(5年高考3年模拟A版)浙江省202x年高考生物总复习 专题31 克隆技术
高考浙科版生物一轮复习课件第34讲 克隆技术
种到若干份培养基中,使其继续生长、
增殖。 4.细胞系和细胞株 (1)细胞系:指可连续传代的细胞。原 首次传代 代培养物在________________ 时就成为
细胞系。
原代培养物或细胞系 (2)细胞株:从_____________________ 中获得的具有特殊性质的细胞,一般具 同功酶类型 、 有恒定的染色体组型、____________ 生化特性 病毒敏感性和_____________ 等。 5.克隆培养法 (1)概念:把一个单细胞从群体中分离 出来单独培养,使之繁衍成一个 新的细胞群体 __________________ 的技术。
或胚状体结构,该过程需要光。
(3)胚状体继续分裂分化成完整植株,
该过程需要光。
(4)生长素和细胞分裂素比例不同,影
响结果不同。
即时应用
1.下列对于细胞全能性的理解,错误
的是(
)
A.花粉可培育成单倍体,是细胞全能
性的体现
B.动物体细胞不表现全能性,其原因
是受到细胞内物质的限制
C.当植物细胞脱离原来的植物体而处
于离体状态时,就可表现出全能性
D.不同种类植物细胞全能性的表达程
度不同 解析:选C。当植物细胞脱离原来的植 物体而处于离体状态时,需要施加一定 的条件,如营养、激素、温度等才能表
现出全能性。
2.下列有关植物克隆的叙述中,正确
的是( 愈伤组织 B.植物细胞经多次传代培养后全能性 的表达程度不变 C.同一植物个体所有具细胞核的活细 )
受精卵 具有全能性 __________
(2)动物难以克隆的根本原因
在动物的个体发育过程中,细胞分化使
得细胞发生了________________ 基因的差异表达 ,细胞
2020年高考浙江版高考生物 专题31 克隆技术
专题31 克隆技术挖命题【考情探究】分析解读本专题包括动、植物克隆的相关知识,为选考加试部分考查内容。
预计今后考查形式仍以非选择题为主,重点考查植物克隆的方法和应用。
复习时注意比较动、植物克隆的基本原理和方法,理解单克隆抗体的制备原理和方法。
【真题典例】破考点考点一植物的克隆【考点集训】考向植物的克隆【加试题】[2017浙江台州选考质检,32(二),8分]某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂(Bar)基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。
请回答下列相关问题:(1)对于已获得的Bar基因可以用技术进行扩增。
图中的a过程通常使用相同的酶和DNA连接酶,使目的基因与载体连接形成重组DNA分子。
(2)在b过程中,获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶外,还需要用到的试剂是。
(3)成功导入重组DNA的原生质体经脱分化形成Ⅰ,进而生长发育成植株。
下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征的是。
A.薄壁细胞B.细胞质丰富C.液泡小D.细胞核小(4)若要判断转基因抗除草剂大豆是否培育成功,比较简便的检测方法是。
答案(1)PCR 限制性核酸内切(2)(较高浓度的)甘露醇(3)愈伤组织 D (4)用一定浓度的除草剂喷洒,观察转基因大豆的生长情况考点二动物的克隆【考点集训】【加试题】[2019届浙江绍兴9月联考,32(二),7分]回答与动物克隆有关的问题:(1)广义的动物组织培养包括和器官培养,器官培养是指、器官的一部分或整个器官在体外和人工控制的条件下得以保存、生长。
(2)细胞融合是细胞工程的主要技术手段之一,其中电融合技术的原理是在低压交流电场中;而细胞杂交是的细胞间的融合。
(3)单克隆抗体的制备中,往往在经过免疫的动物的(器官)中获得能产生抗体的效应B细胞,经融合和筛选再培养,筛选的目标是。
(4)若想通过基因工程制备大量的单一抗体,下列方法可行的是( )A.将抗体基因直接导入小鼠骨髓瘤细胞B.将含有抗体基因的重组DNA分子导入小鼠骨髓瘤细胞C.将含有抗体基因的重组DNA分子导入人的浆细胞D.将含有调控抗体产生基因的重组DNA分子导入人的浆细胞答案(1)细胞培养、组织培养器官的原基(2)击穿质膜脂双层,导致细胞质融通不同基因型(3)脾脏既能产生特异抗体又能无限增殖的细胞(4)B炼技法方法单克隆抗体的制备【方法集训】【加试题】(2017浙江台州2月模拟,32)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。
5年高考3年模拟A版浙江省2020年高考生物总复习专题31克隆技术教师用书
【方法集训】 【加试题】(2017 浙江台州 2 月模拟,32)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。
