GAPDH抗体说明书
作者修回说明如下
作者修回说明如下-------------------------------------------尊敬的南京医科大学编辑部编辑先生、女士:您好,首先向各位专家对本文提出的建议及指正表示感谢，因为个人缺乏投稿经验，在第一次修回过程中未将改动的地方标出，更未一一回答审稿人的问题，在此给审稿人带来的不便致以诚挚歉意。
以下将各位审稿人提出的问题，做出回答，并按照贵刊的要求作了详细修改，且在修改过的地方在文章中用“红色”标记出，尚有不妥之处敬请指正。
1.现已将英文摘要及分组的描述做出了修改并标记；对于p-smad的western条带与量化图也做了更正；并在所有实验结果描述部分均详细写出了蛋白上调或下调的具体数值。
2.对于审稿人提出“如果想要真正深入研究AGEs 对心肌成纤维细胞的老化作用研究，是否考虑做一些在体的工作再结合机制的研究更好？”，我们课题组对此正在进行相关临床研究，且也曾报道过AGEs与老年人血管硬化及心脏舒张功能的相关关系。
3.对于审稿人提出实验设计简单的问题，笔者会在以后的工作中对老化相关问题继续做进一步的研究。
而在此次修回稿中我们也相应的补充了研究数据，包括TGFβ/smad通路抑制剂干预后，老化相关指标的变化情况，以及TGFβ1、p-smad、MMP-2的表达水平，并对文章的题目稍作变动，现改为“晚期糖基化终产物对心肌成纤维细胞老化及纤维化的影响”。
此外，将每张附图的图题、图引标出，重复检测的样本数等也在文章中加以标注，并对标注和书写有误的地方做了修正。
若有不当之处，请加以指正。
此致敬礼晚期糖基化终产物对心肌成纤维细胞的老化及纤维化的影响[摘要]目的:探讨晚期糖基化终产物（AGEs）诱导心肌成纤维细胞老化及纤维化的相关机制。
方法: 用AGEs(200μg/ml)及抗-RAGE抗体(2μg/ml)、TGF-β/smad 通路抑制剂（SB431542,10μM）干预乳鼠心肌成纤维细胞72h。
GAPDH内参抗体,抗GAPDH单抗,GAPDH小鼠源单克隆抗体
GAPDH内参抗体，抗GAPDH单抗，GAPDH小鼠源单克隆抗体Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody （ 2B5）在Western Bloting实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确，或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参，比如内参GAPDH的含量来进行校正。
GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。
GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
应用类型：WB（1:1000-1:10,000）、IHC（1:100-1:800）Fig.Western blot analysis (1:10,000) of GAPDH expression in Rat brain (lane A), HeLa cell lysate (lane B), Mouse brain (lane C), Rabbit muscle (lane D), Chicken muscle (lane E) and Pig heart (lane F) with Anti-GAPDH mouse monoclonal antibody (2B5). 免疫原：KLH偶联的GAPDH部分多肽序列来源宿主：小鼠反应性：该GAPDH内参抗体可识别人、小鼠、兔、大鼠、猴、狗、鸡、猪和绵羊等种属的GAPDH蛋白。
保存建议：能在-20℃保存1年。
为最大限度的避免损失，请在打开管盖之前融化抗体并离心。
建议使用前分装以避免反复冻融，分装后可在4℃保存1个月。
GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）是参与糖酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。
GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2215规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12uL×1支，4℃保存。
临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。
沉默PHLDA1基因表达抑制胃癌细胞增殖
沉默PHLDA1基因表达抑制胃癌细胞增殖丁方方;申红星;王华;邵世和【摘要】目的:明确普列克底物蛋白同源样结构域家族A成员1蛋白(PHLDA1)在各胃癌细胞系中的表达,探讨其对胃癌细胞生物学特性的影响.方法:先采用蛋白质印迹和qRT-PCR法检测MGC-803、BGC-823、MKN45、SGC-7901和HGC-27共5种胃癌细胞系中PHLDA1蛋白和mRNA的表达;再将MGC-803细胞分为对照组(转染乱序RNA)和干扰组(转染靶向干扰PHLDA1的siRNA),蛋白质印迹法检测2组细胞中PHLDA1蛋白的表达;CCK8实验检测细胞增殖率;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;蛋白质印迹检测各组细胞中 Bax、Caspase-8、Cleaved-caspase-8、Caspase-3、Cleaved-caspase-3、Caspase-9和 Cleaved-caspase-9凋亡相关蛋白的表达.结果:PHL-DA1在5种胃癌细胞中呈不同程度高表达,在MGC-803细胞中表达量最高;与对照组比较,干扰组PHLDA1表达量显著降低(P<0.01),细胞增殖率明显减慢,克隆形成数显著减少、单个克隆的细胞数明显减少(P均 <0.05), Cleaved-caspase-8、Cleaved-caspase-3、Caspase-9和Cleaved-caspase-9蛋白表达明显升高(P均<0.05).结论:PHL-DA1在胃癌细胞系中呈高表达,沉默其表达可抑制胃癌细胞增殖.%Objective:To investigate the expression of pleckstrin homology-like domain family A member1(PHLDA1) in gastric cancer cell lines and its effect on the biological characteristics of gastric cancer cells. Methods:Western blotting and qRT-PCR were used to detect the expression of PHLDA1 in gastric cancer cell lines MGC-803, BGC-823, MKN45, SGC-7901 and HGC-27. MGC-803 cells were divided into control group (transfected with scrambled RNA) and interference group (transfected with siRNA targeting PHLDA1),Westernblotting was used to detect the expression of PHLDA1;CCK8 assay was used to test the cell proliferation rate;plate colony formation assay was used to detect the colony for-mation ability;Western blotting was used to detect expression of apoptosis-related proteins such as Bax, Caspase-8, Cleaved-caspase-8, Caspase-3, Cleaved-caspase-3, Caspase-9, and Cleaved-caspase-9 in each group of cells. Results:PHLDA1 was highly expressed in five gastric cancer cell lines at different degree,among which the PHLDA1 expression was the highest in MGC-803 pared with the con-trol group,the interference group showed lower expression of PHLDA1(P<0.01),and less cell prolifer-ation rate,smaller number of cell clones and single cloned cells(P<0.05), and higher expression of Cleaved caspase-8,Cleaved-caspase-3,Caspase-9,and Cleaved-caspase-9 proteins(P<0.05). Conclu-sion:PHLDA1 was highly expressed in gastric cancer cell lines. Silencing PHLDA1 expression could in-hibit proliferation of gastric cancer cell.【期刊名称】《江苏大学学报（医学版）》【年(卷),期】2018(028)003【总页数】5页(P185-189)【关键词】PHLDA1;胃癌;增殖;凋亡相关蛋白【作者】丁方方;申红星;王华;邵世和【作者单位】江苏大学医学院,江苏镇江212013;安徽医科大学第一附属医院生殖中心,安徽合肥230032;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013;江苏大学医学院,江苏镇江212013【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌死亡率居世界癌症第3位[1-2]。
