葡聚糖凝胶

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凝胶层析的应用范围及其优点:


凝胶层析法适用于分离和提纯蛋白质、酶、多 肽、激素、多糖、核酸类等物质。分子大小彼此 相差25%的样品,只要通过单一凝胶床就可以完 全将它们分开。利用凝胶的分子筛特性,可对这 些物质的溶液进行脱盐、浓缩、去热源和脱色。 凝胶层析具有设备简单、操作方便、分离迅速 及不影响分子生物学活性等优点。目前已被广泛 应用于各种生化产品的分离和纯化。
葡聚Baidu Nhomakorabea凝胶
原理

凝胶颗粒内部具有多孔网状结构,被分离 的混合物流过层析柱时,比凝胶孔径大的 分子不能进入凝胶孔内,在凝胶颗粒之间 的空隙向下移动,并最先被洗脱出来;比 网孔小的分子能不同程度的自由出入凝胶 孔内外,在柱内经过的路程较长移动速度 较慢,最后被洗脱出来。
凝胶的种类和性质






谢 谢

(1)交联葡聚糖凝胶(Sephadex) SephadexG :G 后的数字为凝胶吸水值的10倍。G 反应凝胶的交 联程度、膨胀程度和分部范围。 (2)琼脂糖凝胶(Sepharose; pharmacia;Bio-Gel(Blo-Rad) 依靠糖链之间的次级键维持网状结构,琼脂糖密度越大,网状结 构越密集。 (3)聚丙烯酰胺 一种人工合成的凝胶,以丙烯酰胺为单位,由甲叉双丙烯酰胺交 联而成。交联剂越多,孔隙度越小。 商品名为生物胶—P(Bio-Gel P). (4)聚丙乙烯凝胶(Styrogel) 大网孔结构。

Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使 用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
Sephadex LH20 的原理

Sephadex LH20的分离原理主要有两方面:以 凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反 相溶剂中)。 假如使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH20对化 合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物 保存弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保存强, 后出柱。这是亲和力。 假如使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作 用来分离。这是分子包埋力。
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