柱色谱注意的事项.
色谱柱使用注意事项
色谱柱使用注意事项如下：
1.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
2.防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
3.如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
4.应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。
5.如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。
6.一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会迅速降低柱效。
7.选择使用适宜的流动相，以避免固定相被破坏。
8.避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。
9.及时更换损坏的色谱柱。
10.在使用过程中，要定期检查色谱柱是否正常工作。
如发现柱压升高、峰形变差、分离效果降低等情况，应及时处理。
请你总结柱色谱的操作步骤及注意事项
请你总结柱色谱的操作步骤及注意事项
柱色谱是常用的分离和分析技术之一，通常有以下操作步骤及注意事项：
操作步骤：
1. 样品制备：将需要分离的混合物溶解或悬浮在合适的溶剂中，经过过滤或离心等处理，得到样品溶液。
2. 填充柱料：将柱料填充到柱中，常用的柱料有硅胶、脱脂棉、高效液相色谱柱等。
3. 平衡柱料：用适当的溶剂通过柱料进行平衡，以保证柱料内部的平衡状态。
4. 装样：将样品溶液使用适当的方法（如注射器）装载到柱中。
5. 洗脱：通过柱料添加适当的洗脱剂，将混合物中的目标成分逐一洗脱出来。
6. 收集洗脱液：将洗脱液逐一收集到相应的集样器中，可以根据需要选择收集不同时间段或体积段的洗脱液。
7. 分析：对收集的洗脱液进行后续的分析，如测量吸光度、进行色谱质谱分析等。
注意事项：
1. 柱料的选择：根据样品特性选择合适的柱料，以保证分离效果。
2. 柱料的平衡：进行柱色谱操作前，要确保柱内的柱料处于平衡状态，以获得稳定的分离结果。
3. 柱色谱条件的控制：调整洗脱剂的流速、浓度等条件，可以影响分离效果和分离时间。
4. 样品的预处理：对样品进行合适的预处理，如过滤、离心、
浓缩等，以避免堵塞柱料。
5. 柱的保养与维护：定期对柱进行保养和维护，如洗涤、再生、更换等，以保证柱的使用寿命和分离效果。
6. 操作的环境控制：在操作过程中，注意保持干净的工作台和无尘环境，以避免杂质的干扰。
柱色谱注意事项
柱色谱注意事项
柱色谱是一种常用的色谱方法，在操作过程中有以下几点需要注意：
- 色谱柱的选择：通常选择与目标化合物具有相同极性或化学特性的色谱柱固定相涂覆液，以得到良好的峰形。
但极性较高的色谱柱通常耐热温度较低，耐久性也较低，因此建议先用耐热温度较高的无极性色谱柱进行分析，再用极性较高的色谱柱分析。
- 载气纯度：为了防止色谱柱氧化导致分离性能下降，务必使用99.999%以上的高纯载气。
- 温度控制：仪器开机升温前，先注入足够的
载气，将色谱柱中的氧气排出，然后再提高色谱柱温度。
特别是极性色谱柱，容易被氧化，因此请将色谱柱内的空气完全置换为载气后，再进行升温。
关机时，先把色谱柱的温度降到40度以下，最后再关闭载气。
- 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动：温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况。
在使用柱色谱时，需根据实际情况灵活调整，以获得最佳的分离效果。
柱色谱注意的事项
柱层析使用技巧常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
一：柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。
以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
关于柱子的尺寸应该是粗长的最好。
柱子长了，相应的塔板数就高。
柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。
现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。
如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf 在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。
色谱柱的使用和维护方法及操作规程
色谱柱的使用和维护方法及操作规程色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。
当然，色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
1、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
2、应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然，流动相使用前必需经脱气和过滤处理。
3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
