葡萄球菌

微 生 物 学 检 查
细菌学检查流程图 ♠静脉血 5ml—— 肉汤培养基 50ml 增菌 ♠脓液——血平板分离纯化——观察菌落 革兰染色 血浆凝固酶试验 —— 生化反应 —— 甘露醇发酵 肉汤增菌 药敏试验 ♠食物剩余物、呕吐物 —— 分离培养 食物剩余物、 —— 动物试验
凝固酶阴性葡萄球菌
coagulasecoagulase-negative staphylococcus，CNS
高
弱
窄
葡 萄 球菌
Staphylococcus
葡萄球菌与临床
自然界中分布 广泛 医院内交叉感染 医源性感染 耐药性 食物中毒
葡萄球菌分离率及耐药性实验
葡萄球菌分离率及耐药性实验
鼻咽部葡萄球菌分离率
总菌分离率 葡萄球菌分离率
对 照 组 100%（118/118） 68.6%（81/118） （ ） （ ） ） 住院 病人 100% （48/48） 79.2%（38/48） （ ） 卡方检验 \ P < 0.001
毒性休克综合征毒素1 （TSST-1） TSSTTSST-1诱发休克的可能机制
1、损伤肝枯否氏细胞，抑制内毒素分解， 损伤肝枯否氏细胞，抑制内毒素分解，
使内毒素在病人体内畜积。 使内毒素在病人体内畜积。 2、刺激单核吞噬细胞释放血管活性物质 干扰血液动力学。 干扰血液动力学。 3、增加毛细血管通透性，引起心血管功 增加毛细血管通透性， 能损害而导致休克。 能损害而导致休克。
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
(1) CTD （头孢他啶） 头孢他啶） 耐 对 照 组 住院病人 卡方检验 药 敏 感
4.4% ( 3/68 ) 95.6% ( 65/68 ) 42.1%( 16/38 ) 57.9% ( 22/38 ) P < 0.001
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
(2) GEN （庆大霉素） 庆大霉素） 耐 药 对 照 组 住院病人 卡方检验 敏 感
葡萄球菌表面结构
1、荚膜 2、葡萄球菌A蛋白 staphyloccocal protein A 3、磷壁酸 4、肽聚糖
SPA
葡萄球菌的细胞壁结构
肽聚糖(peptidoglycan) 磷壁酸(teichoic acid) 蛋白抗原（SPA） 蛋白抗原（ 多糖抗原 荚膜抗原
葡萄球菌A蛋白
(Staphylococcal Protein A)
表皮剥脱性毒素（exfoliatin） 表皮剥脱性毒素（
分A 和B两个血清 型。 引起烫伤样皮肤 综合征
(staphylococcal scalded syndrome,SSSS)
毒性休克综合征毒素1 （TSST-1） TSST由噬菌体 Ι群金黄色葡萄球菌产生 的一类蛋白质。 的一类蛋白质。TSST-1可引起机 体发热，增加对内毒素的敏感性。 体发热，增加对内毒素的敏感性。
金黄色葡萄球菌的噬菌体分型
噬菌体群
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
噬菌体型
29 3A 6 75 85 81 52 3C 42E 77 94 52A 55 47 83A 95 79 80 71 53 54 84 96
其他
金黄色葡萄球菌的噬菌体分型
葡萄球菌食物中毒主要由Ⅲ群裂解菌株引起； 葡萄球菌食物中毒主要由Ⅲ群裂解菌株引起； Ⅱ群裂解菌株耐药性的出现慢于Ⅰ、Ⅲ群； 群裂解菌株耐药性的出现慢于Ⅰ Ⅰ群裂解菌株中的52、52A、80、81型菌株 常是医院中严重败血症的流行株； 常是医院中严重败血症的流行株； Ⅱ群71型裂解菌株产生表皮溶解毒素， 型裂解菌株产生表皮溶解毒素， 引起剥脱性皮炎。 引起剥脱性皮炎。
(5) AMP （氨苄青霉素） 氨苄青霉素） 耐 药 敏 感 82.4 % ( 56/68 ) 2.6 % ( 1/38 ) P < 0.001
对 照 组 17.6 % ( 12/68 ) 住 院病人 97.4 % ( 37/38 ) 卡方检验
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
(6) TMP （甲氧苄胺） 甲氧苄胺） 耐 药 对 照 组 住院病人 卡方检验 47.1 % ( 32/68 ） 73.7 % ( 28/38 ) 敏 感 52.9 % ( 36/68 ) 26.3 % (10/38 ) 0.001 < P < 0.01
