备考浙大博士分子生物学复习题
分子生物学复习题(含答案)
分子生物学复习题(含答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、有关 SNP 位点的描述,不正确的是A、生物芯片技术可提高 SNP 位点的检测准确性B、单个 SNP 位点信息量大,具广泛的应用前景C、在整个基因组中大概有 300 万个 SNP 位点D、被称为第三代 DNA 遗传标志E、SNP 位点是单个核苷酸的变异正确答案:A2、硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、高结合力B、非共价键结合C、本底低D、脆性大E、共价键结合正确答案:C3、关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案:E4、目前白血病的发病机制的研究主要集中的领域不包括A、融合基因与白血病B、白血病复发的后天因素C、白血病发病的先天因素D、遗传学疾病及白血病发病的后天因素E、基因多态性与白血病正确答案:B5、下列属于抑癌基因的是( )A、c-erb-2B、mycC、sisD、p53E、ras正确答案:D6、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用 mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT),有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便,成为探针的重要来源正确答案:E7、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、探针B、杂交C、变性D、复杂性E、复性正确答案:B8、SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案:D9、DNA 指纹分子的遗传性基础是A、连锁不平衡B、MHC 的多样性C、DNA 的多态性D、反向重复序列E、MHC 的限制性正确答案:C10、以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时,若能与突变探针及正常探针接合,则该样本为A、正常人B、不能确定C、纯合体患者D、杂合体患者E、携带者正确答案:E11、目前细菌表型分型的方法不包括A、血清学分型B、分子分型C、噬菌体分型D、生化分型E、抗生素敏感性分型正确答案:B12、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的 DNA 片段D、克隆于真核载体的 DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案:E13、定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得:A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案:A14、基因诊断对下列哪些疾病最具有确切的临床诊断意义A、肿瘤B、染色体疾病C、畸形D、单基因遗传病E、多基因遗传病正确答案:D15、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案:E16、操纵子结构不存在于:A、原核生物基因组中B、细菌基因组中C、大肠杆菌基因组中D、真核生物基因组中E、病毒基因组中正确答案:D17、分离纯化核酸的原则是( )A、保证一定浓度B、保持一级结构完整并保证纯度C、保持二级结构完整并保证纯度D、保持空间结构完整E、保证纯度与浓度正确答案:B18、关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案:E19、未知突变的检测,下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案:D20、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案:B21、有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域,通常不被转录D、形式为(CA)n/(TG)n、(AG)n、(CAG)n 等E、又称为可变数目串联重复序列(VNTR)正确答案:D22、关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能C、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因D、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案:A23、决定 PCR 反应特异性的是A、模板B、dNTPC、引物D、缓冲液E、Taq DNA 聚合酶正确答案:C24、关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是:A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案:E25、可作为分子遗传标记的是A、HLAB、单拷贝序列C、高表达蛋白D、RFLPE、染色体正确答案:D26、为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用,最好( )A、将核酸溶解保存B、将核酸小量分装保存C、将核酸冻干保存D、将核酸沉淀保存E、将核酸大量保存正确答案:B27、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测,避免浪费C、检测快速准确D、同时检测 TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案:E28、Sanger 双脱氧链终止法使用的链终止物是A、α-32P-dNTPB、dNTPC、ddNTPD、α-35S-dNTPE、NTP正确答案:C29、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、肺炎衣原体B、豚鼠衣原体C、沙眼衣原体D、鹦鹉热衣原体E、鼠衣原体正确答案:C30、实时荧光 PCR 中,GC 含量在 20%~80%(45%~55%最佳),单链引物的最适长度为A、35~50bpB、15~20bpC、5~70bpD、5~20bpE、70~90bp正确答案:B31、Southern 杂交通常是指( )A、DNA 与 RNA 杂交B、DNA 与 DNA 杂交C、RNA 与 RNA 杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA 与蛋白质杂交正确答案:B32、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称A、杂交B、变性C、复杂性D、复性E、探针正确答案:D33、第二代测序技术不能应用于A、从头测序、重测序B、转录组及表达谱分析C、小分子 RNA 研究D、个体基因组测序和 SNP 研究E、直接测甲基化的 DNA 序列正确答案:E34、目前已知感染人类最小的 DNA 病毒( )A、HIVB、HPVC、HBVD、HAVE、HCV正确答案:C35、下列方法中不属于 RNA 诊断的是A、Northern blotB、RNA 斑点杂交C、基因芯片D、mRNA 差异显示 PCR 技术E、逆转录 PCR正确答案:C36、RNA/RNA 杂交体的 Tm 值一般应增加A、1-5℃B、5~10℃C、10~15℃D、15~20℃E、20~25℃正确答案:E37、下列属于核苷酸三联体重复序列发生高度重复所致的是A、珠蛋白生成障碍性贫血B、脆性 X 综合症C、迪谢内肌营养不良D、血友病E、镰状细胞贫血正确答案:B38、逆转录 PCR 扩增最终产物的特异性由A、随机引物决定B、oligo-d(T)决定C、PCR 扩增的特异引物决定D、扩增效率决定E、逆转录酶决定正确答案:C39、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案:D40、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、症状前诊断D、携带者诊断E、耐药基因检测正确答案:A41、乳腺癌分子生物学检测的意义不包括A、预测早期乳腺癌复发、转移的风险B、筛选易感人群C、帮助减轻化疗的不良反应D、反映肿瘤的生物学行为E、筛选适合内分泌、化疗及靶向治疗的患者正确答案:C42、线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话”,相互影响,相互协调正确答案:A43、STR 法医鉴定的基础是A、孟德尔遗传定律B、蛋白质空间结构C、基因扩增技术D、碱基配对原则E、基因多态性正确答案:A44、以下哪种酶可用于 PCR 反应( )A、KlenowB、HindⅢC、Taq DNA 聚合酶D、RNaseE、Dnase正确答案:C45、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是A、NC 膜B、尼龙膜C、化学活性膜D、滤纸E、PVC 膜正确答案:E46、Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:A47、在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、表达异常B、基因结构变化未知C、点突变D、基因片段缺失E、基因片段插入正确答案:B48、关于 mtDNA 非编码序列,描述正确的是A、不参与 mtDNA 