植物检疫之实验室检测

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植物病害检疫检验技术真菌

植物病害检疫检验技术真菌

N=n1×n2×n3/m 式中: N--每克种子的孢子负荷量 n1--每视野平均孢子数 n2--盖玻片面积上的视野数 n3--1ml水的滴数 m--供试样品的重量(g)
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如果镜检洗涤液时,没有检查到病菌孢子,则对同一 样品要重复几次取样洗涤,对每一洗涤液至少要镜检5张 玻片。当一个样品两次取样,洗涤检验的结果相差很大时, 则需要重复一次。
(九)接种方法
从种子、苗木及其他繁殖材料上获得的病菌,有时还 需接种到植株上,使其表现典型症状后,再检查鉴别。
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由于病原种类与传播方式不同,其接种的方法也各不相同, 常用接种方法有下列几种:
(1)拌种接种:用病菌孢子拌种,是接种黑粉病(如矮腥黑穗病) 最常用的方法。
(2)浸种接种:用病原真菌孢子悬浮液浸种,也是常用的接种方法。 (3)花期接种法:主要用于从花期侵入的病菌。如:大麦、小麦散 黑穗病菌的接种。在抽穗后1-2天,用冬孢子悬浮液注射到花内。 (4)整株喷雾接种:孢子悬浮液喷在叶片或茎部 (5)土壤接种法:针对一些土传病菌,如棉花枯、黄萎菌。
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保湿萌芽检验的缺点:
1、在对寄主生长发育不良,而适宜于病菌生长发育的条 件下,则某些腐生菌可能变成萌芽阶段的寄生菌,造成幼 芽发生部分病斑。
2、由于主要还是依靠肉眼检查,多种病害可以产生类似的病症, 就是同一种病害也可发生不同的症状等,这些情况都足以影响检验 结果的准确性。
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第四章 植物病害检疫检验技术
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第一节 植物检疫性真菌常见检疫检验技术
直接检验 比重检验 染色检验 洗涤检验 保湿萌芽检验 分离培养检验
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第三章 动植物检验检疫程序

第三章 动植物检验检疫程序

第二节
检疫申报(报检)
检疫申报,也称报检。是动植物检疫程序中 的必经环节。检疫物在到达前或到达时,货 主或代理人必须及时向检疫机关进行检疫申 报,以利于办理提货手续。
第二节
检疫申报(报检)
一、检疫申报的基本含义
检疫申报(quarantine declaration):是检疫物输 入或输出时由货主或代理人向检疫机关及时声 明并申请检疫的法律程序。 检疫申报的主要作用:是使检疫人员在接到货 主或代理人递交的报检材料后,为进一步核对 相关单证和实施检疫做好必要准备。 检疫申报是一法定程序,是动植物检疫的必经 环节,由货主或代理人和检疫人员共同完成。
第一节
四、检疫许可的基本手续
检疫许可
科研等需要办理特殊许可主要包括3个步骤: (1)领取单证 引进单位提供有关证明和说明材料后, 到当地口岸动植物检疫机关领取许可证申请表 (2)报请批准 引进单位填写申请表后报国家动植物 检疫机关审批。 (3)批准输入 国家动植物检疫机关根据申请和待批 物进境后的特殊需要和使用方式,填发许可证,标 明批准的数量、检疫要求、进境口岸、许可证有效 期等内容,并委托有关口岸动植物检疫机关核查和 监督使用。
第二节
检疫申报(报检)
二、检疫物范围与报检机关
在进出境动植物检疫中,执行检疫申报任务 的检疫机关主要是各口岸出入境检验检疫局。 货主在输入动植物、动植物产品和其他检疫物 时,应向进境口岸动植物检疫机关报检; 输出动植物、动植物产品和其他检疫物时,应 向出境口岸动植物检疫机关报检; 运输动植物、动植物产品和其他检疫物过境时, 向进境口岸动植物检疫机关报检,出境口岸不 再报检。
第二节
检疫申报(报检)
二、检疫物范围与报检机关
在进出境动植物 检疫中,哪些检 疫物需向动植物 检疫机关进行申 报呢?

