黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书
苏微黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书【产品用途】黄曲霉毒素B1（AFB1）免疫亲和柱适合于和AFB1酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用，定量检测AFB1。
用该免疫亲和柱净化样品，提高了样品的纯度。
纯化后的样品可用不同的分析方法测定。
【适应范围及产品性能】用于定性、定量检测谷物、粮油、饲料等样本中AFB1时的样本前处理。
柱吸附能力：≥50ng/支，≥100ng/支（可根据要求选择相应柱容量）；回收率：75%~90%。
柱内凝胶：Protein A琼脂糖凝胶特点：载量大，单抗定向偶联，易洗脱，回收率高。
【测定原理】本产品测定的基础是抗原抗体反应，黄曲霉毒素B1（AFB1）单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱，在免疫亲和柱内，AFB1与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。
最后采用甲醇洗脱AFB1，然后进行相关分析。
【产品组成】标准品（选配）；25支/盒；1mL柱管/支；说明书1份；【所需材料】（不提供）（1）设备及器皿耗材：天平、粉碎机、离心机、高速均质器（18000r/min~22000 r/min）；量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器（100μL~1000μL）、定量滤纸、玻璃微纤维滤纸（直径11cm，孔径1.5μm）、20mL玻璃注射器等。
（2）试剂：甲醇（色谱级）、pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS）、pH7.0磷酸盐缓冲液（PBS）、吐温-20、蒸馏水或去离子水。
【样品制备及净化】（1）谷物、花生及其制品----准确称取25.0g粉碎的样品，加入5.0g氯化钠，----与125.0mL甲醇-水溶液（7+3）混合，以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min，----用定量滤纸过滤，----准确移取15mL滤液并加入30mL水稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，至滤液澄清，备用。
----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。
黄曲霉毒素B1酶联免疫定量检测试剂盒 说明书
1ELISA kit for quantitative detection of aflatoxin B1一、概要黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。
这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。
黄曲霉毒素B1（AFB1）属于自然最强烈的致癌物质，它一般产生于花生、玉米、巴西坚果和棉花种子中。
本试剂盒利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）对各种谷物、饲料及其他食品中的AFB1含量进行快速、定量检测。
二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联免疫吸附微孔模式进行检测，灵敏度可达0.1 µg/kg（ppb）。
样品或标准品中游离的黄曲霉毒素B1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点，经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素B1后加入显色剂与反应底物，其与酶标物作用而成蓝色，加入反应停止液后颜色由蓝色转变为黄色，黄色越深则表明黄曲霉毒素B1越少，用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素B1的污染水平。
三、试剂盒构成1、反应板支架……………………………………………………………………………1块2 黄曲霉毒素B1抗体包被反应板……………………………………………………96孔3、黄曲霉毒素B1标准品溶液（0 ppb，0.1 ppb，0.25 ppb，0.5 ppb，1 ppb，2 ppb）…1套4、酶标记物…………………………………………………………………4瓶5、酶稀释液……………………………………………………………………1瓶6、样品稀释液………………………………………………………………1瓶7、显色剂溶液………………………………………………………………………1瓶8、反应底物溶液………………………………………………………………1瓶9、终止液………………………………………………………………………………1瓶10、浓缩洗涤液（20 X）………………………………………………………1瓶四、注意事项1、试剂盒请置放于2-8℃条件下保存，使用过程中不要让微孔干燥，使用后立即将试剂放回至2-8℃条件下冷藏。
黄曲霉素B1AFB1酶联免疫分析ELISA
黄曲霉素B1（AFB1）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
1 使用目的：本试剂盒用于饲料、谷物、血清等相关液体样本中黄曲霉素B1（AFB1）残留的定量检测。
2 实验原理本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在微孔板包被有黄曲霉素B1（AFB1）偶联抗原，加入黄曲霉素B1（AFB1）标准品或样品，游离黄曲霉素B1（AFB1）与微孔条上预包被的黄曲霉素B1偶联抗原互相竞争抗黄曲霉素B1（AFB1）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中黄曲霉素B1（AFB1）含量成反比，通过标准曲线计算样品中黄曲霉素B1（AFB1）的含量。
3 试剂盒组成3.1 预包被的AFB1偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2 AFB1标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0 ng/ml，0.1 ng/ml,0.3 ng/ml,0.9 ng/ml,2.7 ng/ml,8.1 ng/ml。
