PBS缓冲液配制标准操作规程
(完整版)磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号：大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
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磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号：大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号：大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中，常用到PBS缓冲液。
以下是我们实验室的配方，供大家参考：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4，分子量136.09)加入100ml双蒸水中。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)加入100ml双蒸水中。
或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)加入100ml双蒸水中。
pH值。
A液(ml)。
B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）、NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）和NaCl。
用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。
配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，浓度为0.01M。
PBS缓冲液的配方如下：取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调节pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一，但不同实验室的配方可能不同。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml水。
0.2M NaH2PO4：取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水。
不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制：先配制0.2M PBS(pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。
pbs缓冲液各种PH值得配制方法
配置方法编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合；最终测定PBS液的PH值约为7.4。
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。
乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。
取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
pbs缓冲液各种PH值得配制方法
pbs缓冲液各种PH值得配制方法配置方法编辑用去离子水、KH2PO4和na2hpo42h2o按以下步骤制备PBS溶液：（1）制备1/15mol/lkh2po4，即每升水溶解9.078g KH2PO4；(2)配制1/15mol/lna2hpo42h2o，即每升水中溶解11.876克na2hpo42h2o；(3)将18.2%（体积分数）kh2po4溶液和81.8%na2hpo42h2o混合；最终测定pbs液的ph值约为7.4。
磷酸盐缓冲液：取38.0g磷酸二氢钠和5.04g磷酸二氢钠，加水至1000ml。
磷酸盐缓冲液（ph2.0）溶液A：取16.6ml磷酸，加水至1000ml，摇匀。
B液：取71.63g磷酸氢二钠，加水溶解成1000ml。
取72.5毫升液体a和27.5毫升液体B，混合并摇匀。
磷酸盐缓冲液(ph2.5)取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节ph至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液（pH5.0）：取一定量的0.2mol/l磷酸二氢钠溶液，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0。
磷酸盐缓冲液(ph5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液（pH6.5）：取0.68g磷酸二氢钾，加入15.2ml 0.1mol/l氢氧化钠溶液，用水稀释至100ml。
磷酸盐缓冲液(ph6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液（包括胰蛋白酶）（pH 6.8）取6.8g磷酸二氢钾，加水500ml溶解，用0.1mol/l氢氧化钠溶液调节pH至6.8；此外，取胰蛋白酶10g，加入适量水溶解，将两种溶液混合，用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(ph6.8)取0.2mol/l磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/l氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液（pH7.0）：取0.68g磷酸二氢钾，加入29.1ml 0.1mol/l氢氧化钠溶液，用水稀释至100ml。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－ A液（ml）－－ B液（ml）5.60 －－ 9.50 －－ 0.255.91 －－ 9.00 －－ 1.006.24 －－ 8.00 －－ 2.006.47 －－7.00 －－ 3.006.64 －－ 6.00 －－ 4.006.81 －－ 5.00 －－ 5.006.98 －－ 4.00 －－ 6.007.17 －－ 3.00 －－ 7.007.38 －－ 2.00 －－ 8.007.73 －－ 1.00 －－ 9.008.04 －－ 0.50 －－ 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：A液：0.1mol/L磷酸二氢钾：磷酸二氢钾〔KH2PO4，MW136.09〕1.361g，加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：酸酸氢二钠〔Na2HPO4.2H2O，MW177.99〕1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠〔Na2HPO4.12H2O，MW358.14〕3.58g，加双蒸水至100ml。
