旋光度(比旋度)的测定方法
旋光度测定的步骤
旋光度测定的步骤
旋光度测定是化学分析中一种有用的物质性质检测方法，可以有效地测定极性有机分子（如碳氢化合物、蛋白质、多糖等）的旋光物质。
通过测量物质的旋光度，即可获得物质的结构和性质的定量评价信息。
旋光度测定的步骤一般如下：
1、处理样品：将需要对比的物质和测定物质分别放入旋光仪-测定机，并以特定容量进行称量，并增加一定量的稀释试剂，待样品溶液完全混和后，方可进行旋光度测定。
2、参比测量：准备两个样品容器，一个放入对比物质，一个放入测定物质，用控制仪控制旋转方向与角速度，并在两个样品容器中分别测定旋光度。
3、旋光度测定：将测定物质的旋光度和对比物质的旋光度进行比较，根据旋光度差异计算出总体旋光度值。
4、旋光参数测定：将测定物质和参比物质分别施加不同旋转方向与角速度的梯度，以获得参数变化趋势，根据计算出的旋光参数值来判断物质的旋光性质。
5、数据分析：将所获得的数据与参考数据进行比较，计算旋光率、旋光度等参数，了解试样的旋光性质。
以上就是旋光度测定的基本步骤，能够测出物质的旋光特性以及结构，用以进行优化及定量评价等，是一种重要的傅立叶变换、光谱分析以及芳香族有机分子认证和鉴别等研究中不可缺少的检测方法。
旋光度的测定
旋光度的测定方法和注意事项中国卖仪器网整理：平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度。
偏振光透过长1dm并1mL中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。
测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查某些药品的纯杂程度，亦可用以测定含量。
除另有规定外，本药典系用钠光谱的D线（589.3nm）测定旋光度，测定管长度为1dm（如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20℃。
测定旋光度时，用读数至0.01°并经过检定的旋光度测定计。
将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各药品项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使产生气泡），置于旋光计（旋光测定仪）内检测读数，即得供试液的旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“＋”符号表示；使偏振光向左旋转者（反时针方向）为左旋，以“－”符号表示。
用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度。
a对液体供试品[a](t,D)= ---ld100a对固体供试品[a](t,D)= -----Lc式中［α］为比旋度；D 为钠光谱的D线；t 为测定时的温度；l 为测定管长度，dm；α 为测得的旋光度；d 为液体的相对密度；c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量，g（按干燥品或无水物计算）。
旋光计的检定，可用标准石英旋光管进行，读数误差应符合规定。
【注意事项】（1）每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。
（2）配制溶液及测定时，均应调节温度至20℃±0.5℃（或各品种项下规定的温度）。
（3）供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。
超净工作台如有上述情形时，应预先滤过，并弃去初滤液。
（4）物质的比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。
011-旋光度测定法
1 目的测定药品的比旋度，以测定药品含量。
2 范围本品适用于用来测定药物定性，定量和杂质检查的一种方法。
3 职责质控部、化验室相关操作人员。
4 内容4.1、原理：旋光度测定法是利用直线偏振光，通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常“＋”号表示。
使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“－”号表示。
影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。
当偏振光通过长1dm、每１ml中含有旋光性物质1g的溶液，使用光线波长为钠光Ｄ线（589.3nm）、测定温度为20℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以［α］表示。
比旋度是物质的物理常数。
因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。
由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故而还可以用来测定含量。
4.2、样品测定操作法旋光度测定法主要用于药典某些品种性状项下比旋度的测定，或一些制剂的含量测定。
4.2.1、比旋度测定按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定，测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除零点。
常用测定比旋度的溶液多为水溶液，有时也用稀释的盐酸溶液或氢氧化钠试液，或有机溶剂如乙醇、氯仿、二氧六环等溶液，主要是按照供试品在各种溶剂中的溶解情况决定。
配制溶液的浓度大都根据药品的比旋度大小，使配成的测定液旋光度一般应在左旋或右旋2～8℃范围，测定值太小，在读取旋光度时容易造成误差，且在称量上也易产生误差，一些溶解度小的可以例外。
用旋光法作含量测定时应当称取2份做平行试验。
（装入测定溶液时避免产生气泡，旋紧测试管两端螺帽时，不应用力过大以免产生应力，造成误差，测定旋光度应重复读取3次，取平均值，按规定公式计算结果。
旋光度的测定
旋光度的测定旋光度的测定是一种常用的化学分析方法，它可以用来检测化合物中手性分子的存在以及其对光线偏振方向的旋转程度。
