凝聚胺法交叉配血标准操作规程

凝聚胺法交叉配血标准操作规程

1.目的

规范凝聚胺法交叉配血标准操作程序。

2.原理

红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕,而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。其后，加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一种高阶阳离子多聚物、肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后加入悬浮液（Resuspending）， Resuspending具有中和凝聚胺(Polybrene)的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。

3.试剂

由珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺法试剂盒，其组成：

3.1低离子介质(LIM) 2×130ml。

3.2凝聚胺(Polybrene)溶液2×20ml。

3.3 Resuspending溶液2×20 ml

4.仪器

4.1 80-2离心机：上海医疗器械有限公司

4.2电热恒温水浴箱：上海精宏实验设备有限公司

4.3 OLYMPUS显微镜：日本

5.操作步骤及结果判断

按照试管法血型鉴定检验标准操作程序进行受血者血型鉴定, 并将鉴定结果写于申请单，并签名。以“同型输注”为原则，取相对应的成分血源进行交叉配血。

5.1取洁净小试管2支,分别标明主、次侧管。

5.2于主侧管中加入受血者血浆2滴和供血者3-5%红细胞悬液1滴,次侧管中加

入供血者血浆2滴和受血者3-5%红细胞悬液1滴, 轻轻混匀离心1000r/分钟, 仔细观察有无凝集,无凝集则可进行下一步骤,若有凝集则查找原因。

（盐水法）

编制人王渊审核人钟剑

版本号第二版颁布日期2018年1月1日

5.3将LIM液分别加入上述主侧管、次侧管各0.65毫升，然后分别加入

Polybrene溶液2滴，充分混匀。在室温中静止15秒钟。

5.4 3400转/分钟离心10秒钟，则将上清液倒掉，保留管底约0.1毫升的液体，

轻轻摇动试管，观察有无凝集。若没有凝集，须重做。

5.5最后加入Resuspending溶液2滴，轻轻混匀，1分钟内看凝集是否散开。

若散开，则可以涂成薄片镜检，确定镜下也没有凝集,则判定配血结果相合；

若不散开，将试管立即置入37℃水浴，若凝集散开则为冷凝集，在交叉配血报告单上备注出，提醒临床输注时注意，强冷凝集时建议不输注；若37℃水浴凝集不散则为血交叉不合，通知临床建议不输注，并记录在申请单和异常结果登记本上，如病情需要必须输血，立即送往血液中心做进一步鉴定和血交叉，找到合适的血源。

6.结果报告

6.1 依据交叉结果，认真填写交叉配血报告单。应逐项填写，不得遗漏。结

果经专业人员审核后，确认准确无误后发出报告。若交叉不合，应向上级部门和临床及时联系，并作好记录。必要时送省血液中心。

6.2将交叉结果登记在交叉登记本上，记帐。电告临床由医务人员到血库提取

血制品,在提取血制品时必须由血库工作人员与提血者一起核对后双方在

登记本上签名。

7.附注

7.1第一次输血（浆）病人，必须要求在该病人输注前留血做传染病九项，并

签订输血治疗同意书。

7.2符合交纳互助金者必需交纳, 符合免交纳互助金者必需有相关证件复印,

并在血库备案。

7.3一次输血大于2000毫升者需有输血会诊单。

8.注意事项

8.1观察结果时必在显微镜下观察。

8.2每次离心后观察试管底部是否有红细胞,如果没有,表明有溶血现象,必须

重做。

8.3加再悬液后，应轻轻转动试管，不可过猛，并应立即读取结果（包括镜下

观察），以防弱凝集迅速消散，导致假阴性结果。

8.4聚凝胺是抗肝素药物，如受血者（供血者）血液中含有肝素，试验时应多

加数滴聚凝胺试剂。

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8.5在室温较低的情况下，操作交叉配血试验，某些病人血清中可能含有寒冷

凝集素等因素，而导致假阳性的结果出现。若有此怀疑，建议将试管立即置入37摄氏度水浴中，轻轻转动试管混合，并在30秒内再观察结果。

8.6 供血出现溶血或上清液有混浊现象,严禁使用。

8.7 BASO凝聚胺法试剂使用前请回复室温再行操作。

9.参考文献

9.1陆永绥，张伟民主编.临床检验管理与技术规程.杭州：浙江大学出版社，

2004.

9.2试剂说明书。

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