜0.05,n=12).转基因小鼠心脏组织病理H&E染色和Masson染色显示,转基因小鼠心室扩张,心肌细胞不均匀肥大,细胞间隙变大,心肌间质纤维增多.结论 Calponin 1在心脏特异过表达引起转基因小鼠心脏左室内径增加,收缩期容积和舒张期容积显著增大,心室壁变薄,射血分数及短轴缩短率降低等扩张性心肌病表型,推测Calponin 1是参与心肌病病理发生的基因之一.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2011(021)001【总页数】6页(P59-63,封3)【关键词】碱性凋宁蛋白;转基因小鼠;扩张性心肌病;心脏超声【作者】王书美;吕丹;陈炜;张晓娟;曹兴水;张连峰【作者单位】中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京,100021;中国医学科学院实验动物研究所,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院和北京协和医学院,北京100021【正文语种】中文【中图分类】R541;R332Calponin 1（CNN1）基因编码的碱性调宁蛋白（calponin 1，CNN1）是一个首先从鸡砂囊和牛主动脉中分离出的相对分子质量为3.4×104的碱性蛋白［1，2］。
高频超声心动图评价心梗小鼠左室整体功能和节段性室壁运动异常
高频超声心动图评价心梗小鼠左室整体功能和节段性室壁运动异常王静;谭伟江;李想;张贵平;黄家园;陈小红;雷迁;杨丰华;黄韧【摘要】目的通过建立小鼠心梗模型,探讨应用超高分辨率超声系统评价心梗小鼠心脏结构及心功能方面的应用价值.方法 25只雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,即开胸结扎左冠状动脉前降支建立心梗模型组(n=15)和仅在相同结扎位置穿针,不结扎的方法建立假手术组(n=10).术前3 d和术后1周采用二维、M型、脉冲多普勒(PWD)、组织多普勒(TDI)和EKVTM超声技术对心梗小鼠心脏形态结构、室壁运动以及心功能进行评价.术后1周,取小鼠心脏进行HE染色并观察心肌组织结构.结果二维超声与HE色染均显示,心梗模型组心肌有明显的梗死区;心梗模型组与假手术组比较,心室明显扩大,室壁明显变薄,心室收缩功能与舒张功能均显著下降(P<0.05);局部室壁运动受阻严重,心室发生重构.结论采用2D超声心动图联合M 型、PWD、TDI以及EKVTM超声心动图观察小鼠心梗模型能够更精准敏感地判断心肌梗死位置和梗死程度,为临床心肌梗死诊断、治疗和预后评估提供了参考价值.%Objective To evaluate the value of high-frequency echocardiography in assessing cardiac structure and function in a mouse model of myocardial infarction. Methods Twenty-five C57BL/6 mice were randomly divided into sham-operated group (n=10) and myocardial infarction model group (n=15) established by ligation of the left anterior descending artery. The cardiac structure, regional wall motion and cardiac function of mice were examined with pulsed wave Doppler (PWD), tissue Doppler imaging (TDI), EKV and M-mode echocardiography 3 days before and at 1 week after the operation. The histological changes and myocardial structure ofthe heart were observed at 1 week after the operation. Results High-frequency echocardiography and HE staining detected obvious myocardial infarction in the mice in the