第一章样品前处理支撑液液萃取和蛋白质沉淀介绍

Recovery of the Cephalexin in BSA with different methods
血清中马来酸氯苯那敏
Recovery rates, intra-day and inter-day RSD of the Maleate Chlorphenamine The recovery (%) 110.45 102.34 1.08 1.71 RSD% (intra-day, n=6) RSD% (inter-day, n=6)
快速蛋白质沉淀
The process of protein sample analysis by single PPT and HPLC
高通量蛋白质沉淀
High throughput device
血清中头孢氨苄的分析
90 80 70
Recovery(%)
60 50 40 30 20 10 0 Acetonitrile Acetone Precipitator Methanol
Recovery of the Cephalexin in Fetal calf serum with different precipitators
PPT vs Centrifugation method
90 80 70
Recovery(%)
60 50 40 30 20 10 0 5 20 Concentration (μg/mL) 35 PPT Centrifugation
第一章 样品前处理方法
专题介绍三：支撑液液萃取、 蛋白质沉淀
一、支撑液液萃取

Solid-supported liquid liquid extraction (SLE) 以传统液液萃取原理为基础，结合固相萃取 支撑体易于相分离的特点，以一种吸附性高、 惰性好、比表面积大的多孔填料为介质，从 而实现快速和高通量样品制备；
二、蛋白质沉淀

Protein precipitation tube，PPT 蛋白质沉淀的原理是沉淀剂与蛋白质的一部

分直接或间接的相互作用，从而使蛋白质聚
集沉淀。

生物样品中小分子物质的分析

减少生物样品中的蛋白质的含量

蛋白质标记物的分析

将不同的蛋白质分开 将蛋白质溶液进行浓缩
生物化学
PPT was introduced in 2000 by 3M Company. Compared to traditional centrifugation method the advantages of PPT are as follows: Simple
Hale Waihona Puke Baidu
Easy
Fast High Throughput (HTP)
邻苯二甲酸二甲酯 邻苯二甲酸二乙酯
8.3 9.1
139.4 121.2
122.1 138.3
邻苯二甲酸二己酯 邻苯二甲酸丁基苄 基酯
邻苯二甲酸二(2-丁 氧基)乙酯 邻苯二甲酸二环己 酯 邻苯二甲酸二(2-乙 基)己酯 邻苯二甲酸二苯酯 邻苯二甲酸二正辛 酯 邻苯二甲酸二壬酯
15.6 15.7
87.5 129.4

血清中酸性药物吲哚美辛的萃取
SLE 应用（2）：

鸡肉、蜂蜜、牛奶中硝基呋喃类代谢物的分析：

呋喃唑酮代谢物（AOZ）、呋喃它酮代谢物（AMDZ）、 呋喃妥因代谢物（AHD）、呋喃西林代谢物（SEM）
SLE应用（3）：白酒中塑化剂的分析
化合物 tR S1（%） S2（%） （min） 化合物 tR（min） S1 S2（%） （%）
62.3 96.0
邻苯二甲酸二异丁酯
10.9
171.8
159.6
17.2
164.3
125.4
邻苯二甲酸二丁酯
11.6
176.4
138.0
17.8
111.1
86.3
邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 邻苯二甲酸二戊酯
12.0 12.7 13.1 13.4
No emulsification
High recovery rate
硅藻土-SLE
Investigation of packing and filled method
Characterization of packing
A
B
(A) Inert packing treated by high temperature burning and acid cleaning and ( B) Detail view of the inert packing
C (μg/mL) 8.52 21.35
34.16
96.77
人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。
131.0 97.8 130.8 105.8
99.5 83.9 102.7 66.3
18.1 18.2 20.5 23.023
105.9 170.6 123.8 121.1
89.6 117.7 99.9 97.9
邻苯二甲酸丁酯
填料 回收率（%）
C18
PS-DVB SLE
100.40
123.53 158.37

硅藻土-SLE
The process of sample analysis by SLE and HPLC

First reported in 1997 by Johnson and co-workers

SLE has many advantages compared with LLE
Simple operation

热聚集
盐析 酸变性法 使生物样品中所有蛋白质整体变性
蛋白质沉淀的一般步骤
溶剂的加入
如内标物、反应物、2-5倍样品体积的有机溶剂；
震荡
增加蛋白质变性沉淀的速度，也可以将震荡后的 样品液进行冷冻从而增加蛋白质祛除的效率；
离心或者过滤除沉淀
过滤法效率与离心法相当或者更优于离心法，且 过滤法更易于实现自动化
SLE样品前处理方法

惰性材料：种类、颗粒、装填量等；
萃取剂种类、体积；

萃取后处理；
SLE 应用（1）：

蔬菜、果汁中苯并咪唑类农药残留的检测：
水蜜桃
多菌灵
SLE 应用（2）：
血清中中性药物醋酸地塞米松的萃取
SLE 应用（2）：

血清中碱性药物马来酸氯苯那敏的萃取
SLE 应用（2）：