3.3抗AFB1抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
3.4显色液A：1瓶（6ml）。
3.5显色液B：1瓶（6ml）。
3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7样本稀释液：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2 不要使用过期试剂盒。
6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。
黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)
黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN黄曲霉毒素B1 检测卡说明书【简介】黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。
黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。
黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。
鉴于这些霉菌毒素的毒性，欧盟国家规定，黄曲霉毒素B1的残留限量值为5ppb。
【检测原理】该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。
【检测范围】花生、玉米、小麦、大米、茶叶、油脂、饲料等；【产品组成】黄曲霉毒素B1免疫胶体金快速检测卡(40份/盒)滴管（40支）干燥剂（40片）一次性手套（5只）【技术指标】检测下限：5μg／kg；【检测步骤】1．取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品（过20目筛），准确称取0.5g均匀粉碎试样，加入到配套的15ml离心管中。
2．向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡5分钟，4000rpm离心1分钟（备注：如实验室没有大离心机设备，可以用小离心管取1.5ml上清液，用小离心机离心）。
3．用吸管取0.6mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液（吹风机或烘箱），然后用0.3ml体积稀释液复溶杯底固体。
此溶解液即为检测液.4．取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
5．5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
【结果判断】1、阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于5ug／kg。
2、阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于5μg／kg。
3、无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。
【注意事项】1、本产品在2～30℃密封干燥保存；忌冷冻；检测卡保存期18个月；2、在环境温度15～37℃下操作；检测卡极易受潮，打开小包装后应立即使用；3、乙酸乙酯为易挥发液体，保存为12个月，不用时要盖紧瓶塞；。
黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书
黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)说明书【产品名称】产品名称：黄曲霉毒素B1快速检测卡(胶体金法)英文名称：Aflatoxin B1 Rapid Test Card (Colloidal Gold)【产品简介】黄曲霉毒素是一类丝状真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）产生的有毒代谢产物，黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，其毒性作用主要是对肝脏的损害。
黄曲霉毒素B1污染的食物主要是玉米、稻谷、小麦、花生、花生油等粮油食品，且以南方高温、高湿地区污染最为严重。
本产品用于快速检测玉米油、花生油、葵花籽油等食用油中黄曲霉毒素B1残留，检测过程只需要20分钟，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。
【包装规格】5次/盒。
【产品组成】黄曲霉毒素B1快速检测卡（5条）；1mL刻度吸管（10支）；提取瓶（内含黄曲霉毒素B1提取液2mL，5瓶）。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检出限】本产品检测方法对玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，对其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。
根据《食品真菌毒素限量GB2761-2011》规定，玉米油、花生油黄曲霉毒素B1检出限量为20μg/kg，其他食用油黄曲霉毒素B1检出限量为10μg/kg。
【使用方法】1、玉米油或花生油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样2mL（用吸管移加2次）；其他食用油检测：用1mL刻度吸管向提取瓶中加入油样4mL（用吸管移加4次）。
2、盖紧提取瓶盖，用手上下振荡30-60秒，静置10分钟，待样品分成上下两层。
3、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用另一只新吸管从提取瓶中吸取少量下层液体，垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。
4、室温环境计时约10分钟，根据示意图判定结果。
【结果判定】阴性（-）：T线显色比C线深或一样深，均表示样品中黄曲霉毒素B1浓度低于检出限。
阳性（+）：T线显色比C线明显变浅或T线不显色，表示样品中黄曲霉毒素B1浓度等于或高于检出限。
黄曲霉毒素B1试剂盒操作流程图
该操作是根据江苏省苏微微生物产品应用编制的，具体使用请参照产品附带说明书！黄曲霉毒素B1操作流程示意图
1.