植物检疫性病害的检测及防除研究方法技术

植物检疫性病害的检测及防除研究方法技术

• 寄主:外来有害生物有了新的食物(寄主)或易感病寄主, 导致大爆发;
• 人为因素:外来有害生物传入初期由于人们没有看到它的 危害(危害有量变到质变的过程) ,没有引起人们的足 够重视和防治,没有防微杜渐,最后导致大爆发;人们对 外来有害生物危害性认识不足,缺乏对其生物学特性的了 解,缺乏防治的经验和有效的方法和手段或没有及时采取 防治措施,导致外来有害生物的大爆发和危害。
绪论
• 目的:发现、检出和鉴定有害 生物,作为出证或检疫处理的 依据(食品安全,化妆品安全, 疾病控制)
• 方式:现场检查、实验室检验
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一 检疫(QUARANTINE)
• 检疫Quarantine是拉丁语,原意是40。
• 14世纪,欧洲发生了一场非常大的鼠疫流行。当时整个欧 洲流行鼠疫,死亡了2000万人,也就是当时欧洲1/4的人 口因患鼠疫而死掉了。感染了鼠疫的病人先是淋巴结溃烂, 接着是引起肺部的病变,到后期由于缺氧,整个皮肤变黑。 到死的时候,整个人是黑的。 黑死病流行非常广泛,在
• 现在此病已在全国十二个省市、自治区、特别行政区迅速 蔓延。发生面积已超过8万公顷,死亡的寄主树木2000万 株以上,累计给中国造成直接经济损失近50亿元、对社会 和生态等产生的间接损失上百亿元。在重点发生区,部分 林地已退化为荒山,疫区相关农副产品和林产品的流通和 出口也直接受到影响。
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• 为防止松材线虫的传入,中国政府于2000 年1月1日开始对美、日进口的货物木质包 装实施检疫。
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马铃薯晚疫病
1845年,爱尔兰由于从美洲传入马铃薯晚 疫病,导致病害大流行,使马铃薯造受了 毁灭性灾害。当时,仅800万人口的爱尔兰 岛死于饥荒者达20万人,外出逃荒者164万 人。引起了全世界的震惊。这就是有名的 “爱尔兰大饥荒”。

植物检疫技术

植物检疫技术
切片置于1.5%水琼脂平板上, 在28℃和黑暗条件下培养3d
如确系该菌,则接种部 位软腐、维管束褐变
生理生化及快速测定法
• • 生化测定试剂盒: Biolog 测定:
噬菌体检测
血清学检测技术
酶联免疫吸附技术
(ELISA)-- 酶联免疫吸
附测定(Enzyme linked immunology assay,
电了显微镜观察
• 目前通常认为运用负染和超薄切片电镜观察能诊 断和鉴别植物病毒,一般可诊断到属的水平。
免疫学检测法
快速免疫滤纸测定法(Rapidimmuno afterpaperassay,RIPA)
免疫胶体金技术 (Immune colloidal gold technique)
分子生物学检测方法
植物寄生线虫的各种分离方法
直接解剖法-- 内 生线虫在体视显
微镜下用解剖针
直接解剖病组织

简易贝尔曼漏斗法:分离少量植物材料中有活 动能力的线虫。
清洗材料 收集线虫 切成小段
裹纱布
浸入漏斗12h
• 浅盘法

卡勃过筛分离法――本法用于从大量土壤中分离
各类线虫。
检疫性线虫的一般检验程序及注意事项
的检查、可用于病害普查,口岸检 疫和产地检疫等。
间接法
一抗
底物
二抗
免疫荧光技术
分子检测技术
特异性基因或DNA序列用于检测病原菌
核糖体DNA基础的PCR策略
分子检测试剂盒
生物学检测技术
• 鉴别寄主检测--以鉴别寄主反应或指示植物为依 据的方法。
• 曾广泛运用,目前却由于其检测速度慢、受环境 和季节影响较大等诸多因素限制,而运用较少。
第二节 病原细菌的检疫检验技术

植物检疫学试验指导书

植物检疫学试验指导书

《植物有害生物检疫》实验指导书适用专业:动植物检疫、农学王建国,向妙莲,李小珍编写江西农业大学农学院植保系2008年1月目录第一部分室内实验植物检疫实验注意事项实验1 检疫性有害生物鞘翅目一……………………………………………………………实验2 检疫性有害生物鞘翅目二……………………………………………………………实验3 鳞翅目检疫性有害生物………………………………………………………………实验3 鳞翅目检疫性有害生物………………………………………………………………实验5 双翅目检疫性有害生物二……………………………………………………………实验6 同翅目检疫性有害生物………………………………………………………………实验7 其他检疫性有害生物…………………………………………………………………实验8 产地检疫………………………………………………………………………………实验9 洗涤检验………………………………………………………………………………实验10 分离培养检验…………………………………………………………………………实验11 生理生化检验…………………………………………………………………………实验12 染色检验………………………………………………………………………………实验13 噬菌体检验……………………………………………………………………………第二部分教学实习植物有害生物检疫教学实习计划………………………………………………………………《植物有害生物检疫》实验注意事项1、每人准备HB和3H绘图铅笔个一支,橡皮一块,厘米尺和小刀各一把。