(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时,利用一定的物质,如生物诱导剂—— 介
导,使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选出融合的细胞再进行细胞的 培
考点二 动物的克隆 【考点集训】
【加试题】[2019 届浙江绍兴 9 月联考,32(二),7 分]回答与动物克隆有关的问题: (1)广义的动物组织培养包括 和器官培养,器官培养是指 、 器官的一部分或整个器官在体外和人工控制的条件下得以保存、生长。 (2)细胞融合是细胞工程的主要技术手段之一,其中电融合技术的原理是在低压交流电场中 ;而细胞杂交是 的细胞间的融合。 (3)单克隆抗体的制备中,往往在经过免疫的动物的 (器官)中获得能产生抗体的效 应 B 细胞,经融合和筛选再培养,筛选的目标 是 。 (4)若想通过基因工程制备大量的单一抗体,下列方法可行的是 ( ) A.将抗体基因直接导入小鼠骨髓瘤细胞 B.将含有抗体基因的重组 DNA 分子导入小鼠骨髓瘤细胞 C.将含有抗体基因的重组 DNA 分子导入人的浆细胞 D.将含有调控抗体产生基因的重组 DNA 分子导入人的浆细胞 答案 (1)细胞培养、组织培养 器官的原基 (2)击穿质膜脂双层,导致细胞质融通 不同基因型 (3)脾脏 既能产生特异抗体又能无限增殖的细胞 (4)B
研究。请回答:
(1)原生质体的分离:在无菌条件下,取烟草无菌苗的叶片,放入含有 0.5 mol/L 甘露醇(维持
较高渗透压)的
。
混合液处理,进行培养,重新长出细胞壁,形成胚性细胞。此时,应该 培养基中甘露醇的浓度,以利于胚性细胞继续培养形成细胞团,然后经两条途径形成再生植 株。途径一:细胞团经球形胚、 和胚状体,最后发育成植株。途径二:细胞团增殖为愈伤组织,然后在发芽培养基 上诱导出芽,再经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是 ,胚 性细胞的主要特点是: 。(A.液泡小、细胞核小 B.液泡大、细胞核大 C.液泡大、 细胞核小 D.液泡小、细胞核大) (3)为了对烟草的某些性状进行改良,分离得到两种烟草的原生质体后,通过 方 法将它们的遗传物质组合在一起,经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的 DNA, 采用 扩增相关基因,来鉴定遗传物质是否成功重组。 答案 (1)果胶酶和纤维素酶 (2)降低 心形胚 细胞分裂素 D (3)原生质体融合 PCR 3.(2015 浙江自选,18,10 分)下面是关于植物克隆和生态工程的问题。请回答: (1)为培育能高效吸收和富集重金属镉的转基因植物,将野外采得的某植物幼叶消毒后,用酶 混合液处理,获得了原生质体。酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇,其作用是 ① 。 (2)将目的基因导入原生质体,经培养形成愈伤组织,再通过② 得到分散的胚 性细胞,发育成③ ,生长发育后获得转基因植株。 (3)愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力,下列原因错误的是④ 。 A.愈伤组织发生遗传变异 B.愈伤组织不能分散成单细胞 C.愈伤组织中激素平衡发生改变 D.愈伤组织对外源激素敏感性发生改变 (4)某农业生态工程基地按照生态和⑤ 规律,对种植业和养殖业进行了优化设计。通 过套种、间种和⑥ 等技术的应用,使种植的农作物为该生态系统组成成分中的⑦ 提供更多的食物。在农业生产中尽量不施用农药,其目的是⑧ 。 A.减少水土流失 B.减少土壤肥力 C.减少环境污染 D.减少生物多样性 答案 (1)①维持渗透压 (2)②液体悬浮培养 ③胚状体 (3)④B (4)⑤经济 ⑥轮种 ⑦消费者 ⑧C 考点二 动物的克隆 1.(2014 浙江理综,3,6 分)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( ) A.连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型 B.某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞 C.由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆 D.未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状
高三生物 IA3.2.3 动物的克隆复习课件 浙科版(浙江专用)
【规律方法】动物的克隆繁殖需要动物克隆技术和胚胎工 程多项技术支持。克隆动物的性状表现由早期胚胎的形成决 定,若早期胚胎是经核移植技术形成的重组细胞发育来的, 那么克隆动物性状与供体性状相似。