1、皮肤、粘膜的正常菌群 皮肤、 2、机体免疫功能低下或细菌定居移位， 机体免疫功能低下或细菌定居移位， CNS可引起多种感染，居病原菌第2 可引起多种感染，
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位
3、医院内感染的重要病原菌
凝固酶阴性葡萄球菌
coagulasecoagulase-negative staphylococcus，CNS
凝固酶阴性葡萄球菌
毒性比staphylolysin弱， 为非溶血性毒素， 为非溶血性毒素， 只杀伤白细胞， 只杀伤白细胞， 使细胞膜上三磷酸肌醇变构， 使细胞膜上三磷酸肌醇变构， 影响细胞膜电位的稳定性。 影响细胞膜电位的稳定性。
肠 毒 素（enterotoxin）
• •
抗胃肠液蛋白酶的水解作用 热稳定蛋白质
100 °C 30min不被破坏
葡萄球菌致病物质
血浆凝固酶（coagulase） 血浆凝固酶（ 溶血毒素（ 溶血毒素（staphylolysin） 杀白细胞素（ 杀白细胞素（leakocidin） 肠毒素（ 肠毒素（enterotoxin） 表皮剥脱性毒素（ 表皮剥脱性毒素（exfoliatin） 毒性休克综合征毒素1（TSST-1）
血 浆 凝 固 酶（coagulase）
最主要的致病物质,与所致炎症表现为病灶局限化 有关 游离凝固酶 + 凝固酶反应因子 （酶原形式） （血浆因子） 酶原形式） 血浆因子） 形成 复合物（葡萄球菌凝固酶 Staphlothrombin） 复合物（ 纤维蛋白原 纤维蛋白（沉淀） 纤维蛋白（沉淀）
血 浆 凝 固 酶（coagulase）
葡萄球菌A蛋白
(Staphylococcal Protein A)
生物学效应
抵消抗体吞噬调理作用 促有丝分裂，损伤血小板， 促有丝分裂，损伤血小板，激活补体 替代途径） 引起变态反应。 （替代途径）， 引起变态反应。 协同凝集试验， 作为诊断试剂： 作为诊断试剂：SPA协同凝集试验， 替代第二抗体（抗抗体） 替代第二抗体（抗抗体）
• •
引起食物中毒 超抗原， 超抗原，可激活更多T细胞 促使释放过量细胞因子
肠 毒 素（enterotoxin）
与食物中毒有关， 与食物中毒有关，发病率占食物 中毒的首位。 中毒的首位。分A, B, C1, C2, C3, D, E, G, 和 H 9个血清型。 个血清型。 分子质量26000----30000。 耐胃酸， 耐胃酸，耐100°C，30min。 细胞的超抗原。 为T细胞的超抗原。
coagulasecoagulase-negative staphylococcus，CNS
4、CNS 引起的感染常见的有： 引起的感染常见的有：
泌尿系统感染 感染率仅次于大肠杆菌 败血症 居病原菌第3位 仅次于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 仅次于大肠杆菌、 是新生儿败血症常见病原菌，但应 是新生儿败血症常见病原菌， 注意 CNS 败血症 术后感染
葡 萄 球 菌
分 类
1 色素 分类：金黄色、白色、柠檬色 分类：金黄色、白色、 2 致病性分类：金黄色葡萄球菌(S. aureus) 致病性分类： 表皮葡萄球菌(S. epidermidis) 3 凝固酶分类：凝固酶阳性葡萄球菌 凝固酶分类： (coagulase-positive staphylococcus)
凝固酶阴性葡萄球菌
(coagulase-negative staphylococcus)
金黄色葡萄球菌噬菌体分型 常用于医院内感染的流行 病学调查
金黄色葡萄球菌的噬菌体分型
根据葡萄球菌国际噬菌体分型小组 委员会第六次会议（ 决定， 委员会第六次会议（1974）决定， 个噬菌体群、 将金黄色葡萄球菌分为4个噬菌体群、 23个噬菌体型。 个噬菌体型。 分型用的噬菌体只对凝固酶阳性菌 株敏感，不裂解凝固酶阴性菌株。 株敏感，不裂解凝固酶阴性菌株。
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
(4) CMP （氯霉素） 氯霉素） 耐 药 对 照 组 住院病人 卡方检验 8.8% ( 6/68 ) 31.6% ( 12/38 ) 敏 感 91.2% ( 62/68 ) 68.4% ( 26/38 ) 0.001 < P < 0.01