《江西农业大学实验报告纸》20病装订成册。

2、实验前,预习实验指导书。

3、显微镜安指定号码使用,用完后复原,经教师检查后,放回原处。

4、实验过程中,必须保持安静,按照实验要求和操作规程,认真进行实验。

5、实验报告要求正确、整洁、清晰,当天课后教师批改(教师指定的日期除外)。

3植物病害检疫检验技术

3植物病害检疫检验技术
放线菌,蓝藻,绿藻,立克氏体,菌原体,类菌原体。 (2)原生生物界(Protista):单细胞,有核,孢子虫等。 (3)菌物界(Fungi):吸收异养 (真菌、粘菌) (4)动物界(Animalia):吞噬异养。 (5)植物界(Plantae):光合自养。
植物界
真菌界
动物界
原生生物界
原核生物界
病毒界
三、真菌的生活史(life-cycle)
3.多型现象(polymorphism):许多真菌在整个生活史中可以产生2种或2种以上 的孢子。如锈菌有的可产生5种孢子:性孢子、锈孢子、夏孢子、冬孢子和 担孢子。
4.单主寄生(autoecism):多数植物病原真菌在一种寄主植物上就可以完成生 活史。
5.转主寄生(heteroecism):在真菌的生活史中,有的真菌不同的寄生阶段必 需在两种亲缘关系不同的寄主植物上生活才能完成生活史。无性阶段在一种 植物上寄生,有性阶段在另一种植物上,叫转主寄生。经济价值较大的植物 叫寄主,另一寄主植物叫转主寄主或中间寄主。如梨锈病菌冬孢子和担孢子 产生于桧柏上,性孢子和锈孢子则产生于梨树上,转主寄主为桧柏。
(一) 真菌的无性繁殖
真菌不经过核配和减数分裂,营养体直接以断裂、裂殖、芽 殖和割裂的方式直接产生后代新个体叫无性繁殖。无性繁殖产 生的各种孢子均叫无性孢子。基本特征是营养繁殖,无有性结 合过程。无性孢子多种多样,繁殖能力很强,几天一代,在病 害传播和流行中起重要作用。
真菌无性繁殖的孢子类型
1.游动孢子(Zoospore):鞭毛菌的无性孢子。单细胞,无细胞壁,只有原生质膜, 在膜是着生1-2根鞭毛,水生可游动。形成于游动孢子囊(Zoosporangium)内,在 菌丝的顶端形成的一种囊状物。
6.大多数真菌的营养体为单倍体,而卵菌的营养体为二倍体。许多锈菌和黑粉 菌营养体长时间为双核单倍体。

植物病原细菌检疫检验技术

植物病原细菌检疫检验技术
与抗体以化学方法接合,再与抗体反应,形成有荧光标记 的抗体—抗原复合物,在荧光显微镜下,可观察到黄绿色 荧光。
梨火疫病 Fire blight of pear
分布:
1878年首先由burrill描述,在纽约发生, 后由Erwin命名,是第一个被确定的植 物细菌病害。主要分布于北美洲于西 北欧,中欧、地中海、东南欧及大洋 州和亚洲也有分布。大约40多个国家。
病原菌: 学名:Erwinia amylovora(Burrill)Winslow 异名: Micrococcus amylovorus Burril Bacillus amylovorus (Burrill) Trevisan Bacterium amylovorus (Burrill) Chester
梨火疫病的地理分布
寄主: 梨火疫病菌寄主范围很广,能为害梨、苹果、山楂、木旬 子、李等40多个属220多种植物,大部分属蔷薇科
Pomoideae亚科。
危害性: 仁果类果树的一种毁灭性病害。一棵多年生的梨和苹果树 发病后可在几星期内死亡
症状:侵害花、果实、枝条和叶片。 ① 花:侵染后变深褐色,枯萎。
(2)溃疡枯萎:是指前一季越冬溃疡边缘的病菌重新 复活的结果。初症是在复活的溃疡附近的健康树皮组 织上出现窄的水渍状区,几天后,树皮内部组织出现 褐色条斑,随后病菌侵入附近繁殖枝内部并引起萎蔫 死亡。这些枝条特别是嫩枝与下面谈及的枝枯萎有明 显区别,即在萎蔫之前枝尖芽褪色(黄至桔黄色)。
(3)枝枯萎:细菌直接侵入前 1~3叶的枝尖,然后杀 死整个枝条及支持枝。初症是枝尖萎蔫,但萎蔫前不褪 色,象拐杖状。条件适宜时,几天内可移动15~30cm, 造成整枝死亡,病枝、枝皮、叶通常变黑。潮湿时,枝 条上出现菌脓。后期,终芽前出现的枝枯萎一般不会萎 蔫,且仅在枝最上部出现坏死。随着病菌不断深入,并 侵染主干,皮层收缩,下陷,形成溃疡斑。

植物检疫

植物检疫

第四章植物检疫程序现场检验:是检疫人员在现场环境中对植物、植物产品或其他限定的商品进行的直观检查,以确定是否存在有害生物和/或确认是否符合植物检疫法规要求的法定程序。

现场检查的主要方法:肉眼检查、过筛检查、X光机检查和检疫犬检查等。

实验室检测:由检验人员在实验室中借助一定的仪器设备对样品进行深入检查的植物检疫法定程序,以确认有害生物是否存在或鉴别有害生物的种类。

实验室检测常用方法:比重检测、染色检测、洗涤检测、保湿萌芽检测、分离培养与接种检测、噬菌体检测、显微镜检测、血清学检测、鉴别寄主检测、分子鉴定和计算机辅助鉴定等产地检疫:是在植物或产品出境或调运前,输出方的植物检疫人员在其生长期间到原产地进行检验、检测的过程。