1.(2011·天台模拟)下列有关动物细胞克隆培养法的叙述中, 错误的是( ) A.细胞克隆培养的最基本要求是建成的细胞克隆系来源于单 个细胞 B.提高动物细胞克隆成功率需要以滋养细胞支持生长及激素 刺激等条件 C.原代培养细胞、有限细胞系比无限细胞系、肿瘤细胞更容 易克隆 D.经克隆培养形成的细胞系称为纯系 【解析】选C。理论上各种培养细胞都可以被克隆,但原代 培养细胞、有限细胞系克隆时有实际困难,无限细胞系、肿 瘤细胞反而更容易克隆。
2.(2011·台州模拟)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的 是( ) A.动物细胞培养的目的是获得大量的分泌蛋白 B.通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系,证明了动物细 胞也具有全能性 C.动物细胞培养一般不需要脱分化过程 D.胚胎干细胞培养时,加饲养层细胞是为了促进干细胞分 化
【解析】选C。动物细胞培养的目的是产生大量细胞,不是 为了获得大量分泌蛋白。通过动物细胞培养获得细胞株或细 胞系只能证明细胞的分裂,不能证明细胞的全能性。胚胎干 细胞培养时,加饲养层细胞是为了促进细胞生长而不分化。 动物细胞培养一般不需要脱分化过程。
()
A.容易产生各种变异
B.具有强的全能性
C.分裂增殖的能力强
D.取材十分方便
【解析】选C。幼龄动物的器官或组织细胞分裂增殖的能力
强,便于细胞培养。
4.下列为有关动物细胞培养的叙述,其中错误的是( ) A.是动物细胞工程的基础技术 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个 细胞 C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱 离,制成悬浮液 D.动物细胞培养都只能传50代左右,所培养的细胞就会衰 老死亡
浙江专用2020版高考生物大一轮复习第十一部分现代生物科技专题36克隆技术名师课件
-23-
教材梳理 题型探究 真题演练
(2018 浙江 4月选考 ,32节选 )回答与基因工程和植物克隆有关的问
题。
(1)将含某抗虫基因的载体和含卡那霉素抗性基因的载体 pBI121 均用限制性核酸内切酶 EcoRⅠ酶切,在切口处形
成
。选取含抗虫基因的 DNA片段与切割后的
pBI121用DNA连接酶连接 ,在两个片段相邻处形
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教材梳理 题型探究 真题演练
答案:(1)Ti质粒(甲) 抗虫基因 限制性核酸内切酶和 DNA连接 酶 (2)A (3)全能性 脱分化 芽和根 (4)B
解析:(1)图示为转基因植物的培育过程 ,在图示中 ,基因工程的载 体是农杆菌的 Ti质粒,目的基因是抗虫基因。甲到乙表示形成重组 DNA分子的过程 ,需要用到限制性核酸内切酶和 DNA连接酶。 (2) 基因工程的核心是构建重组 DNA分子,分析图示 ,乙表示重组 DNA 分子的构建。 (3)丁到戊表示植物细胞发育成完整植株的过程 ,体现 了植物细胞具有全能性。由植物细胞发育成完整植株 ,一般会经历 脱分化形成愈伤组织 ,然后愈伤组织再分化形成芽和根 ,最终发育 成植株的过程。 (4)愈伤组织细胞具有细胞核大 ,营养物质丰富 ,液 泡小等特征 ,并保留发育成胚状体的能力。
答案:(1)粘性末端 磷酸二酯键 (2)转化 使CaCl2处理过的农 杆菌恢复细胞的正常状态 (3)消毒 脱分化 水稻的基因型、愈
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(2)将原生质体制成悬浮液培养分散的单细胞 ,这种单细胞具有
细胞的特性 ,在适宜的培养基中 ,可以发育成
,继续培
养发育可以形成植株。
(3)若要用显微镜观察并计数悬浮液培养分散的单细胞 ,则需要把
悬浮液滴加在
浙江省高考生物总复习专题31克隆技术课件
亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤” 的细胞群
细胞)才能生长
得到杂交瘤细胞
得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
2.原代培养和传代培养
表述方法
原代培养
①细胞悬浮液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养 ②第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养
传代培养
①细胞悬浮液培养一段时间后,分瓶再进行的细胞培养 ②传10代以后的细胞培养,统称为传代培养
3.细胞系和细胞株
种类
来源
特点
有限细胞系 由二倍体细胞传代培养建成 有接触抑制;不能连续培养
5.植物细胞培养、器官培养和原生质体培养的关系