4、选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解，压力上升是需要更换预柱的信号。
5、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
6、常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。
7、避开使用高粘度的溶剂作为流动相；假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在试验完毕柱子冲洗干净。
8、进样样品要提纯。
9、严格掌控进样量，不要超载。
10、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱，好用洗脱本领强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。
当接受盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。
色谱柱的使用说明
1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
色谱柱使用注意事项及维护和修理保养
色谱柱使用注意事项及维护和修理保养色谱作为一种分别技术与方法，自本世纪初起已经有100多年的历史了，现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。
随着科技的进展，生产生活的需要，使得色谱技术也得到进一步的进展。
将来不断有新的联用的技术得到应用。
色谱柱的维护与保养的紧要性概括为9点：1.柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或猛烈震动；2.当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路确定要清洗干净；3.要注意流动相的脱气；4.避开使用高粘度的溶剂作为流动相；5. 进样样品要提纯；6.严格掌控进样量；7.每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；8.每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；9.若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。
色谱柱的保养色谱柱是装填有固定相用以分别混合组分的柱管。
多为金属或玻璃制作。
有直管形、盘管形、U形管等形状。
色谱作为一种分别技术与方法，自本世纪初起已经有100多年的历史了，现在已经成为分析化学学科中的一个紧要的分支。
在人类进入新时代之际，人们面临着在信息科学、生命科学、材料科学、环境科学等领域的快速进展的挑战，在这些领域人才的需求成为国家高度进展的至关紧要的因素。
色谱柱在使用前，可以进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行，只有这样，测得的结果才有可比性。
我们在对色谱柱使用前进行测试以后，我们要依据不同的情况对色谱柱进行保养：①反相色谱柱每天试验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应当在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必需存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
色谱柱安全操作保养规定
色谱柱安全操作保养规定色谱柱是现代化学分析技术中重要的一种分离技术，常用于药物研发、环境监测、食品安全等领域。
色谱柱的质量和性能对分析结果的准确性和可靠性有着重要的影响。
在工作过程中，色谱柱需要受到严格的保养和操作，以保证色谱柱的稳定和经济寿命，提高分析数据的可靠性和准确性。
本文主要介绍色谱柱的安全操作保养规定，旨在帮助广大科研工作者更加规范地操作色谱柱。
一、安全操作规定色谱柱操作时需要注意以下几点：1.前后工作环境准备在进行色谱柱操作前后，请保持工作环境整洁，放置好相关的试剂和仪器设备。
特别是颜色鲜艳、刺激性较强的试剂，请选择专用的安全柜或防护屏，以避免对工作人员身体健康造成影响。
同时，在使用色谱柱时，请勿将其移动到不适合操作的位置，以免造成柱子裂开等安全事故。
2.样品前处理与装柱尽量使用样品前处理技术，减少样品中杂质、微量成分等对色谱柱的损害。
在进行装柱时，应仔细查看色谱柱的包装和操作手册，按照规定方法进行装柱。
在操作中应注意色谱柱的端口是否连接稳定，柱底以及柱壁是否均匀受力。
3.操作过程中的安全保障在实验过程中，应遵守相关的安全操作规定。
操作员必须穿戴适当的防护设备，如实验服、手套、护目镜等。
注意不得任意更改色谱柱的温度、流量等参数，以免造成安全事故。
4.紧急情况处理在发生紧急情况时，应熟悉急救处理方法。
当色谱柱出现渗漏、裂开等情况时，请立即采取相应的安全措施，如关闭气源、电源等设备。
二、色谱柱保养规定为了延长色谱柱的使用寿命、保证分析数据的准确性，必须对色谱柱进行定期的保养。
1.保持干燥色谱柱不能长时间置于潮湿的环境中，应置于干燥的环境里存储。
使用色谱柱时，要确保样品和试剂的干燥，避免颜色过深的样品进入色谱柱。
2.定期清洗色谱柱在使用过程中会积累一定的杂质和残留物，因此需要定期清洗。