；
2.1‐6号孔分别按次序由小到大加入浓度为0‐‐2ppb 标准品溶液各50ul ，剩余孔从7号开始分别加入要测定的样品的稀释液；然后从1号开始的所有孔分别加入50ul 稀释后的酶标抗原溶液，加盖后放入37℃培养箱，进行30分钟温育；
3.孵育完成后，倒掉孔内所有试剂，每孔加入约250ul 洗涤液，洗板5次；
4.5次洗板后拍干酶标孔（拍干后残留的气泡可用吸头戳破），按照先后顺序，所有孔先加入50ul 底物a ，然后所有孔再加入50ul 底物b ，加盖后放入37℃培养箱，进行15分钟温育；
显色反应后每个孔基本都会呈现出不同程度的蓝色，肉眼能明显的看到1‐6号孔的蓝色是由深到浅的（毒素含量越低，蓝色越深；反之亦然。
），样品孔则由于毒素含量的不同，呈现出
显色示意图
5.显色反应完成后，在每个孔中加入50ul 的终止液，蓝色变成黄色，混匀后上450nm 波长的酶标仪读取吸光度值。
(整理)黄曲霉毒素B1检测试剂盒操作方法
黄曲霉毒素B1检测试剂盒操作方法2/50 ppb一、样品的准备/萃取1. 获取具有代表性的样品，使用Romer 系列II型研磨机研磨，使至少95%的研磨样品能够通过20目筛网，彻底混合并对样品进行二次取样。
2. 称取4g 研磨样品于干净并可密封的广口瓶中。
加入20mL 70/30（v/v）甲醇/水萃取溶液并密封广口瓶。
注意：样品与萃取溶液比例应为1：5（w:v），振荡或均质3分钟。
3. 静置样品，用滤纸过滤萃取上清液，收集待检滤液。
4. 用提供的分析缓冲液对滤液进行1：2稀释。
例如，将50μL待检滤液加入50μL分析缓冲液中，混匀准备进行随后检测。
二、检测步骤1．将适量的标记颜色的稀释孔条放入微孔板架上，稀释条孔的数目需使每个标准品（0, 2, 5, 20 & 50ppb）或样品能够对应一个稀释孔。
2．将等量的有抗体包被的微孔条放入微孔板架上，未使用的有抗体包被的微孔条需放回装有干燥剂的原铝箔袋内并密封保存。
3．按照240 μL/孔或2 mL/条的体积计算所需的酶联偶合物用量。
从绿色瓶盖的瓶中量取所需用量的酶联偶合物至一个酶联偶合物试剂槽中（如多道移液器所用的试剂槽）。
使用8道移液枪移取100μL酶联偶合物至每个稀释孔中。
4．使用单道移液枪，移取50μL标准品和样品至已装有100μL酶联偶合物的稀释孔中。
用移液枪反复吸送3次以充分混合孔中液体。
每当移取一个标准品或样品时，单道移液枪必需更换上新吸头。
注意确保最后将吸头中的液体排空。
5．使用换有全新吸头的8道移液枪，快速移取每个稀释孔中的液体各100μL至相应的有抗体包被的微孔中。
室温下放置15分钟。
注意不要摇动微孔板去混匀孔中液体，以免引起孔与孔之间的污染。
6．将孔中的液体甩入水槽中，用去离子水或蒸馏水冲洗每个孔，然后将微孔中的水甩入水槽中。
如此方式反复冲洗5次。
注意在冲洗过程中不要将微孔条从微孔板架上取下，每条微孔条带应被固定在微孔板架上。
黄曲霉毒素AFB1_说明书
6. 浓缩洗涤液 （10×） …………………………… 40ml 7. 样品稀释液（10×） ……………………………… 20ml 8. 操作说明书一份
注意：标准品含有低浓度黄曲霉毒素、终止液含 2M HCl， 需小心取用。勿在有效期外使用本试剂盒。
【需要而未提供的设备及试剂】
设备： ┅┅微孔板酶标仪 450nm/630nm ┅┅振荡器 ┅┅涡旋仪 ┅┅离心机 ┅┅天平：感量 0.01g ┅┅微量移液器：单道 20μl～200μl、200μl～1000μl 多道 250μl ┅┅滤纸
【样本前处理步骤】
（一） 谷物（大、小米，玉米等脂肪含量少的谷物）（稀 释倍数：10）
┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml50%甲醇/水溶液混合均 匀；
┅┅强力振荡 3 分钟； ┅┅5000g 离心 10min； ┅┅取400μl 上清液，加入600μl 样品稀释液进行稀释， 充分混匀； ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 （二） 花生（稀释倍数：10）
1
┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 2.0ml 石油醚混合均匀； ┅┅再加入 4ml50%甲醇/水溶液混合均匀； ┅┅强力振荡 3 分钟； ┅┅5000g 离心 10min； ┅┅取 400μl 下层清液，加入 600μl 样品稀释液进行稀 释，充分混匀； ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 （三）食用油（稀释倍数：10） ┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml 石油醚混合均匀； ┅┅再加入 4ml50%甲醇水溶液混合，振荡 1min； ┅┅静置 10min； ┅┅取 400μl 下层清液，加入 600μl 样品稀释液进行稀 释，充分混匀； ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 （四）饲料（稀释倍数：5） ┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml50%甲醇/水溶液混合均 匀； ┅┅强力振荡 3 分钟； ┅┅5000g 离心 10min； ┅┅取上层清液 2.0ml，加入 2.0ml 三氯甲烷用 1.5ml 样 品稀释液进行稀释； ┅┅取 1ml 下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干； ┅┅加入 500ul 50%甲醇/水（1:1）溶液溶解，并加入 750ul 样品稀释液，充分混匀； ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 （五）面粉（稀释倍数：10） ┅┅取 1g 面粉样品，加入 4ml 50%甲醇/水溶液； ┅┅充分振荡 3min； ┅┅5000g 离心，10min； ┅┅取上层清液 500ul 并加入1ml 三氯甲烷，轻摇三分钟， 静置分层； ┅┅取 500ul 下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干； ┅┅加入 250ul 50%甲醇/水溶液溶解，并加入 375ul 样 品稀释液，充分混匀； ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 （六）葡萄酒（稀释倍数：5） ┅┅取 1.0ml 葡萄酒样品，加入 4.0ml 三氯甲烷； ┅┅轻摇三分钟，静置分层； ┅┅取 1ml 下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干； ┅┅加入 500ul50%甲醇/水溶液溶解，再加入 750ul 样品 稀释液，充分混匀；
上海快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡说明书
快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡检测原理：快灵生物黄曲霉毒素B1检测卡基于胶体金免疫层析技术。
检测时，样品中的黄曲霉毒素B1在流动过程中与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体与固相载体膜上的黄曲霉毒素B1-BSA偶联物的结合，如果样品中的黄曲霉毒素B1含量大于灵敏度，检测线在规定时间内不显颜色，结果为阳性，反之，检测线显红色色带，结果为阴性。
无论检测液中黄曲霉毒素B1浓度高低，C线均显红色色带。
适用情况：黄曲霉毒素B1检测卡适用于饲料、粮食、食品企业进行黄曲霉毒素B1的定性或半定量检测；检测样品：谷物、饲料、发酵酒、酱油、醋、食用油等；检测下限：5ppb；试纸特点：黄曲霉毒素B1检测卡可以通过调整稀释倍数准确地检测5ppb、10ppb、20ppb、50ppb或更高阈值；回收率高而稳定（80%左右）；黄曲霉毒素B1检测卡检测背景影响小；通过设置检测梯度实现半定量检测；无毒无害，安全环保；有效期：2~30°C保存18个月。
常见问题：1）用试剂盒定量检测为阳性，但是用试纸卡检测为阴性？答：黄曲霉毒素的生长是呈现不均匀性的，采样不均一可能导致这种结果。
2）说明书后面的残留限量表怎么用？答：残留限量表上面一栏标注有“残留限量”单位是ppb的栏目，是要客户根据自己要测定的标准来选择下面对应稀释液的数量，比如客户是饲料厂，国标规定黄曲霉毒素B1的含量不能超过20ppb，那么在试验中，客户需要加的稀释液的量就是20ppb下面对应的数量。
3）除了产品以外，客户还需要购买其他配套设备和试剂吗？答：配套设备只需要准备基础的实验器材，比如烧杯，电子称等，试剂需要配备乙酸乙酯有机溶剂，规格是分析纯，到普通的化学试剂店就可以买到，价格便宜。
4）试验中提到的纯水可以用蒸馏水代替吗？答：可以。
5）检测时间大概多久？答：加上前处理最多需要半个小时。