gapdh蛋白分子量
gapdh蛋白分子量Gapdh蛋白分子量Gapdh蛋白是一种广泛存在于细胞中的酶，其全称为糖酵解酶磷酸化酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）。
它在细胞内参与糖酵解途径中的第六步反应，将糖分解为能量和原料。
Gapdh蛋白的分子量为36kDa，是一种单体蛋白。
Gapdh蛋白在细胞中具有多种功能。
除了参与糖酵解途径外，它还参与细胞凋亡、DNA修复、转录调控等生物学过程。
在细胞凋亡中，Gapdh蛋白可以与其他蛋白质相互作用，形成复合物，从而促进细胞凋亡的发生。
在DNA修复中，Gapdh蛋白可以与DNA结合，参与DNA修复的过程。
在转录调控中，Gapdh蛋白可以与转录因子相互作用，调节基因的表达。
Gapdh蛋白的分子量为36kDa，是一种单体蛋白。
它的分子量可以通过多种方法进行测定，如SDS-PAGE、Western blot等。
在SDS-PAGE中，将蛋白质样品加入聚丙烯酰胺凝胶中，经过电泳分离后，可以通过染色或Western blot检测到Gapdh蛋白的存在。
在Western blot中，将蛋白质样品经过电泳分离后，转移到膜上，再用特异性抗体检测Gapdh蛋白的存在。
Gapdh蛋白是一种广泛存在于细胞中的酶，其分子量为36kDa，是一种单体蛋白。
它在细胞中具有多种功能，参与糖酵解途径、细胞凋亡、DNA修复、转录调控等生物学过程。
通过多种方法可以测定Gapdh蛋白的分子量，如SDS-PAGE、Western blot等。
对Gapdh 蛋白的研究有助于深入了解细胞代谢、细胞凋亡、DNA修复、转录调控等生物学过程的机制。
western内参选择大讨论
在western blot 实验中，内参的使用是个很重要的部分，看到很多站友对内参的选择经常有些疑问，鉴于此，希望能在一个帖子里面综合所有相关问题，展开讨论，共同学习。
我先提几个，抛砖引玉，希望大家继续。
1。
为什么一定需要内参内参的重要性。
2。
常用的几种内参。
3。
不同的情况如何选择不同的内参。
支持一下！1：用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致，通常使用一些看家蛋白，比如β-actin、GAPDH等等。
这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致，所以用他们来作为你加样量的对照。
这样western结果中你的目的蛋白经过处理后发生变化，而内参的条带基本均匀一致。
这样才有说服力，表明的确是处理因素造成目的蛋白的变化而不是加样误差或是人为造成目的条带浓度的变化。
严格意义上说，内参事必须做的。
2：常用的内参有：b-actin，GAPDH，近2-3 年，更详细的研究发现，β-Tubulin (球管蛋白)，被广泛应用于Western Blotting，β－Tubolin分子量为55KD左右。
3：一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。
因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参！个人一些见解，供参考！内参的重要性，必要性：要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。
因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。
虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。
所以，严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。
western 内参选择 大讨论
在western blot 实验中，内参的使用是个很重要的部分，看到很多站友对内参的选择经常有些疑问，鉴于此，希望能在一个帖子里面综合所有相关问题，展开讨论，共同学习。
我先提几个，抛砖引玉，希望大家继续。
1。
为什么一定需要内参？内参的重要性。
2。
常用的几种内参。
3。
不同的情况如何选择不同的内参。
支持一下！1：用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致，通常使用一些看家蛋白，比如β-actin、GAPDH等等。
这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致，所以用他们来作为你加样量的对照。
这样western结果中你的目的蛋白经过处理后发生变化，而内参的条带基本均匀一致。
这样才有说服力，表明的确是处理因素造成目的蛋白的变化而不是加样误差或是人为造成目的条带浓度的变化。
严格意义上说，内参事必须做的。
2：常用的内参有：b-actin，GAPDH，近2-3 年，更详细的研究发现，β-Tubulin (球管蛋白)，被广泛应用于Western Blotting，β－Tubolin分子量为55KD左右。
3：一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。
因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参！个人一些见解，供参考！内参的重要性，必要性：要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。
因为Western Blot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。
虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。
所以，严谨的Western Blot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA 试剂盒 使用说明书
人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒使用说明书产品编号：D711286包装规格：48 TESTS / 96 TESTS声明：使用前仔细阅读本说明书。
只能用于研究用途，不得用于医学诊断。
用途用于人血清、血浆或其他相关生物液体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶的测定。
工作原理本试剂盒采用的是双抗夹心酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。
测定样品中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶水平。
向预先包被了抗人甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体。
再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人甘油醛-3-磷酸脱氢酶浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶的浓度。
1 / 262 / 26原理图：试剂盒组成说明书1份1份封板膜5片5片预包被酶标板8孔X 6条8孔X 12条-20°C 标准品1瓶2瓶-20°C 标准品/样本稀释液SD120 mL X 1瓶20 mL X 1瓶2-8°C 浓缩生物素标记甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体（100X ）60 μl120 μl-20°C生物素标记抗体稀释液SD214 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C浓缩HRP 标记链霉亲和素（100X ）60 μl120 μl-20°C （避光）HRP标记链霉亲和素稀释液SD314 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C显色剂10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C （避光）终止液10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C浓缩洗涤液（25×）30 mL X 1瓶30 mL X 1瓶2-8°C需要而未提供的试剂和器材1.37°C恒温箱2.酶标仪（450 nm波长滤光片）3.精密移液器及一次性吸头4.去离子水或蒸馏水5.一次性试管6.洗板机或洗瓶，吸水纸注意事项1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。