在药物、食品、化妆品等领域中，旋光度的测定被广泛应用。
本文将介绍旋光度的定义、测量原理、仪器设备和实验步骤。
一、旋光度的定义旋光度是指物质对平面偏振光旋转角度的大小，通常用α表示。
当入射线与观察线夹角为90°时，称为正旋性；当入射线与观察线夹角为270°时，称为负旋性。
其单位为度（°）或毫度（mdeg）。
二、测量原理当平面偏振光通过具有手性分子的溶液或晶体时，由于手性分子对左右两个方向的圆偏振光吸收不同，导致传播速度不同，从而使得出射光线发生相位差，进而改变了偏振方向和波长。
这种现象被称为“旋光现象”。
根据洛仑茨公式可得：α = α0 × l × c其中，α0为比旋光度，l为样品长度，c为样品浓度。
因此，旋光度的测定需要测量样品的长度和浓度，并根据上述公式计算出比旋光度。
三、仪器设备旋光度测定常用的仪器设备有旋光仪和偏振光谱仪。
1. 旋光仪：是一种专门用于测量物质对平面偏振光的旋转程度的仪器。
它由源、偏振器、样品室、检测器和读数装置等组成。
常见的有手摇式旋光仪和自动旋光仪两种。
2. 偏振光谱仪：是一种可以同时测量吸收谱和旋转角度的分析仪器。
它由源、偏振器、样品室、检测器和读数装置等组成。
与传统的分析仪不同之处在于，它使用圆偏振光而非平面偏振光。
四、实验步骤1. 准备样品：将待测物质溶解于适当溶剂中或制备成晶体，并按照要求调整其浓度。
2. 校准：打开旋光仪或偏振光谱仪，进行校准。
校准时应使用已知旋光度的样品进行校准。
3. 实验操作：将样品放入旋光仪或偏振光谱仪中，按照要求调整样品室的长度和浓度，记录下旋转角度。
4. 计算结果：根据洛仑茨公式计算出比旋光度，并将其转换为旋光度。
5. 数据处理：根据实验结果进行数据处理和分析，得出结论。
旋光度测定法
旋光度测定法平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右旋转。
旋转的度数，称为旋光度。
在一定波长与温度下，偏振光透过每lml含有lg旋光性物质的溶液且光路为长ldm时，测得的旋光度称为比旋度。
比旋度（或旋光度）可以用于鉴别或检查光学活性药品的纯杂程度，亦可用于测定光学活性药品的含量。
在间上不能重叠，互为镜像关系的立体异构体称为对映体。
手性物质的对映异构体之间，除了使平面偏振光发生偏转的程度相同而方向相反之外，在非手性环境中的理化性质相同。
生物大分子如酶、生物受体等通常为手性物质，总是表现出对一种对映体的立体选择性，因此，对映体可在药理学与毒理学方面有差异来源于自然界的物质，例如氨基酸、蛋白质、生物碱、抗体、糖苷、糖等，大多以对映体的形式存在。
外消旋体一般由等量的对映异构体构成，旋光度净值为零，其物理性质也可能与其对映体不同。
最常用的光源是采用钠灯在可见光区的D线（589.3nm），但也使用较短的波长，如光电偏振计使用滤光片得到汞灯波长约为578nm、546nm、436nm、405nm和365nm处的最大透射率的单色光，其具有更髙的灵敏度，可降低被测化合物的浓度。
还有一些其他光源，如带有适当滤光器的氙灯或卤钨灯。
除另有规定外，本法系采用钠光谱的D线（589.3mn）测定旋光度，测定管长度为ldm（如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20℃。
用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
旋光度测定一般应在溶液配制后30分钟内进行测定。
测定旋光度时，将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各品种项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注人供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“+”符号表示；使偏振光向左旋转者（反时针方向）为左旋，以“一”符号表示。
用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度对液体供试品 []ld t D αα=对固体供试品 []lc100t D αα= 式中[α]为比旋度；D 为钠光谱的D 线；f 为测定时的温度，℃；l 为测定管长度，dm ；α为测得的旋光度；d 为液体的相对密度；c 为每100ml 溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g 。
3 比旋光度的测定
2．5．2 旋光度的测定 旋光度利用旋光仪进行测定。 为提高测量的准确度，实际应用的旋光仪都采用
所谓“半荫”原理。 图2-22为国产WXG－4型旋光仪。
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图2-22 WXG－4型旋光仪
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比旋光度的测定
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一.偏振光与旋光性 光是一种电磁波, 光的振动方向与其前进的方向垂直.
普通光的光波是在与前进方向垂直的平面内, 以任何方向 振动. 使普通光通过一个尼科尔棱镜, 只有振动方向和棱 镜的晶轴平行的光才能通过. 这种只在一个方向上振动的 光称为平面偏振光, 简称偏振光.
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二.旋光仪和比旋光度 (一)旋光仪
式中α是旋光仪测得的旋光度, C是旋光性物质溶液的 浓度,即1毫升溶液里所含物பைடு நூலகம்的克数, l 为盛液管的长度, 单 位是分米. 在一定的条件下, 旋光性物质的比旋光度是一个 物理常数.
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测定旋光度, 可计算出比旋光度, 从而可鉴定末知的旋 光性物质. 例如, 某物质的水溶液浓度为5g/100ml, 在1分米 长的盛液管内, 温度为20℃, 光源为钠光, 用旋光仪测出旋光 度为-4.64º. 此物质的比旋光度可按下式计算.
