实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

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实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3.用浓盐酸调pH值至8.8。

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl,10mMEDTA(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1MTri-HClBuffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500mMEDTA(pH8.0)20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3.将溶液定至1L 后,高温高压灭菌。

4.室温保存。

4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3.加入去离子水将溶液定容至100mL。

4.高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。

常用缓冲液的配制方法

常用缓冲液的配制方法
40.00
1N
40.00
碳酸钠Na2CO3
106.00
1N
53.00
磷酸氢二钠Na2HPO4.12H2O
358.20
1N
358.20
磷酸二氢钾KH2PO4
136.10
1/15M
9.08
重铬酸钾K2Cr2O7
294.20
0.1N
4.9035
碘化钾KI
166.00
0.5N
83.00
高锰酸钾KMO4
158.00
GR.
ACS.
PA.
XЦ.
CP.
PUSS.
Puriss.
ЦДA.
LR.
EP.
Ц.
p.
pure
用途
纯度最高,杂质含量最少的试剂。适用于最精确分析及研究工作
纯度较高,杂质含量较低。适用于精确的微量分析工作,为分析实验室广泛使用
质量略低于二级试剂,适用于一般的微量分析实验,包括要求不高的工业分析和快速分析
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
(三)巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
PH
0.04M巴比妥钠溶液ml
0.2N盐酸
(毫升)
6.8
100
18.4
8.4
100
0.1N
3.16
醋酸钠NaC2H3O2
82.04

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂的配制方法2×SDS gel-loading buffer10×PBS10×SDS-PAGE电泳液10×转膜液细胞裂解液□组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8),100mM DTT,2%SDS,0.1%Bromophenol blue,10%Glycerol□配制量 10ml□配制方法 DTT 0.1572g,Bromophenol blue 0.01g,Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul,10% SDS 2ml,Glycerol 1ml,超纯水定容至10ml。

分装后于4度保存。

□组分浓度 NaCl 8%,KCl 0.2%,Na2HPO4.12H2O 2.9%g,KH2PO4 0.2%g□配制量 1L□配制方法称取NaCl 80.0g,KCl 2.0g,Na2HPO4.12H2O29.0g,KH2PO4 2.0g,超纯水定容至1L。

□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M,SDS 1%□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,SDS 10.0g,超纯水定容至1L。

□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,超纯水定容至1L。

注意:1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液,200ml甲醇定容至1L。

□组分浓度 NaCl 150mM,NP-40 0.5%,Tris-HCl 10mM,PMSF 0.1mM, aprotimin 2ug/ml, NaN3 0.02%□配制量 100ml□配制方法称取17mgPMSF溶于1ml甲醇,2mg aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用;称取NaCl 0.88g,NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml,Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml,溶有PMSF的甲醇1ml,aprotimin储存液1ml,混匀溶解后超纯水定容至100ml。

各种缓冲溶液配制表-

各种缓冲溶液配制表-

实验室常用缓冲液的配制方法1. 甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05M)X ml 0.2M 甘氨酸+ Y ml 0.2M 盐酸,再加水稀释至200ml。

pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0甘氨酸分子量=75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2. 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05M)X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾+Y ml 0.2M盐酸,再加水稀释至200ml。

pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23 0.2M 邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3. 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml 2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55Na2HPO4分子量=41.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量=78.05 0.2M溶液含35.61gC6H8O7·H2O分子量=10.14 0.1M溶液含21.01g/L4. 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M 柠檬酸C6H8O7·H2O/g 氢氧化钠NaOH/g 浓盐酸HCl/ml 终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10使用时可以每升中加入1g酚,若最后pH有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。

将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。

2、二氧化碳水。

将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。

3、磷酸盐缓冲液。

将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。

4、EDTA标准溶液。

将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。

5、肌酐标准溶液。

将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。

二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。

2、弱碱缓冲液。

将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。

3、弱盐缓冲液。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法1.醋酸钠/醋酸酸性缓冲液醋酸钠/醋酸酸性缓冲液适用于pH范围为4.0-6.0的实验。