GAPDH抗体说明书
GAPDH抗体说明书注意：本说明书提供关于GAPDH抗体的相关信息，包括抗体的来源、性能、应用等。
请在使用前仔细阅读本文档，并按照说明进行实验操作。
如有任何疑问，请咨询我们的技术支持团队。
1. 抗体来源本抗体由优质小鼠单克隆抗体产生，经过多次和GAPDH蛋白免疫去正常反应并经ELISA、WB等方法筛选获得。
2. 抗体性能2.1 特异性GAPDH抗体具有良好的特异性，仅与目标蛋白GAPDH结合，不与其他蛋白发生交叉反应。
经过多次验证，本抗体在多种物种中展现出高度的特异性。
2.2 敏感性本抗体具有较高的敏感性，可以在低浓度目标蛋白的条件下检测到GAPDH的表达。
2.3 稳定性本抗体经过特殊处理，具有较好的稳定性。
久贮存后，抗体的免疫活性仍然能够保持较高水平。
3. 抗体应用3.1 免疫检测GAPDH抗体可用于WB（Western Blot）、IP（免疫沉淀）、IHC （免疫组化）、IF（免疫荧光）等实验技术中。
3.2 WB应用以下为WB实验操作步骤：a) 准备样品：将待检测的蛋白组织或细胞裂解，制备总蛋白提取液。
b) SDS-PAGE分离：将总蛋白提取液通过SDS-PAGE电泳分离。
c) 转膜：将分离得到的蛋白转移到聚丙烯酰胺膜上。
d) 阻断：用5%脱脂奶粉或3%BSA在室温下阻断非特异性结合位点。
e) 一抗孵育：添加稀释后的GAPDH抗体，于室温下孵育2小时或过夜。
f) 洗涤：用PBS-T洗涤膜上未与抗体结合的蛋白。
g) 二抗孵育：添加辣根过氧化物酶标记的抗小鼠二抗，于室温下孵育1小时。
h) 洗涤：用PBS-T洗涤膜上未与二抗结合的抗体。
i) 显色：加入ECL显色剂进行显色，观察目标蛋白是否有特异性表达。
4. 注意事项4.1 使用前请确保本抗体处于稳定的状态，并按照规定的方法进行保存和操作。
4.2 本抗体仅供科学研究使用，不可用于临床诊断。
4.3 不同实验条件下可能需要进行抗体的适应性优化，建议用户根据实际情况进行试验操作。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2210规格：25T/24S50T/48S产品内容：提取液：30mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体15µL×1支，4℃保存；临用前加入0.5mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
4-甲基伞形酮对瘢痕疙瘩成纤维细胞的抗炎作用及机制研究
4-甲基伞形酮对瘢痕疙瘩成纤维细胞的抗炎作用及机制研究作者：牛星堂林珣珣朱昭炜许澍洽唐庆来源：《中国美容医学》2020年第07期[摘要]目的：探讨4-甲基伞形酮（4-methylumbelliferone，4MU）对瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用及机制研究。
方法：体外培养的原代瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFs）分别用浓度为0、0.2、0.4、0.8mM的4MU处理，采用CCK-8法和细胞划痕实验检测4MU对KFs细胞增殖和迁移能力的影响，通过ELISA、qPCR、免疫荧光染色和Western-bloting技术检测4MU对KFs炎症相关因子表达的影响。
结果：4MU不仅抑制KFs细胞增殖迁移，而且可减少KFs对IL-6和IL-8的分泌，同时抑制HAS2和HAS3 mRNA的表达及α-SMA、TLR4、CD44、NF-κB1、P65蛋白的合成。
结论：4MU可以抑制KFs增殖和迁移，并可通过抑制NF-κB通路相关基因的表达，减少KFs炎症因子分泌，因此，4MU有可能成为治疗瘢痕疙瘩的新药物。
[关键词]4-甲基伞形酮;瘢痕疙瘩;炎症因子;TLR4;NF-κB1;作用机制[中图分类号]R619+.6 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2020）07-0097-04Abstract： Objective To investigate the effect of 4-methylumbelliferone （4MU） on keloid fibroblasts （KFs）. Methods Primary keloid fibroblasts were respectively treated with 4MU at concentrations of 0， 0.2， 0.4， and 0.8 mM. The proliferation and migration ability of KFs were detected by CCK-8 assay and cell migration assay. ELISA， qPCR， immunofluorescence and Western-bloting techniques were applied to study the effects of 4MU on the expression of inflammation-related genes in KFs. Results 4MU not only inhibited the proliferation and migration of KFs， but also inhibited the secretion of IL-6 and IL-8. Additionally， 4MU inhibited the expression of HAS2 and HAS3，and reduced the synthesis of α-SMA， TLR4， CD44， NF-κB1 and P65 proteins in KFs. Conclusion 4MU treatment can not only inhibit the activity of KFs， but also decrease the secretion of inflammatory by down-regulating the expression of NF-κB signal pathway. Therefore， 4MU has the potential to be a new drug for the cure of keloids.Key words： 4-methylumbelliferone; keloid; inflammatory factors; TLR4; NF-κB1; mechanism of action瘢痕疙瘩是一种临床常见的成纤维细胞过度增殖性疾病，常继发于各种皮肤损伤，多见于胸前区和耳垂，其病理特征主要表现为真皮增厚、细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）增多及新生血管形成[1]。
Talin1在输卵管妊娠患者的输卵管和绒毛中高表达并促进妊娠滋养细胞的侵袭
异位妊娠是早期妊娠女性死亡的主要原因［1］，其中输卵管妊娠约占98%［2］，尽管检测手段不断进步，早期不明位置妊娠的精确诊断仍是个难题，输卵管妊娠的发病机制也仍在持续探索中。
踝蛋白（Talin ）由TLN 基因编码，Talin1是其主要组成部分。
Talin1是组成粘着斑的重要细胞骨架蛋白［3,4］，可以直接激活整合素［5］以调节细胞功能，在一系列与细胞粘附、侵袭相关的生理和病理过程中及胚胎发生中起着关键性的作用［6-8］。
既往关于Talin1的研究主要集中在肿瘤学领域，大量的文献已证实Talin1的表达异常可通过诱导上皮间质转化来促进肿瘤细胞的侵袭和转移，也可作为诊断标记物和临床预后指标［9-11］。
肿瘤细胞的侵袭转移行为和妊娠滋养细胞的侵袭特性、胚胎植入过程十分相似［12,13］，近年来有研究发现Talin1和胚胎着床有着密切关系［14,15］，但仅有的少数研究均为宫内妊娠，国内外至今尚未见Talin1与输卵管妊娠发生相关机制的报道。
在输卵管妊娠中，绒毛外滋养细胞侵袭和正常宫内妊娠有很多相似性［16］，妊娠滋养细胞在输卵管黏膜层浸润直至浸透浆膜层，造成输卵管破裂，是输卵管妊娠发Talin1is highly expressed in the fallopian tube and chorionic villi to promote trophoblast invasion in tubal pregnancyQIU Pin 1,LIN Xinyi 2,DENG Gaopi 11Department of Gynecology,First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine,2First Clinical Medical College of Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou 510405,China摘要：目的验证Talin1在妊娠输卵管组织及输卵管妊娠绒毛中的表达差异及对HTR-8/SVneo 细胞侵袭、迁移的影响，探讨其作用机制。
WB实验步骤
【WB实验步骤】1.配胶:(1) 根据所需检测蛋白分子量的大小, 配制合适浓度的凝胶。
P53=53KD (1:1000), P21=21KD, Bcl2=28KD, Caspase3=17KD (1:1000)，GAPDH=36kDa (1:5000), β-actin=43kDa50KD以下的分子量选用12%的分离胶(15ml)分离胶加至薄玻板下方约1cm, 分离胶的上方轻轻地来回均匀加蒸馏水，有助于将分离胶压平，1小时后将蒸馏水倒去，用滤纸吸干，准备加浓缩胶(积成胶)。
