临检--网织红细胞计数(Ret)

网织红细胞计数（Ret）

【定义】

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），经活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，颗粒与颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。

【分型】

根据网织红细胞发育阶段分为4型，分别是：

Ⅰ型（丝球型）：红细胞充满网状物，见于骨髓。

Ⅱ型（网型）：红细胞网状物结构松散，见于骨髓。

Ⅲ型（破网型）：红细胞网状物结构稀少，呈不规则枝点状排列，见于外周血。

Ⅳ型（点粒型）：红细胞内为分散的细颗粒、短丝状网状物，见于外周血。

【检测原理】

1.普通光学显微镜法

2.网织细胞计数仪法和血液分析仪法

【操作方法】

1.显微镜试管法操作

（1）加染液：于试管中加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴，再加新鲜血2滴，立即混匀，置37℃下15～20min。

（2）制片：取1小滴制成薄血涂片，自然干燥。

（3）观察：在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。

（4）计数：在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。

（5）计算：网织红细胞分数=（计数的网织红细胞数）/1O00，网织红细胞绝对值（×109/L）=红细胞数×1012/L×网织红细胞分数。

2.显微镜法注意事项

（1）网织红细胞必须活体染色，WH0推荐使用新亚甲蓝染液，其染色力强且稳定。煌焦油蓝染液操作简单、费用低廉，但易产生沉淀、工作效率不高、精度差。染液与血液比例以1:1为宜，严重贫血时，可适量增加血量。

（2）为提高网织红细胞计数精度和速度，ICSH推荐使用Miller窥盘，方法是将Miller 窥盘置于目镜内，选择红细胞散在且分布均匀的部位

（3）用小方格（A）计数红细胞，大方格（B）计数网织红细胞，按下式计算：

（4）注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体。Ret为蓝绿色网状或点粒状物质，分布不均，

HbH包涵体为蓝绿色圆形小体，均匀散布于整个红细胞内。

【方法学评价】

1.普通光学显微镜法

试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发，造成结果偏低。但显微镜法受主观因素影响较多，且耗时费力。

2.网织细胞计数仪法

可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）3类，有助于化疗、放疗、移植患者的监测。

3.血液分析仪法

网织红细胞绝对值（Ret）、网织红细胞百分比（Ret%）、网织红细胞分布宽度（RDWr）、网织红细胞平均体积（MCVr/MRV）、网织红细胞血红蛋白浓度（HCr）、网织红细胞平均血红蛋白浓度（MCHCr）、网织红细胞血红蛋白分布宽度（HDWr）、LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数（RMI，RMI=（MFR+HFR）/LFR×100）。

仪器法优点是测量细胞多，避免主观因素，方法易于标准化。

【参考值】

手工法

成人：0.008～0.02或（25～85）×109/L

新生儿：0.02～0.06

仪器法（RMI）

男性：9.1%～32.2%

女性：12.8%～33.7%

【临床意义】

正常时，外周血网织红细胞中Ⅲ型约占20%～30%，Ⅳ型约占70%～80%，若骨髓增生明显，可出现I型和Ⅱ型网织红细胞。

1.判断骨髓红细胞造血情况

（1）增多：溶血性贫血，放疗、化疗后。

（2）减少：见于再生障碍性贫血、再障危象。

2.观察贫血疗效：缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前，Ret仅轻度增高（也可正常或减少），给予铁剂或维生素B12、叶酸治疗3～5d后，Ret开始上升，7～10d达高峰，2周左右Ret逐渐下降至正常水平，表明治疗有效。

3.骨髓移植后监测：骨髓移植后第21d，如Ret大于15×109/L，表示无移植并发症；小于15×109/L，伴中性粒细胞和血小板增高，可能为骨髓移植失败。

4.网织红细胞生成指数（RPI）

是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。通常Ret生存期限约为2d，若未成熟网织红细胞提前释放入血，Ret生存期限将延长，为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差，用

RPI来反映Ret生成速率。计算公式为：