配制方法如下:- 准备质量浓度为0.1mol/L的醋酸钠溶液和0.1mol/L的醋酸溶液。

-根据所需pH值,按照相应的比例混合醋酸钠溶液和醋酸溶液即可。

2.磷酸/盐酸性缓冲液磷酸/盐酸性缓冲液适用于pH范围为1.0-3.0的实验。

配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L和0.1mol/L的磷酸溶液。

-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和磷酸溶液即可。

3.磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液磷酸/氢磷酸二盐酸性缓冲液适用于pH范围为2.0-7.0的实验。

配制方法如下:- 准备0.2mol/L的盐酸溶液。

- 准备分别为0.2mol/L、0.1mol/L和0.05mol/L的氢磷酸二盐溶液。

-具体配制时,根据所需pH值,按照相应的比例混合盐酸溶液和氢磷酸二盐溶液即可。

4.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液适用于pH范围为5.0-8.0的实验。

配制方法如下:- 准备分别为0.2mol/L的梯度磷酸盐溶液。

-根据所需pH值,按照相应的比例混合相应浓度的磷酸盐溶液即可。

5.三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液三氯乙酸/三氯乙酸钠酸性缓冲液适用于pH范围为3.0-4.6的实验。

配制方法如下:- 准备质量浓度为0.2mol/L的三氯乙酸钠溶液和0.2mol/L的三氯乙酸溶液。

-根据所需pH值,按照相应的比例混合三氯乙酸钠溶液和三氯乙酸溶液即可。

以上是一些常见的缓冲溶液配制方法,具体的配制过程可能会因实验需求和具体试剂而略有不同。

在配制缓冲溶液时,一定要注意使用高纯度的试剂,并按照配制方法进行准确的实验操作。

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液,常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。

根据所需的pH范围和实验目的,可以使用不同的缓冲液配制方法。

以下是一些常见的缓冲液配制方法:1.磷酸盐缓冲液(PBS)磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。

它的制备方法如下:-取一个容器,加入8克氯化钠(NaCl),0.2克磷酸二氢钠(NaH2PO4),和1.44克磷酸氢二钠(Na2HPO4)。

-加入适量的去离子水,搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。

制备方法如下:- 取一个容器,加入121.14克Tris(羟甲基氨基甲烷)。

-加入适量的去离子水,搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。

3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。

制备方法如下:-取一个容器,加入20毫升醋酸钠三水合物(NaC2H3O2·3H2O)。

-加入6毫升醋酸。

-加入适量的去离子水,搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。

4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。

制备方法如下:-取一个容器,加入0.126克磷酸二氢钾(KH2PO4)。

-加入0.680克磷酸二氢钠(Na2HPO4)。

-加入适量的去离子水,搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。

5.碳酸氢盐缓冲液(HEPES缓冲液)HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。

-取一个容器,加入10克HEPES。

-加入适量的去离子水,搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法

各种缓冲液配制方法不同缓冲液的缓冲范围pH缓冲液是化学实验室中常用的一种试剂,可以帮助维持溶液的酸碱度。

下面介绍三种常用缓冲液的配制方法和缓冲范围。

一、甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L甘氨酸和Y毫升0.2 mol/L 盐酸,加入适量的水稀释至200毫升。

缓冲范围:pH值在2.2至3.6之间,X和Y的取值见上表。

二、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L)配制方法:取X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾和Y毫升0.2 mol/L盐酸,加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围:pH值在2.2至3.8之间,X和Y的取值见上表。

三、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制方法:根据上表中的数据,取相应的0.2 mol/L和0.1 mol/L的Na2HPO4和柠檬酸,加入适量的水稀释至20毫升。

缓冲范围:pH值在2.2至8.0之间,具体取值见上表。

以上缓冲液的配制方法和缓冲范围可根据实验需要进行调整和改变。

在实验过程中,正确选择缓冲液可以提高实验的成功率和准确性。

以下是已经修改好的文章:柠檬酸的浓度可以用毫升表示,其浓度数据如下:9.28 mL8.85 mL8.40 mL7.91 mL7.37 mL6.78 mL6.15 mL5.45 mL4.55 mL3.53 mL2.61 mL1.83 mL1.27 mL0.85 mL0.55 mL对于Na2HPO4,其分子量为141.98,0.2 mol/L的溶液需要28.40 g/L。