清洗时，请不要使用任何有机溶剂、硅油等化学试剂，只能使用纯水或等体积的甲醇/水溶液进行清洗。
清洗时要注意控制流速，避免对色谱柱造成二次污染。
色谱柱 操作规程
色谱柱操作规程
《色谱柱操作规程》
一、使用前准备
1.1 检查色谱柱是否有损坏或污染
1.2 准备好色谱柱需要用到的溶剂和试剂
1.3 准备好色谱仪器和相关设备
二、装柱操作
2.1 检查柱子的填料是否均匀，如有不均匀情况需重新填料2.2 使用正确的柱子连接件连接色谱柱和色谱仪
2.3 用适当的方法装载样品进入色谱柱
2.4 在装载样品之前，进行柱子的平衡操作，以确保实验的准确性
三、流动相操作
3.1 准备好流动相，确保流动相的纯度和稳定性
3.2 用注射器将流动相缓慢地注入色谱柱中，直到柱子完全充满
3.3 确保流动相的压力和流速在正常范围内
四、运行及维护
4.1 启动色谱仪器，设置好运行参数
4.2 监控运行过程中的色谱柱压力和流速
4.3 如果发现异常情况，立即停止运行并检查色谱柱及相关设备
4.4 实验结束后，用适当的方法对色谱柱进行保养和清洗，以
确保下次使用时的准确性和稳定性
五、安全注意事项
5.1 操作过程中要严格遵守化学品的安全操作规程
5.2 避免色谱柱受到外部物质的污染和损坏
5.3 注意色谱柱及相关设备的维护和保养，确保使用安全和稳定性
六、记录和报告
6.1 在操作过程中要及时记录实验数据和观测结果
6.2 对实验结果进行分析和总结，撰写实验报告
6.3 如有必要，将实验结果提交并交流给相关部门或同行
以上即是《色谱柱操作规程》，希望能够对使用色谱柱的实验人员有所帮助。
色谱柱的使用管理方法
色谱柱的使用管理方法色谱柱是色谱技术中的关键组成部分，用于分离混合物中的化合物。
为了确保色谱柱的有效使用和延长其寿命，需要采取一些管理方法。
以下是色谱柱使用管理的一些建议：1.适当的操作和维护：操作人员应该接受专业的培训，了解正确的色谱柱使用方法。
保持色谱系统的良好维护，包括定期检查和清洁。
2.样品预处理：在进样之前，对样品进行适当的预处理，如过滤、稀释或提取，以防止样品中的杂质损害色谱柱。
3.使用适当的溶剂和流动相：选择与分析目标相适应的溶剂和流动相，以减少对色谱柱的影响。
使用纯度高的溶剂，并在必要时进行去离子水处理。
4.避免过高的流速：避免使用过高的流速，以减少色谱柱的磨损和提高分辨率。
请参考制造商的建议，确定适当的流速范围。
5.避免过高的温度：控制色谱柱的温度，避免过高的温度，以防止柱内物质的蒸发和减缓柱寿命。
6.使用保护柱：在进样前使用保护柱，以保护主色谱柱，延长其使用寿命。
保护柱通常易于更换和成本相对较低。
7.正常使用和保管：避免碰撞和振动，确保色谱柱处于垂直位置。
当不使用时，将色谱柱存储在适当的条件下，以防止污染。
8.定期性能评估：定期对色谱柱进行性能评估，例如使用标准物质进行系统透明度和分辨率的测试。
根据性能评估的结果，可以及时调整操作条件或更换色谱柱。
9.记录使用历史：记录每次使用的详细信息，包括溶剂、流速、温度等条件。
这有助于分析柱的使用历史，及时发现问题并采取纠正措施。
10.定期更换：尽管色谱柱的使用寿命取决于多种因素，但定期更换柱是确保分析结果准确性和重复性的关键步骤。
根据制造商的建议和实际使用情况，制定定期更换计划。
通过遵循这些管理方法，可以最大限度地提高色谱柱的使用寿命，确保色谱分析的准确性和可靠性。
高效液相色谱柱注意事项
高效液相色谱柱注意事项高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的调配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分别成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱柱注意事项：1、柱效和保护柱拿到一根新柱时，肯定要先看其使说明，然后测柱效，定期检测柱效，保存在新色谱柱上得到的色谱图，并记录条件，定期检测仪器的谱带展宽。
若应用于在线监测，应对色谱柱供应在线的物理保护和化学保护，例如采取安装在线过滤器，自装填料保护柱和预装保护柱等。
在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计，优点是基本不影响柱效，在需要高柱效的时候常用，常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。
缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效，特别是在用微柱时，常用的是普通自装填料的保护柱。
近新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱，它的特点是高质量、高效填料、加添分析柱效、对脏样品载荷本领大，能延长保护柱的寿命，手可拧紧接头，安装时不需要工具，省时省，可换芯式设计，能采用各种不同的填料，重要适用于特别脏特别多而杂的样品本底，例如生化样品，环境样品和食品等，或者不想做太多的圃相萃取，不想降低柱效果等情况。
2、清洗对所做的样品要有充分的了解，用对该样品洗脱本领强的流动相清洗，对于硅胶柱，先用甲醇洗去极性杂质，然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100—20OraL依次活化，对于键和相柱，一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗，每种色谱柱有特定的清洗方法，肯定要看其使用说明。