model group. Compared with the sham-operated mice, the mice with myocardial infarction showed significant left ventricular expansion, obvious thinning of the ventricular wall, and significantly decreased ventricular systolic function and diastolic function with regional wall motion abnormality and ventricular remodeling. Conclusions 2D-type echocardiography combined with M-mode, PWD, TDI and EKVTM for allows accurate and sensitive detection of the loci and severity of myocardial infarction to provide important evidence for clinical diagnosis and treatment of myocardial infarction.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2017(037)008【总页数】8页(P1014-1021)【关键词】高频超声心动图;心梗模型;左室收缩功能;左室舒张功能;局部室壁运动指数【作者】王静;谭伟江;李想;张贵平;黄家园;陈小红;雷迁;杨丰华;黄韧【作者单位】广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州510633;广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州 510633;广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州 510633;广东药科大学,广东广州510006;广州医科大学,广东广州 511436;复旦大学附属中山医院,上海 200032;广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州510633;四川省医学科学院四川省人民医院麻醉科,四川成都 610072;广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州 510633;广东省实验动物监测所//广东省实验动物重点实验室,广东广州 510633;广东药科大学,广东广州510006【正文语种】中文由冠状动脉血管栓塞或粥样硬化导致的心梗及随后发展的心衰是严重危险人类健康的心血管疾病，有极高的发病率和死亡率，预后不良，呈逐年持续增长，且至今尚未完全阐明其疾病机制［1-4］。
有氧运动通过心肌细胞吞运内皮细胞来源外泌体抑制细胞凋亡
有氧运动通过心肌细胞吞运内皮细胞来源外泌体抑制细胞凋亡吴方南1，2，李卓1，田振军1*（1.陕西师范大学体育学院暨运动生物学研究所，陕西西安710119；2.西安交通大学生命科学与技术学院，陕西西安710049）摘要：目的：探讨运动干预对H9C2细胞内吞外泌体及抑制细胞凋亡的影响。
方法：C57/BL6小鼠随机分为假手术组（S组）、心梗组（MI组）、心梗有氧运动组（ME组），每组8只，采用左冠状动脉前降支结扎术（left anterior de‐scending of the coronary artery,LAD）制备MI模型，ME组手术结束1周后进行持续6周的有氧运动。
训练结束后超声检测心脏LVIDs、LVIDd、FS和EF，Masson染色检测心肌纤维化；使用无外泌体培养基培养HUVEC细胞，并提取外泌体孵育H9C2细胞。
使用AMPK激动剂（AICAR，2mmol/L，24h）、脂多糖（LPS，10μg/mL，4h）干预H9C2细胞。
NTA和Western Blotting鉴定、检测提取的外泌体；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡水平；Western Blotting 检测小鼠心肌及H9C2细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved-Caspase3。