而Na2HPO4·2H2O的分子量为178.05,0.2 mol/L的溶液需要35.61 g/L。

最后,Na2HPO4·12H2O的分子量为358.22,0.2 mol/L的溶液需要71.64 g/L。

对于C6H8O7·H2O,其分子量为210.14,0.1 mol/L的溶液需要21.01 g/L。

以下是柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液的相关数据:pH: 2.2.3.1.3.3.4.3.5.3.5.8.6.5钠离子浓度(mol/L): 0.20.0.20.0.20.0.20.0.35.0.45.0.38柠檬酸(g) 氢氧化钠(g) 盐酸(mL)C6H8O7·H2O NaOH 97% HCl (浓)210 210 210210 245 285266 84 8383 144 186156 160 116106 45 68105 126最终体积(L):10使用时可以每升中加入1克酚。

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸–盐酸缓冲液LX毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = , mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升;2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液 mol/LX毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl,再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = , mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = , mol/L溶液为28.40克/升;Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液含35.01克/升;C 4H2O7·H2O分子量 = , mol/L溶液为21.01克/升;4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存;5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液 mol/L柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O :分子量, mol/L 溶液为21.01克/升;柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O :分子量, mol/L 溶液为29.41克/毫升; 6.乙酸–乙酸钠缓冲液 mol/LNa 2Ac·3H 2O 分子量 = , mol/L 溶液为27.22克/升; 7.磷酸盐缓冲液1磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液Na2HPO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为85.61克/升;Na2HPO4·12H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;NaH2PO4·2H2O分子量 = , mol/L溶液为克/升;磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4: pKa1=,pKa2=;Na2HPO4:pKa1=,pKa2=配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=1~4,配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12;用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS十二烷基硫酸钠会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾;磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH 范围宽;③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于;其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用;2磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液1/15 mol/L15M11.876克15M9.078克0.05M0.2M18℃0.04M8.25克0.05M25℃0.1M严;11.硼酸–硼砂缓冲液0.2M 硼酸根硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;溶液=0.2M 硼酸根含19.07克/升; 硼酸H 3BO 3,分子量=,溶液为12.37克/升; 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存; 12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液0.05MX 毫升0.2M甘氨酸+Y 毫升加水稀释至200毫升甘氨酸分子量=;0.2M 溶液含15.01克/升; 13.硼砂-氢氧化钠缓冲液0.05M 硼酸根 X 毫升0.05M 硼砂+Y 毫升加水稀释至200毫升硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=;0.05M 溶液为19.07克/升; 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液0.1M Ca 2+、Mg 2+存在时不得使用Na 2CO 2·10H 2O 分子量=;0.1M 溶液为28.62克/升; N 2HCO 3分子量=;0.1M 溶液为8.40克/升; 15.“PBS”缓冲液pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions注:为保证pH值的准确度,上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制;常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。

配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。

2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。

配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。

可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。

SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。

配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。

4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。

配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。

5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。

配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。

这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。

在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。

下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。

配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。

-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xPBS。

配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。

- 加入0.1%(v/v)Tween-20。

-混合均匀。

配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。

-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。

-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。

-用去离子水稀释至1xTBS。

2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。

配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。

-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。

-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。

-用去离子水稀释至所需浓度。

配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。

-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。

-加入1mM十二烷基硫酸钠。

-用去离子水稀释至所需浓度。

3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。

BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。

-加入0.1M硫酸(提取液B)。

-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。

Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。

-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。

-将A液倒入B液中混合,待用。

Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。

配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

常用试剂配表

常用试剂配表
Tris-Base 12.125g
Nacl 146.1g
(4M)Imidazole (6.25mL)1.7g
加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。用浓盐酸调pH值至8.0,定)
(5mMImidazole)
1M NaPi100mL
10×Transfer Buffer
Glycin144g
Tris base30.3
(Methanol200mL)
先称量Tris base和甘氨酸,加入约600mL的去离子水,搅拌溶解后定容至1L,储存于4℃。使用时取100mL溶液稀释至800mL,加入200mL甲醇配置为工作液。
考马斯亮蓝R-250染色液
Tris30.2g
Glycine188g10%SDS(w/v)100mL
先称量Tris base和甘氨酸,加入约800mL的去离子水,搅拌溶解后加入100mL 10%SDS100mL并加去离子水定容至1L后,室温保存。
5×SDS-PAGELoading Buffer
1MTris-HCl12.5mL
10%SDS50mL
1M IPTG
IPTG5g/21 mL
置于50mL离心管中。加入10mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至21mL。用0.22μm滤膜过滤除菌。分装(1mL/份)后,-20℃保存。
10%(W/V)过硫酸铵(AP)
Sodium persulfate1g/10mL
加入10mL的去离子水后搅拌溶解,贮存于-20℃。
Coomassie blueR-2501g
Ethanol250mL
Acetic acid100mL
称取R-250,置于烧杯。加入250mL的乙醇,搅拌溶解后加入100mL的乙酸(醋酸),混匀后加入650mL的去离子水,用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