聚丙烯酰胺浓缩胶(6ml):(2)(3)等待胶凝固的过程中煮蛋白：在提取的蛋白质样品中加入5×SDS上样缓冲液（5×SDS上样缓冲液:蛋白上清液=1:4），100℃煮6min，瞬离，冰上静置备用，保存于-20℃。
2.电泳：向泳道中加入上述已加热变性的蛋白样品50μg, 同时在合适的泳道加入蛋白Marker。
80V稳压运行40min后,再用120V 稳压电泳至蛋白Loading Buffer移动到凝胶下缘(约55min)。
要用大电泳仪，可以从80V浓缩胶自动转到120V跑分离胶。
放板子的时候，高的厚玻璃板要放在外面一侧。
3.转膜：将转膜缓冲液置于-20°C冰箱预冷1小时，PVDF膜放入甲醇中浸泡30s后去离子水洗涤干净，转入转膜缓冲液中平衡5min。
从黑面开始按照海绵、滤纸、凝胶、PVDF膜、滤纸、海绵按正确顺序装入转膜夹后，将整个转膜系统置于冰上，100V稳压转膜1.5h (注意电流不要超过300mA，以免发热过度)。
4.封闭：转膜结束后，取出PVDF膜。
正面朝上，将其放入PBST配制的5%的脱脂牛奶中，置于摇床上封闭1h。
封闭之前，可根据分子量大小将膜切开：在实验台上铺一层保鲜膜，包住PVDF 膜，用尺对齐，然后将PVDF膜切开。
5.一抗孵育：按照抗体说明书，用5%的PBST配制的脱脂牛奶稀释抗体至所需浓度。
gapdh分子量 内参 wb
GAPDH分子量内参WB1. 任务背景Western blotting (WB)是一种常用的蛋白质检测方法，它可以用于定性和定量分析特定蛋白质在样本中的表达水平。
在WB实验中，内参蛋白是一个重要的参考标准，用于校正样本间的差异。
GAPDH (Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase)是一种常用的内参蛋白，其分子量是一个重要的参数。
2. GAPDH简介GAPDH是一种催化糖酵解过程中糖醛酸-3-磷酸脱氢酶的酶。
它参与糖酵解途径中糖醇磷酸化和糖醛酸脱氢的反应。
GAPDH广泛存在于细胞质和线粒体中，是一种高度保守的蛋白质。
GAPDH在细胞代谢中起着重要的作用。
它不仅参与糖酵解途径，还参与脂肪酸合成、核酸合成、蛋白质合成等多种生物学过程。
由于其丰度相对稳定，GAPDH被广泛用作WB实验的内参蛋白。
3. 分子量测定分子量是蛋白质的一个重要特征，可以通过多种方法进行测定。
在WB实验中，分子量通常通过与已知分子量的蛋白质进行比较来确定。
对于GAPDH，其分子量大约在36-40 kDa之间。
常用的测定分子量的方法有SDS-PAGE和蛋白质标记。
SDS-PAGE是一种常用的蛋白质分离方法，通过电泳将蛋白质按照分子量大小进行分离。
在SDS-PAGE中，GAPDH 可以通过与已知分子量的蛋白质标记进行比较来确定其分子量。
4. GAPDH作为内参蛋白在WB实验中，内参蛋白用于校正样本间的差异，以确保可靠的定量结果。
选择合适的内参蛋白是非常重要的，因为它应该在不同样本中稳定表达。
GAPDH是一个常用的内参蛋白，因为它在大多数细胞和组织中都以相对稳定的水平表达。
选择GAPDH作为内参蛋白有以下几个原因：1.GAPDH广泛存在于不同类型的细胞和组织中，其表达水平相对稳定。
2.GAPDH的分子量较大，不易受到蛋白质修饰的影响。
3.GAPDH在多种生物学过程中参与，其表达水平不易受到外界因素的影响。
gapdh说明书
For research use only and not intended for use in humans or animals.in vitro BACKGROUNDPREDICTED MOLECULAR WEIGHT Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)catalyzes the phosphorylation of glyceraldehyde-3-phosphate during glycolysis.Though differentially expressed from tissue to tissue,GAPDH is thought to be a constitutively expressed housekeeping protein.For this reason,GAPDH mRNA and protein levels are often measured as controls in experiments quantifying specific changes in expression of other targets.Recent work has elucidated roles for GAPDH in apoptosis,gene expression and nuclear transport.GAPDH may also play a role in neurodegenerative pathologies such as Huntington and Alzheimer's diseases.1.Barber,R.D.et al.2005.GAPDH as a housekeeping gene:analysis of GAPDH mRNA expression in a panel of 72human tissues.Physiol.Genomics 21,389-95.2.Hara,M.R.and Snyder,S.H.2006.Nitric oxide-GAPDH-Siah:a novel cell death cascade.Cell Mol.Neurobiol.26,527-38.3.Zheng,L.et al.2003.S phase activation of the histone H2B promoter by OCA-S,a coactivator complex that contains GAPDH as a key component.Cell 114,255-66.4.Bae, B.I.et al.2006.Mutant huntingtin:nuclear translocation and cytotoxicity mediated by A 103,3405-9.5.Wang,Q.et al.2005.Proteomic analysis of neurofibrillary tangles in Alzheimer disease identifies GAPDH as a detergent-insoluble paired helical filament tau binding protein.FASEB J.19,869-71.This Abmart monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide (KLH-coupled)of human GAPDH.GAPDH (2A8)Mouse mAb detects endogenous levels of total GAPDH protein.Store at -20°C.Stable for one year from the date of shipment.Mouse IgG137kDaREFERENCESSOURCESPECIFICITYSTORAGEREACTIVITYISOTYPE H,R,M,Mk,Dg,ChHm rev.2011/01/24APPLICATION DATA COMPANION PRODUCTSWestern blot analysis of extracts from various cell lines:Lane 1-8:Hela,HEK293,Cos-7,NIH/3T3,CHO-K1,MDCK,P12,C6Primary antibody:1:2000Western blot analysis of extracts from various cell lines:Lane 1-8:MCF-7,HepG2,BHK,C2C12,mouse skeletal muscle,mouse heart muscle,mouse brain.Primary antibody:1:5000A549,APPLICATION TESTED SECONDARY ANTIBODYanti-MOUSE WB 1:2000-1:5000For application specific protocols please see the web page at Use an secondary /document.aspx --------------13013095957272555543433434GAPDHGAPDH1701701234567812345678--Reactivity Key:H—human,M—mouse,R—rat,ChHm—Chinese hamster,Mk—monkey,C—chicken,Dm—D.melanogaster,X—Xenopus,Z—zebrafish,B—bovine,Dg—dog,Pg—pig,Sc—S.cerevisiae,Ce—C.Elegans,Hr—Horse Applications Key:WB —Western blot,IP—Immunoprecipitation,IHC—Immunohistochemistry,ChIP—Chromatin Immunoprecipitation,IF—ImmunofluorescencekDa kDa #M21001Goat Anti-Mouse IgG-HRPPlease visit for a complete listing of recommended companion products./products.aspx。