结果：与MI组比较，ME组心功能指标EF和FS显著增加（P＜0.05），细胞凋亡蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）；NTA粒径及Western Blotting鉴定外泌体为阳性结果；正常组细胞无外泌体内吞现象；与单纯LPS诱导的H9C2凋亡组比较，AICAR干预后可显著促进H9C2对外泌体的吞运作用；Hoechst33342染色及TUNEL检测细胞凋亡阳性数目显著减少（P＜0.05），且凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2，cleaved-Caspase3/GAPDH表达显著下降（P＜0.05）。
超声生物显微镜成像对载脂蛋白E基因敲除小鼠心脏功能的分析
（ ０ ００ —２收 稿 ，Ｏ ＯＯ ～４修 回） ２ １ — ３０ ２ １—５１
超 声 生物 显 微 镜 成 像 对 载 脂 蛋 白 Ｅ基 因敲 除 小 鼠 心 脏 功 能 的 分 析
杨娅 王艳 红 谢 谨 捷 李 治 安 张 小杉 李嵘 娟 秦 彦 文
ｍ ｉｅ ｔ ｏｕ ｓ ｒ ａ ｉ ｎ ｎａｙｓｓ ｏ ｅ ｒ ｔ ｕ ｔ ｅ ａ ｆ ｃ ｉ ｗ ｉｈ ｄｉｆ ｒ ｎｔｗ ｅ ｋ ａ ｓ ｅ ｈ ｄｓ Ｍ ａ ｅ ａ ｃ ｈｒ ｇｈ ｏｂ ｅ ｖ ｔｏｎ ａ ｄ ａ ｌ ｉ ｆ ｈ ａ ｔｓ ｒ ｃ ｕｒ ｎｄ ｕｎ ｔｏｎ ｔ ｆｅ ｅ ｅ ｇｅ ．Ｍ ｔ ｏ ｌ ｐｏ
Ａｓ ｅ ｓ ｅ ｔ ｏ ０ ｉ ｐｒ ｔ ｉ ｄｅ ｉ ｉ ｎｔ ｓ ｓ ｍ ｎ ｆ Ａｐ ｌｐＯ Ｏ ｅ ｎ Ｅ— ｆ ｃ ｅ
Ｍ ｉｅ Ｈ ｅ ｒ ｎｃ ｉ ｎ ｗｉｈ Ｗ ｅ ｔ ｒ ｅ ｙ Ｕｌｒ ｓ ｕ ｄ Ｂｉ ｍ ｉｒ ｓ ｏ ｙ ｃ ａ ｔＦｕ ｔｏ ｔ ｓ ｅ ｎ Ｄｉｔｂ ｔａ ｏ ｎ ｏ ｃ ｏ ｃ ｐ
８ ６ ８ ．
［］ ８
Ｎａ ｏ ａ ｌ ｕ ｋ ｐ ｕ ｏ Ｌ， ｔ ｆ ｎ ｋ ， ｎａ ｏ ｏｐ ｕ ｏ Ｓ ｅ ａ ａ ｉ Ｋ Ｐａ ｙ ｔ ｏ １ ｕ Ｅ， ｔ ａ ． ｐ ｅ ｓ ｎ ｅ １ Ｅｘ ｒ ｓ ｉ ｏ ｏ ｈ ａ ｃ ｌ ｒ ｅ ｄ ｔ ｅ ｉｌｇ ｏ ｈ ｆ ｃ ｏ ｅ ｅ ｔ ｒ Ｋｉ ７ ｉ ｅ ｓ ｆ ｔ ｅ ｖ ｓ ｕ ａ ｎ ｏ ｈ ｌ ｒ ｗｔ ａ ｔ ｒ ｒ ｃ ｐ ｏ 一 ｎ ｂｒ ａ ｔ ａ ６
Ｙａ ｇ Ｙａ ｎ ，Ｗ ａ ｇ Ｙａ ｈ ｎ ， Ｘｉ Ｊｎｉ ，ｅ ｌ ｎ ｎｏｇ ｅ ｉｊ ｅ ｔａ
Vevo 小动物超声心动成像手册 说明书
Vevo®小动物超声心动成像手册Vevo®小动物超声心动成像手册课程目标:本指南指引操作者：-识别主要的心脏成像切面-了解常用的测量和计算方法-常见心脏切面图扫描方法-掌握主要计算的估值图1.小鼠心脏解剖图/greenbook/figures/figure13-2.shtml本指南中使用的成像模式概述B模式：B模式或灰阶模式，成像用于获取感兴趣区域的二维图像。
通过灰度图像可以识别解剖结构，利用软件可以在这种成像模式下进行多种测量。
在超声探头上可以添加一个3D马达，使探头在设定的步长范围内平移，软件将多个二维切面重建成三维。
利用三维软件可以进行多种测量并对不同平面进行成像观测。
M模式：M模式或运动模式，成像是用来获取一维随时间变化的图像。
简单地说，将取样容积（Sample Volume，SV gate）放在感兴趣的区域上，该区域的移动将随时间在频谱中显示。
例如，颈动脉壁随时间的运动可以用这种成像来检测。
可以用多种软件测量工具测量血管的直径和壁厚。
脉冲多普勒模式：脉冲波(PW)多普勒模式成像用于分析感兴趣血管内的血流。
取样容积（Sample Volume，SV gate）被放置在血管内，系统产生一个脉冲波多普勒曲线，利用软件可以对该多普勒曲线进行速度、加速度和时间测量等信息。
对于PW多普勒模式和所有其他多普勒成像模式来说，在透射超声声束和流经血管的血液之间达到一个合适的角度是至关重要的。
成像平面应调整为两者夹角小于60°；此时可以进行精确的速度测量。
B模式和PW多普勒模式同时成像，是一种非常实用的小血管实时评估模式。
由于PRF（pulse repetition frequency）限制，绝对速度测量仅限于实时模式下的低速血流。
优化显示参数，使多普勒测量速度范围减小，将大大有助于用户看到小血管并获取多普勒数据。
彩色多普勒模式：彩色多普勒模式可以观测到快速的血液流动并提供血流的方向，用不同深浅代表流速的不同，颜色代表流向。
