第一章样品前处理支撑液液萃取和蛋白质沉淀介绍
液相色谱前处理
液相色谱前处理液相色谱的样品前处理部分和液相色谱使用注意事项刘鹏 1233351 环境工程一、样品的前处理1.液体样品的前处理技术（1）液液萃取法：利用溶液中各组分在所选用的萃取剂中的溶解度差异，用液相萃取剂从溶液中提取出某种组分。
（2）顶空法（静态顶空，吹扫捕集法）：利用待测物的易挥发性，静态顶空法直接抽取样品顶空气体进行色谱分析，吹捕法利用载气尽量吹出样品中待测物后，用冷冻捕集或吸附剂捕集的方法来收集待测物。
（3）超临界流体萃取法：利用超临界流体密度高、黏度小、对压力变化敏感的特性，在超临界状态下萃取待测样品，通过减压、降温或吸附收集后分析。
（4）膜萃取：膜对待测物的吸附作用，先由高分子膜萃取样品中的待测物，再用气体或液体萃取高分子膜中的待测物。
（5）固相萃取：先用固相吸附剂吸附待测物，再用溶剂洗脱待测物。
（6）固相微萃取技术：利用待测物在样品及萃取涂层之间的分配平衡，将萃取纤维暴露在样品或其顶空真中萃取。
（7）液相微萃取法：包括大体积的水溶液及小体积的不溶于水的有机液液萃取，将疏水性的目标有机物转移到一滴有机溶剂中。
2.气体样品的前处理技术（1）样品衍生化：将样品制成衍生物，不仅可以提高从样品基体中萃取和预分离待测化合物的能力，而且可以通过降低样品的极性或改变样品组分的选择性来改善液相色谱分离，还可以改变样品中不同化合物的相对检测器响应，因而可在有谱带重叠的情况下，检测和定量待测组分中的某些组分。
分为紫外衍生化、荧光衍生化、电化学衍生化、柱后或柱前衍生化。
（2）固相萃取：先用固相吸附剂吸附待测物，再用溶剂洗脱待测物。
（3）膜萃取：膜对待测物的吸附作用，先由高分子膜萃取样品中的待测物，再用气体或液体萃取高分子膜中的待测物。
（4）液相微萃取法：包括大体积的水溶液及小体积的不溶于水的有机液液萃取，将疏水性的目标有机物转移到一滴有机溶剂中。
（5）液液萃取法：利用气体样品中各组分在所选用的萃取剂中的溶解度差异，用液相萃取剂从溶液中提取出某种组分。
生物样品前处理方法
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生物样品前处理的考虑因素
▲药物的理化性质和存在形式 ▲待测药物的浓度范围 ▲选用的生物样品类型
▲样品预处理与分析技术的关系
▲药物测定的目的
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生物样品前处理-有机破坏法
▲湿法破坏
硝酸-高氯酸法、电热消化器法、电热板消化法、烘箱消化 法。
▲干法破坏
高温电阻炉灰化法、低温等离子灰化法。
中某些组分，再用适当溶剂冲出杂质。 然后用少量溶剂洗脱，从而达到分离、净化与浓缩的目 的。
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生物样品前处理-固相萃取法
▲固相萃取法适用范围
大多数液体生物样品的前处理（如血浆、尿等）。
固体、半固体样品经过处理后也可使用SPE进行分离。
▲固相萃取法操作步骤
活化：根据所选择固定相的类型使用相应的活化溶剂
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生物样品前处理-固相萃取法
▲固相萃取法简介
固相萃取技术（SPE）是从上世纪八十年代中期发展起
来的，广泛运用于医学、制药、环境、食品等领域。 固相萃取法（SPE）就是用固体物质作为萃取剂，采用 高效、高选择性的固定相，进行萃取的样品预处理技术。
▲固相萃取法原理
以吸附剂为固定相，当液体样品通过固定相时，保留其
▲ 沉淀蛋白法优点
操作简便易行
▲ 沉淀蛋白法缺点
此法仅除去了蛋白质，内源性杂质并没有除去。
运用此法处理后的样品浓度会被稀释，不利于检测。
。 此法所得样品不能用光谱法检测。
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生物样品前处理-液液萃取法
▲液液萃取法简介
多数药物是亲脂性的，在适当的有机溶剂中的溶解度大于在水 相中的溶解度，而生物样品中的大多数内源性杂质是强极性 的水溶性物质。因而用有机溶剂萃取一次即可除去大部分杂 质。
液相色谱分析纯化样品前处理
液相色谱分析纯化样品前处理液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种广泛应用的分离与分析技术，已成为现代分析化学中必不可少的手段之一、液相色谱的样品前处理是指在样品进入液相色谱仪进行分析之前，为了提高分析结果的准确性和灵敏度，需要对样品进行一系列的处理步骤。
1.样品预处理样品预处理是指将样品转化为液相色谱合适的形式，消除样品中的固体颗粒、胶体颗粒和大分子物质。
常用的样品预处理方法包括离心、过滤、稀释等。
离心是将样品置于离心管中，以离心力使它们沉淀到离心管底部，从而分离固体颗粒和胶体颗粒。
过滤是将样品通过滤膜或滤纸，去除固体颗粒和胶体颗粒。
稀释是将样品中的高浓度物质通过加入适量的溶剂进行稀释，以减少样品中物质的浓度。
