植物检疫之实验室检测

——接种 A B
(4)从接种发病的植物上再分离到其纯培养，性状与接种物相同。
A
B
——再次镜检鉴定
镜检
A
分离纯化
孢子
镜 检
B
A与B是同一种微生物，且
是该植物病害的致病微生物
6、害虫的检验方法
A、饲养检验 将样品定量后置
温箱内，定温在25～26℃下
饲养3～5d或更长时间，测定 害虫含量并鉴定种类。
3、洗涤检测
【原理】利用离心力，使悬浮液或乳浊液中不同 密度、不同颗粒大小的物质分离开来
不同容积的离心管
• 检查植物材料表面附着的微生物孢子、病原线虫
病原生 物在底 部沉降
病原 生物 悬浮 液
ห้องสมุดไป่ตู้
•用无菌水反复冲洗植物材料表面，得 到病原菌物孢子悬浮液
•或直接用少量植物材料浸水，进行高
速离心分离
显微镜下，利用血球计数法测孢子数量
保湿萌芽检测
1、比重检测——比重即密度
利用比重原理监测病粒与虫粒。
健康种子
重
生病种子
轻
浮在水面 沉在水底
氯化钠溶液（注意浓度的选择）
适用范围 。
通常用于检查粮谷、谷类中的害虫
2、染色检测
不同种子，选择染色剂的浓度不同
虫蛀
虫蛀
虫蛀
病毒病染色——完全不同于植物病原菌物、病原细菌以及害虫
病原菌物病害
4、保湿萌芽检测：检查种子是否带菌
【方法】
• 在实验室条件下，
进行种子发芽试验
• 检测种子萌发阶段
的发病情况
多种培养方法
5、“分离培养+接种鉴定”检测
科赫氏法则 (1)在病植物上常伴随有一种病原微生物存在；
——镜检 ——分离纯化 (3)将纯培养接种到相同品种的健株上，出现症状相同的病害； ——接种 ——再次镜检鉴定
• 血清学检测 • PCR检测 • 计算机辅助鉴定：PCR技术和计算机技术结 合。
8、实验室的远程鉴定系统
• 利用计算机网络技术，开展远程鉴定，在无 需寄送标本情况下，充分发挥中心实验室和 国内外专家的作用。 • 2008年江苏省出入境检验检疫局实验室与南 京林业大学合作，开发了“有害生物远程鉴 定与植检实验室管理系统”，通过网络把专 家和实验室连接起来开展工作。
(2)该微生物可在离体的或人工培养基上分离纯化而得到纯培养；
(4)从接种发病的植物上再分离到其纯培养，性状与接种物相同。
5、“分离培养+接种鉴定”检测
科赫氏法则的应用
(1)在病植物上常伴随有一种病原微生物存在；
——镜检
(2)该微生物可在培养基上分离，并得到纯培养
——分离纯化
(3)将纯培养接种到相同品种的健株上，出现症状相同的病害；
第四章
植物检疫的基本程序
植物检疫的基本环节
一、检疫许可
二、检疫申报
三、现场检验
四、实验室检测 五、检疫监管
四、实验室检测
指形管
技术性
专业性
鉴定种属以下单元
常用方法
比重检测
染色检测 X光检测 洗涤检测 分离培养与接种试验 噬菌体检测
显微镜检测
血清学检测
分子生物学鉴定
计算机辅助鉴定
B、塑料袋密封检验
塑料袋密封数 小时后，其中的 实蝇幼虫因缺氧 破果而出。
6、害虫的检验方法
C、水盆观察法
将水果或蔬菜放入一个瓷盘内，支放在盛有
清水的大瓷盆上，再用40目尼龙纱罩上。室 温下观察7-10d，实蝇幼虫会从果中弹进大盆 内。本方法主要用于新鲜成熟度不高的水果 。
7、现代生物技术检测手段
细菌病害
病毒病
病毒内含体形态——风轮状、不规则多边形等
检测病毒内含体 （细胞核/细胞质内）
植物染病后的生理代谢反应
植保素大量累积
病毒病染色原理 蓝 色 多酚物质 + NaOH → 蓝色
植保素之一
显色时间较短 易氧化而成红色
• 【不确定性】凡是植物发生生理损伤的情况，植 物体内均能够大量合成多酚。