硕士GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发,毕业范文,毕业专题,.doc
硕士：GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发,毕业,毕业专题,硕士：GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发吴永红；【导师】张成岗；【基本信息】中国人民解放军军事医学科学院，生物化学与分子生物学，2013，硕士【摘要】甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)是生物体内一类十分保守的重要多功能酶类，广泛存在于原核及真核生物体内，如大肠杆菌、酵母、秀丽线虫、大鼠和小鼠等模式生物，主要参与生物体内糖代谢中糖酵解的第六步反应，即催化甘油醛-3-磷酸转化为1,3-二磷酸甘油酸并释放出能量(ATP)的过程。
生物界中GAPDH单体分子量大小在30kD-40kD之间，天然状态的GAPDH主要以四聚体形式存在，其氨基酸编码序列在原核及真核生物体内均高度保守，同源性高达76%。
原核及真核生物体内GAPDH蛋白是一类功能上十分保守的重要蛋白酶超家族，在不同的物种中分别由不同的基因编码，如微生物的gapA, gapB和gapC基因、酵母菌的TDH-1, TDH-2和TDH-3基因、秀丽线虫的gpd-1,gpd-2, gpd-3和gpd-4基因、大鼠的G3PDH基因等。
不同物种中多种编码基因的存在一方面提示了不同GAPDH变体之间的功能代偿性，另一方面反映了个体应对环境压力的高度可调控性，为其作为管家蛋白的功能保守性提供了重要依据。
内标蛋白是生物体内一类重要的管家蛋白，具有序列保守性高、组织分布广等特点。
目如常见的内标蛋白主要包括：细胞骨架蛋白肌动蛋白actin、微管蛋白Tubulin、细胞代谢相关蛋白GAPDH等。
其中，GAPDH在同种细胞或组织中的蛋白表达量相对恒定，且很少受外部应激因素的影响，已被广泛用作RT-PCR和Western blot等分子生物学实验标准化的内参分子，特别是其作为内标蛋白在组织或细胞内蛋白相对表达定量中的应用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
GAPDH抗体WB, Western blot; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry.Mam, mammalian, including human, mouse, rat, pig, rabbit, dog, cat; C, chicken; Fi, fish; Fr, frog. 不能用于检测bovine和yeast样品。
本GAPDH抗体(GAPDH antibody，也称为G3PDH antibody)为进口分装，用从兔肌肉纯化获得的GAPDH作为抗原制备而成的抗GAPDH小鼠单克隆抗体。
克隆号为6C5。
GAPDH (Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)是糖酵解(glycolysis)过程中的关键酶之一。
GAPDH由4个分子量约为36kD的亚基组成，总的分子量为146kD。
在SDS-PAGE凝胶电泳时解聚为单体，显示的分子量约为36kD。
哺乳动物的GAPDH除了在糖酵解过程中起作用外，还和membrane fusioin，microtubule bundling, RNA出核运输，DNA复制和DNA修复等有关，并和前列腺癌、神经细胞凋亡、神经退行性疾病等相关。
GAPDH几乎在所有组织和细胞中组成性高表达。
只有缺氧和糖尿病等情况可以在某些细胞中上调GAPDH的蛋白水平。
GAPDH在各种组织和细胞中都组成性高表达，因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照(loading control)。
配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。
)：保存条件：GAPDH抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。
Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项：在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。
回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。
稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。
如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g 离心1-3分钟，取上清用于后续检测。
如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. Western检测：A. 按照1: 500-1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动1-2小时，确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
通常与一抗4℃缓慢摇动过夜效果更好一些。
C. 回收稀释的一抗，4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。
具体操作可以参考如下网页：h ttp:///western.htm2.免疫染色：可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体，使用后注意回收稀释好的一抗，具体操作可以参考如下网页： /immunol-staining.htm3.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
使用本产品的文献：1. Wu H, Chen Y, Wang ZY, Li W, Li JQ, Zhang L, Lu YJ.Involvement of p21 (waf1) in merlin deficient sporadic vestibular schwannomas.Neuroscience. 2010;170(1):149-55. Epub 2010 Jul 1.2. Xu XY, Li XT, Peng SW, Xiao JF, Liu C, Fang G, Chen KC, Chen GQ.The behaviour of neural stem cells on polyhydroxyalkanoate nanofiber scaffolds.Biomaterials. 2010;31(14):3967-75. Epub 2010 Feb 12..3. Xu H, Wang P, Fu Y, Zheng Y, Tang Q, Si L, You J, Zhang Z, Zhu Y, Zhou L, Wei Z, Lin B, Hu L, Kong X.Length of the ORF, position of the first AUG and the Kozak motif are important factors in potential dual-coding transcripts.Cell Res. 2010;20(4):445-57. Epub 2010 Feb 16.4.Wang ZQ, Wang N, van der Maarel S, Murong SX, Wu ZY.Distinguishing the 4qA and 4qB variants is essential for the diagnosis of facioscapulohumeralmuscular dystrophy in the Chinese population.Eur J Hum Genet. 2011 Jan;19(1):64-9.5.He J, Xiao Z, Chen X, Chen M, Fang L, Yang M, Lv Q, Li Y, Li G, Hu J, Xie X.The expression of functional Toll-like receptor 4 is associated with proliferation and maintenanceof stem cell phenotype in endothelial progenitor cells (EPCs).J Cell Biochem. 2010 Sep 1;111(1):179-86.6.Zhao Z, Huang L, Wu H, Li Y, Zhang L, Yin Y, Xiang Z, Zhao Z.Neuropeptide S mitigates spatial memory impairment induced by rapid eye movement sleepdeprivation in rats.Neuroreport. 