2.样品的萃取和浓缩样品的萃取和浓缩是将样品中目标物质与其他物质分离的重要步骤。
常用的方法有固相萃取、液液萃取和微量浓缩等。
固相萃取是利用固相吸附剂将目标物质从样品中吸附出来，然后用溶剂洗取目标物质，最后将溶液注入液相色谱进行分析。
液液萃取是利用两种互不溶的溶剂相，将目标物质从一个相中转移到另一个相中。
微量浓缩是将大体积的样品溶液经过一系列的萃取和浓缩步骤，将目标物质的浓度提高到适合液相色谱分析的范围。
3.样品的净化和纯化样品的净化和纯化是去除样品中的干扰物质，提高色谱分析结果的准确性和灵敏度的关键步骤。
常用的方法有凝胶过滤、离子交换、分子筛等。
凝胶过滤是将样品溶液通过特定孔径大小的凝胶，去除分子量较大的物质。
离子交换是利用离子交换树脂将样品中的离子物质与树脂上的离子交换，从而去除样品中的离子物质。
分子筛是利用有机聚合物、硅胶等材料对样品进行分子大小的筛选，去除样品中的大分子物质。
总之，液相色谱分析纯化样品前处理是提高分析结果准确性和灵敏度的重要步骤，其中包括样品预处理、样品的萃取和浓缩、样品的净化和纯化等步骤。
通过合理选择和组合上述处理方法，可以有效地去除样品中的杂质，减少色谱柱的堵塞和磨损，提高液相色谱的分离效果和分析结果的准确性。
化学检测样品前处理技术
化学检测样品前处理技术化学检测是一种常见的实验室技术，用于分析和检测样品中的化合物和成分。
在进行化学检测前，样品往往需要经过一系列的预处理工作，以确保样品的准确性和可靠性。
本文将介绍化学检测样品前处理技术的基本原理和常见方法。
一、样品前处理的基本原理样品前处理是指在进行化学检测前对样品进行处理，以去除干扰物质或提取目标成分，从而提高分析的准确性和灵敏度。
样品前处理的基本原理是通过物理或化学的方法对样品进行处理，使得待分析的成分得到富集或纯化，减少干扰因素，从而提高分析的准确性和可靠性。
二、常见的样品前处理技术1. 样品的提取与分离样品的提取与分离是指将待检测的化合物从样品基质中提取出来，以便进行后续的分析。
常见的提取方法包括溶剂提取、固相萃取和液液萃取等。
溶剂提取是利用合适的溶剂将目标物质从样品中提取出来，通常采用搅拌或超声波提取。
固相萃取则是利用固相材料将目标物质吸附或分离出来，通常采用填料柱或固相萃取柱进行提取。
液液萃取是利用两种不相溶的溶剂将目标物质分离出来，通常采用分液漏斗或离心管进行分离。
这些方法能够有效地提取和分离目标物质，减少干扰物质对检测结果的影响。
2. 样品的净化与富集3. 样品的预处理与反应样品的预处理与反应是指对提取和富集后的样品进行适当的处理和反应，以改变化合物的性质和特性，从而便于后续的分析和检测。
常见的预处理方法包括稀释、离子交换、磷酸盐沉淀和甲醇化等。
稀释是将样品的浓度稀释到适当的范围，以符合检测方法的要求。
离子交换是利用离子交换树脂将离子从溶液中吸附或交换出来，通常用于去除干扰离子或富集目标离子。
磷酸盐沉淀是利用磷酸盐将金属离子沉淀成固体，以便后续的分析。
甲醇化是利用甲醇化试剂将目标化合物转化为易于分析的衍生物，通常用于氨基酸、多酚和羰基化合物的检测。
这些方法能够有效地改变化合物的性质和特性，便于后续的分析和检测。
样品的分解与消解是指将样品中的有机和无机成分分解为易于检测的化合物，以便后续的分析和检测。
8.3体内样品预处理-1
1. 溶剂沉淀法 2. 中性盐析法 3. 强酸沉淀法 4. 热凝固法
(二) 分离与浓集法 氮气吹扫仪 真空浓缩离心机
1. 液相萃取法
也称液-液提取法（liquid-liquid extraction，LLE）
原理：多数药物是亲脂性的，在适当的有机溶剂中的溶解 度大于在水相的溶解度，而大多数内源性干扰物质是强 极性的水溶性物质，因此有机溶剂提取后可除去大部分 内源性干扰物质。
萃取操作方法：
一般只提取1次 若提取回收率较低（如低于50%）时, 可提取2~3次 若有脂溶性干扰物, 可将提取出的含药有机相再用
一定pH的小体积水溶液反提取（back extraction ）
*:含过氧化物； :肝脏毒性, 有致癌作用
萃取溶剂的用量
有机相与水相（体内样品）体积比为1:1~5:1 体内样品溶液（水相）的pH
对于碱性药物，最佳pH为高于 pKa 1~2个pH单位
对于酸性药物，最佳pH为低于 pKa 1~2个pH单位
90%的药物 以非电离形 式存在，更 易溶于有机 溶剂中
体内样品预处理 --蛋白沉淀，液液萃取法
内容
一 体内样品预处理的目的 二 常用体内样品预处理方法
一、体内样品前处理的目的
1. 使待测 血浆蛋白结合物；缀合物
组分游离 使待测药物/代谢物释放
测定药物/代谢物总浓度
3. 改善
2. 满足
分析环境 前处理 测定方法
的要求
防止仪器污染,劣化(去蛋白 )提高测定灵敏度/选择性血浆/血清与 有机溶剂的体 积比1∶(2-3)
饱和硫酸铵, 硫酸钠,硫酸镁 ,氯化钠等
血清与饱和 硫酸铵溶液的 比1∶2
10%三氯醋 酸或6%高氯 酸溶液
化学试验室基础：4.样品前处理技术
不同规格的SPE柱
正相 (silica gel,almina,florisil,CN,NH2,Diol) 反相(C18, C8, C4, Phenyl) 离子交换(SAX, WAX, SCX, WCX)