3
(二)比旋光度 旋光度的大小和方向, 不仅取决于旋光性物质的结构和性
质, 而且与测定时溶液的浓度(或纯液体的密度)、旋光管的长度、 溶剂的性质、温度和光波的波长等有关. 一定温度、一定波长的
入管射时光所测, 通得过的一旋个光1度分，米称长比, 盛旋满光浓度度，为用1g•mtl表-1旋c示光l. 性物质的旋光
胆甾醇的氯仿溶液，其浓度为100ml溶剂中含溶质6.15 克. 将该溶液盛于5cm长的旋光管中，于20C时用钠光测得 其旋光度为1.2，则它的比旋光度可按下式计算.
如何测定手性化合物的光学纯度-比旋光度
如何测定手性化合物的光学纯度——比旋光度(o.p.)的测定手性分子能够把平面偏振光旋转到一定的角度，各对映体使其数值相同但方向相反，这种性质即光学活性。
若是消旋体，两个异构体的量刚好相等，表现出来的却是无光学活性。
同样，如果一个对映体的量超过了另一个，该手性化合物就有可能显示出光学活性。
测定手性分子各对映异构体的组成（相对含量），对于开展不对称催化、手性药物合成等方面的研究具有十分重要的意义。
对映体的纯度是手性质控的重要指标，可以通过测定旋光度/比旋度来反映对映体的光学纯度。
什么是光学纯度？光学纯度（optical purity）是衡量旋光性样品中一个对映体超过另一个对映体的量的量度。
若一个纯的光学活性物质是100％的一种对映异构体，那么一个外消旋体的光学纯度则为0。
如某旋光性样品是由一个对映体R-和S-异构体组成，R-异构体含量为30％，S-异构体的含量为70％，其光学纯度则为40％。
样品中有多余40％的S-异构体，而样品中有60％是外消旋体。
如何测量旋光度？可以用旋光仪来测定旋光性物质的旋光度和旋光方向。
旋光仪主要由一个钠光源、两个尼科尔棱镜和一个盛有测试样品的盛液管组成(见图 2.28)。
普通光先经过一个固定不动的棱镜(起偏镜)变成偏振光，然后通过盛液管、再由一个可转动的棱镜(检偏镜)来检验偏振光的振动方向和旋转角度。
若使偏振光振动平面向右旋转，则称右旋；若使偏振光振动平面向左旋转，则称左旋。
1.JPG光活性物质的旋光度与其浓度、测试温度、光波波长等因素密切相关。
但是，在一定条件下，每一种光活性物质的旋光度为一常数，用比旋光度[α]表示：2.jpg其中，α为旋光仪测试值；c为样品溶液浓度，以lmL溶液所含样品克数表示；l为盛液管长度，单位为dm；λ为光源波长，通常采用钠光源，以D表示；t为测试温度。
如果被测样品为液体，可直接测定而不需配成溶液。
求算比旋光度时，只要将其相对密度值(d)代替上式中的浓度值(c)即可：3.jpg除了比旋光度外，还可用光学纯度、左旋和右旋对映体的百分含量以及对映体过量值(Enantiomer Excess，缩写为e．e．)等来反映光活性物质的纯度。
比旋光度检验步骤
比旋光度检验步骤
比旋光度是一种用来检测液体溶质的光学方法，在化学实验、环境检测、生物分析中有广泛的应用。
1、准备样品：将需要检测的样品通过抽滤（或离心）处理并均匀悬浮，以确保测量结果的准确性。
2、设置仪器：将被测样品倒入仪器所需的容器中，并校准仪器参数，比如波长、通道、偏振设置等，设置完成后，可以开启测量程序。
3、数据采集：根据仪器的指示开始采集数据，同时获取参数的测量值，采集数据时需要反复采集，以确保测量值的准确性。
4、计算比旋光度：根据采集到的数据，计算出比旋光度，这是检测
溶质的有效参数。
5、汇总结果：将步骤4计算的结果汇总，整理整个实验的测试结果，获得多组不同波长的比旋光度数据。
6、实验报告：根据步骤5的结果，综合整理实验报告，分析不同波
长的比旋光度数据，从而确定溶质的种类及含量。
7、安全处理：实验完成后，对样品和仪器做出安全处理，将样品送
入排放系统，将仪器清洗干净，及时采取维护措施，以确保下次使用时仪
器能正常工作。
以上为比旋光度检验步骤，通过以上步骤可以分析溶质的种类及含量。
有机化学实验六 旋光度的测定
因此α并非特征物理常数，而用 比旋光度
T 来作为旋光活性
物质的特征物理常数：
l c
T
（Nicol 棱镜）
（Nicol 棱镜）
（Nicol 棱镜）
透过光的强度与原来相同
（Nicol 棱镜）
三、分视场原理：
在起偏振镜后放臵一块狭长的石英片，由 于石英片的旋光性，使偏振光旋转了一个角度θ （2 ~ 3°）： I=I0Cosβ θ
一、实验目的
1. 掌握比旋光的概念及测定方法
2. 了解旋光仪的原理
二、实验原理
旋光法是一种研究非对称性结构的光学方法。
Nicol棱镜
普通光的振动方向
平面偏振光的振动方向
α
·
旋光活性物质
α为旋光度，可直接由旋光仪读出，其值取决于：
被测分子的立体结构
温度、波长
被测定溶液的浓度，单位 g . ml-1
3. 接通电源，预热10min。
（二）、测定工作 1. 零点校正（本实验用空气进行校正）
调节目镜，使视线清晰。 转动刻度盘手轮至视场中三分视场明暗度一