2010 Jun 23;21(9):623-8.7.Shi H, Wang Q, Wang Y, Leng L, Zhang Q, Shang Z, Li H.Adipocyte fatty acid-binding protein: an important gene related to lipid metabolism in chickenadipocytes.Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2010 Dec;157(4):357-63.8.Shi H, Wang Q, Zhang Q, Leng L, Li H.Tissue expression characterization of chicken adipocyte fatty acid-binding protein and itsexpression difference between fat and lean birds in abdominal fat tissue.Poult Sci. 2010 Feb;89(2):197-202.9.Wang J, Ruan K.miR-335 is involved in the rat epididymal development by targeting the mRNA of RASA1.Biochem Biophys Res Commun. 2010 Nov 12;402(2):222-7.10.Fu Y, Teng YY, Xu CW, Zhang X.The effect of bone marrow stem cells on the treatment of experimental autoimmune myasthenia gravis rat.CJCNN, V ol 12, No 2 (2012).11.张庆秋石慧丁宁王宇祥李辉王启贵.鸡肝脏胆汁酸结合蛋白(L¬BABP)抗血清制备及组织表达特性分析.农业生物技术学报，2011，19（ 3 ），571~576.12.Shi H, Zhang Q, Wang Y, Yang P, Wang Q, Li HChicken adipocyte fatty acid-binding protein knockdown affects expression of peroxisomeproliferator-activated receptor γ gene during oleate-induced adipocyte differentiation.Poult Sci. 2011 May;90(5):1037-44.13.Zhang Y, Dong J, Zhu X, Wang W, Yang Q.The effect of sphingomyelin synthase 2 (SMS2) deficiency on the expression of drug transportersin mouse brain.Biochem Pharmacol. 2011 Aug 1;82(3):287-94.14.Zhu ZT, Jiang XS, Wang BC, Meng WX, Liu HY, Tian Y.Andrographolide inhibits intimal hyperplasia in a rat model of autogenous vein grafts.Cell Biochem Biophys. 2011 Jul;60(3):231-9.15.Song H, Yin W, Zeng Q, Jia H, Lin L, Liu X, Mu L, Wang R.Hemokinins modulate endothelium function and promote angiogenesis through neurokinin-1receptor.J. Int J Biochem Cell Biol. 2012 Apr 24.16.Wang D, Fang L, Li K, Zhong H, Fan J, Ouyang C, Zhang H, Duan E, Luo R, Zhang Z, Liu X, Chen H, Xiao S.Foot-and-mouth disease virus 3C protease cleaves NEMO to impair innate immune signaling.J Virol. 2012 Sep;86(17):9311-22. doi: 10.1128/JVI.00722-12. Epub 2012 Jun 20.17.Wang J, Wu Z, Jin Q.COPI Is Required for Enterovirus 71 Replication.PLoS One. 2012;7(5):e38035.18.Wang G, Zhan Y, Wang H, Li W.ABT-263 sensitizes TRAIL-resistant hepatocarcinoma cells by downregulating the Bcl-2 family ofanti-apoptotic protein.Cancer Chemother Pharmacol. 2012 Mar;69(3):799-805. doi: 10.1007/s00280-011-1763-0. Epub 2011 Oct 29.19.Yu L, Lu M, Wang P, Chen X.Trichostatin A Ameliorates Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury Through Inhibition ofEndoplasmic Reticulum Stress-induced Apoptosis.Arch Med Res. 2012 Apr;43(3):190-6. doi: 10.1016/j.arcmed.2012.04.007. Epub 2012 May 4.20.Zhou Y, Li G, Ji Y, Liu C, Zhu J, Lu Y.Cytoplasmic p21 induced by p65 prevents doxorubicin-induced cell death in pancreatic carcinomacell line.J Biomed Sci. 2012 Feb 4;19:15.21.Xue X, Gao W, Sun B, Xu Y, Han B, Wang F, Zhang Y, Sun J, Wei J, Lu Z, Zhu Y, Sato Y, Sekido Y, Miao Y, Kondo Y.Vasohibin 2 is transcriptionally activated and promotes angiogenesis in hepatocellular carcinoma.Oncogene. 2012 May 21.22.Guo X, Li X, Xu Y, Sun T, Yang G, Wu Z, Li E.Identification of OASL d, a splice variant of human OASL, with antiviral activity.Int J Biochem Cell Biol. 2012 Jul;44(7):1133-8. doi: 10.1016/j.biocel.2012.04.001. Epub 2012 Apr 17.23.Gong K, Chen C, Zhan Y, Chen Y, Huang Z, Li W.Autophagy-related gene 7 (ATG7) and reactive oxygen species/extracellular signal-regulated kinase regulate tetrandrine-induced autophagy in human hepatocellular carcinoma.J Biol Chem. 2012 Oct 12;287(42):35576-88. doi: 10.1074/jbc.M112.370585. Epub 2012 Aug 27.24.Yang M, Yuan F, Li P, Chen Z, Chen A, Li S, Hu C.Interferon regulatory factor 4 binding protein is a novel p53 target gene and suppresses cisplatin-inducedapoptosis of breast cancer cells.Mol Cancer. 2012 Aug 13;11:54.25.Yu SC, Xiao HL, Jiang XF, Wang QL, Li Y, Yang XJ, Ping YF, Duan JJ, Jiang JY, Ye XZ, Xu SL, Xin YH, Yao XH, Chen JH, Chu WH, Sun W, Wang B, Wang JM,Zhang X, Bian XW.Connexin 43 reverses malignant phenotypes of glioma stem cells by modulating E-cadherin.Stem Cells. 