SPE 柱预处理, 样品添加, 柱洗涤
SPE 柱
排放槽
收集瓶
馏份洗脱
SPE 柱
（9）生物样品水解、蛋白沉淀
（10）离心/过滤 （11)蒸发浓缩
（12）消解
2 重要性--以残留分析为例
2.1 需要检测痕量或超痕量残留水平。 2.2 待测样品污染源的未知性和样品种类的多样性 2.3 同时进行多残留检测。 2.4 结论：萃取、净化技术等样品前处理是残留分
析的关键。因而选择适当的样品处理方法或多种 手段联合使用，是成功完成样品分析的 基础。
固相微萃取(SPME)是九十年代兴起并迅速发 展的新型的、环境友好的样品前处理技术，无需 有机溶剂，操作简便。在一个简单过程中同时完 成了取样、萃取、富集和进样，是对液体样品中 痕量有机污染物萃取方面的重要贡献。
3.1 固相微萃取原理
吸附--在石英纤维萃取头外表面涂渍一层固定液。 遵循相似相溶原理，待测物在一定条件下被溶解 /吸附在固定液中，并在固定液和样品中介质中 达到平衡。涂层上吸附的待测物的量与样品中待 测物浓度线性相关。
样品分析过程中各程序所花费的时间
数据处理 27%
分析 6%
采样 6% 样品处理 61%
From: LC-GC Intl. Vol. 4, No. 2, 1991
标准曲线 9% 色谱柱 11%
色谱过程中的误差来源
仪器 8%
色谱 7%
积分 6%
进样 6%
化学分析方法的生物样品前处理技术
化学分析方法的生物样品前处理技术化学分析是现代科学研究和工业生产中不可或缺的一环。
为了获得准确和可靠的化学分析结果，对于生物样品的前处理技术至关重要。
本文将介绍几种常用的生物样品前处理技术，包括固相萃取、液液萃取、溶剂萃取和分离提纯技术。
一、固相萃取技术固相萃取（Solid-phase Extraction，简称SPE）是一种用于生物样品前处理的重要技术。
其原理是将待检样品与吸附剂接触或通过吸附剂时，目标分析物被吸附到吸附剂上，达到样品的富集和净化。
固相萃取技术具有以下优点：操作简单、灵敏度高、富集效果好、耗时短等。
在化学分析领域中被广泛应用。
二、液液萃取技术液液萃取（Liquid-Liquid Extraction，简称LLE）是一种通过溶剂与待检样品中目标分析物的选择性溶解度差异而发生分离的技术。
其原理是将待检样品与萃取溶剂进行充分混合搅拌后，静置，根据目标分析物在两种溶剂中的分配系数，使其转移到相应的溶剂层中。
液液萃取技术适用范围广泛，操作简单。
但其溶剂消耗大，使用过程中易产生有机溶剂挥发、环境危害等问题，因此在实际应用中需要加以控制和优化。
三、溶剂萃取技术溶剂萃取技术（Solvent Extraction）是指通过非挥发性溶剂将目标分析物从待测样品中提取出来。
它是一种在液液界面上基于物质间相互作用力原理进行的分离技术。
该技术广泛应用于生物样品的前处理中。
溶剂萃取技术不仅可以提取有机物，还能用于提取无机物，同时能实现溶液的浓缩和纯化。
在生物样品前处理中，该技术常与其他技术，如SPE技术结合使用，以实现样品更好的富集和净化效果。
四、分离提纯技术分离提纯技术在生物样品前处理过程中起到了至关重要的作用。
常见的分离提纯技术包括薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等。
薄层色谱技术（Thin Layer Chromatography，简称TLC）是一种常用的分离化合物的方法。
它通过将待测样品在薄层色谱板上作用，根据各种成分的溶解度差异和物理化学性质等特点进行分离。
蛋白组学样品前处理流程
蛋白组学样品前处理流程蛋白组学是研究蛋白质组的学科，其目标是识别和定量细胞或生物体中的所有蛋白质，并研究其功能和相互作用。
在进行蛋白组学研究之前，需要对样品进行前处理，以确保实验结果的准确性和可重复性。
本文将介绍蛋白组学样品前处理的一般流程。
样品前处理是蛋白组学研究中非常重要的一步，它的目的是去除干扰物质、富集目标蛋白，并将样品转化为适合质谱分析的形式。
一般而言，蛋白组学样品前处理流程包括样品采集、细胞裂解、蛋白质提取、蛋白质富集和样品清洁等步骤。
样品采集是蛋白组学研究的第一步。
根据研究目的的不同，样品可以是细胞、组织、血清、尿液等。
在采集样品时，需要注意选择合适的采集工具和方法，以确保样品的完整性和纯度。
接下来是样品的细胞裂解步骤。
细胞裂解是将细胞膜破坏，释放细胞内的蛋白质，使其能够与后续处理步骤中的试剂发生反应。
常用的细胞裂解方法包括机械破碎、超声波破碎和化学破碎等。
选择合适的细胞裂解方法需要考虑到样品类型、细胞数量和目标蛋白的性质等因素。
蛋白质提取是样品前处理流程中的关键步骤。
提取蛋白质的目的是将其从细胞裂解液中分离出来，并去除其他的非蛋白质成分。
常用的蛋白质提取方法包括溶液提取、固相萃取和电泳法等。
选择合适的提取方法需要考虑到目标蛋白的性质、样品的复杂性和后续分析的要求等因素。
蛋白质富集是样品前处理流程中的关键步骤之一。
由于细胞中蛋白质的种类和丰度差异很大，富集目标蛋白可以提高后续质谱分析的灵敏度和准确性。