【知能拓展】 植物细胞培养、器官培养和原生质体培养统称为植物 的组织培养,都有脱分化和再分化过程,最终都能得到完整的植株,但由 于培养的目的不同,有时需要对愈伤组织进行特殊处理,以达到目的。
考点二 动物的克隆
考点清单
基础知识 一、动物细胞培养 从动物体中取出相关的组织,将其分散成① 单个 的细胞,然后在人 工控制的培养条件下,使这些细胞得以生存,并保持生长、分裂(繁殖)乃 至② 接触抑制 和有规律的③ 衰老、死亡 等生命活动现象。 二、动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。动物组织培 养过程中可以伴随④ 组织分化 。
方法技巧
单克隆抗体的制备 (1)原理:一个(或一种)浆细胞(效应B细胞、B淋巴细胞)只产生一种抗 体,小鼠骨髓瘤细胞能够无限增殖。因此杂交瘤细胞就具备了既能无限 增殖,又能大量产生单一抗体的特征。 (2)过程:
(3)培养方法:体内培养和体外培养。 (4)单克隆抗体的主要优点:特异性强,灵敏度高,可大量制备。 (5)关键点分析: ①细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核。 ②杂交瘤细胞特性:既能无限增殖,又能产生大量特异抗体。 ③获取单克隆抗体的场所:若在培养基中进行杂交瘤细胞培养,则从培 养液中提取;若在小鼠或其他动物腹腔中培养,则从腹水中提取。
高三生物(浙江选考)复习选考加试部分克隆技术
第35讲克隆技术浙江[学考+选考]考纲确认考点知识内容加试二、克隆技术5.植物的克隆b 6。
动物的克隆a考点一| 植物的克隆技术1.植物细胞的全能性和组织培养方法(1)植物组织培养的原理:植物细胞具有全能性,即植物体的每个生活细胞都具有发育成完整植株的潜能。
(2)植物组织培养程序:配制培养基:配制含有适当营养物质和植物生长调节剂↓的半固体培养基.↓切取外植体:从消毒的根、茎、叶上切取一些小组织块。
↓获得愈伤组织:将组织块置于半固体培养基中培养,切口处细胞在创伤的刺激下发生脱分化,在创口表面形成一种由相对未分化的薄壁细胞团组成的新组织。
↓再生新植株:以适当配比的营养物质和植物生长调节剂诱导愈伤组织,直到再生出新植株.将含有愈伤组织的试管放在摇床上,通过液体悬浮培养,可以分散成单细胞(胚性细胞:细胞质丰富、液泡小、核大),这种单细胞可发育成胚状体,再继续发育可以形成植株。
2.植物细胞的全能性体现(1)相对于动物细胞,植物细胞的全能性更容易(填“难”或“容易")体现。
(2)不同种类的植物或同种植物的不同基因型个体的细胞全能性表达程度不同。
(3)在长期培养中,培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的可能原因:染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生;细胞或组织中的激素平衡被打破;细胞对外源生长物质的敏感性发生改变等.3.细胞培养和器官培养器官发生和形态建成主要是通过平衡植物激素配比进行调控:适量的生长素和细胞分裂素配比,可诱导芽的分化;适量的吲哚乙酸及适当减除某些其他激素,可诱导生根。
4.原生质体培养和植物细胞工程(1)原生质体的培养①制备原生质体的原因:植物细胞壁的存在,使植物组织培养与克隆有一定难度。
②制备原生质体的方法:在0。
5~0。
6 mol/L的甘露醇溶液环境下,用纤维素酶和果胶酶混合液处理。
(2)植物细胞工程:1.植物组织培养关键过程总结名称过程形成体特点培养基光脱分由外植体脱分排列疏松、高生长素与细胞避光(1)取材:含形成层(分生组织)的部分易于诱导形成愈伤组织。
克隆技术——2020年浙江高中生物选考各地模拟试题分类汇编
克隆技术——2020年浙江高中生物选考各地模拟试题分类汇编选择题1.(2020.02《名校联盟新高考创新卷》一;11)将植物细胞去壁后制成原生质体,下列说法错误的是A.细胞可能更易被克隆B.更有利于导入外源基因C.细胞间融合更易发生 D.更有利于细胞渗透失水2.(2020.02《名校联盟新高考创新卷》三;20)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是A.胰蛋白酶能消化细胞中的胶原纤维和其他成分,获得单细胞悬液B.动物细胞只能贴壁生长,不能进行悬浮培养C.细胞进行一次传代培养所需时间等于一个细胞周期的时间D.能连续传代的细胞通常具有异倍体核型,其贴壁性下降4.(2020.03全能生C卷;21)下列关于植物的克隆技术的叙述,错误的是A.高度成熟和分化的植物细胞,仍保持了恢复到分生状态的能力B.由于遗传性的差异,不同种类植物细胞全能性的表达程度不相同C.适当配比的营养物质和生长调节剂可诱导愈伤组织的形成D.二倍体植物的花粉培养得到单倍体的过程属于器官培养6.(2020.04平湖中学;13)杂交瘤技术解决了抗血清的异质性问题,下列叙述错误的是A.用体细胞培养的方法可以筛除掉其中的一些杂交细胞B.