肺炎链球菌研究现况及血清分型
肺炎链球菌研究现况及血清分型
04 肺炎链球菌的预防和控制
疫苗接种的重要性
疫苗接种是预防肺炎链球菌感染的最 有效手段，通过接种疫苗可以显著降 低肺炎链球菌的发病率和死亡率。
疫苗接种的策略因地区而异，但通常 建议对高风险人群进行接种，如儿童、 老年人、身体虚弱者以及免疫系统受 损者。
目前已有多种肺炎链球菌疫苗，包括 多糖疫苗和结合疫苗，这些疫苗可以 针对不同血清型的肺炎链球菌提供保 护。
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探索肺炎链球菌的毒力因子
01
深入研究肺炎链球菌的毒力因子及其作用机制，为开发新型药
物和疫苗提供理论支持。
解析肺炎链球菌与宿主细胞的相互作用
02
研究肺炎链球菌如何与宿主细胞相互作用，导致感染和疾病的
发生，揭示其致病机制。
探索肺炎链球菌的耐药机制
03
研究肺炎链球菌对抗生素的耐药机制，为抗生素药物的研发提
详细描述
荚膜多糖是肺炎链球菌的主要抗原，不同血清型具有不同的 荚膜多糖抗原，通过检测荚膜多糖抗原可以区分不同血清型 。目前已经发现了超过90种不同的荚膜多糖抗原，对应不同 的血清型。
分子分型方法
总结词
分子分型方法是一种基于肺炎链球菌基因组序列差异的分型方法，具有高分辨率和高重复性。
详细描述
分子分型方法通过比较肺炎链球菌基因组的序列差异，如单核苷酸多态性、插入序列、重复序列等，来确定不同 菌株之间的差异。这种方法能够更精确地区分不同菌株，对于流行病学调查和疾病控制具有重要意义。
抵抗力
抵抗力较强，对一般消毒 剂敏感，对青霉素等抗生 素敏感。
肺炎链球菌的致病性
致病物质
荚膜、自溶酶、神经氨酸 酶、表面蛋白等。
感染途径
主要通过呼吸道飞沫传播， 也可通过接触污染物体表 面或污染水源传播。
实时荧光定量PCR法快速诊断肺炎链球菌及其血清分型方法的建立
实时荧光定量PCR法快速诊断肺炎链球菌及其血清分型方法的建立摘要】目的：探讨建立荧光定量PCR法直接检测临床标本的肺炎链球菌并对其进行血清学分型的可行性。
方法：针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA及该菌常见的21种血清型设计荧光探针及引物，构建Taqman荧光定量PCR法。
使用荚膜肿胀试验作为金标准检测PCR方法的灵敏度及特异度，选择1209份临床样本同时做培养及PCR方法，比较两种方法的肺炎链球菌检出率及血清分型情况。
结果：构建Taqman荧光定量PCR法灵敏度及特异度分别为94.2%及70%。
Taqman荧光探针PCR法鉴定的主要血清型别为19F（43.7%）、6A/B（17.2%）、23F（13.8%）、19A（6.8%），未能分型的肺炎链球菌为17.2%。
荚膜肿胀试验鉴定的主要血清型别为19F（39.1%）、6A/B（17.2%）、23F（9.2%）、19A（5.7%），未能分型的肺炎链球菌为28.7%。
1209份临床样本仅培养出16份肺炎链球菌，Taqman荧光定量PCR法检出44例肺炎链球菌，其对临床样本肺炎链球菌阳性检出率更高，其差异有显著统计学意义（χ2=13.39，P<0.001）。
结论：Taqman荧光探针PCR法灵敏度高、特异度好，能直接对临床样本进行血清学分型，可大幅度缩短肺炎链球菌检测的报告时间。
【关键词】 Taqman荧光探针PCR法；肺炎链球菌；血清分型；荚膜肿胀试验【中图分类号】R378.1+2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）25-0036-03Establishment of real - time fluorescence quantitative PCR for rapid diagnosis of Streptococcus pneumoniae and its serum typingLiang Zhuoxin, Fu Jinjian, Long Yiqin, Wei Haichun.Guangxi Liuzhou Maternal and Child Health Care Hospital, 1Department of Intensive Medicine, 2Department of Laboratory, 3Department of Pediatrics, 4 Department of Transfusion, Liuzhou 545001, China【Abstract】 Objective To investigate the feasibility of establishing a quantitative method for the direct detection of Streptococcus pneumoniae in clinical specimensand its serological typing. Methods The fluorescent probes and primers for series of serotypes of Streptococcus pneumonia was designed for the development of Taqman fluorescence quantitative PCR. Capsular swelling test was used as the gold standard to determine the sensitivity and specificity of the PCR method. 1209 clinical samples were selected and cultured at the same time. Results The sensitivity and specificity of Taqman fluorescence quantitative PCR was 94.2% and 70%, respectively. The main serotypes identified by Taqman PCR were 19F (43.7%), 6A / B (17.2%), 23F (13.8%),19A (6.8%) and 17.2% of Streptococcus pneumonia cannot be typed. The main serotypes identified by capsular swelling were 19F (39.1%), 6A / B (17.2%), 23F (9.2%), 19A (5.7%) and 28.7% of Streptococcus pneumonia cannot be typed. Sixteen cases of Streptococcus pneumoniae were cultured positive in 1209 clinical samples, and 44 cases of Streptococcus pneumoniae were detected by Taqman fluorescence quantitative PCR. The positive rate of Streptococcus pneumoniae detected by PCR was significantly hi gher than that of capsular swelling method (χ2 = 13.39, P<0.001). Conclusion Taqman Fluorescence Probe PCR method has high sensitivity and good specificity, and it can detected the streptococcus pneumoniae directly from clinicalsamples and can shorten the reporting time.