致，此时原理上游标尺上的0°与主尺的游 标0°对准，若不一致则表明零点有误差。 测量、记录刻度读数，得零点校正读数m m
2. 旋光度的测定
a
a
三分视场变化示意图
170
170
0 10
读 数
175
171
175
175 20 30
0
176
0
0
10 20
3.5
5
0 10 20 10 30 40 15 50
比旋光度的测定
（11） 当放入小角度样品（小于0.5°）时，示数可能变化， 这时只要按复测按钮，就会出现新仪器应放在干燥通风处，防止潮气侵蚀，尽可能在 20℃的工作环境中使用仪器，搬动仪器应小心轻放，避免振 动。 （2）光源（钠光灯）积灰或损坏，可打开机壳擦净或更换。 （3）机械部件摩擦阻力增大，可以打开门板，在伞形齿轮蜗 杆处加少许油。 （4）如果发现仪器停转或其他元件损坏故障，应按电原理图 详细检查，或由厂方维修人员进行检修。 （5）打开电源后，若钠光灯不亮，可检查保险丝。
（3） 打开电源开关，若光源开关扳上后，钠光灯熄灭，则再将 光源开关上下重复扳动一两次，使钠光灯在直流下点亮为正常。
（4）打开测量开关，这时数码管应有数字显示。
（5）将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室，盖上箱 盖，待示数稳定后，按清零按钮。试管中若有气泡，应先让气 泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴，应用软布揩干。试管 螺帽不宜旋得过紧，以免产生应力，影响读数。试管安放时应 注意标记的位置和方向。
比旋光度的测定
某些有机化合物因具有手性，能使偏振光 振动平面旋转。使偏振光振动向左旋转的物质 称为左旋性物质，使偏振光振动向右旋转的物 质称为右旋性物质。
一种化合物的旋光度和旋光方向可用它的 比旋光度来表示。物质的旋光度与测定时所用 物质的浓度、溶剂、温度、旋光管长度和所用 光源的波长等都有关系：
纯液体的比旋光度= [α]λt = α / （L · d）
溶液的比旋光度= [α]λt = α / （L · c）
[αM]λt = 0.01Mr×[α]λt
普通的旋光仪一般由光源、物镜、偏振镜、磁 旋线圈、样品管和光电倍增管组成。仪器的基 本装置如图2-19所示。
旋光度测定法
标题：旋光度检验规程分发部门：质量技术部一份，生产制造部二份旋光度测定法1 定义1.1 旋光度：直线偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或右旋转，此种旋转在一定条件下有一定度数，称为旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）称为右旋物质，常以“＋”号表示。
使偏振光向左旋转者（反时针方向），称为左旋物质，常以“－”号表示。
由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故可以用来测定含量。
影响物质旋光度的因素很多，除化合物特性外，还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度，通过光线的波长和测定时的温度。
1.2 比旋度：当偏振光通过长ldm 、每lml 中含有旋光性物质1g 的溶液，使用光线波长为钠光D 线（589.3nm ）、测定温度为20℃时，测得的旋光度称为该物质的比旋度，以[]αD 20表示。
比旋度是物质的物理常数，因此可用以区别或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。
2 仪器与性能测试：2.1 旋光仪2.2 仪器的性能测试：2.3 按照仪器测量结果的准确度，仪器分为0.01、0.02和0.03三种准确度等级，测定旋光度，可用读数至001.︒并经过检定的旋光仪。
仪器检定的项目，除准确度外，还有重复性和稳定性，其它尚有对测试管盖玻片内应力和测试管长度误差等的检查。
2.4 仪器的性能测试参照JJG675—90规定，用+︒5和-︒1标准石英管进行。
在规定温度下，记录仪器的零点值，再放上旋光标准石英管，读取仪器示值，如此反复测定6次，按规定处理测定结果，与示值不能超出±︒.。
另外并要求将测定管旋转不同角度和倒向测定，001误差都不得大于004.︒。
3 样品测定操作法：3.1 旋光度测定法主要用于药典某些品种性状项下比旋度的测定，或一些制剂的含量测定。
3.2 比旋度测定按各该品种项下规定的方法配制供试品溶液，在规定的温度和放置时间内测定，测定前首先应将室温调至规定温度，然后用配制供试品的空白溶液校正零点或测定停点，以便扣除零点。
[检测方法]比旋光度的测定
![[检测方法]比旋光度的测定](https://img.taocdn.com/s3/m/f4e257106edb6f1aff001fd7.png)
实验六比旋光度的测定一、目的要求1. 了解旋光仪的构造原理，熟悉其使用方法；2. 掌握旋光度、比旋光度的概念及比旋光度的计算。