3、存放存放前除掉杂质和盐，采用合适的存放溶剂，避开色谱柱床的干枯，避开机械振动，防止细菌生长，注意存放的温度。
柱色谱注意事项
柱色谱注意事项柱色谱是一种常用的分离和纯化技术，具有高效、准确、可重复性好等优点。
为了确保柱色谱的正常运行和提高分离效果，有几个需要注意的事项。
首先，要选择合适的柱。
柱子的选择应根据样品的性质和分离要求来确定。
常见的柱子有反相、离子交换、凝胶过滤、糖化柱等。
在选择柱子时要考虑到样品的溶解度、分离的目的、样品量等因素。
其次，要注意样品的前处理。
样品的前处理包括溶解、过滤、稀释、洗脱等过程。
样品必须溶解在适当的溶剂中，以避免柱子堵塞。
如果样品中有杂质，可以通过过滤或洗脱的方法去除。
再次，需要将柱子正确连接到系统中。
柱子通常由进样口、色谱柱和检测器等组成。
在连接之前，要确保柱子和连接部件都是干净的。
正确安装柱子并且密封好连接件，以免发生泄漏。
同时，要检查流路是否完整，避免死角。
此外，要控制流速和压力。
流速和压力是影响分离效果的重要因素。
流速过大会使分离不充分，流速过小会延长分析时间。
因此，要根据实际情况调整流速和压力，以获得最佳的分离效果。
另外，要定期检查和维护柱子。
柱子在使用过程中会发生老化、堵塞等问题，因此需要进行定期检查和维护。
检查柱子的状态，如是否有泄漏、堵塞等问题，并及时更换或清洗柱子。
最后，要记录实验数据和结果。
实验数据和结果的记录是柱色谱分析的重要部分，可以用来追踪实验过程和结果的准确性。
要注意将记录的数据整理归档，方便后续的分析和验证。
综上所述，柱色谱是一种非常有用的分离和纯化技术，在使用过程中需要注意选择合适的柱子、进行样品的前处理、正确连接柱子、控制流速和压力、定期检查和维护柱子，并记录实验数据和结果。
只有这样，才能保证柱色谱的正常运行和获得准确的分离效果。
色谱柱的维护和使用规范 色谱柱解决方案
色谱柱的维护和使用规范色谱柱解决方案色谱柱的维护 1、使用保护柱 2、大多数柱的PH稳定范围是2—7.5，尽可能在此范围内使用 3、避开流动相构成及极性有猛烈变化 4、流动相使用前必需经脱气和过滤处理 5、假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，要在试验完毕将柱子冲洗干净 6、压力上升时更换保护柱HPLC色谱柱的良好使用规范 1.每次使用前,用0.45um/0.22um 的膜过滤流动相 2.运输中或长期保存过程中变干的色谱柱需要用甲醇/乙腈完全润湿 3.样品分别时确定要考虑溶剂对样品的溶解性及分别的影响 4.对样品要依据性质进行预处理 5.处理好PH,温度,等因素对柱子的影响 6.尽可能的使用现配的流动相,注意防止流动相长菌等不良现象发生7.定期的用合适溶剂,合适程序对柱子进行再生8.储存色谱柱时，应将缓冲盐置换干净，并用高比例的有机溶剂饱和色谱柱（乙腈/甲醇）9、避开外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或强力震动色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项紧要指标，混合物能否在色谱柱中得到分别，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填情形等因素有关。
那么，如何有效地提高色谱柱的柱效呢？在确定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。
一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分别效能愈好。
如何提高HPLC柱效？要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
以下介绍了几种国际上流行的测量和计算柱效值的方法。
1、提高液相色谱柱柱效的方法要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
（1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
（2）削减固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
（3）减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
（4）选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
（5）适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分别度也随之降低。
（6）尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生注意事项：1.柱子的贮存：液相色谱柱在非使用状态下应尽量避免暴露在空气中，空气中的灰尘和湿气会影响柱子的性能和寿命。
因此，柱子应存放在其原始包装中，并防止受潮。
2.近似与探头：在使用之前，必须对柱子和探头进行连接和融合。
在操作中，要确保柱子和探头之间无泄漏，否则会影响分析的准确性。
3.流速控制：流速是液相色谱分析中很关键的一点。
流速过高会导致柱子产生过高的压力，甚至超过其承载能力，从而导致柱子破裂。
因此，在进行液相色谱分析时必须要控制好流速。
4.保持温度稳定：液相色谱柱对温度敏感，温度的变化会影响分离效果。
因此，在液相色谱分析中必须保持柱子的温度稳定。
5.避免样品堵塞：柱子中的微孔会很容易受到样品的堵塞，导致柱子无法正常使用。