【Key words】 Taqman fluorescence probe PCR method; Streptococcus pneumoniae; Serotype; Capsular swelling test我国每年因肺炎链球菌相关疾病导致儿童死亡人数列全球前10名[1]。
USCDC-肺炎链球菌
USCDC-肺炎链球菌CHAPTER 8Identification and Characterization of Streptococcus pneumoniae肺炎链球菌是⼀种可以在细胞内或细胞外寄⽣⾰兰⽒阳性球菌，以单个或短链的形式存在。
该菌的⽣长条件较为严格，最适宜⽣长条件为35-37℃、5%CO2。
通常可以在⾎平板（BAP）或巧克⼒平板（CAP）上⽣长。
在⾎平板上菌落形态较⼩、灰⾊、湿润有时候有粘液，有α溶⾎现象（图1）。
这种溶⾎特性可以将该菌与很多细菌区分开，但是⽆法与草绿⾊链球菌区别。
但是该菌在培养24-28⼩时后，菌落形态表现为平坦、中⼼凹陷，⽽草绿⾊链球球菌不会出现以上变化（图2）。
利⽤显微镜对菌落形态的观察有利于鉴别两种菌。
在鉴定之前⼀定要分纯培养。
在下列的鉴定程序中，应着重鉴别有肺炎链球菌的α溶⾎特性，35-37℃、5%CO2条件下培养时间<24⼩时经典肺炎链球菌菌落均会出现这种溶⾎特性。
下⾯的试验⽤于在BAP平板上鉴定肺炎双球菌相及相似菌落（图3）。
肺炎链球菌可以通过同时进⾏⾰兰⽒染⾊，触酶试验，奥普托欣敏感性试验进⾏鉴定，⽤胆盐溶解试验进⾏确证试验。
如果这些试验鉴定是肺炎链球菌时，则进⾏⾎清分型。
辅助⽤于鉴定肺炎链球菌分⼦分型⽅法将在第10章：PCR技术和第12章：分⼦技术中分别进⾏介绍。
其他的⽅法见⽹址/doc/30bf0a57c4da50e2524de518964bcf84b8d52d63.html /ncidod/biotech/strep/strep-doc/index.htm.由于此种细菌对于相关操作⼈员及环境存在潜在的危险，⽣物安全2级试验室是进⾏肺炎链球菌相关操作的必要条件。
根据第4章的具体要求要求进⾏防护和操作。
图1.在⾎琼脂平板上，肺炎链球菌周围出现草绿⾊的α溶⾎环（⿊⾊箭头所指）图2.在⾎琼脂平板上，肺炎链球菌⽣长24-28⼩时后，菌落扁平、中央凹陷；⽽草绿⾊链球菌菌落中央仍然保持凸起翻译⼈：limachao@/doc/30bf0a57c4da50e2524de518964bcf84b8d52d63.htmlFigure 3.肺炎链球菌鉴别流程图I.触酶试验触酶能够将H2O2分解为H2O和O2。
肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型及耐药性分析
系统医学2021年4月第6卷第7期•临床医学系统研究・DOI:10.19368/ki.2096-1782.2021.07.041肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型及耐药性分析何义山东省曹县人民医院检验科，山东荷泽274400［摘要］目的探析肺炎链球菌临床分离株的临床特点、血清分型与耐药性。
方法以该院2019年4月一2020年4月收治的120例患者为研究对象,均对其分离菌株施以血清分型与药敏试验，观察其分离株特点、血清分型情况及耐药性。
结果①120株肺炎链球菌以呼吸道标本为主，占86.67%,以儿科居多,占76.67%,患儿均为以8岁以下群体居多，占67.50%遥②血清分型结果显示：23F型38株(31.67%),19F型25株(20.83%),6A型10株(8.33%),6B型7株(5.83%),14型6株(5.00%),19A型5株(4.17%),4型2株(1.67%),未分型27株(22.50%)。
③肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星药物敏感度最高，对克林霉素、红霉素敏感度最低。
④儿科青霉素耐药率(84.78%)与非儿科(42.86%)相比，差异有统计学意义(x2=20.124,P<0.001)。
结论肺炎链球菌多见于儿科、8岁以下儿童，血清分型以23F、19F居多。
万古霉素与利奈唑胺及左氧氟沙星肺炎链球菌抗菌活性均较高。
［关键词］耐药性;肺炎链球菌；血清分型；临床特点；株菌分离［中图分类号］R446.5［文献标识码］A［文章编号］2096-1782(2021)04(a)-0041-03Clinical Characteristics,Serotypes and Drug Resistance Analysis of Clinical Isolates of Streptococcus PneumoniaeHE YiDepartment of Laboratory Medicine,Caoxian People's Hospital,Heze,Shandong Province,274400China［Abstract］Objective To analyze the clinical characteristics,serotypes and drug resistance of clinical isolates of Streptococcus pneumoniae.Methods120patients admitted to the hospital from April2019to April2020were taken as the research objects.The isolates were subjected to serotyping and drug sensitivity tests to observe the characteristics of the isolates,serotypes and medicinal tolerance.Results 1.The120strains of Streptococcus pneumoniae were mainly respiratory specimens,accounting for86.67%,most of them were pediatrics,accounting for76.67%,and most of the patients were under8years old,accounting for67.50%. 