常用的蛋白质富集方法包括亲和富集、凝胶过滤和电泳分离等。
选择合适的富集方法需要考虑到目标蛋白的性质、样品的复杂性和富集效率等因素。
最后是样品清洁步骤。
样品清洁的目的是去除富集过程中的杂质和残留的试剂，减少对质谱分析的干扰。
常用的样品清洁方法包括洗涤、浓缩和脱盐等。
选择合适的清洁方法需要考虑到样品的复杂性、富集方法的特点和后续分析的要求等因素。
蛋白组学样品前处理流程是蛋白组学研究中至关重要的一步。
生物样本样品前处理
4
常用液液提取溶剂
溶剂名称 二氯甲烷 乙酸乙酯 氯代正丁烷
乙醚 戊烷 环己烷 正己烷 甲苯 异丙醇* 四氢呋喃* 乙腈* 正丁醇* 水*
分子量 84.9 88.1 92.6 74.1 72.2 84.2 86.2 92.2 60.1 72.1 41.1 74.1 18.0
注：“*”表示与水互溶
沸点（℃） 40
5、固相萃取法：可实现自动化，基质效应降低，同时完成样品的富
集与净化；但成本较高
3
液液提取法
利用目标化合物在生物基质和与水不互溶的有机溶剂中溶解度或分配 系数的不同，使化合物从生物基质中转移至有机相中。
➢两相的分离需借助两相的密度差来实现
➢原理：相似相溶
➢分配系数：kA=yA/xA yA和xA分别表示在萃取相和萃余相中的质量比率
常见表面活性剂：Triton-X-100，吐温等
Tips
1、表面活性剂需确立一个浓度范围而不是单一浓度。 2、样本已经采集，考虑将待测物从容器中解离出来。
14
讨论和问题
Thank you!
15
0.08 0.36 1.66 1.63 3.92 1.50 1.84
5
固相提取法
◇HLB(Hydrophilic-Lipophilic Balance Copolymer)材料的优点
△水可浸润 △反相保留 △PH1-14范围内稳定 △没有裸露硅羟基
6
固相提取法
7
固相提取法
8
固相提取法
改变化合物PH，酸性 保留，碱性洗脱
77.1 77
34.5 36.1 80.7
69 110.6 82.4
66 81.6 117 100
密度（g/mL) 1.33 0.90 0.89 0.71 0.63 0.78 0.66 0.87 0.79 0.89 0.78 1.00 1.00
常用的质谱样品前处理方法
常用的质谱样品前处理方法
质谱是一种重要的分析技术，但样品的前处理是质谱分析的关键步骤，其中包括样品的提纯、富集和分离等。
下面介绍几种常用的质谱样品前处理方法。
1. 固相萃取
固相萃取是一种常用的样品富集方法，可以有效地提高样品浓度，并避免多余的基质干扰。
该方法通过将待分析的混合物通过具有亲和性的固相材料，如C18、C8等，将目标分子吸附在固相上，然后用洗脱剂洗掉非目标成分，最后用甲醇等有机溶剂洗脱目标成分。
2. 液液萃取
液液萃取是一种利用不同相溶性进行分离的方法。
在该方法中，待分析的样品与有机溶剂混合，利用溶剂之间的相互作用力和分配系数，将目标分子从水相中分离出来。
然后再将有机溶剂分离，分离后的有机溶剂中就含有目标分子。
3. 离子交换层析
离子交换层析是一种利用固相离子交换材料进行样品的分离和
富集的方法。
在该方法中，待分析的混合物通过离子交换柱，利用不同离子的带电性质进行分离。
通常使用的离子交换柱为阴离子交换柱和阳离子交换柱。
4. 气相色谱-质谱前处理方法
气相色谱-质谱前处理方法是一种将样品分离后再进行质谱分析
的方法。
该方法通常使用的前处理技术包括固相微萃取和固相微萃取
-气相色谱等。
固相微萃取可以将样品分离成含有目标分子的有机溶剂，而固相微萃取-气相色谱则可以将样品分离成含有目标分子的挥发性化合物。
总之，样品的前处理对于质谱分析至关重要，选择合适的前处理方法可以提高样品的纯度和浓度，增加分析的准确性和灵敏度。
蛋白质沉淀法详解
蛋白质沉淀法详解蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。
蛋白质的沉淀（protein precipitation），沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。
蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。
蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸（如三氯醋酸）沉淀等。
在生化制备中，沉淀主要用于浓缩目的，或用于除去留在液相或沉淀在固相中的非必要成分。
在生化制备中常用的有以下几种沉淀方法和沉淀剂：1．盐析法多用于各种蛋白质和酶的分离纯化。
2．有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化，有时也用于蛋白质沉淀。
3．等电点沉淀法用于氨基酸、蛋白质及其它两性物质的沉淀。
但此法单独应用较少，多与其它方法结合使用。
4．非离子多聚体沉淀法用于分离生物大分子。
5．生成盐复合物沉淀用于多种化合物，特别是小分子物质的沉淀。
6．热变性及酸碱变性沉淀法用于选择性的除去某些不耐热及在一定PH值下易变性的杂蛋白。
