PBS缓冲液的配制
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液的配制方法在免疫组化和细胞培养中,常用到PBS缓冲液。
以下是我们实验室的配方,供大家参考:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾将1.361g磷酸二氢钾(KH2PO4,分子量136.09)加入100ml双蒸水中。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠将1.78g酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,分子量177.99)加入100ml双蒸水中。
或者将3.58g酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,分子量358.14)加入100ml双蒸水中。
pH值。
A液(ml)。
B液(ml)5.60.9.50.0.255.91.9.00.1.006.24.8.00.2.006.47.7.00.3.006.64.6.00.4.006.81.5.00.5.006.98.4.00.6.007.17.3.00.7.007.38.2.00.8.007.73.1.00.9.008.04.0.50.9.50免疫组化常用的PBS只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)、NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)和NaCl。
用于细胞培养的PBS需要含有氯化钾。
配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,浓度为0.01M。
PBS缓冲液的配方如下:取8g NaCl、0.2g KCl、3.63g Na2HPO4•12H2O和0.24gKH2PO4,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调节pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一,但不同实验室的配方可能不同。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml水。
0.2M NaH2PO4:取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水。
不同浓度的PBS(pH=7.4)的配制:先配制0.2M PBS(pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4即可。
PBS缓冲液的配方
P B S缓冲液的配方发布日期:2008-11-11 热门指数:865PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCL 的话,加入NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7分子生物学常用溶液配制发布日期:2008-8-25 热门指数:3471分子生物学常用溶液配制一、分子生物学常用贮存液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH --A液(ml)--B液(ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 --1.006.24 --8.00 --2.006.47 --7.00 --3.006.64 --6.00 --4.006.81 --5.00 --5.006.98 --4.00 --6.007.17 --3.00 --7.007.38 --2.00 --8.007.73 --1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制
PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是总结:母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol...PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:`pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7。
pbs缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH --A液(ml)--B液(ml)5.60 --9.50 --0.255.91 --9.00 --1.006.24 --8.00 --2.006.47 --7.00 --3.006.64 --6.00 --4.006.81 --5.00 --5.006.98 --4.00 --6.007.17 --3.00 --7.007.38 --2.00 --8.007.73 --1.00 --9.008.04 --0.50 --9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是常用配方,供大家参考。
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,灭菌即可。
0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
一般免疫组化用PBS,主要用来清洗,都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)和NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)两种组分,母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7关于磷酸缓冲溶液的一些问答PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是1.磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、2.磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及3.磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制之邯郸勺丸创作0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于80 0ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保管存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.27.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO 4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保管备用。
PBST缓冲液取300μl Tween20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。
pbs-缓冲液的配置
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
“PBS”缓冲液试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。
若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.3 6.185.015.0 6.281.518.5 6.377.522.5 6.473.526.5 6.568.531.5 6.662.537.5 6.756.543.5 6.851.049.06.945.055.07.039.061.0 7.133.067.0 7.228.072.0 7.323.067.0 7.419.081.0 7.516.084.0 7.613.087.0 7.710.589.5 7.88.591.57.97.093.08.0 5.394.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
pbs 缓冲液的配置
1、0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
2、磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。
若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
PBS缓冲液配制
PBS缓冲液配制磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、 KCl、 Na2HPO4和 KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl ; KCl ; Na2HPO4 ; KH2PO4 ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 %叠氮钠(100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PHH2O 1000 1000 1000 1000NaClNa2HPO4NaH2PO4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl ,Na2HPO4•12H2O , KH2PO4 ,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。
现用现配。
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在左右,明显偏酸。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液(ml)-- B液(ml)5.60 -- 9.50 -- 0.255.91 -- 9.00 -- 1.006.24 -- 8.00 -- 2.006.47 --7.00 -- 3.006.64 -- 6.00 -- 4.006.81 -- 5.00 -- 5.006.98 -- 4.00 -- 6.007.17 -- 3.00 -- 7.007.38 -- 2.00 -- 8.007.73 -- 1.00 -- 9.008.04 -- 0.50 -- 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L 即可0.01MPBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
PBS缓冲液的配制方法
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是常用配方,供大家参考。
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,灭菌即可。
0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
一般免疫组化用PBS,主要用来清洗,都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)和NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)两种组分,母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7关于磷酸缓冲溶液的一些问答PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是1.磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、2.磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及3.磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。
PBS缓冲液配方
PBS缓冲液配方不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L 磷酸氢二钠:酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH ,, A液 (ml) ,, B液(ml)5.60 ,, 9.50 ,, 0.255.91 ,, 9.00 ,, 1.006.24 ,, 8.00 ,, 2.006.47 ,,7.00 ,, 3.006.64 ,, 6.00 ,, 4.006.81 ,, 5.00 ,, 5.006.98 ,, 4.00 ,, 6.007.17 ,, 3.00 ,, 7.007.38 ,, 2.00 ,, 8.007.73 ,, 1.00 ,, 9.008.04 ,, 0.50 ,, 9.50一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠) NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是我的总结:母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
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PBS缓冲液的配制
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是总结:母液的制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol... PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。
以下是总结:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:
0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:
pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)
5.7 93.5
6.5
5.8 92 8
5.9 90 10
6.0 8
7.7 12.3
6.1 85 15
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45 55
7.0 38 62 7.1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 0.5 7.8 8.5 91.5
7.9 7 93
8.0 5.3 94.7。