2.The serotyping results showed that:23F type38strains(31.67%),19F type25strains(20.83%),6A type10strains(8.33%),6B type7strains(5.83%),14type6strains(5.00%),19A type5strains(4.17%),4type2strains(1.67%),27untyped strains(22.50%).3.Streptococcus pneumoniaehas the highest sensitivity to vancomycin,linezolid and levofloxacin,and the lowest sensitivity to clindamycin and pared with non-pediatric penicillin resistance rate(84.78%)and non-pediatric penicillin(42.86%), the difference was statistically significant(x2=20.124,P<0.001).Conclusion Streptococcus pneumoniae is more common in pediatrics and children under8years old,and the serotypes are mostly23F and19F.Vancomycin and linezolid and levofloxacin Streptococcus pneumoniae have higher antibacterial activities.［Key words］Drug resistance;Streptococcus pneumoniae;Serotyping;Clinical characteristics;Strain isolation肺炎链球菌感染是全球性公共卫生问题,据世界卫生组统计,全球每年约有120万人因肺炎链球菌感染性疾病而死亡。
儿童重症肺炎链球菌肺炎的感染状况、耐药性及血清型研究
儿童重症肺炎链球菌肺炎的感染状况、耐药性及血清型研究作者：孔程祥王飞玲李莉金萍吴丽娟谢红波来源：《中外医学研究》2019年第20期【摘要】目的：分析儿童重症肺炎链球菌肺炎的感染状况、血清学分型及耐药现状，为预防和控制肺炎链球菌感染提供依据。
方法：回顾性分析2013年6月-2018年6月笔者所在医院PICU收治的重症肺炎链球菌肺炎患儿的临床资料，进行病原菌培养及药敏试验，并采用多重PCR对肺炎链球菌血清型体系进行检测。
结果：共分离出肺炎链球菌86株（28.86%），位居首位;对抗菌药物的耐药率总体呈上升趋势，对红霉素、克林霉素、四环素、复方新诺明均有较高的耐药性，多数肺炎链球菌对青霉素类、头孢类药物敏感，对万古霉素、利奈唑胺的耐药率为0，未发现对喹诺酮类药物耐药;血清学分型检测以19F（29.07%）、23F（15.12%）、6型（15.12%）和19A（11.63%）为主。
结论：肺炎链球菌仍是本地区儿童重症肺炎的主要病原菌，耐药问题日益显著，应正确合理使用抗生素，有效提高儿童重症肺炎的救治成功率。
【关键词】儿童; 重症肺炎; 肺炎链球菌; 耐药性; 血清型doi：10.14033/ki.cfmr.2019.20.021 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）20-00-03Study on Infection Status，Drug Resistance and Serotype of Severe Streptococcus Pneumoniae Pneumonia in Children/KONG Chengxiang，WANG Feiling，LI Li，et al.//Chinese and Foreign Medical Research，2019，17（20）：-52【Abstract】 Objective：To analyze the infection status，serological classification and drug resistance of severe Streptococcus pneumoniae infection in children，so as to provide evidence forthe prevention and control of Streptococcus pneumoniae infection.Method：The clinical data of children with severe Streptococcus pneumoniae admitted to PICU from June 2013 to June 2018 were analyzed retrospectively.The pathogen culture and drug sensitivity test were carried out，and the serotype system of Streptococcus pneumoniae was detected by multiplex PCR.Result：A total of 86 strains（28.86%） of streptococcus pneumoniae was isolated，ranking the first.The drug resistance rate of antibiotics was on the rise，and erythromycin，clindamycin，tetracycline and SMZ were all highly resistant.Most streptococcus pneumoniae were sensitive to penicillin and cephalosporins，while vancomycin linezolid and quinolones had no resistance.Serotype was mainly composed of 19F （29.07%），23F（15.12%），type 6（15.12%），and 19A（11.63%）.Conclusion：Streptococcus pneumoniae is still the main pathogen of severe pneumonia in children in our region，and drug resistance is becoming increasingly significant.Therefore，antibiotics should be used correctly and rationally to effectively improve the success rate of treatment for severe pneumonia in children.