第一节盐析法一般来说，所有固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程叫盐析。
在生化制备中,许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离，如蛋白质、多肽、多糖、核酸等，其中以蛋白质沉淀最为常见，特别是在粗提阶段。
盐析法分为两类，第一类叫Ks分段盐析法，在一定PH和温度下通过改变离子强度实现，用于早期的粗提液；第二种叫b分段盐析法，在一定离子强度下通过改变PH和温度来实现，用于后期进一步分离纯化和结晶。
一．影响盐析的若干因素1．蛋白质浓度高浓度蛋白溶液可以节约盐的用量，但许多蛋白质的b 和Ks常数十分接近，若蛋白浓度过高，会发生严重的共沉淀作用；在低浓度蛋白质溶液中盐析，所用的盐量较多，而共沉淀作用比较少，因此需要在两者之间进行适当选择。
用于分步分离提纯时，宁可选择稀一些的蛋白质溶液，多加一点中性盐，使共沉淀作用减至最低限度。
一般认为2.5%-3.0%的蛋白质浓度比较适中。
化学检测样品前处理技术
化学检测样品前处理技术化学检测样品前处理技术是化学分析中不可或缺的一环，它主要是指在进行样品分析前对样品进行必要的处理，以提高分析的准确性和可靠性。
常见的前处理技术包括样品提取、洗涤、浓缩、分离、净化等步骤，这些技术的选择和操作对最终的化学分析结果有着至关重要的影响。
下面将重点介绍几种常见的化学检测样品前处理技术及其在分析中的应用。
一、样品提取技术1. 溶剂萃取法溶剂萃取法是一种常用的样品提取技术，其基本原理是利用溶剂对样品中的目标成分进行提取。
通常情况下，样品与适量的溶剂接触，在合适的条件下将目标成分转移到溶剂中，然后通过减少溶剂体积或者蒸发溶剂来得到提取物。
溶剂萃取法可用于提取各种有机物和无机物，其操作简便、操作成本低，成为分析实验中的重要手段。
2. 固相萃取技术固相萃取技术是利用固相材料对样品中目标成分进行富集和分离的一种技术。
常见的固相材料有气相色谱柱填充物、液相色谱柱填充物、SPE柱和固相微萃取柱等。
固相萃取技术操作简单，操作流程短，对有机物和无机物均有较好的适用性，广泛应用于环境监测、食品安全检测、生物样品分析等领域。
样品洗涤技术主要用于去除样品中的杂质、背景干扰物等，以提高分析的灵敏度和准确性。
常用的样品洗涤技术包括溶液洗涤、水洗和固相萃取物的洗涤等。
1. 溶液洗涤溶液洗涤是指利用适当的溶液将样品中的杂质、干扰物等溶解或者沉淀，从而分离出目标成分。
在进行溶液洗涤时，需要选用适当的洗涤液，并控制洗涤时间、温度和pH等条件，以提高洗涤效果和减少误差。
2. 水洗水洗是一种简便有效的样品洗涤技术，适用于水溶性的样品和水溶性杂质。
水洗的操作简单，且无需添加化学试剂，不会对分析结果产生干扰，因此在分析中得到广泛的应用。
样品浓缩技术主要是为了提高目标成分的浓度，从而提高分析的灵敏度。
常见的样品浓缩技术包括蒸发浓缩、气相浓缩和液相浓缩等。
1. 蒸发浓缩蒸发浓缩是将样品中的溶剂蒸发掉，使目标成分在较小的体积中得到富集。
化学分析方法的样品前处理技术
化学分析方法的样品前处理技术在化学分析中，样品前处理技术是至关重要的步骤。
它包括一系列的操作，旨在提取、浓缩、净化和改变样品的形态，以便于后续的分析。
样品前处理技术的选择和优化对分析结果的准确性和可靠性具有决定性的影响。
本文将介绍几种常用的化学分析方法的样品前处理技术。
一、溶解法溶解法是最常见的样品前处理技术之一。
它适用于固体和液体样品的处理，在分析中经常被用来将固体样品转化为易于处理的溶液。
溶解法有很多种方法，如常规溶解、酸溶解、碱溶解、氧化溶解等。
根据具体的分析要求和样品性质，可以选择合适的溶解方法。
二、萃取法萃取法是一种将目标分析物从复杂的样品基质中提取出来的技术。
它是通过不同物质在不同溶剂中的溶解度差异来实现的。
常见的萃取法有液液萃取、固相萃取、超临界流体萃取等。
萃取法通常需要将样品前处理为溶液形式，然后选择合适的萃取剂和提取条件进行分离。
三、浓缩技术浓缩技术是为了增加分析物的浓度而进行的处理方法。
在某些情况下，样品中的分析物含量较低，需要通过浓缩使其达到检测限。
浓缩技术有很多种方法，如蒸发浓缩、溶剂萃取浓缩、固相萃取浓缩等。
根据不同的分析要求和样品性质，可选择合适的浓缩方法。
四、净化技术净化技术旨在去除样品中的干扰物质，提高分析物的纯度和准确性。
常见的净化技术包括过滤、萃取、萃余、晶体化等。
通过这些技术的应用，可以减少干扰物的影响，提高分析结果的可靠性。
五、前处理技术的优化和自动化为了提高样品前处理技术的效率和准确性，人们进行了大量的研究和探索。
优化前处理条件、改良分析仪器、引入自动化技术等都是提高前处理技术的有效方法。
例如，利用高压加热技术可以实现样品的快速消解和浓缩，从而大大提高分析的效率。
在化学分析中，样品前处理技术的选择和优化对于获得准确、可靠的分析结果至关重要。
各种前处理技术的应用需要根据具体分析要求和样品特性进行选择。
科学家们还在不断探索和改进前处理技术，以满足分析工作的不断发展和创新。
样品前处理方法及应用