沉默生长抑制因子2可缓解血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心脏重塑：基于抑制p53乙酰化
心脏重塑是多种心血管疾病的生理病理基础，它的发生将引发心肌肥大、凋亡、炎症信号的激活和间质的沉积，进而引起心脏结构和功能的改变，最终导致心力衰竭［1,2］。
血管紧张素II （Ang II ）是肾素-血管紧张素系统（RASS ）的关键成分，其可引发心肌炎症反应的过度激活，促使多种炎症因子的释放、诱发心肌成纤维过度增殖、胶原过度沉积，最终导致心脏重塑的发生发展［3］。
在临床上血管紧张素转化酶抑制剂、Ang II 受体和醛固酮受体拮抗剂等的使用尽管能逆转心脏肥大与重塑，但是由于醛固酮逃逸现象的出现，使得这些药物疗效对于部分患者是有限的［4］。
因此，通过探索新的缓解心脏重塑的分子及其机制是目前亟待研究的。
生长抑制因子2（Ing2）前期作为肿瘤抑制基因被广泛研究，但近Inhibitor of growth protein-2silencing alleviates angiotensin II-induced cardiac remodeling in mice by reducing p53acetylationLIU Zhengwang 1,QIU Xiaotang 2,YANG Hua 1,WU Xiaocui 2,YE Wenjing 31Department of Cardiovascular Medicine,2Department of Endocrinology,Chinese Traditional Medicine Hospital of Hainan Province,Haikou 570203,China;3Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou 510006,China摘要：目的明确Ing2对于血管紧张素II （Ang II ）诱导的小鼠心脏重塑的影响和相关机制。
方法通过鼠尾静脉注射IngshRNA2（Ad-sh-Ing2）腺病毒以沉默Ing2表达；通过持续微量注射泵注射Ang II （1000ng·kg -1·min -1）诱导小鼠心脏重塑,对照组给予相同体积生理盐水灌注。
抑制铁死亡可减轻脓毒症小鼠的心肌损伤：脂钙蛋白-2的作用
脓毒症全球死亡率为10%，中国每年约有500万脓毒症患者，死亡率超过30%［1,2］。
心肌功能损伤是脓毒症住院患者中常见并发症［3］，脓毒症引起的心功能不全是脓毒症死亡率高的主要原因［4］，但其确切机制尚不完全清楚。
铁死亡最早被观察到铁离子螯合剂能抑制Erastin 诱导的癌细胞死亡不同于已知的细胞死亡途径，如凋亡、焦亡和坏死［5］。
铁死亡的机制主要涉及脂质过氧化物增加和脂质活性氧的进一步释放。
当谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）或谷胱甘肽活性降低时，可诱导Inhibiting ferroptosis attenuates myocardial injury in septic mice:the role of lipocalin-2HUANG Yuhui 1,ZHANG Gongpeng 2,LIANG Huan 1,CAO Zhenzhen 3,YE Hongwei 1,GAO Qin 11Department of Physiology,2Department of Clinical Medicine,Bengbu Medical College,Bengbu 233000,China;3Department of Respiratory and Critical Care Medicine,First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College,Bengbu 233000,China摘要：目的观察铁死亡在盲肠结扎与穿孔（CLP ）法诱导的脓毒症小鼠心肌损伤中的作用，并探讨脂钙蛋白-2（Lcn2）在铁死亡中的可能作用。
方法选取8周龄雄性C57BL/6小鼠，采用CLP 法诱导脓毒症心肌损伤模型。
小鼠随机分为3组（10只/组）：假手术组、脓毒症组（CLP ，小鼠接受CLP 手术）、脓毒症+铁死亡抑制剂Ferrostain-1组（CLP+Fer-1，小鼠腹腔注射浓度为5mg/mL 的Fer-15mg/kg ，1h 后接受CLP 手术）。