【Key words】 Children; Severe pneumonia; Streptococcus pneumoniae; Drug resistance; Serological typingFirst-author’s address：Shenzhen Bao’an Mate rnal and Child Health Hospital，Shenzhen 518106，China社区获得性肺炎（community acquired pneumonia，CAP）是全球5岁以下儿童死亡的重要原因，细菌感染是主要原因之一，据统计，肺炎链球菌（streptococcus pneumoniae，SP）是引起CAP的主要细菌。
肺炎链球菌研究现况及血清分型
WHO. Weekly Epidemiol Rec 2008;83:1–16
2000年，全球5岁以下儿童肺炎链球菌感染疾病负担估计
1.
1450万肺炎球菌感染病例 ，发病率为2331/10万。 – – 肺炎病例1380万（95.6%），占到所有肺炎病例（16000万）的 8.6%。 脑膜炎病例（10.3万）0.7%，发病率估计为17/10万。
WHO对全球尚未普种/或即将有疫苗可预防疾病的分类
极高度优先 肺炎链球菌性疾病 疟疾* 霍乱 登革热* 乙型脑炎 高度优先 人乳头瘤病毒感染 中度优先 甲型肝炎 戊型肝炎* 流行性脑脊髓膜炎（B）* 腮腺炎
流行性脑脊髓膜炎（ACW135Y） 风疹
狂犬病 轮状病毒感染 季节性流行性感冒
伤寒 黄热病
水痘
5%
中国, 12%
3% 3% 3% 5% 4% 2%
印度
2%
中国 尼日利亚
巴基斯坦
孟加拉
印度尼西亚
埃塞俄比亚
印度, 27%
34%
刚果
肯尼亚
菲律宾
其他
2000年全球5岁以下儿童肺炎球菌感染死亡病例数
国家（死亡病例数）
1. India (142 000) 2. Nigeria(86 000) 3. Ethiopia (57 000) 4. Congo (51 000) 5. Afghanistan (31 000) 6. China (30 000) 7. Pakistan (27 000) 8. Bangladesh (21 000) 9. Angola (20 000) 10.Uganda (19 000)
–
NPNM病例（53.8万） 3.7%
2. 82.6万死亡，5岁以下儿童死亡病例的11% （不包括HIV阳性儿童)。
耐青霉素肺炎链球菌研究进展
中 国 微 生 态 学 杂 志 ２ ０ ０ ２年 ８ 月 第 １ ４卷 第 ４ 期 Ｃｈｎ ｓ ｏ ｒ ａ ｆＭ ｉｒ ｅ ｏ ｏ ｙ， ｇ ｓ ０ ２・ ｌ， Ｎｏ ｉｅ ｅ Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｃ ｏ ｃ ｌｇ Ａｕ ｕ ｔ２ ０ Ｖｏ １１ ４
（ ７ ２ ）为 多 重 耐 药 ， 且 儿 童 Ｐ 耐 药 列 各 年 龄 组 之 ３． 并
首 。
２ 耐 青 霉 素 肺 炎 链 球 菌 的 血 清 型 及 分 型 方 法
肺 炎 链球 菌 共 有 ９ Ｏ个 以 血 清 型 ， 耐 青 霉 素 肺 炎 链 球 而 菌 菌 株 的 血 清 型 多 为 ６ ９、 １ 、 ３。但 不 同 的 国 家 、 区 监 、 １ ２ ４、 ９ 地 测 的 结 果 不 爆 相 同 ， 国 主 要 为 ６ ６ ９ 、 、 Ｆ、 ３ ． 美 Ａ、 Ｂ、 Ａ ｌ ｌ ４ ９ ２Ｆ 西 班 牙 为 ６、 、 ４、 、 ３ １ ． 威 特 主 要 为 ６ 、 Ｂ、 ４、 ９ ９ １ １ ２ ｌ 科 ９ ” Ａ ６ ｌ ｌ Ｆ、 ２ Ｆ ， 加 利 亚 为 ６、 Ａ、 Ｂ、 、 Ａ、 Ｖ、 ３ ２ Ｆｕ 等 ． ９ ３ Ｊ 保 ６ ６ ９９ ９ ２、３ １ ６ ９
药 率 都 ＞ ５ 。北 欧 和 英 国 、 拿 大 Ｐ 耐 药 率 较 低 ； 国 在 ０ 加 美 ２ Ｏ世 纪 ８ Ｏ年 代 为 低 耐 区 ， 家 监 测 资 料 中 Ｐ Ｐ 仅 ４ ～ 国 ＲＳ
５ ， ９ ７年 在 澳 大 利 亚 第 ２ １９ Ｏ届 国 际 化 疗 会 议 上 各 国 报 道 ＰＲＳ 感 染 占 肺 炎 链 球 菌 分 离 比 例 ， 国 为 ４ ， 班 牙 为 Ｐ 美 Ｏ 西 ５ ， 利 为 ２ ， 非 为 ５ Ｏ 智 ５ 南 ５％ ，日本 为 ３ ， 国 香 港 为 ７ 中 ４ ， 国 高 达 ７ 。 ５ 韩 ７ 我 国 尚 无 全 国性 统 一 监测 ， 有 个别 地 区的 监 测 报告 ： 仅 北 京 协和 医 院于 １９ ７年 ５月 ～ ８月 在 ７ ９ ９株 肺 炎 链 球 菌 中 使 用 Ｅ—ｅ ｔ法 测 得 １ ｔｓ １株 耐 青 霉 素 （ ４ ）３， 同 年 ９ １ １ ｌ］ 而 ～ １月 对 ２ ４株 肺 炎 链 球 菌 检 测 发 现 ＰＲＳ 发 生 率 为 １ ． ４ Ｐ ４３ Ｊ 。中 山 医科 大 学 附属 第 三 医 院于 １９ ７年 ５月 ～ １ ９ ２月 ， 集 广 州 收 地 区 肺 炎 链 球 菌 １¨ Ｏ Ｏ株 ， 测 发 现 Ｐ Ｐ 发 生 率 为 １ ， 检 ＲＳ １ １９ ９ ８年 对 １ ２株 肺 炎 链 球 菌 检 测 结 果 为 １ ． Ｌ 。 ２ ０ Ｏ １８ ５ ０ ０年 上 海 、 京 、 州 ３家 儿 童 医 院 各 分 离 １ ０株 Ｐ 用 Ｅ—ｅ ｔ 北 广 ｏ ｔ ｓ 法 测 定 Ｍ Ｉ 值 表 明 ： 霉 素 耐 药 率 北 京 １ ， 海 ３ ． ％ ， Ｃ 青 ４ 上 ５７
对链球菌性肺炎的深度解析
对链球菌性肺炎的深度解析链球菌性肺炎是一种由链球菌感染引起的肺部疾病。
本文将对链球菌性肺炎进行深度解析，包括病因、传播途径、症状、诊断和治疗等方面。
病因链球菌性肺炎主要由肺炎链球菌引起，常见的是肺炎链球菌的血清型3、6、14、19和23。
该菌群通常存在于人的咽喉部，通过飞沫传播或直接接触传播给他人。
传播途径链球菌性肺炎的传播途径主要包括空气飞沫传播和直接接触传播。
当感染者咳嗽、打喷嚏或说话时，会将病原体释放到空气中，其他人通过吸入感染。
此外，与感染者直接接触，如共用餐具、唾液、口腔分泌物等也可能导致传播。
症状链球菌性肺炎的症状包括发热、咳嗽、胸痛、呼吸困难、乏力等。
部分患者可能出现咳痰、咳血等症状。
严重感染时，可能导致中毒性休克或多器官功能衰竭。
诊断链球菌性肺炎的诊断需要结合患者的临床症状和体征，以及相关的实验室检查。
常用的诊断方法包括胸部X射线检查、痰液培养和血液培养等。
