高效液相色谱法相关参数测定
高效液相色谱法含量测定操作规程全文编辑修改
精选全文完整版可编辑修改高效液相色谱法含量测定1检验方法高效液相色谱法2检验原理高效液相色谱法系采用高压输液泵，将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对样品进行测定的色谱方法。
注入样品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依此进入检测器，由数据处理系统记录和处理色谱信号。
3检验试剂甲醇（色谱纯）、乙腈（色谱纯）、纯水（高纯水）、磷酸等。
4供试品溶液制备取要测试的供试品适量，参照《药典》及《制剂规范》，用规定的溶剂适宜的提取精制方法，配制成一定浓度的供试品溶液。
供试品溶液注入色谱柱前要经适宜的0.45nm的滤膜滤过。
5对照品溶液制备根据供试品所要测定的成分取相应的对照品，用适宜的溶剂配制成相应浓度的对照品溶液。
6流动相配制用高纯度的试剂配制流动相，水应为新鲜配制的高纯水。
配制好的流动相通过适宜的0.45nm 的滤膜滤过，用前脱气。
7操作7.1打开自动进样器、检测器、泵、柱温箱，进入工作站。
7.2自动进样器排气自动进样器排气用50%甲醇（用前脱气），点击自动进样器界面上的purge键，自动排气25分钟。
7.3泵排气分析界面中，设置方法参数，下载方法参数。
用流动相冲洗吸滤头，再把吸滤头浸入流动相中，逆时针旋转排气阀90-180度，点击purge键，排气3-4分钟，顺时针旋转排气阀90-180度，激活仪器。
7.4进样操作7.4.1.将对照品溶液和供试品溶液分别置于样品瓶中，盖上带有垫片的瓶盖，顺时针旋紧，7.4.2将样品瓶按顺序放置于样品瓶架上。
7.4.3设置方法参数，选择波长、柱温、流速、结束时间等，下载并保存方法文件，待色谱系统充分稳定，基线平直。
7.4.4设置批处理分析表。
分析界面主项目中，点击批处理分析，依次设置样品瓶号、样品瓶架号、样品名、方法文件、数据文件、进样体积，保存批处理分析表，点击批处理分析开始，开始数据采集。
7.4.5不同浓度的对照品溶液和同一浓度的供试品溶液应分别进样不少于5针。
高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸
4、液相色谱的结构
• 一 流路系统： 流动相、管路、泵、混 合器、脱气机等组成
• 在225nm下测其峰面积：
体积/mL 2.00 含量/mg 0.010 峰面积 280594
3.00 0.015 415433
4.00 0.020 555024
5.00 0.025 687406
6.00 0.030 831821
峰面积
1000000 800000 600000 400000 200000
3、为什么要选择液相色谱方 法？
• 高速：HPLC采用高压输液设备，流速大大增加，分析速度极快， 只需数分钟；而经典方法靠重力加料，完成一次分析需时数小时。
• 高效：填充物颗粒极细且规则，固定相涂渍均匀、传质阻力小， 因而柱效很高。可以在数分钟内完成数百种物质的分离。
• 高灵敏度：检测器灵敏度极高：UV——10-9g, 荧光检测器—— 10-11g
50 100 150 200 250 300 350 波长/nm
三、实验阶段
• 2.仪器参数设置
• 流动相: 甲醇：乙酸铵溶液（0.02mol/L） (5:95)
• 流速:1mL/min • 进样量：10uL • 检测器波长：225nm
三、实验阶段
• 3.标准曲线绘制
• 分别移取苯甲酸标液2mL、3mL、4mL、5mL 、6mL于 50mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
6、如何定性，如何定量
• 1、定性分析：在确定的色谱分离条件下，苯甲酸有一定的保留时间， 在相同的实验条件下，分别测定苯甲酸纯物质和饮料样品中各组分的保 留值，将两者进行对比，就可确定饮料中何种组分为苯甲酸，对其进行 定性。
高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量
高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸含量一、本文概述本文旨在探讨高效液相色谱法（HPLC）在大豆中游离氨基酸含量测定中的应用。
作为一种重要的植物蛋白来源，大豆中的氨基酸组成对于其营养价值及食品工业应用具有重要意义。
游离氨基酸作为大豆蛋白质水解的产物，其含量直接反映了大豆的蛋白质质量和营养价值。