样品前处理方法及应用样品前处理方法指的是对样品进行处理以提取目标成分或减少干扰物对分析结果的影响的方法。
样品前处理是化学分析的重要步骤之一，能够提高分析结果的准确性和灵敏度。
下面将介绍几种常用的样品前处理方法及其应用。
1. 提取分离法提取分离法是采用溶剂将目标成分从样品中提取出来的方法。
它包括固相萃取、液液萃取、超临界流体萃取等。
这些方法广泛应用于环境样品、食品样品、生物样品等的前处理过程中。
例如在环境样品分析中，固相萃取常用于对水样中的有机污染物的提取分离，如挥发性有机物、多环芳烃等。
而在食品样品中，液液萃取可以有效地提取出脂肪溶性的食品添加剂、农药残留等。
2. 气相色谱前处理气相色谱（GC）是一种常用的分析方法，但由于样品的复杂性和复杂基体的影响，样品的组分可能需要进行前处理才能适应气相色谱的分析条件。
例如，对于液态样品，可以通过蒸馏、浓缩、萃取等方法将目标成分从样品中提取出来或浓缩，以减少对GC分析的干扰。
3. 液相色谱前处理液相色谱（LC）是分离和分析化学中常用的技术。
在液相色谱分析中，常常需要对样品进行预处理，以去除干扰物质或浓缩目标成分。
例如，对于复杂的生物样品，可以通过蛋白酶切割、溶剂提取、固相萃取等方法来提取和富集目标化合物。
4. 衍生化衍生化是对分析样品中的化合物进行化学变换以提高其检测性能的方法。
衍生化通常用于气相色谱和液相色谱分析中，可以通过改变分析物的化学性质，增强信号响应和分离性能。
衍生化方法有很多种，如酯化、乙酰化、甲酰化等。
衍生化可以应用于食品、生物制剂等样品的分析中。
5. 固相萃取固相萃取是一种常用的前处理方法，通过使用固定在固相材料上的吸附剂将目标物质从样品中吸附出来。
固相萃取具有操作简单、净化效果好、富集浓度高等优点，广泛应用于环境、食品、生物等领域的样品分析中。
总结起来，样品前处理方法在化学分析中起着至关重要的作用。
通过合适的前处理方法，我们可以提高样品的净化效果、富集目标成分、减少干扰物质对分析结果的影响，从而提高分析结果的准确性和灵敏度。
样品的前处理方法
样品的前处理方法1.溶解和稀释：对于固体样品，首先需要将其溶解或稀释成适当的溶液，以便于后续的分析。
常见的方法包括溶解在溶剂中、酸溶解、碱溶解等。
而对于液体样品，可能需要稀释以调整其浓度。
2.过滤和离心：对于含有悬浮物的液体样品，可以通过过滤将悬浮物去除，以获得清晰的溶液。
而对于固体颗粒的样品，可以通过离心将其沉淀到底部，然后将上清液用于后续处理。
3.搅拌和超声处理：对于含有悬浮物或沉淀物的样品，可以通过搅拌或超声处理来使其更均匀地分布在溶液中，以便于后续处理或分析。
4.萃取和萃取液浓缩：对于有机物或有机溶剂的样品，可以使用萃取方法将所需的成分提取出来。
常见的方法包括液液分配萃取、固相萃取等。
而对于萃取液中含有较多的有机溶剂，可以使用浓缩方法将有机溶剂去除，从而得到目标物质。
5.衍生化：对于一些样品，为了能够更好地进行分析，需要进行衍生化处理。
衍生化可以改变样品中的官能团或结构，以提高其稳定性、挥发性或检测性能。
常见的衍生化方法包括酯化、取代、酰化等。
6.清洗和去除干扰物：在分析过程中，可能存在一些干扰物或杂质，需要使用清洗方法将其去除。
常见的清洗方法包括洗涤、过氧化物清洗、溶剂萃取等。
7.浓缩和净化：对于样品中目标物质的含量较低或需要进一步净化的情况，可以使用浓缩或净化的方法。
常见的方法包括减压浓缩、柱层析、电析等。
8.pH调整和稳定化处理：有些分析方法对样品的pH值有要求，因此需要通过调整和稳定样品的pH值来满足分析的要求。
常见的方法包括加入酸或碱等。
9.补偿因子的添加和校正：在一些实验或分析中，可能需要添加一些补偿因子或内标物质，以进行结果的校正和修正。
常见的添加物包括内标物质、标准溶液等。
分析化学中的样品前处理方法
分析化学中的样品前处理方法分析化学是一门广泛应用于实验室和工业现场的科学技术。
在进行分析前，样品的前处理是非常重要的一步。
样品前处理包括样品的采集、制备、预处理和分配等，目的是提高分析结果的准确性和可靠性。
下面将从常用的样品前处理方法入手，深入探讨其原理和应用。
一、溶解和溶解度测定是样品前处理的基本步骤之一。
溶解是将固体样品或液体样品转化为溶液样品的过程。
在分析化学中，常用的溶解剂有水、有机溶剂如乙醇、甲醇等。
通过溶解样品，分析师可以取得更好的样品均匀性和溶解度，以适应各种分析方法的需要。
溶解度是某种物质在溶液中溶解的程度，可以通过实验测定获得。
测定溶解度的方法有多种，如饱和溶解度法、超过饱和溶解度法等。
二、提取是样品前处理中常用的方法之一。
提取是将样品中目标物质分离出来，获得较高浓度的目标物质。
提取方法的选择主要取决于目标物质的性质和样品的性质。
常用的提取方法包括溶剂提取、液液萃取、固相微萃取等。
在实际应用中，根据需要还可以结合各种增效剂和离子液体等改善提取效果。
三、浓缩是样品前处理中一种常见的步骤。
浓缩的目的是将化学分析中需要的物质浓缩到一个较小的体积，以提高检出限和灵敏度。
浓缩的方法有很多种，如蒸发浓缩、萃取浓缩、溶剂替代浓缩等。
选择适合的浓缩方法需要综合考虑样品特性、目标物质的溶解性和检测方法的要求等因素。