6）阴性和阳性各代表什么意思？答：阴性代表样品中不含有毒素或者含有的毒素含量没有超过检测的限量；阳性代表样品中的毒素含量超过了检测限量。
黄曲霉毒素试剂盒说明书
黄曲霉毒素 B1酶联免疫检测试剂盒使用说明书Ⅰ．样品处理方法一、食品1、脂肪含量小的固体样品（如大米、玉米、小米等）称取5.0g样品（已粉碎）于100ml具塞三角瓶中，准确加入25.0ml甲醇水（1+1）溶液，振摇15min，过滤，弃去1/4初滤液，收集试样滤液，根据样品的国家允许量标准，用A试剂将滤液进行稀释（见表1：样品稀释表）。
将样品稀释液进行定量或限量测定。
2、酱油、醋称取5.0g样品于25ml小烧杯中，用5ml蒸馏水将试样转移到125ml分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3min，静置分层。
放出下层三氯甲烷层，经盛有约5g预先用三氯甲烷湿润的无水Na2SO4过滤器于100ml蒸发皿中，再加5ml三氯甲烷于分液漏斗中，重复振摇提取，三氯甲烷层一并滤于蒸发皿中，最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器，洗液并于蒸发皿中，65℃水浴通风挥干。
挥干冷却后，准确加入25.0ml 甲醇水（1+1），将蒸发皿中的凝结物充分溶解。
根据样品的国家允许量标准，用A试剂将提取液进行稀释（见表1：样品稀释表）。
将样品稀释液进行定量或限量测定。
3、食用油（如菜油、麻油、色拉油、花生油等）称5.0g油样于25ml小烧杯中，用20ml石油醚或正乙烷分次将试样转移至125ml分液漏斗中，准确加入25.0ml甲醇水（1+1）溶液，加塞轻轻振摇5min，静置分层，放出下层甲醇水提取液。
根据样品的国家允许量标准，用A试剂将提取液进行稀释（见表1：样品稀释表）。
将样品稀释液进行定量或限量测定。
4、葡萄酒准备称取5.0g葡萄酒于125ml分液漏斗中，加入20ml三氯甲烷，加塞轻轻振摇3min，静置分层。
放出下层三氯甲烷层，经盛有约5g预先用三氯甲烷湿润的的无水Na2SO4过滤器于100ml蒸发皿中，再加5ml三氯甲烷于分液漏斗中，重复振摇提取，三氯甲烷层一并滤于蒸发皿中，最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器，洗液并于蒸发皿中， 65℃水浴通风挥干。
黄曲霉毒素快速检测卡使用方法
黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。
黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。
黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。
【检测原理】该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。
【检测范围】酱油检测限为5ppb花生、玉米、小麦、大米、茶叶、饲料检测限为10ppb食用油检检测限为10ppb【产品组成】名称数量名称数量黄曲霉毒素B1卡10条样品稀释液11瓶样品稀释液21瓶乙酸乙酯1瓶15ml离心管2只2ml离心管10只一次性手套3只滴管10支说明书1份【检测步骤】1、酱油检测：取100ul酱油加入配套的2ml离心管中，加400ul稀释液1，摇匀. 取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
2、花生、玉米、小麦、大米、茶叶、饲料等检测⑴. 取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品（过20目筛），准确称取0.5g均匀粉碎试样，加入到配套的15ml离心管中。
⑵．向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡5分钟，4000rpm离心1分钟（备注：如实验室没有大离心机设备，可以用小离心管取1.5ml上清液，用小离心机离心）。
⑶．用吸管取0.6mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液，然后用0.3ml体积稀释液1复溶杯底固体。
此溶解液即为检测液.⑷．取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
⑸．5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