因此，准确测定大豆中游离氨基酸的含量对于评估大豆品质及开发高附加值产品至关重要。
高效液相色谱法作为一种高效、准确的分离分析技术，在氨基酸分析领域具有广泛应用。
本文将详细介绍高效液相色谱法的基本原理、样品处理方法、色谱条件优化以及结果计算与分析等方面的内容，并通过实验验证该方法的可行性和准确性。
本文还将讨论高效液相色谱法在大豆游离氨基酸含量测定中的优势及局限性，以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。
二、实验材料与方法（1）大豆样品：选择新鲜、无病虫害、无杂质的大豆作为实验材料，经过清洗、烘干、破碎后备用。
（2）试剂：实验所需试剂包括高效液相色谱仪用流动相（如乙腈、甲醇等）、衍生化试剂（如OPA、FMOC等）、标准品氨基酸等，均为分析纯或更高纯度。
（3）仪器：高效液相色谱仪（配备紫外检测器或荧光检测器）、离心机、涡旋混合器、水浴锅、移液枪等。
（1）样品处理：称取适量大豆样品，加入适量的水或缓冲液，进行匀浆处理。
然后，将匀浆液进行离心，取上清液作为游离氨基酸提取液。
（2）衍生化处理：取一定体积的游离氨基酸提取液，加入适量的衍生化试剂，进行衍生化反应。
衍生化反应的目的是将氨基酸转化为易于检测的衍生物，提高检测灵敏度和准确性。
（3）高效液相色谱分析：将衍生化后的样品进行高效液相色谱分析。
选择合适的流动相和色谱柱，设置合适的检测波长或激发/发射波长，记录色谱图和峰面积。
（4）数据处理：根据标准品氨基酸的色谱图和峰面积，绘制标准曲线。
然后，根据样品的色谱图和峰面积，结合标准曲线，计算样品中游离氨基酸的含量。
本实验采用高效液相色谱法测定大豆中游离氨基酸的含量，通过样品处理、衍生化处理、高效液相色谱分析和数据处理等步骤，实现对大豆中游离氨基酸的快速、准确测定。
九高效液相色谱仪的性能检查和色谱参数的测定
线性范围
检查自动进样器在不同进 样量下的线性响应范围， 以确保其适用于不同浓度 的样品分析。
检测器性能检查
噪声与漂移
评估检测器的基线噪声和漂移，以确保其稳定性和灵 敏度。
线性范围与响应因子
检查检测器在不同浓度下的线性响应范围和响应因子， 以确保其准确性和可靠性。
检测限与定量限
确定检测器的检测限和定量限，以评估其对于低浓度 样品的检测能力。
九高效液相色谱仪的性能检查和色 谱参数的测定
目录
• 性能检查 • 色谱参数测定 • 方法开发与验证 • 仪器维护与故障排除 • 数据处理与结果分析 • 法规要求与实验室管理实践
01 性能检查
泵系统性能检查
01
02
03
流量准确性
通过测量实际流量与设定 流量的偏差来评估泵系统 的准确性。
流量精密度
03 方法开发与验证
方法开发流程梳理
明确分析目标
确定需要分析的样品类型、目标化合物以 及分析要求。
确定洗脱程序
通过优化洗脱程序，包括梯度洗脱和等度 洗脱，使目标化合物在合适的时间内出峰，
并获得良好的峰形和分离度。
选择色谱柱和流动相
根据目标化合物的性质选择合适的色谱柱 和流动相，确保目标化合物能够得到有效 的分离和检测。
峰识别、定量计算及结果解读方法分享
峰识别
根据色谱峰的保留时间、峰形等特征，识别出样品中的各 组分，并与标准品进行比对验证。
定量计算
通过比较样品峰与标准品峰的峰面积或峰高，使用内标法、 外标法等定量方法，计算出样品中各组分的含量。
结果解读
根据定量计算结果，结合样品信息和相关标准，对检测结果进行解读和评估， 判断样品是否符合要求。同时，对异常结果进行原因分析，并提出相应的改进 建议。
高效液相色谱法测定清热解毒口服液中黄芩苷的含量
2020.24科学技术创新（转下页）程中，主要采用工业摄影测量技术，能够准确对零件进行量测，通过拍摄目标的方式计算出零件的三维坐标，运用多角度、时刻多幅图像后方交会方式，明确零件的标志点，从而能够获取目标不同时刻的三维形态变量，相较于其他测量方式而言，工业摄影测量系统本身具有尺度扩展性好、非接触式测量、实时性、测量速度较快等特点，主要应用于飞机、船舶、车辆等机械制造业中，能够有效提升零件加工的精准度，比如：进行飞机外形测量过程中，可以应用工业摄影测量系统，多角度拍摄飞机部件的外形，并准确利用目标标志点建立三维坐标，以便为后续两件加工提供数据依据，同时，进行全尺寸飞机结构试验中，也可以运用工业摄影测量系统测量全尺寸飞机结构位移，以期能够准确获取飞机结构三维变形量数据。
2.3纳米位移测量技术。
在机械制造中，纳米位移测量技术的应用，实现了机械制造业一次质的飞跃。
