酶标板的类型与操作使用注意事项
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酶标板的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标板之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标板后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。
在酶标板的操作中应注意以下事项。
一、因为酶标板就是配合酶标仪用,现在的酶标仪做出来的最多的是96孔,所以客户在购买时也是要96孔板,厂家也为了适应市场基本上做出来的就是96孔的。
二、平底的折射率低,适于在酶标仪检测;U型底的酶标板折射率较高,方便加样、吸样、混匀等操作,可以不用放在酶标仪上,直接通过目测观察颜色变化情况,从而判定有无相应的免疫反应。V底的酶标板可以精确的吸取样品。
三、高结合力和中结合力。
1)高结合力。
此种酶标板,表面经处理后,其蛋白结合能力大大增强,可达300~400ng
IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。
2) 中结合力。
此类酶标板经表面疏水键被动与蛋白结合,适合作为分子量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200~300ng IgG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异性交叉反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。
四、另外根据颜色又分为透明、黑色、白色。
透明的是最常用的,用于最一般的酶联免疫实验。相对于透明的的板子,还有用于发光检测用的不透明的板子,一般有黑色和白色两种。黑色的酶标板自身会有光吸收,所以它的信号相对于白色的板子要低很多,因此一般用于检测较强
的光,如荧光检测。
五、现在大家看到的酶标板大多是可以拆卸的,也就是单条可以拆下来,也有固定的板子。单条可拆的的板子其实可以省下许多钱,因为这样的话,当你想用新的酶标板时,可以将酶标板条拆下来,买些酶标板条就可以了,只是要考虑要配相同的型号即可。另外,可拆的酶标板可以用来做体外检测,方便拆卸。
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