确诊后，还需进行血清学鉴定，确定感染的具体血清型。
治疗链球菌性肺炎的治疗主要包括抗生素治疗和支持性治疗。
对于轻度感染，口服抗生素可以有效治疗。
而对于重症患者，静脉输液抗生素治疗可能更为合适。
同时，还需要对症治疗，如退热、止咳等。
预防预防链球菌性肺炎的关键在于加强个人卫生习惯和免疫力。
保持良好的手卫生、咳嗽礼仪和通风换气是预防传播的重要措施。
此外，接种肺炎球菌疫苗也可有效预防链球菌性肺炎。
以上是对链球菌性肺炎的深度解析，了解该疾病的病因、传播途径、症状、诊断和治疗等方面对于预防和应对该疾病具有重要意义。
肺炎链球菌的检测与分型技术
2020/11/14
41
The Ct value corresponding to the detection level of RT-
PCR and MRT-PCR for pneumococcal serotyping
Serotype
RT-PCT
MRT-PCR
Combined with other serotypes
年龄组, 岁
458例死亡。死亡率 >65岁: 7.55/100 000 < 1岁: 0.71 / 100 000
*覆盖2800万 (占美国人口9%)
2020/11/14
13
/ncidod/DBMD/abcs/survreports/spneu06.pdf
欧洲1985 – 2006年<2岁儿童侵袭性肺炎球菌疾 病发病（发表的研究）
2020/11/14
8
沒有感染者
帶菌者
发病者
2020/11/14
9
肺炎链球菌疾病负担
突破血脑屏障 肺炎球菌菌血症
脑膜炎 脑脊液渗漏
鼻窦炎
突破呼吸道粘 膜纤毛防御系 统
中耳炎 鼻咽部移殖
腹膜炎 关节炎等
突破吞噬细胞防御系统
肺炎
2020/11/14 Salyers AA, Whitt DD. In: Bacterial Pathogenesis: A Molecular Approach. 2nd ed. Washington, USA: 10 ASM Press; 1994. p. 322-31
12A
19F
6C
12B
20
7A
12F
21
7B
13
22A
肺炎链球菌的分离和鉴定
血琼脂培养基
将样本接种在含有血液和琼脂的培养基上， 适宜的温度下培养，观察是否有肺炎链球菌 的生长。
分离步骤
增菌
将采集的样本在适宜的温度和环境下进行增菌培 养，使细菌增殖。
纯化
对单个菌落进行纯化培养，确保分离得到的菌株 为纯培养物。
ABCD
分离
将增菌后的样本划线接种在选择性培养基上，使 肺炎链球菌在培养基上形成单个菌落。
需要加强临床医生和微生物实 验室之间的合作，提高肺炎链 球菌的早期诊断和治疗效果。
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鉴定
通过形态学观察、生化试验和分子生物学方法对 纯化的菌株进行鉴定，确认为肺炎链球菌。
04
鉴定方法
形态学鉴定
总结词
通过观察细菌的形态、染色特性及排列方式，初步判断是否为肺炎链球菌。
详细描述
在显微镜下观察细菌的形态，肺炎链球菌通常呈双排列或四排列，呈革兰氏阳性染色。
生化鉴定
要点一
总结词
通过细菌的生化反应来进一步确定是否为肺炎链球菌。
鉴定准确性
分子生物学鉴定和血清型鉴定的 结果一致，表明实验鉴定方法的 准确性较高。
临床意义
了解分离菌株的血清型和抗生素 敏感性，对于指导临床合理用药、 控制感染和预防疾病传播具有重 要意义。
06
结论与展望
研究结论
01
肺炎链球菌是引起肺炎的重要病原菌，具有多重耐药性，给临床治疗 带来挑战。
02
分离和鉴定肺炎链球菌的方法不断改进，包括传统的培养法、免疫学 方法和分子生物学方法等。
详细描述
肺炎链球菌是一种需氧或兼性厌氧的细菌，在培养基中生长迅速。在血琼脂平板上，肺 炎链球菌形成中等大小、灰白色、半透明、圆形、凸起的菌落，表面光滑，周围有明显
《2024年肺炎链球菌血清型23F荚膜多糖支链结构的生物学功能研究》范文
《肺炎链球菌血清型23F荚膜多糖支链结构的生物学功能研究》篇一一、引言肺炎链球菌是一种常见的呼吸道病原菌，能够引起各种类型的感染，其中尤以肺炎、脑膜炎和中耳炎最为常见。
由于血清型23F是引起这些疾病的重要病原体之一，其生物学特性的研究就显得尤为重要。
本篇论文主要探讨肺炎链球菌血清型23F的荚膜多糖支链结构及其生物学功能。
二、肺炎链球菌血清型23F简介肺炎链球菌属于链球菌属，具有高度多样性，其中血清型23F是一种重要的病原类型。
该类型的主要特点之一是其表面覆盖着一层厚重的荚膜多糖，这层多糖具有许多重要的生物学功能。
三、荚膜多糖支链结构的研究荚膜多糖是肺炎链球菌的重要表面成分，其结构复杂且具有特异性。
对于血清型23F的荚膜多糖支链结构的研究，主要关注其分子组成、空间构象以及与宿主细胞的相互作用等方面。
首先，对于荚膜多糖的分子组成的研究表明，其支链结构由许多重复的糖单元组成，每个糖单元包含多个单糖。
单糖之间通过特定的连接方式形成支链结构，这种结构使得多糖具有高度的柔韧性和可塑性。
其次，对于空间构象的研究表明，荚膜多糖的支链结构在空间上呈现出一种高度有序的排列方式。
这种排列方式使得多糖能够有效地与宿主细胞表面的受体结合，从而影响病原菌与宿主细胞的相互作用。
最后，关于与宿主细胞的相互作用的研究表明，荚膜多糖的支链结构在病原菌感染过程中起到了关键的作用。
它可以通过与宿主细胞的受体结合，促进病原菌的粘附和入侵。
同时，它还能够调节免疫反应，影响宿主的抗感染能力。
四、生物学功能的研究对于肺炎链球菌血清型23F荚膜多糖支链结构的生物学功能的研究表明，其具有以下重要作用：1. 粘附作用：荚膜多糖的支链结构可以与宿主细胞表面的受体结合，从而促进病原菌的粘附和入侵。
这种粘附作用是病原菌感染的重要步骤之一。
2. 免疫调节作用：荚膜多糖的支链结构能够调节宿主的免疫反应。
它可以通过刺激机体产生特异性抗体，增强机体的抗感染能力。
肺炎链球菌血清型分布及耐药性研究
ｍ ｏｎ ｌ ａ Ｃ ＨＥＮ Ｔ ａ ｏ
６１ ０ ５ ０ ０ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
【 Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｒ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ ｄ ｉ ｓ ｔ ｒ ｉ ｂ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ａ ｎ ｔ ｉ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ａ １ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｔ ｒ ｅ ｐ ｔ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ｐ ｎ ｅ ｕ ｍ ｏ ｎ ｉ ａ ｅ