纳米位移测量技术是建立在双频激光技术的基础上，在测量时，通过其所合成波长，区分干涉条纹，进而确定测量的数据，一方面，有效地扩大了测量范围，解决了微运动的技术问题，另一方面，提高测量的超高精度，通常情况下，其进行的位移测量，精度达到纳米级、范围扩大到毫米量程。
2.4激光器测量技术。
在机械制造中，激光器测量技术的应用，使得机械测量的线性度、量程能为精度都有了很大的进步和改进，通过激光器能够有效提高聚物测量精密度，目前，这种技术还要深入研究中，比如当前建立在正交偏振激光器上，所研发出的各种测量仪器，这些测量仪器在应用过程中，不仅操作简便，而且测量精度极高，能够有效提升机械制造测量水平。
2.5超精密仪器核心技术。
这种测量的应用主查将仪器与测量技术进行了完美的融合，在机械制造中，形成一个完备的制造系统，从而来满足所需要的测量精度。
比如Walter 公司在机械制造中所使用的刀具万能测量仪，既满足了非接触性测量，又可以实现测量自动化，使得机件在生产过程中，加强对相关参数的修正，使得零废品制造目标的实现成为可能。
高效液相色谱法测定芳香烃混合物的各组分含量实验报告
高效液相色谱法测定芳香烃混合物的各组分含量实验报告实验报告：高效液相色谱法测定芳香烃混合物的各组分含量一、实验目的：使用高效液相色谱法测定芳香烃混合物的各组分含量。
二、实验原理：高效液相色谱法（HPLC）是一种将液相背靠液相进行分离的色谱分析方法。
在本实验中，选择一种适宜的流动相，通过进样器将待分析的芳香烃混合物注入进液相色谱柱，利用流动相与固定相之间的相互作用及芳香烃分子与固定相之间的相互作用，在柱内进行分离。
通过控制液相流速、柱温等参数，可以实现对芳香烃混合物中各组分的定性与定量分析。
三、实验仪器与试剂：1.高效液相色谱仪2.色谱柱3.样品：芳香烃混合物四、实验步骤：1.根据实验需求，配置适宜的流动相溶液。
2.打开高效液相色谱仪，进行仪器的预热和调试。
3.调节样品进样器，将待测的芳香烃混合物注入进样器中。
4.将进样器连接至HPLC仪器，进行进样。
5.根据所选取的柱类型和分离目标，调节液相流速、柱温等参数进行分离。
6.观察高效液相色谱图谱，记录各峰的保留时间。
7.参考标准溶液浓度进行定量分析。
五、实验结果与分析：[插入实验结果示例图谱]根据光谱图谱，我们可以根据各峰的保留时间与标准曲线进行定量分析。
得到芳香烃混合物中各组分的含量如下：组分1：某 mg/mL组分2：某 mg/mL......组分n：某 mg/mL六、实验结论：通过本实验，我们使用高效液相色谱法成功地对芳香烃混合物进行了定量分析。
通过分析得到的结果，我们可以得知芳香烃混合物中各组分的含量，为后续实验或实际应用提供了重要的参考数据。
七、实验心得与建议：在实验过程中，我们需要严格控制实验条件，确保获得准确可靠的实验结果。
同时，在选择流动相溶液、调节液相流速等参数时，需要根据实际情况进行合理选择。
另外，对于柱的选择也是十分重要的，不同类型的柱会对分离效果产生不同影响，需要根据分离目标进行选择。
总的来说，高效液相色谱法是一种高效、准确的分析方法，在化学、环境、生物等领域有着广泛的应用。
高效液相色谱法测定水中氨实验报告
高效液相色谱法测定水中氨实验报告1. 引言氨是一种广泛存在于自然界中的溶解性无机氮化合物，在环境和食品安全监测中具有重要意义。
因此，准确测定水中氨的含量对于环境保护和人类健康至关重要。
本实验旨在利用高效液相色谱法测定水样中氨的浓度。
2. 实验原理本实验采用高效液相色谱法进行测定。
此方法基于样品中氨的分子结构和物理性质，利用色谱柱对氨进行分离和定量分析。
在色谱柱中，氨与移动相发生相互作用并移动，通过检测器测定峰面积或峰高与氨浓度之间的关系，从而确定水样中氨的含量。
3. 实验步骤3.1 样品处理将待测水样收集于容量为500 mL的锥形瓶中，并在密封情况下储存。
为了提高氨的稳定性，可以在收集样品时添加一定量的硼酸。
3.2 样品预处理取适量的样品，用硫酸和高氯酸进行预处理，以去除样品中的干扰物质。
待预处理完成后，用蒸馏水稀释样品至一定浓度。
3.3 色谱条件设置选择适当的色谱柱和流动相，根据色谱仪的要求进行设置。
一般情况下，C18色谱柱和甲醇-水溶液作为流动相的混合物可以获得较好的分离效果。
3.4 样品进样和分析将经预处理的样品注入色谱仪中，根据仪器要求设置检测器参数。
启动色谱仪，记录检测器输出信号。
3.5 校准曲线的绘制和浓度计算制备一系列标准溶液，并按照同样的方法进行进样和分析。
根据标准曲线的信号峰面积或峰高与浓度之间的关系，计算待测样品中氨的浓度。
4. 结果与讨论在本实验中，我们测定了不同水样中氨的含量，并绘制了标准曲线。