预检:是在植物或植物产品入境前,输入方的植物检疫人员在植物生长期间或加工包装时到产地或加工包装场所进行检验、检测的过程。

产地检疫和预检意义①提高检疫结果的准确性;②简化现场检验的手续,加快商品流通;③避免货主的经济损失。

隔离检疫:是将拟引进的植物种子、苗木和其他繁殖材料,在植物检疫机关指定的场所内,在隔离条件下进行试种,在其生长期间进行检验和处理的检疫过程。

第七章危险性植物病原生物真菌1、小麦印度腥黑穗病菌越冬场所:病菌以冬孢子或菌瘿在土壤中、种子表面或粪肥中越冬。

传播途径:远距离传播-冬孢子随种子的调运传播。

近距离传播-病区主要靠带菌土壤传播。

粪便和秸秆也能传病;随气流传播到麦穗上进行侵染。

检测方法①直接镜检法:50克麦种加100ml水,加1滴吐温20,震荡洗涤30分钟,洗涤液通过上铺滤纸的布氏漏斗,用抽气泵抽滤,1%-3%的KOH湿润滤纸,在25-50倍解剖镜下镜检。

②氢氧化钠鉴定法:用0.2%NaOH溶液浸种24h (20℃)。

病粒发病部位乌黑发亮,健康部位灰黄色。

③洗涤检验、冬孢子形态鉴定:同小麦矮化腥黑穗病菌。

④过滤抽提---离心富集技术:分级过筛-α-淀粉酶酶解-蔗糖密度梯度离心对小麦中的孢子富集,进行检测。

植物检疫检验技术(共31张PPT)

植物检疫检验技术(共31张PPT)

病虫害识别与防治技术
7、害虫的检验方法 A、饲养检验 将样品定量后置温箱内,定温在25~26℃下饲养3~5d或更长时间,测定害 虫含量并鉴定种类。

昆 虫 培 养 箱
下 害 虫 饲 养 箱
病虫害识别与防治技术
B、塑料袋密封检验
塑料袋密封数小时后,其中的实蝇
幼虫因缺氧破果而出。
病虫害识别与防治技术
病虫害识别与防治技术
抽样方法:
根据不同有害生物的分布规律及生物学特性、货物数量、装载方式、堆放形式等而定。 常用方法有对角线取样法、棋盘式取样法和随机取样法或分层随机取样法等几种。 例如:分层随机取样法 在抽样总体中按生物个体划分为若干个层(组),对每层分别抽取一组随机样本, 然后通过加权对总体参数做出估计。
检查对象:运输、装载工具、货物及存入场所、携带邮寄物等; 检验场地:机场、码头、车站等。
病虫害识别与防治技术
现场检查方法:
(1)肉眼检查:现场快速检查。 (2)过筛检查:植物籽粒的现场检查。 (3)x 光机检查:旅客携带物的现场检查。
(4)检疫犬检查:旅客携带物的现场检查。
过筛检查
X光机检查
检疫犬检查
病虫害识别与防治技术
比重检测——比重即密度 即利用比重原理监测病粒与虫粒。
健康种子 重
沉在水底
生病种 子 轻
浮在水面
病虫害识别与防治技术
2、染色检测
高锰酸钾染色法:取样品15g,去除杂质后倒在铜丝网中,浸入30℃温水内1min,移浸于1%高锰 酸钾溶液中浸染45~60s,取出用清水漂洗掉黏附在籽粒表面的颜色,倒在白色吸水纸上,用扩大镜检查。
病虫害识别与防治技术
1、比重检测
适用范围:一般用于检验种子、粮谷、豆类中的钻蛀性害虫,也可检验其中的菌瘿、菌核和病秕籽粒及