的复制、转录等,属于“无用”信息B、是高度重复序列C、占整个 mtDNA 的 15%,比例较大D、mtDNA 中有两段非编码区E、位于 mtDNA 的轻链正确答案:D49、变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案:E50、以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基正确答案:D51、关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用引物步移法C、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用随机克隆法D、大片段未知序列 DNA 测序,可以直接测序E、大规模基因组计划,可以使用多个测序策略正确答案:E52、组织 DNA 提取中,EDTA 的作用是A、抑制 DNaseB、沉淀 DNAC、减少液体表面张力D、抑制 RNaseE、去除蛋白质正确答案:A53、寡核苷酸探针的 Tm 简单计算公式为A、Tm=4(G+C)+2(A+T)B、Tm=2(G+C)+4(A+T)C、Tm=6(G+C)+4(A+T)D、Tm=2(G+C)+6(A+T)E、Tm=6(G+C)+2(A+T)正确答案:A54、对于 BRCA 基因突变的检测,以下最常用的方法是A、变性高效液相色谱法B、单链构象多态性分析C、变性梯度凝胶电泳D、异源双链分析E、直接 DNA 序列分析正确答案:E55、下列关于人类遗传病的叙述不正确的是A、人类遗传病是指由于遗传物质改变而引起的疾病B、遗传性疾病既可以直接诊断,也可以间接诊断C、人类遗传病包括单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病D、21-三体综合症患者体细胞中染色体数目为 47 条E、单基因病是指受一个基因控制的疾病正确答案:E56、第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR 基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2 基因正确答案:A57、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案:C58、关于 PCR-RFLP 错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR 产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR 扩增正确答案:D59、下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性:A、随机扩增 DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案:B60、点/狭缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、用于基因定位分析D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案:A61、DNA 提取中不能有效去除蛋白质的是A、酚/氯仿抽提B、SDSC、高盐洗涤D、蛋白酶 KE、RNase正确答案:E62、宫颈癌与 HPV 病毒感染密切相关,宫颈癌细胞产生的机制是A、HPV DNA 大量复制B、原癌基因被激活C、病毒增殖导致细胞破裂D、HPV 导致细胞凋亡E、病毒蛋白在细胞内堆积正确答案:B63、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8,可使比值升高的是:A、蛋白质B、酚C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案:C64、关于 TaqMan 探针技术的描述,不正确的是A、R 基团与 Q 基团相距较远,淬灭不彻底,本底较高B、易受到 Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析,减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案:C65、基因芯片技术的本质是( ):A、核酸分子杂交B、蛋白质分子杂交技术C、连接酶链反应D、DNA 重组技术E、酶切技术正确答案:A66、编码 HIV 衣壳蛋白的是A、env 基因B、gag 基因C、vif 基因D、tat 基因E、pol 基因正确答案:B67、HIV 核酸类型是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案:D68、检测靶序列是 DNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案:A69、HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAD、ssDNAE、-ssRNA正确答案:A70、关于 Sanger 双脱氧链终止法叙述错误的是A、每个 DNA 模板需进行一个独立的测序反应B、需引入双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)作为链终止物C、链终止物缺少3’-OH,使链终止D、测序反应结果是产生 4 组不同长度的核苷酸链E、高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离仅差一个核苷酸的单链 DNA 正确答案:A71、PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案:E72、以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案:E73、结核杆菌的分子生物学检验临床意义中不包括A、早期诊断B、耐药检测C、鉴别诊断D、疗效评价E、快速诊断正确答案:A74、目前被 DNA 自动化测序技术广泛采用的酶是A、大肠杆菌 DNA 聚合酶ⅠB、Klenow 片段C、测序酶D、耐热 DNA 聚合酶E、限制性内切核酸酶正确答案:D75、结构基因突变不包括A、基因表达异常B、基因点突变C、基因扩增D、基因缺失E、基因重排正确答案:A76、点突变引起的血友病 A 的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案:E77、大肠杆菌类核结构的组成是A、双链 DNAB、RNAC、蛋白质+DNAD、支架蛋白E、RNA+支架蛋白+双链 DNA正确答案:E78、作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理,其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案:A79、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、已明确母亲为携带者的婴儿B、没有 FraX 家族史C、发育迟缓或自闭症的患者D、未诊断的 MR 家族史E、有 FraX 体格或性格阳性征象者正确答案:B80、关于人工合成的寡核苷酸探针,下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案:E81、下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案:D82、下列几种 DNA 分子的碱基组成比例,哪一种的 Tm 值最高( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案:A83、关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用 DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d(T)理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案:E84、一个完整的生物芯片配套软件不包括A、统计分析软件B、生物芯片的图像处理软件C、画图软件D、生物芯片扫描仪的硬件控制软件E、数据提取软件正确答案:C85、线粒体疾病的遗传特征是A、女患者的子女约 1/2 发病B、母系遗传C、发病率有明显的性别差异D、交叉遗传E、近亲婚配的子女发病率增高正确答案:B86、在人类基因组中,编码序列占的比例为A、23%B、1.5%C、3%D、21%E、5%正确答案:B87、乙型肝炎病毒的核酸类型是( )A、双股 DNAB、负股 DNAC、正股 DNAD、单股 DNAE、DNA-RNA 二聚体正确答案:A88、对于相同大小的核酸片段,最快的转移方法是A、电转移B、真空转移C、毛细管电泳D、向下虹吸转移E、虹吸转移正确答案:B89、延伸的温度通常为A、95℃B、55℃C、37℃D、72℃E、25℃正确答案:D90、在 pH 为下述何种范围时,Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案:A91、标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、复性B、复杂性C、杂交D、变性E、探针正确答案:E92、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用( ):A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案:E93、与耳聋有关的最主要的 mtDNA 突变是A、点突变B、插入或缺失C、大片段重组D、拷贝数变异E、异质性突变正确答案:A94、荧光原位杂交的描述正确的是A、快速确定是否存在目的基因B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:C95、第三代测序技术的最主要特征:A、对单分子 DNA 进行非 PCR 的测序B、对 SNP 进行非 PCR 的测序C、高通量和并行 PCR 测序D、直接分析 SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP 研究正确答案:A96、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案:B97、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案:C98、生物芯片根据芯片上固定的探针种类不同可分为几种,不包括:A、DNA 芯片B、蛋白质芯片C、细胞芯片D、组织芯片E、测序芯片正确答案:E99、DNA 芯片的固相载体不可以用A、半导体硅片B、玻璃片C、滤纸D、硝酸纤维素膜E、尼龙膜正确答案:C100、DNA 自动化测序技术一般用不到的技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、电泳技术正确答案:B。