取1ml待测食用油样品于2ml离心管中，加入1ml样品稀释液2，振荡5min，取上清液100ul，加100ul 样品稀释液1稀释，加样检测。
5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
黄曲霉毒素B1 ELISA快速检测试剂说明书
黄曲霉毒素B1 ELISA快速检测试剂盒【产品概述】黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性。
主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液、动物饲料相关的产品中。
天然污染的黄曲霉毒素以AFB1为主。
1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织的癌症研究机构划定为类致癌物，是一类毒性极强的剧毒物质。
它被证明对人和动物的肝脏、肾脏等组织和器官具有很大的危害。
产生黄曲霉毒素的霉菌（如黄曲霉、寄生曲霉等）遍及世界各地，黄曲霉的污染可以发生在植物的生长、收获和加工、储藏、运输等过程中、及时发现污染源是最好的预防黄曲霉毒素污染的方法。
【产品原理】本产品是利用免疫竞争法检测原理建立的一种定量检测试剂盒。
具有简单、快速，无需特殊的仪器设备，既可以在实验室进行，也可在农场、饲料混合车间等实地进行测定。
结果准确，灵敏度度为0.05ppb，准确率大于95% 。
适用于谷物、饲料等样板中的黄曲霉毒素的检测。
【产品特性】1）试剂盒灵敏度: 0.05ppb2）试剂盒变异系数：小于20%。
3）试剂盒准确度：回收率范围在80％-110％之间。
【试剂盒组成】1）包被有抗原的96微孔板：1块（96 孔，12 条×8 孔）2）黄曲霉标准品：0 ppb 、0.05 ppb、0.12 ppb、0.25 ppb、0.5ppb、1 .0 ppb、2.0ppb1 瓶× 1.0ml3）200×黄曲霉抗体浓缩液： 1 瓶× 0.25ml4）60×酶标二抗浓缩液： 1 瓶× 0.25ml5）10×浓缩洗涤液： 1 瓶× 50ml6）稀释缓冲液： 2 瓶×40ml7）显色底物液 1 瓶×7ml8）反应终止液： 1 瓶× 7ml9) 试剂盒说明书【仪器试剂】仪器—酶标仪450nm—过滤漏斗—微量移液器20μl～200μl，100μl～1000μl—刻度移液管—天平：感量0.01g—50ml离心管或25ml锥形瓶—定性滤纸试剂—甲醇—蒸馏水【样本的前期处理】1. 玉米、花生等谷物----称取10g样品，加入20ml样品提取液（每100ml中含60ml甲醇，40ml蒸馏水），剧烈振荡3分钟（用手或振荡器）----将提取液用普通滤纸过滤，用稀释缓冲液按1：9的比例稀释过滤液（吸取100u过滤液，加入900ul稀释液缓冲液）样本稀释倍数为20倍2. 饲料（1）普通饲料----称取5g样品，加入25ml样品提取液（每100ml中含60ml甲醇，40ml蒸馏水），剧烈振荡3分钟（用手或振荡器）----将提取液用普通滤纸过滤，用稀释缓冲液按1：9的比例稀释过滤液（吸取100u过滤液，加入900ul稀释液缓冲液）样本稀释倍数为50倍（2）浓缩饲料----称取5g样品，加入25ml样品提取液（每100ml中含60ml甲醇，40ml蒸馏水），剧烈振荡3分钟（用手或振荡器）----将提取液用普通滤纸过滤，取2ml滤液，加入3ml三氯甲烷，振荡1分钟，静置1分钟，3500rpm离心5分钟。
总黄曲霉毒素检测卡说明书(完整版)
总黄曲霉毒素快速检测卡【产品简介】黄曲霉毒素是真菌的次级代谢产物，主要是由黄曲霉、寄生曲霉和特曲霉产生。
它易天然存在于花生、棉籽、玉米、小麦和稻米等农作物中具，有强烈的毒性和致癌性。
本产品为总黄曲霉毒素胶体金快速检测卡，用于定性检测核桃奶、银杏露等各种饮品以及玉米、花生等坚果和饲料中的黄曲霉毒素B1、B2 和G1、G2 的残留，整个检测过程只需要5 分钟左右。
核桃奶、银杏露等各种饮品灵敏度为1ppb，玉米、花生等坚果和饲料的灵敏度为2ppb 。
乳液中黄曲霉毒素Ｍ１检测灵敏度为0.5ppb.【产品规格】规格：40 份/盒【样品处理】1、饮品可直接用于检测。
2、玉米、花生等坚果和饲料称取适量样品经饲料粉碎机磨细后，过20 目筛。
称取过筛后 1 克粉碎样品，用4ml 样品提取液溶解。
用手或用涡旋仪剧烈震荡 5 分钟左右。
静置10-20 分钟。
静置后轻轻取上清液，按1:2 加入样品稀释液（上清液：样品稀释液=1:2）。
充分混匀后用于检测样品提取液：60%甲醇溶液。