通过计算实验样品中氨的浓度，得到了以下结果：（结果数据根据实际测定填写）实验结果表明高效液相色谱法可用于准确测定水中氨的含量。
然而，为了确保结果的可靠性，实验中仍需注意一些关键因素，如样品的采集和保存、预处理的精确性以及仪器设备的精密度和准确性等。
5. 结论通过本实验，我们成功利用高效液相色谱法测定水中氨的含量。
该方法具有准确度高、操作简便、灵敏度强等优点，对于环境监测和水质分析具有重要意义。
高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量
高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量引言清肺颗粒是一种中药颗粒剂，常用于治疗咳嗽、喘息等呼吸系统疾病。
其中的甘草酸作为主要有效成分之一，具有镇咳、平喘、化痰等功效。
准确测定清肺颗粒中甘草酸的含量对于保证其药效，具有重要意义。
本文将利用高效液相色谱法对清肺颗粒中甘草酸的含量进行测定。
实验方法1. 仪器和试剂本实验使用的仪器主要包括: 高效液相色谱仪、电子天平、PH计等；试剂有：甘草酸标准品、乙腈、甲醇、磷酸、二甲基亚砜等。
2. 样品制备取清肺颗粒0.5g，加入50ml的乙醇水溶解液中，超声提取3次，每次15分钟，离心，取上清液，合并，浓缩至1ml，称取1ml装入10ml量瓶，加纯水至刻度。
3. 色谱条件色谱柱：C18色谱柱；流动相：甲醇-0.05%磷酸溶液（25:75）；检测波长：254nm；柱温：25℃；流速：1.0ml/min。
4. 色谱峰识别用甘草酸标准溶液进行色谱峰识别，测定其保留时间。
5. 色谱峰积分将制备好的清肺颗粒提取液进行色谱测定，测得其峰面积值。
6. 含量计算由色谱峰面积值和标准曲线得出清肺颗粒中甘草酸的含量。
结果与分析通过上述实验方法，我们测定了清肺颗粒中甘草酸的含量。
例如：得到清肺颗粒中甘草酸的含量为Xmg/g。
根据国家药典规定的标准范围，我们可以判断该批次的清肺颗粒中甘草酸的含量是否符合要求。
通过对多个批次的清肺颗粒进行测试，得出结果稳定可靠。
讨论通过本次实验，我们成功地利用高效液相色谱法对清肺颗粒中甘草酸的含量进行了测定。
该方法简单、精确、灵敏，能够满足对清肺颗粒中甘草酸含量的要求。
该方法还可以应用于其他中药颗粒剂中甘草酸含量的测定，具有重要的实际应用意义。
高效液相色谱法相关参数测定
化学键合固定相
硅氧碳键型： ≡Si—O—C 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C
化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相；
硅碳键型： ≡Si—C 硅氮键型： ≡Si—N
稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广；
化学键合固定相的特点
（1）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快； （2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击； 耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定； （4）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性； （5）有利于梯度洗脱；
2.流速
流速大于0.5 cm/s时, H～u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
二、分离类型选择
choice of separation types
application of HPLC
三、HPLC的应用
高效分离柱
柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
a. 紫外检测器 应用最广，对大部分有机化合物有响应。 特点： 灵敏度高； 线形范围高； 流通池可做的很小（1mm × 10mm ，容积 8μL）； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 波长可选，易于操作； 可用于梯度洗脱。
流动相类别
按流动相组成分：单组分和多组分； 按极性分：极性、弱极性、非极性； 按使用方式分：固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂： 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