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题(共49题,每题1分,共49分)1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案:D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案:B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案:D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案:B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案:A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案:A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案:B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案:B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案:A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案:A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案:B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案:B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案:C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案:B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案:B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案:D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案:C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案:D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案:C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案:C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案:C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案:B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案:B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案:D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案:C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案:A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案:C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案:C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案:D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案:D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案:C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案:C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案:C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案:A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案:C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案:B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案:B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案:B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案:D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案:C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案:D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案:D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案:A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案:B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案:A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案:D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案:C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案:D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案:B二、多选题(共35题,每题1分,共35分)1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案:BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案:G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案:BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案:EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案:B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案:G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案:AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案:G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案:G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案:B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案:G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案:CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案:B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案:ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案:G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案:G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案:D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案:AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案:BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案:G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案:G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案:F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案:C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案:CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案:G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案:B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案:E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案:D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案:ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案:ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案:AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案:F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案:CG三、判断题(共38题,每题1分,共38分)1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
浙大考博分子生物学历年考试难题
什么是代谢组学,如何进行研究?代谢组学(Metabonomics/ Metabolomics ):通过考察生物体系(细胞,组织或生物体)受刺激或扰动后(如将某个特定的基因变异或环境变化后),其代谢产物的变化或其随时间的变化,来研究生物体系的一门科学。
代谢组(metabolome):基因组的下游产物,也是最终产物,是一些参与生物体新陈代谢、维持生物体正常生长功能和生长发育的小分子化合物的集合,主要是相对分子量小于1000的内源性小分子。
代谢组学的特点:1)关注内源化合物2)对生物体系的小分子化合物进行定量定性研究3)上述化合物的上调和下调指示了与疾病、毒性、基因修饰或环境因子的影响4)上述内源性化合物的知识可以被用于疾病的诊断和药物筛选。
研究方法运用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、气质联用技术(GCMS)、高效液相色谱(HPLC)等技术对细胞提取物、组织提取物和生物体液,随时间变化的代谢物浓度进行检测,结合有效的模式识别方法进行定性、定量和分类,并将这些代谢信息与病理生理过程中的生物学事件关联起来,从而了解机体生命活动的代谢过程。
完整的代谢组学流程包括样品采集及预处理、数据采集和数据分析及解释。
1.样品采集及预处理2.数据采集NMR技术迄今为止,在代谢组学研究中最常见的分析工具是NMR。
能够实现对样品的非破坏性、非选择性分析,满足代谢组学中对尽可能多的化合物进行检测的目标。
质谱具有较高灵敏度和专属性,可以实现对多个化合物的同时快速分析与鉴定。
3.数据分析及解释代谢组学的分析目标是对生物体系中尽可能多的内源性代谢组分进行无偏差的定性定量测定,整个分析过程应尽量保留生物样品中代谢物的整体信息。
报告基因,报告基因与转录调节的关系.报告基因 (reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。
把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。
分子生物学 考博真题
中国疾控中心2005年分子生物学(博士)一、名词解释1.EST2.YAC3.Sense DNA4.RNAi5.Race二、问答题1、乳糖操纵子的结构。
IPTG如何诱导结构基因表达?2、正向突变、抑制突变及回复突变的定义及与突变的关系。
3、PUC18克隆载体的结构特征。
4、在做PCR过程中,常遇到的问题及解决方法。
5、已知蛋白A、B之间相互作用,C、D分别与A、B 相似,如何签定C、D之间的相互作用,两种方法说明之。
6、试用分子生物学相关知识建立动物模型的方法,如何建立病原生物学的动物模型。
军事医学科学院1995年分子生物学试题(博士)1. Apoptosis的生物学意义及其调控基因。
2.基因转移的概念及基因转移载体应具备的条件。
3.原癌基因的功能及其转化为癌基因的机理。
4.人主要组织相容性抗原在细胞识别中的作用及原理。
5.染色体重排对生物体的影响及其主要类型。
6.噬菌体显示技术原理及其在生物学研究中的意义。
军事医学科学院1996年分子生物学试题(博士)1.什么是原癌基因?它们怎样被反转录病毒激活?2.什么是tumor supperssor gene?举例说明它的调控功能。
3.细胞染色体的异常如何导致癌基因的激活?4 解释以下名词:(1) gene knock-out (2) molecular hybridization (3) restriction fragment length polymorphism (4) human genome project5.G蛋白的结构特点信其功能.6 .apoptosis的特征与其生理及病理意义,已知它的调控基因有哪些?2006 协和生物化学与分子生物学专业博士试题一、填空(24空24分)1.---------年,由-------和-------(英文姓)首次提出了DNA的双螺旋模型,其结果发表在----杂志,他们提出的实验依据是-------和--------。
分子生物学试题考博历年考题复习题问答题集锦最全
1.写出分子生物学广义的与狭义的定义,现代分子生物学研究的主要内容,以及5个分子生物学发展的主要大事纪(年代、发明者、简要内容)。
广义上:分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究、以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。
狭义概念:既将分子生物学的范畴偏重于核酸(基因)的分子生物学,主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。
其中也涉及到与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
现代分子生物学研究的主要内容有:基因与基因组的结构与功能,DNA的复制、转录和翻译,基因表达调控的研究,DNA重组技术,结构分子生物学等。
几个分子生物学发展的主要大事纪(年代、发明者、简要内容):1.1944年,著名微生物学家Avery 等人在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。
这一重大发现打破了长期以来,许多生物学家认为的只有象蛋白质那样的大分子才能作为细胞遗传物质的观点,在遗传学上树立了DNA是遗传信息载体的理论。
2.1953年,是开创生命科学新时代具有里程碑意义的一年,Watson和Crick发表了“脱氧核糖核酸的结构”的著名论文,他们在Franklin和Wilkins X-射线衍射研究结果的基础上,推导出DNA双螺旋结构模型,为人类充分揭示遗传信息的传递规律奠定了坚实的理论基础。
同年,Sanger历经8年,完成了第一个蛋白质——胰岛素的氨基酸全序列分析。
3.1954年Gamnow从理论上研究了遗传密码的编码规律, Crick在前人研究工作基础上,提出了中心法则理论,对正在兴起的分子生物学研究起了重要的推动作用。
4.1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)2. 作为主要遗传物质的DNA具有哪些特性,研究DNA一级结构有什么重要意义? DNA拓扑异构体之间互变异构依赖于什么?简述真核生物的染色体结构,它们是如何组装的?有几种组蛋白参与核小体的形成?作为遗传物质的DNA具有以下特性:①贮存并表达遗传信息;②能把遗传信息传递给子代;③物理和化学性质稳定;④有遗传变异的能力。
还有农科院、农大、浙江大学等)分子生物学往年考博试题(2021整理)
中科院2002年分子遗传学〔博士〕注:1、A卷考生必须答复以下5题,每题20分。
B卷考生任选四题答复,每题25分。
一、请举出细胞中的各种RNA分子的名称、特征和功能。
如何从RNA动身开展功能基因组的研究。
二、真核生物的基因表达操纵〔controlofgeneexpression〕和信号传导〔signaltransduction〕有紧密的关系,请举出一个你熟悉的例子分不讲明这两个概念的含义及其联系。
三、目前差不多有一些现成的软件用来猜测基因组全序列中的基因。