因此，必须确保样品中无固体杂质，并且在注射之前先过滤样品，以避免样品堵塞柱子。
柱子再生方法：1.水洗法：将柱子安装在逆相液相色谱系统中，用纯水进行洗脱，如果必要可以加入少量的乙酸、甲酸或其他有机溶剂进行洗脱。
该方法适用于非极性化合物的柱子。
2.有机溶剂洗脱法：将柱子连同柱底栓安装在逆相液相色谱系统中，用纯有机溶剂或者含有有机溶剂的溶液进行洗脱。
该方法适用于极性化合物的柱子。
3.极性液洗法：将柱子置于极性液相溶剂中，如醇类、酸类或含有酸性成分的有机溶剂中进行洗脱。
该方法适用于阴离子柱等需要去除离子物质的柱子。
4.特殊洗脱法：对于一些具有独特功能的柱子，如固体相萃取柱、色譜柱等，可以根据其特殊性质采用相应的洗脱方法。
除了以上的再生方法，还有一些更加复杂的再生方法，如使用酸碱溶液、有机溶剂进行再生等。
用户在使用液相色谱柱时，应根据柱子的具体情况及实际分析样品的特性选择合适的再生方法。
总之，液相色谱柱的正确使用和再生对于高效可靠地进行液相色谱分析具有重要影响。
使用者应严格按照操作规范进行操作，并根据不同柱子的特性进行合适的柱子再生方法，以延长柱子的使用寿命和保证分析的准确性。
柱色谱的原理及应用实验注意事项
柱色谱的原理及应用实验注意事项一、柱色谱的原理柱色谱是一种常用的分离技术，主要基于样品在固定相和移动相之间的相互作用力的不同来实现分离。
柱色谱主要包括气相色谱（GC）和液相色谱（LC）两种类型。
1. 气相色谱（GC）1.1 原理概述气相色谱是通过气态载气流动相和固态柱填充物之间的相互作用力不同，实现样品分离的一种色谱技术。
其中，固态柱填充物通常由具有不同极性的固体材料制成，比如分子筛、聚合物等。
1.2 分离机制在气相色谱中，样品首先被注入到柱上，然后通过供气系统将载气流动相送入柱中。
不同组分在固态柱填充物上的相互作用力会导致它们以不同的速度通过柱，从而实现分离。
2. 液相色谱（LC）2.1 原理概述液相色谱是通过液态载流动相和固态或液态柱填充物之间的相互作用力不同，实现样品分离的一种色谱技术。
固态柱填充物通常由具有不同极性的固体材料制成，如硅胶、金属氧化物等。
2.2 分离机制在液相色谱中，样品被溶解在流动相中，然后通过泵系统被送入柱中。
样品与固态柱填充物之间的相互作用力不同会导致不同组分以不同的速度通过柱，从而实现分离。
二、柱色谱的应用实验注意事项进行柱色谱实验时，需要注意以下事项：1.选择合适的柱和固定相：–根据分析目的和样品性质选择合适的柱类型，如C18柱、阳离子交换柱等。
–要确保固定相的质量稳定，避免固定相破碎或松动。
2.优化流动相的组成：–流动相的选择要根据样品特性进行优化，包括溶剂极性和pH 值等。
–流动相的组成要保证溶剂纯度，避免杂质对分离的影响。
3.控制流速：–流速的选择要根据柱的规格和样品的特性进行，过高的流速可能导致分离不良。
–控制流速的变化要平稳，避免对柱填充物造成不可逆的损害。
4.操作温度：–根据样品的性质和分离需求，选择适当的操作温度，如某些物质需要在高温下进行分离。
–控制温度的变化要平稳，避免对柱填充物造成影响。
5.样品预处理：–样品的前处理对柱色谱分离的准确性和重复性有很大影响，可能需要进行样品的提取、净化和浓缩等步骤。
色谱柱的维护和使用规范
色谱柱的维护和使用规范
色谱柱的维护
1、使用保护柱
2、大多数柱的PH稳定范围是2-7.5，尽可能在此范围内使用
3、避免流动相组成及极性有剧烈变化
4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理
5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，要在实验完毕将柱子冲洗干净
6、压力升高时更换保护柱
HPLC色谱柱的良好使用规范
1.每次使用前,用0.45um/0.22um的膜过滤流动相
2.运输中或长期保存过程中变干的色谱柱需要用甲醇/乙腈完全润湿
3.样品分离时一定要考虑溶剂对样品的溶解性及分离的影响
4.对样品要依据性质进行预处理
5.处理好PH,温度,等因素对柱子的影响
6.尽可能的使用现配的流动相,注意防止流动相长菌等不良现象发生
7.定期的用合适溶剂,合适程序对柱子进行再生
8.储存色谱柱时，应将缓冲盐置换干净，并用高比例的有机溶剂饱和色谱柱（乙腈/甲醇）
9、避免外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或强力震动。
简述色谱柱的使用注意事项
简述色谱柱的使用注意事项色谱柱是色谱实验中最重要的部分，它的质量和正确使用对实验结果的准确性和可靠性起着至关重要的作用。
下面是色谱柱使用的一些注意事项：1.储存条件：色谱柱应储存在干燥、阴凉和避光的地方，远离酸、碱、有机溶剂和氧化剂。
避免温度过高或过低，以防止柱体损坏或性能下降。
柱体不能长时间处于干燥状态，以免介质中的水分流失。
在存放时，柱体要由塑料袋或者塞子封口，以防止灰尘和杂质进入。
2.洗脱剂的选择：根据实验需要和待分离物质的性质，选择合适的洗脱剂。
洗脱剂的选择应考虑到洗脱剂的溶解力、缩短洗脱时间的能力、可用于检测的波长等因素。
根据实验需要，可以选择无机盐溶液、有机溶剂、酸或碱溶液等作为洗脱剂。
3.柱温的控制：对于一些需要控制温度的色谱实验，应使用恒温槽或恒温箱来控制柱温。
柱温的控制需要考虑柱子的温度稳定性和色谱介质的特性。
4.流速的控制：流速是影响色谱分离效果的重要因素之一、流速过快可能导致分离不彻底，流速过慢则会影响分析时间。
因此，根据待测物质的性质和实验要求，要选择合适的流速进行实验。