流动相选择
在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。 常用溶剂的极性顺序： 水(最大) > 甲酰胺> 乙腈> 甲醇> 乙醇> 丙醇> 丙酮> 二氧六环> 四氢呋喃> 甲乙酮> 正丁醇> 乙酸乙酯> 乙醚> 异丙醚> 二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油(最小)
高效液相色谱法测定纯度
高效液相色谱法测定纯度
高效液相色谱法是目前用于药物纯度测定的常用方法之一。
它具有快速精准、重现性好、适用范围广等优点。
下面将介绍高效液相色谱法测定纯度的具体步骤及注意事项。
1. 样品制备：将所需样品按照规定方法制备成溶液，并通过滤膜除去悬浊物和杂质，保证样品的纯度和质量。
2. 色谱条件设置：根据所需测试物质的物化性质和药物规定，选择适宜的色谱柱和固定相；设置流速、温度、波长等参数。
3. 校准与质量控制：测试前需进行柱的校准，确保分离准确；在分析过程中，不断对标准样品进行检测，掌握质量控制。
4. 分析过程：将样品注入进样器，经过分离柱后，在检测器中检测吸收峰，得到各化合物的峰面积和保留时间。
通过比对标准品数据和其它药物数据，计算出样品中目标物质的含量和相关物质的杂质含量。
5. 数据处理：将测试结果进行计算、比对和分析，得出该物质的组成和含量，以及样品中其它附加物的杂质含量。
注意事项：
1. 仪器、柱和标准品等均需严格控制质量和纯度，以保证测试结果的准确性。
2. 在进行测试前，要对仪器进行充分的清洁和调试，确保仪器的正常运行状态。
3. 注意样品制备过程中细节操作，以避免样品被污染或改变其纯度。
4. 在测试过程中，根据不同样品和测试要求，选择不同的色谱固定相和柱子，以保证分离效果和分离速度都满足测试要求。
5. 良好的数据分析和处理，是测试结果准确性和可信性的重要保障。
因此，要对数据进行细致分析和检查，保证测试结果的合理性和科学性。
高效液相色谱分离模式及检测
● 试剂：乙腈(JDH.色谱纯);磷酸、磷酸二氢钾(GR,国药集团化学试剂有限公司);三聚氰胺标准物质 (中国计量科学研究院),实验用水为高纯水,电阻率为18.25 MΩ·cm-1。
● 称取100.0mg三聚氰胺标准物质,用水完全溶解后定容至100m L,混匀,此为三聚氰胺标准储备液, 三聚氰胺浓度为1.00g/L。用水逐级稀释三聚氰胺标准储备液至1.00mg/L,此为三聚氰胺标准溶液。 分别移取标准溶液0.50m L、1.00m L、2.00m L、5.00m L、10.00m L、25.0m L、50.0m L 和100.0m L至100m L容量瓶中,并用水定容至刻线,此标准工作溶液三聚氰胺含量分别为5μg/L、 10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L、1000μg/L
测蛋白质的重要方法。并且,人们的研究证明HPIEC与RP-HPLC都是分离膜蛋白的首选方法
分离模式3
● 高效凝胶过滤色谱
● 凝胶过滤色谱也称体积排阻色谱(Size exclusion chromatography,SEC), 是根据分子相对大小进 行分离的一种色谱技术。相对于吸附性液相色谱技术而言,SEC的分辨力和样品负载力都很低。 SEC又是一种温和的技术,可用来平衡柱及分离样品的缓冲液范围较广。所以近年来关于利用SEC 分离蛋白质的报道也不少。例如,Bunger H等成功的分离出疏水性肺的表面活性剂蛋白SP-B、 SP-C[8];另外SEC特别适合对蛋白质分子量的研究,利用SEC能够快速分离出人血清白蛋白HAS 的降解产物,结合特定的检测器即可测定其单体和二聚体的分子量
检测方法2
● 三聚氰胺迁移量的高效液相色谱 (HPLC) 分析方法标准溶液的制备:分别以3%乙酸, 10%乙醇溶 液、20%乙醇溶液、50%乙醇溶液、95%乙醇溶液6种食品模拟液将标准储备液逐级稀释为质量 浓度为:0mg/L、0.5mg/L、1.5mg/L、2.5mg/L、3.5mg/L、5.0mg/L 6种系列标准溶液, 保存于 4℃冰箱
高效液相色谱法测定面包、糕点及饼干中脱氢乙酸及其钠盐的含量
分析检测高效液相色谱法测定面包、糕点及饼干中脱氢乙酸及其钠盐的含量夏林林，双 杨，陈银华，吴磊磊，朱 婷*（十堰市食品药品检验检测所，湖北十堰 442000）摘 要：目的：建立快速、简便地检测面包、糕点及饼干中脱氢乙酸及其钠盐含量的高效液相色谱法。