为了设计这些软件,你觉得哪些关于基因和基因组的分子遗传学知识是必须的?请讲明理由。
四、在真核生物中转座子能够分为几种类型?请分述每种类型的结构和特征。
如何利用转座子进行分子遗传学的研究和功能基因组的研究。
五、自从克隆的多利羊诞生以来,报界经常传播所谓克隆动物的缺陷,有一种讲法是克隆动物会早衰,有人推测早衰的缘故可能是:〔1〕被克隆的体细胞核的染色体端粒变短或〔2〕被克隆的体细胞核的基因表达程序差不多处在发育上成熟的时期。
现在请你从染色体DNA 复制的角度作支持第〔1〕种可能的阐述,并从基因表达调控的角度做反对第〔2〕中可能的阐述。
中国海洋大学博士进学考试试题分子生物学2002年名词解释:基因组学基因组大小基因组复杂度基因表达正操纵顺势调控元件开放阅读框架基因芯片内含子肽核酸内含肽咨询答题:1、表达遗传中心法那么,目前在用的重要分子生物学技术有哪些?请用中心法那么解释这些技术的工作原理。
2、基因全然结构如何?〔即含有基因的DNA区域具有什么结构能使基因遗传信息传递给蛋白质?〕3、什么是遗传变异?变异的实质是什么?现在使用的分子标记系统各利用了哪些变异?基本上如何利用的?4、用哪些方法能够获得一段DNA的大量拷贝?分子克隆是获得大量拷贝的技术之一。
请对历史上使用过的和目前仍在使用的分子克隆载体做评述〔描述特点,对比异同〕5、DNA测序的方法是什么?目前在用的方法和原始方法有什么不同?有一段100千碱基对的DNA片断〔没有重复区段〕,请设计最正确测序策略。
浙江大学医学分子生物学(乙)2005--2017年考博真题
2、SSR:简章序列重复多态性,引物是根据微卫星DNA重复序列两翼的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身。由于重复的长度变化极大,所以是检测多态性的一种有效方法。其特点包括:一般检测到的是一个单一的多等位基因位点,共显性遗传,故可鉴别杂合子与纯合子;得到的结果重复性很高。
3、EST:表达序所产生的cDNA序列。随着高通量测序技术的进步,使人们越来越相信,大规模地产生EST,结合生物信息学的手段,将为人们提供一种快速有效的发现新基因的方法。
7、SNP:单核苷酸多态性,是一种较为新型的分子标记,其依据的是一位点的不同等位基因之间常常只有一个或几个核苷酸的差异,因此在分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。
8、FISH:荧光原位杂交技术,是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合起来,通过荧光标记的DNA探针与待测样本的DNA进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
考试科目:医学分子生物学
注意:所有答案一律写在答题纸上,写在试题纸上或其他地方一律不给分。
一、名词解释:(25%)
浙江大学医学博士考试分子生物学(乙)历年真题
浙江大学医学博士考试分子生物学(乙)2005-2015年真题2015年分子生物学(乙)1.什么是基因转录?什么是基因表达?两者区别?(10分)2.染色质状态改变的机制,基因选择性开关的可能临床应用。
(10分)3.什么是RNA剪接?什么是RNA编辑?什么是选择性剪接?(10分)4.如果组织中某种蛋白表达量很低,如何获得高浓度的这种蛋白?(10分)5.什么是非编码RNA?有哪些?长链非编码RNA的功能。
(10分)6.什么是遗传?什么是表观遗传?表观遗传的分子机制。
(10分)7.核酸测序的发展史,当代最主流的测序技术在分子生物学中的应用。
(10分)8.如何确定P53蛋白和蛋白X有相互作用。
(10分)9.什么是超分辨率荧光显微镜(2014年诺贝尔化学奖)?在分子生物学中的应用?你想拥有怎样的显微镜?(10分)10.从分子水平上设计试验证明镉对血管有损伤作用。
(10分)2014年分子生物学(乙)1.图示基因表达过程并指出调控关键点。
10分2.蛋白质现实中以三级以上结构存在,为什么教科书中从蛋白质一、二级结构写起?10分3.什么是siRNA、miRNA,其作用的异同点?10分4.什么是γH2AX,为什么可用于DNA损伤的检测?8分5.解释细胞自噬过程。
7分6.DNA、RNA、蛋白质相互作用的方式及涉及的分子生物学现象。
10分7.设计试验使得人源性基因在大肠杆菌中高表达。
10分8.什么是PM2.5?设计试验从细胞水平研究其特点及作用机制。
10分9.曹操家族基因研究发现,曹操非汉相曹参后代,同时推翻了曹操为夏侯氏抱养而来的说法。
请你写一篇科普小论文介绍其中的一些分子生物学知识并证明你的结论。
10分10.2013诺贝尔奖,囊泡运输的知识。
15分2013年分子生物学(乙)浙大考博分子生物学名词解释(全中文,9题,36分):细胞骨架、细胞增殖、干细胞、细胞分化、细胞膜的跨膜转运、信号肽、自噬小体、蛋白激酶、呼吸链。
1.细胞连接的概念,分类及特点。
浙江大学研究生期末考试分子生物学复习题
分子生物学复习题一、柯越海教授(导论、基因组与基因组变异、分子生物学与模式动物)1、Central dogma中心法则Gene--One enzyme(polypeptide)hypothesis一基因一个酶(多肽)假说:2、One GeneBeadle和Tatum利用红色面包霉不同类型营养缺陷型突变株,发现营养缺陷和基因突变直接相关,每一种基因突变只阻断某一生化反应,而每一种生化反应都特异性依赖一种酶的催化,从而提出一个基因一个酶假说。
但有些酶由多条肽链聚合才有活性,一条多肽链也可以是多种酶的组成成分。
在一个基因一个酶假说基础上产生了一个基因一条多肽链假说,认为一个基因决定一条多肽链的结构。
一个基因一条多肽链假说具有普遍意义。
3、Translational medicine转化医学:转化医学是一种医学研究,试图在基础研究和临床治疗之间建立更直接的关系,把生物医学的研究成果转化为有前景的新型诊断试验、治疗及药物。
加速从循证医学到可持续解决方案的进程,进而解决公众健康问题。
4、Robertsonian translocation罗伯逊易位:常见人类染色体结构异常,又称着丝粒融合,一种特殊类型的交互易位。
两个端部着丝粒染色体在着丝粒处发生断裂,一条染色体的长臂与另一条染色体的短臂发生交换,形成一条大染色体和一条由两个短臂重接而成的小染色体,后者在减数分裂过程中丢失。
短臂携带的遗传信息少,丢失并不影响易位携带者的表型及智力,但其后代有患唐氏综合症的风险。
5、Genome基因组:生物体所携带的全部遗传信息。
即单倍体细胞中全套染色体为一个基因组,或是单倍体细胞中全部基因为一个基因组。
6、Histone组蛋白:组蛋白是真核生物染色体的基本结构蛋白,是一类保守的小分子碱性蛋白质,富含带正电碱性氨基酸,能够同DNA中带负电磷酸基团相互作用,有五种类型:H2A、H2B、H3、H4、H1。
组蛋白H2A、H2B、H3、H4各两分子组成蛋白八聚体,外绕DNA形成核小体,H1独立于核小体外,结合在连接相邻两个核小体的DNA分子上。
备考浙大博士分子生物学复习题
一、胰岛素的信号转导途径胰岛素(包括IGFI、IGFII) 信号所激发的信号传递途径主要有二,一为Ras-MAPK途径,一为PI3-激酶途径。
(一) Ras-MAPK途径当胰岛素或IGF 与胰岛素受体结合后,引起受体自身磷酸化而活化(酪氨酸激酶的活性),活化的受体使胞质内的胰岛素受体底物(IRS) IRS-1和SHc等的酪氨酸残基磷酸化,磷酸化的酪氨酸残基结合Grb2的SH2结构域,Grb2的SH3结构域又可与Sos 结合并使之活化,激活的Sos即可与质膜上的Ras相结合。
Sos具有鸟苷酸交换因子( GEF) 的作用,使Ras释放结合的GDP,结合GTP而活化。
Ras 的下游信息传递是一系列蛋白激酶的级联传递和放大过程。
活化的Ras-GTP与Raf的N端结构域结合并使之活化,Raf 是丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶(MAPKKK),活化Raf结合并激活另一种蛋白激酶MAPKK,它可结合并磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶MAPK (mitogen-activated protein kinase,MAPK)的第185位酪氨酸残基及第183位苏氨酸残基,而使之激活。
活化的MAPK进入细胞核,可使EIK-1、RNA 聚合酶II等许多转录因子活化,进而促进c-fos,c-jun的表达。
Ras-MAPK信号通路可概括如下:配体→RPTK→adaptor(如Grb2)→GEF→Ras→Raf(MAPKKK)→MAPKK→MAPK→进入细胞核→转录因子→基因表达。
通过Ras-MAPK传递途径可促使靶细胞基因表达,导致细胞生长、增殖及分化。
(二) 磷脂酰肌醇3-激酶( PI3-K) 途径PI3-K 的SH2 结构域能与含磷酸酪氨酸残基的信号分子如IRS-1 结合,SH3 结构域能与富含脯氨酸的各种信号蛋白结合。
当胰岛素或IGF作用于胰岛素受体后, PI3-K 与酪氨酸磷酸化的IRS-1 结合,激活催化活性,PI3-K的靶蛋白是蛋白激酶B ( PKB) 。
分子生物学 考博真题
分子生物学考博真题浙江大学 2021 博分子生物学试题名解,基因组问答1、什么是转化医学2、如果某信号对某蛋白有作用,设计一个试验来确定这条信号通路3、表观遗传学及其意义4、如何解释细胞基因组相同但是蛋白质组不相同的现象简答1、细胞死亡的几种方式2、转录,翻译,蛋白表达的概念名词解释:基因和基因组;ncRNA;问答题:1.转化医学:2、研究信号通路,信号从细胞外传至细胞内,往往是形成一个复合物,从而引起效应,请你设计一个方法,了解整个信号通路的传递过程。