植物检疫程序

植物检疫程序
2.2 检查货物有无水湿、霉变、腐烂、异味、杂质、虫蛀、活 虫、土壤和鼠类等,情况严重的,应对现场进行拍照或录像。
2.3 检查植物性包装材料、铺垫材料是否符合我国进境植物检 疫要求。
3 按规定抽取样品,需进行实验室检验检疫的,应填写送样 单并及时将样品连同现场发现的可疑有害生物一并送实验室 检验检疫。
四、结果评定与出证
1 检验检疫合格的 检验检疫结果符合要求的,出具《入境货物检验检疫证明》
《卫生证书》或《检验证书》。 2 检验检疫不合格的 2.1发现我国进境植物检疫危险性有害生物(一、二类)、潜在
危险生物、政府及政府主管部门间双边植物检疫协定、协议 和备忘录中订明的的有害生物、其它有检疫意义的有害生物 的,出具《检验检疫处理通知书》,报检人要求或需对外索 赔的,出具《植物检疫证书》。 2.2 安全卫生检验不合格的,出具《卫生证书》。 2.3 品质检验不合格的,出具《检验证书》。
申报要求:①必须事先向植物检疫部门提出申请;②必 须详细说明需要引进物的品名、品种、产地、引进的特殊 需要和使用方式; ③提供具有符合检疫要求的监督管理 措施。
办理进境检疫许可手续后,在有下列4种特殊情况之 一时,货主、物主或者代理人应当重新申请办理检疫许可 手续。这些特殊情况包括:变更了品种或数量;变更了输 出国家和地区;变更了进境口岸;超过了检疫许可有效期。
2.5 经审核符合出入境检验检疫报检规定的,接受报检。否则, 不予受理报检。
3 受理与时限规定
3.1 入境清关货物,应在进境前或进境时向入境口岸检验检疫 机构报检,由入境口岸检验检疫机构实施检验检疫。
入境清关货物,需调离到指运地实施检验检疫或因口岸 条件限制等原因确实无法在入境口岸完成检验检疫的货物, 入境口岸检验检疫机构可办理相关调离手续,并将货物流向 的有关信息通知指运地检验检疫机构,由指运地检验检疫机 构实施检验检疫。

实验一植物检疫性病害的症状观察及病原鉴定-更多文档分类

实验一植物检疫性病害的症状观察及病原鉴定-更多文档分类

《动植物检疫学》实验指导书罗佳、刘国坤编福建农林大学植物保护学院2010.9.实验要求一实验室制度1 提前10分钟到达实验地点,不迟到、早退,不穿拖鞋、背心上课。

2 遵守实验室管理规则,按学号顺序入座,保持课堂安静。

3 爱护公物,对标本、仪器按要求操作,不随意拆卸。

课前、课后要检查所用标本、仪器,若发现有损坏或遗失,立即报告指导教师。

损坏仪器等物品应按规章赔偿。

4 保持实验室卫生,实验材料残体、纸屑、铅笔屑应倒入垃圾桶内。

5 实验结束后,将仪器、标本擦拭干净后放回原位;值日生应清理实验桌、实验台和地板等,关好门窗,关闭水、电开关。

二课前准备1 预习:认真阅读实验内容,了解实验方法、步骤和要求。

2 用具:实验报告纸、绘图铅笔、炭素墨水钢笔、橡皮擦、小刀、尺子等。

三实验报告1 一般在课堂内完成,采用专用实验报告纸。

2 实验报告用铅笔完成。

实验报告要整洁、清晰,根据操作步骤和内容完成。

3 根据报告纸设置图画,注意大小、位置;根据观察标本设计图画比例,力求准确、美观,轮廓用线条表示,明暗处通过梅花细点表示,不要涂抹。

图中文字标注以平行虚线引出,一般放在图右侧,并注意对齐。

图下文字标注居中。

实验一植物检疫性病害的症状观察及病原鉴定(验证性实验)一、实验目的要求:通过对实验室保存的我国进境植物检疫性病、杂草、全国农业植物检疫性病原病害标本进行症状观察,掌握这些重要检测性病害的症状特点及病原种类。

并通过对实验室保存的检疫性病原玻片、新鲜病原培养物进行观察,掌握其病原物形态特征特点。

二、实验仪器与材料:实验室保存的各种类型的病害蜡叶及液浸标本,植物病原真菌重要的属的永久玻片。

多媒体幻灯片、挂图或图片等。

一些检疫性植物病原真菌的平板培养物等。

解剖针、载玻片、盖玻片、显微镜。

三、实验内容和方法:(一)植物检疫性病害症状的观察1、大豆疫病:大豆疫病可以发生在大豆生育期的各个阶段。

幼苗期:烂根、猝倒、烂苗。

在植株复叶出现以后,病菌侵染下胚轴和根部,呈水渍状褐色,根部逐渐腐烂,植株萎蔫、叶下垂,不脱落.成株期根部出现水渍状,逐渐变为褐色至黑褐色,为害茎杆时,病情较轻,病斑颜色较浅红褐色,病,严重植株矮化,叶片从下而上萎蔫,叶柄缓慢下垂,与茎杆成八字形,叶柄不会从茎杆上脱落。

植物的病毒检测技术

植物的病毒检测技术

植物的病毒检测技术植物病毒病害是一类重要病害,几乎在各类作物上都有发生,严重影响农作物的产量和质量,用一般的方法难以防治,是生产上的一大难题。

种植无病毒种子、苗木是一种非常有效的防治措施。

因而如何对种子、苗木等无性繁殖材料以及在发病早期对植株进行快速准确地检测诊断就显得尤为重要。

最初植物病毒检测主要依靠生物学性状,但生物学方法费时费力,检测周期长,而且易受环境条件的影响,反应不稳定、重复性差。

目前植物病毒检测主要是血清学检测(以病毒外壳蛋白为基础)和核酸检测,前者主要包括ELISA、快速免疫滤纸测定、免疫胶体金技术、免疫毛细管区带电泳、免疫PCR 等;后者主要有PCR、分子信标、实时RT-PCR和核酸杂交等。

