动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定

动物性蛋白质饲料

胃蛋白酶消化率的测定过滤法

参考标准：GB/T 17811-2008

一、适用范围

二、实验原理

已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。

三、实验用品

三、实验内容

一份15ml的丙酮进行洗涤，照上法振摇和倒出。检查瓶子，并用丙酮再次洗涤。当全部液体通过滤纸后,用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次,并抽干。从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸(用滤纸将残渣包裹好),无损地移入100烧杯中并置于105℃烘箱内烘干。

5 粗蛋白质

的测定将上述已烘干的滤纸包无损地移入

凯氏烧瓶中，按《FOSS 定氮仪测定

饲料中粗蛋白含量的方法》测定残

渣粗蛋白质的质量分数（ω

2

）。同

时，称取脱脂风干的样品0.3 g（精

确至0.0002 g），直接按《FOSS 定

氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方

法》测定脱脂未酶解的样品中粗蛋

白质的质量分数（ω

1

）。

测定残渣粗蛋白质时应从每个

样品残渣粗蛋白质中减去酶液

的空白值。

6 计算X- 试样胃蛋白酶消化率，以质

量分数计（%）；

ω

1

- 脱脂未酶解的样品中粗蛋

白质的质量分数（%）；

ω

2

- 脱脂酶解后的残渣中粗蛋

白质的质量分数（%）。

重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%；

2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其算

粗蛋质含量允许相对偏差

>25% 1％

10%

≤10% 3％

3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。

误差来源及分析

附录2：盐酸标准溶液的配制与标定

参考标准：GB/T601-2002

1.盐酸标准溶液的配制

按下表的规定量取盐酸，注人1000m L 水中，摇匀。

2.盐酸标准溶液的标定

按下表的规定称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠，溶于50ml.水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2 min ，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。 3.计算

盐酸标准滴定溶液的浓度[c(HCI)].数值以摩尔每升(mol/L 表示，按式(2)计算：

M

V V m HCl C ⨯-⨯=

)21(1000

)(

m- 无水碳酸钠的质量的准确数值，单位为克(g); V1 -盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(ml); V: -空白试验盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(mL) M- 无水碳酸钠的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol) 注意事项：

1.灼烧温度不能超过300度，当温度超过300度时无水碳酸钠分解，可将马福炉的温度调至250，等升温稳定后再调至280，或者将马福炉事先升温至280度，待稳定后再放入无水碳酸钠

2.无水碳酸钠的称量质量小于0.2g时要用十万分子之一天平称量。

3.混合指示剂为 0.1%甲基红，0.1%溴甲酚绿，1：1混合。

4.滴定一定要滴到暗红色再煮沸，可事先根据大体浓度计算大约的滴定体积。

5.滴定终点到达之后一定是再次去煮不会变回绿色。