柴胡皂苷的提取与结构鉴定

天然药物化学课程实验柴胡皂苷的提取及结构鉴定

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柴胡皂苷

⏹【产品名称】柴胡提取物

⏹【英文名称】Radix Stellaviae

⏹【拉丁名称】Radix Bupleuri

⏹【来源】本品为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurum scorzoner-ifolium Willd.的干燥根。按性状不同，分别习称“北柴胡”及“南柴胡”。春、秋二季采挖，除去茎叶及泥沙，干燥。

⏹【功能主治】和解表里，疏肝，升阳。用于感冒发热，寒热往来，胸胁胀痛，月经不调，子官脱垂，脱肛。

柴胡皂苷理化性质

⏹ 1.物理性质

三萜皂苷分子大，不易结晶，大多数为白色或乳白色无定形粉末，仅少数为结晶体，皂苷元大多有完好的结晶。皂苷多数为具有苦味和辛辣味，且多具有吸湿性。三萜皂苷有降低水溶液表面张力的作用，其水溶液经常强烈振摇能产生持久性泡沫，不因加热而消失。三萜皂苷的熔点都很高，常在熔融前分解，分解点多在200℃-300℃之间。

⏹ 2.溶解度

三萜皂苷一般可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶或难溶于丙酮、乙醚、苯等有机溶剂。皂苷在正丁醇或戊醇提取皂苷，可使之与亲水性杂质分离。三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂，而不溶于水。

⏹3.金属盐类反应

三萜皂苷的水溶液可与一些金属盐类，如铅盐、钡盐、

铜盐等产生沉淀。酸性皂苷水溶液，加入中性盐类即生成沉淀；中性皂苷水溶液则需加入碱式醋酸铅或氢氧化钡等碱性盐类才能产生沉淀。

⏹4.显色反应

三萜皂苷在无水条件下，与强酸（硫酸、磷酸、高氯酸）、中强酸（三氯乙酸）或Lewis酸（氯化锌、三氯化锑）作用，会出现一系列显色变化或荧光。

⏹5.光谱特征

除少数化合物如甘草酸、远志皂苷等外，大多数三萜化合物无明显的紫外吸收或仅在200 nm附近有末端吸收

柴胡皂苷的现代药理综述

⏹1对中枢神经系统作用

1．1抗惊厥作用

1 . 2抗癫痫作用

⏹2抗肿瘤作用

⏹3护肝作用

⏹4抗炎、免疫抑制作用

⏹5促胰腺腺泡酶分泌作用

柴胡皂苷的提取

⏹取一定量的北柴胡根部干粉，加入70％乙醇浸泡3 d，纱布滤纸过滤后收集滤液，滤渣继续重复上述操作2次，最后合并3次所得的滤液。

⏹滤液减压浓缩至原体积的1／10左右，石油醚3次脱去脂溶性成分。

⏹水相挥去残留石油醚，加水稀释后上AB-8大孔吸附树脂

柱进一步分离提取。

⏹所得乙醇洗脱液经D-280树脂柱脱色，减压浓缩后，冻干。

⏹AB一8树脂柱的使用流程

⏹预处理好的AB一8 树脂柱，样品液上柱，反复吸附直至薄层层析检测流出液中不再有皂苷为止，6～8倍柱体积的去离子水洗脱糖，乙醇洗脱皂苷。

⏹D一280树脂柱的使用流程

⏹预处理好的D．280 树脂柱，待脱色样品液上柱，收集流出液(控制流速约为3 mL／min)，75％乙醇洗脱残留在树脂上的皂苷，合并流出液即为脱色后的样液。

薄层层析法(TLC)检测柴胡皂苷

将薄层层析板于110℃烘箱活化30～60min，用微量点样器吸取样品，点样于薄层层析板的点样线上。点样线～般距硅胶板底缘1．5cm左右，点样次数由样品质量浓度来确定，每次点样均须用电吹风吹干。薄层层析板点好样后放人层析缸中展开，所用展开剂为V(氯仿)：V(甲醇)：

V(水)=7：2．5：0．5，且所用展开剂的量不能没过薄层层析板的点样线。待展开至规定距离(一般距薄层层析板上缘0．5cm)，取出，吹干溶剂，2％对二甲氨基苯甲醛-硫酸(40％)热吹风显色。

高效液相色谱法(HPLC)检测柴胡皂苷

取用大孔树脂洗脱液所提取的柴胡皂苷，及柴胡皂苷a和b2标准品各1mg，用色谱纯甲醇配制成1 mg／mL的溶液，做高效液相色谱检测。将洗脱液中柴胡皂苷的图谱与柴胡皂苷a和b2标准品的图谱进行对比。