四、样品预处理是样品前处理中一个非常重要的环节。
样品预处理的目的是消除样品中的干扰物质，提高分析结果的准确性。
常见的样品预处理方法包括沉淀分离、过滤、洗涤等。
这些步骤可以去除样品中的杂质，提供纯净的样品供后续分析使用。
此外，样品预处理还包括样品的预处理技术如加热处理、冷冻干燥等，以改变样品的物理和化学性质，提高分析结果的准确性。
五、样品分配是样品前处理中一个关键的步骤。
样品分配的目的是将样品按照不同的分析要求进行处理和分配，以满足不同分析方法和仪器的需要。
样品分配可以进行样品混合、稀释、分装等操作。
样品前处理技术
样品前处理技术：1）溶剂萃取液体样品最常用的萃取技术之一是溶剂萃取，通常叫做液液萃取。
据调查，在分析化学实验室中几乎半数的人员常常使用液液萃取。
在固体或者气体中含有的某些物质，也可以使用溶剂将它们溶解出来，这样的方法也称作溶剂萃取。
根据基质的不同，可分为液液萃取、液固萃取和液气萃取（溶液吸收）。
其中，使用最为广泛的是液液萃取。
液液萃取技术利用样品中不同组分分配在两种不混溶的溶剂中溶解度或分配比的不同来达到分离、提取或纯化的目的。
现在的液液萃取技术已不只是传统的使用分液漏斗的一步液液萃取，它还包括连续萃取、逆流萃取、微萃取、萃取小柱技术、在线萃取技术、自动液液萃取等方式。
其中，连续萃取和逆流萃取有利于处理含有低分配系数物质的样品；微萃取技术有利于提高灵敏度和减少溶剂用量，但回收率方面还有待提高；萃取小柱技术模仿了传统的液液萃取技术，而且使样品收集变得非常容易，同时避免了样品乳化问题；在线萃取和自动液液萃取等方式能够减小人为误差，有利于处理大体积样品。
2）蒸馏蒸馏是一种使用广泛的分离方法，根据液体混合物中液体和蒸汽之间混合组分的分配差异进行分离。
蒸馏技术是挥发性和半挥发性有机物样品精制的第一选择。
对于复杂的环境样品前处理而言，很少会用到简单的常压蒸馏，更多使用的是分馏、水蒸气蒸馏、真空蒸馏、抽提蒸馏与液液萃取或升华等技术的联用。
3）固相萃取固相萃取就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，使其与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。
与液液萃取等传统的分离富集方法相比，具有如下优点：（1）高的回收率和富集倍数。
大多数固相萃取体系的回收率较高，可达70％～100％；另外，富集倍数一般很高，很多体系很容易就能达到几百倍，少数体系甚至能达到几千或几万倍。
（2）使用的高纯有毒有机溶剂量很少，减少了对环境的污染，是一种对环境友好的分离富集方法。
（3）无相分离操作，易于收集分析物组分，能处理小体积试样。
体内药物分析样品前处理(final)
沉淀剂 10% 三氯乙酸水溶液 （体积体积比） 10% 硫酸锌水溶液 （重量体积比） 饱和硫酸铵水溶液 （室温下） 乙腈 乙醇 甲醇
沉淀剂-血浆 体积比 0.5 2 3 1.5 3 2.5
11
二. 蛋白沉淀法
在96孔板中加入标准曲线样品， 质控样品和未知样品各50µL
Oasis® WCX
Oasis® WAX
C O OH
COO- + H+
pKa ~5
NO
N
N H
NO
H
N+ N+
HH
pKa ~6
32
四. 固相萃取法
• Oasis WCX
WCX neutral state
Acids (HA)
Q+
utral
B
Q+
Bases (BH+)
A-
0 2 4 6 8 10 12 14 pH
14
三. 液-液萃取法
• 常见的亲水与亲脂官能团
官能团名称 亲水性基团 羟基 胺基 羧基 酰胺基 胍基 烷氨基 硫酸盐
结构，举例
-OH -NH2 -COOH -CONH2 -NH(C=NH)
15
三. 液-液萃取法
• 常见的亲水与亲脂官能团 (续表)
官能团名称 亲脂（亲油）性基团 碳-碳键 碳-氢键 碳-（卤族元素）键 烯烃族化合物 芳香族化合物
Oasis® HLB
NO
Oasis® MCX
Oasis® MAX
- SO3 pKa <<1
NO
CH3
CH2N+-C4H9
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PPT was introduced in 2000 by 3M Company. Compared to traditional centrifugation method the advantages of PPT are as follows: Simple
Easy
Fast High Throughput (HTP)
快速蛋白质沉淀
The process of protein sample analysis by single PPT and HPLC
高通量蛋白质沉淀
High throughput device
血清中头孢氨苄的分析
90 80 70
Recovery(%)
60 50 40 30 20 10 0 Acetonitrile Acetone Precipitator Methanol
血清中酸性药物吲哚美辛的萃取
SLE 应用（2）：