二、基本原理有些有机化合物，特别是很多的天然有机化合物，都是手性分子，能使偏振光的振动平面旋转一定的角度α，使偏光振动向左旋转的为左旋性物质，使偏光振动向右旋转的为右旋性物质。
比旋光度是旋光物质重要的物理常数之一，经常用它来表示旋光化合物的旋光性。
通过测定旋光度，可以检验旋光性物质的纯度并测定它的含量。
测定旋光度的仪器叫旋光仪，其基本结构及其测量原理如图2.30所示。
图2.30 旋光仪的构造及其测量原理示意图光线从光源经过起偏镜，再经过盛有旋光性物质的旋光管时，由于物质具有旋光性，使得产生的偏振光不能通过第二个棱镜，必须旋转检偏镜才能通过。
检偏镜转动角度由标尺盘上移动的角度表示，此读数即为该物质在此浓度时的旋光度α。
旋光度α除了与样品本身的性质有关以外，还与样品溶液的浓度、溶剂、光线穿过的旋光管的长度、温度及光线的波长有关。
一般情况下，温度对旋光度测量值影响不大，通常不必使样品置于恒温器中。
因此常用比旋光度[α]λt来表示各物质的旋光性。
在一定的波长和温度下比旋光度[α]λt可以用下列关系式表示：纯液体的比旋光度= [α]λt =α/（d·l）溶液的比旋光度= [α]λt =100·α/（c·l）[α]λt：表示旋光性物质在t℃、光源的波长为λ时的比旋光度。
光源的波长一般用钠光的D线，在20℃或25℃测定。
如[α]D20（水）表示某旋光化合物以水为溶剂在20℃时在钠光的D线下所测的比旋光度；α：标尺盘转动的角度读数（即旋光度），用旋光仪测定；λ：光源的光波长；d：纯液体的密度（单位：g/cm3）；l：旋光管的长度（单位：dm）；c：溶液的浓度（100mL溶液中所含样品的质量，g）；t：测量时的温度（℃）。
三、基本操作1. 溶液样品的配制：在分析天平上精确称取0.1至0.5g纯样品，溶解，置于25mL的容量瓶中定容，溶剂常选水、乙醇、氯仿等。
比旋度检验标准操作规程
依据：依据：《GMP》与药品生产质量检验的要求
目的：建立比旋度标准操作规程
范围：用于样品比旋度的测度
1．器：W-ZZ-Z型数字显示自动旋光仪，TG-382A电光分析天平，100ml容量瓶
2．样品测定操作方法
2.1用溶剂作空白校正
2.2将测定管用试汇体或溶汇（取固体供试品，接各药品项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋无计内检测读数，即得供试液的旋光度，显示窗上负号（-）亮表示左旋，不亮表示右旋。
3．结果计算：用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋。
对液体样品[a]t
=
a
ld d
对固体样品[a]t
=
100a
lc d
式中[а]为比旋度；D为钠光谱的D线；t为测定时的温度；L为测定管长度，dm；а为测得的旋光度；d为液体的相对密度 c为每100ml液体中含有被测物质的重量，g c按干燥品或无水物计算。
4．意事项
4.1每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。
4.2配制溶液及测定时，均应调节温度至20℃±0.5℃（或各药品项下规定的温度）。
4.3供试的液体或固体物质的溶液应不是浑浊或含有混悬的小粒。
旋光度测定法比较
旋光时，测得的旋光度称为可以用于鉴别或检查光学活性药品的纯杂程度，亦可用于测定光学活性药品的含”为左旋，精确的旋光度是指,在温度t下，波长为λ的光透过长1m或含1kg/m3旋光活性物质的液体，所发生的旋转，用弧度(rad)表示。
实际操作中，旋光度常用mrad ﹒m2﹒kg-1表示。
纯液体旋光度：旋光度以角度(°)表示，即20℃下，1dm长测定管的纯液体使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度；对于溶液，按专论规定方法制备。
液体旋光度：测定即20℃下，1dm长的测定管的含待测液体的溶液使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度(°)，即溶液旋光度。
溶液中液体旋光度，由溶液旋光度除以溶液中被检测液体的密度（g/cm3）计算得出。
固体物质的旋光度：测定20℃下，1dm长测定管的含被测物质1g/ml的溶液使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度，即溶液旋光度。
溶液中固体物质的旋光度由溶液的旋光度计算得出。
溶液中某物质的旋光度与溶剂和浓度有关。
按本药典采用的惯例，旋光度不标注单位；它的实际单位为：(°)﹒ml﹒dm-1﹒g-1。
右旋物质的旋光度为正的（+），即右旋物质可以使偏振光平面顺时针方向旋转；左旋物质的旋光度为负的（-）。
重要标准。
力的物质是手性的。
本药典的旋光度同国际标准单位旋光度的换算关系如下：纯液体旋光度：溶液中物质的旋光度：c为浓度，单位g/l。