1 血清学检测方法1.1 酶联免疫吸附测定(ELISA)酶联免疫吸附测定是一种采用固相(主要为聚苯乙烯酶联板) 吸附,将免疫反应和酶的高效催化反应有机结合的方法,其基本原理是以酶催化的颜色反应指示抗原抗体的结合。

该方法首先将同源特异抗体吸附在反应器皿底部,加入欲测试的含病毒的样品,病毒与抗体结合,病毒颗粒被固定,再加入标记的特异抗体和酶的底物,酶与底物反应后会出现有颜色的溶液其强度与病毒浓度成正比,用此方法可测定出病毒的浓度。

ELISA方法简单,灵敏度高,特异性强,适于大量样品的检测,目前该方法已被广泛用于植物病毒检测。

在此基础上加以改进又发展了一些新的检测方法,如A 蛋白酶联吸附(SPA-ELISA)、斑点免疫吸附(DIBA)、直接组织斑免疫测定( IDDTB) 、伏安酶联免疫分析[1]、快速ELISA 等。

1.2 快速免疫滤纸测定法(Rapid immuno-filter paper assay , RIPA) 快速免疫滤纸测定类似乳胶凝集反应,其原理是把待测病毒的抗体吸附在乳胶颗粒上,通过大颗粒乳胶间接反应小颗粒病毒的存在。

所不同的是RIPA使用了一种红色乳胶,从而使检测更加简单和直观。

森林植物检疫第5章检验

森林植物检疫第5章检验


④ ⑤

取样
应施检疫的森林植物及其产品包括: (1)林木种子、苗木和其它繁殖材料; (2)乔木、灌木、竹子等森林植物; (3)从疫情发生县运出的木材、竹材、根桩、枝条、树皮、藤条 及其制品; (4)森林植物的种子、苗木、接穗,以及用疫区木材、种子、苗 木等为原材料制成的林产品; (5)花卉植物的种子、苗木、球茎、鳞茎、鲜切花、插花; (6)中药材; (7)可能被林业检疫性有害生物污染的其它林产品、包装材料和 运输工具。
A染色检验--谷象、米象、豆象类 紫穗槐种子10 g放入铜纱网中,浸入1 %碘酒溶液中染色1-1.5 min, 取出后移入0.5 %氢氧化钾或氢氧化钠溶液中处理30 s,然后用 清水冲洗20-30 s,倒入白瓷盘用扩大镜仔细检查,凡在靠近种 托处有一个直径1-2 mm黑色圆点的种粒,即为虫蛀的种粒
B比重检验--种实含虫率较低;线虫虫瘿、菌核和杂草籽 食盐水、硝酸铵溶液 种子与溶液的容积比以1:5为宜 滞留时间:一般的1min,落叶松种子小蜂,10h C解剖检验 D软X光机检验--稀有、珍贵种苗的检验检疫 在暗室首先把放大纸或黑白文件反拍胶片按照需要的尺寸切好, 装入黑纸袋中并做好标记,再把被检的种苗样品放在黑纸袋(放 大纸或胶片的正面)上,臵于国产HY-35型或其它型号农用软X光 机载物台上,调好焦距,打开电源,调好电压、电流和曝光时间, 开机拍摄。 在暗室把放大纸或胶片取出,用显影液显影,用酸性定影液定影, 最后根据照片上的害虫影像进行识别。 种壳种仁连成一体呈白色者为健康饱满的种子; 种壳轮廓清晰,种壳内呈暗灰色者为空粒种子; 种壳轮廓清晰,种壳内暗灰色,在暗灰色的中央有一个白色幼虫 影像者为被害种子; 在种壳内暗灰色的中央有几个白色幼虫影像重叠在一起者为寄生 性天敌的幼虫。

动植物检验检疫学

动植物检验检疫学

一、名词解释1.检疫监管:检疫机关对进出境或调运的植物、植物产品的生产、加工、存放等过程实行监督管理的检疫程序。

2.检疫处理:一种采取扑杀即全部杀掉,尸体深埋或焚烧,另一种则退回。

对于动物产品也可通过物理、化学方法进行消毒处理。

3.隔离检疫:是将进出境或国内调运的有关动植物在检疫机关指定的场所内,于隔离条件下进行饲养或种植,并在其生长期内进行检验、检测和处理的一项措施。

4.检疫许可:是在输入某些检疫物时,输入单位向检疫机关提前提出申请,检疫机关审查并决定是否输入的法定程序。

5.传染源:就是受感染的动物,指体内有病原体寄居、生长、繁殖,并能排到体外的动物。

6.产地检疫:是动植物或动植物产品在国内省(地)间或省(地)内进行调运前,由检疫人员在其生长或生产期间于原产地进行检验、检测、以防止管制性动物疫病或植物有害生物在国内传播或扩散的一项措施。