5.工作压力的控制：在液相色谱实验中，应注意控制适当的工作压力。
过高的工作压力可能导致填充物受损，严重时甚至会破损柱壁。
过低的工作压力会导致流速减慢，从而影响实验结果。
6.保护色谱柱：为了延长色谱柱的使用寿命和保持其分离能力，应在样品进样前使用预柱保护色谱柱。
预柱是一种具有相同或相似填充物的小柱，在进样前，样品会先流过预柱，可以去除样品中的杂质和保护色谱柱。
7.避免混合使用：为了保证实验结果的准确性，避免不同种类的色谱柱混合使用。
不同种类的色谱柱填充物对待测物质的选择性和分离效果可能存在差异，混用可能导致分离不完全或无法分离。
8.柱后的处理：实验结束后，应及时清洗色谱柱，防止残留物堵塞填充物。
柱后处理的方法可以根据填充物的不同，选择适当的处理液进行后处理。
9.柱的流向：根据色谱柱的设计和厂家提供的说明，正确安装柱子的流向。
色谱柱的使用注意事项及维护
色谱柱的使用注意事项及维护色谱柱是色谱分析中最重要的部分之一、它起着分离和保留样品成分的作用，对于保证色谱分离效果和分析结果具有决定性的影响。
因此，在使用色谱柱时，需要注意以下几个方面的问题：选择合适的柱、正确操作和维护柱。
选择合适的柱选择合适的柱是保证色谱分离效果和分析结果准确的首要步骤。
需要根据分析目的、样品特性和分离要求等因素，选择合适类型和规格的柱。
1.根据分析目的选择柱类型：常见的色谱柱包括气相色谱柱、液相色谱柱和离子色谱柱等。
根据需要进行样品分析的特性，选择合适类型的柱，如分离挥发性物质可选择气相色谱柱，分离非挥发性物质可选择液相色谱柱。
2.根据样品特性选择柱材质：色谱柱的柱材质会对分离效果产生影响，如亲水性样品可选择C18柱，疏水性样品可选择SiO2柱等。
3.根据分离要求选择柱规格：柱的长度、内径和填料颗粒大小等参数会对分离效果产生影响，一般情况下，柱越长、内径越小和填料颗粒越细，分离效果越好，但分析时间会相应延长。
正确操作柱正确操作色谱柱是保证色谱分析结果准确的重要保障。
以下是一些常见的操作注意事项：1.小心安装柱：柱的安装需要小心，避免损坏柱螺母和柱连接口。
同时，注意柱的方向，确保样品进入和流出的方向正确。
2.注意样品预处理：在进样前，需要对样品进行适当的预处理，如样品的提取、浓缩、稀释等。
避免进入样品中的杂质和残留物影响分离效果。
3.合适的流速：根据柱的规格和样品特性，选择适当的流速和进样量。
流速过高会导致分析结果不准确，流速过低则分析时间过长。
4.清洗柱：使用前后需要对柱进行适当的清洗。
首次使用柱时，需要进行季戊四醇样品的预柱包，以去除树脂中残留的离子。
使用结束后，需要用适当溶剂或移液器进行冲洗，清除样品和杂质。
维护柱良好的柱维护是保证色谱柱使用寿命和分析效果的关键。
以下是一些常见的柱维护注意事项：1.避免样品残留：在每次使用完毕后，需要充分清洗柱，避免样品残留导致柱堵塞和污染。
色谱柱的使用和维护注意事项
色谱柱的使用和保护注意事项色谱柱的正确使用和保护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至破坏。
在色谱操作过程中，需要注意以下问题，以保护色谱柱。
1、防止压力和温度的急巨变化及任何机械震动。
温度的忽然变化或许使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填补状况；柱压的忽然高升或降低也会激动柱内填料，所以在调节流速时应当迟缓进行，在阀进样时阀的转动不可以过缓( 如前所述 )。
2、应渐渐改变溶剂的构成，特别是反相色谱中，不该直接从有机溶剂改变成所有是水，反之亦然。
3、一般说来色谱柱不可以反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才能够反冲除掉留在柱头的杂质。
不然反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适合的流动相( 特别是pH)，以防止固定相被破坏。
有时能够在进样器前方连结一预柱，剖析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入剖析柱以前早先被硅胶 " 饱和 " ，防止剖析柱中的硅胶基质被溶解。
5、常常用强溶剂冲刷色谱柱，消除保存在柱内的杂质。
在进行冲洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20 倍左右。
6、保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防备溶剂挥发干燥。
绝对严禁将缓冲溶液留在柱内静置或更长时间。
7、色谱柱使用过程中，假如压力高升，一种可能是烧结滤片被拥塞，这时应改换滤片或将其拿出进行冲洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
在后两种状况发生时，当心拧开柱接头，用干净小钢将柱头填料拿出1-2mm 高度 ( 注意把被污染填料取净) 再把柱内填料整平。
然后用适合溶剂润湿的固定相 ( 与柱内同样 ) 填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。
这样办理后柱效能获得改良，可是很难恢复到新柱的水平。
柱子无效往常是柱端部分，在剖析柱前装一根与剖析柱同样固定相的短柱 (5-30mm) ，能够起到保护、延伸柱寿命的作用。