两次及两次以上的抗体检测,有利于更好的得到单克隆细胞C.获得单克隆抗体必须将单克隆阳性杂交瘤细胞注射到小鼠体内D.可以用仙台病毒介导,将免疫过的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合7.(2020.04台州一模;17)下列有关现代生物科技专题的叙述正确的有几项①基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因②肝细胞在培养过程中,通常在培养液中加入5%的CO2以刺激细胞呼吸③单克隆抗体的制备过程体现了动物细胞的全能性④大量研究已经证明,受休对移入子富的外来胚胎基本上不发生免疫排斥,这就为胚胎在受体内存活提供了可能⑤胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移⑥限制性内切酶、DNA连接酶只存在于原核生物中A.一项B.两项C.三项D.四项12.(2020.06温州三模;19)下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是A.饲养层细胞由射线照射处死的成纤维细胞组成B.可用特定的选择或纯化方法从细胞系中获取细胞株C.利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,需要选择培养基D.“多莉”的克隆过程中,通过调节培养基中牛血清浓度实现营养限制性培养13.(2020.06东阳模拟;22)下列关于单克隆抗体制备的说法,正确的是A.将特定抗原注射到小鼠体内,可以从小鼠血清中获得单克隆抗体B.培养杂交瘤细胞必需提供动物血清C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,发生融合的细胞均为杂交瘤细胞D.第二次筛选杂交瘤细胞是为了筛选出能产生特定抗体且遗传稳定的杂交瘤细胞14.(2020.06诸暨市;17)人绒毛膜性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断,下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,有关叙述正确的是A.①过程可采用在高压交流电场中击穿质膜脂双层,使胞质融通的技术实现细胞融合B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体C.③过程利用的原理是抗原和抗体的特异性结合D.④过程需要添加抗生素等物质防止病毒污染15.(2020.06精诚联盟;18)利用杂交瘤技术可以制备单克隆抗体。
推荐-5年高考3年模拟A版浙江省2020年高考生物总复习专题31克隆技术教师用书
专题克隆技术挖命题【考情探究】考点内容要求年考情预测热度考题示例素养要素难度一、植物的克隆植物的克隆浙江月选考(二)分科学思维科学探究难★★★★☆二、动物的克隆动物的克隆浙江理综分科学思维中★★★★☆分析解读本专题包括动、植物克隆的相关知识,为选考加试部分考查内容。
预计今后考查形式仍以非选择题为主,重点考查植物克隆的方法和应用。
复习时注意比较动、植物克隆的基本原理和方法,理解单克隆抗体的制备原理和方法。
【真题典例】破考点考点一植物的克隆【考点集训】考向植物的克隆【加试题】[浙江台州选考质检(二)分]某科研团队利用植物细胞工程技术,把基因序列已知的抗除草剂()基因导入原生质体获得抗除草剂大豆。
请回答下列相关问题:()对于已获得的基因可以用技术进行扩增。
图中的过程通常使用相同的酶和连接酶,使目的基因与载体连接形成重组分子。
()在过程中,获得原生质体除了需要纤维素酶和果胶酶外,还需要用到的试剂是。
()成功导入重组的原生质体经脱分化形成Ⅰ,进而生长发育成植株。
下列不属于Ⅰ细胞应具有的特征的是。
.薄壁细胞.细胞质丰富.液泡小.细胞核小()若要判断转基因抗除草剂大豆是否培育成功,比较简便的检测方法是。
答案() 限制性核酸内切()(较高浓度的)甘露醇()愈伤组织()用一定浓度的除草剂喷洒,观察转基因大豆的生长情况考点二动物的克隆【考点集训】【加试题】[届浙江绍兴月联考(二)分]回答与动物克隆有关的问题:()广义的动物组织培养包括和器官培养,器官培养是指、器官的一部分或整个器官在体外和人工控制的条件下得以保存、生长。
()细胞融合是细胞工程的主要技术手段之一,其中电融合技术的原理是在低压交流电场中;而细胞杂交是的细胞间的融合。
()单克隆抗体的制备中,往往在经过免疫的动物的(器官)中获得能产生抗体的效应细胞,经融合和筛选再培养,筛选的目标是。
()若想通过基因工程制备大量的单一抗体,下列方法可行的是( ).将抗体基因直接导入小鼠骨髓瘤细胞.将含有抗体基因的重组分子导入小鼠骨髓瘤细胞.将含有抗体基因的重组分子导入人的浆细胞.将含有调控抗体产生基因的重组分子导入人的浆细胞答案()细胞培养、组织培养器官的原基()击穿质膜脂双层,导致细胞质融通不同基因型()脾脏既能产生特异抗体又能无限增殖的细胞()炼技法方法单克隆抗体的制备【方法集训】【加试题】(浙江台州月模拟)请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。