7.检疫申报:是检疫物输入或输出时由货主或代理人向检疫机关及时声明并申请检疫的法定程序。

8.动物疫病:指危害或可能危害动物及动物产品的任何传染病和寄生虫病。

9.有害生物风险分析(PRA):是以生物的或者其它科学的和经济依据,确定一种有害生物是否应该限制和加强防治措施力度的评价过程。

10.限时检疫:11.植物疫区:是指在某一植物检疫性有害生物发生分布未广的情况下,对发生了这一有害生物的地区,为了防止其向未发生地区传播扩散,经省(自治区,直辖市)人民政府批准而划定,并采取封锁,消灭措施的区域。

12.植物保护区:是指在某一植物检疫性有害生物发生已较普遍的情况下,对尚无此有害生物分布的地区,为了防止其被污染或被人为传入,经省(自治区,直辖市)人民政府批准而划定,并采取保护措施的区域。

1.植物产品:是指来源于植物未经加工或者虽经加工但仍有可能传播病虫害的产品,如粮食、豆、棉花、油、麻、烟草、籽仁、干果、鲜果、蔬菜、生药材、木材、饲料等。

2.实验室检测:是指借助于实验室仪器设备对动物样品进行动物疫病检查、鉴定的法定程序。

植物检疫学植物检疫程序

植物检疫学植物检疫程序
第四章 植物检疫程序
检疫许可
掌握我国植物检疫的基本环节,正
检疫申报
现场检验 确理解检疫许可、检疫申报、现场检验、
实验室检测、检疫监管、检疫处理与出
证等检疫程序的含义和意义。了解检疫 实验室检测
许可的审批手续、检疫申报的办理手续、
现场检验的主要方法、疫情监测的主要 检疫处理与出证
手段、实验室检测的主要方法
管理机构:国家质量监督检验检疫总局所属 各口岸植物检疫机关
申报手续:报检员负责办理。
三、现场检验 On-the-sport Inspection
概念:检疫人员在现场环境中对应检物进行 检查、抽样,初步确认是否符合相关检疫要 求的法定程序。 现场检查 现场抽样
1.现场检查
主要是针对运输及运输工具、货物及存 放场所、携带物及邮寄物等应检物进行查验。 主要方法有:
六、检验检疫处理
1 对检疫不合格且有有效检疫除害处理方法 的,在检验检疫机构监督下进行检疫除害处 理。具体检疫除害处理方法详见本手册第五 章“植物检疫除害处理”。对检疫不合格且 无有效检疫除害处理方法的,作退运或销毁 处理。
2 安全卫生项目或品质检验不合格的,按有 关规定进行处理。
七、检验检疫监管
3.2 入境转关货物,除国家质检总局特殊规定和进境动植物检 疫许可证及检疫审批要求在入境口岸实施检验检疫的,应由 指运地检验检疫机构受理报检并实施检验检疫。
3.3 大宗散装货物、易腐烂变质货物、废旧物品、疫区货物由 入境口岸受理报检。
3.4 输入种子、种苗及其他繁殖材料的,应当在入境前7天报检。
二、现场检验检疫
4 样品由实验室保存。一般样品保存6个月(易腐烂的 样品除外),需对外索赔的保存到索赔期满方可处 理。