按体积比甲醇：纯水=3:2 配制。
样品稀释液：0.01mol/L 磷酸盐缓冲液PBS【使用步骤】1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。
2、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。
3、将检测卡平放，用滴管吸取待检样品溶液，垂直逐滴加入4、滴无气泡样品于加样孔中，加样后开始计时。
5、5 分钟读取结果，30分钟后结果判读无效。
根据示意图判定结果。
注：如果出现无法层析至顶的情况，可酌情多滴1-2 滴。
【结果判定】阴性（-）：两条紫红色条带出现。
表示样品中不含有总黄曲霉毒素或其浓度低于检测限。
阳性（+）：检测T 线无显色，则表示样品中总黄曲霉毒素浓度高于检测限。
无效：未出现质控 C 线，表明操作过程不正确或检测卡已失效。
【注意事项】1、检测卡请在有效期内一次性使用；2、检测时避免阳光直射和电风扇直吹；3、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面；4、样品滴管不可混用，以免交叉污染；5、如果样品出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测；由于样品的差异，有的检测线可能偏淡或颜色偏灰，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。
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黄曲霉毒素B1 检测卡说明书
【简介】
黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。
黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。
黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。
鉴于这些霉菌毒素的毒性，欧盟国家规定，黄曲霉毒素B1的残留限量值为5ppb。
【检测原理】
该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。
【检测范围】
花生、玉米、小麦、大米、茶叶、油脂、饲料等；
【产品组成】
黄曲霉毒素B1免疫胶体金快速检测卡(40份/盒)
滴管（40支）
干燥剂（40片）
一次性手套（5只）
【技术指标】
检测下限：5μg／kg；
【检测步骤】
1．取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品（过20目筛），准确称取0.5g均匀粉碎试样，加入到配套的15ml离心管中。
2．向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL，将瓶塞盖紧密封，用力振荡5分钟，4000rpm离心1分钟（备注：如实验室没有大离心机设备，可以用小离心管取1.5ml上清液，用小离心机离心）。
3．用吸管取0.6mL上清液到小玻璃杯中，吹干滤液（吹风机或烘箱），然后用0.3ml体积稀释液复溶杯底固体。
此溶解液即为检测液. 4．取出试纸，开封后平放在桌面，用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。
5．5~10分钟判断结果，半小时后的结果判读无效。
【结果判断】
1、阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现，表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于5ug／kg。
2、阳性:只有对照线(C),无测试线(T)，表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于5μg／kg。
3、无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现，或者对照线（C）不出现。
【注意事项】
1、本产品在2～30℃密封干燥保存；忌冷冻；检测卡保存期18个月；
2、在环境温度15～37℃下操作；检测卡极易受潮，打开小包装后应立即使用；
3、乙酸乙酯为易挥发液体，保存为12个月，不用时要盖紧瓶塞；
（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）。