高考生物一轮复习 32克隆技术试题 浙科版选修3
第2讲克隆技术(时间:45分钟)A组基础演练1.(2013·浙江余杭一次诊断)对细胞全能性的表述正确的是( )。
A.没有离体的植物细胞也能表现出全能性B.动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现C.单克隆抗体的制备原理是依据细胞的全能性D.花粉可培育成单倍体是细胞全能性的体现解析只有离体的植物细胞才能表现出全能性,A错误;细胞全能性是指一个细胞形成一个生物个体,动物细胞融合仅仅是两个细胞融合成一个细胞,并未形成一个个体,B 错误;单克隆抗体的制备原理是细胞分裂(细胞培养)和膜的流动性(动物细胞融合),C 错误。
答案 D2.无论是植物细胞,还是动物细胞,都可以利用一定的方法诱导融合,可用模型图表示细胞融合技术的一些过程,有关叙述错误的是( )。
A.若该过程表示植物原生质体的融合,则甲、乙细胞可用酶解法获取B.若该过程表示体外受精,则甲、乙细胞都需要经过准备阶段C.若该过程表示制备单克隆抗体,则丙细胞是杂交瘤细胞D.以上三个过程可以用同一种诱导剂诱导融合解析若图示过程表示植物原生质体的融合,在形成甲、乙细胞之前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,可用聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合;若图示过程表示体外受精,则甲、乙细胞应代表精子与卵细胞,其中精子需要获能处理,卵细胞需要培养成熟,两者可在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精;若图示过程表示单克隆抗体的制备,则丙细胞是B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞,可用聚乙二醇(PEG)或灭活的病毒诱导细胞融合;可见,以上三个过程不能用同一种诱导剂诱导融合。
答案 D3.(2013·全国重点中学冲刺卷)下列有关动植物细胞工程的叙述,不正确的是( )。
A.动物细胞融合过程中,常用的诱导因素有灭活的病毒、PEG等B.动物细胞培养过程中,常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织块C.植物组织培养过程中,需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁D.植物体细胞杂交过程中,需要用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种细胞解析植物组织培养时不需要去掉细胞壁,植物体细胞杂交才需要先去掉细胞壁。
(5年高考3年模拟A版)浙江省高考生物总复习专题30基因工程教师用书
专题30 基因工程挖命题【考情探究】考点内容要求5年考情预测热度考题示例素养要素难度基因工程工具酶的发现和基因工程的诞生a2016浙江4月选考,32(二),7分科学思维科学探究难★★★☆☆基因工程的原理和技术b ★★★★☆基因工程的应用 a ★★★★☆活动:提出生活中的疑难问题,设计用基因工程技术解决的方案c ★★★★☆分析解读本专题包含了基因工程的原理、操作流程及应用等知识点,为选考加试部分内容,预计今后考查仍以非选择题形式为主,多以具体的案例为背景,或结合植物克隆加以考查。
复习时要重点掌握基因工程的基本原理和操作流程,能灵活应用基因工程技术解决实际问题。
【真题典例】破考点考点基因工程【考点集训】考向基因工程的原理及应用1.(2018北京理综,5,6分)用Xho Ⅰ和Sal Ⅰ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。
以下叙述不正确...的是( )图1 酶切位点图图2 电泳结果示意图A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图2中酶切产物可用于构建重组DNAC.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA答案 D2.【加试题】[2017浙江杭州重点中学期中,32(二),6分]人血清蛋白(HSA)具有重要的医用价值。
如图是用基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。
(1)如果HSA基因序列未知,可以采用的方法获取该目的基因,为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存,通常要先构建后才能导入宿主细胞。