按下式计算以g/l为单位的溶解物质的浓度c，或以m/m百分比为单位的浓度c′：= 20±0.5℃下，旋光度读数，单位度（°）；l = 测定管长度，单位dm。
ρ20 = 20℃下溶液密度，单位g/cm3,本药典在2.2.5节中以相对密度代替密度。
c = 溶解物质的浓度，单位g/l。
c′ = 溶解物质的浓度，单位g/l。
测20±0.5℃下，旋光计调零，用钠光谱的D线（λ＝589.3nm）测定，或者按专论要求的温度旋光的测量使用一个旋光计2、CP和EP相比，EP中描述更详细，且EP中多了纯液体的测定。
旋光度测定操作规程
1. 目的建立一个旋光度测定操作规程，以保证旋光度测定检验的规范性，获取正确的检验数据。
2. 范围适用于旋光度测定。
3. 责任人质控部负责人、质控部化验员。
4. 内容4.1. 规程依据：中国药典2010年版二部附录ⅥE 及中国药品检验标准操作规程。
4.2. 简述4.2.1. 平面偏振光通过某些光学活性化合物的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的平面向左或向右发生旋转，旋转的度数，称为旋光度。
偏振光透过长1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。
测定比旋度（或旋光度）可以区别或检查某些药品的纯杂程度，亦可以用以测定含量。
4.3. 测定方法4.3.1.《中国药典》旋光度测定法主要用于某些药品性状项下比旋度的测定，还用于一些制剂的含量测定。
4.3.2.比旋度的测定4.3.2.1.按各品种项下的规定进行操作。
除另有规定外，本法系采用钠光谱的D 线（589.3nm ）测定旋光度，测定管长度为1dm （如使用其他管长，应进行换算），测定温度为20℃。
用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
4.3.2.2.测定旋光度时，将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各品种项下的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
使偏振光向右旋转者（顺时针方向）为右旋，以“＋”符号表示；使偏振光向左旋转者（反时针方向）为左旋，以“－”符号表示。
用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度。
对液体供试品： []lda a t D = 对固体供试品： []lca a t D 100= 式中 []a 为比旋度D 为钠光谱的D 线t 为测定时的温度，℃l 为测定管长度，dma 为测得的旋光度d为液体的相对密度c为每100ml溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g4.3.2.3.旋光计的检定，可用标准石英旋光管进行，读数误差应符合规定。
实验二 药物比旋度测定实验
实验二药物比旋度测定实验
[实验目的]
1、掌握药物旋光度的测定方法，原理及比旋度的计算方法
2、掌握自动旋光仪的工作原理及使用方法和仪器的一般维护，了解圆盘式旋光仪的基本构
造和工作原理。
[实验原理]
1、[ａ]= ａ/L（dm）*C（g/ml）;
[试药和仪器]
试药葡萄糖（口服或者注射用）氨试液
仪器自动旋光仪（或圆盘式旋光仪） 100毫升容量瓶 100毫升烧杯
[操作步骤]
1、供试液的配制：精密称取葡萄糖5克，置100毫升的烧杯中加适量的纯化水溶解，定量
转移至100毫升容量瓶中，再加氨试液0、2毫升后，加纯化水稀释至刻度，摇匀，静置10分钟备用。
2、旋光度的测定：将配制好的葡萄糖溶液转移至旋光仪测定管中，在自动旋光仪（或圆盘
旋光仪）上测出旋光度，重复读数三次，取其平均值为供试品溶液的旋光度。
3、计算比旋度：根据实验测得的旋光度值计算葡萄糖的比旋度值，并与药典规定的葡萄糖
比旋度值比较
[思考题]
1、葡萄糖溶液的旋光度测定时候，为什么要加入氨试液？。
[说明]葡萄糖溶液旋光度的测定
![[说明]葡萄糖溶液旋光度的测定](https://img.taocdn.com/s3/m/5b1778fd541810a6f524ccbff121dd36a32dc461.png)
葡萄糖溶液旋光度的测定1. 比旋光度旋光性：化合物使平面偏振光偏振面旋转的性质。
旋光物质：具有旋光性的物质称为旋光物质，或称为光学活性物质。
旋光度(α) ：偏振面被旋转的角度。
旋光性物质的旋光度和旋光方向可用旋光仪进行测定。
由旋光仪测得的旋光度，甚至旋光方向，不仅与物质的结构有关，而且与测定的条件有关。
因为旋光现象是偏振光透过旋光性物质的分子时所造成的。
透过的分子愈多，偏振光旋转的角度愈大。
因此，由旋光仪式测得的旋光度与被测样品的浓度（如果是溶液），以及盛放样品的管子（旋光管）的长度密切相关。