霉素 、 四环 素 耐药 率较 高 。 结 论 成 都 市新 都地 区肺 炎链 球 菌血 清型 以 １ ９ Ａ、 １ ９ Ｆ 、 ６ Ｂ 、 ２ ３ Ｆ 、 ９ Ｖ 、 ４ 型 为主 ， Ｐ Ｃ Ｖ ７ 疫
肺炎链球菌研究现况及血清分型课件
疫苗的研发和生产应不断改进 和更新，以应对不断变异的肺 炎链球菌菌株。
抗生素的合理使用
抗生素是治疗肺炎链球菌感染的 重要药物，但过度使用或滥用会
导致细菌耐药性的产生。
医生应严格按照抗生素使用指南， 根据患者的病情和药物敏感性试 验结果，选择合适的抗生素。
患者应遵循医生的建议，按时按 量服用药物，避免自行停药或更
肺炎链球菌主要通过飞沫传播，也可 通过接触污染物体表面或吸入污染水 源而感染。
肺炎球菌的研究
02
疫苗研究
疫苗种类 目前针对肺炎链球菌的疫苗主要有多糖疫苗和结合疫苗两 大类。多糖疫苗主要针对23种血清型，而结合疫苗则针对 6种或7种血清型。
疫苗接种情况 全球范围内，肺炎链球菌疫苗接种率在不同地区和国家存 在差异。发达国家接种率较高，而发展中国家接种率较低。
抗生素耐药性的影响
抗生素耐药性的增加导致治疗肺炎链球菌感染的难度加大，治疗效 果下降，甚至出现无药可用的局面。
新型治疗手段的研究
新型药物研究
针对肺炎链球菌的抗生素耐药性 问题，研究者正在开发新型的抗 菌药物，如新型抗生素、抗菌肽
等。
免疫治疗研究
免疫治疗作为一种新型的治疗手 段，通过提高机体免疫力来清除 病原体。目前已有一些针对肺炎 链球菌的免疫治疗策略正在研究
血清分型的常用方法
荚膜肿胀法
通过特异性抗体与细菌表面抗原 结合，观察细菌荚膜肿胀的程度，
从而确定血清型。
血清凝集试验
利用不同血清型肺炎链球菌的特异 性抗体与相应细菌进行反应，观察 是否发生凝集现象，以此确定细菌 的血清型。
分子生物学方法
利用基因测序、PCR等技术对细菌 基因组进行分析，确定其血清型。
免疫疗法
肺炎链球菌研究现况及血清分型课件
疫苗接种情况
全球范围内，肺炎链球菌疫苗接 种率在不同地区和国家存在差异
，但总体呈上升趋势。
疫苗效果评估
多项研究表明，接种肺炎链球菌 疫苗能够有效降低肺炎链球菌感 染的发生率，减轻病情严重程度
，降低死亡风险。
抗生素耐药性研究
01
02
03
耐药性现状
肺炎链球菌对抗生素的耐 药性日益严重，部分菌株 对常用抗生素如青霉素、 红霉素等产生了抗药性。
主要血清型流行病学特征
1型
01
主要引起大叶肺炎、脑膜炎等，全球分布广泛，是导致社区获
得性肺炎的主要病原体之一。
3型
02
常引起儿童和老年人肺炎、脑膜炎等，也是导致医院获得性肺
炎的重要病原体之一。
7型
03
常引起儿童急性中耳炎、鼻窦炎等，也是导致社区获得性肺炎
的常见病原体之一。
04
肺炎链球菌的防治
疫苗接种的重要性
易引起组织坏死和空 洞形成
可产生多种毒素和酶 ，如荚膜多糖、肺炎 链球菌溶血素等
肺炎链球菌的流行病学
主要通过飞沫传播，也可通过接触污 染物体表面传播
全年均可发病，但冬季和春季更容易 流行
在人群密集的场所，如学校、医院等 容易传播
02
肺炎链球菌的研究现状
疫苗研究
疫苗种类
目前针对肺炎链球菌的疫苗主要 有多糖疫苗和结合疫苗两大类， 其中结合疫苗又分为蛋白结合疫
呼吸道卫生
鼓励公众在咳嗽、打喷嚏时使用纸巾或肘部遮掩口鼻，以避免飞沫 传播病菌。
健康生活方式
提倡健康的生活方式，如保持充足的睡眠、均衡的饮食、适当的锻炼 等，以提高身体免疫力，抵抗病菌的感染。
肺炎链球菌鉴定流程
肺炎链球菌鉴定流程肺炎链球菌是一种革兰阳性菌，可引起肺炎、脑膜炎和败血症等严重感染。
其识别需要准确可靠的实验室检测。
以下是肺炎链球菌鉴定的综合流程：显微镜检查：将疑似标本制成涂片，革兰染色。
在显微镜下观察革兰阳性球菌，通常呈卵圆形或兰氏链球菌排列。
培养和形态学特征：疑似标本接种于适当的培养基上，如血琼脂平板。
培养 24-48 小时，观察菌落形态、溶血性（α、β、γ）。
α溶血菌落周围出现绿色透明晕环。
生化反应：进行生化反应，如 katalase 试验、optochin 敏感性试验。
Katalase 阳性菌产生气泡，optochin 敏感菌在含 optochin 的培养基上生长受抑制。
抗原检测：利用免疫学方法检测肺炎链球菌荚膜多糖 (CPS) 抗原。
常见的技术包括乳胶凝集试验和酶联免疫吸附测定 (ELISA)。
不同血清型荚膜多糖抗原可用于区分不同的肺炎链球菌株。
分子检测：利用聚合酶链反应 (PCR) 等分子技术检测肺炎链球菌特异性基因。
PCR 可快速灵敏地检测出肺炎链球菌，即使在标本量少或菌载量低的情况下。
血清分型：根据肺炎链球菌荚膜多糖抗原的不同，将其分为 90 多种血清型。
血清分型对于流行病学调查和疫苗接种策略至关重要。
耐药性检测：检测肺炎链球菌对常用抗生素的耐药性。
常见的抗生素包括青霉素、头孢菌素和宏观内酯类。
耐药性检测结果指导临床治疗方案的选择。
综合解读：结合上述检测结果，综合解读以确定疑似标本中是否含有肺炎链球菌。
准确的鉴定有助于指导患者的管理和控制肺炎链球菌感染的传播。
优势和局限性：肺炎链球菌的鉴定流程提供了准确可靠的结果。
综合方法提高了检测的灵敏性和特异性。
分子检测技术在标本量少或难以培养的情况下尤为有用。
培养时间和抗生素耐药性检测结果的等待时间可能是局限性。
2004~2009年临床分离肺炎链球菌的血清型／群分布及耐药性监测
2004~2009年临床分离肺炎链球菌的血清型／群分布及耐药性监测目的：了解当前本院临床分离肺炎链球菌的血清型/群分布及耐药趋势，为临床合理使用抗生素提供参考。
方法：以2004~2009年临床分离的822株肺炎链球菌为研究对象，采用荚膜肿胀试验进行血清分型/群，E-test检测菌种对青霉素、头孢呋辛、头孢地尼、头孢克罗、红霉素、四环素、左氧氟沙星、万古霉素等8种抗生素的敏感性。
结果：2004年青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）的分离率为49.4%，并呈逐年上升趋势，至2006年PNSP分离率高达67.8%，2009年下降至51.0%。
822株肺炎链球菌最常见的型/群是19群，其次是23、6、14、3、其他。
PNSP在6种血清型/群中所占的比例在2004~2009年期间无显著性变化（P ＞0.05）。
肺炎链球菌对其他β内酰胺类抗生素的非敏感趋势类似青霉素，对红霉素、四环素的非敏感率始终在60%以上，其中青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）对红霉素和四环素几乎100%耐药，对左氧氟沙星、万古霉素的非敏感率均＜3%。
结论：临床分离肺炎链球菌以19群、23群、6群、14群、3群常见；对β内酰胺类抗生素的非敏感率自2007年呈下降趋势，且对左氧氟沙星、万古霉素始终具有较高的敏感性。