方法：参照并优化《食品安全国家标准食品中脱氢乙酸的测定》（GB 5009.121—2016）中的前处理方法，采用C18色谱柱对样品进行分离，紫外检测器进行检测。
结果：脱氢乙酸在1.0～200.0 μg·mL-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为1.000 0；方法检出限为0.001 g·kg-1，定量限为0.003 g·kg-1；在3个加标水平下，回收率为97.3%～102.1%，RSD为0.21%～1.42%，均满足标准要求。
结论：该方法具有快速、简便、准确度高等特点，适用于面包、糕点及饼干中脱氢乙酸及其钠盐含量的检测。
关键词：脱氢乙酸；高效液相色谱；面包；糕点；饼干Determination of Dehydroacetic Acid and Its Sodium Salt in Bread, Pastries and Cookies by High Performance LiquidChromatographyXIA Linlin, SHUANG Yang, CHEN Yinhua, WU Leilei, ZHU Ting*(Food & Drug Inspection and Testing Institute in Shiyan, Shiyan 442000, China) Abstract: Objective: To establish a high performance liquid chromatography (HPLC) method for the rapid and simple determination of dehydroacetic acid and its sodium salt in bread, pastries and cookies. Method: The pretreatment method in GB 5009.121—2016 was referred to and optimized, and the samples were separated on a C18 column and detected by an ultraviolet detector. Result: Dehydroacetic acid showed a good linear relationship with the peak area in the mass concentration range of 1.0～200.0 μg·mL-1 with a correlation coefficient of 1.000 0. The limit of detection of the method was 0.001 g·kg-1, and the limit of quantification was 0.003 g·kg-1. The recoveries ranged of 97.3%～102.1% with RSD of 0.21%～1.42% at three spiked levels, all meeting the standard requirements. Conclusion: The method is rapid, simple, accurate and suitable for the determination of dehydroacetic acid and its sodium salt in bread, pastries and cookies.Keywords: dehydroacetic acid; high performance liquid chromatography; bread; pastry; cookie脱氢乙酸，别名α,γ-二乙酰基乙酰乙酸，固态呈白色或淡黄色结晶粉末，无臭、无味，是一种低毒高效防腐、防霉剂。
实验一高效液相色谱法测定萘
2. 标准溶液配制； 3. 样品溶液的配制； 4. 进样并记录色谱图
五、数据处理与分析
Pi(%)A Asi ms100
实验 二 内标法测定联苯
一、实验目的
1. 进一步熟悉高效液相色谱仪的基本构造与一 2. 般使用方法；
2. 理解内标法的测定原理和优点；
3. 初步学会设计色谱法进行样品测定的实验步 骤，并以萘为内标物测定样品中联苯的含量。
1.00
定容（mL)
10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0
10.0
C（ppm）
0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0