鸡肉、蜂蜜、牛奶中硝基呋喃类代谢物的分析：
呋喃唑酮代谢物（AOZ）、呋喃它酮代谢物（AMDZ）、 呋喃妥因代谢物（AHD）、呋喃西林代谢物（SEM）
SLE应用（3）：白酒中塑化剂的分析
化合物 tR S1（%） S2（%） （min） 化合物 tR（min） S1 S2（%） （%）
131.0 97.8 130.8 105.8
99.5 83.9 102.7 66.3
18.1 18.2 20.5 23.023
105.9 170.6 123.8 121.1
89.6 117.7 99.9 97.9
邻苯二甲酸丁酯
填料 回收率（%）
C18
PS-DVB SLE
100.40
123.53 158.37
邻苯二甲酸二甲酯 邻苯二甲酸二乙酯
8.3 9.1
139.4 121.2
122.1 138.3
邻苯二甲酸二己酯 邻苯二甲酸丁基苄 基酯
邻苯二甲酸二(2-丁 氧基)乙酯 邻苯二甲酸二环己 酯 邻苯二甲酸二(2-乙 基)己酯 邻苯二甲酸二苯酯 邻苯二甲酸二正辛 酯 邻苯二甲酸二壬酯
15.6 15.7
87.5 129.4
热聚集
盐析 酸变性法 使生物样品中所有蛋白质整体变性
蛋白质沉淀的一般步骤
溶剂的加入
如内标物、反应物、2-5倍样品体积的有机溶剂；
震荡
增加蛋白质变性沉淀的速度，也可以将震荡后的 样品液进行冷冻从而增加蛋白质祛除的效率；
离心或者过滤除沉淀
过滤法效率与离心法相当或者更优于离心法，且 过滤法更易于实现自动化
No emulsification
High recovery rate
硅藻土-SLE
Investigation of packing and filled method
Characterization of packing
A
B
(A) Inert packing treated by high temperature burning and acid cleaning and ( B) Detail view of the inert packing
Recovery of the Cephalexin in BSA with different methods
血清中马来酸氯苯那敏
Recovery rates, intra-day and inter-day RSD of the Maleate Chlorphenamine The recovery (%) 110.45 102.34 1.08 1.71 RSD% (intra-day, n=6) RSD% (inter-day, n=6)
C (μg/mL) 8.52 21.35
34.16
96.77
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
硅藻土-SLE
The process of sample analysis by SLE and HPLC
First reported in 1997 by Johnson and co-workers
SLE has many advantages compared with LLE
Simple operation
62.3 96.0
邻苯二甲酸二异丁酯
10.9
171.8
159.6
17.2
164.3
125.4
邻苯二甲酸二丁酯
11.6176.4Fra bibliotek138.0
17.8
111.1
86.3
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 邻苯二甲酸二戊酯
12.0 12.7 13.1 13.4
第一章 样品前处理方法
专题介绍三：支撑液液萃取、 蛋白质沉淀
一、支撑液液萃取
Solid-supported liquid liquid extraction (SLE) 以传统液液萃取原理为基础，结合固相萃取 支撑体易于相分离的特点，以一种吸附性高、 惰性好、比表面积大的多孔填料为介质，从 而实现快速和高通量样品制备；
二、蛋白质沉淀
Protein precipitation tube，PPT 蛋白质沉淀的原理是沉淀剂与蛋白质的一部
分直接或间接的相互作用，从而使蛋白质聚
集沉淀。
生物样品中小分子物质的分析
减少生物样品中的蛋白质的含量
蛋白质标记物的分析
将不同的蛋白质分开 将蛋白质溶液进行浓缩
生物化学
Recovery of the Cephalexin in Fetal calf serum with different precipitators
PPT vs Centrifugation method
90 80 70
Recovery(%)
60 50 40 30 20 10 0 5 20 Concentration (μg/mL) 35 PPT Centrifugation
SLE样品前处理方法
惰性材料：种类、颗粒、装填量等；
萃取剂种类、体积；
萃取后处理；
SLE 应用（1）：
蔬菜、果汁中苯并咪唑类农药残留的检测：
水蜜桃
多菌灵
SLE 应用（2）：
血清中中性药物醋酸地塞米松的萃取
SLE 应用（2）：
血清中碱性药物马来酸氯苯那敏的萃取
SLE 应用（2）：