[Abstract] Objective: To investigate serotype/serogroup distribution and the trend of antimicrobial resistance of Streptococcus pneumoniae isolated from patients hospitalized for pneumonia in our hospital, so as to provide guidance for rational clical treatment. Methods: 822 strains of S.pneumoniae were collected from 2004 to 2009. Minimal inhibition concentrations(MIC) of penicillin, cefuroxime, cefdinir, cefaclor, erythromycin, tetracycline, levofloxacin, vancomycin were determined by E-test. And the isolates were serotyped with the quellung reaction. Results: The prevalence of PCG-nonsusceptible S. pneumoniae (PNSP) isolates increased gradually from 49.4% in 2004, reaching a statistical peak in 2006 (67.8%), then decreasing to 51.0% in 2009. Among 822 strains of S. pneumoniae, the most prevalent serogroups/serotypes were type 19, 23, 6, 14, 3, others. The distribution of 6 serotypes in PNSP isolates was not statistically different between years (P＞0.05). The prevalence of S.pneumoniae isolates nonsusceptible to other β-lactam antibiotics, similar to penicillin. The prevalence of strains nonsusceptible to erythromycin and tetracycline were consistently＞60%. Almostly all PCG-resistant S.pneumoniae (PRSP) were resistant to both erythromycin and tetracycline throughout the period. The prevalence of strains resistant to levofloxacin and vancomycin were ＜3% over the period. Conclusion: Serotype/serogroup 19, 23, 6, 14, 3 are the commom types among the S.pneumoniae. Decreased preval ence of β-lactam resistant strains has been occurring since 2007. And These S.pneumoniae strains are highly sensitive to levofloxacin and vancomycin consistantly.[Key words] Streptococcus pneumoniae; Serotype/serogroup; Antimicrobial resistance; Antibiotics肺炎鏈球菌（streptococcus pneumoniae，SP）是社区获得性肺炎、脑膜炎、中耳炎等的常见致病菌，根据荚膜多糖不同的抗原性，分为46个血清群和90个血清型，且其分布具有地域差异性[1]。
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肺炎球菌疫苗发展史
疫苗 Prevnar (PCV7) Synflorix (PCV10) Prevnar13(PCV13) V114（PCV15) PPV23 4 √ √ √ √ √ 6B √ √ √ √ √ 9V √ √ √ √ √ 14 √ √ √ √ √ 18C 19F 23F 1 √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ 5 7F 3 6A 19A 22F 33F 2, 8, 9N, 10A, 11A, 12F, 15B, 17F, 20 载体 CRM197 蛋白 D, DT, TT CRM197 CRM197 无
抗生素耐药性检测 免疫学：血清学、免疫效果评价 分子生物学测：PCR检测、分型、聚类、遗传变异、进化分析
肺炎链球菌（ Streptococcus pneumoniae)
• 又名肺炎球菌(Pneumococcus)或肺炎双球菌。 • 多成双或短链排列,革兰染色阳性 • 肺炎球菌主要抗原： ① 荚膜多糖：致病的主要基础及血清分型依据，超 过90种血清型 ，仅少数血清型致病 ② 菌体抗原：C多糖，可与C反应蛋白发生沉淀反应。 M蛋白：型特异性蛋白 • α溶血（草绿溶血环）。 • Optochin敏感试验阳性。 • 胆汁溶解试验：自溶酶，胆汁或脱氧胆酸盐可激活 自溶酶，加速菌体自溶。胆汁溶解试验阳性。可与 甲型溶血性链球菌区别。
–
NPNM病例（53.8万） 3.7%
2. 82.6万死亡，5岁以下儿童死亡病例的11% （不包括HIV阳性儿童)。
1. 2. 3. 4.
Lancet 2009; 374: 893–902 WHO. Report of a meeting on priorities for pneumococcal and Haemophilus influenzae type b (Hib) vaccine development and introduction. Geneva, February 9–12, 1999. WHO/V&B/01.14. http://www.who.int/vaccines-documents/DoxGen/H4-Inno.htm (accessed July 30, 2009). WHO. Pneumococcal vaccines. Wkly Epidemiol Rec 2003;78: 110–19. WHO. Pneumococcal conjugate vaccine for childhood immunization —WHO position paper. Wkly Epidemiol Rec 2007; 82: 93–104.