(2)方框中的“?”一般选用的生物是,为了提高Ⅱ过程的导入成功率,通常用处理大肠杆菌。
(3)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性,所以,选择途径(填“Ⅰ”或“Ⅱ”)获取rHSA更有优势。
(4)为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA,可以用方法来进行检验。
A.检验HSA基因是否导入B.检验细胞中是否产生相应的mRNAC.抗原—抗体杂交D.检测是否有标记基因答案(1)从基因文库中提取重组DNA分子(2)农杆菌氯化钙(3)Ⅰ(4)C炼技法方法限制性核酸内切酶的选择【方法集训】图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
高考生物一轮复习 第二章 克隆技术课件 浙科版选修3
2.克隆的发展
遗传工程克隆(基因克隆)→遗传工程克隆(基因克隆)→个
体水平上的克隆(克隆羊多莉)
3.克隆的条件 (1)具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞(胚胎细胞、 乳腺上皮细胞) (2)能有效调控细胞核发育的细胞质物质(如去核卵的细胞质)
(3)完成胚胎发育的必要的环境条件。
【拓展延伸】
1.有性繁殖和无性繁殖(克隆)的区别:是否经异两性生殖细 胞的结合。 2.个体克隆成功的根本原因:细胞(尤其是细胞核)含全套遗 传物质,具有发育成完整个体的潜能。 3.克隆产生的子代个体与亲代个体基因相同,但不是完全相 同,原因:①细胞质中遗传物质不同;②发育过程可能发
2.(2010· 宁波模拟)一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核
置换后,这个卵细胞经过多次分裂,再植入第三只羊的子
宫内发育,结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用 途,但是不能 A.有选择地繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优秀个体 C.用于保存物种 D.改变动物的基因型 ( )
解析:本题侧重考查生物发育和遗传的关系。生物的遗传主
生突变;③后天环境条件的影响。
即时突破
1.(2010· 杭州模拟)下图是某克隆羊的培育过程模式图,则 与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌 的主要性激素分别是 ( )
A.无性生殖;雄性激素
C.有性生殖;雄性激素
B.无性生殖;雌性激素
D.有性生殖;雌性激素
解析:性染色体在细胞核中,克隆羊的性染色体为 XY, 为雄性。 答案:A
②愈伤组织需通过液体悬浮培养分散成单细胞后在适宜培养基中
培养成植株。
特别提醒
①植物细胞全能性表达的条件 a.离体、无菌。 b.一定的营养物质;水、无机盐、蔗糖、维生素等。 c.植物生长调节剂:激动素和细胞分裂素、吲哚乙酸。 ②植物细胞的全能性大小比较 受精卵>生殖细胞>体细胞 ③生物体细胞不能表达全能性的原因:生物体细胞内基因的选择性 表达。
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(2)动物的克隆繁殖
重难突破 一、动物的克隆 1.动物细胞培养 (1)过程
【知能拓展】 ①动物细胞培养中的取材很重要,大部分取自动物胚胎或出 生不久的幼龄动物的器官或组织,这是因为这些组织或器官的细胞生命力旺 盛,分裂能力强。②动物细胞培养中胰蛋白酶可消化组织中的胶原纤维和细 胞外的其他成分,获得细胞悬浮液。培养前要将组织细胞分散成单个细胞的 原因:成块组织不利于培养,其中的细胞不能与培养液充分接触,而且动物细 胞具有接触抑制的特性,分散成单个细胞有利于培养。③原代培养的细胞因 代谢消耗和接触抑制现象,培养到一定时期必须进行传代培养。
高考生物(浙江专用)
专题31 克隆技术
考点一 植物的克隆
基础知识
考点清单
1.原理:植物细胞的全能性即植物体的每个生活细胞都具有① 遗传上 的全能性 ,因而都具有发育成完整植株的潜能。 2.技术基础:
3.原生质体培养:植物细胞 ③ 原生质体 新植株
4.植物细胞工程:外源遗传物质 ④ 受体细胞 的新植株
2.基本要求:必须肯定所建成的克隆来源于 3.提高细胞克隆形成率的措施
单个细胞 。
六、动物细胞融合技术及应用 1.原理:细胞膜的 流动性 。 2.方法:物理法(电激)、化学法和
生物法 (灭活病毒)。
3.应用:制备单克隆抗体,过程如下: 4.单克隆抗体的特点: 特异性强 ,灵敏度高,并可大量制备。
二、植物组织培养和植物细胞工程 1.植物组织培养程序
2.植物细胞工程的操作过程
3.植物组织培养关键过程总结
名称
过程
形成体特点
光
脱分化
排列疏松、高度液泡化的薄壁
由外植体脱分化为愈伤组织
避光
细胞团
