动物生物化学试验-动物医学实践教育中心

《动物生物化学实验》教学大纲

一、基本信息

二、教学目标及任务

《动物生物化学》是为高等农业院校动物医学、动物药学、动物科学和水产养殖等专业本专科开设的重要的专业基础课，也是一门重要的实验性课程。通过本课程的系统学习和实验，使学生掌握动物生化实验的基本知识,基本理论和基本实验技能,掌握熟悉常用生化仪器的原理和使用方法,了解有关电泳，色谱，制备，透析等基本的生化实验手段,培养理论联系实际的学风和动手能力。

三、学时分配

教学课时分配

四、实验内容及教学要求

实验一：蛋白质的沉淀反应和两性反应，蛋白质透析脱盐。

本实验重点、难点：生化实验常用的仪器的使用；理解蛋白质的一般理化性质；盐析、透析的概念。

本实验教学要求：教育学生对生化实验的认识；了解生化实验常用的仪器及使用方法；理解蛋白质的沉淀、两性反应及透析脱盐的原理；掌握蛋白质盐析和透析等操作技术。

实验二：蛋白质的定量分析------双缩脲法测定蛋白质浓度；分光光度计的使用和注意事项；Excel软件制作标准曲线。

本实验重点、难点：分光光度法测定蛋白质的浓度的原理；标准曲线的制作。

本实验教学要求：了解蛋白质含量测定的原理和方法；掌握分光光度法的原理及分光光度计的使用方法和注意事项；用标准曲线法准确测定未知样品中蛋白质的含量；学习使用Excel软件制作标准曲线。

实验三：动物心脏、肝脏中琥珀酸脱氢酶的制备和活性鉴定*；动物血清和组织匀浆液的制备；附：玻璃匀浆器、离心机的使用。

本实验重点、难点：制备血清和组织匀浆液；观察琥珀酸脱氢酶竞争性抑制的基本原理；玻璃匀浆器、离心机的正确使用。

本实验教学要求：了解琥珀酸脱氢酶竞争性抑制的实验原理；掌握动物血清和组织匀浆液的制备，匀浆器、离心机的使用等方法。

实验四：电泳的概念和一般原理；醋酸薄膜电泳分离血清蛋白；电泳分离条带的扫描及软件分析*。

本实验重点、难点：电泳的概念和一般原理；电泳分析动物血清中各种蛋白组分。

本实验教学要求：了解电泳的概念和一般原理；掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作技术和操作要点；学会用电脑软件分析动物血清中各种蛋白组分

实验五：盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白*。

本实验重点、难点：盘状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术和操作要点

本实验教学要求：了解聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和优点；掌握盘状不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术和操作要点；比较醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白的异同和优缺点。

实验六：层析的概念、分类和机理；分子筛凝胶过滤分离血红蛋白和核黄素#。

本实验重点、难点：层析的概念、分类。凝胶层析的一般原理；凝胶过滤柱层析分离血红蛋白和核黄素的方法和操作要点。

本实验教学要求：了解层析的概念、分类和机理；理解凝胶层析分离大、小分子物质的一般原理；掌握凝胶过滤柱层析分离血红蛋白和核黄素的方法和操作要点。

实验七：动物肝脏DNA的提取及纯度鉴定*；低温离心机、紫外分光度计的使用及注意事项。

本实验重点、难点：DNA的分离纯化的原理及意义；低温离心机、紫外分光度计的正确使用。

本实验教学要求：了解DNA提取的原理及意义；掌握DNA的分离纯化的方法。学习紫外吸收法确定其含量和纯度的方法；掌握二苯胺法鉴定DNA的方法。

实验八：钨酸法无蛋白血滤液的制备；Folin-W法全血中葡萄糖的测定*（3学时）本实验重点、难点：钨酸法制备无蛋白血滤液的原理；Folin-W法测定血糖的原理。

本实验教学要求：了解无蛋白血滤液的制备和血糖测定的原理；掌握钨酸法制备无蛋白血滤液的技术；掌握Folin-W法测定全血中葡萄糖的方法和操作要点。

实验九：吸咐层析的原理及操作方法；脂质的提取----索氏抽提器的使用方法；蛋黄油中的脂质成分薄层层析#。

本实验重点、难点：吸咐层析分析蛋黄油中的脂质成分的原理；索氏抽提器的使用。

本实验教学要求：了解脂质提取与薄层层析的原理；掌握索氏抽提器的使用方法、的原理及操作方法；分析蛋黄油中的脂质成分。

五、考核方式及要求

总分100，其中40%为实验理论（闭卷），20%为实验技能，40%平时（包括实验报告和平时表现）。平时表现主要以学生实验课的出席情况、课堂的表现以及实验报告的书写为主。

六、推荐教材及教学参考书

教材：《动物生物化学实验指导》第3版，刘维全主编，中国农业出版社，2008年，全国高等农林院校“十一五”规划教材，标准书号：ISBN 978-7-109-12013-6, CIP数字核字（2008）第004037号。

参考书：《生化实验方法和技术》，张龙翔，张庭芳，李令媛主编，高等教育出版社，1997年，标准书号：ISBN 7-04-006009-4, CIP数字核字（96）第21702号。

《生物化学技术原理和方法》，李建武等主编，北京大学出版社，1994年，标准书号：ISBN 7-301-02614-5？Q.061, CIP数字核字（94）第07041号。

《现代动物生物化学》第3版，汪玉松、邹思湘、张玉静主编，高等教育出版社，2005年，标准书号：标准书号：ISBN 7-04-015859-0;CIP数字核字（2004）第137354号。

七、说明

实验安排每学期在顺序上可能略有改动。* 者为综合性实验#者为设计性实验

大纲修订人：张源淑

大纲审定人：邹思湘

修订日期：2008年11月25日