3.表观遗传学。
浙江大学 2021 博分子生物学试题名词解释1、种系分析法2、癌基因和抑癌基因3、顺式作用元件和反式作用因子4、表观遗传学5、简答1、什么是基因、基因组,蛋白质和蛋白质组2、蛋白质之间相互作用的方法有哪些3、什么是基因表达及其调控机制?4、设计一个实验以证明DNA是遗传物质。
5、基因操作中的常用工具有哪些?6、举例说明蛋白质结构与功能的关系。
论述1、有一个蛋白X,发现其在血管内皮细胞中与信号转导通路A有密切联系,如何证明在此细胞中与蛋白X相互作用的蛋白。
2、 HGP已完成,谈谈你对其后续计划的认识。
浙江大学 2021 博分子生物学试题名词解释1、蛋白质的超二级结构2、核酸分子杂交3、基因组4、操纵子5、反式作用原件6、小卫星DNA7、基因表达8、逆转录9、管家基因10、信号肽11、基因打靶12、基因治疗论述题1、 DNA的复制过程的基本特点和要点。
2、 G-蛋白信号介导的信号转导途径。
3、 DNA损伤可以分为哪几类?其相应分类分别是?4、蛋白质组的概念及其研究意义。
2021年中国海洋大学分子生物学考博试题第一题,5翻译题,每题8分,共40分。
包括siRNA,Sanger(1953年,其确定了牛胰岛素的一级结构)等第二题问答题1、某学生在大肠杆菌的培养基中1)加葡萄糖2)加乳糖3)加葡萄糖和乳糖,详述操纵子调控。
2、请说明分子标记的方法3、一个功能基因,如果已经知道其序列,如何知道它的功能?4、一个蛋白酶,要选择什么样的载体,才能高量表达和易纯化?山东大学2021博分生一、名词解释: 1、顺式作用元件2、模序与结构域3、岗崎片段4、Southern Blotting5、遗传密码的简并性和摇摆性二、简答:1、基因治疗中常用病毒载体类型及特点?2、IP3-PKB介导的受体信号转导途径?3、蛋白质(酶)活性的快速调节方法有哪些?举三例说明磷酸/脱磷酸化是酶活性快速调节的重要方式。
浙江大学细胞生物学和生物化学与分子生物学真题
浙江大学细胞生物学和生物化学与分子生物学真题Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】细胞生物学一、名词解释(5'x10)1.冷冻电子显微镜技术2.蛋白质模式结合域3.磷脂交换蛋白4.纤连蛋白5.核质互作6.凋亡诱导因子7.双信使系统8.泛素化和蛋白酶体介导的蛋白质降解9.胞内受体超家族10.踏车行为二、论述题(20'x5)1.请描述线粒体的融合和分裂分子与细胞生物学基础2.靶细胞信号分子脱敏机制3.什么是细胞分化简述其分子机制、调控机制4.如何理解高尔基体作为细胞大分子转运的枢纽5.请描述细胞骨架的分子组成及结构特征,并简述其在细胞生命活动中的作用生物化学与分子生物学830一、判断20'1.蛋白质中的稀有氨基酸是翻译后修饰而成的2.蛋白质具有紫外吸收能力的原因是酪氨酸和色氨酸3.肽链具有一定的刚性是因为肽键上的氧原子和氮原子共振4.α螺旋具有电偶极,氨基端带正电,羧基端带负电5.质子会降低血红蛋白对氧气的结合能力6.胰凝乳蛋白的催化机理是共价键作用和金属键作用7.酶反应动力学参数Kcat的单位是时间8.葡萄糖在水中多为直链结构而非环状9.阿莫西林的抗菌机理是阻止肽聚糖的合成10.血管的弹性来自于硫酸皮肤素的蛋白聚糖、糖胺聚糖…11.磷脂双分子层的相变温度取决于磷脂和膜蛋白的含量12.烟酰胺乙酰胆碱受体是配体门通道13.人对颜色的区分依靠视杆细胞而非视锥细胞14.蚕豆病源于葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的缺失15.细菌的抗药性来源于质粒,但没有质粒细菌也能存活16.原核生物也有内含子,但不会出现在编码蛋白基因序列中17.蓖麻毒蛋白能破坏真核生物的40S核糖体亚基18.嘧啶核苷酸从头合成途径不涉及天冬酰胺19.氟喹诺酮类抗生素如环丙沙星的作用机理是抑制DNA转录20.人体内色氨酸可以通过两步反应转化为5羟色胺二.选择题20'1.组氨酸的酸碱性1’下同2.哪个氨基酸会阻碍α螺旋的形成3.镰刀型贫血病对何种疾病有耐性4.Ig有几个抗原结合位点5.过敏是由哪种抗体造成的6.腺苷酰化通常发生在哪个氨基酸上7.胆固醇在哪个细胞器膜中含量最高8.下列不是还原糖的是9.咖啡因会作用于__(信号分子)保持人兴奋10.下列信号分子不使用cAMP作为第二信使的是11.ATP水解发生的反应是亲核/电SN1/212.FAD是哪个酶的辅基13.大肠杆菌主要的DNA聚合酶是14.糖异生主要发生在哪个器官15.脂肪酸合成发生在哪个细胞器16.固氮过程一次反应消耗多少ATP17.原核生物中谷氨酸合成什么的(色、组、苯丙、腺苷三磷酸)18.腺嘌呤核苷酸从头合成途径原料19.乙酰CoA合成的部位20.哪个酶不是柠檬酸循环的调节酶三、名词解释20'1.凝集素2.阻抑物3.信号识别颗粒4.癌基因5.Ⅱ型限制性核酸内切酶6.操纵基因7.管家基因8.剪接体9.锌指结构10.端粒四、大题90'1.肌钙蛋白有哪些肌肉收缩过程2.转座子概念真核转座子特征3.糖酵解过程4.同工酶概念和生化特征5.蛋白质合成阶段起始复合物过程组成(15')6.WesternBlotting原理过程7.信号转导概念显着特征8.酶的抑制剂概念分类作用特征9.基因克隆载体组分功能常用类型(5')。
考博分子生物学试题MicrosoftWord文档(2)
浙江大学2008年博士生入学分子生物学(甲)试题一、名词解释(30分):1.质粒2. 锌指结构3.分子杂交4.密码的简并性5.信号肽6.核糖开关7.反式作用子8.基因组9.hnRNA 10.cDNA二、简答题(30分):1.何谓乳糖操纵子,简述乳糖操纵子的正负调节机制?2.谈谈你的硕士论文的基本内容,研究方法和结果,有什么收获,打算你的博士生涯如何度过?3.核酸凝胶电泳的基本原理和方法是什么?4.简述原核和真核细胞在核酸翻译成蛋白质的过程中的异同点?5.何谓质粒的不相容性和相容性?其分子基础机制是什么?三、问答题(40分):1.近年来有些什么分子生物学研究的成果应用到实际应用当中?2.试述一条反向遗传克隆功能基因的途径3.假定事先给你一个cDNA序列,你如何表达,纯化得到目的蛋白质?4.阐述一种细胞信号转导的途径(从接受信号到调控基因表达)5.简述3种由PCR技术衍生出来的技术及其应用?南京农业大学2006年攻读博士学位研究生入学分子生物学考试试题一、解释下列各组名词的概念(每小题4分,共24分)1 .Interrupted genes; Pseudogenes2 .Mutation hotspot; Recombination hotspot3. Signal peptide; signal patch4 .Positive regulation; Negative regulation5 .Cis-acting element; Trans-acting factor6. Homologous recombination; Site-specific recombination二、简答题(每小题7分,共56分)1.真核生物mRNA的5’和3'端是怎样形成的?2.分离调控元件可以采用哪些方法?怎样验证分离到的调控元件?3.简述基因定位中,“接合定位法”的机理。
4.请以噬菌体中cI基因为例,简述其在E. col i中是如何产生“免疫”功能的?5.阐述×174噬菌体+DNA的复制过程。
浙江大学分子生物学考研真题汇总(含答案)
浙江大学2000年分子生物学试题一、名词解释(12)1、PCR2、Southern bolt3、外显子4、G蛋白5、基因组6、反式作用子二、问答题:1、简述DNA结构(15)2、何为分子克隆?扼要说明分子克隆技术操作要点和常用的工具酶(15)。
3、何为基因突变?扼要说明基因突变的类型及其后果(15)。
4、RNA聚合酶的作用特点。
以真核细胞mRNA为例说明转录产物的加工过程(15)。
5、简述基因的表达与调控机理(18)。
6、阐述目前国际上的植物基因组研究的现状和发展趋势(10)。
浙江大学2001年分子生物学试题一、名词解释(20%)1.基因组2.突变3.染色体4.克隆二、真核生物基因表达调控过程描述(30%)三、描述从基因到蛋白质的过程(30%)四、简述21世纪生命前沿领域(20%)浙江大学2004年分子生物学试题1、阐述PCR技术原理 (15)2、描述一种研究基因表达的方法 (15)3、阐述蛋白质生物合成途径 (25)4、阐述一条真核细胞信号转导途径(从信号接受到调控基因表达) (25)5、阐述一条反向遗传克隆功能基因的途径 (20)6、A,B和C三个基因都决定矮牵牛花的花色,当基因型为A-B-C-时表型为红色,其余为白色.AaBbCc的个体与三种纯系(系1系2和系3)杂交。
分别的红色:白花1:3,1:7和1:1的分离比。
问:系1和系2杂交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何?系3和系2杂交,F1基因型和表型如何,F2的基因型和表型如何?(要写出分离比)(25)7、什么是染色体重排和基因重排?它们在发育中有和作用?它们在进化中有和作用(25)浙江大学2005年分子生物学试题一、名词解释:(20)突变顺式作用元件(cis acting element )操纵子转座子RNA剪辑载体(vector)二、描述cDNA文库构建原理与方法(25)三、描述蛋白质生物合成过程(20)四、阐述真核生物基因表达调控的基本过程(20)五、阐述DNA半保留复制过程(15)六、一个父亲是色盲而本人色觉正常的女子,与一个色觉正常的男子结婚,但这个男子的父亲是色盲,问这对夫妇的子女表现色觉正常和色盲的可能性各有多少?(10)七、果蝇的某一性状其正反交结果不同,你如何判断该性状是伴性遗传?是母性影响?还是细胞质遗传?(10)八、下面是位于同一条染色体上的三个基因的隐性基因连锁图,并注明了重组频率。
(完整版)各个名校分子生物学考博历年真题