pH －－A液〔ml〕－－B液〔ml〕5.60 －－9.50 －－0.255.91 －－9.00 －－1.006.24 －－8.00 －－2.006.47 －－7.00 －－3.006.64 －－6.00 －－4.006.81 －－5.00 －－5.006.98 －－4.00 －－6.007.17 －－3.00 －－7.007.38 －－2.00 －－8.007.73 －－1.00 －－9.008.04 －－0.50 －－9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O〔磷酸氢二钠〕NaH2PO4•2H2O〔磷酸二氢钠〕Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。
以下是我的总结：母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
pbs 缓冲液的配置0.01M
0.1M “PBS”缓冲液配制（10倍浓缩）一般所说PBS缓冲液为0.01M，故使用时需稀释溶液10倍1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂：NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法：先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液)，两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
A液：称取NaH2PO4·2H2O 3.12g，加双蒸水充分溶解定容至100ml；B液：称取Na2HPO4·12H2O 7.16g，加双蒸水充分溶解定容至100ml；2、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)的配制：A液为碱性，B液为酸性；取A液和B液在pH计的监测下按一定比例进行混和，可得到所需的不同pH的0.2mol/L的PB。
pH7.4所需A液和B液为1.9ml和8.1ml0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）(PB)pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)7.3 2.3 6.77.4 1.9 8.17.5 1.6 8.43、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)：（1）、100ml试剂：0.2mol/L PB 50ml 【（5×1.9）+（5×8.1）= 9.5 + 40.5】NaCl 0.85-0.9g(约0.15mol/L)双蒸水加至100ml配制方法：取0.2mol/L PB 50ml，加入30ml双蒸水及NaCl 0.85-0.9g，充分搅拌溶解后加入双蒸水定容至100ml。
一般情况下，0.2mol/L PB的pH值稍微高些，稀释成0.1mol/L PBS时，常可达到要求的pH；若需调整pH，通常是调PB的pH。
（2）、20ml试剂：0.2mol/L PB 10ml 【1.9(A)+8.1(B)= 10ml】NaCl 0.17-0.18g (约0.15mol/L)双蒸水加至20ml配制方法：取0.2mol/L PB 10ml，加入6ml双蒸水及NaCl 0.17-0.18g，充分搅拌溶解后加入双蒸水定容至20ml。
PBS缓冲液配制
NaCl 8.0g；KCl 0.2g；Na2HPO4 1.44g；KH2PO4 0.24g；加蒸馏水至1000ml，调节pH到7.4（用Na2HPO4或KH2PO4调节）。用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠（0.1g/100ml PBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
PBST缓冲液取300μl Tween-20加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~
PBS缓冲液配方
PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。
pbs 缓冲液的配置
1、0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
2、磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer, PB）试剂：NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的Na2HPO4：称取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。
若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7～8.0）pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂：NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法：先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液)，两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
0.01M PBS (pH 7.4)配制标准操作规程
编号：YF-001 实验室PBS缓冲液配制标准操作规程
版次：第一版/0 第1页/共1页
0.01M PBS （pH 7.4）配制标准操作规程
1.目的
建立实验室PBS缓冲液配制标准操作规程，确保溶液的配制准确
2.适用范围
0.01M PBS pH7.4缓冲液配制。
3.溶液配制前
3.1 配制前确认药品是否足够，不足的按名称、编号、规格、数量等填写限额领料单给领料员到仓库领料。
3.2 领取的药品需具有合格标签，并在有效期内。
3.3 准备配制所用的试剂瓶、烧杯和烧瓶等，检查是否已清洁并且干燥。
4. 溶液配制（以1000mL为例）
4.1 称量：用电子分析天平按下表称取药品并做好记录，倒入1000ml烧杯中。
4.2 溶解：用量筒量取800mL纯化水倒入烧杯中，放入搅拌转子，并放到磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。
4.3 pH调节：用校准后的pH计测量上述溶液的pH，用0.1M的HCl或NaOH调整pH=7.40±0.05。
4.4 定容：将上述完全溶解的溶液到入1000ml容量瓶，并用少量纯化水冲洗烧杯后，倒入容量瓶，重复3次，将容量瓶中的液体用纯化水补充至刻度线，塞上盖子后上下颠倒10次，确保溶液充分混匀。
4.6 过滤：
4.7 移瓶：将定容后的溶液倒入洁净蓝色盖子的玻璃瓶，在瓶身上标明品名、体积、日期、有效期、操作者等信息。
4.8 存储：该溶液于（4～30）℃，可保存6个月。
5.溶液配制完成后
5.1 按要求填写溶液配制记录。
5.2 关闭仪器，填写仪器使用记录。
5.3 清理实验场地，清洗烧杯、容量瓶、转子等。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS缓冲液，下面是常用配方，供大家参考。
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L，灭菌即可。
