旋光度(比旋度)的测定方法
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旋光度(比旋度)的测定方法
平面偏振光通过某些光学活性物质(如具有不对称碳原子的化合物)的液体或溶液时,偏振光的振动平面向左或向右旋转的现象称为旋光现象。
偏振光旋转的角度称为旋光度。
旋光度有右旋、左旋之分,偏振光向右旋转(顺时针方向)称为“右旋”,用“+”表示;偏振光向左旋转(逆时针方向)称为“左旋”,用“—”表示。
偏振光透过长1dm 且每1mL 中含有旋光性物质1g 的溶液,在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度,以t
λα][表示。
t 为测定时的温度,λ为测定
波长。
比旋度是旋光物质的重要物理常数,可以用来区别药物或检查药物纯杂的程度。
旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系,故还可以用来测定含量。
1.测定仪器
测定旋光度的的专用仪器为旋光计。
除另有规定外,测定时采用钠光谱的D 线(589.3nm )测定旋光度,测定管长度为1dm (如使用其它管长,需进行换算),测定温度为20℃。
使用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
2.测定方法
测定旋光度时,将测定管用供试液体或溶液(取固体供试品,按各药品项下规定的方法制成)冲洗数次,缓缓注入供试液体或溶液适量(注意勿使发生气泡),置于旋光计内检测读数,即得供试液的旋光度。
用同法读取旋光度3次,取3次的平均数,照下列公式计算,即得供试品的比旋度。
对液体供试品 ld t
D αα=][
对固体供试品 lc t
D α
α100][=
式中,[α]——为比旋度,通常测定温度为20℃,使用钠光谱的D 线
(589.3nm )表示时,可表示为20][D α;
D ——钠光谱的D 线; t ——测定时的温度; l ——测定管长度,dm ;
α——测得的旋光度; d ——液体的相对密度;
c ——每100mL 溶液中含有被测物质的重量(按干燥品或无水物计算),g 。
3.注意事项
(1)每次测定前应以溶剂作空白校正,测定后,再校正1次,以确定在测定时零点有无变动;如第2次校正时发现零点有变动,则应重新测定旋光度。
(2)配制溶液及测定时,均应调节温度至20℃±0.5℃(或各药品项下规定的温度)。
(3)供试的液体或固体物质的溶液应充分溶解,供试液应澄清。
(4)物质的比旋度与测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。
因此,表示物质的比旋度时应注明测定条件。
(5)旋光计的检定,可用标准石英旋光管进行,读数误差应符合规定。
4. 在含量测定中的应用 具有旋光性的药物,特别是在无其他更好的方法测定含量时,可采用旋光度法测定。
《中国药典》采用旋光度法测定含量的药物有葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、谷氨酸钾注射液、右旋糖酐氯化钠注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液等。
如右旋糖酐20氯化钠注射液中右旋糖酐20的含量测定方法为:精密量取本品10ml ,置25ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照旋光度测定法测定,按下式计算右旋糖酐20的含量。
α5128.0=C
式中,C ——每100ml 注射液中右旋糖酐20的重量,g ;
α——测得的旋光度⨯稀释倍数2.5.
已知右旋糖酐20的比旋度为+195°,代入浓度的计算公式:
[]ααααα⨯=⨯⨯=⨯⨯⨯=⨯⨯=5128.05.25128.05.211951005.2100''20'l C D
式中,'
α——测得的旋光度。