动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定
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动物性蛋白质饲料
胃蛋白酶消化率的测定过滤法
参考标准:GB/T 17811-2008
一、适用范围
二、实验原理
已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。
三、实验用品
三、实验内容
取下载有残渣的滤纸(用滤纸将残渣包裹好),无损地移入100烧杯中并置于105℃烘箱内烘干。
5 粗蛋白质
的测定将上述已烘干的滤纸包无损地移入
凯氏烧瓶中,按《FOSS 定氮仪测定
饲料中粗蛋白含量的方法》测定残
渣粗蛋白质的质量分数(ω
2
)。同
时,称取脱脂风干的样品0.3 g(精
确至0.0002 g),直接按《FOSS 定
氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方
法》测定脱脂未酶解的样品中粗蛋
白质的质量分数(ω
1
)。
测定残渣粗蛋白质时应从每个
样品残渣粗蛋白质中减去酶液
的空白值。
6 计算X- 试样胃蛋白酶消化率,以质
量分数计(%);
ω
1
- 脱脂未酶解的样品中粗蛋
白质的质量分数(%);
ω
2
- 脱脂酶解后的残渣中粗蛋
白质的质量分数(%)。
重复性:1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解,平行测定残渣粗蛋白质的质量分数,以其算术平均值为测定结果(保留三位有效数字),测定结果的相对≤6%;
2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数,以其算
粗蛋质含量允许相对偏差
>25% 1%
10% ≤10% 3% 3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。 误差来源及分析 误差来源控制方案 样品抽样取样要有代表性、真实性。 制备样品要有一定数量; 充分混匀,用四分法缩分; 粉碎至能全部通过20目。 附录2:盐酸标准溶液的配制与标定 参考标准:GB/T601-2002 1.盐酸标准溶液的配制 按下表的规定量取盐酸,注人1000m L 水中,摇匀。 2.盐酸标准溶液的标定 按下表的规定称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠,溶于50ml.水中,加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液,用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2 min ,冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。 3.计算 盐酸标准滴定溶液的浓度[c(HCI)].数值以摩尔每升(mol/L 表示,按式(2)计算: M V V m HCl C ⨯-⨯= )21(1000 )( m- 无水碳酸钠的质量的准确数值,单位为克(g); V1 -盐酸溶液的体积的数值,单位为毫升(ml); V: -空白试验盐酸溶液的体积的数值,单位为毫升(mL) M- 无水碳酸钠的摩尔质量的数值,单位为克每摩尔(g/mol) 注意事项: 1.灼烧温度不能超过300度,当温度超过300度时无水碳酸钠分解,可将马福炉的温度调至250,等升温稳定后再调至280,或者将马福炉事先升温至280度,待稳定后再放入无水碳酸钠 2.无水碳酸钠的称量质量小于0.2g 时要用十万分子之一天平称量。 3.混合指示剂为 %甲基红,%溴甲酚绿,1:1混合。 4.滴定一定要滴到暗红色再煮沸,可事先根据大体浓度计算大约的滴定体积。 5.滴定终点到达之后一定是再次去煮不会变回绿色。