Kan(卡那霉素)50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。

2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。

2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解,定容至50mL。

3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。

LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone(胰化蛋白胨)10gYeast Extract(酵母提取物)5gNaCl(氯化钠)10g2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。

3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

4.加去离子水定容至1L。

5.高温高压灭菌后,4℃保存。

几种实验室常见缓冲液的配比方法

几种实验室常见缓冲液的配比方法

几种实验室常见缓冲液的配比方法1、Trizma base 和Trizma HCl (Sigma 的Tris配比方法) 混合配1 L 50 mM Tris 缓冲液2、1L 1M磷酸钠缓冲液(pH6.0-7.2)配比表(25°C)1 L 100 mM 磷酸钠缓冲液(pH5.8-8.0)配比表(25°C)3、50 mM Glycine-HCl 缓冲液准备200 mM glycine溶液(A),200 mM HCl (B)50 mL (A) + X mL (B),稀释到200 mLpH范围表如下所示4,50 mM Glycine-NaOH缓冲液准备200 mM glycine溶液(A),200 mM NaOH (B) 50 mL (A) + X mL (B),稀释到200 mLpH范围表如下所示5,50 mM 乙酸根缓冲液准备200 mM 乙酸溶液(A),200 mM乙酸钠溶液(B) X mL (A) + Y mL (B), 稀释到100 mLpH范围如下所示6,50 mM 柠檬酸盐缓冲液准备100 mM柠檬酸溶液(A),100 mM柠檬酸钠溶液(B) X mL (A) + Y mL (B),稀释到100 mLpH范围如下表所示7,50 mM 碳酸根缓冲液准备200 mM Na2CO3 (A) 和200 mM NaHCO3 (B) X mL (A) + Y mL (B), 稀释到200 mLpH范围表如下所示8,PBS然后调节pH到需求的值,最后使用蒸锅或过滤膜进行杀菌。

要说缓冲液种类,肯定不是只有这八种,在这里只是简单举例了这八种,最后附上一张各种缓冲液适用的pH范围(引著:Sigma Trizma Buffers 产品说明书,英文版!),快来看看你用的缓冲液在不在这里面吧~~。