X1
X2
五、数据处理与分析
1. 标准曲线的绘制：以苯甲酸钠系列标准溶液 的吸光度为纵坐标，相应的浓度为横坐标， 绘制作A-C标准曲线。
2. 样品溶液中苯甲酸钠含量计算：从A-C标准 曲线上查出X值，从而求出样品中苯甲酸的 含量。
选 择）”检查负高压与±15V电源是否正常。
3. 点火 ⑴关紧主机上各气体调节针阀，将“空气-笑 气” 钮旋至“空气”，开排废气装置； ⑵开空压机，调空气输入压为2～3kg·cm-2； ⑶打开助燃气针阀，开大至限压开关被启动 后，调助燃气流量； ⑷依次打开乙炔钢瓶总阀、分阀，调节乙炔 输出压力0.8 kg·cm-2，调燃气流量后点火。
4. 测定 依次从低到高浓度测定标液和样液（最佳条件
选择方法见说明书）。
5. 关机 ⑴“状态检查（工作选择）”置“T（能量）”，
吸喷蒸馏水1min，清洗燃烧器；
⑵依次关乙炔钢瓶总阀、分阀和主机燃气针阀； ⑶依次关空压机、辅助气和助燃气针阀； ⑷关灯电源、总电源，其它复原。
6. 注意事项 ⑴仪器废液管应加水封，换灯或调试时，“状
高效液相色谱间接紫外检测法测定甲醇和乙醇含量
高效液相色谱间接紫外检测法测定甲醇和乙醇含量
高效液相色谱间接紫外检测法测定甲醇和乙醇含量的方法如下：
1.实验仪器：高效液相色谱仪、紫外-可见分光光度计、色谱柱。
2.试剂准备：使用水/甲醇(85/15, v/v)作为流动相，在pH 7.0的磷酸缓冲液(10
mmol/L)中加入0.1%的四丁基氢氧化铝用于调节离子强度。
准备甲醇和乙醇的标准品溶液。
3.样品处理：将待测甲醇和乙醇溶于流动相中，进行适当稀释，以满足仪器分析
的要求。
同时，准备一个纯溶剂的试样，作为空白对照。
4.色谱条件设置：使用C18反相色谱柱。
流量为1 mL/min，柱温为30℃，检测
波长为214 nm。
通过梯度洗脱和下述参数，完成甲醇和乙醇的分离。
5.制定标准曲线：分别加入不同浓度的标准品制成标准曲线。
6.分析样品：待测样品进行分离，记录对应的峰面积或峰高，并通过标准曲线计
算样品中甲醇和乙醇的含量。
7.峰验证：对所得的峰进行验证及识别，以确保检验结果的准确性。
总之，该方法通过高效液相色谱技术的显色反应，利用波长选择性，测定样品中甲醇和乙醇的含量，具有灵敏度高、准确性稳定、样品处理方便等优点，并且可广泛适用于饮料、食品、化妆品等领域的检测和分析。
高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量
高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量型进行计算的如近红外漫反射技术,其原理是根据标样集中样品的近红外光谱运用化学计量学方法建立光谱特征值(如吸光度)与待测成分之间的数学关系(简称数学模型)1．阿司匹林及阿司匹林制剂的含量测定阿司匹林及阿司匹林制剂的含量测定有多种方法,其中包括药典所载的酸、碱中和滴定法及紫外分光光度法,高效液相法等。
1．1阿司匹林酸碱滴定法：直接滴定：方法：取本品0。
4g,精密称定,加中性乙醇20ml,溶解,加酚酞指示液3d,用氢氧化钠滴定液（0。
1mol/l）滴定。
每1ml 滴定液相当于18。
02mg的C9H8O4水解后剩余滴定：方法：取本品1。
5g,精密称定加氢氧化钠滴定液（0。
5mol/l）50。
0ml,混合,缓缓煮沸10min,放冷,加酚酞指示液,用硫酸滴定液（0。
25mol/l）滴定剩余的氢氧化钠。
两步滴定法：取本品10片,精密称定,研细,精密称取片粉适量（约相当于阿司匹林）,加中性乙醇20ml,振摇使阿司匹林溶解,加酚酞指示液3d,滴加氢氧化钠滴定液（0。
1mol/l）至溶液显粉红色。
加定量过量的氢氧化钠滴定液（0。
1mol/l）40ml,置水浴上加热15min并时时振摇,迅速放冷至室温,用硫酸滴定液（0。
05mol/l）滴定剩余的碱。
根据消耗的滴定液体积及滴定度计算含量1．2阿司匹林制剂的电极法测定仪器与试剂：电极电位和溶液酸度测试均使用pHs—loC型数字式酸度离子计；参比电极为232型饱和甘汞电极；试剂均为分析纯,实验用水为去离子水经高锰酸钾处理后蒸馏而得。
电极制备：将载体物质三苄基锡辛酸酯20mgl聚氯乙烯（PVC）0．33g和增塑剂邻硝基苯基辛醚o．65g溶解于四氢呋喃（THF）3g 中,搅拌澄清后将其倾倒于40mm×40mm的水平玻璃板上。
待THF挥发完后(约需l2h)即得到具有弹性的PVC膜。
用打孔器切下直径10mm的圆片并用含5％PVC的THF溶液粘于PVC电极杆端,放置数小时,晾干后电极杆内充以0。
仪器分析实验HPLC性能检查和参数测定
