分光光度计培训课件

分类-按波长
1、可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区； 2、紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区； 3、红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区； 4、荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光 谱； 5、原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经 过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定 特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
722型分光光度计的使用操作方法
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值 （吸光度值尽可能在0.2-0.8之间）。
7、浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度 的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测 样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
分光光度计的主要部件
1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度。 a 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) b 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)
2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 3、棱镜:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm。 4、光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便。
8、关机 比色完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比 色皿座架用用软布或软纸擦净。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。
3、不能碰 比色皿的光学表面。
4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
注意事项
5、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原 理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器 的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节 旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。
722型分光光度计的使用操作方法
5、调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比 色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻 轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
6、吸光度的测定 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处， 用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，将选择开关置于“A”，盖上 试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字 显示为“0.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的 其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入 光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开 试样室盖，切断光路。
2、选定波长 转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 3、固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情 况下，尽可能采用灵敏度较低的档，使用时，首先调到“1”挡， 灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%” 和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 4、调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”， （此时试样室是打开的）。
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 a 可见光区：光学玻璃池 b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。 光电池，光电管，光电倍增管
7、指示器： a 低档仪器：刻度显示 b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
722型分光光度计的使用操作方法
1、预热仪器 打开电源开关，使仪器预热30分钟（为了防止 光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室 盖打开，使光路切断）。
分光光度计
2016年2月18日
目录
A
简介
B
722分光光度计
C
仪器故障及解决
D
拓展
简介
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长 范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下， 产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的， 各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光 通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度 和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比 耳定律。
722分光光度计
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定 量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。
工作环境
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。 3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
6、长期不用时，需用将仪器使用防护罩罩住。
维护方法
1、若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新 校正“0”和“100%”点，然后再测量。
2、比色杯的配套性问题。比色杯必须配套使用，否则将使测试 结果失去意义。在进行每次测试前均应进行比较（具体方法如下； 分别向被测的两只杯子里注入同样的溶液，把仪器置于某一波长处 （石英比色杯：220nm、700nm装蒸馏水，玻璃比色杯：700nm处装 蒸馏水），将某一个池的透射比值调至100%，测量其他各池的透射 比值，记录其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范围 内则可以配套使用，若超出此范围应考虑其对测试结果的影响）。