植物检疫复检流程

植物检疫复检流程

植物检疫复检流程一、什么是植物检疫复检呢?简单来说,就是对之前已经检疫过的植物或者植物产品再检查一次。

这就好比咱们人去医院复查一样,看看之前的状况有没有什么新变化。

你想啊,植物也是有生命的,在运输或者储存过程中可能会发生一些状况,所以再检查一遍就很有必要啦。

二、谁来做这个复检呢?通常是由专业的植物检疫人员来做这个工作。

这些检疫人员就像是植物的健康卫士,他们可是经过专门训练的哦。

他们熟悉各种植物可能出现的病虫害,对植物检疫的标准也了如指掌。

就像超级英雄守护城市一样,他们守护着植物的健康。

三、复检前的准备。

1. 通知相关方。

检疫人员要通知货主或者相关的责任人,告诉他们要进行复检啦。

这个通知就像是一张请柬,不过这张请柬可没有那么让人开心,但它是非常重要的。

就像你要去朋友家做客,提前打个招呼一样。

2. 收集资料。

检疫人员还得收集之前检疫的资料,看看之前有什么特殊情况没有。

这就好比侦探破案之前要收集线索一样,之前的检疫资料就是他们的重要线索。

四、复检的具体操作。

1. 外观检查。

检疫人员会先看看植物或者植物产品的外观。

他们会像挑水果一样,仔细查看植物的叶子有没有发黄、有没有斑点,枝干有没有损伤等等。

这是最直观的检查方法,如果植物看起来就病恹恹的,那肯定是有问题啦。

2. 抽样检查。

光看外观还不够,有时候还得抽样。

这抽样就像是抽奖一样,不过抽到的可不是什么奖品,而是要拿去做更深入检查的样本。

检疫人员会按照一定的规则抽取样本,然后送到实验室去做进一步的检测。

3. 实验室检测。

在实验室里,那些样本可就要接受各种高科技的检测啦。

像是检测有没有害虫的虫卵,有没有病菌之类的。

这就像是给植物做一个全身的CT扫描,把它身体里的小毛病都找出来。

五、复检后的处理。

1. 合格的情况。

如果复检后发现植物或者植物产品是合格的,那就皆大欢喜啦。

就像学生考试及格了一样,货主可以松一口气啦。

检疫人员也会给相关的证明,让这些植物或者植物产品可以继续它们的旅程,不管是去市场上销售还是种到地里。

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细菌病害
病毒病
病毒内含体形态——风轮状、不规则多边形等
检测病毒内含体 (细胞核/细胞质内)
植物染病后的生理代谢反应
植保素大量累积
病毒病染色原理 蓝 色 多酚物质 + NaOH → 蓝色
植保素之一
显色时间较短 易氧化而成红色
• 【不确定性】凡是植物发生生理损伤的情况,植 物体内均能够大量合成多酚。
B、塑料袋密封检验
塑料袋密封数 小时后,其中的 实蝇幼虫因缺氧 破果而出。
6、害虫的检验方法
C、水盆观察法
将水果或蔬菜放入一个瓷盘内,支放在盛有
清水的大瓷盆上,再用40目尼龙纱罩上。室 温下观察7-10d,实蝇幼虫会从果中弹进大盆 内。本方法主要用于新鲜成熟度不高的水果 。
7、现代生物技术检测手段
4、保湿萌芽检测:检查种子是否带菌
【方法】
• 在实验室条件下,
进行种子发芽试验
• 检测种子萌发阶段
的发病情况
多种培养方法
5、“分离培养+接种鉴定”检测
科赫氏法则 (1)在病植物上常伴随有一种病原微生物存在;
——镜检 ——分离纯化 (3)将纯培养接种到相同品种的健株上,出现症状相同的病害; ——接种 ——再次镜检鉴定
(2)该微生物可在离体的或人工培养基上分离纯化而得到纯培养;
(4)从接种发病的植物上再分离到其纯培养,性状与接种物相同。
5、“分离培养+接种鉴定”检测
科赫氏法则的应用
(1)在病植物上常伴随有一种病原微生物存在;
——镜检
(2)该微生物可在培养基上分离,并得到纯培养
——分离纯化
(3)将纯培养接种到相同品种的健株上,出现症状相同的病害;
保湿萌芽检测
1、比重检测——比重即密度
利用比重原理监测病粒与虫粒。
健康种子

生病种子

浮在水面 沉在水底
氯化钠溶液(注意浓度的选择)
适用范围 。
通常用于检查粮谷、谷类中的害虫
2、染色检测
不同种子,选择染色剂的浓度不同
虫蛀
虫蛀
虫蛀
病毒病染色——完全不同于植物病原菌物、病原细菌以及害虫
病原菌物病害
第四章
植物检疫的基本程序
植物检疫的基本环节一、检疫许可 Nhomakorabea二、检疫申报
三、现场检验
四、实验室检测 五、检疫监管
四、实验室检测
指形管
技术性
专业性
鉴定种属以下单元
常用方法
比重检测
染色检测 X光检测 洗涤检测 分离培养与接种试验 噬菌体检测
显微镜检测
血清学检测
分子生物学鉴定
计算机辅助鉴定
3、洗涤检测
【原理】利用离心力,使悬浮液或乳浊液中不同 密度、不同颗粒大小的物质分离开来
不同容积的离心管
• 检查植物材料表面附着的微生物孢子、病原线虫
病原生 物在底 部沉降
病原 生物 悬浮 液
•用无菌水反复冲洗植物材料表面,得 到病原菌物孢子悬浮液
•或直接用少量植物材料浸水,进行高
速离心分离
显微镜下,利用血球计数法测孢子数量
• 血清学检测 • PCR检测 • 计算机辅助鉴定:PCR技术和计算机技术结 合。
8、实验室的远程鉴定系统
• 利用计算机网络技术,开展远程鉴定,在无 需寄送标本情况下,充分发挥中心实验室和 国内外专家的作用。 • 2008年江苏省出入境检验检疫局实验室与南 京林业大学合作,开发了“有害生物远程鉴 定与植检实验室管理系统”,通过网络把专 家和实验室连接起来开展工作。
——接种 A B
(4)从接种发病的植物上再分离到其纯培养,性状与接种物相同。
A
B
——再次镜检鉴定
镜检
A
分离纯化
孢子
镜 检
B
A与B是同一种微生物,且
是该植物病害的致病微生物
6、害虫的检验方法
A、饲养检验 将样品定量后置
温箱内,定温在25~26℃下
饲养3~5d或更长时间,测定 害虫含量并鉴定种类。
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