右旋体和左旋体：若手性化合物能使偏振面右旋（顺时针）称为右旋体，用(+)表示；而其对映体必使偏振面左旋（逆时针）相等角度，称为左旋体，用(-)表示。
比旋光度：通常，规定旋光管的长度为1dm ，待测物质溶液的浓度为1g/mL ，在此条件下测得的旋光度叫做该物质的比旋光度，用[α]表示。
比旋光度仅决定于物质的结构，因此，比旋光度是物质特有的物理常数。
2. 比旋光度测定 （1）仪器旋光度：精度0.01° 分析天平：感量0.1mg 容量瓶：100mL ，1000Ml 称量瓶：50mm ³30mm （2）试剂氨试液：量取浓氨溶液400mL ，置于1000mL 容量瓶中，加水稀释至刻度。
（3）分析步骤 称取样品10g （精确至0.0001g ），置于100mL 容量瓶中，加水适量溶解，加氨0.2mL ，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min 。
于25℃用水调零，然后用样液冲洗旋光管两次，样液装满旋光管，不能有气泡产生，进行测定。
（4）结果计算 样品的比旋光度按下式计算()11100X L m X -⨯⨯⨯=α 注： X ——比旋光度（°） α——旋光度（°）100——样品总体积的数值（g ） L ——旋光管的长度的数值（dm ）X1——样品水分的质量分数（%） 所得结果保留至一位小数。
有机化学基础知识点整理立体化学中的旋光度与比旋度
有机化学基础知识点整理立体化学中的旋光度与比旋度在立体化学领域，旋光度和比旋度是非常重要的概念。
它们与手性分子的光学活性密切相关，通过测量它们可以确定分子的立体结构和手性性质。
本文将对旋光度和比旋度的定义、测量方法以及相关理论进行详细解析。
一、旋光度的定义与测量方法旋光度是描述手性物质旋光现象的物理量，用来衡量光线在通过手性物质后发生的光学旋光的程度。
旋光度的定义为：旋光度α =(α_observed × 100) / (l × c)，其中α_observed表示观察到的旋光角度，l 表示光通过样品的光程长度，c为光的波长。
测量旋光度的方法主要有两种：比色法和仪器法。
比色法是通过将样品与标准溶液进行比较，根据颜色的深浅来确定旋光度。
而仪器法则是利用仪器设备，例如旋光仪或极慢光速旋光仪，直接测定旋光度的数值。
二、比旋度的定义与测量方法比旋度是旋光度的数值进一步衍生出的量，用来表示不同手性物质之间旋光度的相对大小。
比旋度的定义为：比旋度[α]_D = α_D / c，其中α_D表示物质旋光度的数值，c为物质在特定条件下所处的浓度。
测量比旋度需要先测定物质的旋光度，然后再根据其浓度计算得到比旋度的数值。
比旋度是一个与浓度无关的物理量，可以用来比较不同物质的旋光场强。
三、旋光度与比旋度的理论基础旋光现象是由手性分子引起的，其基础理论是量子力学和电磁理论。
量子力学描述了手性分子的电磁性质以及与光的相互作用。
电磁理论则解释了光通过手性分子时发生的旋光现象。
根据理论计算，旋光度与比旋度与分子结构的对称性和手性有关。
手性分子的旋光度与比旋度通常与分子的构型、空间取向以及它们与光的相互作用的方式有关。
由于手性分子的旋光度与比旋度对于不同的化合物有着不同的数值，因此它们可以用来区分手性分子与非手性分子。
四、应用与意义旋光度和比旋度在有机化学、药物化学、食品科学等领域有着广泛的应用。
它们可以用来确定和鉴别手性化合物的结构、纯度和浓度，同时也可以用来研究手性分子的物化性质和光学活性。
比旋光度测定
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比旋度的测定
自然光与偏振光
• 光是一种电磁波,是横波。即振动方向与前进方向
相垂直。自然光（日光、灯光等）的光波有各个 方向的振动面，当它通过尼科尔棱镜时，透过棱 镜的光线只限于在一个平面内振动，这种光称为 偏振光，偏振光的振动平面叫偏振面。
旋光度与比旋光度
• 旋光度：当偏振光通过旋 • 一般规定：比旋光度是以 钠光线为光源（D)，在温 光物质的溶液时偏振面所 旋转的角度 度为20°C时偏振光透过 10cm长、每毫升含1g旋 • 旋光度大小主要决定于旋 光物质的溶液时的旋光度。 光物质的分子结构特征， 也与旋光物质溶液的浓度、 • 黑板上写关系式符号意义 液层的厚度、入射偏振光 • 比旋光度可用来度量物质 的波长、测定时的温度有 的旋光能力，是旋光物质 关。 在一定条件下的物理特.旋光仪应放在通风、干燥和温度适宜的地方， 以免仪器受潮。 • 2.旋光仪连续使用时间不宜超过4h。如果使用时 间较长，中间应关闭10~15min,待钠光灯冷却后 再继续使用，或用电风扇吹，减少灯管受热程度 以免亮度下降或寿面降低。 • 3.旋光管用后要及时将溶液倒出，用蒸馏水洗涤， 拭干；所有镜片应用柔软绒布揩擦。 • 4.仪器停用后，应将塑料套套上，放入干燥剂， 装箱时应按固定位置放入箱内并压紧。
旋光仪测定旋光度
• 提一下几个表格内容、 看一下例题。 • 左边是国产WXG-4型 旋光仪外形图