2012 Feb;30(2):108-20. doi: 10.1002/stem.1685.26.Zhao W.Comparison of L1 expression and secretion in glioblastoma and neuroblastoma cells.Oncol Lett. 2012 Oct;4(4):812-816. Epub 2012 Jul 5.27.Chen J, Xia L, Wu X, Xu L, Nie D, Shi J, Xu X, Ni L, Ju S, Wu X, Zhu H, Shi W.Clinical significance and prognostic value of PAX3 expression in human glioma.J Mol Neurosci. 2012 May;47(1):52-8. doi: 10.1007/s12031-011-9677-1. Epub 2012 Jan 10.28.Zhang H, Duan CJ, Chen W, Wang SQ, Zhang SK, Dong S, Cheng YD, Zhang CF.Clinical significance of SH2B1 adaptor protein expression in non-small cell lung cancer.Asian Pac J Cancer Prev. 2012;13(5):2355-62.29.Zong L, Qu Y, Xu MY, Dong YW, Lu LG.18α-glycyrrhetinic acid down-regulates expression of type I and III collagen via TGF-Β1/Smad signaling pathwayin human and rat hepatic stellate cells.Int J Med Sci. 2012;9(5):370-9. doi: 10.7150/ijms.4395. Epub 2012 Jul 10.30.Liu J, Fang L, Cheng Q, Li L, Su C, Zhang B, Pei D, Yang J, Li W, Zheng J.Effects of G250 promoter controlled conditionally replicative adenovirus expressing Ki67-siRNA on renal cancercell.Cancer Sci. 2012 Oct;103(10):1880-8. doi: 10.1111/j.1349-7006.2012.02380.x. Epub 2012 Aug 10.31.Song L, Zhu Y, Jin M, Zang B.Hydroxysafflor yellow a inhibits lipopolysaccharide-induced inflammatory signal transduction in human alveolarepithelial A549 cells.Fitoterapia. 2013 Jan;84:107-14. doi: 10.1016/j.fitote.2012.11.004. Epub 2012 Nov 15.32.Yang Y, Wang Y, Yang X, Wang Z, Lian Y, Yang Y, Li X, Gao X, Chen J, Shu Y, Cheng L, Liao Y, Liu K.The Antibody Targeting the E314 Peptide of Human Kv1. 3 Pore Region Modulates Key Cholesterol-Metabolism-Associated Molecules in Human Macrophages .Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2013 110:(24) E2239-E2248.33.Ma GF, Chen SY, Sun ZR, Miao Q, Liu YM, Zeng XQ, Luo TC, Ma LL, Lian JJ, Song DL.FoxP3 inhibits proliferation and induces apoptosis of gastric cancer cells by activating the apoptotic signalingpathway.Biochem Biophys Res Commun. 2013 Jan 11;430(2):804-9.34.Duan Y, Zhou B, Su H, Liu Y, Du C.miR-150 regulates high glucose-induced cardiomyocyte hypertrophy by targeting the transcriptional co-activatorp300.Exp Cell Res. 2013 Feb 1;319(3):173-84. doi: 10.1016/j.yexcr.2012.11.015. Epub 2012 Dec 2.35.An Y, Cai B, Chen J, Lv N, Yao J, Xue X, Tu M, Tang D, Wei J, Jiang K, Wu J, Li Q, Gao W, Miao Y.MAP3K10 promotes the proliferation and decreases the sensitivity of pancreatic cancer cells to gemcitabine byupregulating Gli-1 and Gli-2.Cancer Lett. 2013 Feb 28;329(2):228-35. doi: 10.1016/j.canlet.2012.11.005. Epub 2012 Nov 23.36.Lu L, Li C, Li D, Wang Y, Zhou C, Shao W, Peng J, You Y, Zhang X, Shen X.Cryptotanshinone inhibits human glioma cell proliferation by suppressing STAT3 signaling.Mol Cell Biochem. 2013 Jun 6. [Epub ahead of print].37.Sun J, Tu M, Han B, Xue X, Zhang Y, Wei J, Chen J, Lu Z, An Y, Cai B, Lv N, Jiang K, Miao Y, Gao W.Generation and characterization of rabbit polyclonal antibodies against Vasohibin-2 for determination of itsintracellular localization.Int J Oncol. 2013 Jul;43(1):255-61. doi: 10.3892/ijo.2013.1919. Epub 2013 Apr 24.38.Pan HC, Lin JF, Ma LP, Shen YQ, Schachner M.Major vault protein promotes locomotor recovery and regeneration after spinal cord injury in adult zebrafish.Eur J Neurosci. 2013 Jan;37(2):203-11. doi: 10.1111/ejn.12038. Epub 2012 Oct 28.39.Liu Y, Guo Y, An S, Kuang Y, He X, Ma H, Li J, Lv J, Zhang N, Jiang C.Targeting Caspase-3 as Dual Therapeutic Benefits by RNAi Facilitating Brain-Targeted Nanoparticles in a RatModel of Parkinson's Disease.PLoS One. 2013 May 13;8(5):e62905. doi: 10.1371/journal.pone.0062905. Print 2013.40.Zhang Z, Wang H, Sun Y, Li H, Wang N.Klf7 modulates the differentiation and proliferation of chicken preadipocyte.Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 2013 Apr;45(4):280-8. doi: 10.1093/abbs/gmt010. Epub 2013 Feb 24.41.Bi LQ, Zhu R, Kong H, Wu SL, Li N, Zuo XR, Zhou SM, Kou JP, Yu BY, Wang H, Xie WP.Ruscogenin attenuates monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats.Int Immunopharmacol. 