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柱层析使用技巧常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
一：柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。
以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。
特别是在容易分解的样品的分离中适用。
压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
关于柱子的尺寸应该是粗长的最好。
柱子长了，相应的塔板数就高。
柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。
试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。
而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。
现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。
如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf 在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。
关于无水无氧柱适用于对氧，水敏感，易分解的产品，可以湿柱，也可以干柱。
不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，毕竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。
也是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。
至于是加压、常压、减压，随需而定。
因为是schlenk操作，所以点板是个问题，如果样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。
如果样品无色，只好准备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。
像我以前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集到。
无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。
因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很容易是样品分解，特别是金属有机化合物和含磷化合物。
而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。
听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。
哪位做过可以提出来大家参详参详。
四：关于湿法、干法上样湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。
很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。
可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的吸附饱和，而样品本身又是比较好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，如果不能重结晶，那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。
有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。
样品和硅胶的量有一种说法是1：1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上）。
溶剂的选择当然是最便宜，最安全，最环保的了。
所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。
文献中有写用正己烷的，太贵了，除非特别需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因为极性很小，有时还是非它不可。
乙醚也可以用，但是就是容易睡觉，注意保持清醒别让溶剂流干了，那样柱子也就不爽了。
二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。
甲醇据说能溶解部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。
其他的溶剂用的相对较少，要依个人的不同需要选择了。
由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。
经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。
当然过原料时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。
另外溶剂在过柱子后最好也回收使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，缺点是要消耗一定的人工。