WXG-4型旋光仪光略图
• 解释图及工作原理
WZZ-1型自动旋光计工作原理
• 解释图及工作原理
注意以下几点
1.无论是校正零还是测定试样，旋刻度线盘必须极其缓慢， 才能观察到现场亮度的变化。 现场亮度一直判断：当现场亮度一致时，轻微旋动刻度盘， 2.视场出现出现下图(a)或者（c)的图像。轻微向左或向左 旋转至（b)即视场亮度一致。插入35页图。 3.旋光仪采用双游标读数，以消除度盘的偏心差；试盘分 360格，每格为1°，游标分20格。等于度盘的19格，用 游标直接读数到0.05°如下读数为右旋9.3°。 4.因葡萄糖为右旋性物质，故以顺时针方向旋转刻度盘， 如未知试样的旋光性，应先确定其旋光性方向后，再进行 测定。 此外，试样液必须清澈透明，如出现浑浊或有悬浮物时， 必须处理成清液后测定。
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旋光度（比旋度）的测定方法
平面偏振光通过某些光学活性物质（如具有不对称碳原子的化合物）的液体或溶液时，偏振光的振动平面向左或向右旋转的现象称为旋光现象。
偏振光旋转的角度称为旋光度。
旋光度有右旋、左旋之分，偏振光向右旋转（顺时针方向）称为“右旋”，用“+”表示；偏振光向左旋转（逆时针方向）称为“左旋”，用“—”表示。
偏振光透过长1dm 且每1mL 中含有旋光性物质1g 的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度，以t
λα][表示。
t 为测定时的温度，λ为测定
波长。
比旋度是旋光物质的重要物理常数，可以用来区别药物或检查药物纯杂的程度。
旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系，故还可以用来测定含量。
1．测定仪器
测定旋光度的的专用仪器为旋光计。
除另有规定外，测定时采用钠光谱的D 线（589.3nm ）测定旋光度，测定管长度为1dm （如使用其它管长，需进行换算），测定温度为20℃。
使用读数至0.01°并经过检定的旋光计。
2．测定方法
测定旋光度时，将测定管用供试液体或溶液（取固体供试品，按各药品项下规定的方法制成）冲洗数次，缓缓注入供试液体或溶液适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，即得供试液的旋光度。
用同法读取旋光度3次，取3次的平均数，照下列公式计算，即得供试品的比旋度。
对液体供试品 ld t
D αα=][
对固体供试品 lc t
D α
α100][=
式中，[α]——为比旋度，通常测定温度为20℃，使用钠光谱的D 线
（589.3nm ）表示时，可表示为20][D α；
D ——钠光谱的D 线； t ——测定时的温度； l ——测定管长度，dm ；
α——测得的旋光度； d ——液体的相对密度；
c ——每100mL 溶液中含有被测物质的重量（按干燥品或无水物计算），g 。
3．注意事项
（1）每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正1次，以确定在测定时零点有无变动；如第2次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。
（2）配制溶液及测定时，均应调节温度至20℃±0.5℃（或各药品项下规定的温度）。
（3）供试的液体或固体物质的溶液应充分溶解，供试液应澄清。
（4）物质的比旋度与测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。
因此，表示物质的比旋度时应注明测定条件。
（5）旋光计的检定，可用标准石英旋光管进行，读数误差应符合规定。
4. 在含量测定中的应用 具有旋光性的药物,特别是在无其他更好的方法测定含量时，可采用旋光度法测定。
《中国药典》采用旋光度法测定含量的药物有葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、谷氨酸钾注射液、右旋糖酐氯化钠注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液等。
如右旋糖酐20氯化钠注射液中右旋糖酐20的含量测定方法为:精密量取本品10ml ，置25ml 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照旋光度测定法测定,按下式计算右旋糖酐20的含量。
α5128.0=C
式中，C ——每100ml 注射液中右旋糖酐20的重量，g ；
α——测得的旋光度⨯稀释倍数2.5.
已知右旋糖酐20的比旋度为+195°，代入浓度的计算公式：
[]ααααα⨯=⨯⨯=⨯⨯⨯=⨯⨯=5128.05.25128.05.211951005.2100''20'l C D
式中，'
α——测得的旋光度。