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
最主要的致病物质,与所致炎症表现为病灶局限化 有关 胞壁上凝固酶（凝聚因子） 胞壁上凝固酶（凝聚因子）
纤维蛋白原
纤维蛋白（覆盖菌体表面） 纤维蛋白（覆盖菌体表面）
溶血毒素（staphlolysin）：
α、 β 、 γ、 δ 其中对人致病主要为 α 损伤各种血细胞
杀白细胞素（leakocidin） 杀白细胞素（
蛋白抗原 ( staphylococcal protein A, SPA) 菌体表面抗原，存在于细胞壁最外层， 菌体表面抗原，存在于细胞壁最外层， 分子量13,000 ~ 42,000，为完全抗原。 为完全抗原。 可与人及哺乳类IgG (IgG1、IgG2、 IgG4、 IgG3例外) 的Fc端非特异性结合。 端非特异性结合。
所 致 疾 病
侵袭性疾病： 侵袭性疾病：
全身各种化脓性 炎症，特点脓汁 炎症， 粘稠，病灶局限。 粘稠，病灶局限。 败 血 症
所 致 疾 病
侵袭性疾病： 侵袭性疾病：
各种化脓性炎症， 各种化脓性炎症， 特点脓汁粘稠， 特点脓汁粘稠， 病灶局限。 病灶局限。 败 血 症
毒 素 性 疾 病
食物中毒 假膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征
球 菌 基 本 特 点
形态特征明显， 形态特征明显，直接涂片染色在鉴定 球菌中有重要意义。 除奈瑟球菌外， 球菌中有重要意义 。 除奈瑟球菌外 ， 均为革兰氏阳性菌。 均为革兰氏阳性菌。
致病性球菌的生物学特性
营养要求 葡萄球菌 (staphylococcus) 链 球菌 (streptococcus) 肺炎球菌 (pneumococcus) 奈瑟球菌 (Neisseria) 低 抵抗力 强 致病谱 广
致 病 特 点
致病种类多样化 侵袭性疾病：化脓性感染 侵袭性疾病： 病灶局限，脓汁粘稠，不易扩散 病灶局限，脓汁粘稠， 可表现为多部位、多脏器感染以及 可表现为多部位、 脓毒血症、败血症 脓毒血症、 毒素性疾病：食物中毒、伪膜性肠炎、 毒素性疾病：食物中毒、伪膜性肠炎、 表皮剥脱性皮炎、毒性休克综合症 表皮剥脱性皮炎、
细 菌 学 各 论
Systematic Bacteriology
球 菌 的 种 类
葡萄球菌（ 葡萄球菌（Staphylococcus) 链 球 菌 (Streptococcus) 双 球 菌 (Diplococcus) 四联球菌 (Tetrads) 八叠球菌 (Sarcina)
球 菌 Coccus
15% ( 1/68 ) 98.5% ( 67/68 ) 39.5% ( 15/38 ) 60.5% ( 23/38 ) P < 0.001
葡 萄 球 菌 耐 药 状 况
(3) CFZ （头孢唑啉） 头孢唑啉） 耐 药 对 照 组 住院病人 卡方检验 0% ( 0/68 ) 28.9%(11/38) 敏 感 100% ( 68/68 ) 71.1%( 27/38 ) P < 0.001
5、CNS 耐药率更高
防
治
原
则
预防交叉感染及医源性感染 治疗选用敏感抗生素 不可过早停药
Terms of Microbiology
Staphylococcus S.aureus S.epidermidis S.saprophyticus Staphylococcal protein A ,SPA Coagglutination Coaggulase Free coaggulase Bound coaggulase Staphylolysin Leukocidin Enterotoxin 葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 葡萄球菌A蛋白 葡萄球菌 蛋白 协同凝集试验 凝固酶 游离凝固酶 结合凝固酶 葡萄球菌溶血素 杀白细胞素 肠毒素
食物中毒
免
非特异性免疫： 非特异性免疫：
疫
性
正常皮肤粘膜－挡菌作用 正常皮肤粘膜－ 中性粒细胞－吞噬作用 中性粒细胞－ 特异性免疫： 调理素抗体－促吞噬作用 调理素抗体－ 抗毒素抗体－中和外毒素 抗毒素抗体－
微 生 物 学 检 查
只对深部感染败血症或指导用药时才做。 只对深部感染败血症或指导用药时才做。 肠毒素检测： 肠毒素检测： ELISA法、 幼猫呕吐试验