山楂有效成分提取和含量测定方法论文
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山楂有效成分的提取和含量测定方法研究[摘要] 山楂为药食两用中药,现代中医认为其具有防治心血管疾病的作用,其有效活性成分为黄酮类,其果实和叶子中都含有。本文就山楂黄酮的提取和含量测定做一综述。
[关键词] 山楂;黄酮;提取;含量测定
[中图分类号] r932 [文献标识码] b[文章编号] 1005-0515(2011)-07-040-01
[abstract] the hawthorn is the medicine food dual purpose chinese native medicine, modern traditional chinese medicine considers it can prevent and treat the cardiovascular disease, its active compounds are flavonoids, and they exist in the fruit and leaves . this article is a summary about the extraction and the content determination of flavonoids.
[keywords] hawthorn; flavonoids; extraction; content determination
山楂为蔷薇科rosaceae植物山楂crataeguspinnatifida、山里红crataegus pinnatifida var.major及野山楂crataegus cuneata 的干燥成熟果实[1]。山楂为药食两用中药,性微温,味酸甘,入脾、胃、肝经,有消食健胃、活血化淤、收敛止痢之功能。现代医学研究表明,山楂还具有防治心血管疾病,具有扩张血管、强心、增加冠脉血流量、改善心脏活力、兴奋中枢神经系统、降低血压和胆固醇、软化血管及利尿和镇静作用;防治动脉硬化,防衰老、
抗癌的作用。其主要有效成分是黄酮类。
1 有效成分的提取
1.1 加热回流提取一般可将山楂破碎后置于热水中浸渍,采用回流等辅助提取,然后经乙醇沉淀离心获取,刘巧利等[2]得出最佳提取工艺条件:水提取3次,加水倍量为14、12、12倍,浸泡时间为60min,提取时间3.0、
2.5、2.5 h。
1.2 乙醇回流提取取山楂果肉30g,以60%乙醇回流提取2次,每次l.5h。合并提取液,回收乙醇,得山楂浸膏[3]。
1.3 索氏提取索氏提取是将药品粉碎后置于索氏提取器中,加入溶剂,采用回流装置辅助提取。张妍等[3]采用甲醇为溶剂,索氏提取:取山楂果肉30g,以甲醇为溶剂,用索氏提取器回流提取4h,回收甲醇,得山楂浸膏。
1.4 超声提取超声提取是利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应和搅拌作用等加速药物有效成分进入溶剂,从而提高了提取效率,缩短了提取时间,节约了溶剂,低温提取有利于有效成分的保护,是提取天然产物有效成分的较好的手段。取山楂果肉30 g,加60%乙醇,超声3次,每次45 min,合并提取液,回收乙醇,得山楂浸膏[3]。
1.5 高压均质技术该技术利用高压条件下的混悬液,通过可调节的限流缝隙过程中失压、膨胀、爆炸、剪切和高速撞击等综合效应,将在液体中的颗粒粉碎至直径0.1~2μm,平均直径<1μm,这个过程集超声波粉碎、胶体磨、球磨功能于一体,颗粒面积的增大
及高压带来的综合效应,极大地加速了可溶物的渗透和扩散[4]。钟汉左等通过实验,得出工艺条件为压力60mpa,提取时间为30min,乙醇体积分数为70%,山楂叶与溶剂的质量比为1:30。
2 有效成分的含量测定
2.1 滴定法取本品粉末1g,精密称定,精密加水100ml,室温下浸泡4小时,时时震荡,过滤,精密量取滤液25ml,加水50ml,加酚酞指示液2滴,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/ml)滴定即得。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/ml)相当于6.404mg的枸橼酸[5]。
2.2 硝酸铝显色法精密吸取提取液3ml于10ml量瓶中,加水至刻度。加5%亚硝酸钠0.3ml,放置6min,再加10%硝酸铝0.3 ml,放置6min,加4%氢氧化钠4ml,加80%乙醇至刻度,摇匀。在510nm 处测吸光度[2]。
2.3 高效液相色谱法高效液相色谱法具有高效、高灵敏度、应用范围广、分析速度快及载液流速快等特点,目前,高效液相色谱法已经被广泛的运用到中药中多糖的含量测定。
3 结论山楂提取方法中超声提取可以破坏细胞壁,使细胞内的有效成分大量溶于有机溶剂,所以提取效率较高。以甲醇为溶剂索氏提取器提取和乙醇回流提取效率都比较高,但是索氏提取溶剂对人体伤害大,不利于生产。这几种提取方法广泛用大孔吸附树脂技术进行分离,效果较好。高压均质提取工艺操作简单、安全等优势,但是工艺研究不是很完善,还需要更进一步的研究。在含量测定中,药典上用的是滴定法。我们可以研究用高效液相色谱法来更准确的
进行含量测定。
参考文献
[1] 宋学玲,王美芝.山楂的化学成分与临床应用[j].甘肃中医,2007,20(10):47.
[2] 刘巧利,王柳云,严建业.等.山楂中总黄酮和多糖的提取工艺研究[j].中南林业科技大学学报,2010,30(9):162-165.
[3] 张妍,李厚锦,孙建平,等.山楂果总黄酮的提取分离及体外抗肿瘤活性[j].中草药,2004,35(7):787-789.
[4] 钟汉左,梁勇,胡江涌,等.高压均质提取山楂叶有效成分[j].精细化工,2007,24(9).
[5] 中华人民共护国药典一部[m].化学工业出版社:29-30.