这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越来越大了。
在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。
六：关于操作问题1、装柱柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。
干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。
装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。
书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。
当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。
但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废！2、加样用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。
加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（2～4cm就够了），再加压，这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行。
3、淋洗剂的选择感觉上要使所需点在rf0.2～0.3左右的比较好。
不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子就用那种极性，如果rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的状态，可以通过公式的比较：0.6/0.8一次的分离度，肯定不如（0.2/0.3）的三次方或四次方大。
4、样品的收集用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。
所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话，就不容易流出。
这样就会发生，后面的点先出，而前面的点后出。
这时可以采用氧化铝作固定相。
另外，收集的试管大小要以样品量而定，特别是小量样品，如果用大试管，可能一根就收到了三个样品。
如果都用小试管那工作量又太大。
5、最后的处理柱分后的产品，由于使用了大量的溶剂，其中的杂质也会累积到产品中，所以如果想送分析，最好用少量的溶剂洗涤一下，因为大部分的杂质是溶在溶剂里的，一洗基本就没了，必要时进行重结晶。
另外，再过柱的时候，有时会出现气泡，一是和使用的溶剂有关，如果是易挥发的溶剂，如乙醚、二氯甲烷等，在室温稍高的情况下，很容易出现这种现象，因此，在室温高的时候，可以选择沸点较高，挥发相对小的溶剂。
还有，使用混合溶剂时，使用的两种溶剂的沸点应该相差不大，如：乙酸乙酯和石油醚(60~90).硅胶的预处理我们以浓盐酸浸泡硅胶14小时，然后用蒸馏水洗涤硅胶4次后，将起进行减压抽滤，后不断加蒸馏水冲洗。
在1小时之后，抽滤的水呈中性，但仍然含有氯离子。
经过4小时不断的冲洗才使得抽滤液中基本不含氯离子。
晾干一周后，在110℃烘箱中活化2小时。
活化后的硅胶加石油醚浸泡并搅拌均匀。
在装柱时，宜使用口径较大的玻璃漏斗置于层析柱上部，注入1/2高的石油醚，打开下部活塞，然后尽量均匀地将硅胶倾入漏斗，这样可以防止层析柱中形成断层(这一步是实验的关键步骤)。
装柱装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂"走柱子"，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结实。
接着是用淋洗剂"走柱子"，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。
干法装柱较方便，但最大的缺陷在于"走柱子"时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲烷更为明显。
虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平整地通过，当然也就谈不上分离了。
解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、一定要用较多的溶剂"走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去压力。
也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层不再整齐。
但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。
上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。
如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。
干法上样较麻烦，但可以保证样品层很平整。
湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入。
然后用少量洗涤后，再加入。
湿法较方便，熟手一般采用此法。
干法装柱就是不加溶剂直接将硅胶加入柱内，将拌样的硅胶洒于其上，然后在上面加一层保护硅胶和棉花，之后，将洗脱液倒入其内。