08中科院分子生物学试题1、表观遗传,及调控方式,还有蛋白质通过哪些共价修饰调控其功能?2、蛋白质与DNA结合的方法和比较,EMSA和DNase1足迹法?3、密码子改造研究新蛋白药物,原理,关键和方法4、设计研究未知基因(预测两个跨膜区域)功能的实验方案(不低于4个)5、质粒改造原则6、诱导全能干细胞的方法,实验方案等。
(去年的nature上发表的)个人认为除了第二和五题之外,其它的题目都属于一骑绝尘的,要么会,要么不会,想蒙是绝对没门的。
这门专业课能及格,我想都不错了,特别是1,3,6题。
不知道大家做的如何,反正第一题,我是意思都没看懂,不知道连续的3问是不是指1个东西。
还是最后1问是单独的,与前面的2问无关2008年中科院动物所生物化学与分子生物学博士题一名词解释密码子的变偶性程序性死亡冈崎片断单克隆抗体基因治疗 SD序列移码突变 Z型DNA 蛋白质组学反向PCR二大题简述真核生物5’帽子结构和功能。
简述NO作为信号分子的调节作用。
运用你所学的知识和可能的实验经验,研究一个新基因的生理功能。
已知A和B蛋白质作用于同一生理功能,至少用三种方法证明A和B之间有无相互作用,并给出所用原理。
结合当前科学前沿,阐述真核生物基因表达调控。
2008年浙江大学分子生物学考博试题问答题:双向电泳的原理及应用三种分子标记方法描述两种大规模研究DNA的方法2007年诺贝尔生理与医学奖授予什么技术,该技术的应用人类基因组中有一基因为2Kb,提到的基因组为10微克,计算该基因的含量名词解释:免疫沉淀,RNA剪切,核糖开关,分子伴侣,浙江大学2006秋博分子生物学考题分子生物学(甲)名词解释(每个4分)原位杂交、顺式作用元件、信号肽、选择性剪接、C-值矛盾(c-value paradox)问答题(每个20分)1、RNAi的优缺点,如何避免改正2、何为正向遗传学、反向遗传学,阐述一条反向遗传学研究功能基因的方法3、真核生物基因表达调控的途径4、近年分子生物学中诺贝尔奖有哪些,请举二例,说明内容和意义2008年华中科技大学生化与分子考试试题生化与分子共七道题:1. 蛋白质的结构原则2. 进化中为什么选择蛋白和RNA作为酶3.关于盐浓度对蛋白与DNA结合能力的影响(具体的题太长,叙述难免出错,所有把考点给出来大家斟酌)4.基因功能的研究方法,简述3类及原理5.真核与原核细胞的启动子的结构和功能及翻译起始的差异与共同点6.关于基因CDNA克隆和蛋白表达的方法的实验设计题!有一植物中共有的基因与某重要功能有关。
浙江大学医学院研究生分子生物学-分子医学1复习题
分子生物学复习题名词解释1.Tunneling nanotubes(通道纳米管):在压力刺激下,不同细胞间产生的直径在50-200nm之间,用于传递信息和交流物质细膜通道。
2.Hippo signaling pathway (Hippo 信号通路):正常的Hippo 信号通路通过高度保守的蛋白激酶Hpo磷酸化蛋白激酶Wts的核心激酶级联反应维持细胞增殖、促进细胞凋亡、参与压力应答,从而维持组织器官的正常大小。
3.SD序列(Shine-Dalgarno sequence):原核生物中mRNA起始密码子AGU上游8个碱基处存在的一个可以与核糖体小亚基16S rRNA 3’末端序列互补结合的序列,使得翻译起始复合物准确定位于翻译起始部位。
4.内部核糖体进入位点序列(Internal ribosome entry site, IRES):它的存在能够使蛋白质翻译起始不依赖于5’帽结构,从而使直接从信使mRNA中间起始翻译成为可能,一般来讲,内部核糖体进入位点通常位于RNA病毒基因组的5’端非翻译区,这样病毒蛋白的翻译就可以不依赖于5’帽子结构,常用构建于真核生物双顺反子,第一个蛋白通常靠5’帽子结构起始翻译,而第二个蛋白则依靠IRES起始翻译。
IRES前后的两个蛋白的表达通常是成比例的,因此可以根据其中一个报告基因的表达情况来反映另外一个蛋白的表达情况。
5.分子伴侣(chaperone):能够识别并结合到不完整折叠或装配的蛋白质,帮助这些多肽正确折叠、转运或防止他们聚集,其本身不参与最终产物的形成。
6.核定位信号(nuclear localization signal, NLS):蛋白质的一个结构域,通常为一短的氨基酸序列,与入核载体相互作用,使蛋白能被转运进细胞核。
7.共翻译转位(co-translational translocation):膜结合核糖体上合成的蛋白质,在它们进行翻译的同时就开始了转运,主要是通过定位信号,一边翻译,一边进入内质网, 然后再进行进一步的加工和转移。
考研考博分子生物学习题集精解历年试题及答案最全(已解密)之三(要点型)
核酸结构与功能一、填空题1.病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。
2.AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。
3.X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。
4.氢键负责维持A-T间(或G-C间)的亲和力5.天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。
二、选择题(单选或多选)1.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是(C )。
A.从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂B.DNA突变导致毒性丧失C.生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能D.DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子E.真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2.1953年Watson和Crick提出( A )。
A.多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B.DNA的复制是半保留的,常常形成亲本-子代双螺旋杂合链C.三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D.遗传物质通常是DNA而非RNAE.分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3.DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键,并因此改变了它们的光吸收特性。
以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述?( CD )A.哺乳动物DNA约为45℃,因此发烧时体温高于42℃是十分危险的B.依赖于A-T含量,因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少C.是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值D.可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定E.就是单链发生断裂(磷酸二酯键断裂)时的温度4.DNA的变性(ACE )。
A.包括双螺旋的解链B.可以由低温产生C.是可逆的D.是磷酸二酯键的断裂E.包括氢键的断裂5.在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中,发夹结构的形成(AD )。
A.基于各个片段间的互补,形成反向平行双螺旋B.依赖于A-U含量,因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少C.仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生D.同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对E.允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基6.DNA分子中的超螺旋(ACE )。
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一、胰岛素的信号转导途径胰岛素(包括IGFI、IGFII) 信号所激发的信号传递途径主要有二,一为Ras-MAPK途径,一为PI3-激酶途径。
(一) Ras-MAPK途径当胰岛素或IGF 与胰岛素受体结合后,引起受体自身磷酸化而活化(酪氨酸激酶的活性),活化的受体使胞质内的胰岛素受体底物(IRS) IRS-1和SHc等的酪氨酸残基磷酸化,磷酸化的酪氨酸残基结合Grb2的SH2结构域,Grb2的SH3结构域又可与Sos 结合并使之活化,激活的Sos即可与质膜上的Ras相结合。
Sos具有鸟苷酸交换因子( GEF) 的作用,使Ras释放结合的GDP,结合GTP而活化。
Ras 的下游信息传递是一系列蛋白激酶的级联传递和放大过程。
活化的Ras-GTP与Raf的N端结构域结合并使之活化,Raf 是丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶(MAPKKK),活化Raf结合并激活另一种蛋白激酶MAPKK,它可结合并磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶MAPK (mitogen-activated protein kinase,MAPK)的第185位酪氨酸残基及第183位苏氨酸残基,而使之激活。