0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml 双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。
一般免疫组化用PBS，主要用来清洗，都只包含Na2HPO4•12H2O（磷酸氢二钠）和NaH2PO4•2H2O（磷酸二氢钠）两种组分，母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.5 6.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7关于磷酸缓冲溶液的一些问答PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。
pbs缓冲液各种PH值得配制方法
配置方法编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合；最终测定PBS液的PH值约为7.4。
磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。
乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。
取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
0.01M PBS (pH 7.4)配制标准操作规程
编号：YF-001 实验室PBS缓冲液配制标准操作规程
版次：第一版/0 第1页/共1页
0.01M PBS （pH 7.4）配制标准操作规程
1.目的
建立实验室PBS缓冲液配制标准操作规程，确保溶液的配制准确
2.适用范围
0.01M PBS pH7.4缓冲液配制。
3.溶液配制前
3.1 配制前确认药品是否足够，不足的按名称、编号、规格、数量等填写限额领料单给领料员到仓库领料。
3.2 领取的药品需具有合格标签，并在有效期内。
3.3 准备配制所用的试剂瓶、烧杯和烧瓶等，检查是否已清洁并且干燥。
4. 溶液配制（以1000mL为例）
4.1 称量：用电子分析天平按下表称取药品并做好记录，倒入1000ml烧杯中。
4.2 溶解：用量筒量取800mL纯化水倒入烧杯中，放入搅拌转子，并放到磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。
4.3 pH调节：用校准后的pH计测量上述溶液的pH，用0.1M的HCl或NaOH调整pH=7.40±0.05。
4.4 定容：将上述完全溶解的溶液到入1000ml容量瓶，并用少量纯化水冲洗烧杯后，倒入容量瓶，重复3次，将容量瓶中的液体用纯化水补充至刻度线，塞上盖子后上下颠倒10次，确保溶液充分混匀。
4.6 过滤：
4.7 移瓶：将定容后的溶液倒入洁净蓝色盖子的玻璃瓶，在瓶身上标明品名、体积、日期、有效期、操作者等信息。
4.8 存储：该溶液于（4～30）℃，可保存6个月。
5.溶液配制完成后
5.1 按要求填写溶液配制记录。
5.2 关闭仪器，填写仪器使用记录。
5.3 清理实验场地，清洗烧杯、容量瓶、转子等。
磷酸盐缓冲液配制方法
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB（PH=7.4）：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl 调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。
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PBS缓冲液配制标准操作规程
1 范围
本标准适用于PBS缓冲液的配制。
2 职责
操作人员：严格按照该标准操作规程进行。
QA：对该标准操作规程的执行情况进行监督检查。
3 内容
3.1 操作前检查
3.1.1 计量器具是否完好，性能与称量要求相符，并在检定有效期内。
3.1.2 操作人员检查水、电、气供应是否良好，纯化水及注射用水是否检验合格。
3.1.3 操作人员检查洁净室温度、湿度、压差是否符合要求。
3.1.4 操作人员检查质量部门出示的尘埃粒子、沉降菌的检测报告是否符合相关规定，并在有效期内。
3.1.5 操作人员应对上一个班次的生产清场进行检查，有QA下发的清场合格证，方可进行操作。
3.1.6 检查电子天平等设备状态标志，设备是否“完好”、“已清洁”。
3.1.7 检查所需文件记录齐备，无与本批生产无关的指令及记录，无与本批生产无关的物料。
3.1.8 及时填写并悬挂生产状态卡。
3.2 操作前准备
3.2.1 药品
氯化钠
磷酸氢二钠
磷酸二氢钠（NaH
2PO
4
·H
2
O）
3.2.2 器具配液罐
搅拌器
电子天平
蠕动泵
套筒式滤器
滤芯
印度瓶
pH计
吸管
吸头
硅胶塞
绢布
丝光绳
3.3 配制过程
3.3.1 配方：配制0.001mol/L PBS缓冲液（按10L配制量计算）配制10L0.01mol/L
PBS 缓冲液需用药品氯化钠80.8g、磷酸氢二钠12.4g、磷酸二氢钠（NaH
2PO
4
·H
2
O）1.8g,
如药品结晶水有变化应按其配方相应换算。
3.3.2 用电子天平分别称取 3.3.1中药品倒入同一印度瓶中,加注射用水至8000ml，摇动印度瓶使其充分溶解,补加注射用水至10L，混匀（二人复核）。
3.3.3 用pH计测pH值，为7.6±0.1时合格。
3.3.4 按生产所需进行分装，经过滤后，每10000ml印度瓶装量7000ml包扎瓶口，然后贴上标签注明名称、批号、灭菌日期及有效期。
3.3.5 于121℃、0.105Mpa、60分钟(压力蒸汽灭菌器)或 121℃、0.105Mpa、40
分钟(脉动真空灭菌柜)高压灭菌，灭菌后存放于已高压灭菌室备用，有效期72小时，或按3.3.6项进行操作。
3.3.6 启动蠕动泵，将PBS缓冲液通过套筒式过滤器过滤到印度瓶中，盖上灭菌胶塞。
（如使用配液罐，参照3.3.2按相应的配制体积加入药品，使其充分溶解后校准液量，再除菌过滤）。
参照《除菌过滤标准操作规程》。
3.3.7 取样做无菌试验，参照《无菌检查标准操作规程》。
3.3.8 对套筒式过滤系统清洗参照《套筒式过滤系统清洁标准操作规程》。
3.3.9 对套筒式过滤系统进行完整性检测，参照《完整性检测仪使用、维护
保养标准操作规程》，如完整性检测不合格，应对制品重新滤制。
3.3.10 在瓶壁上贴上标签，注明名称、批号、浓度、配制日期、有效期，放入2～8℃冷库中保存备用，并在6个月内使用完。
3.3.11 填写PBS缓冲液配制记录。
3.4 清洁清场
3.4.1 生产结束后，对物料、设备、文件、环境按《清场管理规程》进行清洁及时悬挂卫生状态标志。
3.4.2 清场合格后，经QA验收合格后发放清场合格证并作好清场记录。
3.5 异常情况处理和报告
3.5.1 在配液过程中如遇停电、无注射用水，应立即盖好所有盖子保持环境的清洁卫生要求。
3.5.2 如遇异常情况按上述方法处理后，应立即报告相关人员和车间主任。
4 相关文件
《除菌过滤标准操作规程》
《无菌检查标准操作规程》
《套筒式过滤系统清洁标准操作规程》
《完整性检测仪使用、维护保养标准操作规程》
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《人员进出一般生产区和洁净区标准操作规程》
《清场管理规程》
《压力蒸汽灭菌器使用、维护保养标准操作规程》。