再分化
由愈伤组织分化为幼苗或胚 有根、芽或有生根发芽的能力 需光
状结构
营养生长和 发育成完整的植物体
生殖生长
三、原代培养和传代培养 1.原代培养:从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。 2.传代培养:将⑤ 原代 培养的细胞分成若干份,接种到若干份培养基 中,使其继续生长、增殖。 四、细胞系和细胞株 1.细胞系:原代培养物在⑥ 首次传代 时就成为细胞系。 2.细胞株:从原代培养物或⑦ 细胞系 中获得的具有特殊性质的细胞, 一般具有恒定的染色体组型、⑧ 同功酶类型 、病毒敏感性和⑨ 生化特性 等。 五、克隆培养法 1.概念:把一个单细胞从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的 ⑩ 细胞群体 的技术。
七、动物的克隆繁殖 1.动物细胞全能性的表现程度
2.动物难以克隆的根本原因是动物的个体发育过程中,细胞分化使得细 胞发生了 基因 的差异化表达,细胞基因组中基因的活动很不完全。 3.细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 (1)核移植:利用一个细胞的 细胞核 来取代另一个细胞中的细胞 核,形成一个 重建 的“合子”。
(2)原理:细胞增殖。 (3)条件 ①充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因 子、血清等。 ②适宜的温度:36.5 ℃±0.5 ℃;适宜的pH:7.2~7.4。
4.在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达,细胞分化为不同的组织、 器官。 5.植物细胞全能性的大小 受精卵>生殖细胞>体细胞 分化程度低的细胞>分化程度高的细胞 6.培养物的胚胎发生和器官形成能力下降的原因 (1)染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生等,而且其结果是不可逆的; (2)细胞或组织中激素平衡被打破,或细胞对外源生长物质的敏感性发 生改变; (3)随着时间推移,由于其他各种原因产生了缺乏成胚性的细胞系。
具有特定性状
重难突破 一、植物细胞的全能性 1.基本含义:植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性,因而都具有 发育成完整植株的潜能。 2.基础:植物体的每一个细胞都含有该物种发育所需的全部遗传物质。 3.全能性表达的条件 (1)离体、无菌。 (2)一定的营养物质,如水、无机盐、蔗糖、维生素等。 (3)植物生长调节剂。
5.植物细胞培养、器官培器官培养和原生质体培养统称为植物 的组织培养,都有脱分化和再分化过程,最终都能得到完整的植株,但由 于培养的目的不同,有时需要对愈伤组织进行特殊处理,以达到目的。
考点二 动物的克隆
考点清单
基础知识 一、动物细胞培养 从动物体中取出相关的组织,将其分散成① 单个 的细胞,然后在人 工控制的培养条件下,使这些细胞得以生存,并保持生长、分裂(繁殖)乃 至② 接触抑制 和有规律的③ 衰老、死亡 等生命活动现象。 二、动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生长特性。动物组织培 养过程中可以伴随④ 组织分化 。
由根、茎、叶、花、果实、种 需光
子组成
4.植物组织培养基本操作要求 (1)取材:含形成层(分生组织)的部分易于诱导形成愈伤组织。尽管植物体 其他已分化的部分也可以用于组织培养,但诱导形成愈伤组织比较困难。 (2)消毒:培养基中含有丰富的营养物质,不仅有利于培养物的生长,也利 于各种杂菌的生长。一旦污染,迅速生长的各种杂菌不仅会与培养物争 夺营养,还会产生大量对培养物有害的物质,导致培养物死亡。 【知能拓展】 (1)植物激素是影响脱分化、再分化的重要因素。细胞 分裂素与生长素不同浓度的配比在再分化过程中,分别对诱导根或芽的 产生起关键作用。当细胞分裂素与生长素的浓度比高时,有利于芽的产 生;浓度比低时,有利于根的产生。
(2)光照:对于植物组织培养来说,光照条件非常重要,包括光照强度、时 间和波长。但在愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养,而在分化再生的过 程中一定要有光照。愈伤组织诱导阶段的暗培养有利于细胞的脱分化 产生愈伤组织,如果在光照条件下容易分化产生维管等组织,则不利于 产生大量的愈伤组织。 (3)无菌:如果在培养基上有细菌等微生物,它们相比植物细胞具有更强 的新陈代谢能力,比植物细胞生长繁殖得更快,而且它们会产生毒素,使 培养基上的植物细胞死亡。因此,在培养过程中要求一系列的消毒、灭 菌,并且要求无菌操作。 (4)非离体状态下,植物体细胞不能表达全能性的原因:植物体细胞内的 基因选择性表达。