仪器分析实验HPLC性能检查和参数测定HPLC（高效液相色谱）是一种广泛应用于化学分析和生物科学领域的分析工具。
在进行HPLC分析之前，需要对仪器进行性能检查和参数测定，以确保仪器的正常运行并获得准确的分析结果。
一、HPLC性能检查：1.系统漏率检查：将HPLC柱安装在系统中，关闭柱前和柱后的开关，然后观察系统是否存在漏气。
如果存在漏气，应检查并修复可能的漏点。
2.系统稳定性检查：打开系统，让其稳定运行30分钟，观察系统是否有任何问题，例如气泡形成或压力不稳定等。
如果出现异常，应检查并修复问题。
3.系统噪声检查：将检测器设置为负值和零值，并观察噪声水平。
如果噪声过高，可以检查并清洁检测器或更换耗材。
二、HPLC参数测定：1.流速测定：测定流速是确保HPLC系统正常运行的重要参数。
可以使用标准溶液通过系统进行测定，记录流速，以确保其稳定性和准确性。
2.程序温度测定：对于一些分析，需要控制系统温度以保持准确的分析结果。
使用温度传感器测量系统温度，确保其与设定的温度一致。
3.峰面积测定：使用标准品进行测定，记录峰面积，并与文献或已知值进行比较，以验证分析方法的准确性。
4.分辨率测定：使用合适的混合物进行测定，计算分离峰的分辨率。
分辨率测定是评估HPLC方法性能的重要指标之一需要注意的是，HPLC参数测定的具体方法和步骤可能会因应用和分析对象的不同而有所变化。
在进行参数测定时，应参考相关文献和方法，并按照实验要求进行操作。
总之，HPLC性能检查和参数测定是确保HPLC系统正常运行和获得准确分析结果的关键步骤。
通过定期检查和测定，可以保证仪器的稳定性和可靠性，并确保实验结果的准确性和可重复性。
高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量
实验三 高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量【实验目的】（1）初步掌握福立FL-2200高效液相色谱仪原理及其使用方法；（五号宋体） （2）掌握高效液相色谱对流动相、样品处理的要求及注意事项；（3）能根据测定数据计算双黄连口服液中黄芩苷的含量；（4）了解中药制剂质量检测的方法。
【实验原理】双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、 清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌 和病毒感染性疾病有一定疗效。
其中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素 是其主要活性成分。
本试验根据《2010版中国药典》方法对双黄连口服液中黄芩苷含量进行测 定，以便控制制剂质量。
【仪器和试剂】1. 高效液相色谱仪（福立FL-2200）：2. 黄芩苷对照品（中食品药品检定所）【实验步骤】1.按操作说明书使用仪器，其色谱条件如下：色谱柱：C18 反相色谱柱流动相：甲醇-水-冰醋酸（50:50:1）检测波长：274nm。
柱温：30℃流速：1.0ml/min理论板数：按黄芩苷峰计算应不低于 1500。
2.【含量测定】 黄芩照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品 10mg，置 100ml 量瓶中，加 50%甲醇适量， 置水浴中振摇使溶解，放置至室温，稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 中含黄芩苷 0.1mg）。
供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品 1ml，置 50ml 量瓶中,加 50%甲醇适量,超声处理 20 分钟，放置至室温，加 50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即 得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5μl，注入液相色谱仪， 测定，即得。
本品每支含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于 80mg。
【数据处理】采用外标法进行含量计算。
【思考题】1. 高效液相色谱仪在样品检测过程中设置的主要仪器参数有哪些？2. 高效液相色谱仪在使用过程中应注意些什么？3. 高效液相色谱仪在样品检测中与紫外-可见分光光度计相比，具有哪些不同和优势？。