活化的MAPK进入细胞核,可使EIK-1、RNA 聚合酶II等许多转录因子活化,进而促进c-fos,c-jun的表达。
Ras-MAPK信号通路可概括如下:配体→RPTK→adaptor(如Grb2)→GEF→Ras→Raf(MAPKKK)→MAPKK →MAPK→进入细胞核→转录因子→基因表达。
通过Ras-MAPK传递途径可促使靶细胞基因表达,导致细胞生长、增殖及分化。
(二) 磷脂酰肌醇3-激酶( PI3-K) 途径PI3-K 的SH2 结构域能与含磷酸酪氨酸残基的信号分子如IRS-1 结合,SH3 结构域能与富含脯氨酸的各种信号蛋白结合。
当胰岛素或IGF作用于胰岛素受体后, PI3-K 与酪氨酸磷酸化的IRS-1 结合,激活催化活性,PI3-K的靶蛋白是蛋白激酶 B ( PKB) 。
PKB 是Ser/ Thr 蛋白激酶家族的成员,。
当胰岛素及IGF 作用于靶细胞时迅速引起PKB 的活化,并使PKB从细胞膜脱落,进入胞质,进而对胞质内的靶蛋白发挥作用。
PKB的靶蛋白有:磷酸果糖激酶-2,与糖酵解的调控有关;糖原合成激酶3(glycogen synthase k inase 3,GSK3);受PKB磷酸化后GSK3活性降低,再使糖原合成酶因磷酸化减少而活性增加,从而导致糖原合成增加。
此外, GSK3与mRNA 转录起动的活化也有关。
参与细胞凋亡的Bad蛋白也是PKB 的底物,PKB使Bad磷酸化而转变成无活性形式,从而抑制细胞凋亡。
此外, PKB 还与葡萄糖的转运、细胞增殖、分化及细胞周期的调节等有关。
二、JAK-STAT 信号转导途径JAK(just another kinase 或janus kinase)是一类非受体酪氨酸激酶家族,已发现四个成员,即JAK1 、JAK2 、JAK3 和TYK1,其结构不含SH2 、SH3,C 段具有两个相连的激酶区。
JAK 的底物为STAT,即信号转导子和转录激活子(signal transducer and activator of transcription,STAT),具有SH2 和SH3 两类结构域。
STAT 被JAK 磷酸化后发生二聚化,然后穿过核膜进入核内调节相关基因的表达,这条信号通路称为JAK-STAT 途径JAK-STAT 途径1、配体与受体结合导致受体二聚化;2、二聚化受体激活JAK;3、JAK 将STAT 磷酸化;4、STAT 形成二聚体,暴露出入核信号;5、STAT 进入核内,调节基因表达。
RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism, RFLP)限制性片段长度多态性,当用限制性内切酶切割不同品种或个体的基因组DNA时,如果限制性内切酶的酶切位点的碱基发生突变,或者酶切位点之间DNA片段发生碱基的插入或缺失,导致酶切片断的大小、数量发生了变化,产生相当多的数目和大小不等的DNA片段。
这种变化可以通过特定的探针杂交进行检测,从而可以比较不同品种或个体之间的DNA水平的差异(或多态性)。
广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物的进化和分类关系研究。
RAPD(Random Amplified Polymorphism DNA, RAPD)随机扩增多态性DNA,利用随即引物扩增寻找多态性DNA片段的分子标记方法。
是建立在PCR技术基础上,利用一系列(通常数百)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(一般为10 bp)为引物,对所研究的基因组DNA进行PCR扩增,然后用凝胶电泳分开扩增片段,EB等染色剂染色后检测扩增产物DNA片段的多态性。
与RAPD技术相类似的还有AP-PCR(Arbitrary Primed PCR)和DAF(DNA Amplified Fingerprints)2种标记技术。
在AP-PCR分析中,所使用的引物较长(通常10~50 bp),扩增分为3个部分,每个部分要求的条件和组分的浓度存在差异。
DAF是一种改进的RAPD分析技术,与RAPD技术不同的是它使用引物浓度更高,长度更短(一般5~8 bp),只有2个温度循环,并常用聚丙烯酰胺凝胶电泳,所提供谱带信息比RAPD大得多。
AFLP(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)扩增片段长度多态性,AFLP是RFLP和PCR结合的产物,其基本原理是:将基因组DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增,使用双链人工"接头"与基因组DNA的酶切片段相连接作为扩增反应模板,"接头"与"接头"相邻的酶切片段的几个碱基序列作为引物的结合位点。
这样就只有那些两端序列能与选择碱基配对的限制性片段被扩增,再在高分辨力的测序胶上分开这些扩增产物。
该技术的独特之处在于所用的专用引物可在不知道DNA信息的前提下就可对酶切片段进行PCR扩增。
是目前一种十分理想有效的分子标记STS(Sequence-Tagged Site, STS)序列标签位点是基因组上定位明确、作为界标并能通过PCR扩增被唯一操作的短的、单拷贝DNA 序列,,用于产生作图位点,即测定一系列STS 的次序即可作出基因组区域的图谱。
STS主要包括简单重复序列(Simple Sequence Repeat Polymorphisms, 简称SSR或SSRP)、锚定简单重复序列(Anchored Simple Sequence Repeats, ASSR)、序列特异扩增区域(Sequence-characterized a mplified regions)、酶切扩增多态性序列(Cleaved Amplified Polymorphism Sequences, C APS)、单引物扩增反应(Single Primer Amplification Reaction, SPAR)等标记技术。
SSR (Simple Sequence Repeats,SSR) 简单重复序列真核生物的基因组中散布大量的串联重复序列,其中2~4个bp的微卫星序列具有高度多态性,微卫星在结构上的最大特点是两端序列较保守,因此可设计与两端保守序列互补的引物进行PCE扩增,来揭示微卫星的多态性。
SSR 是检测多态性的一种有效方法。
SSCP(Single Strand Conformation Polymorphism, SSCP)单链构像多态性是指相同长度的单链DNA因核苷酸序列的差异,甚至单个碱基不同,而产生的构像变异,在非变性聚丙烯酰胺中表现为电泳迁移率的差别。
PCR产物变性处理,双链DNA分开成单链,再用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,根据条带位置变化来判断目的片段中是否存在突变。
SSCP分析对DNA序列的改变非常敏感,常常一个碱基差别都能显示出来。
SSCP结果判定是通过多个样品之间对比,观察条带之间位置改变,从而显示出不同生物个体的DNA特异性,达到指纹分析的目的。
该技术已被广泛用于癌基因和抗癌基因变异的检测、遗传病的致病基因分析以及基因诊断、基因制图等领域。
SNP(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)单核苷酸多态性是指DNA序列上单个核苷酸的差异,是单个核苷酸置换产生的遗传标记。
根据从STS中确定SNP位点的经验,每千个核苷酸会出现一个标记位点,因SNP的分布密集。
检测SNP的最佳方法是DNA芯片技术,如果能将所有SNP全部信息载入DNA 芯片,就可制造基因组扫描仪,用来扫描各个个体并分析它们在基因组成上的差异。
SCAR(Sequence-characterized amplified regions) SCAR标记是在RAPD技术的基础上发展起来的。
目标RAPD片段克隆和测序,根据原RAPD片段两末端的序列设计特定引物进行PCR特异扩增。
,EST)表达序列标签短的、单次(测序)阅读EST(expressed sequence tag的cDNA 5’或3‘端序列。
也包括来自于差异显示和RACE实验的cDNA序列。
一般是来自不同组织来源的cDNA序列,长度在300-500bp左右。
Contig 重叠群或邻接片段基因组测序中将许多序列片段经过比对找到重叠区,从而连接成长片段,这些片断称重叠连续群,简称重叠群。
UniGene —被整理成簇的EST和全长mRNA序列,每一个代表一种特定已知的或假设的人类基因,有定位图和表达信息以及同其它资源的交叉参考。
SAGE(serial analysis of gene expression,),基因表达系列分析是近几年来发展起来的一种快速分析基因表达水平信息的技术。
它通过快速和详细分析成千上万个EST来寻找出表达丰度不同的SAGE标签序列,从而接近完整地获得基因组的表达信息。
基因组学(Genomics),指对所有基因进行基因组作图(包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱),核苷酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一门科学。
基因组研究应该包括两方面的内容:以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学,又被称为后基因组(postgenome)研究。
蛋白质组(proteome)指全部基因表达的全部蛋白质及其存在方式,是一个基因、一个细胞或组织所表达的全部蛋白质成分,蛋白质组学是不同时间和空间发挥功能的特定蛋白质群体的研究。
蛋白质组学(protemics)。
蛋白质组学是不同时间和空间发挥功能的特定蛋白质群体的研究。