2013 May;16(1):7-16. doi: 10.1016/j.intimp.2013.03.010. Epub 2013 Mar 26.42.Gao C, Chen G, Liu L, Li X, He J, Jiang L, Zhu J, Xu Y.Impact of High Glucose and Proteasome Inhibitor MG132 on Histone H2A and H2B Ubiquitination in RatGlomerular Mesangial Cells.J Diabetes Res. 2013;2013:589474. doi: 10.1155/2013/589474. Epub 2013 Apr 30.43.Liu L, Gao C, Chen G, Li X, Li J, Wan Q, Xu Y.Notch Signaling Molecules Activate TGF- β in Rat Mesangial Cells under High Glucose Conditions.J Diabetes Res. 2013;2013:979702. doi: 10.1155/2013/979702. Epub 2013 Apr 18.44.Xu D, Wang Q, An Y, Xu L.miR-203 regulates the proliferation, apoptosis and cell cycle progression of pancreatic cancer cells by targetingSurvivin.Mol Med Rep. 2013 May 31. doi: 10.3892/mmr.2013.1504. [Epub ahead of print].45.Zong L, Qu Y, Xu MY, Dong YW, Lu LG.18α-glycyrrhetinic acid extracted from Glycyrrhiza radix inhibits proliferation and promotes apoptosis of thehepatic stellate cell line.J Dig Dis. 2013 Jun;14(6):328-36. doi: 10.1111/1751-2980.12041.46.Luo L, Lu AM, Wang Y, Hong A, Chen Y, Hu J, Li X, Qin ZH.Chronic resistance training activates autophagy and reduces apoptosis of muscle cells by modulating IGF-1 and its receptors, Akt/mTOR and Akt/FOXO3a signaling in aged rats.Exp Gerontol. 2013 Apr;48(4):427-36. doi: 10.1016/j.exger.2013.02.009. Epub 2013 Feb 16.47.Qiu LL, Wang X, Zhang XH, Zhang Z, Gu J, Liu L, Wang Y, Wang X, Wang SL.Decreased androgen receptor expression may contribute to spermatogenesis failure in rats exposed to lowconcentration of bisphenol A.Toxicol Lett. 2013 May 23;219(2):116-24. doi: 10.1016/j.toxlet.2013.03.011. Epub 2013 Mar 22.48.Wang J, Du J, Wu Z, Jin Q.Quinacrine impairs enterovirus 71 RNA replication by preventing binding of polypyrimidine-tract binding proteinwith internal ribosome entry sites.PLoS One. 2013;8(1):e52954. doi: 10.1371/journal.pone.0052954. Epub 2013 Jan 3.49.Zhou SF, Ma J, Qu HT, Liu ZT, He WD, Wang JD, Dou AX, Zhang N, Liu JL, Guo CS, Shi Y, Hou M, Peng J.Characterization of Th1- and Th2-associated Chemokine Receptor Expression in Spleens of Patients with ImmuneThrombocytopenia.J Clin Immunol. 2013 Jul;33(5):938-46. doi: 10.1007/s10875-013-9883-4. Epub 2013 Mar 14.50.Yang Y, Wang YF, Yang XF, Wang ZH, Lian YT, Yang Y, Li XW, Gao X, Chen J, Shu YW, Cheng LX, Liao YH, Liu K.Specific Kv1.3 blockade modulates key cholesterol-metabolism-associated molecules in human macrophagesexposed to ox-LDL.J Lipid Res. 2013 Jan;54(1):34-43. doi: 10.1194/jlr.M023846. Epub 2012 Oct 24.51.Zhang W, Chen J, Tao J, Hu C, Chen L, Zhao H, Xu G, Heng BC, Ouyang HW.The promotion of osteochondral repair by combined intra-articular injection of parathyroid hormone-relatedprotein and implantation of a bi-layer collagen-silk scaffold.Biomaterials. 2013 Aug;34(25):6046-57. doi: 10.1016/j.biomaterials.2013.04.055. Epub 2013 May 20.52.Zhang X, Jiang H, Gong Q, Fan C, Huang Y, Ling J.Expression of high mobility group box 1 in inflamed dental pulp and its chemotactic effect on dental pulp cells.Biochem Biophys Res Commun. 2014 Aug 8;450(4):1547-52. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.07.027. Epub 2014 Jul 11.53.Zhan A, Xu X, Chen L, Wang X, Yanfeng X, Dan W, Zhan Y, Shi Q.Decreased expression of Gab2 in patients with temporal lobe epilepsy and pilocarpine-induced rat model.Synapse. 2014 Apr;68(4):168-77. doi: 10.1002/syn.21725. Epub 2013 Dec 20.54.Ma H, Shi J, Wang C, Guo L, Gong Y, Li J, Gong Y, Yun F, Zhao H, Li E.Blockade of PDE4B limits lung vascular permeability and lung inflammation in LPS-induced acute lung injury.Biochem Biophys Res Commun. 2014 Aug 8;450(4):1560-7. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.07.024. Epub 2014 Jul 11.55.Chen Z, Liu G, Xiao Y, Lu P.Adrenomedullin22-52 suppresses high-glucose-induced migration, proliferation, and tube formation of human retinal endothelial cells.Mol Vis. 2014 Mar 3;20:259-69. eCollection 2014.56.Zhang Q, Xie D, Wang S, You C, Monroig O, Tocher DR, Li Y.miR-17 is involved in the regulation of LC-PUFA biosynthesis in vertebrates: effects on liver expression of a fatty acyl desaturase in the marine teleost Siganus canaliculatus.Biochim Biophys Acta. 2014 Jul;1841(7):934-43. doi: 10.1016/j.bbalip.2014.03.009. Epub 2014 Mar 28.。