• PCV7: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F • PHiD10: 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F • PCV13:4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F, 23F, 1, 5, 7F, 3, 6A, 19A
肺炎球菌
荚膜
预防策略
• • 接种肺炎球菌疫苗是优选的预防方式 降低 肺炎球菌感染的严重危害„ 抗生素的耐药性„
• WHO对多价肺炎球菌多糖疫苗推荐人群为2岁以上的肺炎球菌性疾病高 危人群，包括： 65岁以上健康老年人，尤其是在公共机构中生活的老年人 慢性呼吸系统疾病、糖尿病、肾病综合征和某种免疫功能缺陷的 患者，尤其是功能性或解剖学上无脾者
轮状病毒：453 000
IPD病例的危害
• 75%的IPD病例和83%的肺炎球菌脑膜炎病例发生在2岁以下的儿童 中，对于肺炎而言，8.7%~52.4%的病例发生在小于6个月的婴幼儿。 • IPD 病例： • 病死率高，发展中国家，菌血症20%，脑膜炎50%，婴幼儿是高危人 群，发达国家，菌血症成人病死率15~20%，老年人中30%~40%。 • 后遗症 • 中耳炎：公共卫生问题 • 肺炎球菌感染定义：血液或其他无菌部位标本（CSF）分离到细菌， 但是对于无菌血症的肺炎病例，判断起来比较困难。
WHO：2008年疫苗可预防疾病
WHO估计，2008年全球5岁以下儿童150万死于疫苗可预防疾病， 占5岁以下儿童死亡的17%
肺炎球菌病: 476 000 Hib: 199 000 百日咳: 195 000 麻疹: 118 000 新生儿破伤风: 59 000 破伤风 (non-neonatal): 2 000
பைடு நூலகம்
播 散
健康人群
暴露 未暴露
感染
未感染
病例 携带者
肺炎球菌的致病机理
细菌黏附和穿透粘膜
细菌血中生存
细菌穿过血脑屏障
Meningococcal Disease, Nancy E. Rosenstein,N Engl J Med, 2001
肺炎链球菌感染性疾病
侵袭性 脑膜炎
预计年病例数
患病率
疾病严重程度
WHO对全球尚未普种/或即将有疫苗可预防疾病的分类
极高度优先 肺炎链球菌性疾病 疟疾* 霍乱 登革热* 乙型脑炎 高度优先 人乳头瘤病毒感染 中度优先 甲型肝炎 戊型肝炎* 流行性脑脊髓膜炎（B）* 腮腺炎
流行性脑脊髓膜炎（ACW135Y） 风疹
狂犬病 轮状病毒感染 季节性流行性感冒
伤寒 黄热病
水痘
WHO. Weekly Epidemiol Rec 2008;83:1–16
2000年，全球5岁以下儿童肺炎链球菌感染疾病负担估计
1.
1450万肺炎球菌感染病例 ，发病率为2331/10万。 – – 肺炎病例1380万（95.6%），占到所有肺炎病例（16000万）的 8.6%。 脑膜炎病例（10.3万）0.7%，发病率估计为17/10万。
2008年全球5岁以下儿童死亡病因
2008年，全球小于5岁的儿童死亡879万（不包括HIV感染），597万死于传 染病（68%）。 前5位的国家：印度、尼日利亚、刚果、巴基斯坦、中国。
Source: RE Black et al, Global, regional, and national causes of child mortality in 2008: a systematic analysis, Lancet, 2010 Margaret Kendrick Hostetter，NEJM,2012
菌血症/败血症 肺炎
X 10 X 100
中耳炎、鼻窦炎、支气管炎
非侵袭性
Annual incidence of meningitis in <2-year-olds 7-10/100,000 - United States
X 1000
American Academy of Pediatrics. Pediatrics. 2000;106:367-376 & MMWR. 1997;46:1-24
卫生部2011年《中国妇幼卫生事业发展报告》
导致5岁以下儿童死亡的前5位死因顺位是：①早产或低出生体重， ②肺 炎， ③出生窒息， ④先天性心脏病，⑤意外窒息，占全部死亡原因的 60.7%
1.WHO. Weekly Epidemiol April 2012, 87:129-144 2.WHO. Weekly Epidemiol Rec 2007; 82: 93-104 3. UNICEF/WHO. Pneumonia: The forgotten killer of children, 2006 Sep
“由于肺炎球菌疾病在儿童和成人中的高负担， WHO优先考虑在发达和发展中国家进行肺炎球菌疾病的预防”
* WHO Position Paper on 23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine. Wkly Epidemiol Rec 2008;83(Oct 7):373-84. www.who.int/wer/2008/wer8342.pdf
肺炎链球菌研究现况及血清分型
邵祝军 2013-3-20
传染病监测：流行病学+实验室
环境
传 播
人
群
监 测
健康人群
暴露 未暴露
感染
未感染
病例 携带者
2
呼吸道传染病室
脑膜炎奈瑟菌 百日咳 肺炎链球菌 流感嗜血杆菌 白喉 军团菌 克雷伯杆菌
细菌学实验室工作内容
1.
2. 3. 4.
病原学：采样、运输、培养、分离、鉴定、分型、保存
2000年，全球5岁以下肺炎球菌病发病病例数
– – – – – – – – – –
India: 27% China: 12% Nigeria: 5% Pakistan: 5% Bangladesh: 4% Indonesia: 3% Ethiopia: 3% Congo: 3% Kenya: 2% Philippines: 2%
Russel F et al 2011，SAGE meeting, 8–10 November 2011
肺炎球菌病疾病负担
• WHO估计，2008年全球5岁以下儿童死亡880万，其中，5.4%（47.6 万）死于肺炎球菌感染，多数在发展中国家，非洲和亚洲。 • HIV感染加重疾病负担。 • 肺炎球菌是儿童重症肺炎的主要致病菌，约50%的重症肺炎的病原菌 是肺炎链球菌，在致死病例中可能超过50% 。 • 疾病负担估算的影响因素： 病例的定义、实验室检测能力、监测系 统的敏感性等。
PPV
1911
1945
4-valent PPV
1976
6-,12-,14-Valent PPV
1983
Merck: 23-valent PPV
Whole cell vaccine
PCV
2000
Wyeth: PCV7