常用标准缓冲溶液的配制

常用标准缓冲溶液的配制

常用标准缓冲溶液在化学分析、仪器分析、生物化学等领域有广泛的应用。

它们通常用于标定传感器、校准仪器、测定物质特性等。

下面将详细介绍如何配制常用标准缓冲溶液。

一、磷酸盐标准缓冲溶液磷酸盐标准缓冲溶液通常用于pH测量。

具体配制方法如下:1. 称取约2克磷酸二氢钾,用纯水溶解。

2. 加入约700ml纯水。

3. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至7.0。

可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。

4. 稀释至总容量为1000ml,这样就得到了磷酸盐标准缓冲溶液。

二、乙酸-乙酸钠缓冲液乙酸-乙酸钠缓冲液常用于PH计的校准。

其配制方法如下:1. 称取无水乙酸钠(28.85g)及乙酸(3mL,约27ml)溶于约500mL纯水中。

2. 用盐酸(1+1)溶液调整溶液pH至3.6~3.8。

3. 稀释至总容量约700mL。

三、纳氏试剂缓冲溶液纳氏试剂是一种常用的显色剂,常用于水质分析等工作中。

缓冲溶液的配制如下:1. 称取三乙醇胺9~15g,加少量纯水溶解,再加入氢氧化钠溶液至pH值约10,即得基本缓冲液。

2. 称取酒石酸钾钠20g及碘化钾2g溶于纯水,稀释至基本缓冲液总容量约50ml,然后慢慢加入碘化汞钾溶液(4%w/v)4~5滴,即得纳氏试剂缓冲溶液。

四、磺基水杨酸标准缓冲溶液磺基水杨酸标准缓冲溶液常用于电位滴定分析,其配制方法如下:1. 称取24克磺基水杨酸,加入约600毫升蒸馏水,完全溶解。

2. 用氢氧化钠溶液调整溶液pH至5.4,使其符合滴定分析要求。

可以使用0.1N氢氧化钠溶液进行调pH。

3. 稀释至总容量约1000ml,这样就得到了磺基水杨酸标准缓冲溶液。

需要注意的是,在配制标准缓冲溶液时,必须严格遵守实验室安全规范,包括正确处理化学药品、避免交叉污染、避免蒸发皿破裂等。

同时,也应注意保护实验环境的卫生和安全,如保持实验台整洁、避免有毒废料的排放等。

此外,对于不同类型和浓度的标准缓冲溶液,可能需要不同的配制步骤和注意事项。

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法试剂是进行科学实验和研究所必需的物质。

常用试剂包括化学品、酶、抗体等。

缓冲液则是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液。

下面将介绍几种常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.硫酸铜溶液硫酸铜溶液常用于定量分析和化学反应。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取1.27g的硫酸铜并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

2.盐酸盐酸常用于酸碱中和实验及有机合成。

其配制方法如下:(1) 准备500ml容量瓶,称取36.5-37.5%的盐酸浓缩液25ml。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

3.硝酸银溶液硝酸银溶液常用于检测氯离子的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取2.91g的硝酸银固体并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

4.碘液碘液常用于检测淀粉的存在。

其配制方法如下:(1) 准备100ml容量瓶,称取0.25g的碘固体,并将其溶解于去离子水中。

(2)加入去离子水至容量瓶刻度线,均匀摇匀。

缓冲液是在实验中用于稳定溶液pH值的溶液,常用于生物化学、细胞生物学和分子生物学实验中。

以下是几种常用缓冲液的配制方法:1. Tris缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

(2)打开pH计,将电极插入去离子水中进行校准。

(3) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(4) 将7.94g Tris酸加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(5) 加入约5ml盐酸,搅拌均匀,并用盐酸调节溶液至所需pH值。

2.PBS缓冲液(1)准备所需的磷酸二氢盐、氯化钠和氯化钾。

(2) 在磁力搅拌器上加热约800ml去离子水至70-80℃。

(3)将0.2g磷酸二氢盐、8g氯化钠和0.2g氯化钾加入加热的去离子水中,搅拌溶解。

(4)用盐酸或氢氧化钠调节溶液至所需pH值。

3. Tris-HCl缓冲液(1) 准备所需的Tris酸和盐酸。

实验室常用缓冲液配置方案

实验室常用缓冲液配置方案

实验室常用缓冲液配置方案实验室里,各种缓冲液就像是实验操作的基石,有了它们,实验才能顺利进行。

今天,我就来和大家分享一下,我积累十年的实验室常用缓冲液配置经验,保证你一看就懂,一学就会!一、磷酸盐缓冲液(PBS)PBS,这可是实验室的“老熟人”了。

配置方法如下:1.称取8克NaCl,0.2克KCl,1.44克Na2HPO4,0.24克KH2PO4,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用pH计调整溶液至7.4。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

二、Tris缓冲液Tris缓冲液,用途广泛,特别是在蛋白质实验中,是不可或缺的。

1.称取121.1克Trisbase,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

三、醋酸缓冲液醋酸缓冲液,主要用于微生物实验和细胞培养。

1.称取5.7克NaAc·3H2O,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用冰醋酸调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

四、甘氨酸缓冲液甘氨酸缓冲液,适用于蛋白质电泳等实验。

1.称取15.1克甘氨酸,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用NaOH调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

五、氨水缓冲液氨水缓冲液,主要用于微生物实验。

1.量取100毫升浓氨水,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,搅拌均匀。

3.用浓HCl调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

六、硼酸缓冲液硼酸缓冲液,适用于核酸实验。

1.称取12.4克硼酸,放入烧杯中。

2.加入800毫升去离子水,用玻璃棒搅拌至溶解。

3.用NaOH调整溶液至所需pH值。

4.定容至1000毫升,过滤,分装,灭菌。

七、EDTA缓冲液EDTA缓冲液,主要用于金属离子螯合实验。

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实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1L。

5. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。

3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。

4. 室温保存。

4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。

2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。

3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4□配制量1L□配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。

NaCl 8 gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42 gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。

3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。

4. 高温高压灭菌后,室温保存。

注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵□配制量100mL□配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。

2.加去离子水将溶液定容至100mL。

3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。

4.密封瓶口于室温保存。

注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。

7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。

但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。

同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。

因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。

2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。

所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下:①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。

从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。

②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。

该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。

有助于方便识别有机相。

③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

④重复操作步骤③。

⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。

⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。

⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。

⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。

8、苯酚/氯仿/异戊醇□配置方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。

氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。

2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

9、10%(W/V)SDS□组份浓度10%(W/V)SDS□配制量100mL□配置方法1.称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。

2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。

3. 将溶液定容至100mL后,室温保存。

10、2 N NaOH□组份浓度2N NaOH□配制量100mL□配置方法1.量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH 溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。

2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。

3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。

4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。

11、2.5 N HCl□组份浓度2.5 N HCl□配制量100mL□配置方法1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸(11.6N),均匀混合。

2. 室温保存。

12、5 M NaCl □组份浓度5 M NaCl□配制量1L□配置方法1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约800mL 的去离子水后搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

13、20%(W/V)Glucose □组份浓度20%(W/V)Glucose□配制量100mL□配置方法1. 称取20g Glucose置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水后,搅拌溶解。

2. 加去离子水将溶液定容至100mL。

3. 高温高压灭菌后,4℃保存。

14、Solution I □组份浓度25 mM Tris-HCl(pH8.0),10mM EDTA,50mM Glucose(质粒提取用)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。

1M Tris-HCl(pH8.0)25mL0.5 M EDTA(pH8.0) 20mL20%Glucose(1.11M) 45mLdH2O 910mL2. 高温高压灭菌后,4℃保存。

3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A(20mg/mL)。

15、Solution II□组份浓度250mM NaOH,1%(W/V)SDS (质粒提取用)□配制量500mL□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。

10%SDS 50mL2N NaOH 50mL2. 加灭菌水定容至500mL,充分混匀。

3. 室温保存。

此溶液保存时间最好不要超过一个月。

注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。

16、Solution III□组份浓度3M KOAc,5M CH3COOH(质粒提取用)□配制量500mL□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。

KOAc 147gCH3COOH 57.5mL2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至500mL。

4. 高温高压灭菌后,4℃保存。

17、0.5M EDTA□组份浓度0.5 M EDTA(pH8.0) □配制量1L□配置方法1. 称取186.1g Na2EDTA•2H2O,置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌。

3. 用NaOH调节pH值值8.0(约20g NaOH)。

注意:pH值至8.0时,EDTA才能完全溶解。

4. 加去离子水将溶液定容至1L。

5. 适量分成小份后,高温高压灭菌。

6. 室温保存。

18、1 M DTT□组份浓度1 M DTT□配制量20mL□配置方法1. 称取3.09g DTT,加入到50mL塑料离心管内。

2. 加20mL的0.01 M 的NaOAc(pH5.2),溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌。

3. 适量分成小份后,-20℃保存。

19、10mM ATP□组份浓度10mM ATP□配制量20mL□配置方法1. 称取121mg Na2ATP•3H2O,加入到50mL塑料离心管内。

2. 加20mL的25mM Tris-HCl(pH8.0),搅拌溶解。

3. 适量分成小份,-20℃保存。

分子生物学实验常用培养基的配制方法1、Ampicillin□组份浓度100mg/ml Ampicillin(100mg/ml)□配制量50mL□配置方法1. 称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。

2. 加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。

4. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

2、IPTG □组份浓度24mg/mL IPTG(24mg/mL)□配制量50mL配置方法1. 称量1.2g IPTG置于50mL离心管中。

2. 加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。

4. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

3、X- Gal□组份浓度20mg/mL X- Gal(20mg/mL)□配制量50mL□配置方法1. 称取1g X-Gal置于50mL离心管中。

2. 加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50mL。

3. 小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。

4、LB培养基□组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl□配制量1L□配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中Tryptone 10gYeast Extract 5gNaCl 10g2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。

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